BAZELE MOLECULARE ALE PROCESELOR DE LA NIVELUL BIOMEMBRANELOR IN CONDITII NORMALE SI PATOLOGICE

- noiuni de baz; coala doctoral 2006-2007 Esena vieii (fenomene biotice) const n capacitatea structurilor vii de a oxida gradat diferite substane, utiliznd mare parte din energia chimic astfel eliberat pentru desfurarea anumitor reacii chimice ce consum energie (endergonice). Ansamblul acestor procese de nivel molecular se numete metabolism i st la baza vieii, asigurnd condiiile energetice pentru fenomenele antientropice de pstrare i dezvoltare a structurilor proprii. Celula este unitatea fundamental a materii vii. La nivel celular se manifest toate proprietile generale, fundamentale, ale materiei vii: metabolismul, excitabilitatea, micarea, reproducerea. Ele sunt asigurate morfofuncional la nivel subcelular n mod difereniat, prin specializrile organitelor celulare. Unele aspecte ale vieii sunt prezente izolat, oarecum incomplet, i la nivel de organite izolate i chiar ansambluri supramoleculare reconstituite artificial. Celula este alctuit din membran, citoplasm i nucleu. Componenta principal a membranei este plasmalema, un bistrat fosfolipidic n care se gsesc proteine periferice i integrale, la care se adaug glicokalixul (cu compoziie predominant glicoproteic) la exterior i citoscheletul submembranar i reticulul endoplasmi superficial la interior. Citoplasma este compartimentat printr-un sistem de membrane fosfolipidice intracelulare. Organitele delimitate de asemenea membrane sunt de tip vezicular / canalicular i cuprind: reticulul endoplasmic, mitocondriile, lizozomii, aparatul Golgi, vezicule de endo- i exocitoz. Reticulul endoplasmic (RE) este un ansamblu tubulo-vezicular cu rol n: transportul intracelular de substane, stocarea i eliberarea calciului, sinteza fosfolipidelor, acizilor grai i steroizilor. Poriunile de reticul care prezint ribozomi ataai (RE rugos) particip la sinteza proteinelor ce sunt eliberate direct n lumenul reticular. Aparatul Golgi este o formaiune specializat din reticulul endoplasmic, constituit ca un ansamblu de cisterne turtite i mici vezicule (de transfer la un pol i de exocitoz la cellalt), cu rol n procesarea post-translaional a proteinelor secretorii (glicozilare i mpachetare n vezicule de exocitoz) precum i n direcionarea proteinelor proprii. Lizozomii, formai la nivelul aparatului Golgi, sunt vezicule cu coninut bogat de hidrolaze, ce realizeaz procese de digestie intracelular a materialului de endocitoz (heterofagie) sau a structurilor proprii (autofagie), cea din urm mai ales n cadrul procesului de nlocuire permanent a proteinelor pentru meninerea funcionalitii lor. Citoscheletul este un ansamblu de filamente de natur proteic, cu diferenieri regionale de compoziie i arhitectur ce servesc diverse roluri funcionale. Dup criterii morfo-structurale se descriu trei clase de filamente: microfilamente (implicate n meninerea arhitecturii celulare), microtubuli (implicai n motilitate) i filamente intermediare (cu rol de ancorare a unor proteine membranare). Stocarea energiei metabolice Desfurarea reaciilor anabolice i a altor procese celulare consumatoare de energie necesit disponibilitatea acesteia ntr-o form direct utilizabil, uor controlabil

