Sunteți pe pagina 1din 133

1 INTRODUCERE N MICROBIOLOGIE

1.1 DEZVOLTAREA MICROBIOLOGIEI CA TIIN


Datorit nivelului general redus al cunotinelor asupra
naturii, pn la sfritul secolului al VIII-lea, n medicin au
dominat concepiile idealiste, metafizice, conform crora bolile
aveau cauze imateriale i reprezentau pedepse date omului de
ctre Divinitate, pentru ispirea unor pcate.
n perioada antichitii, datorit observaiilor filozofului grec
Aristotle (384-322 .e.n) asupra mutelor i viermilor s-au pus
bazele teoriei generaiilor spontane, acceptat, timp de cteva
secole, de majoritatea popoarelor din epoc. Adepii acestei teorii
afirmau c unele animalele mici i, mai trziu, organismele
microscopice, iau natere n mod spontan, n materia organic
aflat n descompunere.
Au existat ns i adepi ai unor concepii materialiste, ca
Tucidide din Atena (460-395 .e.n.) care a formulat teoria
contagiunii

intuind c bolile epidemice se datoreaz unor

particole vii, pe care le numea contagium animatum, Titus


Lucretius Carus (98-55 .e.n) care a afirmat c ciuma este
produs de germeni ai bolii i morii, Hippocrat (460-375
.e.n.), medicul grec care a elaborat teoria miasmelor,
conform creia epidemiile sunt produse de miasme morbide,
transmise prin aer sau ap i filozoful roman Marcus Terentius
Varro (116-27 .e.n.) care considera c n zonele palustre exist
fiine minuscule, denumite animalis minuta.
Mai trziu, n 1546, omul de tiin italian Girolamo
Fracastoro a sugerat c unele boli sunt produse de forme de

Taxonomie i nomenclatur microbian

via invizibile pe care le numea seminaria prima neputnd


ns s aduc argumente concrete prin care s infirme teoria
generaiei spontane care domina nc gndirea cercettorilor
naturii i medicilor din epoc.
Primele observaii privind existena microorganismelor
au fost posibile dup construirea lunetelor i microscoapelor. n
1590, opticienii Zacharias i Hans Jansen din Middleburg,
Olanda, au construit primul microscop, cu un tub de 2 metri
lungime. n scurt timp, tehnica construirii microscoapelor s-a
rspndit n Europa.
n 1665, englezul Robert Hooke, n lucrarea Micrographie,
scria despre structura i utilizrile microscoapelor atrgnd
atenia i asupra existenei unor organisme microscopice.
Microorganismele au fost observate, pentru prima dat,
de ctre Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723), un lefuitor de
lentile din Delft, Olanda, care a construit microscoape cu
putere de mrire de pn la 300 ori, cu care a examinat apa
de ploaie sttut, apa din reeaua de canalizare i tartrul
dentar. Acesta le-a desenat i le-a numit viva animalcula.
Microorganismele au fost introduse, dup anul 1700, n
clasificarea lumii vii a botanistul suedez Carol Linn (Sistema
Nature), sub numele de chaos infusorium, categorie separat
de cele 2 regnuri existente, vegetal i animal.
De-a lungul secolului al XVIII-lea i prima jumtate a
secolului al XIX-lea au existat muli cercettorii care, prin
experimentele lor, au ncercat s infirme teoria generaiei
spontane. Dintre acetia fac parte Francesco Redi, John

Taxonomie i nomenclatur microbian

Needham, Lazzaro Spallanzani, Theodore Schwan, Georg


Friedrich Schroder, Theodor van Dusch, Felix Pouchet, John
Tyndall, Ferdinand Cohn.
Un uria pas nainte a fost realizat prin descoperirile
epocale ale marelui savant francez Louis Pasteur (1822-1895),
considerat printele microbiologiei.
El a demonstrat c bacteriile nu se nasc spontan ci din
prini, c se multiplic i c pot fi distruse (1861), aducnd
argumente puternice n favoarea infirmrii teoriei generaiei
spontane. Ca urmare a studiilor efectuate asupra unor boli
epizootice i a unor boli epidemice umane (holera ginilor,
antraxul, ciuma, tuberculoza, febra tifoid, difteria) a reuit s
stabileasc relaia de cauzalitate ntre microbi i infecii
punnd bazele teoriei germenilor (1862). Acesta a preparat
vaccinuri (1885 - primul vaccin antirabic) i a demonstrat c
prevenirea infeciilor este posibil prin utilizarea flacoanelor
sterile, flambate n prealabil i acoperite cu dopuri de vat
sterile, introducnd, pentru prima oar, conceptul de asepsie
i metoda lucrului aseptic n bacteriologie. De asemenea, a
recomandat nclzirea sucului de struguri pentru distrugerea
formelor de via nainte de iniierea fermentaiei (procedeu
numit, n prezent, pasteurizare) i a introdus sterilizarea prin
cldur uscat n cuptorul Poupinel (la 180C, timp de 2 ore).
Descoperirile sale au revoluionat industria mtsii, vinurilor, a
berii i au demonstrat implicarea microbilor n bolile viermilor
de mtase i n fermentaia alcoolic. A realizat primul model
experimental de cercetare a unui virus prin inocularea n
creier de iepure, urmat de treceri repetate care au condus la

Taxonomie i nomenclatur microbian

atenuarea virulenei acestuia i a intuit c agentul turbrii este


de dimensiuni foarte mici deoarece nu l-a putut evidenia prin
microscopie optic.
Ca urmare a acestor descoperiri, chirurgul englez Joseph
Lister (1827-1912) a introdus, din anul 1867, asepsia (evitarea
infectrii plgilor prin acoperirea acestora cu pansamente sterile,
pulverizarea unei soluii de acid fenic n aerul slilor de operaie)
i antisepsia (folosirea antisepticelor, sterilizarea bandajelor i
instrumentelor) n chirurgie.
Denumirea de microb a fost utilizat, pentru prima oar,
n anul 1878, de ctre chirurgul francez Charles Emmanuel
Sdillot, cu ocazia unei comunicri tiinifice la Academia de
tiine din Paris.
O contribuie deosebit de important a avut i Robert
Koch (1843-1910), medic de ar i activ cercettor, considerat
printele

colii

germane

de

microbiologie.

Acesta

descoperit

agenii antraxului (1876), tuberculozei (1882) i

holerei (1883). De asemenea, a descris alergia tuberculoas i


imunitatea de premuniie, a reuit s cultive in vitro unele
bacterii pe medii de cultur solide utiliznd pentru prima
oar, ca agent de solidificare, agarul (geloza), un extract de
alge propus de Fannie Eilshemius (soia unui colaborator al
acestuia care l folosise la prepararea gemurilor), a introdus
frotiul (preparatul fixat) n practica microscopic i a realizat
modele de infecie experimental.
Postulatele formulate n 1882, care i poart numele, au
reprezentat argumente n favoarea teoriei germenilor i i-au
pstrat valabilitatea pn n zilele noastre:

Taxonomie i nomenclatur microbian

n organismul bolnavilor suferind de o anumit boal,


microbul care a determinat-o se gsete rspndit n
raport cu simptomele i cu leziunile observate.

Microorganismul poate fi izolat din corpul bolnavului i


crescut n culturi pure n laborator.

Inocularea microbului la un animal receptiv produce o


infecie asemntoare cu cea natural, acesta putnd
fi reizolat din corpul animalului infectat.

n a doua jumtate a secolului al XIX-lea, microbiologia a


aprut i s-a constituit ca tiin independent dintr-o
necesitate absolut, pentru a rspunde dezvoltrii societii
omeneti.
Factorii care au contribuit la apariia i consolidarea
acesteia n rile europene au constat n faptul c industria
mtsii era n criz datorit bolilor viermilor de mtase,
industria buturilor alcoolice (vin, bere) era afectat de perturbri
ale procesului de fermentaie, numeroase animale sufereau de
antrax iar n colectivitile umane erau nregistrate cifre ridicate
de morbiditate i mortalitate prin boli infecioase grave (difterie,
tuberculoz, holer, etc.) sau infecii postoperatorii sau postpartum (febr puerperal).
n aceast perioad, numeroi cercettori, majoritatea
colaboratori ai savanilor Pasteur i Koch, i-au adus aportul
la dezvoltarea bacteriologiei tiinifice. Au fost descoperite specii
noi (1879: Albert Neisser - Neisseria gonorrhoeae; 1884: George
Gaffky bacilul tific; 1884: Friederich L effler Corynebacterium
diphteriae; 1885: Theodor Escherich - Escherichia coli; 1886:
Albert Fraenkel Streptococcus pneumoniae; 1887: David Bruce -

Taxonomie i nomenclatur microbian

Brucella sp; 1887: Anton Weichselbaum - Neisseria meningitidis;


1889: Shibasaburo Kitasato - Clostridium tetani; 1892: William
Welch i George Nattal - Clostridium perfringens; 1894: Alexandre
Yersin i Shibasaburo Kitasato - Yersinia pestis; 1895: Jules
Bordet Bordetella pertussis; 1896: Emile von Ermengem Clostridium botulinum; 1897: Kiyoshi Shiga - agentul dizenteriei)
i toxine bacteriene (1884: Alexandre Yersin i Emile Roux - toxina
difteric), noi metode de sterilizare la cald (1884: Charles
Chamberland - autoclavul), de examinare microscopic (1878:
Ernst Karl Abb

