METODE MICROSCOPICE DE DIAGNOSTIC

Diagnosticul histopatologic; Citodiagnosticul.

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC
Definiie : Este diagnosticul stabilit pe baza examinrii microscopice a seciunilor

histologice.
Se efectueaz pe produse recoltate prin:
1. BIOPSIE (recoltarea unor fragmente de esuturi / organe n timpul vieii);

a. Microbiopsia: Puncia biopsie (pentru organele profunde: ficat, splin, rinichi, mduv osoas); Chiuretajul (pentru mucoase: endometru, col uterin, cavitatea bucal sau leziuni superficiale: piele); Endobiopsia (mucoasa gastric, rectal, laringian, bronic). b. Biopsia chirurgical: Incizional (n scop diagnostic); Excizional (n scop diagnostic i terapeutic).
2. EXEREZ

CHIRURGICAL piese de exerez chirurgical.

3.PRELEVARE DE FRAGMENTE DE ESUTURI / ORGANE N TIMPULNECROPSIEI

prelevate necropsice.

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC

Endoscop

Endobiopsie colonic

Puncia biopsie hepatic

Produs de chiuretaj uterin

Hiperplazie endometrial

Viloziti coriale (placentare)

BILET DE TRIMITERE CTRE LABORATORUL DE ANATOMIE PATOLOGIC

Serviciul medical n care s-a efectuat recoltarea............ Nr. de nregistrare / Data...........

Ctre Laboratorul de Anatomie Patologic,

Numele i prenumele bolnavului............................................................... Vrsta................Profesia.................Domiciliul............................................ Diagnostic clinic.......................................................................................... Antecedente fiziologice i patologice.........Tratamente efectuate............. Produsul de biopsie.............................Fixator............................................

Semntura i parafa medicului (care a efectuat recoltarea)

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC
Timpii de prelucrare a prelevatului tisular:

Recoltarea (indicaii): leziuni ntinse biopsii multiple, leziuni ulcerate recoltare din margine Fixarea: formol 10% tamponat, lichid Carnoy, Bouin

Includerea la parafin
Secionarea blocurilor tisulare la microtom (3 5) Colorarea seciunilor histologice.

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC

Tehnici de colorare:
Tehnici uzuale:
Hematoxilin-Eozin, Tricromice (van Gieson, Simionescu, Masson);

Tehnici histochimice:

PAS (MPZ neutre, glicogen, membrane bazale, fungi); Fontana/Grimelius (granule neurosecretorii); Gordon-Sweets, Gomori (fibre de reticulin, membrane bazale); Perls (hemosiderina Fe3+); Fontana (melanina); von Kossa (calciu); Negru Sudan, Sudan 3, Scharlach (lipide neutre); Rou Congo (amiloid); Albastru Alcian (mucine acide).

Unitatea (Laboratorul de anatomie-patologic)................................... Nr. de nregistrare................................................................................. Data examinrii..................................................................................... Buletinul de diagnostic anatomo-patologic

Numele i prenumele bolnavului.............................Vrsta................... CNP ..............................Clinica (n care este internat pacientul).......... Diagnostic clinic.................................................................................... Descriere detaliat a modificrilor constatate la ex. microscopic........ ......................................................................................................... Concluzii finale (diagnostic histopatologic)...........................................
Semntura i parafa medicului anatomo- patolog

CITODIAGNOSTICUL
Definiie:

Este diagnosticul stabilit pe baza examinrii microscopice a modificrilor morfologice ale celulelor (izolate) coninute de diferite produse biologice etalate pe lame (frotiu).

Avantaje:

Ofer un diagnostic rapid; Este ieftin; Puin traumatizant; Uor de repetat; Util n aciunile de screening.

CITODIAGNOSTICUL

Tehnici de recoltare a produselor patologice

1. 2.