i n cantitate suficient. Aceste criterii sunt ndeplinite de energia chimic din aanumitele legturi fosfat macroergice (esterice fosfat-fosfat sau fosfat-substrat), din diveri compui cum sunt creatin-fosfatul i nucleotidele, dar cel mai important compus din aceast clas este de departe adenozin-trifosfatul (ATP). Reaciile chimice ce se desfoar cu consum de energie metabolic (sub forma principal de ATP) sunt catalizate direct de enzime cu activitate ATP-azic sau cuplate indirect cu hidroliza ATP, care furnizeaz astfel energia necesar. Sinteza ATP se realizeaz prin anumite reacii din catabolismul nutrimentelor, cuplate cu fosforilarea ADP, care poate necesita sau nu prezena oxigenului. De aici distincia aerob / anaerob sau fosforilare de substrat / oxidativ. Cea mai mare parte a produciei de ATP se realizeaz la nivel mitocondrial, dar contribuia acestui proces difer n funcie de tipul celular (de fapt depinde mai ales de numrul mitocondriilor i ncrcarea lor enzimatic), precum i n funcie de statusul metabolic i de oxigenare al celulei. In matricea mitocondrial se desfoar secvena catabolic final pentru toate nutrimentele, ciclul acizilor tricarboxilici (Krebs), n care este preluat un rest acetil i se elibereaz dou molecule de CO , cu formarea unei molecule de ATP i reducerea uneia 2 de flavin-adenin-dinucleotid (FAD) i a trei molecule de nicotinamid-adenin-dinucleotid + (NAD ). Aceste dou coenzime transportoare de electroni sunt re-oxidate la nivelul membranei mitocondriale interne, n cadrul lanului enzimatic transportor de electroni (respirator). Acesta transfer electronii ctre oxigen, cu formare de ap, iar excesul de protoni este eliberat n spaiul intermembranar, meninnd gradientul electrochimic ce asigur funcionarea unei ATP-sintaze din membrana mitocondrial intern. Resturile acetil sunt introduse n ciclul Krebs de ctre acetil-coenzima A, care le preia din catabolismul nutrimentelor dup cum urmeaz. Glucoza este catabolizat pn la piruvat cu producerea net a 2 molecule de ATP i 2 molecule de NADH, care pot fi reoxidate prin transformarea anaerob a piruvatului n lactat. Conversia piruvatului n acetil-coenzim A mai produce o molecul de NADH. Glicerolul de provenien lipidic intr n calea glicolitic. Acizii grai sunt catabolizai la nivel mitocondrial prin -oxidare, un ciclu de reacii n care intrarea se face prin conversie n acil-coenzim A, cu dubla defosforilare a unei molecule de ATP. Apoi al treilea atom de carbon din lan este hidroxilat i oxidat, cu producerea cte unei molecule de FADH i NADH. In sfrit, se elibereaz acetil-CoA, 2 iar o alt molecul de CoA reintroduce n ciclu acidul gras rezultat, care este mai scurt cu doi atomi de carbon dect cel iniial. Aminoacizii sunt deaminai, iar acizii carboxilici rezultai sunt convertii la piruvat sau un intermediar din ciclul Krebs. Calculele stoechiometrice arat urmtoarea producie de molecule de ATP prin catabolizarea complet a unei molecule de nutriment: 30 pentru glucoz, 124 pentru un acid gras cu 18 atomi de carbon, maximum 12,5 pentru aminoacizi (ciclu Krebs complet). Reglarea intrinsec permanent a metabolismului energetic se face prin concentraia de ATP i ADP, alosteric la nivelul etapelor enzimatice limitante de vitez. Exemplul tipic este controlul fosfofructokinazei, care este inhibat de NADH, citrat i ATP i stimulat de ADP. La nivelul fosforilrii oxidative ADP realizeaz i aa-numitul control respirator; scderea ADP inhib lanul transportor de electroni datorit

gradientului protonic excesiv creat ca urmare a scderii activitii ATP-sintazei; n mod normal aceasta permite limitarea permanent a creterii gradientului protonic prin calea oferit pentru difuzia retrograd (utilizat ca surs de energie pentru sinteza ATP). Sinteza proteic ARNm este produs prin transcripia ADN sub aciunea unei ARN polimeraze ADNdependente. Aceasta determin separarea local a catenelor ADN dup legare la nivelul unei regiuni promotoare i catalizeaz legarea nucleotidelor, rezultnd transcrierea primar. Acest ARN este procesat post-transcripional, fiind nlturate secvenele nesemnificative (introni) iar cele ce codific secvena polipeptidic (exoni) sunt realipite, rezultnd produsul final, ce ptrunde n citoplasm prin porii nucleari. Sinteza proteic are loc la nivel ribozomal, prin translaie a secvenei