- un nou condensator i examinarea cu

imersie, 1884: Hans Christian Gram - coloraia Gram;), de


cultivare a germenilor (1884: Fannie Eilshemius a propus
agarul ca agent de solidificare; 1887: Richard Petri - placa Petri),
de preparare a unor seruri i vaccinuri (1890: Albert Calmette
obine o tulpin atenuat de Mycobacterium tuberculosis; 1890:
Emil von Behring antitoxine difterice i tetanice).
Majoritatea microbiologilor de marc din aceast perioad
au aparinut colilor rus sau german. De menionat este
contribuia remarcabil a lui Ilia Mecinikov (1845-1916) care a
descoperit fenomenul de fagocitoz i inflamaia punnd astfel
bazele imunologiei.
n secolul al XX-lea s-au fcut progrese importante n
bacteriologie. Astfel, introducerea microscopiei electronice i a
tehnicilor cu izotopi radioactivi a permis observarea detaliilor
de structur ale bacteriilor. Astfel, au fost descoperite specii
bacteriene i chiar noi boli de etiologie infecioas.
Un alt important deschiztor de drumuri a fost Alexander
Fleming (1881-1955) care, n anul 1945, a descoperit penicilina,

Taxonomie i nomenclatur microbian

substan secretat de ciuperca Penicillium notatum i a artat


rolul acesteia n terapia infeciilor marcnd momentul nceperii
erei antibioticelor.
Utilizarea metodelor performante ale ingineriei genetice a
deschis noi perspective n microbiologia modern. Tehnicile de
recombinare genetic au permis aprofundarea cercetrii microbiologice i producerea de vaccinuri mai eficace sau de biomolecule care pot fi utilizate n scop terapeutic.
De asemenea, au fost efectuate numeroase remanieri n
ncadrarea taxonomic a germenilor, ca urmare a progreselor
geneticii moleculare (hibridrile de acizi nucleici, utilizarea
anticorpilor monoclonali, analiza secvenelor A.R.N. ribozomal
i a coninutului n guanin i citozin al bazelor A.D.N., etc.).
Tehnicile genetice (ex.: P.C.R. = polymerase chain reaction),
accesibile laboratoarelor performante, permit identificarea
rapid a agenilor patogeni n probele pacienilor.

1.2 CONTRIBUII ALE MICROBIOLOGILOR ROMNI


Pn la jumtatea secolului al XIX-lea, pe teritoriul
romnesc, dezvoltarea cultural a fost redus datorit invaziilor
i dominaiei otomane i a relaiilor feudale existente n epoca
respectiv. Din aceste motive, rile romne au fost bntuite de
numeroase epidemii (cium, holer, variol, etc.) de-a lungul
secolelor. n literatura de specialitate nu sunt menionate
contribuii romneti semnificative n aceast perioad istoric,
doar ncercri timide, empirice, de prevenire i combatere a
rspndirii acestora.
Medicul Victor Babe (1854-1926), fondatorul microbiologiei
romneti, cu o formaie iniial de anatomo-patolog care, devenit

Taxonomie i nomenclatur microbian

ulterior microbiolog, a abordat cercetarea microbiologic dintr-o


perspectiv nou, histo-patologic.
El a studiat relaiile dintre microorganisme i organismul
gazd precum i asociaiile microbiene intuind posibilitatea
folosirii antagonismului bacterian n tratamentul infeciilor. A
descoperit 2 specii de protozoare (Babesiella bovis 1888;
Babesiella ovis - 1892), a realizat un procedeu de colorare
vital a bacteriilor, a studiat capsula bacterian i a descris
corpusculii metacromatici ai bacililor difterici, patognomonici
pentru aceti germeni, numii ulterior corpusculii BabeErnst. De asemenea, s-a ocupat de introducerea vaccinrii
antirabice i a seroterapiei n Romnia (antirabic i antidifteric). Activitatea sa tiinific s-a concretizat n peste 1000
de lucrri. A participat la nfiinarea primului institut de
cercetri medicale din Romnia (1887) care astzi i poart
numele i a primelor laboratoare de igien i de bacteriologie.
Organizatorul colii romneti de microbiologie a fost
remarcabilul om de tiin Ion Cantacuzino (1863-1934). El a
studiat tuberculoza, holera, scarlatina i a pus bazele medicinei
preventive (prepararea de vaccinuri antiholerice, antitifoidice, antidizenterice i de ser antistreptococic).
Datorit lui Cantacuzino, Romnia a fost a doua ar din
lume, dup Frana, care a introdus vaccinul B.C.G., pentru
profilaxia tuberculozei, doar la 3 ani dup ce a fost descoperit
de ctre Albert Calmette i Camille Gu rin. n 1921, profesorul
Cantacuzino a fondat Institutul de Microbiologie din Bucureti
ce astzi i poart numele.

Taxonomie i nomenclatur microbian

1.3 IMPORTANA I SCOPURILE MICROBIOLOGIEI


Microorganismele sunt rspndite peste tot unde viaa
este posibil datorit capacitii lor crescute de adaptare la
condiii de mediu diferite, se caracterizeaz printr-o mare
diversitate i i exercit influena, n diferite moduri, asupra
societii omeneti.
Microbiologia (limba greac: mikros = mic, bios = via,
logos = vorbire) reprezint ramura biologiei care se ocup cu
studiul organismelor vii, capabile de multiplicare, prea mici
pentru a putea fi vzute clar cu ochiul liber.
Aceste forme minuscule de via, cu dimensiuni mai mici de
1 mm, sunt denumite prin termeni ca microb (limba greac:
mikros = mic, bios = via), organism microscopic (limba greac:
mikros = mic, scopein = a vedea) sau microorganism.
Din aceast categorie de organisme, vizibile prin microscopie
optic sau electronic, fac parte bacteriile, virusurile, protozoarele,
unele alge i fungi.
n secolul al XX-lea, microbiologia s-a dezvoltat progresiv
ca disciplin independent difereniindu-se treptat de celelalte
ramuri ale biologiei.
Obiectul microbiologiei este extrem de complex incluznd
cunoaterea structurii intime, a morfologiei, compoziiei chimice,
metabolismului i sensibilitii germenilor la diveri ageni fizici,
chimici i biologici, a relaiilor ntre microorganisme i gazdele lor,
a implicaiilor n patologia uman i animal, a mecanismelor de
declanare a proceselor morbide, a rspunsului imun antimicrobian i cutarea unor mijloace profilactice i terapeutice
ct mai eficiente.

Taxonomie i nomenclatur microbian

10

Microbiologia reprezint n zilele noastre una dintre cele mai


largi i mai complexe tiine biologice care include mai multe
specialiti derivnd din natura germenilor pe care este focalizat
activitatea sau domeniul principal al societii n care acestea au
aplicaie iar scopurile acesteia sunt de cercetare fundamental
sau aplicative.
n funcie de tipul microorganismelor studiate, s-au
constituit mai multe ramuri ale microbiologiei. Principalele sunt
bacteriologia, virusologia i micologia, la care, dup unii autori, se
adaug algologia i protozoologia.
Treptat, n cadrul microbiologiei s-au definit ramuri noi, din
ce n ce mai specializate, cu domeniu tot mai restrns de
cercetare, cum sunt:

morfologia microbian se refer la structura intern;

fiziologia microbian studiaz metabolismul, pn la


nivel celular i molecular;

ecologia microbian se ocup cu studierea relaiilor


dintre microbi i mediu;

taxonomia microbian realizeaz clasificarea, nomenclatura i identificarea germenilor;

genetica microbian studiaz funciile complexe ale


materialului genetic;

biologia molecular are ca obiect analizarea reaciilor


biochimice metabolice.

n ultimele decenii, importana microbiologiei a crescut


considerabil, printr-o mai larg utilizare n mai multe sfere de
activitate, de la medicina uman i veterinar, industrie,
agricultur pn la biologie cosmic. Acest lucru a fost posibil

Taxonomie i nomenclatur microbian

11

datorit descoperirilor remarcabile din genetic i biologie


molecular care au permis trecerea de la o simpl descriere a
bacteriilor la studiul proceselor din celula bacterian.
Aceste aspecte au condus la dezvoltarea biotehnologiei
care permite utilizarea tehnicilor biochimice i microbiologice
pentru rezolvarea unor probleme practice i obinerea de
produse necesare omului.
Microbiologia industrial are ca obiect utilizarea microorganismelor pentru obinerea unor cantiti foarte mari de
antibiotice (streptomicina, eritromicina, tetracicline, rifampicina,
polimixine, bacitracina, etc.), alimente (n special produse lactate
ca iaurtul, smntna, brnza), mediatori sau hormoni (insulin,
S.T.H. = hormonul de cretere, steroizi, factorul de necroz
tumoral, interferoni, interleukina 2, factorul VIII de coagulare,
plasminogen, streptokinaz), vaccinuri mai eficiente, aminoacizi,
vitamine, substane chimice rezultate din fermentaie (acid lactic,
acid acetic, etanol, aceton), etc.
n acest context, rolul microbiologiei medicale (uman
sau veterinar) este foarte important deoarece permite izolarea
i identificarea germenilor patogeni din probele bolnavilor sau
purttorilor sntoi precum i testarea comportamentului
fa de diferite substane antimicrobiene a acestora n vederea
unei antibioterapii inite, elaborat pe baze tiinifice.
Microbiologia agriculturii se ocup, n principal, cu studiul
interrelaiilor ntre microbi i culturile agricole (n scopul creterii
productivitii), creterea fertilitii solului, combaterea insectelor
i a bolilor infecioase ale plantelor. Tehnicile de inginerie genetic

Taxonomie i nomenclatur microbian

12

permit mbuntirea calitativ a plantelor prin obinerea unor noi


proprieti (rezisten la infecii bacteriene sau virale, insecticide
sau ierbicide, modificarea coninutului n ulei, aspect mai plcut,
aciune insecticid, etc.). Aceasta se realizeaz prin inserarea unor
gene bacteriene.
Microbiologia sanitar are ca obiect controlul microbiologic
al aerului, apei, alimentelor, solului, etc. i gsete soluii de
mbuntire a calitii mediului i combatere a efectelor
polurii, cu ajutorul microorganismelor.
Viitorul microbiologiei este luminos deoarece progresele
remarcabile din domeniul recombinrii A.D.N. i ingineriei
genetice vor asigura o dezvoltare rapid a acesteia, cu impact
important asupra societii umane.

