1

Raport de practic

RAPORT DE PRACTIC
Numele i prenumele studentului:
POPA ALINA LOREDANA
Universitatea/Facultatea:
UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN VETERINAR BUCURETI,
Facultatea de Biotehnologii
Instituia i departamentul n care a desfsurat stagiul de pregtire practic:
S.C.BIO HIGH TECH S.R.L.-Evic Romnia, Laboratorul de Microbiologie
Domeniul de activitate:
Cercetare i dezvoltare n biotehnologii
Date de contact instituie:
Str. Constantin Boianu, nr.15, sector 4, Bucureti
Perioada i durata stagiului de pregtire practic:
09.07.2012- 27.07.2012 , 90 ore
Tutore desemnat:
Expert microbiolog Getua DOPCEA
Responsabil de practic:
Lect. univ. dr. Silvana DNIL GUIDEA
1.OBIECTIVELE STAGIULUI DE PRACTIC
Stagiul de practic a avut ca obiective :

mbuntirea i sporirea cunotinelor teoretice i practice dobndite pe parcursul facultii;

Dobndirea de experien practic cu privire la controlul i utilizarea instrumentelor i aparaturii

specifice laboratorului n care mi-am desfurat stagiul de practic;

Dezvoltarea spiritului de iniiativ i a capacitii de a lucra n echip;
Adaptarea la condiii diverse de munc;
Familiarizarea cu tot ceea ce presupune munca ntr-un laborator, prin implicarea n activitile

practice i nu numai , desfurate la nivelul acestuia;

Facilitarea inseriei pe piaa muncii.
2.ACTIVITILE DESFURATE
ZIUA 1 -09.07.2012

Raport de practic

Am luat la cunotin normele de securitate i sntate n munc .

Mi-a fost prezentat regulamentul de ordine interioar.
Mi-a fost descris laboratorul de microbiologie , echipamentele din cadrul acestuia, precum i
principalele activiti realizate n locaia n care mi-am desfaurat stagiul de practic.
ZIUA 2-10.07.2012
PREPARARE MEDIU DE CULTURA TSA+LT(LP)
Mediul de cultur TSA+LT reprezint mediul de cultur utilizat n laboratorul n care am derulat
stagiul de practic, att n cadrul studiilor realizate ct i pentru determinarea numrului de
microorganisme ce se dezvolt din probe prelevate de pe suprafee, din aer sau ap.
Pentru a realiza acest mediu de cultur am parcurs urmtoarele etape:

Cntrirea cantitii corespunztoare din formula de mediu ce conine toate componentele

precizate n reeta de preparare a mediului;

Omogenizarea soluiei obinute i topirea complet a formulei de mediu prin nclzire pe baia de

ap la 700C ;
Ajustarea pH-ului la valoarea 7,29. Anterior utilizrii pH-metrului am realizat o calibrare n trei

puncte;
Autoclavarea mediului la 1210C, timp de 15 minute.

n vederea utilizrii ulterioare, am repartizat mediul de cultur n condiii aseptice n plci Petri, care
au fost pstrate la frigider.
Fotografii din timpul zilei 2 de practica n anexa 1.
ZIUA 3-11.07.2012
PREPARARE SOLUIE DE DILUARE (PBW)
Soluia de diluare PBW( Butterfields sterile phosphate buttered Water) se utilizeaz la realizarea
diluiilor seriale din probele prelevate i totodat reprezint lichidul din tampoanele pentru prelevat probe
de pe suprafee-SWAB.
Pentru a realiza aceast soluie am msurat dintr-o soluie stoc preparat cantitatea corespunztoare
preparrii a 500 ml soluie PBW, peste care am adugat 500 ml AD.
Manevrarea soluei stoc am realizat-o la hota n flux laminar pentru a evita contaminarea acesteaia.
PREPARARE SOLUIE DE PRELEVARE SAMPLING SOLUTION (S.S.)
S.S. este o soluie utilizat n cadrul experimentelor de testare de substane antibacteriene, pentru
prelevarea probelor de pe subieci.
Pentru realizarea soluiei am parcurs urmtorii pai:
Cntrirea fiecrei substane precizate n reeta de preparare a soluiei urmat de trecerea
cantitativ a acesteia la balonul cu dop rodat;

