NUTRITIA,

METABOLISMUL SI
CRESTEREA
BACTERIAN

NUTRITIA BACTERIAN
asimilarea substantelor nutritive, organice
si anorganice, din mediul extern, necesare
metabolismului

nutrienti = substante a cror solutii pot

traversa membrana citoplasmatic
particip la reactiile metabolice care
asigur cresterea si multiplicarea celulei
2

NUTRITIA BACTERIAN
Compusi din care deriv nutrientii:
prin simpl solvire: sruri minerale, CO2, O2
dup digestia extracelular prealabil:
1. proteine fragmente polipeptidice, aa
2. polizaharide monozaharide
3. lipide acizi grasi si gicerol
4. acizi nucleici nucleozide si fosfati anorganici
3

NUTRITIA BACTERIAN
a. intervin hidrolaze: proteaze, lipaze, amilaze etc.
b. nutrientii traverseaz membrana citoplasmatic prin:

difuziune simpl sau facilitat (proteine carrier)

diferente de concentratie

transport activ contragradient

cu consum de energie obtinut prin hidroliza ATP

cu participarea unor enzime (permeaze)
conc. intracelular a nutrientilor pn la 1000 ori mai mare
dect n mediu
4

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Principalele elemente cu rol structural si
functional:
C - din greutatea uscat a celulei
bacteriene
N pt. sinteza proteinelor 10% din greutatea
uscat a celulei bacteriene
O,
sruri minerale
5

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Surse de carbon:
CO2 bacterii autotrofe
compusi organici bacterii heterotrofe
( carbohidrati, proteine, lipide)
compusi organici si CO2 bacterii
heterotrofe (capnofile sau carboxifile)

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Surse de azot:
azot atmosferic bacterii autotrofe

surse organice(peptide, aa)

surse anorganice
(sruri de amoniu, nitrati)

bacterii
heterotrofe

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Surse de oxigen:
O2 molecular
n molecule biologice (aa, nucleotide,
gliceride etc).

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Surse de elemente minerale:
sulf
prezent n
aa grupri tiol (-SH)
vitamine biotina, tiamina
coenzima A

asimilat din compusi

organici
anorganici
9

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Surse de elemente minerale:
fosfor
- necesar pentru sinteza
acizi nucleici
fosfolipide membranare
ATP

- asimilat sub form de fosfati anorganici

10

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Surse de elemente minerale:
alte elemente
Na, K, Mg, Cl

- asigur echilibrul fizico-chimic al bacteriei

Fe, Ni, Se
intr n structura unor enzime

- citocromi
- peroxidaze
- hidrogenaze
11

NUTRITIA BACTERIAN
necesitti nutritive de baz
Surse de elemente minerale:
alte elemente
- Ca
+ acid picolinic dipicolinat de Ca n
citoplasma endosporilor bacterieni
- Co, Cu, Mn, Mo
activatori enzimatici
necesari n cantitti foarte mici
(oligoelemente)
12

NUTRITIA BACTERIAN
factori de crestere
Bacterii
care pot obtine toti compusii necesari
metabolismului
mediu ap, sruri minerale glucoz

care nu pot sintetiza factori esentiali - FACTORI

DE CRESTERE= bacterii fastidioase
necesari a fi prezenti n mediu
aa
baze purinice, pirimidinice
vitamine
13

NUTRITIA BACTERIAN
factori de crestere
Asigurati:
de alt specie bacterian
nglobati n mediul de cultur

14

NUTRITIA BACTERIAN
factori de crestere
1. Asigurati de alt
specie bacterian:
care sintetizeaz
acel factor
SINTROFIE,
SATELITISM
Ex. S.aureus
produce factor V
(NAD) necesar
pentru
Haemophilus
influenzae
15

NUTRITIA BACTERIAN
factori de crestere
2.Inglobati n mediul de cultur
mutatie pierdere de enzim blocare
secvent metabolic oprire sintez
metabolit esential
tulpina parental = PROTOTROF

tulpina mutant = AUXOTROF

16

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
izolarea bacteriilor din produse patologice

utilizarea unor medii de cultur optime

17

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR
mediu care asigur nutrientii si conditiile fizicochimice necesare cresterii si multiplicrii
bacteriene

