SINTEZA PROTEINELOR

Abilitatea celulelor de a menine un nalt nivel de ordine ntr-un univers haotic depinde de
informaia genetic, informaie care este exprimat, meninut, replicat i ocazional
ameliorat printr-o serie de procese specifice cum ar fi: inteza ARN !i a proteinelor,
repararea A"N, replicarea A"N i recom#inarea genic$
n cadrul acestor procese, informaia dintr-o secven linear de nucleotide este transpus fie
ntr-un alt lan de nucleotide (ADN sau AN! fie ntr-un lan de aminoaci"i (peptid!#
$roteinele constituie mai mult de %&' din masa uscat a unei celule iar sinte"a lor este
esenial pentru meninerea statusului celular ca i pentru cretere i de"voltare# (inte"a
proteinelor repre"int cel mai comple) proces biosintetic descris p*n la momentul de fa+
aceasta deoarece, la eucariote, procesul de sinte" a proteinelor implic activitatea a ,&
proteine ribo"omale diferite, a peste -& de en"ime necesare activrii aminoaci"ilor
precursori, a "eci de proteine au)iliare alturi de factori de iniiere, elon.are i
terminali"are, a apro)imativ /&& en"ime adiionale pentru procesare final a diferitelor
proteine, a peste 0& de tipuri de ANt# 1irca 2&& de macromolecule sunt implicate n
cooperarea necesar sinte"ei proteinelor#
NE%ESAR "E &'ATERIALE(
(inte"a proteinelor necesit, ca i construcia unei cldiri,
- 3crmi"i4 care n acest ca" sunt repre"entate de aminoaci"i
- 3transportorii4 5 ANt specifici
- 3constructori4 5 ribo"omii
- 3un plan4, aici repre"entat de informaia cuprins n ANm, copiat pe ba"a codului
.enetic cuprins n ADN
ARNt, tranportorii aminoacizilor care )or contitui )iitorul lan pepti*ic, acioneaz
ca !i a*aptori ce )or transla ec)ena nucleoti*ic +n ec)en proteic$
6olecula de ANt este o molecul mic, av*nd circa ,&-7& nucleotide# Are o structur
specific, o e)tremitate posed*nd sistemul de conectare la secvena codonului de pe ANm
(deci un anticodon! i alta care cuprinde sistemul de conectare la un aminoacid specific#
8 a doua funcie a ANt este aceea de a activa un aminoacid (AA! specific, cupl*ndu-l la
captul carbo)i5terminal printr-o le.tur de nalt ener.ie+ astfel, captul carbo)i-terminal
3ncrcat4 din punct de vedere ener.etic va putea s se cuple"e cu re.iunea amino-terminal
a urmtorului aminoacid adus de un alt ANt# Activarea este necesar, deoarece un AA
neactivat nu va putea fi adu.at unui lan polipeptidic n cretere#
Activarea AA necesit ener.ia furni"at de hidroli"a A9$#
/
Structura ARNt ,forma *ef!urat- Structura ARNt ,tructura tri*imenional-

Ri#ozomii
(tructur# ibo"omii nu pot fi observai n microscopia fotonic#
:ltrastructur# n microscopia electronic au fost descrii ca i corpusculi elipsoidali cu
diametrul mare de -&--% nm iar cel mic de /%-/, nm#
Din punct de vedere ultrastructural cuprind - subuniti:
(ubunitatea mic la eucariote au un coeficient de sedimentare 0&( (2&( la
procariote!
(ubunitatea mare la eucariote au un coeficient de sedimentare ;&( (%&( la
procariote!
Subunitatea mic pre"int o proeminen numit cap, o platform i o ba" sau corp
(platforma i ba"a repre"int -<2 din unitate!# ntre cap i ba" se .sete o stran.ulaie#
Subunitatea mare pre"int 2 proeminene din care una central numit protu#eran
central iar celelalte 5 tulpin i creast# ntre protuberana central i creast e)ist o
depresiune i un canal prin care se scur.e lanul polipeptidic n reticulul endoplasmatic
ru.os#
=a nceputul i finalul sinte"ei unui peptid, subunitile sunt separate#
-
ibo"omii, structur tridimensional pe subuniti (ubunitile ribo"omale i componentele lor moleculare
(cu"e, n-am mai avut timp s traduc
Structura molecular a ri#ozomilor
(tructura chimic a ribo"omilor cuprinde molecule de AN ribo"omal (ANr!, proteine
ba"ice, acide i ioni (6., >, 1a!#
(ubunitatea mare este format din ANr %(, ANr -?( (responsabil de formarea le.turii
peptidice+ la procariote are -2(! i 07 de proteine#
(ubunitatea mic este format din ANr /?( i 22 proteine#
(tructura tridimensional a ribo"omilor a fost descris complet pentru @# coli n au.ust
-&&&# Astfel s-a constatat c proteinele din compo"iie sunt structuri de asi.urare a unitii i
mobilitii ribo"omale, fiind situate mai mult la suprafaa ribo"omului de unde trimit
e)tensii sinuoase spre interior, unde sunt locaiile de cuplare a ANt## (inte"a propriu"is a
peptidului i mai ales formarea le.turii peptidice repre"int opera aproape e)clusiv a
ANr -2( (-?( la eucariote!# Astfel ribo"omul poate fi privit ca o uria riboen"im# (asta e
de actualitate A!
