METABOLISM ENERGETIC

De la hran la energie

CE ESTE METABOLISMUL?
- Totalitatea transformrilor care au loc ntr-un organism - Alctuit din catabolism (degradare la compui mia simpli, cu producere de energie) i anabolism (construire compui compleci din compui simpli, cu consum de energie)

Ce este BIOENERGETICA sau TERMODINAMICA BIOCHIMIC?

= studiul modificrilor energetice care nsoesc reaciile biochimice

Apectele principale ce urmeaz s fie discutate:

Principiile termodinamicii Organisme autotrofe, heterotrofe Variaia energiei libere n reaciile biochimice Reacii exergonice i endergonice Cuplarea reaciilor endergonice cu cele exergonice Proprietile ATP Hidroliza ATP Compui macroergici Oxidarea n procesele biochimice Sinteza ATP (fosforilare la nivel de substrat, fosforilare oxidativ)

Termodinamica
Studiul transformrilor energetice care au loc ntrun sistem. Sistemele biologice sunt sisteme deschise (ntre sistem i mediu exist schimb de materie i energie).

Dou principii ale termodinamicii: 1. Principiul I (al conservrii energiei) 2. Principiul II (al evoluiei) Principiile termodinamicii clasice sunt valabile i n cazul sistemelor biologice.

Primul principiu al termodinamicii (principiul conservrii energiei)

Energia nu poate fi creat sau distrus, ci poate fi doar convertit n alte forme. Consecin: cantitatea total de energie din univers este constant.

Al doilea principiu al termodinamicii (Principiul evoluiei)

Entropia (cantitatea de dezordine dintr-un sistem) universului crete. SAU Orice transformare liber i spontan se face n direcia corespunztoare creterii entropiei ansamblului constituit din sistem i mediul nconjurtor. Consecina: Toate transformrile energetice sunt ineficiente deoarece fiecare reacie conduce la o cretere a entropiei i la pierderea de energie sub form de cldur.

Energia ptrunde n biosfer sub form de radiaie solar i prsete biosfera sub form de cldur.

Organisme autotrofe

Radiaia solar este sursa primar de energie pentru toate organismele vii.

Organisme heterotrofe

ENERGIA INTERN (E)

E = G + TS
G energia liber TS- energia legat

ENERGIA LIBER (G) -component a energiei interne a sistemului, convertibil la t i p constante n lucru mecanic (micare ordonat)-

Variaia energiei libere (G) este energia utilizabil

G = H - TS H variaia entalpiei/energia intern a sist. S variaia entropiei (T S energie legat) T- temperatura absolut

Variaia energiei libere a unei reacii determin spontaneitatea ei

1) dac DG este negativ reacia va evolua spontan de la stanga la dreapta (i poate efectua travaliu)
2) dac DG este pozitiv- reacia nu va evolua spontan de la stanga la dreapta, ci pentru desfurarea ei necesit energie din exterior 3) dac DG = 0 reacia este la echilibru, nu evolueaz spontan n nici un sens

Variaia energiei libere depinde de concentraiile reactanilor i produilor de reacie i de valoarea unei constante (G)

Pentru reactia A + B C + D [C] [D] o DG = DG ' + RT ln [A] [B]

DGo' = variaia energiei libere standard (la pH 7, 25C, conc. produilor i reactanilor 1M) R = constanta gazelor (1,98cal/molxK); T = temp.

Variaia energiei libere i constanta de echilibru (Keq)

La echilibru DG = 0.
DG = DG' + RT ln [C] [D] [A] [B]

[C] [D] = DG' + RT ln [A] [B]

K'eq, raportul [C][D]/[A][B] la echlibru. Dac K'eq > 1: reacie spontan (DG negativ).

DG' = - RTln

[C] [D] [A] [B]

[C] [D] defining K'eq = [A] [B] DG' = - RT ln K'eq

DGo' = -RT ln K'eq

Variaia DGo (25 oC) cu valoarea constantei de echilibru

K'eq 10 10
0 4 2

DG ' kJ/mol

Reactie (1M si pH 7) Spontana de la stinga la dreapta Spontana de la stinga la dreapta echilibru Are loc in sens invers Are loc in sens invers

- 23 - 11
0 + 11 + 23

10 = 1 10 10
-2 -4

ntrebare:
1. A+B C +D Reacia de mai sus se desfoar ntr-un volum de 2,5 l soluie; cantitile n moli din fiecare component la echilibru sunt: A=10; B=5; C=5; D=5. Constanta de echilibru Keq pentru aceast reacie are valoarea : A. 0,5 B. 0,67 C. 1,00 D. 1,5 E. 2,00

Tipuri de reacii n funcie de valoarea G

1. reacii exergonice 2. reacii endergonice

Reacii endergonice
Reacii chimice care necesit un aport energetic exterior au G >0 .

