RETICULUL ENDOPLASMIC

RETICULUL ENDOPLASMIC
RE este un ansamblu de membrane intracitoplasmatice
(endomembrane), prezent n toate celulele EK, care particip la
numeroase procese biochimice eseniale pentru viaa celulei.
La nivelul RE se desfoar:
- biosinteza proteinelor, precum i modificarea cotranslaional (glicozilarea) i post-translaional (ancorarea
de lipide) a unor proteine
- biosinteza lipidelor membranare
n celulele animale membranele RE pot reprezenta mai mult de
50% din totalitatea membranelor.
Reeaua de membrane ale RE a fost evideniat pentru prima
oar de ctre Keith Porter (1953) prin examinarea la
microscopul electronic a diverse tipuri de celule cultivate in vitro.

Organizarea structural a RE
RE reprezint o reea tridimensional de tubuli ramificai
i saculi aplatizai. Aceast reea extins n citosol este
delimitat de o membran unic.

Compartimentul intern al RE se numete lumen, i ocup

circa 10% din volumul celulei.
Membrana RE separ lumenul de citosol i mediaz
transferul selectiv al moleculelor ntre cele dou
compartimente.
ntinderea acestui sistem membranar este variabil n
funcie de tipul celular. RE este abundent n special n
celulele cu un nivel crescut al sintezei de proteine i
glicoproteine.

REN i RER
RE este de dou tipuri, diferena morfologic dintre
acestea fiind dat de prezena/absena ribosomilor
ataai pe suprafaa sa:
RE rugos (RER), cnd sunt prezeni ribosomi pe
suprafaa sa
RE neted (REN), fr ribosomi
Termenul vechi folosit pentru RER este
ergastoplasm, termen introdus de ctre Garnier n
anul 1897 pentru a desemna anumite formaiuni
specifice din celulele secretorii.

RER se gsete grupat n jurul nucleului, membrana sa

continundu-se cu membrana nuclear extern.
REN este de obicei mai ndeprtat de nucleu.

Izolarea microzomilor provenii din RER i REN prin

centrifugare n gradient de densitate.

Funciile reticulului endoplasmic

Sinteza i depozitarea lipidelor

RE particip la sinteza i depozitarea lipidelor. Sinteza
lipidelor membranare (fosfogliceride, compui steroidici,
triacilgliceroli) are loc att la nivelul RER ct i la nivelul
REN.

Detoxifierea celular
REN este implicat n reacii de detoxifiere ce au ca scop
transformarea unor compui toxici liposolubili (fiziologici,
patologici sau farmacologici) n compui netoxici (metabolii
hidrosolubili), uor de eliminat din celule.

Depozit dinamic de Ca2+

Aceast funcie se manifest pregnant n celulele musculare
striate.

Reticulul endoplasmic - depozit dinamic de Ca2+

REN conine proteine ce funcioneaz ca pompe pentru ionii
de Ca2+, implicate n transportul i stocarea ionilor de Ca2+
n lumenul reticulului endoplasmic. Aceast rezerv de calciu
este eliberat n citosol ca rspuns la diverse semnale.
REN din fibrele musculare poart numele de reticul
sarcoplasmic i se dispune sub form de tubuli (sarcotubuli)
aezai n iruri, ce mbrac ca nite manoane miofibrilele.
Reticulul sarcoplasmic este implicat n procesul de contracierelaxare al fibrelor musculare. Dinamica acestui proces se
realizeaz prin cooperarea mai multor componente
moleculare. O componente important este calsechestrina,
protein cu mare afinitate pentru ionii de calciu, aflat n
cantitate mare n lumenul organitului.
Fiecare molecul de calsechestrin poate
leaga 18-50 de ioni de Ca2+.

Reticulul sarcoplasmic dispoziia sub form de

tubuli ce mbrac ca nite manoane miofibrilele.
RS funcioneaz ca depozit dinamic de Ca2+ n cursul
procesului de contracie-relaxare.

Funciile RE rugos

Biosinteza proteinelor:
(i) proteine membranare (ex. proteinele TM din MP)
(ii) proteine destinate s funcioneze n RE, n aparatul
Golgi, sau lizosomi
(iii) proteine destinate exportului (proteine de secreie)
Prelucrarea a proteinelor nou-sintetizate n RE:
Transformri ale proteinelor care au loc concomitent cu
translaia (modificri co-translaionale). Un exemplu l
constituie iniierea glicozilrii proteinelor care const n
grefarea (ataarea covalent) unor secvene glucidice cu
numr mic de monozaharide (oligozaharide) pe resturi de
asparagin ale catenei polipeptidice n curs de sintez.
Transformri dup terminarea translaiei (modificri posttranslaionale) (ex. ancorarea de lipidele membranare).

