03 Structura Celulei

Celula
unitatea vie fundamental a oricrui organism

ca ntregul organism celula exprim caracteristicile de
baz ale vieii
folosete nutrienii din mediu pt a obine energie
poate crete; se poate reproduce
rspunde la stimulii din mediu

lumin
cldur/frig
substane chimice
poate suferi mutaii genetice

supravieuire
apariie de noi specii etc.
Celula procariot
Celula
prima form de via de pe Pmnt
celula primitiv asemntoare cu cele mai simple bacterii de
azi
celula fr sistemul complex de membrane procariot
celula cu membran nuclear i reticul endoplasmic
eucariot
virusurile evoluie regresiv

cteva gene protejate de un nveli proteic

fr/puine enzime proprii
depind de metabolismul energetic al celulei gazd
Bacterii., Alge albastre
Fungi, alge verzi, protozoare, plante,

animale superioare
Perete celular
Rigid: mucocomplex
Rigid: chitin (fungi), celuloz (alge

verzi, plante superioare), absent (celule
animale)
Nucleu
Primitiv, netipic (nucleoid)
Tipic, cu nucleol
Membrana nuclear
Absent
Prezent
Cromozom
Unic, molecul circular

ADN, haploid
> 1, nr. constant pentru specie
Diviziune
Direct (amitoz)
Indirect (mitoz sau cariokinez)
nmulire sexuat
Rar i de tip particular
Frecvent
Cureni citoplasmatici
Abseni
Prezeni
Reticul endoplasmic
Absent; mezozomi
Prezent, organizare caracteristic
Mitocondrii
Absente
Prezente
Organe de locomoie
Facultative (cili)
Facultative (cili sau flageli)
Micare amoeboid
Absent
Perete rigid absent;

Fr perete rigid prezent
Celula
microorganisme
n medicin
important cunoaterea structurii i nelegerea
diferenelor de structur i metabolism a

Celula eucariot
Organisme
celulare
acelulare
diferitelor tipuri de celule

diferitelor categorii de microorganisme
viroizi
PROCARIOTE
EUCARIOTE
prioni
virusuri
explicarea fenomenelor patologice

explicarea efectelor terapiei medicamentoase
chemoterapia distruge microorganismele
chemoterapia nu distruge celula uman sntoas
archaea
algae
bacteria
protozoa
cyanobacteria
fungi
EUCARIOTE
PROCARIOTE
STRUCTURA I MORFOLOGIA FUNGILOR

I PROTOZOARELOR
EUCARIOTE
EU adevrat
CARYO nucleu
ADN-ul celular este

nconjurat de membran
nuclear
Cross-section through a yeast

cell, showing the nucleus (N)
with nuclear pores (P),
mitochondrion (M), and
vacuole (V). The cytoplasm is
surrounded by the cell
membrane. The thick outer
portion is the cell wall.
(Lechavalier HA, Pramer D:
The Microbes. Philadelphia,
JB Lippincott, 1970.)
Dimensiuni
10-30 m
de 10 ori mai
mari dect
celula procariot
EUCARIOTE membrana celulara

membrana celular=membrana plasmatic=membran citoplasmic
mozaic format din proteine i fosfolipide

structur i funcie similar tuturor membranelor prezente
n celulele eucariote
Rol
separ componentele celulei de mediul extern
regleaz schimburile dintre celul i mediul extern
(permeabilitate selectiv)
A typical eucaryotic animal cell. (

BJ,
Wood DL: Memmlers The Human Body in
Health and Disease, 9th ed. Philadelphia,
Lippincott Williams & Wilkins, 2000.)
EUCARIOTE - nucleul
comanda central a celulei
unific, controleaz i integreaz funciile celulei
are 3 componente:
EUCARIOTE - nucleul
cromozomi

membran nuclear strbtut de pori prin care pot trece
molecule relativ mari

nucleoplasm matrice gelatinoas, tip de protoplasm
suspendai n nucleoplasm
molecule liniare de ADN i proteine
genele localizate de-a lungul moleculei de ADN
(genom=genotip)
codific proteine
rARN sintetizat n nucleol intr n compoziia
ribozomilor
tARN
caracteristice pt fiecare specie:
numrul i compoziia cromozomilor
numrul genelor de pe fiecare cromozom
EUCARIOTE citoplasma (citosol)
EUCARIOTE reticul endoplasmic
semifluid, gelatinoas
conine:
granule de stocare
reticul endoplasmic
ribozomi
complex Golgi
mitocondrii
lizozomi, etc.
aici au loc majoritatea reaciilor metabolice
sistem de membrane interconectate i aranjate s

formeze un sistem de transport alctuit din:
tubuli
saci plai
ME:
reticul endoplasmic rugos ribozomi ataai de partea
extern a membranelor
reticul endoplasmic neted nu are ribozomi ataai
EUCARIOTE - ribozomi
EUCARIOTE - ribozomi
18-22 nm
alctuii din ARN ribozomal i proteine
majoritatea proteinelor eliberate de reticolul

endoplasmatic nu sunt mature trec n complexul
Golgi maturare exercitarea funciei caracteristice.
rol n sinteza proteinelor eseniale

aglomerri de ribozomi poliribozomi (polisomi)
legai printr-o molecul de mARN.
fiecare ribozom alctuit din:
subunitate mare 60S
unii ribozomi de 80S
subunitate mic 40S
produi n nucleol transportai n citoplasm legai
prin mARN iniiaz sinteza de proteine
S unitate Svedberg
40S, 60S, 80S
coeficieni de sedimentare
Dr. Usanee Anukool, CMB-AMS, CMU
EUCARIOTE complex Golgi

comunic cu reticolul endoplasmic
completeaz transformarea proteinelor nou formate n
proteine mature, funcionale i mpachetarea lor n
vezicule:
depozitate n celul
excretate din celul exocitoz/secreie
EUCARIOTE lizozomi si peroxizomi

lizozomi:
vezicule mici derivate din complexul Golgi
1 m
conin lizozim i enzime digestive