Exemplu: 1. Fotosinteza

fotoni

Energie Soare solar

6CO2

+ 6H2O

C6H12O6 + 6O2
(glucoza)

Reacii exergonice
Reacii chimice cu eliberare de energie au G<0 Examplu: 1. Respiraia celular
Energie

C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O +

(glucoza)

ATP

 Reacii endergonice reaciile anabolice

Reacii exergonice- recaiile catabolice

Cile anabolice
Reacii metabolice, care consum energie (endergonice), pentru a construi molecule complexe din molecule simple.

Exemplu: 1. Fotosinteza 6CO2 + 6H2O

Soare

Energie luminoas

C6H12O6 + 6O2
(glucoza)

Cile catabolice
Reacii care elibereaz energie (exergonice) prin care molecule complexe se scindeaz n molecule simple. Exemplu: 1. Respiraia celular C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O +
(glucoza) energie

ATP

cale catabolic

Cuplarea cilor metabolice

cale anabolic

A
energie

C1

ATP Energie
energie

energie

B1

energie

A1

Cuplarea reaciilor metabolice

este posibil datorit naturii aditive a variaiei energiei libere
O reacie spontan poate susine o reacie non-spontan: o reacie exergonic (G1 <0 ) se poate cupla cu o reacie endergonic (G2>0)

Variaiile energiei libere ale reaciilor cuplate sunt aditive, iar variaia total a energiei libere trebuie s fie negativ (Gtotal = G1 + G2; Gtotal < 0).

Cuplarea reaciilor endergonice cu cele exergonice

Dou tipuri de cuplaj

A. Cuplarea prin intermediar comun obligatoriu: A+C I B+D

Intermediarul comun obligatoriu I trebuie s fie nrudit structural cu A,C, B sau D.

Acest tip de cuplaj nu este specific pentru sistemele biologice.

I. Cuplarea prin intermediar comun obligatoriu

Exemplu
- Dou reacii din glicogenoliz glucozo-1-P glucozo-6-P glucozo-6-P fructozo-6-P DGo' = -1,74kcal/mol DGo' = +0,40kcal/mol

TOTAL:

DGo' = -1,34 kJ/mol

I. Cuplarea prin intermediar comun energetic

-Dou reacii care se deruleaz n acelai compartiment celular se pot cupla printr-un intermediar energetic comun care prezint dou forme E/E*, una energizat (E*) i alta srac energetic, intermediar care servete drept transductor de energie. A Free energy E* E*/E=ATP/ADP E

-Intermediarul comun energetic E, (spre deosebire de I, intermediarul comun obligatoriu) nu trebuie s fie nrudit structural cu A, B, C sau D

Modelul ATP ca Donor Energetic Universal

Proprietile ATP

Structura ATP
ATP conine adenin, riboz i 3 grupri fosfat unite dou legturi macroergice

Adenozin trifosfat (ATP)

P
1 fosfat srac energetic

P
2 fosfai bogai energetic

Legturile macroergice
ATP Adenozin trifosfat
N H2 N N

O -O P OO

O P OO

O P OH OH O CH 2 H O H

adenina
H H O

Legaturi anhidridice (~)

riboza

- Legturi de tip anhidrid - DG hidroliz cu valoare negativ mare. - Reprezentate prin simbolul "~"

Hidroliza ATP: dou modaliti

Potential, ambele legturi macroergice pot fi scindate, i cele dou grupe fosfat bogate n energie eliberate prin hidroliza ATP. ATP ADP + Pi ADP AMP + Pi Alternativ: ATP AMP + PPi PPi 2Pi

Hidroliza ATP: dou modaliti

I. ATP + H2O ADP + P G = -7,3kcal/mol
Adenozin trifosfat (ATP)

P
+ H2O

Adenozin difosfat (ADP)

Hidroliza ATP: dou modaliti

I. ATP + H2O PP 2P AMP + PP G = -7,3kcal/mol G = -9 kcal/mol

Gtotal = -16,3 kcal/mol

P P P

Adenozin trifosfat (ATP)

+ H2O

Adenozin monofosfat (AMP)

+H2O P
P P

Hidroliza ATP la ADP

- are loc atunci cnd variaia energiei libere a reaciei endergonice este mai mic de 7,3kcal/mol Exemplu

Unele reacii enzimatice pot fi interpretate drept dou jumti de reacie cuplate, una spontan i cealalt nespontan.
-

- La centrul activ al enzimei, cuplajul este favorizat cinetic, n timp ce jumtile de reacie sunt prevenite.

