Fiziologie LP6

Hemoglobina Culoarea rosie a sangelui, respectiv a globulelor rosii este data de o substanta chimica care contine un pigment pe baza de fier, numit hemoglobina. Aceasta substanta are capacitatea de a fixa oxigenul din aer la nivelul plamanilor, pe care apoi de a-l transporta in tot organismul, la celule. Molecula de hemoglobina este un tetramer format din 4 grupari heminice (Hem) si globina constituita din 2 perechi de lanturi polipeptidice. Hem-ul este format dintr-o molecula de protoporfirina legata de un atom de fier. Fiecare hem este legat de un lant polipeptidic. Exista 4 tipuri de lanturi polipeptidice. Valori normale Barbati: 13-16 g la 100 ml sange Femei: 11-15 g la 100 ml sange Scaderi patologice Valori scazute ale hemoglobinei se intalnesc in:

Anemii

Hemoglobine anormale Carboxihemoglobina: este un compus reversibil rezultat prin legarea monoxidului de carbon la Hb. Afinitatea Hb pentru acest gaz este de 210 ori mai mare decat pentru O2, ceea ce explica rapiditatea aparitiei si gravitatea intoxicatiei cu CO chiar in situatiile in care concentratia lui in aerul inspirat este relativ mica. In sangele normal, concentratia carboxihemoglobinei este de 0-2% din Hb totala, iar la fumatori este 2-4% si poate ajunge chiar pana la 10%. Cel mai caracteristic semn al intoxicatiei cu CO este culoarea rosie purpurie a tegumentelor si mucoaselor. Oxigenoterapia hiperbara prin dislocarea CO de pe hemoglobina reprezinta baza tratamentului intoxicatiilor cu CO. Sulfhemoglobina: este un derivat stabil nefunctional al hemoglobinei. Se considera a fi un produs de denaturare oxidativa a hemoglobinei. Structura hemoglobinei este modificata prin existenta unui atom de sulf legat de fiecare grup heminic. Methemoglobina: numita si hemiglobina este o ferihemoglobina in care

fierul feros s-a transformat in fier feric, pierzandu-si astfel capacitatea de fixare a oxigenului.

DOZAREA HEMOGLOBINEI Metode de dozare ale hemoglobinei: 4.1. Dozarea hemoglobinei ca oxihemoglobin 4.2. Dozarea fotometric a hemoglobinei ca cianhemiglobin i cianmethemoglobin 4.3. Dozarea spectrofotometric a hemoglobinei 4.4. Dozarea electroforetic a hemoglobinei 4.1. Dozarea hemoglobinei ca oxihemoglobin: Principiul metodei Soluia diluat de amoniac produce hemoliza sngelui i totodaat mpiedic transformarea hemoglobinei n methemoglobin. Oxihemoglobina se dozeaz n funcie de densitatea optic a soluiei la 540 nm(filtru verde). Tehnica: 0,02 ml snge se omogenizeaz cu 5 ml soluie hidroxid de amoniu 0,1%. Se citete extinciaamstecului i se calculeaz concentraia hemoglobinei prin interpolare pe curba de calibrare. Valori normale: : 13 17 g/ 100ml : 12 15 g/ 100ml

4.2. Dozarea fotometric a hemoglobinei ca cianhemiglobin i cianmethemoglobin: Aceast determinare este metoda standard pe plan mondial pentru dozarea hemoglobinei. Principiul metodei: Fericianura de potasiu oxideaz fierul feros din hemoglobin n fier feric, iar acesta face ca toate

felurile de hemoglobin s se transforme m methemoglobin sau hemiglobin, care pe msur ce se formeaz, se tranform n cianmethemoglobin sau cianhemiglobin, care se vor doza fotometric. Tehnica: 0,02 ml snge venos sau capilar se amastec cu 5 ml reactiv KampenZylstra, se omogenizear ,I se las n repaus 30 de minute. Extincia se va citi la 540 nm. Concentraia hemoglobinei se calculeaz prin interpolare pe curba de calibrare. 4.3. Dozarea spectrofotometric a hemoglobinei: Aceast este o metod cantitativ de dozare a hemoglobinei. Principiul metodei: Derivaii hemoglobinei, fiind substane colorate (prin componenta porfirinic), pot fi uor deosebite prin spectrul lor de absorbie. Derivaii hemoglobinei: a) HbO2 (oxihemoglobina): are dou spectre de absorbie n zona galbenverde (570-545nm). Reprezint 97% din hemoglobin n sngele arterial i 70-75% n sngele venos. b) HbH (hemoglobina redus) c) HbCO (carboxihemoglobina):n mod normal reprezint 0,5-2% din hemoglobin, iar la fumtori n jur de 6.5%. d) MetHb : n mmod normal reprezint 0,2-1%. e) HbCO2 (carbhemoglobina), concentria acestuia variaz n limite largi, este mai mare n sngele venos i mai mic n sngele arterial. 4.4. Dozarea electroforetic a homoglobinei: Principiul metodei: Hemoglobina i derivaii si migreaz n cmp electrostatic, datorit componentei lor proteice. n comparaie cu proteinograma efectuat din plasm, la proteinograma efectuat din ser hemolizat apar benzi n plus n fraciunile n care migreaz diferitele tipuri de hemoglobin, n special n 2. Concentraia hemoglobinei se poate determina densitometric. Tipuri de hemoglobin: a) HbA1: migreaz n fraciunea 2, 2 i reprezint 96-98 % din hemoglobin. b) HbA2: migreaz n fraciunea 2, 2, reprezint 1-3% din hemoglobin.

c) HbF: migreaz n fraciunea 2, 2 i reprezint 0,5- 0,8% din hemoglobin Cristalele Teichman Sunt cristale de hematina (clorhemina), obtinute prin tratarea Hb cu HCl in stare nascanda(rezultate din reactia NaCl + acid acetic glacial)