Raport de practic

Omogenizarea soluiei formate din 500 ml AD i substanele cntrite anterior, prin

nclzire pe baia de ap;
Ajustarea pH-ului cu ajutorul soluiei de NaOH 32%;
Autoclavarea soluiei obinute
Fotografii din timpul zilei 3 de practic n anexa 2.
ZIUA 4- 12.07.2012
PREGTIREA TAMPOANELOR PENTRU PRELEVAREA PROBELOR DE PE SUPRAFEE-SWAB I A
EPRUBETELOR PENTRU DILUII SERIALE
n funcie de punctele de recoltare a microflorei de pe suprafee am notat tampoanele pentru prelevarea
probelor SWAB.
Ulterior notrii tampoanelor SWAB am repartizat n fiecare din acestea cte 10 ml soluie PBW.
Totodat am pregtit i eprubetele sterile pe care le-am folosit la realizarea diluiilor seriale. n acestea din
urm am repartizat cte 9 ml soluie PBW. Repartizarea soluiei n ambele cazuri am realizat-o la hota n
flux laminar. Tampoanele SWAB i eprubetele pentru diluii au fost pstrate la frigider pn n momentul
prelevrii probelor.
Fotografii din timpul zilei 4 de practic n anexa 3.
ZIUA 5- 13.07.2012
PRELEVAREA PROBELOR DE PE SUPRAFEE I NSMNAREA PE PLCI PETRI CU MEDIU
TSA+LT
Prelevarea probelor s-a fcut din punctele stabilite cu o zi nainte i dup metoda descris n protocolul
de lucru. Pentru prelevare am utilizat tampoane sterile SWAB.
Dup prelevare am realizat nsmnarea plcilor Petri cu 1 ml prob (suspensia obinut iniial sau
diluii seriale ale acesteia) pe care l-am etalat cu ajutorul baghetei Drigalski.. Aceste operaii le-am
efectuat n condiii aseptice la hota n flux laminar.
Pentru a favoriza dezvoltarea coloniilor, plcile nsmnate au fost introduse la incubator la 30 0 C,
timp de 72 h.
ZIUA 6- 16.07.2012
EXPRIMAREA REZULTATELOR PROBELOR PRELEVATE DE PE SUPRAFEE
Cu ajutorul unui colony counter am numrat coloniile aprute pe plcile nsmnate. Rezultatele
obinute le-am introdus n formula : Ns/cm2=( N x F x D)/A i astfel am calculat numrul de uniti
formatoare de colonii / cm2 pentru fiecare suprafa testat.
Ulterior am realizat prelucrarea datelor obinute, putnd astfel s compar rezulatatele nregistrate n
diferite ncperi i pe diferite suprafee, precum i corelarea acestor date cu gradul de circulare sau
utilizare al camerelor i suprafeelor de lucru.
Fotografii din timpul zilei 6 de practic n anexa 4.
Rezultatele probelor prelevate de pe suprafee aici.

Raport de practic

ZIUA 7- 17.07.2012
RECOLTARE PROBE AER
Pentru recoltarea probelor de aer am folosit metoda gravimetric ce const n expunerea plcilor Petri
deschise n anumite puncte stabilite iniial i pentru o anumit perioad de timp (n cazul determinrilor
realizate de ctre mine expunerea a fost de 10 minute).Plcile expuse conineau mediul TSA+LT.
Scopul acestei analize a fost determinarea ncrcturiii microbiene a aerului n condiii normale de
lucru , n timpul programului, motiv pentru care ncperile au fost circulate ca de obicei, a existat contact
cu exteriorul i n unele camera a funcionat aerul condiionat.