2 TAXONOMIE I NOMENCLATUR MICROBIAN


2.1 SISTEMATICA LUMII VII
Prima ncercare de clasificare a lumii vii a fost realizat
n secolul al VIII-lea de ctre suedezul Carol Linn (Sistema
nature), care a mprit iniial vieuitoarele n dou regnuri,
vegetal i animal.
ncepnd cu 1700, ca urmare a observaiilor lui Antoni
van Leeuwenhoek, organismele microscopice au fost introduse
n clasificarea lui Linn ca o categorie separat, numit chaos
infusorium. Acest fapt nu a influenat n mod semnificativ
dezvoltarea microbiologiei deoarece nu s-au luat n discuie
implicaiile patogenice ale acestora.

Taxonomie i nomenclatur microbian

13

n 1786, microscopistul danez Otto Frederich M ller a


ncercat s realizeze o prim clasificare a bacteriilor.
Mai trziu, n anul 1866, Ernst Haeckel a definit, alturi
de regnurile Plantae i Animalia constituite anterior, un al
treilea, numit Protista, n care a inclus toate microorganismele
unicelulare.
n 1950, dup introducerea microscopiei electronice, au
fost separate din regnul Protista, n care au rmas protoarele
i algele unicelulare, microorganismele lipsite de membran
nuclear care au fost introduse n al patrulea regn, denumit
Procaryotae sau Monera.
n 1967, Robert Whittaker a descris un al cincilea regn,
numit Fungi sau Myceteae care includea organisme cu mod de
nutriie absorbativ.
Dup anul 1980, ca urmare a analizei secvenelor oligonucleotidice din A.R.N.-ului ribosomal, Carle Woese a realizat o
clasificare a organismelor vii numit arborele vieii, cu ramurile
principale Bacteria, Archaea i Eucarya, corespunztoare unor
uniti taxonomice superioare regnului, numite domenii.
Conform acestei clasificri, procariotele sunt divizate n 2
domenii, Bacteria i Archaea iar eucariotele sunt incluse, n
totalitate, n domeniul Eucarya.
n prezent, sistematica organismelor vii este mult mai
complex i este supus permanent unor remanieri profunde.
Astfel, se disting urmtoarele categorii:
I. Microorganisme acelulare (subcelulare)
A. Bacteriocine corpusculare

Taxonomie i nomenclatur microbian

14

B. Ageni infecioi subvirali (flies: viroizii, virusoizii,


transposomii, prionii)
C. Regnul Vira (virusuri)
II. Microorganisme unicelulare
A.

Procariote (scotobacterii, fotobacterii)

B. Eucariote (plante inferioare, fungi, protozoare)


III. Macroorganisme
A. Regnul vegetal (plantele superioare)
B. Regnul animal (helmini, artropode)
n prezent, se consider c microorganismele au reprezentat
primele forme de via de pe Terra. Pe parcursul evoluiei vieii,
s-au selectat variate specii, capabile s se dezvolte n cele mai
diferite condiii de mediu, fapt care explic numrul imens i
larga rspndire a acestora pe glob.
Primele au aprut procariotele (limba greac: pro = nainte,
karyon = nucleu). Cele mai vechi rmie fosilizate ale lor,
descoperite pn n prezent, dateaz de aproximativ 3,8 miliarde
de ani. Dup aproape 2 miliarde de ani de evoluie au aprut
organisme eucariote (n limba greac: eu = adevrat, karyon =
nucleu), cu structur mai complex.
n prezent, practic toate formele de via cunoscute sunt
procariote sau eucariote. Virusurile nu fac parte din nici una
din aceste categorii deoarece nu sunt vii. n schimb, sunt
particule infecioase.
Termenii procariote i eucariote au fost propui n
1937 de ctre Edward Chatton. Acetia fceau referire la tipul
de nucleu celular al celor dou categorii de organisme, prima
descoperit i cea mai important deosebire ntre acestea. n

Taxonomie i nomenclatur microbian

15

timp, cercettorii au constatat c, n realitate, exist diferene


de structur mult mai profunde ntre celulele de tip procariot
i cele eucariote.
Structura celulei procariote este prezentat schematic n
figura urmtoare:

Figura 1 - Structura celulei procariote


1.
2.
3.
4.
5.

material nuclear
citoplasm
ribozom
incluzie
mezozom

6.
7.
8.
9.
10.

mb. citoplasmatic
perete celular
capsul
pili
cili

2.2 NOIUNI DE TAXONOMIE MICROBIANA


Iniial, clasificarea microbilor a fost realizat pe baza unor
caractere fenotipice (morfo-tinctoriale sau culturale).
Mai recent, au fost luate n discuie i criterii genetice
cum sunt raportul citozin/guanin i secvenele nucleotidice

Taxonomie i nomenclatur microbian

16

din A.D.N., secvenele din A.R.N. ribosomal, diverse enzime,


ceea ce a condus la schimbarea unor ncadrri taxonomice.
Termenul de clasificare (limba greac: klesis = distribuie;
limba latin: classis = grupare, adunare, diviziune) se refer la
gruparea fenomenelor, obiectelor, substanelor sau fiinelor pe
baza anumitor criterii.
Taxonomia (limba greac: taxis = ordine, aranjare) este tiina
care se ocup cu clasificarea organismelor. n sens mai extins,
n prezent, printre obiectivele acesteia este inclus i stabilirea
denumirii tiinifice (nomenclatura).
Iniial s-a folosit clasificarea n chei (cheia = un grup de
indivizi cu caractere comune evidente), ca i pentru obiecte,
care a condus la erori n cazul fiinelor.
Clasificarea pe baze filogenetice care are la baz taxonul
= unitatea taxonomic (grup de indivizi asemntori care au
un strmo comun) s-a dovedit a fi mult mai judicioas.
n prezent sunt utilizate mai multe uniti taxonomice
care sunt, n ordine descresctoare a mrimii lor, regnul, diviziunea (dup unii autori), clasa, ordinul, familia, tribul (dup
unii autori), genul i specia.
Specia este unitatea taxonomic de baz, constituit din
indivizi cu caractere comune care i difereniaz de alte microorganisme (caractere cu specificitate de specie). n cadrul
acesteia se descriu subspecii i tipuri (serotipuri pe baza
caracterelor antigenice, lizotipuri n funcie de sensibilitatea
la bacteriofagi, biotipuri dup activitatea biochimic).

Taxonomie i nomenclatur microbian

17

Genul, taxonul imediat superior speciei, identificat n mod


curent n practica diagnosticului bacteriologic, include specii cu
anumite caractere comune sau asemntoare.
Specia-tip a unui gen este cea care reprezint cel mai bine
caracterele care au stat la baza constituirii acestuia.
Tulpina reprezint o populaie microbian manipulat de
ctre microbiologi ce include un grup de indivizi cu unul sau
mai multe caractere comune care i difereniaz de alte populaii
din aceeai specie (caractere cu specificitate de tulpin).
Apariia unor noi variante de tulpini n cadrul unei
specii poate fi acceptat doar dup compararea acestora cu o
tulpin de referin.
Tulpina de referin este o tulpin bacterian de interes,
cultivat n condiii standard, cu caracterele biologice studiate
cu mult rigoare tiinific, pstrat n colecii, menionat n
cataloage i publicaii de specialitate i livrat de laboratoarele
centrale ctre cele din reeaua sanitar pentru a fi utilizat, n
principal, la controlul mediilor sau rondelelor de antibiotice.
Termenul bacteria prin care sunt denumite microorganismele procariote, provine din limba latin i este pluralul
cuvntului bacterium care nseamn bastona.