Hidroliza ATP la ADP

Reacia catalizat de hexokinaz; cele 2 jumti de reacie sunt:
ATP + H2O ADP + Pi DGo' = -7,3 kcal/mol

Pi + glucoz glucozo-6-P + H2O

DGo' < +7,3 kcal/mol

Cuplaj: ATP + glucose ADP + glucozo-6-P DGo' < 0 kcal/mol Structura centrului activ al enzimei cavitate hidrofoba-, care exclude H2O, previne reactiile hidrolitice individuale, in timp ce favorizeaza reactia cuplata.

II. Hidroliza ATP la AMP

- are loc atunci cnd variaia energiei libere a reaciei endergonice este mai mic de 7,3kcal/mol

RCOOH + CoASH RCOSCoA ATP + H2O AMP + PPi PPi + H2O 2 Pi

DGo' > +7,3kcal/mol DGo' = - 15,3 kcal/mol

Reactia globala: RCOOH + ATP + CoASH RCOSCoA+ AMP + 2 Pi DGo' < 0 kcal/mol (spontana)

De ce nu se hidrolizeaza ADP la AMP?

Nu exista enzima corespunzatoare in organism

De ce hidroliza legaturilor de tip anhidrida din ATP si PPi au o valoare mare a G?

Stabilizarea prin rezonanta a produsilor de hidroliza este mai puternica de cit in cazul compusului ca atare.
Repulsia electrostatica intre atomii de oxigen incarcati negativ ai gruparilor fosfat favorizeaza separarea gruparilor fosfat (prin reactia de hidroliza a ATP se reduce nr. sarcini negative de la 4 pt ATP la 3 pt ADP.

Prezenta ioni Mg2+ in celule: afinitatea ADP pt Mg2+ este de 6 ori mai mare decit afinitatea ATP]

Intrebare:
1. 2. 3. 4. 5. ATP nu contine: Legatura de tip anhidrida Legatura esterica Legatura N-glicozidica Legatura tioesterica Grupe hidroxil de tip alcool secundar

Care sunt modalitatile de echilibrare a continutului de grupari fosfat macroergice intre nucletidele dintr-o celula (si de folosire a energiei legaturii macroergice din dinucleotide)?
REACTIILE CATALIZATE DE ENZIMELE: Adenilat kinaza Nucleozid difosfosfat kinaza

Adenilat kinaza AK (Miokinaza) interconverteste nucleotidele cu adenina

ATP + AMP 2 ADP AK este prezenta in majoritatea celulelor Reactia AK furnizeaza substratul pentru sinteza ATP (ex. sub actiunea ATP sintazei mitocondriale), ADP, in conditiile in care in exista reactii metabolice in cadrul carora ATP-ul este defosforilat la AMP. Reactia AK permite cresterea concentratiei de AMP (2ADP AMP + ATP) in conditiile in care exista depletie celulara de ATP, AMP care va actiona ca activator alosteric pentru enzimele catabolice, care vor conduce la generarea crescuta de ATP Reactia AK este o sursa minora temporara de ATP, permitind gruparilor fosfat macroergice din ADP sa fie utilizate pentru sinteza directa de ATP

NUCLEOZID DIFOSFAT KINAZA (NuDiKi)

NuDiKi echilibreaza continutul de grupari fosfat macroergice ~P intre diferitele clase de nucleotide, in functie de necesitatile celulei, ex. pentru sinteza ADN & ARN. NuDiKi catalizeaza reactii reversibile de tipul:

ATP + GDP ADP + GTP, ATP + UDP ADP + UTP, etc.

Cuplarea energetica in transportul ionilor

Transportul ionilor poate fi cuplat cu o reactie chimica, ex. Hidroliza sau sinteza ATP.

ADP + Pi

S1
ATP
Side 1 Side 2

S2

Variatia energiei libere in transportul ionilor

S1
Side 1 Side 2

S2

G (diferenta de potential electochimic) asociata cu transportul ionului S printr-o membrana de pe fata 1 pe fata 2 este: [S]2 DG = R T ln + Z F DY [S]1 R = constanta gazelor, T = temp, Z = sarcina ionuluic, F = constanta Faraday, DY = tensiunea.
DG pt. fluxul ionic variaza cu gradientul ionic & tensiunea.

ADP + Pi

ADP + Pi

S1
Transport activ

S2
ATP

H+1
Sinteza ATP

H+2
ATP

2 situatii Transport activ: Hidroliza spontana a ATP (DG <0) este cuplata cu (sustine energetic) fluxul ionic contra gradient (DG>0). Sinteza ATP: Fluxul H+ spontan conform gradientului de concentratie (DG <0) este cuplat (sustine energetic) sinteza ATP (DG>0).