Fotografii din timpul zilei 7 de practic n anexa 5.

ZIUA 8- 18.07.2012
VERIFICAREA CONFORMITII BALANELOR ANALITICE
Am realizat verificarea conformitii a dou balane analitice: model 1 cu 4 zecimale i model 2 cu 3
zecimale . Pentru aceasta am folosit o serie de etaloane de 500 mg, 200 mg, 100 mg, 50 mg, 20 mg (1), 20
mg (2), 10 mg, 5 mg, 2 mg (1), 2 mg (2) i n plus pentru cea cu trei zecimale un etalon de 200 g. Am
calculat abaterea experimental fcnd diferena ntre valoarea indicat de balan i valoarea
convenional a maselor. Am urmrit ca abaterea experimental s fie situat ca valoare sub abaterea
experimental total. n cazul n care majoritatea etaloanelor au respecatat aceast cerin balana a fost
declarat conform n caz contrar a fost declarat neconform.

Fotografii din timpul zilei 8 de practic n anexa 6.

ZIUA 9- 19.07.2012
Am ajutat la trecerea unor date tehnice n format electronic. n felul acesta m-am familiarizat cu modul
n care se ine evidena subiecilor implicai n studiile desfurate n cadrul laboratorului n care mi-am
realizat stagiul de practic.
ZIUA 10- 20.07.2012
EXPRIMAREA REZULTATELOR PROBELOR DE AER
Pentru exprimarea rezultatelor probelor de aer am introdus numrul de colonii identificate pe plcile
nsmnate n formula de calcul Omellansky: N/m3 aer = (n x 10000)/S x K. Astfel am determinat NTG
din diferitele ncperi i am corelat aceste rezultate cu cele obinute anterior la testarea NTG de pe
diferitele suprafee.

Rezultatele probelor de aer aici.

DETERMINAREA NTG DIN H2O

Am realizat nsmnri pentru determinarea NTG din 3 probe de ap : ap de pu (AP), ap robinet
(AR), o marc de ap plat din comer (AF). Volumul de lichid cu care am nsmnat a fost 1 ml, iar

Raport de practic

etalarea am facut-o cu bagheta Drigalsky. Toate aceste operaii au necesitat condiii aseptice motiv pentru
care am lucrat la hota n flux laminar.
Pentru a asigura dezvoltarea coloniilor am plasat plcile Petri cu mediu TSA+LT la incubator pentru
72 h, la 300 C.

Fotografii din timpul zilei 10 de practic n anexa 7.

ZIUA 11- 23.07.2012

EXPRIMAREA REZULTATEALOR PROBELOR DE AP
Cu ajutorul unui colony counter am determinat numrul de colonii aprute pe plci i am calculat NTG
din probele analizate.

Rezultatele probelor de ap aici.

TESTARE DEZINFECTANI
Am testat 3 dezinfectani. Pentru aceasta am pregtit eprubete cu cte 3 mL soluie PBW pentru
prelevare i eprubete cu cte 9 mL soluie PBW pentru realizarea de diluii seriale. Am prelevat probe
nainte i dup aplicarea dezinfectanilor pentru a putea urmrii eficacitatea acestora.Pentru prelevare am
folosit tehnica Williamson-Kligman descris n protocolul de lucru.
Plcile nsmnate au fost puse la incubator pentru 2 zile, la 30 0C.

Fotografii din timpul zilei 11 de practic n anexa 8.