2
ARNm, planul contruciei proteinelor#
AN este sinteti"at pe ba"a ADN sub influena unor en"ime denumite AN-polimera"e+
procesul poart numele de trancripie# 9oate cele 2 tipuri de AN (transfer, mesa.er sau
ribo"omal! repre"int copii ale unor secvene de ADN#
ANm este deci o molecul monocatenar, cu lun.imea cuprins ntre ,& i /&#&&& de
nucleotide# Dei, n principiu, orice parte a moleculei de ADN poate fi transcris, numai
anumite "one sunt utili"ate n acest scop, n funcie de anumite secvene nucleotidice,
denumite promotori#
(unt definite trei tipuri de AN i anume ANm, ANt i ANr#
%o*ul genetic ete *egenerat#
n timpul sinte"ei proteice, mainria translaional se mic dinspre captul %B spre captul
2B al moleculei de ANm# (ecvena ANm este citit cu c*te 2 nucleotide odat (2
nucleotide succesive C codon!# Diecare aminoacid este specificat n secvena ANm de ctre
un triplet de nucleotide, denumit co*on, care corespunde unei secvene similare de
nucleotide la nivelul ANt, antico*on#
a# Alinierea ANm i ANt este antiparalel# ANt
este repre"entat n confi.uraia caracteristic de
frun" de trifoi#
b# 9rei tipuri de relaii posibile codon anticodon
atunci c*nd anticodonul ANt conine ino"inat#
Deoarece numai un anumit ANt poate fi complementar unui anumit codon de pe ANm,
acesta din urm va determina aminoacidul specific ce va fi adu.at#
Av*nd n vedere c AN este compus din 0 tipuri de nucleotide, e)ist ;0 de posibiliti de
a aranEa c*te 2 nucleotide ntr-un codon (0)0)0!# 9rei secvene din aceste ;0 nu codific
pentru aminoaci"i, repre"ent*nd codonii stop# m*n deci, ;/ de codoni care vor codifica
pentru -& de aminoaci"i# De aceea maEoritatea AA sunt repre"entai de mai mult de / codon,
motiv pentru care codul .enetic este denumit degenerat# Doi AA, 6et i 9rp sunt
repre"entai de un sin.ur codon i n acelai timp sunt cei mai puin abundeni AA dintr-o
celul#
0
De.enerarea codului .enetic const fie n faptul c e)ist mai muli ANt specifici pentru
acelai aminoacid fie n acela c un ANt poate cupla mai muli codoni diferii# De fapt,
ambele situaii sunt valabile# $entru unii aminoaci"i e)ist mai mult de un ANt, iar unele
molecule de ANt sunt astfel construite nc*t necesit o omolo.ie numai la nivelul primelor
- nucleotide din codon, toler*nd o nepotrivire la cel de-al treilea 5 ipote"a wobble
ovial#
De e)emplu, alanina (Ala! este codat de tripletele F1:, F11, F1A sau F1F# $rimele -
perechi de ba"e (F1 i A9! la nivelul cuplului codon-anticodon formea" le.turi puternice
de hidro.en (numite le.turi Gatson-1ricH!+ n schimb, a treia ba" a"otat din codon (A, :
sau 1! formea" puni de hidro.en slabe cu re"iduul inosinat, locali"at n prima po"iie a
anticodonului (ve"i fi.ura de mai sus!#
REZ.'AT / 0 1AZE "E RE2IN.T
8 secven de AA dintr-o protein este construit pe ba"a translrii informaiei
codificate n ANm, repre"ent*nd copia unei catene din ADN# Acest proces este
reali"at de ctre ribo"omi#
Aminoaci"ii sunt specificai de codonii ANm care repre"int triplete de nucleotide#
$rocesul de translaie necesit molecule adaptor care sunt ANt# Aceste molecule
conin triplete de nucleotide 5 anticodoni 5 care corespund codonilor din ANm#
ANt vor insera aminoaci"i n po"iiile lor specifice din lanul polipeptidic#
1odonul A:F semnali"ea" nceputul translaiei# 9ripletele :AA, :AF i :FA
repre"int codoni stop#