descompun materialul strin ptruns n celul fagocitoz

intervin i n distrugerea celulelor deteriorate autoliz
peroxizomi
vezicule ncojurate de mebran unde se produce i se
descompune H2O2 n H2O i O2.
conin catalaz
prezeni n aproape toate celulele eucariote
predomin n hepatocitul mamiferelor
EUCARIOTE - mitocondria
fabrica de energie
0,5 1 m; lungime 7 m
aici are loc respiraia celular sinteza moleculelor de ATP
nr. mitocondrii / celul variaz
! Mitocondria i cloroplastul provin din bacterii care au
convieuit cu celule eucariote
EUCARIOTE - plastid
la celulele plantelor
organit n care se produce energie
structuri inconjurate de membran
conin pigmeni fotosintetici
sediul fotosintezei conversia energiei luminoase n
energie chimic
energie luminoas
CO2 i H2O
carbohidrai i oxigen
energie stocat n leg.chimice
EUCARIOTE - plastid
cloroplast
un tip de plastid
conine pigment fotosintetic verde clorofil
prezent n:

celulele plantelor
algelor
EUCARIOTE perete celular

structur simpl
celuloz n alge, plante
pectin
lignin
chitin fungi, exoschelet crabi, exoschelet crbu
sruri minerale n alge
rol:
rigiditate
form
protecie
EUCARIOTE - citoschelet
sistem de fibre alctuit din:
microtubuli
concavi, subiri, formi din subuniti proteice = tubulin
microfilamente de actin
filamente intermediare
rol:
structural: rigiditate, form
diviziune celular
contractilitate
motilitate etc.
EUCARIOTE flageli
organite de locomoie
celula eucariot
imobil
mobil

spermatozoid
protozoare flagelate
1 sau mai muli / celul

imprim micare de rsucire
EUCARIOTE cili
organite de locomoie
n raport cu flagelii sunt mai:
muli
scuri
subiri
celula eucariot mobil prin cili
celule ale organismului uman: celula ciliat tract respirator
protozoare ciliate
imprim micare coordonat, ritmic
PROCARIOTE
PROCARIOTE
de 10 ori mai mic fa de celula eucariot

structur simpl
citoplasma

Structura i morfologia celulei bacteriene
1 cromozom
ribozomi
alte particule
nu are sistem de mebrane interne
membrana citoplasmatic
elemente obligatorii
citoplasma
material nuclear
perete
elemente facultative
perete celular
capsul, flageli, pili, spor
PROCARIOTE perete bacterian
PROCARIOTE
Grosime 15 35 nm; alctuit din proteine, lipide, hidrai de carbon
Format din:
elemente obligatorii
perete
citoplasma
material nuclear
elemente facultative
capsul
flageli
pili
spor
- strat bazal
= mucopeptid = mucocomplex = peptidoglican = murein
* reea
- macromolecule lungi, polizaharidice paralele
Acid N-acetilmuramic
N-acetilglucozamina (! Lizozim)
- legate prin puni transversale polipeptidice

Tetrapeptid D i L-aminoacizi ataat la acidul N-acetilmuramic
Pentapeptid puni ntre tetrapeptide (!penicilina)
STRUCTURA PEPTIDOGLICANULUI

- stratul structurilor speciale:
bacterii Gram-pozitive
(20%) polizaharide, acizi teichoici, MPZ
bacterii Gram-negative
(80%) lipopolizaharide = endotoxine + lipoproteine
(complex glucido-lipido-polipeptidic)
bacterii acido-alcoolo-rezistente
acid micolic, ceruri, proteine GM mic
Bacterial cell walls. (A) A portion of the Gram-positive bacterium, Bacillus fastidious;
note the cell walls thick peptidoglycan layer, beneath which can be seen the cell membrane.
(B) The Gram-negative bacterium, Enterobacter aerogenes; both the cell membrane and
the outer membrane are visible along some sections of the cell wall. (A: Volk WA, et al.:
Essentials of Medical Microbiology, 5th ed. Philadelphia, Lippincott-Raven, 1996.)
rolul peretelui bacterian

susine mecanic celula bacterian
menine forma bacteriei
asigur protecia celulei bacteriene
intervine n procesele de osmoz i difuziune
este sediul
unor antigene somatice
receptorilor specifici pentru bacteriofagi
particip la diviziunea bacteriei
imprim caracterele de tinctorialitate ale
celulei bacteriene
COLORAIA GRAM
PROCARIOTE membrana citoplasmatica
structur similar cu cea a eucariotelor

flexibil, foarte subire, vizibil la ME
alctuit dup modelul mozaicului fluid:
dou straturi de molecule fosfolipidice cu extremitile
hidrofobe spre interior i cu cele hidrofile spre exterior
ntre moleculele de fosfolipide se gsesc proteine
Invaginare - mezozomi: sistem membranos intracelular cu rol n
respiraie, diviziune etc.
PROCARIOTE membrana citoplasmatica

Rolul membranei citoplasmatice:
regleaz presiunea osmotic
controleaz procesele de difuzie pasiv
controleaz procesele de difuzie catalizate
enzimatic
conine enzime ale metabolismului respirator
intervine n creterea i diviziunea bacteriei
este locul de sintez al endotoxinelor
PROCARIOTE material nuclear

nu este delimitat de o membran difereniat
nu are nucleosol
alctuit dintr-un unic cromozom haploid
format dintr-o unic molecul de ADN dublu helicat,
nchis circular
PROCARIOTE citoplasma
sistem coloidal complex: proteine, glucide, lipide, ap,
minerale
structur granular:
ribozomi 15 nm; izolai sau ca reticul endoplasmatic; rol
esenial n biosinteza proteinelor celulare

granulaii de volutin (corpusculi Babe-Ernst, granulaii
metacromatice) polimetafosfai
granulaii (incluzii) de glicogen, amidon, lipide etc.
vacuole conin diferite substane n soluii nvelite de
membran lipoproteic = tonoplast

conine mari cantiti de ARN citoplasma intens bazofil
PROCARIOTE material nuclear

cromozomul bacterian are 850 6500 gene codificante pt:
enzime
proteine
rARN
tARN
coordoneaz toat activitatea celulei

capabil de autoreplicare
diviziunea nucleului precede diviziunea citoplasmei i a
peretelui - bacterii cu 2-4 nuclei ce apar ca gheme (sculuri)

de forme diferite ocupnd cam 1/10 din volumul bacteriei =
bacterii pe cale de diviziune
PROCARIOTE
material nuclear extracromosomal
plasmide
molecule mici de ADN dc, circular
libere n citoplasm / integrate n cromozom
conin 10 sute de gene
prezente n