2.3 NOMENCLATURA MICROBILOR


Nomenclatura microbian (limba latin: nomen = nume)
const n stabilirea numelui microorganismelor, pe baza unor
reguli standard.
Astfel, denumirea tiinific este format dintr-un substantiv
din limba greac sau latin ce denumete cel mai evident caracter

Taxonomie i nomenclatur microbian

18

al microbului, latinizat printr-un sufix care este ales pentru


ordin (ex.: Eubacteriales), aceae pentru familie (ex.: Enterobacteriaceae) i um, us, a sau as pentru gen (ex.: Clostridium, Streptococcus, Leptospira, Pseudomonas).
Denumirea speciei, este format din 2 cuvinte. Primul,
nceput cu o majuscul, reprezint genul din care face parte
bacteria iar al doilea cuvnt, scris cu litere mici, denumete un
caracter reprezentativ (Staphylococcus aureus), indic boala pe
care bacteria o determin (Neisseria meningitidis), numele persoanei
care a descoperit-o (Staphylococcus schleifferi), regiunea din
organism (Campylobacter jejuni) sau geografic (Lactobacillus
sanfrancisco) unde a fost gsit.
Cnd sunt descoperite specii microbiene noi, intervine un
grup internaional de specialiti care verific dac procedura
standard de stabilire a denumirii a fost respectat i dac
acesta nu a mai fost utilizat anterior.
n literatura de specialitate, dup ce numele tiinific al
speciei a fost scris o dat complet, sunt admise prescurtri ale
primului cuvnt care denumete genul (ex.: S. pyogenes).
Dac n practica diagnosticului bacteriologic nu se poate
realiza identificarea pn la nivel de specie, alturi de numele
genului se adaug prescurtarea sp. care nseamn specie
neidentificat (ex.: Salmonella sp.).
Unele dintre microbii implicai n patologie au denumiri
uzuale (ex.: S. pneumoniae pneumococul, N. meningitidis
meningococul, N. gonorrhoeae gonococul, P. aeruginosa
bacilul piocianic, C. diphteriae bacilul difteric, Bacillus
anthracis bacilul crbunos).

Taxonomie i nomenclatur microbian

19

3 MORFOLOGIE I STRUCTUR BACTERIAN


3.1 MORFOLOGIA BACTERIILOR
Pentru studierea bacteriilor, n laboratorul de bacteriologie
sunt utilizate, de obicei, frotiuri (preparate fixate i colorate) care
permit evidenierea caracterelor morfo-tinctoriale ale acestora:
1) Dimensiunile celulei bacteriene
Dimensiunile bacteriilor sunt variabile n raport cu genul
sau specia, condiiile de dezvoltare i vrsta culturii. n medie,
acestea au o lungime de 3-6 m i o grosime de 0,5-1 m.
Exist i cazuri particulare de bacterii cu dimensiuni extrem
de mici (Francisella tularensis 0,3-0,7/0,2 m) sau foarte
mari (Caryophanon latum 6-30 m/2,5-3 m).
Datorit dimensiunilor foarte mici, raportul ntre suprafaa
i volumul bacteriilor este mare comparativ cu alte organisme,
ceea ce permite existena unor schimburi intense ntre acestea i
mediul exterior.
2) Forma bacteriilor
Bacteriile prezint forme diverse, caracteristice genului
sau speciei din care fac parte. Acestea se datoreaz peretelui
celular, o structur rigid care rezist la aciunea forelor de
suprafa. Bacteriile la care acest component celular lipsete,
prezint un polimorfism accentuat.
Variaii ale formei bacteriene pot apare n relaie cu vrsta
culturii i condiiile de mediu.
n funcie de aspectul lor microscopic, bacteriile se pot
clasifica n urmtoarele categorii:

Morfologie i structur bacterian

21

coci (n lb gr.: kokkos = boab) sunt bacterii de form


rotund (Staphylococcus aureus), ovalar (Streptococcus pyogenes), reniform (Neisseria sp.), lanceolat (Streptococcus
pneumoniae);

bacili sunt bastonae cu lungime i grosime variabil,


drepte sau incurbate, cu extremiti ascuite (ex.: Fusobacterium fusiforme), mciucate (ex.: Corynebacterium
diphteriae), rotunjite (ex.: familia Enterobacteriaceae) sau
retezate (ex.: Bacillus anthracis);

cocobacili sunt bacterii cu form intermediar ntre


coci i bacili (ex.: genurile Bordetella, Brucella);

vibrioni sunt bacterii cilindrice, scurte, incurbate,


cu aspect de virgul (ex.: Vibrio cholerae);

bacterii spiralate au corpul alungit, n form de spiral,


flexibil (ex.: genurile Treponema, Borellia, Leptospira) sau
rigid (ex.: genul Spirillum);

actinomicete pe frotiurile din culturi tinere, apar sub


forma unor filamente lungi, ramificate (ex.: genul
Actinomyces) care se fragmenteaz ulterior rezultnd
bacili de dimensiuni variate.

n figura urmtoare sunt prezentate formele bacteriene:

Morfologie i structur bacterian

22

1. coci
2. bacili
3. cocobacili
4. vibrioni
5. bacterii spiralate
6. bacterii ramificate

Figura 3 Forme bacteriene

3) Prezena capsulei bacteriene


Unele bacterii, n special tulpinile mai virulente, sunt
incapsulate (ex.: pneumococii, meningococii, gonococii, unele
tulpini de stafilococi sau streptococi, Klebsiella pneumoniae)
iar altele nu prezint acest caracter.

Morfologie i structur bacterian

23

1. coc incapsulat
2. bacil incapsulat
3. coci in diplo incapsulai

Figura 4 Bacterii incapsulate


Capsula poate fi colorat prin metode speciale (coloraii
cu tu de China sau cu rou Congo). Microscopic, apare ca o
zon refringent, incolor n coloraiile uzuale.
4) Prezena sporilor bacterieni
Majoritatea bacteriilor implicate n patologia uman sunt
nesporulate. Bacteriile din genurile Clostridium i Bacillus pot
forma, n condiii nefavorabile de via, spori deformani sau
nedeformani, localizai central, subterminal sau terminal.
Datorit densitii crescute a coninutului i permeabilitii
reduse a nveliurilor, sporii bacterieni se coloreaz cu dificultate.
Acetia pot fi colorai doar cu ajutorul unor colorani puternici,
concentrai i sub aciunea cldurii (ex.: verde malahit).
n coloraiile simple sau complexe, difereniale, sporii pot
fi observai, dar sunt incolori, refringeni, situai n interiorul
sau la extremitatea corpului bacterian.

Morfologie i structur bacterian

24

1. ovalar terminal
2. rectangular terminal
3. rectangular subterminal
4. rectangular central
5. circular central
6. deformant
Figura 5 Tipuri de spori bacterieni
5) Modul de grupare
Bacteriile se nmulesc prin diviziune simpl, urmat de
separarea celulelor fiice de celulele parentale.
Cnd condiiile de mediu sunt mai puin prielnice, celulele
bacteriene tinere rmn ataate unele de altele realiznd grupri
caracteristice speciei, genului sau familiei bacteriene respective.
n funcie de orientarea spaial a planurilor succesive
de diviziune, se disting urmtoarele modaliti de grupare:

dac planurile succesive de diviziune sunt paralele, se


pot

dispune

in

diplo

(ex.:

N.

gonorrhoeae,

N.

meningitidis, S. pneumoniae), n lanuri (ex.: S. pyogenes,


B. anthracis), n form de L, V,

N, M (ex.: M.

tuberculosis), palisade sau litere chinezeti (ex.: C.


diphteriae);

dac diviziunea se realizeaz dup 2 planuri perpendiculare succesive se obine aranjarea n tetrade (ex.:
Micrococcus tetragena);

dac diviziunea se face dup 3 planuri perpendiculare


succesive rezult structuri cubice (ex.: Sarcina lutea);

Morfologie i structur bacterian

25

dac diviziunea are loc dup planuri orientate diferit,


rezult grupuri neregulate de celule (ex.: Staphylococcus
aureus n ciorchine de strugure).

Figura 6 ilustreaz moduri de grupare a bacteriilor:

1. coci in diplo
2. coci n tetrade
3. coci i bacili n
lanuri
4. coci n ciorchine

Figura 6 Gruparea bacteriilor


6) Tinctorialitatea
n coloraiile simple (ex.: albastru de metilen 1 %, fuxin
bazic 1 %), toate bacteriile, ca i alte elemente de pe frotiuri,
iau culoarea colorantului utilizat.
n coloraiile difereniale (ex.: coloraiile Gram sau ZiehlNielsen), bacteriile se coloreaz diferit, n funcie de structura
peretelui lor celular care determin afinitatea pentru colorani.
7) Localizarea
n raport cu celulele epiteliale i inflamatorii (polimorfonucleare neutrofile) prezente n produsele patologice din care

Morfologie i structur bacterian

26

se efectueaz frotiuri colorate, bacteriile se pot dispune extracelular (majoritatea) sau intracelular (ex.: genul Neisseria). n
cazul bacteriilor intracelulare, acest mod de dispunere poate
sugera stadiul bolii (localizarea intracelular infecii acute),
genul i specia bacterian.

Figura 7 Bacterii intra- i extracelulare

3.2 STRUCTURA BACTERIAN


Dei au dimensiuni foarte mici, microorganismele conin
elementele prezente i n celule mai complexe. Astfel, A.D.N.
reprezint materialul ereditar ca i n cazul altor fiine vii i
multe aspecte referitoare la reaciile biochimice i la cretere
sunt chiar identice. Totui, exist deosebiri semnificative care
le diferenieaz de alte organisme.

