Rspunsul Imun Umoral

CURSUL X

La baza RIU st o cooperare celular la care particip 4 categorii de celule: APC n cadrul aceluiai RIU vin mai multe tipuri de APC, nu doar unul singur. Ly Th primele care vin la contactul cu Ag Ly Ts Ly B

Cooperarea celular este bidirecional,cu 2 secvene: a. Secvena efectorie (de activare) cuprinde toate influxurile activatoare executate centrifug de la APC la Ly B, la final realizndu-se activarea complet a Ly B n plasmocite ce vor elibera Ac. n aceast secven particip 3 tipuri de celule: APC, Ly Th, Ly B Sunt ndeplinite 3 funcii mai importante: Selecia Ly Ag specifice sunt ndeprtate Ly ce nu pot capta Ag. Activarea i proliferarea Ly selectate anterior Producia unei cantiti adecvate de Ac n vederea

neutralizrii,ndeprtrii i distrugerii Ag declanator

b. Secv de autocontrol (inhibitorie):limiteaz intensitatea RIU la un minimum necesar unei aprri imune eficiente.
3

 Mecanismul

de realizare a retrocontrolului, cel

mai important este:activarea Ly Ts eliberatoare

de factori T supresori ce inhib n ordine: Ly B, Ly Th, APC. Mecanismul inhibitor este protector i prin el se evit 2 efecte defavorabile ce ar putea veni din orice RIU: - proliferarea excesiv a clonelor Ly T, Ly B stimulate de Ag - producia unei cantiti prea mari de Ac n mod N, ntre cele 2 secvene de activare i inhibitorie, se menine un echilibru ce asigur 4 homeostazia imun umoral.

I. Cooperarea celular n serie (modelul clasic)

Se realizeaz ntre APC, Ly Th i Ly B. Ag complet (cu o parte carrier i o parte haptenic) e prelucrat de APC i prezentat pe MHC II ctre LyTh (cu partea haptenic ctre Ly Th).Din acest moment ntre APC i Th ncepe o cooperare cognitiv: prin contact direct (RR); cooperarea e condiionat de captarea i recunoaterea Ag. II. Cooperarea noncognitiv se realizeaz prin IL 1 ce activeaz suplimentar mereu aceeai IL 1, (indiferent ce Ag a fost prezentat i cunoscut).La finele dublei cooperri se afl activarea Ly Th ce stimuleaz LyB prin partea sa haptenic cooperare cognitiv, la care vine i cooperarea noncognitiv (realizat prin IL 2 i IL 4). 5

Secvena de activare Modele de cooperare celular

Figura 2 II. Cooperarea celular n paralel (model clasic)

Figura 3

Ag este preluat de APC i expus n paralel pe molec MHC II (n special) spre ambele limfocite (Th i B) : Th este activat de Ag prin partea c, LyB activat de Ag prin partea h. Are loc o cooperare cognitiv completat de o cooperare noncognitiv realizat prin IL1 (produs de APC) astfel fiind simultan activate Ly Th i Ly B. Aceste cooperri cognitiv i noncognitiv sunt realizate prin IL 1,IL4, rezultnd producerea de Ac Cele 2 modele de cooperare sunt pt cooperarea in vitro . Ele sunt modele de cooperare ntr-o singur etap, fapt ce nu poate avea loc in vivo". In vivo aceste modele nu pot avea loc pt c cele 3 tipuri de celule sunt distribuite diferit n organism, cooperarea dintre ele nu poate avea loc per primo, ea are loc numai ca urmare a migrrii acestor cel. n final cooperarea dintre ele se realiz. prin etape succesive 7 .

III. Cooperarea prin etape succesive

1. Ag T dependent e preluat de ctre APC (la poarta de intrare a Ag n organism la nivel tisular). APC migreaz i transport Ag captat intratisular, n ariile T dependente ale organelor limfoide. Aceste APC sunt non B: monocitele i principalele celule dendritice (Langerhans i
interstiiale).