1odul .enetic standard este de.enerat: pre"int multiple cuvinte cod pentru aproape
fiecare aminoacid#
1uvintele de cod sunt universale la toate speciile cunoscute, cu mici e)cepii la
mitocondrii i unele unicelulare#
A treia po"iie din fiecare codon este mai puin specific dec*t primele dou#
SINTEZA PROTEINELOR / ETAPE
@tapele sinte"ei proteice sunt divi"ate n 2 etape principale i - accesorii, una care precede
sinte"a propriu-"is 5 activarea presintetic a precursorilor i una postsintetic 5 procesarea
lanului de aminoaci"i#
Pe curt
@9A$A I 5 A19IJA@A $@(IN9@9I1K A $@1:(8I=8
$entru sinte"a unui polipeptid cu o secven definit sunt necesare - condiii biochimice:
- .rupul carbo)il al fiecrui aminoacid trebuie s fie activat pentru a facilita formarea
le.turii peptidice
- trebuie stabilit o le.tur ntre fiecare nou AA i informaia din ANm-ul care l
codea"#
Ambele necesiti sunt ndeplinite de ataarea unui AA la un ANt specific n prima etap a
sinte"ei proteice# Ataarea AA corect este esenial# Aceast reacie are loc n citoplasm i
nu n ribo"om# Diecare din cei -& de aminoaci"i este cuplat covalent la ANt specific prin
ener.ia furni"at de hidroli"a A9$, n pre"ena unor en"ime de activare dependente de 6.,
%
numite A( (amioacil ANt-sinteta"e!# 8dat ce AA este ataat la ANt, se formea" un
aminoacil-ANt (AA-ANt! iar AA este numit Lactivat4#
@9A$A II - INIMI@@A
ANm care transport codul pentru polipetidul de sinteti"at se cuplea" la subunitatea
ribo"omal mic i la AA-ANt# Apoi are loc cuplarea subunitii mari pentru a forma
comple)ul de iniiere# AA-ANt de iniiere i codonul A:F de pe ANm semnali"ea"
debutul sinte"ei polipeptidului# Acest proces necesit F9$ i este indus de o serie de factori
numii factori de iniiere#
@9A$A III-a 5 @=8NFA@A
$olipeptidul nascent este alun.it prin le.area covalent succesiv a unitilor AA, fiecare
fiind transportat la ribo"om n po"iia corect de ctre ANt specific# @lon.area necesit
proteine citoplasmatice numite factori de elon.are# Ataarea fiecrui AA-ANt i micarea
ribo"omului de-a lun.ul ANm este determinat de hidroli"a F9$ (/ F9$ la fiecare
re"iduu AA adu.at la polipeptid!#
@9A$A IJ-a 5 9@6INA=INA@A OI @=IP@A@A
1ompletarea lanului polipeptidic este semnali"at de codonii stop din ANm# $olipeptidul
este eliberat din ribo"om cu aEutorul factorilor de eliberare#
@9A$A J 5 $=I@@ OI $81@(A@ $8(99AN(=AMI8NA=K
$entru determinarea formei active biolo.ic, polipeptidul trebuie pliat pentru determinarea
conformaiei tridimensionale# nainte sau dup pliere, polipeptidele sufer procesare
en"imatic care include nlturarea unor aminoaci"i (de obicei de la captul amino-
terminal!, adiia .ruprilor acetil, fosforil, metil, carbo)il etc#!, ataarea unor .rupri
carbo)ilice sau prostetice#
@9A$A I 5 A19IJA@A $@(IN9@9I1K A $@1:(8I=8
Aminoacil/ARNt/intetazele acti)eaz ARNt$
Am v"ut modul n care un anumit ANt recunoate codonul care specific un anumit
aminoacid# ( vedem modul n care ANt cuplea" AA devenind activat# Acest proces
crucial este catali"at de -& aminoacil-ANt sinteta"e (A(s!, fiecare fiind capabil de a
recunoate un anumit AA i ANt-ul su corespun"tor# Aceste en"ime de cuplare lea. un
AA la hidro)ilii -B sau 2B care sunt liberi la nivelul ribo"ei din adeno"in, nspre captul
terminal al moleculei de ANt# eacia de cuplare a AA este o reacie n doi pai,
dependent de hidroli"a A9$#
@n"im Q AA Q A9$
6.