de codoni din ARNm n secvena polipeptidic. Fiecare aminoacid este specificat de unul sau mai muli codoni, la care se adaug un codon special de iniiere a sintezei i trei codoni de stopare. Oricare din aceti codoni are semnificaie translaional unic. La nivel ribozomal mesajul este decodificat cu ajutorul ARNt, fiecare aminoacid fiind adus de o asemenea molecul specializat, ce recunoate codonul corespunztor n ARNm (cu ajutorul anticodonului din propria structur amplasat n cadrul unui situs de recunoatere). Legarea ARNt pe ARNm se face la situsul A (aminoacil) din structura ribozomului. O aminoacil-transferaz realizeaz alipirea noului aminoacid la secvena peptidic preexistent, ataat de ARNm prin ARNt anterior la situsul P (peptidil) al ribozomului. Apoi o translocaz determin micarea reciproc a ribozomului i ARNm, cu eliberarea ARNt anterior i citirea unui nou codon. Procesarea post-translaional a polipeptidelor cuprinde reacii de fosforilare, glicozilare, proteoliz. Diferenierea celular, deseori i reglarea funcional, se realizeaz prin controlul ratei transcripiei genice. Aceasta presupune mecanisme complexe, bazate pe principiile stimulrii prin substrat i inhibiiei prin produs, deseori folosind gene reglatoare specializate. Structura i funciile membranei celulare Membrana celular cuprinde plasmalema propriu-zis i glicoproteinele de pe faa sa extern (glicokalix) i este strns legat morfo-funcional cu structuri asociate submembranare (specializri ale citoscheletului i reticulului endoplasmic). Plasmalema este un bistrat fosfolipidic ce conine i alte lipide, precum i proteine intrinseci (integrale, ce strbat ambele straturi) sau extrinseci (periferice, aparinnd unui singur strat). Plasmalema delimiteaz celula, asigurnd schimburi controlate de substan i informaie cu mediul extracelular. Ea prezint structuri specializate pentru diverse aspecte funcionale: transferul substanelor hidrofile (pori, canale, transportori), recunoaterea semnalelor biochimice (receptori), legtura cu celulele nvecinate (jonciuni strnse i comunicante), micarea celulei / lichidului extracelular (cili i flageli). Permeabilitatea sa selectiv st la baza diferenelor de compoziie ionic ntre mediul intra- i extracelular, ce explic existena potenialului electric membranar de repaus. Variaiile de potenial electric membranar au o importan special n semnalizarea la nivel celular. Transportul transmembranar se realizeaz ca macro- i microtransfer. Dup sens, macrotransferul poate fi endocitoz i exocitoz. Dup cum vezicula de endocitoz

conine sau nu material solid, aceasta se numete fago- sau pinocitoz, iar dup dimensiuni poate fi vorba de macro- sau micropinocitoz. Microtransferul poate fi pasiv sau activ, dup cum se realizeaz n sensul sau mpotriva gradientului electrochimic transmembranar. Transportul pasiv este de fapt un proces de difuziune prin membran. In general rata de difuzie printr-o membran este proporional cu temperatura absolut, gradientul de concentraie i coeficientul de permeabilitate, determinat la rndul su de coeficientul de partiie ntre membran i mediu. Substanele lipofile difuzeaz uor prin bistratul fosfolipidic, iar cele hidrofile utilizeaz diverse ci hidrofile. In sensul scderii ratei de transfer i al creterii selectivitii, precum i pe baza diferenelor structurale, cile hidrofile pot fi clasificate n pori, canale i transportori. Porii i canalele sunt structuri proteice care delimiteaz ci apoase transmembranare. Canalele prezint bariere de permeabilitate i de selectivitate, unele din ele operate chimic sau electric. Difuziunea transmembranar pe ci prefereniale specifice se numete facilitat, n opoziie cu difuziunea simpl. Difuziunea apei prin membran se numete osmoz. Presiunea osmotic este egal cu presiunea care