Morfologie i structur bacterian

27

Bacteriile sunt microorganisme unicelulare, haploide, cu


structur de tip procariot. Particularitile structurii intime a
acestora au putut fi observate dup introducerea microscopiei
electronice.
Cunoaterea ultrastructurii bacteriilor este esenial pentru
ncadrarea taxonomic corect a acestora, pentru nelegerea
comportamentului fa de factorii de mediu, a mecanismelor
patogene i pentru realizarea unei antibioterapii ct mai eficiente.
A. Componente bacteriene obligatorii
1. Materialul nuclear (corp nuclear sau nucleoid):

reprezint aproximativ 10 % din volumul celulei;

este lipsit de membran proprie;

este localizat, de obicei, central;

este ovalar dar poate lua forme diverse n diferite


stadii de diviziune;

este legat de membrana citoplasmatic prin mezozomi;

este format dintr-o singur molecul de A.D.N. dublu


catenar, circular care constituie un cromozom unic;

din punct de vedere al compoziiei chimice, materialul


nuclear bacterian este alctuit din 60 % A.D.N., 30 %
A.R.N. i 10 % proteine;

are afinitate pentru colorani bazofili, dar este greu de


evideniat datorit bazofiliei intense a citoplasmei;

funciile acestuia sunt::

autoreplicarea semiconservativ se realizeaz prin


clivarea moleculei de A.D.N. n cele dou catene
componente care servesc ca matrice pentru sinteza

Morfologie i structur bacterian

28

unora noi, urmat de reasocierea, prin complementaritate, a bazelor purinice i pirimidinice);


1. heteroreplicarea

- se realizeaz pe baza

informaiei genetice din A.D.N. nuclear care


este

transmis,

prin

intermediul

A.R.N.

mesager, la ribozomii din citoplasm, unde


are loc sinteza proteinelor struc-turale i
funcionale necesare bacteriei.
2. Citoplasma

este situat ntre materialul nuclear i faa intern a


membranei citoplasmatice adernd intim de aceasta;

reprezint un sistem coloidal (gel) care conine ap, n


proporie de 80 %, n care sunt dizolvate proteine,
lipide, carbohidrai cu molecul mic, acizi nucleici,
ioni anorganici, etc.;

ca aspect, este intens bazofil (conine mult A.R.N.),


semitransparent, omogen la celulele tinere i cu
condensri sau vacuolizri la cele btrne;

conine materialul nuclear i alte structuri eseniale


sau inconstante:

mezozomii reprezint invaginri ale membranei


citoplasmatice, prezente n special la bacteriile
Gram pozitive, cu dimensiuni, forme (lamelari,
tubulari, veziculari), localizri (nucleari, septali,
periferici) i structuri interne diferite; acetia leag
nucleoidul de membrana citoplasmatic i se pot
asocia cu ribozomii; particip la sinteza de A.D.N.
i de proteine;

Morfologie i structur bacterian

29

ribozomii reprezint principalele elemente ale


citoplasmei, prezente n mod constant, care i
confer aspectul granular i bazofilia; conin cte 3
molecule de A.R.N. ribozomal (65-70 %) i cte 55
de molecule proteice (30-35 %); au constanta de
sedimentare la ultracentrifug 70 S (S = uniti
Svedberg); sunt formai din dou uniti, 30 S i 50 S
care se unesc formnd un complex stabil n prezena
ionilor de Mg++; reprezint sediul sintezei de proteine
structurale i funcionale;

incluziile pot avea dimensiuni, forme i compoziie


diferit (glicogen, lipide, amidon, volutin = polifosfai anorganici); constituie rezerve nutritive; n
unele situaii, sunt markeri ai infeciei cu bacteria
respectiv (ex.: corpusculii metacromatici BabeErnst pentru Corynebacterium diphteriae); recent,
n literatura strin au fost descrii magnetozomii,
particule care conin fier, influenate de cmpurile
electromagnetice, implicate probabil n orientarea
bacteriilor n mediu n scopul ajungerii ntr-un
habitat favorabil;

elemente inconstante sunt alveole cu lichid (reziduuri


metabolice), vacuole gazoase (la bacteriile acvatice care
plutesc), plasmide, etc.; plasmidele sunt mici cantiti
de A.D.N. extracromozomial care conin puine gene,
implicate n dobndirea rezistenei la antibiotice, nu i
n creterea bacterian; din acest motiv sunt numite
factori R (factori de rezisten); pot fi transmise de la o

Morfologie i structur bacterian

30

bacterie la alta n procesul de recombinare genetic;


prezint un interes deosebit pentru ingineria genetic
n scopul utilizrii lor n biotehnologie;

funciile citoplasmei deriv din structurile sale.

3. Membrana citoplasmatic

mrginete citoplasma la exterior separnd-o de


peretele celular, de care ader intim datorit presiunii
endocelulare;

este o membran biologic relativ groas (6,5-7 m),


cu o structur n mozaic fluid fiind format din 2
lanuri fosfolipidice aezate cu prile hidrofobe fa n
fa i cu cele hidrofile n afar i din proteine cu
extremitile hidrofile expuse spre spaiul intracelular
sau extracelular, aflate n mare dinamic; conine i
cantiti reduse de glucide, legate de proteine (glicoproteine) sau de lipide (glicolipide);

Figura 8 Structura membranei citoplasmatice

funciile membranei sunt multiple:

Morfologie i structur bacterian

31

este o membran biologic selectiv i o barier


osmotic - permite transferul pasiv al substanelor
lipofile i activ al celor lipofobe reglnd schimburile
ntre celula bacterian i mediul extern;

reprezint sediul enzimelor respiratorii realizeaz


producerea de energie prin fenomenul de fosforilare
oxidativ; conine dehidrogenaze, citocromi i alte
proteine ale sistemului transportor de electroni;

este sediul unor receptori de suprafa este implicat


n fenomenul de chemotaxie;

intervine n procese de sintez conine enzime cu rol


n sinteza fosfolipidelor, peretelui celular i capsulei;

are rol n diviziunea bacterian membrana citoplasmatic intervine n replicarea A.D.N.;

alte funcii dup unii autori, aceasta este implicat,


alturi de alte structuri, n sporulare, eliberarea unor
enzime, toxine, produi de catabolism.

4. Peretele celular

nvelete la exterior membrana citoplasmatic;

este o structur rigid;

structura peretelui celular determin afinitatea fa


de colorani ceea ce a permis clasificarea bacteriilor
n Gram pozitive i Gram negative, prin utilizarea
coloraiei difereniale Gram; modul n care bacteriile
patogene se coloreaz Gram constituie o informaie
preioas pentru dirijarea diagnosticului bacteriologic
i pentru orientarea precoce a antibioticoterapiei;

Morfologie i structur bacterian

32

conine un component specific, numit peptidoglican,


asociat cu alte structuri, diferite la bacteriile Gram
pozitive fa de cele Gram negative:

peptidoglicanul (mureina) este un heteropolimer


format dintr-o parte glicanic i o parte peptidic;
partea glicanic este alctuit din lanuri lineare de
acid N-acetil muramic i N-acetil glucozamin care se
succe alternativ; partea peptidic are n componen
uniti tetrapeptidice i pentapeptidice; ntre lanurile
paralele se formeaz legturi peptidice constituinduse astfel o structur rigid numit sac mureinic care
nvelete celula;

este sensibil la aciunea unor antibiotice (ex.: peniciline);

peretele bacteriilor Gram pozitive are grosime mai


mare (15-30 nm) dar o structur mai simpl; este
format din peptidoglican (50-90 %) dispus ntr-o
reea tridimensional i un spaiu periplasmic de
mici dimensiuni; de peptidoglican se leag acizii
teichoici (limba greac: teichos = perete); acizii teichoici
sunt polimeri polifosfai, legai covalent de peptidoglican; exist i acizi lipoteichoici care strbat tot peretele
legndu-se covalent de membrana citoplasmatic i prin
fore ionice de peptidoglican;

Morfologie i structur bacterian

33

Figura 10 Peretele bacteriilor Gram pozitive

peretele bacteriilor Gram negative este subire, cu


o grosime de 8-12 nm, dar cu o structur
complex; este format din spaiul periplasmic i
din membrana extern; spaiul periplasmic este
localizat ntre membrana citoplasmatic i cea
extern i este ocupat de peptidoglican (dispus
ntr-o reea bidimensional care reprezint 5-20 %
din grosimea peretelui) i de lipoproteine (leag
peptidoglicanul de membrana extern); membrana
extern este o membran biologic selectiv care
are o structur n mozaic fluid, ca i membrana
citoplasmatic i este alctuit din 2 straturi
fosfolipidice i proteine, unele majore (reprezint

Morfologie i structur bacterian

34

aproximativ 70 % din proteinele membranare i


sunt porine sau nonporine) i altele minore; n
stratul superficial al membranei externe, pe zone
relativ ntinse, fosfolipidele sunt substituite de
macromolecule complexe de lipopolizaharide; n
structura lor sunt incluse lipidul A (este alctuit
din uniti dizaharidice de glucozamin, legate
intim de acizi grai comuni unor grupe de
bacterii), un miez polizaharidic (core), comun
tuturor bacteriilor Gram negative care formeaz
antigenul R i uniti monozaharidice, care se
repet de 10-25 ori, cu specificitate de specie
sau de tip, care alctuiesc antigenul O (endotoxina); peretele celular al bacteriilor Gram negative
este mai bogat n proteine i lipide i mai srac
n polizaharide dect cel al bateriilor Gram
pozitive;