CRITERII DE CLASIFICARE
provenienta nutrientilor
valoare nutritiv
consistent
scopul utilizrii
18

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - provenienta
nutrientilor:
MEDII EMPIRICE (NATURALE)
produse de origine animal sau vegetal
Ex.: cord, muschi de vit, creier, ficat, ou etc

MEDII SINTETICE- contin ingrediente

pure
19

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - valoare nutritiv
MEDII SIMPLE (DE BAZ)
- extract de carne, pepton, NaCl
- pentru bacterii nepretentioase
- bulion, geloz, ap peptonat
MEDII MBOGTITE
- adaos de snge, ser, ou, extract de levuri etc.
- pentru bacterii exigente
- bulion-snge; bilion-ser; bulion-glucozat;
geloz-snge
20

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR consistent
MEDII LICHIDE
- eprubete, baloane
- pentru culturi monobacteriene, caractere
biochimice
MEDII SOLIDE
- cutii Petri, eprubete (pant, coloan)
- colonii
MEDII SEMISOLIDE
- eprubete (coloan)
- studiul mobilittii bacteriilor, caractere metabolice,
conservare
21

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR consistent
pt. consistenta mediului - AGAR
fitocoloid obtinut din alge marine, speciile:
- Gelidium
- Gracilaria
- Pterocladia
22

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR consistent
- AGAR caracteristici
lichefiaz la 100C
se solidific la 42C
mentine starea solid a mediilor la temp de 0
80C
nu este utilizat ca nutrient de ctre bacterii
23

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR consistent
pt. consistenta mediului
- coagularea termic a proteinelor din
ser sau ou

24

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - scopul utilizrii
medii de izolare
medii de identificare
medii de conservare

25

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - scopul utilizrii
medii de izolare
uzuale
- gam larg de bacterii de interes medical
- pt. produse
monobacteriene
cu flor asociat
- pt. aprecieri calitative si cantitative a
bacteriilor n pp.
26

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - scopul utilizrii
medii de izolare
selective

- contin substante cu actiune

inhibitorie asupra unor bacterii: antibiotice,
coloranti, sruri biliare, azid de Na etc.
- favorizeaz izolarea
preferential unor specii
27

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - scopul utilizrii
medii de izolare
- de mbogtire
- medii lichide
- favorizeaz multiplicarea unor
bacterii
- inhib selectiv flora de asociatie
- pt. izolarea unor bacterii aflate n nr.
mic n pp.
- pot fi utilizate n combinatie cu medii
selective
28

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - scopul utilizrii
medii de izolare
- diferentiale
- contin un substrat pentru unele
enzime bacteriene
- permitnd diferentierea acestora
n cultura primar
29

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - scopul utilizrii
medii de identificare
- contin
- unul sau mai multe substraturi pt.
enzime bacteriene
- indicatori care evidentiaz produsi
intermediari sau finali de metabolism: indol,
H2S, acetoin etc.
- indicatori de pH: recunosc
degradarea unor zaharuri sau aa
- pt. identificarea de gen, specie
30

NUTRITIA BACTERIAN
aplicatii practice
MEDII DE CULTUR - scopul utilizrii
medii de conservare
pt. pstrarea n laborator a unor tulpini
bacteriene n cultur pur

31

METABOLISMUL BACTERIAN

totalitatea proceselor biochimice prin

care celula bacterian si procur
materialul plastic si energetic din
mediul nconjurtor

32

REACTII METABOLICE:
catabolice reactii prin care se
elibereaz energie

anabolice (asimilare) consum

energie pt. sinteza constituentilor
celulari

33

REACTII CATABOLICE:
= metabolismul energetic; respiratia
bacterian
procesele biochimice aerobe sau
anaerobe prin care compusi organici cu
structur complex se degradeaz n
compusi simpli cu eliberare de energie
energia eliberat se stocheaz n
molecula de ATP
34