aplicat n compartimentul cu osmolaritate mai mare poate mpiedica osmoza. Osmolaritatea unei soluii este numrul total de particule aprinnd substanelor dizolvate raportat la numrul lui Avogadro i la volumul soluiei. In cazul transportorilor, transferul de substan presupune legarea acesteia de proteina transportoare pe o fa a membranei, o anume modificare conformaional a acesteia (flip-flop, ping-pong, situsuri succesive de legare), i eliberarea substanei transportate pe cealalt fa a membranei. Dup numrul de specii moleculare transferate pentru un ciclu transportor, exist uniport i cotransport. Acesta din urm se numete sinport dac transferul este n acelai sens i antiport dac sensul transferului este opus. Transportul activ se realizeaz evident numai de ctre transportori proteici i poate fi primar sau secundar, dup cum proteina transportoare prezint sau nu activitate ATPazic proprie. Transportul activ secundar este ntotdeauna cotransport, una din substane fiind transportat activ pe baza gradientului pentru o alta. Consumul de energie este indirect, realizndu-se la nivelul unui transportor activ primar ce menine gradientul menionat, necesar pentru funcionarea celui secundar. Jonciunile celulare sunt alctuite din alipiri ale plasmalemei celulelor nvecinate, simple n cazul jonciunilor strnse (aderente), strbtute de filamente ancorate submembranar n cazul desmozomilor i de canale n cazul jonciunilor comunicante. Aceste canale sunt permeabile pentru ioni i molecule mici (de exemplu ATP), sunt formate din dou seturi pereche de cte ase proteine numite conexoni i ar putea fi reglate de concentraia local de calciu i protoni. Plasmalema este esenial implicat n rspunsurile celulare la diveri stimuli din mediu. Stimulii fizici determin la nivel plasmalemal modificri de conductan ionic, cu variaii consecutive ale potenialului electric transmembranar. Dac depolarizarea atinge nivelul prag pentru deschiderea unor anume populaii de canale ionice voltajdependente se declaneaz potenialul de aciune (PA), ce se propag n toat membrana. PA, precum i alte modificri de potenial, sunt implicate n conducerea excitaiei electrice i n cuplarea acesteia cu alte modaliti de rspuns celular. Modificrile locale de potenial sunt deosebit de importante prin efectul de modulare a excitabilitii electrice; potenialul se apropie sau se deprtez de valoarea prag pentru declanarea potenialului de aciune.

Stimulii chimici sunt reprezentai de diverse substane din spaiul extracelular, cu aciune mai mult sau mai puin specific. Exist substane bioactive care trec prin membran i se leag de proteine receptor din citosol, complexul rezultat acionnd ulterior la nivel nuclear asupra ratei de transcripie a anumitor gene. Majoritatea lor acioneaz ns la nivel plasmalemal, asupra fluiditii membranare, direct asupra unor canale ionice, dar mai ales prin legarea de proteine receptor mebranare. Complexul agonist-receptor realizeaz mai departe transmiterea semnalului pe diverse ci. Unii receptori au n structura lor sau sub control direct canale ionice numite receptor-operate. Aceast categorie de canale include i pe cele controlate indirect, prin intermediul proteinelor G sau prin mesageri secunzi. Proteinele G reprezint o modalitate principal de transducie transmembranar a semnalului chimic extracelular mediat de activarea receptorilor. Ele sunt structri trimerice, formate din complex , comun diverselor tipuri, i subunitate , specific fiecrui tip. Transducia presupune activitatea GTP-azic a proteinei G; se consider c elementul activ este complexul -GTP. Inafar de operarea unor canale ionice, proteinele G controleaz enzime submembranare ce genereaz mesageri secunzi, reprezentnd puncte de plecare pentru diferite ci de semnalizare intracelular. Cele mai