celula fungic
celula bacterian

1 plasmid
multiple copii ale aceluiai plasmid
mai multe tipuri de plasmide
PROCARIOTE capsula
atenie!!
plastid
organit citoplasmatic prezent n unele celule eucariote
alge, plante
sediul fotosintezei
plasmid
mic molecul de ADN extracromozomal
prezente n majoritatea bacteriilor
PROCARIOTE capsula
capsul
substan gelatinoas, mucoid la exteriorul celulei
bacteriene, bine delimitat, vizibil la microscop
se formeaz
microcapsul (slime layer; glycocalix)

substan gelatinoas, mucoid la exteriorul celulei
bacteriene, n strat subire, evideniabil doar prin metode
chimice
compoziie n funcie de specie
n organismul gazd
pe medii n condiii optime
colonii M lucioase, mucoase, confluente
n general polizaharide
polipeptide Bacillus anthracis
substane capsulare diferite chimic la aceeai
specie tulpini diferite difereniere

serologic
PROCARIOTE capsula
ROL:
asociat cu patogenitatea tulpinii - factor al virulenei
protector fa de factori nocivi (fagocitoza, desicaia)
de adezin (permite aderarea unor bacterii)
barier protectoare fa de bacteriofagi
conine substane cu specificitate antigenic de specie
sau de tip (ag. K)
PROCARIOTE capsula
EVIDENIERE:
coloraie negativ cu tu de China, colargol
coloraii speciale (Hiss)
reacia de umflare a capsulei (Neufeld) cu seruri
polivalente i monovalente anti-capsulare
Coloraia MANEVAL pentru capsul corpul bacterian n

rou, materialul capsular clar (necolorat)
(necolorat)
Capsula bacterian coloraie negativ

Capsule stain. The capsule stain is an example
of a negative staining technique.
The bacterial cells and the background stain,
but the capsules do not. The capsules are seen
as unstained halos around the bacterial cells.
Klebsiella pneumoniae (x 1000)
Streptococcus pneumoniae (x 1000)
Streptococcus pneumoniae
PROCARIOTE flageli
PROCARIOTE flageli
organe de locomoie
subiri, fine, alungite, neramificate, flexibile, sinuoase
alctuii din flagelin protein complex similar cu
miozina muscular
reprezint antigenul flagelar H
1.
Corpuscul bazal
situat n citoplasm
imediat sub membrana
citoplasmatic
alctuit din
pornesc din citoplasma bacteriei, din corpusculul bazal
2 discuri M i P la bacterii
Gram-pozitive
4 discuri M, S, P, L la
bacterii Gram-negative
2. Crlig
3. Filament flagelar
PROCARIOTE flageli
peritrich
PROCARIOTE flageli
amphitrich
monotrich
lophotrich
PROCARIOTE flageli
PROCARIOTE pili (fimbrii)

formaiuni filamentoase, rigide, pericelular
prezente la unele bacterii Gram-negative
excepional la bacterii Gram-pozitive (Streptococcus
mutans)
mai scurte i mai subiri dect flagelii
nu au rol n mobilitate
originea n membrana citoplasmatic
alctuite din subuniti proteice - pilin
pili de sex (de conjugare)

0-4 buci / celul;
codificai de plasmide
fimbrii de adeziune
10-30 buci / celul;
codificate de gene de pe cromozom
fimbrii comune
50-400 buci / celul
Proteus vulgaris cell, possessing numerous short, straight pili and several longer, curved flagella; the cell is
undergoing binary fission. (Volk WA, et al.: Essentials of Medical Microbiology, 5th ed. Philadelphia,
Lippincott-Raven, 1996.)
PROCARIOTE spor (endospor)

format n unele bacterii
form de rezisten / supravieuire
sporulare
celul vegetativ
endospor
germinare
sporulare
copia cromozomului + cantitate mic de citoplasm
nconjurate de un nveli proteic gros

rezisteni la
cldur
frig
uscciune
substane chimice
supravieuiesc ani de zile n praf, pe sol
rezist la fierbere, la aciunea dezinfectantelor
se evideniaz cu coloraii speciale sau la ME
10

Spor central, sferic, mai mic
dect corpul bacterian
Spor central, ovalar, mai mare
Spor subterminal, ovalar, mai
mare dect corpul bacterian
Spor terminal, sferic, mai mare
Bacillus anthracis coloraie pentru

spori (x 1000)
Viroizi
Prioni
Virusuri
Viroizi
Viroizi
Caractere morfostructurale
ME: formaiuni liniare sau bastonae
lungime < 50 nm; diametru 2,5 nm
sunt molecule unice de acid nucleic:
Localizare

ARN, m.c., nchis covalent, circular

240 375 nucleotide
nu au capsid
nucleoli / nucleoplasm
cloroplaste
Replicare
probabil n nucleu
dependent de enzimele celulei gazd
n absena unui virus helper (dif. de v. defective)
ARN-ul viroizilor nu are capaciti codificante (absena
aparent a sintezelor)
ARN-ul viroizilor funcioneaz i ca enzim - ribozima
11
Prioni - generaliti
Viroizi
boli ale plantelor superioare
boala tuberculilor fuziformi ai cartofului
boli ale citricelor
nanismul i marmorarea crizantemelor
boli ale palmierului de cocos, ale roiilor etc.
vizualizare
hibridizare in situ
scanare cu laser
ME de baleiaj
Prioni - multiplicare
proteine capabile de autoreplicare, n absena
acidului nucleic
fac parte din grupul autofoldaze sau chaperone
ageni infecioi de natur proteic (PrPsc)

proteine anormale, infecioase
proteinaceous infectious particle
Henry Prusiner (1982) - 1997 premiul Nobel
structuri proteice, transmisibile i infecioase se
multiplic!! anuleaz dogma central

a biologiei moleculare
induc boli ale SNC la om i animale

encefalopatii spongiforme transmisibile (EST)
Prioni - Compoziie chimic, structur

