Antigenul

C1
1

Definiia clasic:
Ag reprezint orice subst.de origine exogen care din momentul ptrunderii n organism pe de-o parte
induc sinteza de Ac i pe de alt parte interacioneaz

specific cu acetia. Se susin 4 idei fundamentale: 1. antigenele sunt numai de origine exogen 2. orice contact Ag-Ac se soldeaz cu rspuns imun RI, RI ce are urmtoarele caracteristici: este obligatoriu, este constant ca intensitate i mrime 3. ntotdeauna este vorba despre un RI umoral 4. Ac. care se formeaz au ntotdeauna efect protector pentru organism, contribuie la neutralizarea, ndeprtarea i distrugerea Ag.
2

Antigen (Ag) = o substan strin capabil s

induc un rspuns imun.

Virusuri Bacterii Fungi Parazii Un bun antigen: Polen Are masa molecular mare Alimente (>10,000) Medicamente Este organic Are structur complex Este non-self

 ANTIGENIMUNOGEN
DETERMINANI ANTIGENICI (Epitopi)

Factorii care influeneaz imunogenitatea contribuia imunogenului

este

strin organismului mrimea

Structura conformationala
Structura primar Structura secundar Structura teriar Structura cuaternar
Determinani secveniali Determinani conformaionali

Factorii care influeneaz imunogenitatea

contribuia sistemului biologic

Genetici
De

specie

Individuali Vrsta

Factorii care influeneaz imunogenitatea Metoda de administrare Doza Calea Subcutan > Intravenos > Intragastric Adjuvantul Substane care accentueaz rspunsul imun fa de un antigen

Natura chimic a imunogenelor

Proteine
Polizaharide

Acizi nucleici
Lipide

Critici:

1.Se iau n considerare numai Ag exogene, nu i cele endogene: - Ag exogene sunt reprezentate de cele bacteriene, parazitare, alergenii(polenuri, praful de cas, alimente, medicamente), substane chimice de origine industrial - Ag endogene sunt autoAg:orice organism N elaboreaz n mod continuu i cantiti mari de autoAg, dar care, n condiii N sunt sechestrate de anumite bariere morfofuncionale ce mpiedic contactul acestora cu sist imunitar SI. n condiii patologice , ca urmare a deteriorrii acestor bariere,se realizeaz recunoaterea lor de ctre SI i elaborarea unor RI autoreactive fa de propriile structuri antigenice, acest fenomen stnd la baza bolilor autoimune.
10

Ag tumorale sau neoAg. Orice organism N produce cel. tumorale sau canceroase ntr-o cot redus care sunt recunoscute de SI n funcie de Ag , neoAg exprimat pe suprafaa lor i se produce astfel o distrugere continu sau o supraveghere imunologic - Ag virale: marea majoritate a virusurilor i includ propriul genom n genomul gazd, iar Ag sunt secretate ca structuri proprii ale organismului
11

2.Orice contact cu Ag se soldeaz obligatoriu cu un RI, dar avem i excepii: - RI nu este obligatoriu pt c exist anumite Ag care singure nu sunt capabile s declaneze un RI (haptenele) - exist o categorie de Ag ce au ca proprietate fundamental inhibarea activ a RI ateptat numite tolerogene, ele activeaz limfocitele T supresor (LyT ) 3. RI nu este constant ca intensitate: are un grad f. mare de variabilitate ce depinde de natura Ag ,calea de ptrundere n organism, gradul de maturaie a organului receptor: de ex. n cazul unor organisme adulte avem RI intense , n cazul unor organisme de tip embriofetal se observ diminuarea intensit. RI; depinde de condiionarea genetic: intensitatea 12 depinde de haplotip:Ir genele RI, genele MHC(HLA)
s

4. RI nu se face exclusiv prin anticorpi(Ac), el neglijeaz RI rspunsul imun celular(RIC) care are funcii deosebite: eliminarea i distrugerea cel. somatice infectate cu microorganisme cu habitat sau dezvoltare intracel, supravegherea i aprarea antitumoral, anticanceroas, respingerea sau rejecia grefelor de organe 5. Ac nu au ntotdeauna un efect de protecie. Funcia Ac este de recunoatere i nu de distrugere. Distrugerea e obinut n urma activrii sistemului complement sau a unor cel. cu potenial citotoxic. Ac au efect distructiv doar uneori i anume doar Ac citotoxici.
13

EPITOPI

Sunt regiunile imunologic active ale antigenelor Paratop=structura corespondenta sau receptorul de antigen al imunoglobulinei Numarul epitopilor prezenti pe o molecula de antigen va determina valenta antigenului

CLASIFICAREA EPITOPILOR:
EPITOPI SECVENTIALI = reprezentati de un segment continuu de AA dintr-un lant polipeptidic si sunt dependenti de structura primara a proteinei. EPITOPI CONFORMATIONALI = sunt formati din AA care in structura primara se afla la distanta intr-un lant polipeptidic sau sunt situati pe lanturi diferite si sunt adusi unul langa celalalt prin plierea lanturilor in cadrul structurii secundare dau tertiare a proteinelor.