importante studiate pn n prezent sunt adenilat ciclaza, guanilat ciclaza, fosfolipaza C i fosfolipaza A2. Proteinele ce controleaz adenilat ciclaza sunt activatoare sau inhibitoare (Ga i Gi), dup natura subunitii . Proteinele G non-a, non-i prezint numeroase varieti, cele mai importante aparinnd clasei Gq (stimuleaz de exemplu fosfolipaza C). Ciclazele sunt esteraze ce acioneaz asupra nucleotidelor trifosforilate respective (ATP i GTP), rezultnd nucleotidele ciclice corespunztoare (cAMP i cGMP). Fosfolipaza C este o esteraz ce scindeaz fosfatidil-inozitol bifosfatul membranar (PIP2) n inozitol-trifosfat (IP3) i diacilglicerol (DAG). Fosfolipaza A2 este important prin eliberarea din trigliceride a acidului arahidonic, care poate fi metabolizat pe calea ciclooxigenazei sau lipooxigenazei, rezultnd o varietate de compui foarte activi i cu multiple efecte, cunoscui sub numele generic de eicosanoizi (prostaglandine, leucotriene, etc.). Nivelul nucleotidelor ciclice este controlat i prin aciunea litic a unor fosfodiesteraze specifice, uneori influenate de stimuli externi. Nucleotidele ciclice stimuleaz cu o oarecare specificitate proteinkinaze (A i G), cu numeroase efecte prin fosforilri asupra unei multituduni de situsuri proteice (uneori prin intermediul unei alte kinaze, ca n cazul clasic al reglrii cAMP-dependente a glicolizei). IP3 poate elibera calciu din reticulul endoplasmic prin aciune asupra unor canale reticulare, dar mai ales faciliteaz aciunea eliberatoare a calciului citosolic nsui (eliberare de calciu dependent de calciu) asupra canalelor menionate (receptori pentru IP3). Calciul citosolic determin eliberare de calciu din reticul i prin aciune asupra unei alte categorii de canale (receptori pentru ryanodin). DAG determin activarea protein kinazei C (calciu-fosfolipiddependent), ce acioneaz de asemeni prin multiple fosforilri proteice. Calciul citosolic ca mesager secund acioneaz n special prin cuplare cu calmodulina, complexul rezultat activnd diverse proteinkinaze (cum este de exemplu kinaza lanului uor al miozinei). Proteinkinazele menionate fosforileaz resturi aminoacil de serin i treonin. O alt categorie este cea a tirozinkinazelor, care pot fi citosolice sau pot funciona ca element de transducie n cadrul unor receptori plasmalemali (insulin). Ar mai putea fi implicate n semnalizarea intracelular i unele protein-fosfataze, precum i reacii de

metilare, tiolare, etc. Poteniale electrice membranare Permeabilitatea selectiv a plasmalemei determin distribuia asimetric a ionilor de o parte i de alta a acesteia. In condiiile existenei unnor ioni nedifuzibili ntr-unul din cele dou compartimente separate de membrana permeabil selectiv, pentru orice ion difuzibil se definete potenialul de echilibru conform legii Nernst: E=61log(c /c ), c 1 2 1 i c fiind concentraiile ionului respectiv n cele dou compartimente; relaia se deduce 2 pe baza principiului echilibrului dinamic aplicat energiilor poteniale electric i de difuziune. Aplicat la nivel celular aceast relaie ia forma ecuaiei Goldman-Hodgkin-Katz; potenialul membranar de repaus este determinat de distribuia i coeficienii de + + permeabilitate membranar pentru trei ioni majori: Na , K , Cl . Permeabilitatea pentru potasiu fiind mai important, potenialul de repaus este apropiat de valoarea potenialului de echilibru pentru acest ion. Potenialul membranar de repaus variaz de la o celul la alta, n funcie de permeabilitatea membranei pentru diveri ioni. Ca urmare a diferenei de potanial plasmalema este ncrcat electric n repaus, negativ pe faa intern i pozitiv pe cea extern. Dat fiind mecanismul fizic al potenialului de repaus, acesta se va modifica n funcie de variaiile concentraiilor ionice n cele dou compartimente. Pentru meninerea