Prion-proteina (PrPsc din scrapie sau PrPcj din BCJ)
este produsul de clivaj al proteinei precursor (PrPc)

protein normal de 33 35 kDa

glicoprotein secretat la suprafaa membranei plasmatice a tuturor
celulelor din organism

rolul proteinei precursor (PrPc)
interacioneaz cu receptorii de acetilcolin
n memorie
codific i conserv informaia
n reglarea somnului
protecie n stress-ul oxidativ
trofic pentru celulele Purkinje
cantitate mare pe suprafaa neuronilor

proteina precursor (PrPc) normal
compus din 254 aa
devine funcional dup
modificri chimice
modificri conformaionale
12
modificri chimice (7 modificri)
1. clivarea peptidului semnal N-terminal (cu 22 aa)
5. .
Formarea unui inel cu o legtur disulfidic
2. modificarea reziduului de arginin la nivelul
6. .
prin care se unesc dou reziduuri de cistein
codonului 25
3. .
4. .
Glicozilarea oligozaharidelor linkate de

asparagin la nivelul codonilor 181 i 198
de la nivelul codonilor 179 i 214

7. ndeprtarea peptidului hidrofob C-terminal (cu
20 aa) i fixarea, n schimb, a unui
glicozilfosfatidilinozitol


replierea proteinei configuraie secundar -helix

surs de energie (rol de enzim) chiar PrPc care catalizeaz
propria mpturire: rol de autofoldaz=protein chaperone
(Anca-Michaela Israil-Biologie molecular,prezent i perspective)

Prion-proteina (PrPsc) - anormal
protein anormal
greutate molecular 21 30 kDa
izolat din plcile amiloide cerebrale
morfologic structuri filamentoase
scrapie associated filaments SAF

compus tot din 254 aa
codificat de acelai ORF (open reading frame)
are acelai semnal peptidic format din 22 aa
diferite modificrile posttranslaionale chimice i
conformaionale
13

Prion-proteina
(PrPsc)
- anormal

1. clivarea peptidului semnal N-terminal (cu 22 aa)
(identic)
2. modificarea reziduului de arginin la nivelul
codonului 25 (identic)
3. .
4. .
Glicozilarea oligozaharidelor linkate de asparagin


5. .
6. .
Formarea unui inel cu o legtur disulfidic

prin care se unesc dou reziduuri de cistein
de la nivelul codonilor 179 i 214 - n
interiorul inelului , la nivelul codonului 189
la nivelul codonilor 181 i 198 rezult 400 forme
se evideniaz o substituire de aminoacid
diferite de proteine prionice
? rol n modificarea timpului de incubaie n scrapie??
? difer ologozaharidele linkate n cele 2 proteine??


Prion-proteina (PrPsc) anormal

7. ndeprtarea peptidului hidrofob C-terminal (cu
20 aa) i fixarea, n schimb, a unui

glicozilfosfatidilinozitol
8. Modificri la nivelul reziduului de arginin
Determin alte diferene posttranslaionale i de

metabolism
diferite fenotipuri de boli prionice
corespunztor codonului 37
Prioni - aspecte genetice

sinteza proteinei prionice codificat genetic
expresia PrPc umane
codificat de gena PRNP

situat pe braul scurt al cromozomului 20
cadru deschis de citire (ORF) 253 codoni (759 nucleotide)
mutaii punctiforme i inserii n codonii PRNP susceptibilitate

la encefalopatii spongiforme:
codonii 200, 210, 232 BCJ
codonii 117, 198, 217 BGSS
codonii 129, 178 IFF

replierea proteinei configuraie secundar -plisat (-sheets)
izoform proteic cu structur i funcionalitate anormal
14
Prioni - aciunea agenilor fizici i chimici

PrPsc = prion proteina anormal din scrapie
PrPc = prion proteina normal celular
alctuite din 250 aa

cele 2 proteine sunt izoforme
structura primar asemntoare
structura secundar difer:

PrPc tip -helix
PrPsc tip -plisat
PrPsc rezistent fa de:

proteaze
nucleaze
DN-aze
RN-aze
ageni inactivatori ai acizilor nucleici

radiaii ionizante
UV cu lungimi de und 254-280 nm
ageni chimici
aldehide
hidroxilamina etc.
PrPsc parial inactivat de:

cldur 1000C
fenol
clor
hidroxid de Na

rezistena PrPsc:
expresia alterrilor sale conformaionale deficiene de
transport la suprafaa celulei i de catabolizare

acumulare anormal n substana cerebral, formare de
agregate fibrilare, dezorganizarea substanei cerebrale
Prioni boli prionice
LA OM:
kuru
boala Creutzfeld-Jacob (BCJ)
boala Gerstmann-Strussler-Scheincker (BGSS)
varianta Creutzfeld-Jacob (v. BCJ)
insomnia fatal familial (IFF)
(Anca-Michaela Israil-Biologie molecular,prezent i perspective)
15
Prioni boli prionice
LA ANIMALE:
scrapie
Prioni Caracterele bolilor prionice

Clinic
encefalita transmisibil a curcilor
perioada de incubaie lung: 2 luni-30 ani
encefalita spongiform bovin (boala vacilor nebune)
simptomatologie neurologic
encefalita degenerativ a felinelor (pisici domestice)
evoluie lent, progresiv: luni-ani
boala cronic caectizant a cervideelor
fatal
encefalopatia ugulatelor exotice: nyala, antilopa

african n captivitate

Histopatologic
leziuni cerebrale degenerative
Exist sub forme interconvertibile de bastoane, complexe

proteice cu lipid-detergent i lipozomi
vacuolizare progresiv a
corpilor neuronali
dendritelor
axonilor
proliferare astrocitar excesiv

status spongious al materiei cenuii
detectare de structuri tubo-veziculare n prelungirile
sinaptice
(Anca-Michaela IsrailBiologie molecular,prezent i perspective)
Rspuns imun
ABSENT!!
gazda este imunocompetent fa de alte antigene!!
Rspuns imun n boala natural
sistemul imun nu se mobilizeaz fa

de prioni!!
tratamentul cu imunomodulatoare
sau imunosupresoare nu modific
evoluia bolii!!
absena sintezei anticorpilor specifici

absena rspunsului celular specific
absena oricror modificri calitative, cantitative
sau funcionale ale limfocitelor T i B