@n"im(aminoacil-A6$! Q $$
i
ANt Q @n"im(aminoacil-A6$! aminoacil-ANt Q A6$ Q @n"im R
n prima etap, en"ima, aminoacidul i A9$ formea" un comple) i eliberea" $$
i
n a doua etap, .rupul aminoacil este transferat din comple)ul en"imatic pe ANt, care va
elibera A6$#
Aproape Eumtate din A(s transfer .rupul aminoacil la hidro)ilul -B al adeno"inei,
constituind sinteta"e de clasa I, iar celelalte, care transfer aminoacilul la hidro)ilul 2B al
adeno"inei repre"int sinteta"e de clasa II# AA-ANt re"ultat pstrea" ener.ia re"ultat din
hidroli"a A9$, re"iduul de aminoacid fiind astfel acti)at# @chilibrul reaciei este diriEat
;
nspre activarea aminoacidului datorit pirofosfata"ei care desface le.turile
fosfoanhidridice nalt ener.etice din pirofosfat#
ntrea.a reacie se poate scrie:
AA Q A9$ Q ANt
en"im
aminoacil-ANt Q A6$ Q -$
i
ecent, s-a determinat structura A(s din @#1oli i din multe eucariote, observ*ndu-se c
fiecare tip de en"im are un anumit model (secven de AA! caracteristic fiecrei clase#
Determinarea structurii tridimensionale a celor - tipuri de A(s a artat diferene n ceea ce
privete contactarea ANt#
1iecare molecul *e ARNt ete recunocut *e o aminoacil/ARNt/intetaz pecific$
Identificarea ANt de ctre A( specific este la fel de important pentru translaie ca i
mperecherea corect codon-anticodon# 8dat ANt ncrcat cu un AA, mperecherea
codon-anticodon va direciona ANt pe locul corect din ribosom# Dac este ataat un alt AA
se produce o eroare n sinte"a lanului#
:n e)periment clasic demonstrea" acest fapt# :n re"iduu de cistein deEa ataat la ANt a
fost nlocuit cu un rest de alanin astfel nc*t cisteinil-ANt
1Ss
a devenit alanil-ANt
Ala
#
Adu.at n sinte"a unei lan polipeptidic n cretere n dreptul codonilor pentru 1Ss a aprut
Ala# (-a demonstrat astfel c numai anticodonul ANt este implicat n recunoaterea ce va
duce la ataarea unui anumit AA n polipeptid#
Nu se tie nc precis modul n care A( identific ANt specific# (e tie totui c o A(
poate adu.a acelai AA la - (sau mai muli! ANt, cu anticodoni diferii care codea"
acelai AA# Astfel, fiecare din aceti ANt diferii au situsuri de cuplare similare care vor fi
recunoscute de sinteta"e#
n vederea identificrii unui anumit AA de ctre ANt, un rol important l Eoac structura
braului acceptor al ANt# Inseria unei sin.ure perechi de ba"e la nivelul braului acceptor
pentru AA la ANt
$he
poate comuta identitatea acestuia de la $he la Ala#
,
?
INIMI@@A
Semnalul *e iniiere la ni)elul ARNm ete co*onul A.3#
$rimul eveniment al etapei de iniiere este ataarea unei molecule libere de 6et la ANt
6et
(specific! sub aciunea unei aminoacil-ANt-sinteta"e specifice# @)ist cel puin - tipuri de
ANt
6et
# $rimul tip, desemnat sub si.la ANt
i
6et
, poate iniia sinte"a proteic n timp ce al
doilea poate incorpora 6et dar nu particip la creterea lanului polipeptidic# Aceeai
en"im, metionil-ANt-sinteta"a poate ataa 6et la ambele tipuri de ANt dar numai
comple)ul metionil-ANt
i
6et
poate cupla subunitatea ribosomal mic n vederea iniierii
sinte"ei proteice# (la bacterii, .rupul amino al 6et este formilat!# 1omple)ul 6et-ANt
i
6et
(asistat de un comple) protein-F9$! mpreun cu subunitatea ribosomal mic se lea. la
ANm, pe un situs specific, locali"at adesea n imediata vecintate a codonului de iniiere
A:F#
=a maEoritatea bacteriilor, subunitatea ribosomal mic identific situsul de iniiere prin
interaciunea dintre anumite secvene din ANr/;s i ANm# =a nivelul ANm e)ist aa
numita secven S4ine/"elgarno chiar l*n. situsul de start al sinte"ei proteice, secven
care este complementar cu o secven la sau imediat l*n. captul 2B al moleculei de