APC expun Ag ctre Ly Th pe moleculele MHC II, cu partea carrier a Ag i ncepe o cooperare cognitiv ntre APC i Ly Th , la care se adaug o cooperare noncognitiv realizat prin IL 1 i anume activarea Ly Th ce se transform n limfoblati Th. Pe msura transformrii celulelor Th ele migreaz de la contactul cu Ag n ganglioni sau n splin.
8

2. Ag declanator aflat n stare liber difuzeaza n tot organismul i ajunge n ariile bursodependente ale organelor limfoide, unde sunt captate i concentrate pe loc ca urmare a funciei de filtru a cel. foliculare dendritice (CDF). Aceste Ag pot fi activate ulterior de LyB care prin activare devin limfoblati B ce prsesc contactul cu Ag i migreaz, ajungnd n contact cu limfoblatii Th. Cele 2 categorii de limfoblati
coopereaz:

a. Cognitiv limfoblatii prezint Ag pt c exprim cantitate crescut de MHC II -limfoblastul Th recunoate Ag prin partea de carrier - activarea complet a limfoblatior Th ce produc cantiti mari de IL 1 i IL 4 b. Noncognitiv prin IL1 i IL 4 se activeaz limfoblatii B ce devin n final plasmocite ce lanseaz n circulaie Ac Ag-specifici (recunosc Ag dup9partea
sa haptenic).

toate Ly ce particip, primele care vin la contactul cu Ag sunt Ly Th (celule intens recirculante) . La cooperare particip toate cele 3 tipuri de APC profesionale, primele fiind monocitele i celulele dendritice (pt c sunt deja prezente la poarta de intrare a Ag n organism ) mai trziu particip i LB activate la stadiul de limfoblati B (APC neoformate). Ly B ndeplinesc funcii foarte complexe: 1. Recunosc i capteaz Ag declanator 2. Prezint Ag ctre Ly Th 3. Sunt responsabile de producerea de Ac specifici.
Dintre
10

Etape de cooperare
A.

Cooperarea APC- LyTh limfoblati B limfoblati Th

Cooperarea

A.

Cooperarea dintre APC i Ly Th

loc n ariile Timo-dependente ale

Are

organelor limfoide: zone pals externe din splin i paracorticala ganglionilor.

Etape:
1.

Cooperarea cognitiv dintre cele 2 celule:

11

a. Legturile Ag-nespecifice se realizeaz prin cuplurile de adeziune intercelular: Linia 1: CD2 (Th) i LFA 3 (APC) (cei 2 receptori au o f mare afinitate unul pt cellalt). Legturile sunt stabile fiind f numeroase (sute
de mii de cupluri n cteva secunde)

Linia 2: LFA 1 (Th) i ICAM (APC) aceste legturi apar mai trziu i sunt instabile un anumit timp pt c cei 2 receptori au afinitate mic. Acestea sunt contactele Ag-nespecifice ce permit stabilirea unor contacte Ag-specifice. b. Legturile Ag-specifice ntre MHC II ce prezint epitopi i TCR, cnd vin fa n fa, se stabilesc legturi Ag-specifice se activeaz Ly Th pe calea TCR avnd ca efect intensificarea fosforilrilor.
12

Substratul fosforilrilor este lanul al lui LFA1 , rezultnd modificri al lanului ce cresc mult afinitatea lui LFA1 pt ICAM, legturile LFA1 ICAM devin f stabile i se intensific i recunoaterea Ag. 2. Cooperarea noncognitiv. Simpla recunoatere a complex MHC II-epitop prin TCR nu este suficient pt activarea LyTh la un nivel corespunztor pragului declanrii unui RIU eficient. Acest prag e atins i depit printr-un co-stimulator (IL 1 ) asupra lui LyTh Interleukina 1

IL 1 este o glicoprotein cu masa de 17 kd, ca surse de IL1 sunt monocitele (produc cea > cantitate de IL1 ), celulele dendritice, Ly B , ultimele 2 fiind APC profesionale.
13

Clasificarea IL 1:

-IL 1-nu are funcie imunologic,este o form inflamatorie

-IL 1 - singura implicat n RIU, este produs de monocite, dar nu e niciodat exocitat i e expus pe membrana APC (spre deosebire de IL 1 ) de aceea se mai numete i IL 1 membranar (e expus n spaiul dintre monocit i LyTh, strict activarea LyTh
e strict direcionat i se evit stimularea ntmpltoare a altor LyTh)

Este receptat de un receptor de pe LyTh, IL1 R ce declaneaz stimuli activatori i rezult 2 efecte majore: la nivelul nucleului activeaz metabolic LyTh datorit activrii genelor pt IL 2 i genelor pt receptorul IL 2 (CD 25) receptorul fiind expus pe membrana LyTh, activare autocrin prin propria IL 2. LyTh ncep s se maturizeze funcional i s se diferenieze n subclase de Ly Th. 14

Subclasele de Ly Th

Nu sunt celule preformate, ci apar n timp n cadrul cooperrii celulare (se formeaz in situ). Morfologic i fenotipic sunt identice (toate exprim pe suprafaa lor receptorii CD4 i CD8). n funcie de setul de IL produse se mpart n mai multe categorii (ce
apar doar n cadrul cooperrii celulare).