absena oricror modificri ale interleukinelor
16
Prioni cultivare - boala experimental
Prioni
inoculare
animale
izolare de
PrPsc din
creierul pacienilor i
animalelor bolnave
cimpanzei
i.cerebral
maimue
i.peritoneal
oareci
subcutan
digestiv
hamsteri
transmitere intraspecie sau interspecii, cu
material infecios cerebral
necesar
nurci
pisici
specificitate de specie a
proteinelor prionice
oi
adaptarea agentului prin pasaje
bividee etc.
repetate
suspensii de creier de la bolnavii de kuru

filtrate acelulare de la bolnavi cu BCJ
Prioni cultivare substraturi celulare
reprodus boala dup

laten de 1 an
Prioni patogeneza aspecte clinice

poarta de intrare
culturi de explanturi de creier inoculare cu ageni
kuru i BCJ infective 70 25 zile
oral
canibalism ritual
hrana bovinelor
lichidele de cultur inoculate la cimpanzei - boal

cale de diseminare nu este cert
replicare n ggl regionali ci limfatice ci
sanguine (trombocite infectate?) esut

reticulo-endotelial
fin de carne de oi, capre insuficient prelucrat termic
parenteral
injecii cu preparate contaminate
transfuzii
intervenii chirurgicale
transplant de organe etc.
cale de eliminare nu este cert

prioni la om
n snge i urin
n creier i cornee
centripet pe cale nervoas la roztoare
17

caracteristicile comune ale encefalopatiei
spongiforme:
Boala Creuzfeld Jacob

la 65 ani
oboseal, anxietate,
confuzie
caracter heredo-familial
transmitere vertical
predispoziie genetic
tablou clinic neurologic cu demen:
dezorientare, scderea memoriei, tulburri ale

intelectului i judecii
supravieuire
debut
perioada de stare
6 -12 luni
evoluie
fatal
diagnostic
mioclonii, ataxie
cerebeloas
EEG caracteristic
simptome piramidale
ex. histopatologic creier
simptome
extrapiramidale
demen progresiv
Western-blot PrPsc
degenerri neuronale
vacuolizri
acumulare de amiloid

cunoscut din sec. 18; frecven 1/1.000.000/an n lume

debut la 60 ani
Simptome:
3 mecanisme de producere aBCJ
pierderea treptat a strii de echilibru

pierderea treptat a capacitii de deplasare
infecie lent
pierderea memoriei
infecie sporadic
stare de confuzie
alterare genetic
dezorientare
demen
sfrit letal

3 mecanisme de producere a BCJ
infecie lent
1. infecii conjugale transmitere orizontal??
2. infecii n raport cu profesiunea:
mcelari:
familie cu 9 membrii 3 mcelari toi cu BCJ transmitere prin soluie de

3 mecanisme de producere a BCJ
infecie lent
contaminare iatrogen

continuitate?? (sngele este infecios nainte de apar.simpt)

fermieri:
personal medical:
3 cazuri de fermieri proprietari de animale cu ESB

oftalmologi, ORL-iti, neurochirurgi, ortopezi, anatomo-patologi
80 cazuri pn n prezent
transplant de cornee, de timpan
implantare de electrozi intracerebrali insuficient sterilizai
instrumentar chirurgical sterilizat prin metode clasice
administrare de hormon pituitar de cretere preparat din esut hipofizar
recoltat de la cadavru
1973-1985, Frana- 100.000 hipofize prelevate 41 cazuri
Anglia 17 cazuri
SUA - 15 cazuri
transfuzie de snge Australia femei cu tratament cu hormoni
gonadotropi n antecedente ulterior donatoare de snge
vaccinare cu vaccin antirabic preparat din esut cerebral de animal infectat
18

infecie sporadic
mecanism necunoscut

alterare genetic
10-15% din cazuri
1994 Anglia 53 cazuri vrste peste 75 ani
pn n 1996 100 familii cu asemenea cazuri
1994 Germania 115 cazuri vrsta medie 66 ani
legtur ntre unele mutaii de pe cromozomul 20 i boal
1996 Anglia 10 cazuri noi variant BCJ 19-41 ani
Boala GerstmannGerstmann-Str
Strussler
ussler--Scheincker
debut
la 45 50 ani
mai frecvent n Japonia
are caracter ereditar familial (form genetic a bolii)
variant a BCJ
simptomatologie similar cu BCJ
domin
ataxia spino-cerebeloas
demena
Insomnia fatal familial

descris n 1992 (Medori R.)
1994: 14 cazuri n Italia, Frana, Anglia, SUA
debut
la 35-60 ani;
evoluie
7-12 luni
caracter familial-ereditar:
29 cazuri ntr-o familie pe 5 generaii

simptome:
tulburri de ritm circadian;
pierderea total a somnului;
tulburri vegetative:
HTA, tahicardie, hipertermie etc.
alterarea progresiv a ateniei;
disfagie;
tulburri de echilibru;
mioclonii;
confuzie;
halucinaii;
crize epileptiforme.

evoluie
13 luni
diagnostic
histopatologic
atrofia selectiv a talamusului, n lipsa plcilor amiloide

nucleu anterior talamic

nucleu talamic medio-dorsal
19
Varianta nou a BCJ

descris n 1996
diferene:
debut la 29 ani
evoluie - 1 an
predomin simptome psihiatrice, demen final
fr modificri EEG caracteristice
cauze posibile:
transmitere de la bovine consum de carne de vit

infectat cu prioni (140 cazuri confirmate n Anglia)
Boala kuru
1957 Gajdusek - la triburile din Papua-Noua Guinee
canibalism ritual
femeile i copiii - consum de creier de la rudele decedate
clinic
ataxie cerebeloas (kuru = tremurturi)
rigiditate
caexie progresiv
evoluie letal
infectate prin consum de pulbere de concentrate

de carne din oi cu scrapie
Prioni dg. laborator

pp:
biopsii de esut cerebral (!! risc mare)
ganglioni spinali
nervi periferici
snge
l.c.r.
evidenierea PrPsc doar la conc. de 106 particule /gr.
esut cerebral
!! deja infecia a depit faza asimptomatic
evidenierea plcilor amiloide

biopsie cerebral + ex. histopatologic
! risc de rezultat fals negativ (zon neafectat)
ex. imuno-histo-chimic cu Ac. monoclonali
ggl. spinali, ggl. mezenterici, nervi periferici
Western-blot
LCR, snge, derivate din plasm, material bioptic
PET-blot
preparate fixate cu formol
detecteaz conc. mici de PrPsc, n faze incipiente
PCR, hibridizri, ELISA