Exfoliere (sput, secreie prostatic, mamar, vaginal, cervical); Puncie-aspiraie din revrsate seroase (lichid pleural, peritoneal, articular), coninut structuri chistice; Grataj/periaj (col uterin, tract respirator); Lavaj organe cavitare (ci respiratorii, vezic urinar); Amprentare (leziuni cutanate, ganglioni limfatici); Puncie aspiraie cu ac fin (tiroid, prostat, gland mamar, pancreas), tumori solide profunde, mduv osoas.

3. 4. 5. 6.

BILET DE TRIMITERE CTRE LABORATORUL DE ANATOMIE-PATOLOGIC

Serviciul medical n care s-a efectuat recoltarea............ Nr. de nregistrare / Data...........

Ctre Laboratorul de Anatomie Patologic/Citodiagnostic, Numele i prenumele bolnavului................................................................... Vrsta............CNP..................Profesia.................Domiciliul........................... Diagnostic clinic.............................................................................................. Antecedente fiziologice i patologice.........Tratamente efectuate................ Felul produsului din care s-a efectuat frotiul..................Nr. de frotiuri......... Semntura i parafa medicului (care a efectuat recoltarea)

CITODIAGNOSTICUL
Timpii de execuie a frotiurilor
1. Etalarea
Direct: secreii naturale, puroi, produse obinute prin puncie-aspiraie din organe solide, amprentare; Dup centrifugare

5-10 minute, apoi etalarea sedimentului: lichide din

revrsatele seroase, structuri chistice, lavaje i urin.

2. Fixarea
Agitare n aer cteva secunde i uscare (pentru coloraia May-Grunwald-Giemsa); Alcool 96% (pentru coloraia Papanicolau);

3. Colorarea
MGG - foarte simpl Papanicolau - pentru citologia cervico-vaginal, bronic Speciale pentru a evidenia lipidele, glicogenul, mucinele Imunocitochimie

Frotiu de snge

MGG

Frotiu lavaj bronic

Frotiu inflamator

Frotiu tumoral

Frotiu cervical

Amprent tumoral ganglionar

Laboratorul care a efectuat citodiagnosticul.............. Nr. de nregistrare....................................................... Data examinrii...........................................................

Buletin de citodiagnostic
Numele i prenumele pacientului ............................................. Vrsta............ CNP......................Clinica ...................... Medicul care a trimis ......................... Diagnostic clinic................................................................................................ Descrierea modificrilor constatate la examenul microscopic ........................ Concluzii (diagnostic sintetic) .......................................................................... Recomandri ..................................................................................................... Semntura i parafa medicului citolog

Tehnici speciale de diagnostic

Imunohistochimia
Imunofluorescena pentru detectarea (prin marcare cu colorani fluoresceni)

autoanticorpilor, antigenelor, complexelor antigen-anticorp sau fraciunilor complementului.

Imunoperoxidaza (prin metoda peroxidaz-antiperoxidaz sau/i complex Avidin-Biotin)

utilizeaz anticorpi monoclonali/policlonali pentru detectarea:

Originii celulelor neoplazice (diagnosticul diferenial ntre carcinom-sarcom-

limfom):
o o o o o Citokeratin - carcinom; Antigen comun leucocitar - limfom; Mioglobin - rabdiomiosarcom; Vimentin - tumori conjunctive; Antigenul factor VIII-tumori vasculare.

Antigenelor oncofetale n tumori (-feto-proteina, antigenul carcinoembrionar); Hormonilor /receptorilor hormonali; Oncogenelor, genelor supresoare tumorale (p53); Tiparea imunofenotipic a limfoamelor maligne.

Tehnici speciale de diagnostic

Histoenzimologia detectarea enzimelor;

Microscopia electronic pentru diferenierea ntre: Carcinom-melanom-sarcom; Adenocarcinom-mezoteliom; Timom-limfom-seminom; Tumori cu celule mici, tumori cu celule fusiforme; Tumori endocrine i non-endocrine; Nefropatii glomerulare cu mecanism imun.

Tehnici de biologie molecular: PCR (Polymerase Chain Reaction); Citometria n flux pentru analiza ADN (ploidia); Hibridizarea in situ pentru identificarea fragmentelor de ADN; Analiza rearanjrii genelor.