ANr/;s# Astfel:
mNA %B-:AAFFAFF-(%-/& nucleotide!-A:F
T8-A::11:11-(apro)#/0&& nucleotide!-%B rNA
(emnalele start pentru sinte"a proteic nu se potrivesc e)act cu secvena din ANr dar n
.eneral e)ist o coresponden la ; din ? nucleotide# Astfel, ANr bacterian Eoac un rol
esenial n selectarea unui situs de start al sinte"ei proteice la nivelul ANm# Astfel,
ribosomii bacterieni pot iniia sinte"a proteic la nivelul acestor situsuri chiar dac acestea
sunt situate in miElocul unor molecule de ANm foarte lun.i#
=a eucariote, mecanismul prin care subunitatea ribosomal mic recunoate situsul de
iniiere nu este preci"at# $rimul semnal recunoscut este captul %B, pre"ent la toate
moleculele ANm la eucariote# 9otui, unele molecule de ANm viral care sunt translate
prin mecanismul celul .a"d n eucariotele infectate, nu posed capt %B# n acest ca",
recunoaterea are loc cu aEutorul unor factori proteici adiionali# De obicei, dup
recunoaterea capului %B, are loc o .lisare a subunitii mici de-a lun.ul moleculei de
ANm n vederea locali"rii A:F# De obicei este utili"at primul codon A:F dar eficiena
iniierii este accentuat considerabil de pre"ena unor anumite nucleotide n preaEma A:F#
Aceast secven, esenial pentru iniiere, situat la captul %B al ANm se numete
ec)en 5oza6 ,'aril7n 5oza6-$
mNA %B-A11A.3F-
1a i suport al acestei ipote"e, menionm c un ANm circular artificial care nu are capete
nu va fi translat# De asemenea, ANm fr captul %B sunt slab translate iar mutaii
survenite la nivelul secvenei >o"aH duc la o scdere a iniierii sinte"ei proteice# 9otui,
chiar dac n ca"ul virusului poliomielitei, lipsete captul %B, ribosomul .sete situsul de
iniiere la ;&& de nucleotide de acest capt# (e pare c, la eucariote, translaia ANm are loc
dup recunoaterea capului %B fie prin utili"area primului A:F fie prin recunoaterea unui
A:F pro)imal datorit secvenei >o"aH specifice#
7
1actorii *e iniiere, ARNt, ARNm !i u#unitatea ri#ozomal mic formeaz un
complex *e iniiere$
(ubunitatea ribosomal mic poate .si situsul de iniiere datorit unui .rup de proteine,
denumite factori de iniiere (I1!# Dr aceste proteine nu se poate forma comple)ul de
iniiere (cu ANm, ANt
6et
i subunitatea mic!# (-au caracteri"at 2 ID la procariote i cel
puin % la eucariote#
=a procariote, ID
2
este esenial pentru .sirea A:F#
=a eucariote, comple)ul eID
0
asi.ur faptul c ANm este monocatenar (astfel asi.ur*nd
at*t fi)area capului %B c*t i eliminarea unor structuri secundare nedorite!+ de asemenea, eID
0
asi.ur faptul c %B este pre.tit pentru ca subunitatea mic s locali"e"e A:F# Numai dup
ce subunitatea mic .sete i lea. A:F, subunitatea mare poate fi adu.at#
Iniierea lanului polipepti*ic#
Ar cuprinde c*teva subetape:
eID
-
care aduce cuplat o molecul de F9$ se va le.a de 6et-ANt
i
6et
# (la procariote,
6et de la ANt
6et
este formilat!#
eID
-
Q 6et-ANt
i
6et
lea. eID
2
i comple)ul eID
0
alturi de ANm i 0&, form*nd
comple)ul de iniiere de 0&(#
Are loc po"iionarea corect a 6et-ANt
i
6et
la A:F, cu consum ener.etic (A9$ i
F9$!# @ste eliberat eID
2
#
@ste cuplat ;&, cu intervenia eID
/
i eID
%
# (e consum o molecul de F9$# (e
formea" ?&, deci ribo"omul funcional, .ata de sinte" i care va cuprinde locurile @
i $ (spre captul %B! i locul A (spre captul 2B!# (unt eliberai factorii de iniiere care-i
reiau funcia#
1apetele 2B i %B ale ANm sunt cuplate cu un
comple) proteic care cuprinde unii factori de
iniiere i proteina de cuplare $AP# eID0@ i
eID0F sunt parte a unui comple) mai mare numit
eID0D, comple) care cuplea" subunitatea
ribosomal mic (0&(!