Biogeneza membranelor n RE
Rennoirea membranelor necesit sinteza de noi
molecule lipidice. n celulele animale la nivelul RE sunt
sintetizate clasele majore de lipide membranare
(fosfogliceride, colesterol) sau precursori ai unor lipide
membranare ce sunt ulterior prelucrai n aparatul Golgi.
Biosinteza fosfolipidelor se desfoar n mai multe etape
catalizate de enzime membranare pe faa citosolic.
Pentru a echilibra compoziia n fosfolipide a celor dou
straturi moleculare ale bistratului membranei RE, la
nivelul acesteia acioneaz un traslocator fosfolipidic
(scramblaza) ce mediaz transferul fosfolipidelor de pe
un strat molecular pe cellalt (micri de flip-flop),
echilibrnd distribuia fosfolipidelor pe cele dou straturi
moleculare ale bistratului lipidic (transferul are loc cu o
frecvena de 100.000 de ori mai mare dect micarea de
flip-flop spontan) .

Translocatorul fosfolipidic
scramblaza din membrana
RE echilibreaz compoziia
n fosfolipide n cele dou
straturi moleculare ale
membranei RE.

 Distribuirea lipidelor nou sintetizate n RE ctre

alte tipuri de membrane:
- Difuzie lateral pentru nveliul nuclear;
- Transport vezicular pentru aparatul Golgi, lizosomi,
membrana plasmatic;
- Proteine de transfer a fosfolipidelor (transportori de
schimb fosfolipidic) pentru mitocondrii i peroxisomi.

Transportul vezicular - proces activ i selectiv ce

mediaz transportul unor substante i constitueni celulari
n vezicule nchise, delimitate de membrane, ntre diferite
organite celulare sau din celule ctre mediul extracelular.

Transportul vezicular

Transportul non-vezicular prin intermediul

transportorilor de schimb fosfolipidic
Este caracteristic pentru mitocondrii i peroxisomi
Transportorii sunt proteine hidrosolubile ce transfer
molecule individuale de fosfolipide ntre membrane.
Au capacitatea de a extrage un anumit fosfolipid dintr-o
structur membranar pe care o transport prin citosol i
o cedeaz altei structuri de bistrat lipidic (membrana
int).
Au specificitate pentru structura capului hidrofil.
n cursul transportului prin citosol mascheaz cozile
hidrofobe ale fosfolipidelor.

APARATUL GOLGI
(Complexul Golgi)

 Aparatul Golgi, denumit i complex Golgi, este un

organit celular ce ndeplinete un rol important n
procesele de biogenez a membranelor, precum i n
procesele de prelucrare, sortare i distribuire a proteinelor
ce au ca destinaie diverse compartimente intracelulare
sau mediul extracelular. Aadar complexul Golgi face
parte, alturi de RE, din sistemul de organite implicate
n traficul intracelular al membranelor i
macromoleculelor.

Acest organit a fost pus n eviden pentru prima dat de ctre

cercettorul italian Camilo Golgi (1898), n celulele Purkinje, prin
tehnica histochimic numit impregnare argentic. Structura
intracelular s-a dezvluit ca o dantel esut n jurul nucleului.
Golgi a denumit-o, pe baza morfologiei, aparat reticular
endocelular, sau aparat reticular intern.

Celule Purkinje
(neuroni din cortexul
cerebelului)

n 1906 Camilo Golgi a primit mpreun

cu Santiago Ramon y Cajal Premiul Nobel
pentru Fiziologie i Medicin, ca
recunoatere a contribuiei sale privind
evidenierea aparatului reticular n
celulele sistemului nervos.

Camilo Golgi

n 1954 a descris pentru prima dat ultrastructura n imagini

de microscopie electronic.
Studiile de microscopie electronic au artat c aparatul Golgi
este format dintr-un complex de membrane, dispuse de
obicei ntre reticulul endoplasmic i membrana plasmatic.
Caracteristica structural a aparatului Golgi o constituie
prezena cisternelor aplatizate (numite i saculi), mai dilatate
la capete. Mai multe cisterne turtite aezate unele peste altele
(n stiv) constituie un dictiozom.