Dg. de certitudine
postmortem evidenierea leziunilor histopatologice
cerebrale
Prioni epidemiologie
incidena bolii subevaluat
nu are raportare obligatorie
dg. de certitudine nu se practic ntotdeauna
incidena anual
1 -2 cazuri la 1 milion
rata medie a mortalitii
0,09 31 cazuri la 1 milion
raport brbai / femei 1,05 / 1
20
rezervor de infecie pt cazurile umane:
omul
animale??? (insuficient cunoscut)
transmitere pt. BCJ
iatrogen

transmitere pt. BCJ
caracter profesional
cu hormon pituitar de cretere (hipofiza cadavru infectat)

transplant de cornee sau dura mater
implantare de electrozi insuficient sterilizai
transfuzii de snge de la femei tratate anterior cu hormon
gonadotrop
vaccinare cu vaccin antirabic din esut cerebral infectat
transmitere pt. BCJ
oral
boala kuru
produse alimentare de la animale infectate???
canibalism
contact cu esut sau snge contaminat

mcelari
personal medical
neurochirurgi
oftalmologi
anatomopatologi
Prioni profilaxie
reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
transmisibile:
exclus de la donare

persoana cu antecedente familiale de boli prionice

persoana cu antecedente de tratament cu hormon hipofizar
manipulare atent a esuturilor i organelor

Prioni profilaxie
transmisibile:
sterilizarea instrumentarului
cldur: autoclavare de 2 ori la
ageni chimici

creier
snge
lcr
Prioni profilaxie
transmisibile:
134C cte 1h; 138C cte 18 min;

hipoclorit de Na 5 - 25% - 1h;
NaOH (1N 2N) 1h urmat de autoclavare la 121C 30 min.
incinerare esuturi, organe contaminate
interzis consum carne animal bolnav

interzis fina de oase carne n hrana animalelor
arderea animalelor bolnave
piese histopatologice
tratare cu formol apoi cu acid formic 96% - 1h (nu inactiveaz
complet agentul prionic!!)
21
Prioni
pentru viitor
elucidarea naturii prionilor
aprofundarea

aspectelor genetice
patogenezei
inter-relaiilor cu encefalopatia spongiform a animalelor
identificarea aspectelor epidemiologice care contribuie
la apariia encefalopatiei spongiforme i ntreruperea

acestora
Virusuri - definiie
Virion = virus = corpuscul elementar = corpuscul viral

unitatea viral, morfofuncional, complet, intact,
infecioas, cu diametrul cuprins ntre 18-400 nm, capabil
s infecteze bacterii, plante, animale, omul
Se gsesc extracelular:
nainte de a infecta celula gazd
dup ce s-au asamblat i au fost eliberai din celula n care
s-au multiplicat
Virusuri - dimensiune
Extrem de mici
18 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae)
V. hepatitei A, v. poliomielitei
40 80 nm
rotavirus, v. rubeolos, v. hepatitei B, v. hepatitei C
90 200 nm
V. herpetic, v. rujeolos, v. respirator sinciial, v. rabic
300 - 450 nm (Poxviridae)

V. variolic
Caractere generale ale virusurilor

Dimensiuni extrem de mici
Nu pot fi vzute la microscopul optic
Se evideniaz la microscopul electronic
Sunt filtrabile prin filtre bacteriologice
Au un singur tip de acid nucleic
ARN (ribovirusuri) sau
ADN (dezoxiribovirusuri)
Au structur extrem de simpl
peste 900 nm lungime, diametru 80 nm (Filoviridae)
Caractere generale ale virusurilor

Parazitism avansat
Nu au enzime proprii
Dependen cvasitotal de enzimele i mainria
replicativ a gazdei
Se multiplic doar n interiorul unei celule vii
VIRUS VEGETATIV particula viral aflat n celul,

deficitar n unele aspecte ale replicrii
PROVIRUS genom viral integrat n cromozomul celulei
gazd, multiplicndu-se sincron cu acesta
22
Morfologia virusurilor
sferic
v.gripal, v.herpetic, adenovirus, v. polio
cilindric, bastona
v. mozaicului tutunului, fagi
paralelipiped
v. variolic, v. vaccinia
cartu
v. rabic
filamentos
v. Ebola
sferic cu coad
bacteriofag
Structura virusurilor
GENOMUL VIRAL
I. genom viral
II. capsida
III. nveli viral
este alctuit dintr-o molecul de acid nucleic viral

FIE ARN RIBOVIRUSURI
FIE ADN DEZOXIRIBOVIRUSURI
poart informaia genetic necesar replicrii
determin capacitatea infectiv a virusului.
MRIMEA GENOMULUI VIRAL

apreciat n funcie de:
unitatea de mas molecular DALTON
nr. de nucleotide sau perechi de nucleotide din structurile
mono- sau bicatenare KILOBAZA
Dalton unitate de msur egal cu 10.000 pe scara greutilor
atomice??
Kilobaza unitate egal cu:
1.000 nucleotide pt str. monocatenare (kb)
1.000 perechi de nucleotide pt. str. bicatenare (kbp)

diferit de la o familie la alta referitor la:
greutatea molecular
1,5 x 106 Da Parvovirus
15 x 106 Da Poxvirus
numrul de nucleotide
5-7 kb - Papovavirus
231 kbp - Herpesvirus
compoziia n baze
23
STRUCTURA GENOMULUI VIRAL

nr. de gene cuprins n genom
9 structuri genice - HIV
12 structuri genice - v. gripal
240 structuri genice - v. vaccinia
virusuri ARN
1.
m.c. liniar:
2.
m.c. divizat
8 molec liniare inegale ARN
v.gripal