Morfologie i structur bacterian

35

Figura 11 Peretele bacteriilor Gram negative

perete celular defectiv majoritatea speciilor, sub


aciunea unor factori fizici, chimici sau biologici,
genereaz forme L, cu perete defectiv, viabile, care
cresc i se divid; astfel, n cazul bacteriilor Gram
pozitive, peretele celular se rupe i rezult forme
sferice numite protoplati iar la bacteriile Gram
negative se formeaz sferoplati care sunt nvelii n
membrana extern; repuse n condiii de mediu
favorabile, formele L pot sintetiza un perete celular
normal dac mai exist resturi de peptidoglican;

funciile peretelui celular:

asigur forma bacteriilor reprezint o structur rigid


ce rezist la presiunea osmotic din interiorul celulei
bacteriene;

Morfologie i structur bacterian

36

are rol n reglarea traficului molecular membrana


extern a bacteriilor Gram negative reprezint o
membran biologic selectiv ce permite trecerea
pasiv, prin difuziune la nivelul porilor (formai de
proteinele majore numite porine) a substanelor
hidrofile cu greutate molecular mic i activ, cu
ajutorul unor proteine de transport (nonporine), a
complexelor care conin Fe 3, a vitaminei B12, a
oligonucleotidelor i a maltozei; aceast structur
mpiedic trecerea spre spaiul periplasmic a unor
molecule nocive ceea ce explic rezistena mai
ridicat a acestora la antibiotice i antiseptice;

favorizeaz activitatea enzimatic intens de la nivelul


membranei citoplasmatice: la bacteriile Gram pozitive,
acizii teichoici leag Mg crend un microclimat
favorabil; la Gram negative, n spaiul periplasmic
sunt stocate enzime hidrolitice ce degradeaz nutrienii
i faciliteaz transportul prin membrana citoplasmatic a produilor simpli rezultai;

este sediul unor receptori pentru bacteriofagi aceste


structuri sunt acizii teichoici la bacteriile Gram
pozitive i porinele din membrana extern la cele
Gram negative;

este sediul unor antigene de suprafa acestea


sunt responsabile de inducerea rspunsului imun,
de reacii de hipersensibilizare i sunt importante
pentru identificarea antigenic;

Morfologie i structur bacterian

37

are rol n diviziunea bacteriilor const n formarea


septului de diviziune la bacteriile Gram pozitive i
prin invaginarea peretelui la cele Gram negative;

are funcie antifagocitar n principal acizii teichoici


din structura bacteriilor Gram pozitive care inhib
fagocitoza;

particip la iniierea i reglarea sintezei componentelor


bacteriene acizii teichoici sunt implicai n creterea
peretelui celular; unii autori descriu existena, n spaiul
periplasmic al bacteriilor Gram pozitive, a interstratului MW, o zon cu un grad ridicat de organizare,
implicat n polimerizarea componentelor peretelui
celular; proteinele minore de la nivelul membranei
externe a bacteriilor Gram negative regleaz sinteza
componentelor capsulei.

B. Structuri facultative
1. Glicocalixul i capsula

sunt structuri situate la exteriorul peretelui celular;

sunt prezente numai la unele bacterii;

de obicei sunt de natur polizaharidic, mai rar polipeptidic sau din acid hialuronic;

unele specii bacteriene prezint pe suprafa, n mediul


lor natural de via, o reea de fibre polizaharidice care
formeaz glicocalixul, vizibil prin microscopie electronic;
altele formeaz o microcapsul sau capsula propriu-zis,
structuri mai dense, vizibile prin microscopie optic;

Morfologie i structur bacterian

38

n funcie de consistena sa, capsula poate fi flexibil


sau rigid;

capsula poate fi integrat sau periferic;

este un caracter de virulen deoarece mpiedic


procesul de fagocitoz;

prezena acestui caracter are importan practic la


unele bacterii pentru identificarea speciei sau pentru
caracterizarea antigenic;

n coloraiile uzuale, capsula apare ca o zon refringent


n jurul corpului bacterian, putndu-se ns colora prin
metode speciale (tu de China, rou Congo);

funciile capsulei:

realizeaz protecie fa de factorii aprrii antiinfecioase a organismului (anticorpi, complement,


fagocite);

reprezint un factor de aderen i colonizare la


alte celule sau la suprafee inerte;

determin rezistena fa de agenii nocivi din


mediu (variaii de pH, desicare, ageni tensioactivi,
antibiotice, bacteriocine, bacteriofagi, protozoare).

2. Cilii (flagelii)

structura cililor este complex, cuprinznd:

corpusculul bazal la bacteriile Gram pozitive, este


alctuit dintr-o pereche de inele cu care se
realizeaz ataarea la membrana citoplasmatic;
la bacteriile Gram negative, din alctuirea sa fac
parte 2 perechi de inele, unite printr-o structur

Morfologie i structur bacterian

39

cilindric rigid, una servind la fixarea cilului n


membrana citoplasmatic (inelele S i M) iar
cealalt n membrana extern (inelele P i L);

crligul reprezint o articulaie flexibil, situat n


exteriorul corpului bacterian;

filamentul cilial (flagelar) este un filament flexibil,


spiralat, cu dimensiuni de 3-12 m12-30 nm;

Figura 12 Structura cilului la bacterii Gram negative

din punct de vedere biochimic, flagelii sunt de natur


proteic fiind alctuii din flagelin, o protein fibrilar
asemntoare miozinei;

pot fi observai la microscopul optic, pe preparate


colorate prin impregnare argentic;

prezena sau absena, numrul i distribuia cililor


sunt caractere taxonomice;

n funcie de aceste criterii, bacteriile pot fi:

Morfologie i structur bacterian

40

atriche = fr cili (ex.: Klebsiella pneumoniae);

monotriche = cu un cil polar (ex.: Vibrio cholerae);

amphitriche = cu cte un cil la fiecare din poli (ex.:


Spirillum sp.);

lophotriche = mnunchiuri de cili dispuse la unul


sau ambii poli (ex.: Pseudomonas aeruginosa);

peritriche = cilii sunt distribuii pe toat suprafaa


corpului (ex: Escherichia coli);

Figura 13 Distribuia cililor bacterieni

sunt prezeni pe suprafaa unor specii bacteriene,


mai frecvent la bacili, vibrioni, spirili i extrem de rar
la coci;

funciile cililor constau n:

Morfologie i structur bacterian

41

asigurarea locomoiei cilii sunt responsabili de


mobilitatea bacteriilor;

au rol n chemotaxie aceast aciune se datoreaz


receptorilor specifici existeni la nivelul membranei
citoplasmatice;

sunt antigene specifice formeaz antigenul H i


sunt imunogene (induc rspunsul imun constnd,
mai ales, n formarea unor anticorpi specifici).

3. Pilii

sunt apendici filamentoi prezeni la multe specii de


bacterii Gram negative;

sunt de dou tipuri:

Pilii comuni (fimbriile) sunt structuri filamentoase


neflexibile, subiri (7-10 nm) i scurte (0,5-2 m);
conin o protein numit pilein sau fimbrilin; de
obicei, sunt numeroi pe suprafaa unei celule
bacteriene (peste 100), fiind dispui peritriche; pot
fi observai numai prin microscopie electronic;
sunt factori de aderen la celulele gazdei (celule
epiteliale, hematii) sau la lichide statice (bacteriile
pot forma pelicule la suprafaa apelor stttoare
pentru a fi n contact cu O2);

Pilii sexuali sunt organite filamentoase rigide, cu


dimensiuni de 20 m/8,5 nm i cu extremitatea
liber cu aspect de buton; au putut fi evideniai
la unele tulpini de bacili Gram negativi (ex.: E.coli)
care conin plasmide conjugative care i determin
genetic; sunt implicai n procesul de conjugare

Morfologie i structur bacterian

42

bacterian, fixnd bacteria donatoare pe receptori


de pe membrana extern a celei receptoare n
vederea unui transfer de material genetic ntre cele
dou celule bacteriene; au receptori specifici
pentru bacteriofagi.
4. Sporii

reprezint formaiuni care se dezvolt n interiorul sau la


extremitatea corpului unor specii bacteriene (ex.: Bacillus
sp., Clostridium sp.), n condiii nefavorabile de mediu, n
scopul conservrii fondului genetic i supravieuirii
speciei;

au form sferic sau oval;

sporul conserv parial componentele celulei vegetative;

din interior spre exterior, structura sporului cuprinde:

protoplastul sporal este format din A.D.N., cantiti


reduse de constituieni citoplasmatici, 4050 % ap,
dipicolinat de calciu (5-15% din greutatea uscat) i
membrana citoplasmatic;

peretele celular primordial i cortexul sunt 2


structuri distincte, formate din peptidoglican;

nveliurile sporale sunt constituite din mai multe


straturi concentrice iar din compoziia lor fac parte
proteine bogate n cistein;

exosporiul nveli lipoproteic, prezent la unele specii;