CARACTERISTICILE RECUNOASTERII EPITOPILOR DE CATRE LIMFOCITELE T:

Celulele

pot

fi

stimulate

de

Ag

solubile

reprezentate de proteine si polizaharide

Recunosc numai peptide care au fost procesate si expuse la suprafata celulelor prezentatoare de Ag impreuna cu molecule HLA cls. II

LT CD8+ recunosc peptide asociate cu molecule

HLA cls. I prezentate pe suprafata celulelor tinta

Complexe trimoleculare: TCR-peptidul antigenmolecula HLA

Definiia actual :

Ag este orice substan de origine exog. sau endogen,

capabil s declaneze un RI ce const n 2 aspecte: - stimularea i proliferarea limfocitelor Ly antigen specifice - sinteza unor molecule de recunoatere antigenic
receptori membranari) (Ac i / sau

ce au capacitatea de a se combina specific

in vitro sau n vivo cu Ag inductor

Ly antigen specifice sunt : limfocitele B (Ly B) ce

particip la rspunsul imun umoral(RIU), Ly T citotoxice

(Ly Tc)
17

ce particip n RIC, Ly T supresor (Ly Ts)

tolerogene cu rol n tolerana imunologic.

Ac au 2 funcii, aceea de structur de recunoatere antigenic i faptul c au n structura lor anumite

componente antigenice numite idiotopi, de unde paradoxul antigen = anticorp.

S-a descris o categorie aparte de Ag numite superAg ce au alte caracteristici de declanare a RI . Definiia stabilete de fapt anumite criterii de definire a Ag, i anume: o substan este Ag dac declaneaz RI,dac reacioneaz specific cu produsele rezultate n urma elicitrii RI.
18

CLASIFICAREA ANTIGENELOR:

In functie de tipul raspunsului imun:

Ag timo-independente nu necsita prezenta limfocitului T Ag timo-dependente necsita prezenta limfocitului T

TIPURI DE ANTIGENE
T-independente

Polizaharide Proprieti Structur polimeric Activare policlonal a celulelor B Yes -Type 1 (TI-1) No - Type 2 (TI-2) Rezistente la degradare Exemple
Polizaharide i lipopolizaharide pneumococice Flagella

TIPURI DE ANTIGENE
T-dependente

Proteine Structura

Exemple
Proteine microbiene Proteine non-self sau self alterate

CLASIFICAREA ANTIGENELOR:
In functie de relatia cu subiectul responsiv:
Alloantigenele atg ale aceeasi specii Xenoantigenele atg ale altei specii

Autoantigenele atg HLA in anumite conditii

(boli autoimune)

CLASIFICAREA ANTIGENELOR:
In functie de repartitia antigenelor in natura:
Antigene ubicuitare Antigene restranse

CLASIFICAREA ANTIGENELOR:
In functie de natura chimica: Glucide Lipide

Proteine
Acizi nucleici

Compusi sintetici

HAPTENA
= o substan strin cu masa molecular suficient de

redus ca s nu poat produce rspuns imun

Pentru a produce rspuns imun trebuie s se lege de

un carrier - prin cuplare cu haptena imunogena

Exemplu: Medicamentele = haptene, fiind suficient de

mici ca s nu fie recunoscute ca fiind strine de

organism. Uneori, acestea se pot lega de exemplu de eritrocite i devin imunogene.