Elongarea lanului polipepti*ic$
$resupune intervenia unor factori de elon.are (@D9u, @D9s i @D-F la eucariote!#
n acest moment, 6et-ANt
i
6et
ocup locul $ n ribosom#
Inseria# (ub influena unui comple) @D9u-F9$, are loc po"iionarea corect a unui
AA-ANt n locul A al ribo"omului# F9$ este hidroli"at iar @D9u-FD$ este re.enerat
sub influena @D9s fiind retransformat n @D9u-F9$#
/&
=ocul A este liber pentru al doilea AA-ANt care
va fi cuplat la lan
Al doilea AA-ANt este adus de ctre @D9u-
F9$, eliberat i fi)at pe locul A# F9$ din
comple) este hidroli"at iar @D9u-FD$ este
eliberat n citoplasm unde va re.enera @D9u-
F9$ sub influena @D9s-F9$
Al doilea AA-ANt este inserat n locul A
//
Transferul# Aici, lanul peptidic de pe locul $ (n acest ca", doar 6et! este desprins de
ANt de pe locul $ i cuplea" AA de pe locul A printr-o le.tur peptidic# =ocul $ va
fi ocupat de un ANt deacilat iar locul A de un dipeptidil ANt#
/-
Translocarea# $rin hidroli"a unei molecule de F9$, ribosomul se deplasea" ctre
captul 2B cu un codon# Astfel, ANt de pe fostul loc $ este eliberat n citoplasm, locul
$ devine acum locul A i va fi ocupat de acelai dipeptidil ANt# =ocul A este acum
liber i .ata de a primi un nou AA-ANt# Acest proces este mediat de @D-F, protein
care aduce cuplat molecula de F9$ necesar translocrii#
$rin acelai mecanism se adau., pas cu pas c*te un nou aminoacid, conform codonilor
respectivi, la lanul polipeptidic n cretere#
/2
S urmrim un film erial cu elongarea
/0
/%
Terminalizarea$
Are loc n momentul c*nd citirea ANm nt*lnete pe acesta unul din cei 2 codoni stop,
:AA, :AF, :FA# Acetia nu fi)ea" nici un ANt ci unul din cei - factori specifici, D
/
sau D
-
# Acetia, induc hidroli"a le.turii lanului peptidic cu ultimul ANt, cu re.enerarea
188T terminal# (inte"a a luat sf*rit#
/;
%OST.RI ENER3ETI%E ALE SINTEZEI
Dormarea fiecrui comple) AA-ANt necesit - .rupri fosfat (A9$ U A6$!#
/ molecul F9$ suplimentar este consumat la fiecare activare incorect a unui AA#
$rimul pas al elon.rii consum / F9$#
9ranslocarea consum / F9$#
@chivalentul ener.etic este 0)2&,% HV<mol C /-- HV<mol de le.turi fosfodiesterice
consumai per le.tur peptidic n timp ce ener.ia liber re"ultat din hidroli"a le.turii
peptidice este de numai --/ HV<mol# @ner.ia liber net n timpul sinte"ei unei le.turi
peptidice este de -/&/HV<mol#
POLIRI8OSO'II
epre"int comple)e mari de /&-/&& ribo"omi care se formea" mai ales n celulele cu
capacitate crescut de sinte" a proteinelor# Aceste comple)e care pot transla simultan
re.iuni dintr-o sin.ur molecul de ANm repre"int un poliribo"om sau poli"om# Astfel,
citirea ANm este mult mai eficient fc*nd posibil sinte"a simultan a unor copii multiple
din polipeptidul specificat#
"E %E NE INTERESEAZ9 SINTEZA PROTEINELOR :
(inte"a proteinelor este un proces fundamental al fi"iolo.iei celulare i inta principal
pentru unele antibiotice sau to)ine# Datorit diferenelor dintre mecanismele sinte"ei
proteice la procariote i eucariote, antibioticele to)ice pentru unele bacterii sunt relativ
inofensive pentru eucariote# @voluia natural a permis e)ploatarea unor diferene minore
pentru a afecta selectiv sistemele bacteriene# Astfel, unele arme biolo.ice sinteti"ate de
unele microor.anisme sunt to)ice pentru altele# @)emple:
Puromicina# (inteti"at de fun.ii Streptomyces alboniger este unul din cele mai bine
studiate antibiotice# (tructura sa este asemntoare cu captul 2B al unui AA-ANt, ceea ce
i permite cuplarea pe locul A i participarea la formarea le.turii peptidice cu formarea
unui peptidil-puromicin# Deoarece puromicina seamn numai cu terminaia 2B a ANt, ea
nu se an.aEea" n translocare i se disocia" de ribo"om scurt timp dup cuplarea cu
captul caro)i-terminal al peptidului# Acest eveniment oprete sinte"a proteic#
Tetraciclinele inhib sinte"a prin blocarea locului A, prevenind cuplarea AA-ANt
%loramfenicolul inhib sinte"a proteic prin blocarea peptidil transfera"ei, cea care
media" formarea le.turii peptidice# Nu afectea" sinte"a citoplasmic la eucariote#