REACTII CATABOLICE
dup calea prin care obtine energia:
photobacterii folosesc energia
luminoas, triesc la lumin
scotobacterii (bacterii chimiosintetizante)
produc energia prin oxido-reducere,
triesc la ntuneric

35

REACTII CATABOLICE
hidratii de carbon
surse de energie: aa, purine, pirimidine,
acizi grasi
foarte important catabolismul
carbohidratilor glucoza prin:
- respiratie
- fermentatie

36

REACTII CATABOLICE
hidratii de carbon
RESPIRATIA CELULAR
proces generator de ATP
- moleculele sunt oxidate acceptorul final de
electroni este o molecul anorganic:
- O2 respiratie aerob
- alt molecul anorganic respiratie
anaerob
-ion nitrat NO3
- ion sulfat SO4
Catabolismul glucozei: serii de reactii de oxidoreducere,
n 3 etape: glicoliza, ciclul acizilor tricarboxilici, lantul
transportului de hidrogen
37

REACTII CATABOLICE
hidratii de carbon
RESPIRATIA CELULAR
pierde H, electroni

donor
se oxideaz

acceptor
se reduce

38

REACTII CATABOLICE
hidratii de carbon
RESPIRATIA CELULAR
respiratie aerob (resp. oxibiotic; metabolism
aerob)
- acceptor final este oxigenul molecular
- necesar existenta membranei celulare
- substratul reductor NADPH
- enzime
- nicotinice NAD (nicotin adenin
dinucleotid) si NADP(nicotin adenin dinucleotid
fosfat)
- flavinice FMM (flavin mononucleotid)
sau FAD (flavin adenin dinucleotid)
- ferice (citocromi, citocromoxidaz,
peroxidaz etc).
- sinteza ATP fosforilare oxidativ

39

REACTII CATABOLICE
hidratii de carbon
RESPIRATIA CELULAR
respiratie anaerob (respiratie anoxibiotic,
metabolism anaerob)
- acceptor final este substant anorganic
(exceptnd oxigenul)
- fosforilare la nivelul substratului
- bacteriile nu au enzime respiratorii
(catalaz, peroxidaz, citocromi)
40

REACTII CATABOLICE
hidratii de carbon
FERMENTATIA
proces de oxido-reducere biologic
donorul si acceptorul final sunt compusi
organici
acidul piruvic convertit, n raport cu specia,
la:
- ac.lactic
- acid acetic
- etanol
- acid butiric etc.
41

REACTII CATABOLICE
hidratii de carbon
Clasificarea bacteriilor dup tipul respirator
(dup potentialul redox al substratului):
obligat aerobe
- exclusiv respiratia aerob
aerobe facultativ anaerobe
- cale oxidativ si fermentatia
microaerofile
- concentratii reduse de O2
obligat anaerobe - exclusiv fermentatia
42

REACTII CATABOLICE
lipide, proteine

energie din oxidarea acizilor grasi,

glicerolului, aa ciclul Krebs

43

REACTII ANABOLICE
metabolismul de sintez; asimilare; nutritia
bacterian
reactii de biosintez a unor componente
celulare cu consum de energie:
- polizaharide- glicoliza si ciclul Krebs
- lipide- din glicerol si acizi grasi
- aa si proteine- din catabolismul glucozei, din
mediu
- baze purinice si pirimidinice- din glicoliza si
ciclul Krebs
44

REACTII ANABOLICE
dup sursele folosite ca material de
sintez:
1. autotrofe
2. heterotrofe
3. paratrofe

45

REACTII ANABOLICE
Bacterii autotrofe
sintetizeaz toti compusii organici din
materie anorganic
folosesc CO2 ca surs de carbon;
azotul atmosferic ca surs de N
pot fi fototrofe sau chimiosintetizante
bacterii saprofite cu rol n circuitul
materiei n natur
46

REACTII ANABOLICE
Bacterii heterotrofe
depind de prezenta unor compusi organici
folosesc surse organice de carbon; surse organice si
anorganice de N
sunt chimiosintetizante
se disting:
- bacterii fixatoare de azot:
- surse organice de carbon; azot molecular,
atmosferic
- triesc n sol n simbioz cu plantele
- bacterii care folosesc C organic si N din legturi
anorganice (amoniu, sruri de amoniu)
- bacterii care folosesc C si N organic
- specii saprofite si potential patogene din
cavittile naturale ale omului
- specii patogene pentru om
47

REACTII ANABOLICE
Bacterii paratrofe
energia trebuie oferit de gazd
strict parazite intracelulare; nu se
cultiv pe medii artificiale
Rickettsia spp., Mycobacterium leprae,
Chlamydia spp.