Superantigenele
Definiie: molecule care se leaga in exteriorul MHC II de o secventa a TCR. Nu sunt recunoscute specific
Antigen conventional
Superantigen

Rspuns T Monoclonal/Oligoclonal

Rspuns T policlonal

1:104 - 1:105

1:4 - 1:10

Antigen conventional

Superantigen

Superantigene
Exemple

Enterotoxina stafilococi Toxina de oc stafilococic Exotoxina pirogenic a streptococului

! Importanta: inductia bolilor autoimune

S. aureus

Proprietile antigenului: 1. Declanarea rspunsului imun:

Este un proces complex ce presupune 3 etape: A. Selecia de ctre Ag, dintr-un repertoriu de Ly, a acelora care sunt Ag specifice, adic cele care exprim pe membrana lor receptori capabili s se combine cu Ag i s-l recunoasc. Ag ptrunde n organism, ajunge n organele limfoide: ganglioni, splin, etc; unde ntlnete miliarde de tipuri distincte de Ly. Se iau n considerare 3 tipuri de Ly B cu aceleai dimensiuni, acelai raport citoplasm / nucleu, dar diferite din punct de vedere al receptorilor membranari de recunoatere a Ag 29

Aceste Ly sunt reprezentantele unor familii / populaii celulare denumite clone limfocitare Toate Ly aparinnd aceleai clone exprim pe suprafaa lor acelai tip unic de receptori de recunoatere antigenic, deci se poate face asocierea: o clon un Ag. Astfel prima etap n declanarea RI se numete Selecia clonal. Ly sunt n faza G0 a ciclului mitotic. B.Activarea metabolic a Ly antigen specifice: Se produc modificri morfologice i Ly se transf. n limfoblati, ele trec de fapt din faza G0 a ciclului mitotic n interfaz, aceast etap numindu-se Activarea clonal . 30

C. Expansiunea clonal

Ly ajung n faza M a ciclului i prin diviziuni repetate se produce nr. de Ly per clon activat
Ly se transform n plasmocite ce vor secreta Ac Ag specifici, acetia au un situs combinativ pt Ag celular al receptorilor de pe membr Ly B.
Declanarea RI definete termenul de Imunogenitate

2. Specificitatea Este proprietatea Ag de a reaciona specif. numai cu receptorii spec, fie ei solubili fie membranari, a cror producie a fost stimulat de Ag
31

Nu toate Ag se caracterizeaz prin ambele proprieti, i se mpart n : A. Imunogenele: care sunt Ag. complete Acestea se pot mpri n: a)Ag timo-independente categorie minoritar, declaneaz de regul RIU pt c au capacitatea de activare direct aLy B,nefiind necesar prezena Ly T b)Ag timo-dependente pot declana fie RIU fie RIC numai ca urmare a unei cooperri celulare la care este necesar prezena Ly Th . Ele pot fi proteine B. Haptenele - antigene incomplete Sunt substane cu gr.molec.mic sau f mic,cu struct. simpl, ele sunt capabile s interacioneze cu receptorii antigenici, dar ele singure nu pot declana RI dect dac sunt cuplate natural sau artif.cu macromolec imunogene ce se numesc purttor = 32 carrier

Ex: Dinitrofenol = DNP, BSA = serum albumina bovin

DNP nu induce Ac anti DNP DNP + BSA induce Ac anti DNP

Deci haptenele au specificitate, nu i imunogenitate

Imunogenitatea este capacitatea de a satisface o condiie necesar i anume concentrarea ntro arie restrns a membr. celulare a tuturor cuplurilor Ag-Ac, numita i cross-linkare interreceptorial. Astfel, imunogenele realizeaz cross-linkarea, deci declaneaz RI, pe cnd haptenele nu pot
declana RI datorit imposibilitii de cross-linkaj
33

n cazul haptenelor, avem stimuli cu intensitate mic, ce se exercit la mare distan unul de altul, dar nu se pot nsuma i genera un stimul activator, de aici paradoxul: recunoaterea nu nseamn i declanarea RI Teoretic s-ar putea declana RI dac toate cuplurile sar concentra ntr-o arie, iar stimulii s-ar putea nsuma. Haptenele singure nu se pot concentra ntr-o arie. Imunogenele Ele pot realiza cross-linkarea interreceptorial, concentrarea receptorilor ntr-o anumit arie. Crosslinkarea se realizeaz diferit n funcie de tipul de Ag: a)Antigenele timo-independente. Au o struct de baz: carrier, cuplat cu numeroi determinani antigenici, cu aceeai structur i repetitivi, denumii haptene.
34

Stimulii, fiind situai aproape se nsumeaz, componenta responsabil de cross-linkare

fiind carrierul, dei nu este recunoscut de Ly

b)Antigenele timo-dependente Au 2 componente: o parte carrier de natur peptidic cu gr. molec. mic i structur mai simpl dect precedenta , i o singur hapten Acestea determin RI numai ca urmare a unei cooperri celulare ntre LyTh i Ly B, astfel Ly B recunoate partea haptenic, Ly T recunoate partea carrier, rezultnd concentrarea, cross-linkarea dat de Ly Th .