%iclo4eximi*a blochea" peptidil-transfera"a la ribo"omii eucariotici dar nu i la cei
bacterieni#
Streptomicina, un tri"aharid, determin erori de citire a codului la concentraii sc"ute+ la
concentraii crescute inhib iniierea#
:nii inhibitori sunt to)ici pentru or.anismul uman i pentru eucariote n .eneral#
Toxina *ifteric catali"ea" AD$-ribo"ilarea unei diftamide (histidin modificat! de la
nivelul factorului de elon.are e@D- pe care l inactivea"#
Ricinul, o protein e)trem de to)ic, inactivea" subunitatea (;& a ribo"omilor eucariotici
prin depurinarea unei adeno"ine specifice din ANr de -2(#
/,
RETI%.L.L EN"OPLAS'ATI% ,RE-
@ este un or.anit celular membranar repre"entat de un sac ale crui membrane se continu,
din loc n loc cu membrana nuclear e)tern# @ este abundent n celulele cu procese
intense de sinte" i secreie# @ se pre"int n celul sub dou forme: @, cu ribosomi
ataai la suprafa i @N, fr ribosomi# 1ele dou tipuri de @ difer i ca funcii i
structur chimic#
RER
@ este format din saci (cisterne! i tuburi care au un lumen comun, av*nd la suprafa
ataai ribosomi#
n microscopia fotonic, @ se poate observa ca o formaiune ba"ofil perinuclear# n
celul poate ocupa diverse po"iii: n celulele pancreasului e)ocrin sau n celulele parotidei,
@ ocup o po"iie ba"al# n hepatocite @ este dispus concentric n Eurul nucleului
form*nd corpii Per.# n neuroni este bine de"voltat la nivelul corpului neuronal form*nd
corpii Nissl# 6embranele @ se continu cu membrana nuclear e)tern iar lumenul @
se continu cu spaiul perinuclear (ve"i po"ele de la nucleu!#
REN
@ste repre"entat de o reea de canalicule (canale mai mici! care comunic cu sacii care
formea" @# Nu pre"int ribo"omi la suprafa# (e poate .si n toate tipurile celulare,
dar este mai bine de"voltat n:
- celule care sinteti"ea" hormoni steroi"i: suprarenal, celule interstiiale din testicul
i ovar+
- celule care sinteti"ea" mari cantiti de .lico.en: hepatocite, miocite+
- celule care sinteti"ea" pi.meni: melanocite#
Structura c4imic a RE
- ;&' proteine
- 0&' lipide 5 fosfolipide i colesterol
@n"imele cele mai frecvent nt*lnite la @ sunt: NADT citocromul b%, A9$a"a, i en"ima
marHer 5 glucozo/;/fofataz#
8ri.inea @ nu este clar: este posibil s provin prin nmu.urirea membranei nucleare
e)terne#
/?
1unciile RE
$utem descrie trei tipuri de funcii:
1uncii pecifice RER
- (inte"a i sortarea proteinelor prin pre"ena ribo"omilor ataai# $roteinele sinteti"ate
pot fi proteine de e)port sau proteine de structur+
Ilustrm aici modul de sintez a proteinelor la nivelul @
/7
Sortarea intracelular a proteinelor
Sinteza polipepti*elor +ncepe +n citoplam$ <n momentul +n care polipepti*ul are circa => *e aminoacizi, inteza
poate urma *ou ci?
I6$89 18-9AN(=AMI8NA=
Dac este destinat oricrui dintre compartimentele
sistemului endomembranar, polipeptidul devine asociat
cu membranele @ i este transferat prin aceste
membrane n lumen (cisternele @! n timp ce sinte"a
continu# :lterior, polipeptidul complet rm*ne n @
sau este transportat prin ve"icule la comple)ul Fol.i sau
ctre alte destinaii# $roteinele membranare inte.rale sunt
inserate n membranele @ pe msur ce sunt
sinteti"ate i nu sunt eliberate n lumen#
I6$89 $8(9-9AN(=AMI8NA=
Dac polipeptidele sunt destinate citoplasmei sau
importului nuclear, mitocondriilor, cloroplastelor sau
pero)i"omilor, sinte"a lor continu n citoplasm# Atunci
c*nd polipeptidul este complet, este eliberat din ribo"om i
fie rm*ne n citoplasm, fie este transportat n or.anitele
int prin transport posttranslaional# 6ecanismele de
transport sunt specifice pentru fiecare or.anit#
-&
- .lico"ilarea lanului polipeptidic, prin ataarea de .rupri .lucidice n timpul etapei
de elon.are+ astfel proteinele sinteti"ate n @ difer de cele sinteti"ate direct n
citoplasm pe ribosomi liberi+
6ecanismul de .lico"ilare a proteinelor n @
- modificri ale lanurilor laterale de aminoaci"i prin formarea de puni disulfidice+
1uncii pecifice REN