3.
v.gripal
m.c. cu 3 str. circulare

bunyavirus
nr. de proteine codificate dependent de mrimea

genomului
250 proteine - v. vaccinia
200 proteine - v. herpetic
2 6 proteine - Parvoviridae
4 proteine - Picornavirus
VHA
pies unic
picornavirus, VHA
4. d.c. cu 10-12 segm. separate
reovirus
5.
m.c. cu 2 segmente inegale

arenavirus
6. m.c. diploid:
2 molec. identice ARN legate

necovalent
retrovirusuri
reovirus
STRUCTURA GENOMULUI VIRAL

virusuri ADN
1.
m.c. liniar:
2.
m.c. circular
3.
parvovirus
fag X 174
d.c. cu secvene terminale

repetitive
adenovirus, herpesvirus
4. d.c. cu extremiti nchise covalent

5.
v. vaccinia
d.c. circular, nchise necovalent, cu

extremiti m.c.
hepadnavirus
FUNCIILE GENOMULUI
conine ntreaga informaie genetic viral
asigur infectivitatea viral
este capabil de autoreplicare n absena celorlali
constitueni virali
excepie: ARN viral izolat, m.c., sens negativ (virusuri cu
genom divizat othomyxovirus)
6. d.c. circular, nchise covalent i
suprarsucite
SV40, polyomavirus
CAPSIDA
complex de structuri proteice care mbrac acidul
nucleic viral
CAPSIDA
aspecte caracteristice ale morfogenezei capsidei
virale:
nr. mic de gene din genomul viral nu permite
are arhitectur i compoziie specifice fiecrui tip
viral
sintez de polipeptide cu diversitate mare

!! uniti structurale similare, grupate repetitiv, dup

modele geometrice similare, avantajoase capside cu
structuri foarte complexe
24
CAPSIDA
aspecte caracteristice ale morfogenezei capsidei
virale:
resurse limitate: cpii multiple sintetizate de o singur
gen
ntre subunitile proteice capsidale interaciuni

puternice realizeaz ansambluri stabile care
-
mbrac genomul viral

asigur integritatea genomului viral
TIPURI DE SIMETRIE ALE ARHITECTURII CAPSIDALE
cubic icosaedric
helicoidal
binar, helicoidal-icosaedric
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC

particula viral are form sferic sau contur hexagonal
virusuri ARN sau ADN
virusuri cu sau fr anvelop
cea mai eficient aranjare - maxim de volum cu minim
de material
capsomerele nu sunt echivalente cu subunitile
chimice de construcie
capsomere alctuite din 5, 6 subuniti chimice

vertex
reunete 5 fee PENTON
fiecare fa 5 subuniti
proteice PENTAMERI
muchii i fee
HEXONI

capsomerele organizate n jurul unor axe perpendiculare
caracteristice simetriei cubice icosaedru
poliedru cu:
20 fee triunghiuri echilaterale
30 muchii
12 vrfuri (vertex), orientate dup axe de simetrie rotaional de tip 2/3/5

* numrul capsomerelor specific pt. fiecare virus
* pentone ntotdeauna 12; variaz nr. de hexone
virusuri ADN parvovirus 32 capsomere; herpesvirus 162
virusuri ARN picornavirus 32 capsomere; reovirus 92
alctuii din 6 subuniti
proteice - HEXAMERI
* numrul capsomerelor specific pt. fiecare virus
* pentone ntotdeauna 12; variaz nr. de hexone
virusuri ADN parvovirus 32 capsomere; herpesvirus 162
virusuri ARN picornavirus 32 capsomere; reovirus 92
25
adenovirus
herpesvirus
Herpes nucleocapsid showing pentons at the vertices of the icosahedron

Zhou et al. Baylor College of Medicine Reference: Z. H. Zhou, B.V.V Prasad, J.
Jakana, F.R. Rixon, W. Chiu Baylor College of Medicine, Journal of Molecular Biology
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDAL
poliovirus
enterovirus

Nucleocapsida tubular cu gol axial
particula viral are form tubular, flexibil sau
rigid, de lungimi i diametre variabile

virusuri ARN
Disc de subuniti alturate
virusuri cu sau fr anvelop

capsomerele
subuniti chimice identice
aezate repetat pe spira acidului nucleic printr-o micare
de rotaie n jurul unui ax + translaie paralel cu acelai

ax
Cretere n spiral
Structur viral cilindric
26

Virusuri cu anvelop:
ntreaga structur rigid
form sferic structura tubular ncolcit n interiorul
virionului
Virusuri fr anvelop
form flexibil
aspect de bastona
v.mozaicului tutunului

spir regulat v.gripal

ghem neregulat v.paragripal
de cartu structura tubular orientat n spire strnse,
paralele v.rabic
Orthomyxoviridae
Paramyxoviridae
Rhabdoviridae
Capside cu simetrie binar, icosaedrichelicoidal

influenzavirus
Bacteriofagi
Cap
simetrie icosaedric
Coada
parainfluenzavirus
simetrie helicoidal
v. rabic
Simetrie complex
nveli viral
nucleoid viral
ADN viral cu proteine

asociate
Funciile capsidei virale

protejeaz genomul de aciunea factorilor externi, de
nucleazele celulare;
asigur forma virionului;
fixeaz virionii nuzi de receptorii celulari specifici;
subunitile structurale ale capsidei sunt antigene care
induc formarea i reacioneaz cu anticorpii
neutralizani.
-corpi laterali
-membran extern acoperit de tubuli
27
nveliul viral
peplos, anvelop
deriv din membranele celulei gazd:
din membrana plasmatic
v. gripal,
v. paragripal,
retrovirusuri
din membrana nuclear
herpesvirus
Rolul nveliului viral

protejeaz nucleocapsida;
intervine n iniierea ciclului infectant prin
recunoaterea i ataarea v. de receptorii celulari;
intervine n procesul de asamblare a noilor particule
virale;
intervine n activiti specific virale (hemaglutinare,
hemadsorbie, hemoliz, fuziunea membranelor
celulare);
Structura nveliului extern

structuri proprii virale (codificate de v.:
Structura nveliului extern

structuri derivate din celula gazd:
dublu strat lipidic constituit, n proporii diferite,

de fosfolipide, colesterol, glicolipide
Proteina M (matrix)
prezent la toate v. nvelite (excepie bunyavirus)
Proteina M
situat pe faa intern a nveliului viral
Spiculi
Funcii:

Hemaglutinine
Neuraminidaze
Profactori de fuziune
menine integritatea nveliului viral;
rol n asamblarea virionilor i eliberarea lor prin nmugurire;
implicat n transportul ionilor de H
28
Spiculii
de natur glicoproteic se afl pe suprafaa nveliului viral
n structura lor au fost identificate 3 zone:

Spiculii
Hemaglutininele

Zona de ancorare, situat pe faa intern a nveliului viral,

de natur peptidic;

Zona medie care strbate stratul bilipidic al nveliului

extern, format din lanuri polipeptidice;
prezente la v. nvelite:

bastonae prismatice cu baza triunghiular

nr. spiculilor de HA variaz n funcie de virus
funcii:
Zona extern, situat deasupra nveliului extern, alctuit

din glicolipide.

