Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
2 Org Mat Genetic
2 Org Mat Genetic
MATERIALULUI GENETIC
Din punct de vedere funcţional se disting trei
niveluri de organizare a materialului genetic:
-genic
-cromozomial
-genomic
U.M.F IAŞI
35.000 gene
In genomul uman există mai multe tipuri de ADN, diferite prin repetiţia secvenţelor
nucleotidice:
• ADN nerepetitiv, (60%) este alcătuit din secvenţe unice per genom la nivelul
cromozomilor se gaseste in benzile eucromatice, la nivel genic se gaseste in exoni
• ADN moderat repetitiv (30 %) este alcătuit din secvenţe scurte repetate de zeci şi sute
de mii de ori şi dispersate în genom. Se gaseste in:
– elemente retrotranspozabile din clasa LINE-elemente lungi de spaţiere
– elementele SINE- elemente mici de spatiere
– gene care codifica ARNr si ARNt
• ADN înalt repetitiv (10 % din genom) este alcătuit din secvenţe foarte scurte repetate în
tandem (), de milioane de ori; ele nu sunt transcrise. Se clasifica in:
– ADN satelit din regiuni heterocromatice, pericentromerice si la nivelul telomerelor
– ADN minisatelit cuprinde secvente polimorfe si sunt localizate la nivelul telomerelor
– ADN microsatelit este reprezentat de numarul repetarilor intr-un anumit locus si cel
mai bine caracterizat este cromozomul Y.
Caracteristici Genom nuclear Genom mitocondrial
Număr de molecule de ADN 23 (la celulele XX) sau 24 (la O moleculă circulară de ADN
diferite celulele XY)
Heterocromatina
• este de doua feluri : constitutiva si facultativa
( clasificare facuta de S.Brown in 1975).
Caracteristici EUCROMATINA HETEROCROMATINA
A. Alcatuirea miezului
histonic (cate 2
molecule din H2A,
H2B, H3, H4).
• B. O secventa de
ADN (de 146 pb)
se infasoara de in
jurul miezului
histonic
• C. Histona H1 leaga doi nucleozomi vecini
SOLENOIDUL
• pasul de 6
nucleozomi
• diametrul de
30nm
• compactare
de 5 ori
filament de nucleozomi filament de solenoid
10 nm 30 nm
BUCLE LATERALE
• 20-100kb
• diametrul de 300nm
• buclele sunt ataşate la
un "schelet" sau matrice
proteică “regiunile de
ataşare la matrice"
( SAR) sunt bogate în A-
T
• proteinele non histonice
Sc1 si Sc2 ( ‘’scaffold”)
• - hipercondensare
• - fibra bucleiforma se
rasuceste
suplimentar(grad
compactare 20)
• - 30 proteine non
histonice
• - nr rasuciri la cr 1 ar fi
de 29-33 rotatii
• - cromatida unui
cromosom cu diametrul
de 700nm
Structura
cromozomilor
metafazici
2 cromatide
unite
printr-un
centromer
• OM - 46
• MAIMUTA - 42
• CIMPANZEU - 48
• BOVINE - 60
• CAINE - 78
• PISICA - 38
• CAL - 64
• SOARECE - 40
• DROSOPHILA – 8
• CRAPUL -104
Metode de obtinere a cromozomilor
Tehnici citogenetice clasice
Sisteme de Cariotipare
Cariotipul
Cariotip – aranjarea sistematizata a cromozomilor unei celule
ISCN (International System for Human Cytogenetics Nomenclature) a
stabilit o serie de abrevieri
Formula de baza are 3 itemi separati de virgula:
primul precizeaza nr de cromozomi (46);
al doilea constitutia cromozomilor sexuali (XX, XY);
al treilea anomaliile de nr si structura ale autozomilor ;
Ex: 46,XX,t(9;22),+8
In urma tehnicilor de bandare fiecare brat cromozomial poate fi
divizat in mai multe regiuni, iar o regiune in benzi si subbenzi.
Ex : 1q21.1 – cromozom 1, brat lung, regiunea 2, banda 1,
subbanda 1.
Cariotip-bandare GTG
Tehnici de citogenetica moleculara
Hibridizarea în situ cu fluorescenţă (FISH) este o
metodă de citodiagnostic molecular în care, are loc
hibridizarea, pe bază de complementaritate, între o
secvenţă specifică din ADN-ul cromozomului analizat
(ADN ţintă) şi o sondă de ADN.
Tipuri de sonde:
- centromerice
- telomerice
- specifice unui intreg cromozom
Testele FISH se pot efectua pe
- nuclei interfazici din celule ale lichidului amniotic
- celule ale vilozităţilor coriale
- limfocite, celule din măduva osoasă, tumori solide
HIBRIDIZARE FLUORESCENTA IN SITU (FISH)
Aspect normal al nucleului interfazic(sex
Aspect normal al nucleului interfazic(sex masculin)
feminin)
FISH în sindromul Down FISH la sindromul Edwards