48

FACTORI CARE INFLUENTEAZ

METABOLISMUL BACTERIAN
pH ul
presiunea osmotic
temperatura
atmosfera de incubare
49

FACTORI CARE INFLUENTEAZ

METABOLISMUL BACTERIAN
pH ul
- asigurat de mediile de cultur
- 7 - 7,5
- influenteaz:
- structura tridimensional a
proteinelor, enzimelor metabolismului celular
- transportul nutrientilor
- transferul de electroni
50

FACTORI CARE INFLUENTEAZ

METABOLISMUL BACTERIAN
pH ul
tamponat cu
- fosfati
- peptone
- aminoacizi

bacterii acidofile
- pH 5 5,5
- lactobacili
bacterii bazofile
(alcalinofile)
- pH 8,5 9
- genul Vibrio
51

FACTORI CARE INFLUENTEAZ

METABOLISMUL BACTERIAN
presiunea osmotic
- asigurat de mediul de
cultur/mediul intern
- mediu izoton
- mediu hipoton
peretele celular limiteaz
ptrunderea apei
micoplasme, bacterii cu
perete modificat
afectate

- Mediu hiperton
plasmoliz
bacterii halofile NaCl >
2%

52

FACTORI CARE INFLUENTEAZ

METABOLISMUL BACTERIAN
Temperatura

bacterii psihrofile : 0-20C

bacterii mezofile : 25-45C
bacterii termofile : 50-70C
temperatura optim: 37C

53

FACTORI CARE INFLUENTEAZ

METABOLISMUL BACTERIAN
atmosfera de incubare

aer atmosferic
anaerobioz
microaerofilie
CO2

54

55

CRESTEREA SI
MULTIPLICAREA BACTERIILOR
CRESTEREA BACTERIAN:
mrirea tuturor componentilor, a
volumului unui microorganism prin
adugare de substant nou
cresterea volumului celular raportat la
cresterea suprafetei este mai mare
punct critic diviziune (restabilirea
echilibrului) optim
56

CRESTEREA SI
MULTIPLICAREA BACTERIILOR
MULTIPLICAREA BACTERIAN
diviziune simpl (direct, binar,
sciziparitate) modalitate frecvent
nmugurire / ramificare la un numr mic
de specii

57

Notiuni

1. timp de generatie
2. rata de crestere
3. colonia bacteriana
4. cultura bacteriana
Cultura mixta
Cultura pura
58

Notiuni
1. Inoculare
2. insamantare

1. colonii de tip S( smooth)

2. colonii de tip R(rough)
3. colonii M
4. colonii untoase
5. colonii pufoase
6. fenomen de catarare
59

CRESTEREA SI
MULTIPLICAREA BACTERIILOR
DIVIZIUNEA DIRECT
scindarea unui individ n 2 celule
cresterea
numrului de germeni
diviziunea precedat de:
- cresterea cantittii de ARN
- intensificarea sintezei proteinelor
- dublarea cantittii citoplasmei si a materialului
nuclear
- diviziunea substantei nucleare prin intermediul
mezozomilor
- alungirea celulei etc.
60

CRESTEREA SI
MULTIPLICAREA BACTERIILOR
DIVIZIUNEA DIRECT
diviziune prin:
- formarea septului transversal derivat
din membrana citoplasmatic
- strangularea, ngustarea median a
celulei determinat de invaginarea
membranei citoplasmatice, cresterea spre
interior prin invaginare a peretelui celular
61

Curba de crestere
UNITATE
FORMATOARE
DE COLONII

Stationar

Moarte

Log

Lag

TIME
62