potenialul membranar de repaus este necesar pomparea permanent a ionilor, pentru a asigura menienerea gradientelor de concentraie, deoarece permeabilitatea ionic a membranei pentru ionii respectivi n repaus, dei extrem de mic, nu este nul. In absena transportului activ s-ar produce n timp pierderea de potasiu i acumularea de sodiu. Transportul activ al celor doi ioni este cuplat, fiind realizat de o ATP-az membranar special, numit i pomp de sodiu. Pentru fiecare ciclu conformaional ea expulzeaz 3 ioni de sodiu i introduce doar doi ioni de potasiu, fiind deci electrogen, cu efect hiperpolarizant fa de valoarea calculat teoretic pentru potenialul de repaus. Activitatea pompei fiind dependent de concentraia sodiului intracelular, ea va participa la fenomenul de repolarizare. Creterea diferenei de potenial electric transmembranar se numete hiperpolarizare, iar reducerea acesteia este o depolarizare. Depolarizarea local presupune de obicei un influx net de sarcini pozitive. Datorit difuziunii n spaiul intracelular i submembranar, aceasta se propag pe o mic arie, scznd n amplitudine cu distana. Depolarizarea tranzitorie care se propag nedecremenial la distan se numete potenial de aciune (PA). Canalele ionice implicate n declanarea potenialului de aciune au o dependen de voltaj a probabilitii de deschidere relativ abrupt, ceea ce imprim n unele cazuri (neuroni, miocite striate) caracteristica de fenomen cu prag a acestui fenomen i a celor subsecvente (legea tot sau nimic). Propagarea PA n membrana celular se realizeaz prin autoregenerare, pe baza difuziunii sarcinilor pe cele dou fee ale membranei. Cu alte cuvinte dac propagarea local, decremenial, prin cureni ionici, determin o depolarizare suficient pentru deschiderea canalelor voltaj-dependente din apropiere. Ca urmare viteza de propagare depinde de fora motrice a difuziei, adic de amplitudinea PA i panta depolarizrii, precum i de densitatea canalelor voltaj-dependente implicate n declanarea PA. Fiziologic PA apare prin sumaie temporal a efectelor depolarizante i

hiperpolarizante ale diferiilor cureni ionici. Curenii ionici depolarizani pot fi determinai de mediatori chimici, ca n cazul transmiterii sinaptice sau al unor efecte hormonale sau paracrine, sau de ageni fizici ca n cazul celulelor receptoare specializate (poteniale de receptor) sau al canalelor ionice activate de deformare mecanic, prezente n numeroase tipuri celulare. In fibra muscular scheletic i n fibrele nervoase cu diametru mare PA are caractere i mecanisme prototip: depolarizare abrupt cu repolarizare imediat (spikepotential), cu depirea izopotenialului (overshoot). Depolarizarea se produce ca urmare a unui influx masiv de sodiu prin canale voltaj-dependente rapide (cu kinetic conformaional accelerat; deschidere cu prag de voltaj i inactivare rapid). Repolarizarea se produce ca urmare a efluxului de potasiu prin canale voltaj-dependente ceva mai lente, n condiiile inactivrii canalelor de sodiu. Transmiterea sinaptic Sinapsele chimice sunt structuri specializate ce asigur transmiterea de mesaje ntre celule nvecinate. Aa-zisele sinapse electrice sunt de fapt bazate pe jonciunea celular comunicant (nexus, gap-junction), structur proteic transmembranar ce delimiteaz un por care strbate dou membrane adiacente. Ele permit difuzia ionilor de la o celul la cealalt, asigurnd astfel direct propagarea potenialului de aciune. Sinapsa chimic presupune existena unui mediator chimic pentru semnalizarea intercelular, eliberat n spaiul sinaptic din teritoriul presinaptic i acionnd asupra unor receptori specifici prezeni n membrana postsinaptic. Componenta presinaptic este ntotdeauna terminaia unei prelungiri neuronale de tip axonic. Dac celula receptoare este un neuron, sinapsa este