Morfologie i structur bacterian

43

1. A.D.N.
2. protoplast sporal
3. perete primordial
4. cortex
5. nveliuri sporale
6. exosporiu
Figura 14 Structura sporului

existena sau absena, dimensiunile, localizarea i forma


sporilor reprezint caractere taxonomice;

n funcie de mrimea sa, sporul poate fi deformant (cu


diametrul mai mare dect cel al celulei bacteriene) sau
nedeformant (cu diametrul mai mic dect al bacteriei);

sporii pot fi localizai central, subterminal sau terminal;

n condiii nefavorabile, unele specii bacteriene produc


spori, proces numit sporulare; etapele acestui proces au
putut fi studiate pe culturi bacteriene; astfel s-a putut
constata c, la sfritul fazei de cretere exponenial,
dup epuizarea unui nutrient din mediu de cultur, s-a
produs

replicarea

dispunerea

cromozomului,

cromatinei

sub

forma

urmat
unui

de

filament

longitudinal; o parte din acesta ajunge la una dintre


extremitile celulei bacteriene prin retracia unui
mezozom, se nconjoar cu o mic cantitate de
citoplasm i cu o membran dubl, constituit prin
invaginarea celei citoplasmatice; ntre cele dou foie

Morfologie i structur bacterian

44

membranare se formeaz peretele celular primordial,


cortexul, nveliurile sporale i eventual, structurile
neobligatorii; n final, sporul matur este eliberat prin
autoliza celulei de origine; acesta poate rmne n
stare dormant zeci sau chiar sute de ani;

repus ntr-un mediu de via favorabil, sporul va da


natere formei vegetative a bacteriei, proces numit
germinare; aceasta este iniiat ca urmare a existenei
anumitor condiii de mediu (temperatur, umiditate,
pH, etc.) i factorilor nutritivi (aminoacizi, glucoz,
etc.) care determin ieirea sporului din starea dormant
i declanarea unui lan de reacii biochimice; cortexul i
nveliurile sporale sunt apoi lizate enzimatic iar peretele
sporal este permeabilizat ceea ce determin pierderea
dipicolinatului de Ca n mediu i ptrunderea apei i a
substanelor nutritive n protoplast; din acest moment se
declaneaz intense procese de sintez care conduc la
creterea n dimensiuni i la transformarea sporului n
celula vegetativ;

sporularea nu reprezint o metod de nmulire deoarece


dintr-o celul vegetativ rezult un singur spor; n acelai
mod, dar n sens invers, se realizeaz i procesul de
germinare;

din cauza coninutului dens (datorat cantitii reduse


de ap, faptului c aceasta este, n mare parte, legat
n compui chimici i bogiei n dipicolinat de Ca) i
permeabilitii sczute a nveliurilor sporale, sporii

Morfologie i structur bacterian

45

bacterieni reprezint cele mai rezistente forme de


via cunoscute;

sunt rezisteni la aciunea agenilor fizici i chimici;


astfel, n prezena cldurii umede, rezist mai multe
minute la 120C, mai mult dect celulele vegetative,
fapt important pentru corectitudinea sterilizrii; n apa
care fierbe rezist peste 2 ore; n alcoolul etilic de 70
pot rezista ani de zile; rezist la iradiere pn la aproximativ 1.000.000 remi, n timp ce omul doar pn la
500 remi;

rezistena la uscciune este impresionant (au fost


gsii spori viabili n intestinul mumiilor egiptene);

din aceleai motive, sporii bacterieni sunt greu colorabili


fiind necesar folosirea unor colorani concentrai (verde
malahit 5 %) a cror ptrundere n perete este facilitat
prin aciunea cldurii.

3.3 COMPOZIIA CHIMIC A BACTERIILOR


Celulele bacteriene au o compoziie chimic complex:

Ap:

se gsete n cantiti mari n formele vegetative (pn la


80 % din greutate) i este redus cantitativ n spori (4050 %);

se gsete n stare liber (preponderent n celulele


vegetative) sau legat n compui chimici (mare parte
din apa coninut n spori);

Morfologie i structur bacterian

46

constituie mediul n care sunt dispersate sau dizolvate


substane necesare proceselor vitale bacteriene (sruri
minerale, aminoacizi, zaharuri simple, vitamine, etc.);

particip la reacii de oxido-reducere (se poate disocia


n ioni OH i H) i intr n combinaii chimice n
cadrul proceselor anabolice i catabolice celulare.

Proteine:

sunt principalele componente ale bacteriilor (40-80 %


din greutatea uscat a celulei);

bacteriile au echipament enzimatic bogat; enzimele


pot fi clasificate n funcie de mai multe criterii; n
funcie de localizare, pot fi intracelulare (intervin n
procesele de sintez), extracelulare (sunt factori de
patogenitate, antigenice i au rol n nutriie) i
ectocelulare (regleaz schimburile membranare); din
punct de vedere al compoziiei chimice, enzimele pot fi
proteine pure = haloproteine (ex.: pepsina, tripsina),
cuplate cu metale = metaloproteine (ex.: anhidraza,
enolaza), cu substane nonmetalice (coenzime) sau cu
derivai ai hemului = heteroproteine (ex.: peroxidaza,
catalaza); dup procesul chimic n care sunt implicate,
enzimele pot fi hidrolaze care particip la procese de
sintez sau degradare prin incorporare sau eliberare
de ap (ex.: proteaze, carbohidraze) i desmolaze ce
desfac legturi ntre lanuri de atomi de carbon (ex.:
oxidaze, catalaze); dup modul de apariie n celula
bacterian, enzimele pot fi constitutive fcnd parte

Morfologie i structur bacterian

47

dintre constituienii celulei (ex.: lipaze, carbohidraze,


proteaze) sau adaptative care se sintetizeaz cnd n
mediul de cultur exist substratul lor.

au rol structural, funcional (enzimele care intervin n


nutriie, respiraie i multiplicare), imunogen (sunt
antigene), energetic (minor) i patogenic (prin toxine);

Glucide:

reprezint 12-28 % din greutatea uscat a celulei


bacteriene, ponderea acestora variind n funcie de
specie, mediul de cultur sau vrsta acesteia;

sunt monozaharide, polizaharide sau combinaii cu


alte substane (glicoproteine, glicolipoproteine);

au rol plastic, energetic, de patogenitate i sunt


slab imunogene.

Lipide:

la majoritatea bacteriilor reprezint 3-10 % din


greutatea uscat a celulei; sunt n cantitate mai
mare (30-40 %) n cazul bacteriilor acido-alcoolorezistente (genurile Mycobacterium, Actinomyces i
Nocardia); concentraia acestora poate fi mai mare
n culturi vechi sau de pe mediile bogate n zaharuri;

pot fi simple sau complexe (glicolipoproteine, fosfolipide, glicolipide);

au un rol plastic, energetic, patogenic i sunt slab


imunogene.

Substane minerale:

Morfologie i structur bacterian

48

reprezint 2-30 % din greutatea uscat a celulei;


sunt mai bogate n substane minerale culturile
tinere i cele obinute pe medii foarte nutritive;

celula bacterian conine oligoelemente (magneziu,


fosfor, potasiu, natriu, calciu, sulf, clor, fier, zinc,
cupru, plumb, etc.);

unele intr n compoziia bacteriei (ex.: fosforul este


constituient al nucleoproteinelor, al unor lipide i
zaharuri, sulful intr n structura unor aminoacizi i
a unor vitamine) iar altele intervin n procese fiziologice (ex.: fierul are rol n fenomenele de oxidare i
respiraie, stimuleaz toxigeneza i pigmentogeneza) sau sunt activatori ai unor enzime (ex.: magneziul,
cuprul, zincul).

Nucleoproteine:

reprezint 5-25 % din greutatea uscat a celulei


bacteriene;

sunt de dou tipuri, ribonucleoproteine i dezoxiribonucleoproteine;

sunt depozitare ale informaiei genetice bacteriene.

4 FIZIOLOGIA I METABOLISMUL BACTERIILOR


4.1 NUTRIIA BACTERIILOR
Nutriia reprezint procesul prin care bacteriile i asimileaz
substanele plastice i energetice necesare metabolismului. Acest
proces se realizeaz prin absorbia nutrienilor.

Morfologie i structur bacterian

49

Nutrienii reprezint substane organice sau anorganice


care sunt necesare creterii i multiplicrii bacteriilor. Acetia
pot proveni din mediul extern sau din organisme vii, dup
solvire (O2, CO2, sruri minerale, etc.) sau digerare pn la
produi mai simpli (proteinele aminoacizi, polizaharidele
monozaharide, lipidele acizi grai, etc.).
Pentru a-i asigura nutriia, bacteriile au nevoie de surse
de energie, de carbon, de azot, de sruri minerale, de factori
de cretere, etc.
Analiza compoziiei chimice a bacteriilor demonstreaz
c mai mult de 95 % din greutatea uscat a acestora este
reprezentat de aa-numitele macroelemente (carbon, oxigen,
azot, sulf, fosfor). Acestea sunt componente ale proteinelor,
carbohidrailor, lipidelor sau acizilor nucleici. Sunt necesare
pentru metabolismul bacterian n cantiti relativ mari, de
ordinul gramelorlitrul de mediu de cultur.
Magneziul,

potasiul,

calciul

fierul

din

celula

bacterian se gsesc sub form de cationi. Aceste elemente


sunt necesare bacteriilor, pentru a putea fi cultivate, n
cantiti de cteva miligramelitrul de mediu.
De asemenea, bacteriile necesit cantiti reduse, de ordinul
microgramelorlitru, de microelemente sau oligoelemente (cobalt,
zinc, molibden, nichel i cupru).
n funcie de sursa de energie din mediu pe care o pot
utiliza, bacteriile pot fi:

Bacterii fototrofe (fotosintetizante) folosesc radiaiile


luminoase ca surs de energie;

Morfologie i structur bacterian

50

Bacterii chimiotrofe (chimiosintetizante) utilizeaz energia


eliberat ca urmare a unor reacii de oxido-reducere la
care particip un donor i un acceptor de hidrogen; n
funcie de natura donorului de hidrogen, pot fi bacterii
chimiolitotrofe (limba greac: lithos = piatr) care obin
energia prin oxidarea substanelor anorganice i bacterii
chimioorganotrofe care i procur energia prin oxidarea
unor substane organice; acceptorul de hidrogen poate fi
oxigenul gazos, compui anorganici sau organici.