1. Ly Th Primitive (Ly Thp) sau productoare de IL 2 Sunt LyTh imature (se afl la primul contact cu Ag) i dein n genom toate genele pt IL ; cu excepia genelor pt IL 2 toate celelalte sunt inhibate. Ca urmare a unei scurte activri antigenice ele se activeaz la Ly Th0

2. Ly Th0 zero ce devin productoare de toate clasele de IL n cantiti mici, insuficiente i deci IL produse nu folosesc la nimic de unde numele de zero
15

3. Etap a cooperrii celulare duce la LyTh1, implicate n amplificarea RIC pt c produc IL 2 n cantitate mare, IL 3, mult IFN , mult TNF 4. Dac sunt prezente LyB atunci LyTh 0 se transform n Ly Th 2, care sunt celule ce amplific RIU prin producerea de IL 4, IL 5, IL 6 i IL 10.
LyTh0 se transform n LyTh 1 sau LyTh 2 i datorit mecanismului de excludere reciproc,prin IL produse:

LyTh 1 inhib diferenierea n LyTh 2 prin IFN cu efect distructiv pt LyTh 2; LyTh 2 inhib diferenierea n 1 prin IL 10 care declaneaz apoptoza LyTh 1.

Rspunsurile in vivo sunt clare ,ori umoral ori celular

16

IL 2
Sursa este n celulele LyTh p, LyTh 0 i LyTh 1. Aceste celule trebuie s fie complet activate cognitiv (stimulare Ag) i necognitiv (prin IL 1 i IL 6) Aciunile sunt autocrine ntre IL2 i TRP i paracrine. Activeaz alte celule dect cele productoare Ly Tc, Ly B, NK, trombocite, monocite. Rezultatul este stimularea de ctre IL 2 a receptorilor pt IL2 adic, CD25. CD25 se prezint sub forma de heterotrimer: 3 lanuri , , transmembranare, cu capetele NH2 terminale ce sunt externe, se asociaz ntre ele i formeaz situsul receptor pentru IL 2, declannd stimuli activatori transmii n profunzime de lanul Hi (transmembranar cu segmentul

intracelular f profund).
17

 Lanul

(Hi) se afl n contact cu un tip de PTK (fosfo-tiro-kinaz) particular activat prin activarea PLC declanarea cascadei fosfatidil-inozitolilor. Acest mecanism activator seamn cu cel de pe calea TCR (TCR-like) . poate activa diverse tipuri de RI, depinznd de sursa ei: IL 2 e produs de Ly Th 1, rezult un RIC

IL2

dac

dac

este produs de LyTh p, LyTh 0, atunci IL 2 declaneaz RIU primare, ce apar la primul contact cu Ag 18

IL 4
Surse

: Ly Th 0, Ly Th 2
(apar la al 2 contact cu Ag, i

Funcii:

activeaz RIU secundar la urmtoarele), prin:

-Stimularea produciei i a maturaiei intramedulare a LyB

-IL4

stimuleaz funcia de APC a LyB pt c IL4 crete f mult expresia de MHC II pe membrana limfoblatilor B 4 stimuleaz producia de Ig G, inhibnd producia de Ig M (pt c IL4 stimuleaz n genomul LyB mecanismul de
switch, sau comutare izotipic)
19

-IL

IL 5

Surse : Ly Th 0, Ly Th 2 Stimuleaz RIU desfurat n mucoase pt c are 2 proprieti fundamentale: - stimuleaz producia i maturarea de Ly B - favorizeaz net producia Ac de tip Ig A, inhibnd n paralel producia de IG M (prin acelai mecanism de switch) IL 6 Funcioneaz n cadrul unei cascade de IL. Surse: Ly Th 0, Ly Th 2 Funcii: activeaz RIU i RIC pt c determin produciei de ctre LyTh a receptorilor pt IL2 i a IL2,
are efecte protectoare prin activarea sintezei proteinelor

de faz acut elaborate de ficat (limiteaz apariia unor leziuni tisulare ca 20

urmare a declanrii proceselor inflamat. sau imune).