35

Concluzii :
-nu toate antigenele sunt imunogene -cei 2 termeni de antigenitate i imunogenitate nu sunt sinonimi -toate Ag complete sunt constituite din cele 2 pri distincte: carrier i haptena, cu funcii diferite, ansamblul celor 2 este responsabil de imunogenitate , partea haptenic este responsabil de specificitate -in vivo partea haptenic realizeaz o dubl specificitate: de RI i de reacie imun

36

Haptena se numete determinant Ag, subcomponent al structurii antigenice care din pdv funcional se mpart n 1)determinani antigenici liniari, secveniali peptidici, cu 8-15 AA dispui n serie unii dup alii. Sunt recunoscute numai de Ly T, sunt structuri amfipatice, secvene peptidice interiorizate n structura Ag nativ ce pot fi eliberate numai n urma prelucrrii de APC(Antigen Presenting Cells). 2) determinani antigenici conformaionali - 8-15 AA ce pot proveni din regiuni diferite ale lanului peptidic / lanurilor peptidice , ei fiind adui n apropriere ca urmare a unor legturi disulfurice sau necovalente inter / intracatenare Sunt recunoscui numai de Ly B sau produii acestora : Ac. Sunt constituii numai din AA hidrofili, sunt dispui la suprafaa moleculei de Ag nativ, n poriunile de maxim flexiblilitate / mobilitate. 37

mprirea ar fi de fapt n Ag predominant secveniali i Ag predominant conformaionali. Cea care conteaz f mult este conformaia molecular. Importana conformaiei moleculare n determinanii antigenici secveniali

Este pt prezentarea Ag i recunoaterea Ag : Un fragment din mioglobin liniar, 132-146, cu struct. amfipatic, este recunoscut numai de Ly T, prin TCR (T cell receptor), doar dac sunt prezentai Ag de APC(de ex macrofagele). APC au numai legturi cu AA hidrofobi prin MHC , Ly T au legturi numai cu AA hidrofili prin TCR.

n timpul formrii legturilor, Ag capt o conformaie helicoidal n care AA hidrofobi trec ctre MHC, iar AA hidrofili trec ctre TCR.
38

Importana conformaiei moleculare determinanii antigenici conformaionali

Este pt recunoaterea Ag, nefiind necesar prezentarea Ag. Exemplu: Ag HEL (Hen Egg Lyzozime). HEL are n structura sa o ans intern ce este poriunea cea mai imunogen. Prin fragmentarea HEL Ac dau reacie cu ansa intern, dac se rup legturile ce in ansa intern, deci ansa este derulat, reacia este compromis Ac recunosc determinanii antigenici conformaionali dup principiul conformaional cheie n broasc 39

 Soarta

antigenelor n organism Ag timo-independente ptrund n esuturi, antrenate n circulaia limfatic, ajung n ariile burso-dependente unde declaneaz RIU din Ly B. Ag timo-dependente ptrund n esuturi, preluate de APC, ajung n ariile timo-dependente ale esuturilor limfoide unde fie coopereaz cu Ly B i rezult RIU, sau cu Ly Tc i rezult RIC.
40

Impactul imunologiei asupra sntii omului

Kochs Kohler & Milstein Postulatele Ac monoclonali Metchnikoff Fagocitoza Miller Mller Jenner Wright Bacteria Vaccinarea Antiserul Cel. T

Jansen Microscopul

1600

1700

1800

1900 1955

2000

30 ri cu peste un caz de variol pe an 15 200 ani WHO anun dup Jenner Eradicarea variolei

0 1965 1970 1975 1980

IMUNIZAREA
3000 H
Egipt cruste variolice

1700 DH
Introducerea variolizrii n Anglia

2000 H
China cruste variolice

1780 DH
Edward Jenner descoper vaccinul

1500 DH
Turcii introduc variolizarea

1885 DH
Pasteur descoper vaccinul antirabic atenuat

Edward Jenner

Descoperirea vaccinului antivariolic

Edward Jenner
Among patients awaiting small pox vaccination

Epoca modern a vaccinrii

1920
Difteria i Tetanosul 1934

1960s Pojarul i rubeola Sabin polio

1985 Haemophilus

Pertussis 1955
Salk polio

1990s
Hepatita i varicela

Incidena unor boli pre i post vaccinare

Viitoare Vaccinuri

Vaccinuri anti-idiotip

ADN
Peptid imuno-dominant ........ ........