- sinte"a lipidelor, mai ales n celulele .onadelor, celulele mucoasei intestinale+
caracteristic este sinte"a tri.liceridelor care se pot evidenia sub form de picturi de
.rsime+
- funcie de deto)ifiere, prin en"ime care particip la reacii de o)idare, hidroli",
reducere sau conEu.are# $roduii to)ici pentru celul devin solubili i care se pot
elimina prin rinichi+
- eliberarea .luco"ei din .lico.en n special la nivelul hepatocitelor: en"ima implicat
este chiar en"ima marHer .luco"o-;-fosfata"a#
1uncii comune RER !i REN
- @ este un sistem circulator intracitoplasmatic care induce o compartimentare
funcional a citoplasmei+
- @ sinteti"ea" fosfolipide: procesul are loc n membranele @ iar precursorii sunt
preluai din citoplasm+
- @ Eoac rol de suport mecanic pentru citoplasm+
- @ este o fabric de membrane pentru care sinteti"ea" lipide i proteine# Aceste
elemente determin creterea i nmu.urirea membranelor @ care vor forma
ve"icule care conin parte din coninutul lumenului @# Aceste ve"icule sunt
e)portate prin e)ocito" sau fu"ionea" cu membranele altor or.anite#
-/
%O'PLE@.L 3OL3I ,%3-
1F este un or.anit celular membranar format dintr-un .rup hetero.en de compartimente
delimitate de membrane 5 un .rup de cisterne#
Structura +n microcopia fotonic
n microscopia fotonic, 1F este vi"ibil doar datorit unor coloraii speciale, cum ar fi
impre.naia ar.entic# @ste un or.anit polimorf, cu variate aspecte morfolo.ice: vacuole,
trabecule anastomo"ate etc# $o"iia 1F n celul varia" n funcie de tipul i funcia celulei#
n celulele nervoase (neuroni! 1F este dispus perinuclear# n celulele .landelor cu secreie
e)ocrin 1F este situat ntre nucleu i polul apical, aproape de "ona de sinte" a produilor
de secreie# n celulele endocrine este situat ntre nucleu i polul ba"al# @ste o structur n
permanent transformare (dinamic! i micare, situ*ndu-se n "onele din celul unde
activitatea metabolic este mai accentuat#
Structura +n microcopia electronic ,ultratructura-
$re"int dou componente delimitate de membrane:
- un .rup de saci aplati"ai (cisterne! care pre"int dilataii la e)tremiti# 6ai multe
cisterne formea" un dichtio"om# Diecare dichtio"om are dou fee:
fa de formare, denumit cis, care este conve) i orientat spre nucleu+
fa de maturare, denumit trans, orientat spre plasmalem+
- microve"icule care vin dinspre @ ctre faa cis cu care pot fu"iona+
- macrove"icule care se desprind de pe faa trans#
--
1unciile %3
1uncii +n ecreia celular
- formarea de .ranule de secreie: compuii sinteti"ai n @ sunt n.lobai n
microve"icule i trimii la dichtio"omi# Aici, microve"iculele fu"ionea" cu acetia
iar coninutul se vars n lumenul sacilor 1F# @n"imele din 1F acionea" asupra
acestor produi n variate moduri+
- .lico"ilarea terminal a proteinelor: produii de secreie provenii din @ sunt
.lico"ilai terminal n pre"ena .lico"il-transfera"ei i -mano"ida"ei+
- .lico"ilarea .an.lio"idelor i cerebro"idelor are loc n celulele din creier i rinichi i
este asistat de .lico"iltransfera"+
- sulfatarea produilor provenii din @, n pre"ena sulfotransfera"elor: 1F are un rol
important n secreia mucopoli"aharidelor+
- concentrarea produilor de secreie: are loc n sacii 1F# $roduii de secreie
interacionea" cu unele comple)e protein-poli"aharidice cu sarcin electric opus i
i reduc presiunea osmotic, av*nd ca re"ultat eliminarea apei i concentrarea+
- maturarea produilor de secreie: de e)emplu, proinsulina este transformat n
insulin
- bio.ene"a li"o"omilor: en"imele li"o"omale pre"int un marHer, mano"-;-fosfat,
pentru care e)ist receptori la nivelul "onelor dilatate din coarnele 1F# Aici en"imele
sunt mpachetate n ve"icule care se desprind ca li"o"omi primari#
- traficul de membrane i reciclarea membranelor: traficul de membrane presupune
transferul de ve"icule de la @ la 1F urmat de formarea de macrove"icule pe faa de
maturare cu e)ocito"a acestora# 1ircuitul endocito"-sinte"-e)ocito" face ca
suprafaa total a plasmalemei s rm*n constant#
-2
'eto*ologii *e reciclare a mem#ranelor
-0