neuro-neuronal, iar dac aparine altui tip celular sinapsa se numete neuro-efectoare. Etapele transmiterii sinaptice reprezint tocmai parcursul moleculei semnal. Mediatorul sinaptic (neuromediator) este sintetizat la nivelul butonului terminal sau n ribozomii corpului celular al neuronului. In al doilea caz (neuropeptide), el este transportat cu ajutorul microtubulilor (neurofilamente) de-a lungul axonului. In cele mai multe cazuri eliberarea mediatorului n spaiul sinaptic se produce prin exocitoz, ceea ce preupune prezena sa la nivel presinaptic n vezicule (de exocitoz). Apariia unui potenial de aciune la nivelul butonului terminal (fiziologic prin propagare de-a lungul membranei axonale) determin un influx de calciu voltaj-dependent. Creterea calciului citosolic la nivel submembranar presinaptic iniiaz fuziunea membranei veziculelor cu mediator (ancorate deja la nivelul situsurilor de eliberare) cu membrana presinaptic, deci exocitoza. Mediatorul eliberat n spaiul sinaptic poate fi recaptat la nivel presinaptic, poate fi inactivat enzimatic, poate difuza extrasinaptic. Aceste molecule sunt ns destinate s acioneze la nivelul membranei postsinaptice, unde cuplarea cu receptori membranari specifici determin un rspuns excitator sau inhibitor. In termeni de potenial electric transmembranar excitaie nseamn depolarizare, iar inhibiie nseamn hiperpolarizare, respectiv creterea sau scderea probabilitii de apariie a unui potenial de aciune pe baza fenomenului de sumaie spaio-temporal a acestor efecte. Eliberarea cuantal a mediatorului (cantiti quasiconstante corespunztoare ncrcrii veziculelor de exocitoz) face posibil eivdenierea transmiterii sinaptice cu ajutorul microelectrozilor inserai intracelular la nivel postsinaptic, care detecteaz modificri tranzitorii de potenial numite poteniale

postsinaptice excitatorii respectiv inhibitorii. Depolarizarea este de obicei rezultatul unui influx pasiv de cationi, iar hiperpolarizarea poate fi determinat de eflux de potasiu sau de influx de clor. Multe sinapse folosesc mai muli mediatori pentru transmiterea i modularea semnalului (cotransmisie), dintre care unul este de obicei neurotransmitorul principal, iar ceilali sunt cotransmiatori, cu diverse efecte post- i presinaptice. Chiar transmitorul principal poate aciona pe receptori presinaptici, de obicei n sens autoinhibitor. Datorit vitezei relativ mici a etapelor componente, transmiterea sinaptic presupune o ntrziere, determinat mai ales de difuzia mediatorului. In cazul jonciunii nero-musculare din muchiul striat frecvena potenialelor de aciune din fibra motorie determin cantitatea de mediator eliberat, deci gradul de ocupare a receptorilor postsinaptici nicotinici i n final, datorit sumaiei temporospaiale de la nivelul membranei postsinaptice, condiioneaz probabilitatea declanrii potenialelor de aciune n fibra muscular (respectiv frecvena acestora). In cazul sinapselor interneuronale mecanismul intgrativ este mult mai complex. Membana corpului celular esten general incapabil s genereze poteniale de aciune; ea va reprezenta suportul sumaiei spai-temporale a tuturor efectelor postsinaptice excitatorii i inhibitorii, condiionnd frecvena de descrcare a potenialelor de aciune la nivelul conului de emergen al axonului. In jonciunile neuro-efectoare vegetative, laxe, nu exist o specializare strict delimitat ca membran postsinaptic. Datorit spaiului larg de difuziune a mediatorului ntreaga membran a celulei efectoare este sub influena neuromediatorilor provenii din varicoziti ale mai multor terminaii neuronale. In funcie de echipamentul de canale ionice, rspunsul postsinaptic poate fi o modificare global a potenialului membranar sau potenial de aciune, dac este atins pragul ntr-o regiune membrana oarecare.