Metodele specific de diagnostic in

bolile infectioase- metoda microscopica

, cultura

A efectuat :Onica Iulia

Specialitatea : Medicina
Calificarea : Asistent medical
 Metoda microscopica

 Examenul microscopic are un rol fundamental în

microbiologie, fiind o etapă importantă în examinarea
produselor biologice. Examenul microscopic direct
restrânge aria de investigaţii, indicând modalităţile
ulterioare de diagnostic microbiologic.
 El se poate efectua la:
Microscopul cu cimp luminous – la care se examineaza preparatele colorate sau preparate
native .

Microscopul cu fond intunecat – la care se examineaza preparatele native , intre lama

si lamella efectuate direct dintr-un produs in care se cauta bacterii a caror latime nu
depaseste 0,1- 0,2 um.

Microscopul cu contrast de faza – se foloseste la examinarea preparatelor native in

care microorganismele si celulele au aspect tridimensional.

Microscopul cu lumina UV – se utilizeaza pentru examinarea preparatelor colorate cu

substante fluorescente .
Prin microscopie se examinează:

Preparate
Frotiuri colorate cu
fixate , substante
Preparate colorate fluorescente
native intre la
lama microscopul
cu lumina
UV.
 In lumina directa este
utilizat pentru
evidentierea unor cellule
PMN, eritrocite , a
germenilor mobile in
probe lichide ex: urina,
LCR, sau lichidul din
chisturi. Examenul in
cimp intunecat se
utilizeaza pentru
decelarea Treponemei
Pallidum , coroborat cu
datele clinice , poate
stabili etiologia infectiei.
Preparatul nativ intre lama si lamella
Frotiul colorat

Frotiul colorat efectuat din produsul

recoltat furnizeaza date care se
refera la prezenta celulelor
inflamatorii IMN, macrofage ,
morfologia bacteriilor ex: coci
bacilli , vibrioni , spirili . Examenul
microscopic permite si aprecierea
obiectiva a calitatii acestora . Frotiul
se poate efectua si din cultura
microbiana , pentru orientarea
ulterioara a testelor de identificare .
Coloraţia simplă • Frotiul fixat la flacara se acopera cu albastru de
metilen , care se lasa sa actioneze 1- 2 min , se spala
cu albastru de apoi cu apa , se usuca si se examineaza la microscop
cu obiectivul cu imersie. Fondul preparatului apare
metilen colorat in albastru –deschis , iar bacteriile in albastru –
inchis . Evidentiaza citologia , prezenta leucocitelor ,
PMN, limfocitelor, levuri.

Coloratia simpla cu
albastru de metilen
 Coloraţia Gram
Coloraţia Gram reprezintă
coloraţia de bază în Bacili Gram –
microbiologie şi a fost pozitivi
descrisă în 1884 de medicul aerobi
danez Christian Gram.
Această coloraţie împarte
bacteriile în două grupe:
bacterii Gram pozitive,
colorate în violet şi bacterii Clepsiela
Gram negative, colorate în pneumoniae
roşu. Diferenţa de culoare
se datorează deosebirilor de
structură, respectiv de
permeabilitate ale peretelui Coci Gram-
celular. negativi