Gruparile fosfat bogat energetice sunt moneda energetica a celulei

ATP este principala moneda energetica ATP este constant consumat si generat Consum ATP: contractie musculara, transport activ, reactii biosintetice Generarea ATP

Compusi macroergici sau fosfageni

Forme de depozitare a gruparilor fosfat bogate energetic, capabili sa actioneze ca donori de grupari fosfat ~P catre ADP, astfel regenerind rapid ATP Hidroliza compusilor macroergici elibereaza o cantitate de energie libera de cel putin 7,3kcal/mol (IGI>7,3 kcal/mol)

Variatia energiei libere standard in cazul unor compusi organofosforici

Compus Fosfoenolpiruvat (PEP) Carbamoil fosfat 1,3-Bifosfoglicerat Fosfocreatina Acil-SCoA ATP (hidrolizat la ADP) ATP (hidrolizat la AMP) Pirofosfat Glucozo-1-fosfat Glucozo-6-fosfat AMP Glicerol-3-fosfat DGo' hidroliza, kcal/mol -14, -1,3 -11, -1,3 -7,5 -7,3 -7,3 - -5, -3, -3,4 -,

COMPUSI MACROERGICI
O C C CH2 OPO32H
+

OADP ATP

O C C

O-

O C

O-

OH

C CH3

CH2

PEP

enolpiruvat

piruvat

Fosfoenolpiruvatul (PEP), implicat in sinteza ATP.

COMPUSI MACROERGICI Fosfocreatina (creatinfosfat): musculatura scheletica, inima, spermatozoizi, creier

O
-

CH3 H N C NH2 N
+

O CH 2 C O-

P O
-

fosfocreatina

Creatine Kinaza catalizeaza reactia reversibila: Fosfocreatina + ADP ATP + creatina Rolurile fosfocreatinei

-Sursa de ATP in cursul contractiei musculare -Depozit de ~P - transport ~P intre diferitele compartimente ale celulei .

COMPUSI MACROERGICI

Coenzyme A-SH +

HO

O Coenzyme A-S C R + H2O

In contrast cu esterii fosforici, tioesterii au o valoare negativa a DG pentru hidroliza foarte mare. Spontaneitatea scindarii legaturii tioesterice este esentiala pentru rolul coenzimei A de acyl group carrier.

Esteri fosforici cu valori negative dar <7,3kcal/mol la hidroliza

NH2 N

Legatura esterica
O -O P OO O P OO O P OH O CH2 H OH O H H OH N N

adenina riboza

ATP

legatura esterica dintre prima grupare fosfat si 5OH al ribozei din ATP.

Esteri fosforici cu valori negative dar <7,3kcal/mol la hidroliza

O
6 CH 2 5 4

P OH O H
2

OH

CH 2 HO CH CH 2

OH O O P OO-

H
1

H OH
3

OH

OH

OH

glicerol-3-fosfat

glucozo-6-fosfat

Esteri fosforici cu valori negative dar <7,3kcal/mol la hidroliza

Protein kinaza
Protein OH + ATP Protein O O P OPi H2 O O
- + ADP

Protein fosfataza

Legatura esterica dintre restul de acid fosforic si gruparea OH a unui aa dintr-o proteina (Ser, Thr, Tyr).

AMPc este un compus care hidrolizeaza spontan conform reactiei (catalizata de fosfodiesteraza):

cAMP
N

NH2 N

cAMP 5'-AMP
DE CE? deoarece exista constringeri sterice in cadrul ciclului. CE IMPORTANTA ARE ACEASTA LABILITATE A AMPc LA HIDROLIZA? Labilitatea AMPc la hidroliza il face un semnal celular tranzitoriu excelent.
O O H2 5' C 4' H

N O H

1'

H 3' P O O-

2' H

OH

Enumerati compusii organofosforici care au G<0 si precizati rolurile lor: Transfer sau depozit energetic ATP, PPi, creatinfosfat Transfer de grupari chimice ATP, Acil-CoA Semnal tranzitoriu AMPc

Generarea/sinteza ATP
I. Conditii anaerobioza
Lipsa O2 Fosforilare la nivel de substrat 1) 2 reactii in glicoliza 3) 1 reactie in ciclul Krebs

II. Conditii de aerobioza

prezenta O2 Fosforilare oxidativa

Fosforilare la nivel de substrat -glicoliza1,.3-Bifosfoglicerat Fosfoglicerat kinaza 3-fosfoglicerat

ADP ATP

Fosforilare la nivel de substrat in glicoliza:

reactia catalizata de fosfogliceratkinaza

Fosforilare la nivel de substrat in glicoliza: reactia catalizata de piruvatkinaza

O C C

OADP ATP OPO32H

+

O C C

O-

O C

O-

OH

C CH3

CH2

CH2

PEP

enolpiruvat

piruvat

Fosforilare la nivel de substrat in ciclul Krebs:

reactia catalizata de succinilCoA kinaza

succinil~ CoA + GDP + Pi

succinat + GTP + CoASH