B. Cooperarea dintre limfoblatii Th i cei B

Are loc la nivelul zonei pals externe (splin) i paracorticala ganglionilor cel mai frecvent. Contactele stabilite ntre cele 2 celule sunt de 2 feluri: 1. Contacte Ag-specifice - Limfoblastul B e pe post de APC; produce multe molecule MHC II, prezint Ag captat limfoblastului Th prin partea carrier (TCR). - Limfoblastul Th recunoate Ag prin TCR - Limfoblastul B exprim CD40 (heterodimer), receptor ce angajeaz legturi cu un contraligand CD40L de pe limfoblastul Th, un inceput de cooperare bidirecional - Semnale transmise pe calea TCR: ajung n genom i sunt activate genele pt IL, sunt lansate mai multe IL n spaiul dintre cei 2 limfoblati (cooperare noncognitiv)
21

Semnalele activatoare pe calea CD40 se transmit n genom i se activeaz genele pt receptorii pt IL, receptori expui pe membrana limfoblatilor B (cooperare cognitiv). Limfoblatii B se transform datorit IL n plasmocite i produc Ac n funcie de tipul de IL ce a stimulat limfoblastul: Produc Ig M dac au fost stimulate de IL 2
(LyTh2)

1.

(limfoblastul Th a fost limfoblast Th p sau 0)

2.Produc IgG dac stimulul s-a produs prin IL4

3.

Produc Ig A prin stimulare cu IL 5 (LyTh2)

22

Retrocontrolul RIU

Este procesul complex ce implic activ Ly Ts. Ly Ts este o clas f heterogen, are diverse tipuri:

I. Ly Ts Ag specifice clas destul de omogen:

1. Prezint pe suprafaa lor acelai fenotip; sunt celule CD8+, dar Ly Ts sunt celule CD28- spre deosebire de Ly Tc. 2. Sunt activate numai de Ag expuse pe membrana APC n complex cu MHC I. 3. Odat activate, elaboreaz anumii factori supresori ce inhib cooperrile celulare. 4. Sunt celule ce inhib RIU i RIC la care ele vor s participe, sunt supresoare nespecifice.
23

II. LyTs idiotip specifice clas f heterogen : sunt aproximativ 60 de tipuri: 1.65% sunt cel. CD8+, restul sunt cel. CD4+, asemntoare cu LyTh. 2. Se numesc idiotip specifice pt c sunt activate n urma recunoaterii prin receptorii lor de suprafa a prii Ag a unor receptori pt Ag (idiotop, idiotip) 3. Inhib RIU prin activarea unor factori TSF ce provin prin solubilizarea receptorilor de suprafa.Receptorul de suprafa al Ly Ts idiotip specifice e un complex format din 3 structuri diferite: 24

- Receptorul propriu zis pt Ag (Ig-like) situat n afara celulei (nu are contact cu membrana). E ataat de membrana celulei printr-o - Molecul MHC II-E, fixat la suprafaa Ly Ts prin - Piesa de jonciune (segment ce se inser n membrana Ly Ts). Prin activare complexul receptorial se desolidarizeaz n componente solubile: a. e eliberat receptorul propriu zis (Ig-like) b. e pus n libertate receptorul pt Ag (solubil = liber n faz fluid), receptorul capt proprieti inhibitorii (receptorul este asemntor cu TSF)
25

Tipurile de LyTs idiotip specifice

- Ly Ts idiotip specifice inductorii (CD4+) inhib Ly B n cadrul RIU-ului

- LyTs idiotip specifice transductorii (CD8+) - n cadrul RIU inhib cooperarea dintre limfoblatii Th i limfoblatii B - Ly Ts idiotip specifice efectorii (CD8+)- inhibiia Ly B participante la cooperarea celular Toate tipurile prezint urmtoarele 3 caracteristici: 1. Sunt activate de structuri Ag total diferite:

a. Ly Ts idiotip specifice inductorii(LyTs I) recunosc partea haptenic a Ag prezente pe membrana APC, concurnd cu Ly B pt partea haptenic
26