Spiculii
Neuraminidazele

prezente la orthomyxovirus, paramyxovirus

Glicoproteine ancorate n dublul strat lipidic
Funcii:
faciliteaz ptrunderea virusului n celula gazd prin
scindarea acidului sialic din glicoproteinele suprafeei

celulare

poate fi situat pe nveliul viral sau pe alte structuri ale

nveliului
prezent la herpes virus, VRS, paramyxovirus
form inactiv
Glicoprotein
Funcii:
intervin n procesul de ieire a noilor particule din celul

Alte componente asociate virionului

Enzimele virale
Sinteza de proteine-enzime codificate de virus este restrns
(nr. mic de gene din genomul v.)
Sunt proteine
Structurale - n nveliul viral
Nestructurale - asociate nucleocapsidei
rol interrelaie cu celula gazd

rol
replicarea genomului viral
sinteza de proteine virale
recunoatere receptori celulari, ataare i penetrare virus n

celul;
induc rspuns imun (antc. hemaglutinoinhibani)
rol n hemaglutinarea hematiilor i n hemadsorbie.
Spiculii
Profactorul de fuziune

Orthomyxovirus
Paramyxovirus
Rhabdovirus etc.
fuziunea nveliului viral cu membrana celular favoriznd

penetrarea virusului n celula gazd;
fuziunea membranelor celulare determinnd apariia de
sinciii;
diseminarea infeciei;
producerea hemolizei.
Cele mai importante enzime virale

Transcriptaze virale/replicaze
ARN-polimeraze ARN dependente

la v. ARN m.c. de sens negativ
paramyxovirus, rhabdovirus, orthomyxovirus
ARN-polimeraze virale ADN dependente

transcrierea ADN n ARNm
poxvirus
ADN-polimeraze virale ADN dependente

herpesvirus
29
Reverstranscriptaze
prezente la retrovirusuri, hepadnavirusuri
Endonucleaze
cliveaz catenele acizilor nucleici
prezente la: v. ARN: v. gripal; v. ADN: poxvirus
integreaz genomul viral n ADN celular
ADN-polimeraz ARN dependent

transcrie genomul ARN n ADN

ADN-polimeraz ADN dependent

integraz
integreaz ADN proviral n ADN celular
numai la retrovirusuri

Proteinkinaze, Timidinkinaze, Dezoxicitindezaminaze
accelereaz transcrierea i replicarea genomului viral
prezente la: herpesvirus
Tirozinkinaze
codificate de oncogene ale v. sarcomului aviar (v. Rous)
au ca int proteinele celulare implicate n reglarea ciclului
celular
la v. cu potenial oncogen
SV40, adenovirusuri
Enzime
necesare transcrierii i modificrilor ARNm
poliadenilat-polimeraze; metiltransferaze etc.
prezente la: poxvirus; reovirus

Proteinaze
cliveaz precursorii polipeptidici n proteine funcionale
i structurale
prezente la: picornavirus, togavirus, coronavirus,
flavivirus, calicivirus
4 clase:

serinproteinaze
cisteinproteinaze
aspartatproteinaze
metaloproteinaze
30

03 Structura Celulei

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

03 Structura Celulei

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Celula

unitatea vie fundamental a oricrui organism

poate suferi mutaii genetice

cteva gene protejate de un nveli proteic

Bacterii., Alge albastre

Fungi, alge verzi, protozoare, plante,

Rigid: chitin (fungi), celuloz (alge

Primitiv, netipic (nucleoid)

Unic, molecul circular

> 1, nr. constant pentru specie

Indirect (mitoz sau cariokinez)

Rar i de tip particular

Prezent, organizare caracteristic

Facultative (cili sau flageli)

Perete rigid absent;

diferitelor tipuri de celule

explicarea fenomenelor patologice

STRUCTURA I MORFOLOGIA FUNGILOR

ADN-ul celular este

Cross-section through a yeast

EUCARIOTE membrana celulara

mozaic format din proteine i fosfolipide

A typical eucaryotic animal cell. (

membran nuclear strbtut de pori prin care pot trece

molecule relativ mari

EUCARIOTE citoplasma (citosol)

EUCARIOTE reticul endoplasmic

sistem de membrane interconectate i aranjate s

majoritatea proteinelor eliberate de reticolul

rol n sinteza proteinelor eseniale

Dr. Usanee Anukool, CMB-AMS, CMU

EUCARIOTE complex Golgi

EUCARIOTE lizozomi si peroxizomi

descompun materialul strin ptruns n celul fagocitoz

EUCARIOTE perete celular

concavi, subiri, formi din subuniti proteice = tubulin

1 sau mai muli / celul

de 10 ori mai mic fa de celula eucariot

Structura i morfologia celulei bacteriene

PROCARIOTE perete bacterian

Grosime 15 35 nm; alctuit din proteine, lipide, hidrai de carbon

- legate prin puni transversale polipeptidice

PROCARIOTE perete bacterian

PROCARIOTE perete bacterian

rolul peretelui bacterian

PROCARIOTE membrana citoplasmatica

structur similar cu cea a eucariotelor

PROCARIOTE membrana citoplasmatica

PROCARIOTE material nuclear

esenial n biosinteza proteinelor celulare

membran lipoproteic = tonoplast

PROCARIOTE material nuclear

coordoneaz toat activitatea celulei

peretelui - bacterii cu 2-4 nuclei ce apar ca gheme (sculuri)

microcapsul (slime layer; glycocalix)

compoziie n funcie de specie

substane capsulare diferite chimic la aceeai

specie tulpini diferite difereniere

polivalente i monovalente anti-capsulare

Coloraia MANEVAL pentru capsul corpul bacterian n

Capsula bacterian coloraie negativ

Klebsiella pneumoniae (x 1000)

Streptococcus pneumoniae (x 1000)