Organizarea structural a aparatului Golgi

Aparatul Golgi este structurat ca o stiv de cisterne.
Cisternele aparatului Golgi sunt deseori curbate, avnd o fa
convex (numit i fa formatoare, proximal sau faa cis),
orientat spre nucleu i reticulul endoplasmic i o fa concav
(numit i fa matur, distal sau fa trans) orientat spre
membrana plasmatic.
Se consider c aparatul Golgi are 3 compartimente distincte:
reeaua cis, pachetul de cisterne i reeaua trans.
n ceea ce privete stiva de cisterne, se opereaz cu noiunile:
cisterne cis, cisterne mediene i cisterne trans, dup cum
acestea sunt orientate ctre faa cis-Golgi, ctre faa transGolgi, sau sunt aezate n zona din mijloc a stivei.
Numrul i distribuia cisternelor aplatizate depind de tipul
celular, starea funcional i etapa ciclului celular, fiind de regul
cuprins ntre 4-8.

Modelul organizrii structurale a aparatului Golgi

Aparatul Golgi este caracterizat din punct de vedere ultrastructural

prin polaritate morfologic, dar i prin polaritate funcional.

Ultrastructura aparatului Golgi:

(A) reprezentare schematic;
(B) imagine de microscopie electronic.

Funciile aparatului Golgi

Aparatul Golgi joac un rol fundamental n:
Prelucrarea prin glicozilare a proteinelor nou-sintetizate,
conducnd la formarea glicoproteinelor (la nivelul su continu
procesul nceput in RE).
Sortarea i transportul proteinelor la destinaia final
intracelular, sau eliminarea anumitor proteine (numite proteine
de secreie) n mediul extracelular prin secretare (exocitoz).
Prelucrarea i transportul lipidelor.
Sinteza proteoglicanilor (molecule ce se formeaz prin
ataarea unor lanuri polizaharidice de dimensiuni mari de
proteine sintetizate n reticulul endoplasmic. Proteoglicanii sunt
prezeni n matricea extracelular a celulelor animale.
Biogeneza lizosomilor.
Biogeneza i traficul intracelular al membranelor pe calea
transportului vezicular.

De menionat c toate aceste procese se petrec

ntr-o succesiune ordonat de etape, bine
controlate i reglate, pe msur ce substanele
primite de la RE avanseaz prin aparatul Golgi
dinspre faa cis, prin cisternele mediene ctre faa
trans.

Ordonarea etapelor este posibil datorit

polaritii morfologice i polaritii biochimice.

Concluzie
Celulele i-au dezvoltat mecanisme prin care decid i
direcioneaz o anumit protein spre o destinaie
precis.
Aceste mecanisme sunt diferite pentru fiecare
compartiment celular n parte, dar exist cteva aspecte
de principiu comune.
Informaia referitoare la destinaia final a unei proteine
n celul se afl nscris, de regul, n structura primar
a proteinei (secvena de aminoacizi), n ceea ce numim
semnal de retenie sau semnal de sortare.

Abordare experimental
O modalitate de abordare experimental a rolului
complexului Golgi n traficul intracelular al proteinelor
const n folosirea proteinelor himerice obinute prin
cuplarea proteinelor de studiat cu proteina fluorescent
verde (GFP, Green Fluorescent Protein izolat din
meduza Aequorea victoria).
Proteinele himerice se obin cuplarea genelor celor dou
proteine (proteine de studiat i GFP) pentru a obine o
nou gen care este introdus prin transfecie n celula
supus investigrii. Se pot obine astfel proteine cu
funcie cunoscut marcate fluorescent.
2008 - Premiul Nobel pentru Chimie (Martin Chalfie,
Osamu Shimomura i Roger Y. Tsien) pentru
descoperirea i studiile privind GFP.

GFP

Structura tridimensional a GFP (238 aa).

n interiorul structurii se evideniaz
cromoforul (parte integrant a proteinei,
aa din poziiile 65, 66, 67; ser-dehydrotyrgly.
Aequorea victoria

Evidenierea traficului intracelular al proteinelor

i a rolului aparatului Golgi
n prezena unui inhibitor al transportului vezicular
proteina rmne sechestrat n aparatul Golgi
(imaginea de sus).
n condiii normale, n absena inhibitorului,
proteina obinut prin fuziunea GFP i o
glicoprotein este transportat la nivelul
membranei plasmatice.