b. Ly Ts idiotip specifice transductorii(Ly Ts T) i Ly Ts idiotip specifice efectorii (Ly Ts Ef) recunosc idiotopii prezentai n structura unor receptori pt Ag. 2. LyTs nu activeaz independent unele de altele,ci se activeaz n etape succesive unele pe altele formnd cascada T supresoare: Ly Ts I Ly Ts T Ly Ts Ef 3. Cascada T supresoare este declanat trziu n RIU , doar dup ce apar primele cantiti de Ac. Funcia de ansamblu a cascadei este de a inhiba diferite etape implicate n secvena efectorie a RIU. Activarea secvenei de retrocontrol e rezultatul prezenei pe aceste APC a Ag, prezentate spre LyTs prin moleculele MHC II-E; Ag este expus spre LyTs prin partea sa haptenic ce este recunoscut de LyTs idiotip specifice inductorii(CD4+). 27

28

 Prin

activarea acestora se produce solubilizarea complexului receptorial de suprafa; e pus n libertate receptorul pt Ag: acest receptor devine receptor solubilizat se numete TSF 1 (pt T supresor) ce are 2 funcii: 1. Funcia inhibitorie: - TSF 1 difuzeaz pn cnd vine n contact cu Ag inductor aflat n stare solubil; - TSF 1 angajeaz legturi cu Ag, recunoscnd partea haptenic. Se formeaz complexe TSF 1- Ag i prin urmare scade cantitatea de Ag liber disponibile pt activarea LyB
29

2. Funcia activatorie:

- TSF 1 prezint structuri Ag situate n interiorul situsului combinativ pt Ag, TSF 1 activeaz urmtoarele Ly Ts din cascad: transductoriile (ce prezint un receptor complementar pt TSF 1; sunt activi
metabolic elibereaz receptorul de suprafa ce devine receptor solubil = TSF 2)

- TSF 2 este identic cu Ag la partea sa haptenic i este diferit structural n restul moleculei: prezint o alt parte carrier dect cea a Ag inductor TSF 2 = copia intern a Ag ; are 2 funcii: inhibitorie i activatorie
30

Funciile TSF 2 TSF 2 difuzeaz n organism pn cnd ajunge n contact cu LyB Ag specifice ce recunosc TSF 2 ca Ag inductor dup partea sa haptenic TSF 2 este captat de LyB n calitate de Ag , TSF 2 este ulterior prezentat de limfoblatii B (pe MHC II) ctre limfoblatii Th : partea carrier ctre limfoblatii Th , o alt parte carrier dect cea pe care Ly o poate recunoate limfoblastul Th nu mai poate realiza recunoaterea, deci cooperarea limfoblast B - limfoblastul Th nu mai este posibil, deci producia de Ac scade f mult. TSF 2 este idiotip specific, se comport ca un Ag, deci TSF 2 activeaz pe celulele Ly Ts efectorii ce au recept. de recunoatere a lui TSF 2. Acestea, activate, pun n libertate receptorul de suprafa numit TSF 3. 31

TSF 3

Este identic la partea receptorial cu TSF 1, dar difer de TSF 1 prin restul moleculei.
TSF 3 recunoate partea haptenic a Ag se formeaz

complexe cu Ag, se face blocarea Ag i diminuarea cantitii de Ag disponibil pt activarea LyB. Puinele LyB nu mai coopereaz cu limfoblatii Th datorit TSF 2 intensitatea RIU este mult sczut

Cele 2 secvene (de activare i de retrocontrol) sunt decalate n timp, prima este activat cea efectorie. Aceste 2 secvene sunt f fin echilibrate funcional ntre ele pt c ambele secvene ale RIU sunt declanate de una i aceeai APC non B prezentnd cantiti echivalente de Ag n ambele cazuri. 32

Iniial are loc prezentarea Ag pe moleculele MHC II A i activarea secvenei efectorii, apoi se prezint Ag pe moleculele MHC II E ce activeaz secvena inhibitorie. Ele sunt echilibrate pt c la stimularea realizat de APC particip la cooperarea celular un nr echivalent de LyTh i LyTs inductoare. ntre cantitile de Ag utilizat n secvena efectorie i cea de TSF 2
din secvena de retrocontrol este un raport de echivalen

n cadrul RIU Ag este utilizat n 2 forme:

1. Ag original este folosit pentru declanarea RIU

2. Copia Ag este folosit n special pentru inhibiia RIU
33