ZIUA 12- 24.07.2012

Am ajutat la realizarea cureniei periodice n laboratorul de microbiologie, n vederea meninerii sub
control a numrului de germeni , diminund n acest fel posibilitatea contaminrii probelor care se
lucreaz n laborator. Astfel suprafeele i spaiile de depozitare a ustensilelor au fost dezinfectate,
pavimentul de asemenea, iar la finalul programului de lucru a fost pornit lampa UV pentru o distrugere
ct mai complet a germenilor.
ZIUA 13- 25.07.2012
EXPRIMAREA REZULTATELOR TESTRII DEZINFECTANILOR
n urma numrrii coloniilor aprute pe plcile Petri nsmnate cu dou zile nainte am putut calcula
numrul de UFC/cm2 nainte i dup aplicarea de dezinfectani ceea ce mi-a permis realizarea unor
comparaii ntre dezinfectani i desemnarea dezifectantului cu cea mai mare eficacitate.

Rezultatele testrii dezinfectanilor aici.

ZIUA 14- 26.07.2012

Raport de practic

Trecerea de date n format electronic. Datele tehnice sunt pstrate n dosarul fiecrui subiect, ns sunt
trecute i n format electronic. Trecerea n format electronic se realizeaz cu ajutorul programului de
calcul tabelar Excel.
ZIUA 15- 27.07.2012
Verificarea caietului de practic de ctre tutore i susinerea colocviului de practic cu responsabilul de
pratic.
3.OBSERVAII PERSONALE

Am ataat raportului de practic fotografii din timpul zilelor de practic;

Am ataat de asemenea i rezultatele obinute n cadrul activitilor practice desfurate;
Pentru prelevarea probelor n timpul practicii n vederea determinrii gradului de sanitaie al
suprafeelor i a numrului de UFC/m3 aer s-au meninut condiiile normale de lucru (contact
cu exteriorul, instalaie de climatizare pornit), scopul fiind aproximarea numrului de UFC
existent n ncperi n mod normal i nu verificarea eficienei dezinfeciei din ncperi situaie

n care contactul cu exteriorul nu ar mai fi trebuit s existe deoarece ar fi viciat rezultatele.

Prin compararea rezultatelor obinute n cazul probelor prelevate de pe suprafee i a celor
prelevate din aer am constatat existena unei corelaii ntre acestea . Astfel n ncperea n care
am determinat cel mai mare numr de UFC la nivelul suprafeei de lucru i al pavimentului am
determinat i unul din cel mare UFC n aer , aceasta fiind depit doar de o ncpere mai

circulat n ceea ce privete numrul UFC din aer.

n cazul testrii dezinfectanilor cel mai eficient s-a dovedit a fi Bixol-ul.

4.CONCLUZII
La finalul stagiului de practic pot afirma c stagiul de practic:

A fost benefic pentru instruirea i dezvoltarea mea n vederea inseriei pe piaa muncii pe viitor;
Mi-a permis dezvoltarea de noi competene i consolidarea celor dobndite pe parcursul

facultii;
Mi-a oferit posibilitatea de a lua contact cu documentaia necesar pntru a menine un laborator
n conformitate cu legea, precum i cu munca necesar pentru acreditarea acestuia, oportunitate
pe care nu am avut-o anterior i care m-a ajutat s m familiarizez i cu aceast parte a muncii
din laborator extrem de important pentru buna funcionare a acestuia i pentru asigurarea

credibilitii rezultatelor studiilor realizate la nivelul su;

Mi-a oferit posibilitatea de a lucra practic, punnd n aplicare ceea ce am studiat n timpul
facultii n special la disciplina Microbiologie, dar nu numai, ns faptul c am lucrat cu un
numr de probe mai mare, c am fost nevoit s realizez centralizarea rezultatelor obinute i
interpretarea acestora a fost benefic pentru acomodarea mea cu munca pe care o presupune

Raport de practic

realizarea unui studiu amplu precum cele realizate la nivelul laboratorului n care am derulat

stagiul de practic;
Faptul c tutorele de practic mpreun cu echipa din cadrul laboratorului de microbiologie, miau permis s m implic ntr-un numr mare de activiti practice m-a ajutat s mi dezvolt mai
mult capacitatea de a lucra n echip, spiritual de iniiativ i mi- a facilitate adaptarea la condiii
noi i diverse de munc.