Bacteriile chimiotrofe pot obine energie prin:

Respiraia aerob donorul de H+ este o substan


organic iar acceptorul de H+ este O2; transferul de
electroni se face prin lanul respirator (substrat
N.A.D. flavoprotein chinon citocrom b
citocrom c citocrom a O2) localizat la nivelul
membranei citoplasmatice;

Respiraia anaerob - donorul de H+ este o substan


organic iar acceptorul de H+ este o substan anorganic diferit de O2 (nitrii, nitrai, sulfai, carbonai,
etc.); transferul de electroni se realizeaz tot la nivelul
lanului respirator;

Fermentaia - donorul de H+ i acceptorul de H+ sunt


substane organice; acest proces se poate desfura i n
prezena O2 dar acesta nu intervine n acest proces.

n raport cu modul de obinerea a energiei, se disting:

Bacterii strict aerobe necesit prezena O2 n mediu;


folosesc respiraia aerob (figura 15 - a);

Morfologie i structur bacterian

51

Bacterii strict anaerobe se dezvolt n absena O2 care


le omoar; utilizeaz fermentaia (figura 15 - b);

Bacterii aerobe, facultativ anaerobe prefer mediile


cu O2, unde folosesc doar respiraia aerob dar se pot
dezvolta i n absena acestuia, obinnd energia prin
fermentaie sau respiraie anaerob (figura 15 - c);

Bacterii microaerofile se dezvolt cel mai bine n medii


cu concentraii sczute de O2 i pot utiliza respiraia
aerob, anaerob sau fermentaia (figura 15 - d);.

Bacterii anaerobe aerotolerante se pot dezvolta i n


prezena O2 dar utilizeaz fermentaia (figura 15 - e);

n funcie de sursa de carbon , se disting:

Bacterii autotrofe folosesc dioxidul de carbon;

Bacterii heterotrofe iau carbonul din compui organici;

Bacterii mixotrofe pot utiliza substane organice sau


anorganice.

Bacteriile patogene sunt chimioorganoheterotrofe.


Sursele de azot sunt, mai frecvent, srurile de amoniu i,
ntr-o mai mic msur, azotul din aminoacizi, peptide, nitrii
sau chiar cel atmosferic.
Un rol esenial n nutriia bacterian i revine membranei
citoplasmatice. Aceasta este o membran biologic selectiv i
o barier osmotic (rezist la presiunea osmotic intracelular
crescut) intervenind n reglarea schimburilor ntre bacterie i
mediul extern. La acest nivel are loc absorbia nutrienilor din
mediu i eliminarea produilor de catabolism, procese care se
realizeaz pe toat suprafaa membranei. Schimburile se fac
prin difuzie pasiv n ambele sensuri (ap, ioni, vitamine, zaharuri

Morfologie i structur bacterian

52

simple, sruri minerale, etc.) i transfer activ, catalizat enzimatic de


permeaze. Hidrolazele intracelulare descompun nutrienii n
compui simpli, utilizai pentru sinteza componentelor proprii.
Procesul este stadial rezultnd compui intermediari cu grad tot
mai mare de stabilitate chimic. n fiecare stadiu intervin enzime
distincte. De asemenea, membrana citoplasmatic reprezint
sediul enzimelor respiratorii implicate n producerea de energie
prin fosforilare oxidativ, conine dehidrogenaze, citocromi, alte
proteine ale sistemului transportor de electroni i este sediul unor
receptori de suprafa fiind implicat n chemotaxie.

4.2 MOBILITATEA BACTERIILOR


Actual, se consider c aproximativ jumtate din speciile
bacteriene cunoscute sunt mobile adoptnd strategii diferite
de a se propulsa n mediu.
Motilitatea reprezint unul dintre criteriile principale de
identificare i clasificare a bacteriilor. Aceast capacitate le
permite bacteriilor s gseasc i s se dezvolte n condiii
optime de mediu.
Unele nainteaz n medii lichide, altele traverseaz medii
semisolide sau alunec pe suprafaa celor solide.
Micarea bacteriilor este influenat de stimuli externi,
favorabili sau nefavorabili. Termenul de taxis, mai utilizat n
literatura occidental, se refer la rspunsul, prin micare, a
bacteriilor la stimulri din mediul extern. Pornind de la acesta
i de la cunoaterea elementelor care, prin variaia lor, sunt
implicate n direcionarea deplasrii bacteriilor, se pot defini
chemotaxia (un gradient chimic), fototaxia (lumina), aerotaxia (con-

Morfologie i structur bacterian

53

centraia de O2), osmotaxia (presiunea osmotic), termotaxia (temperatura) i magnetotaxia (cmpul electromagnetic).
Bacteriile au capacitatea de a se deplasa n direcia unor
stimuli favorabili i de a se ndeprta de cei nocivi. Astfel,
chemotaxia, capacitatea de deplasare a bacteriilor, dirijat de
prezena n mediu a unui gradient de substane chimice, poate fi
pozitiv (factori nutritivi: aminoacizi, zaharuri) sau negativ (factori
nocivi: acizi, baze, fenoli).
Micarea bacteriilor este fin reglat prin existena unor
chemoreceptori situai la nivelul membranei citoplasmatice i
spaiului periplasmic. Prin legarea substanelor (factori atrgtori
sau respingtori) de receptori se produce metilarea i, respectiv,
demetilarea, proteinelor chemotactice metil-acceptoare (MCP) care
declaneaz micarea n sensul sau n direcia opus stimulilor.
Transformarea informaiei referitoare la gradientul chimic din
mediu n micare este foarte rapid (200 milisecunde).
Mecanismul intim, molecular, a fost mai bine studiat n
cazul speciei Escherichia coli. Cnd concentraia nutrienilor din
mediu scade, MCP este demetilat, ATP fosforileaz proteina CheA
care transfer fosfatul proteinei CheY. Aceasta interacioneaz cu
proteina de transport FliM de la baza cilului inducnd bacteriei
micarea de rostogolire prin care schimb direcia.
Pn n prezent, sunt cunoscute 3 modaliti principale
de deplasare a bacteriilor:

micarea bacteriilor ciliate;

micarea bacteriilor alunectoare;

micarea spirochetelor.

Morfologie i structur bacterian

54

Majoritatea bacteriilor mobile sunt ciliate. Cilii (flagelii)


sunt prezeni pe suprafaa unor specii bacteriene, n special
bacili, vibrioni, spirili i foarte rar coci. n cadrul unei specii
mobile, pot exista i variante imobile. Rolul cililor n motilitatea
acestor bacterii a fost demonstrat experimental. S-a constatat
c, dup secionarea cililor, bacteriile au rmas viabile dar nu
s-au mai putut deplasa prin mediu lichid. Dup ce acetia au
crescut din nou, bacteriile au redevenit mobile.
Cilii au o lungime, de obicei, mai mare dect a corpului
bacterian i sunt formai dintr-un filament proteic, de flagelin,
fixat printr-un crlig de corpusculul bazal, cu structur inelar,
care i ancoreaz n membrana citoplasmatic (i n membrana
extern n cazul celor Gram negative). Structura acestora este
diferit de a celor prezeni la eucariote.
Corpusculul bazal ciliar funcioneaz ca un motor rotativ
ce pune bacteria n micare. Energia necesar este eliberat
prin fosforilare oxidativ. n acest proces intervin 2 proteine
flagelare Mot A i Mot B care formeaz un canal protonic la
nivelul membranei citoplasmatice. Electronii sunt transportai
prin acest canal napoi, n citoplasma bacterian, iar protonii
se acumuleaz n spaiul dintre membrana citoplasmatic i
peretele celular. Gradientul protonic rezultat este responsabil
de micarea cilului. Se pare c n interiorul motorului ciliar
exist i o protein reglatoare a acestui proces.
Bacteriile ciliate se deplaseaz prin micri de rotaie
ale cililor. Viteza de deplasare a acestora este de 50msec. iar
cea de rotaie a cililor, de 200-1000 rotaiisec. Direcia de rotaie
a cililor imprim sensul de micare a bacteriei. Uneori, bacteriile

Morfologie i structur bacterian

55

parcurg distane de peste 2000 de ori mai mari dect lungimea


corpului lor.
La bacteriile monotriche, rotaia cilului polar n direcie
antiorar (mpotriva acelor de ceasornic) propulseaz bacteria
nainte (flagelul situndu-se n partea posterioar a acesteia).
n cazul celor peritriche, micarea se produce n acelai mod,
ns rotaia flagelilor este coordonat.
Cu ajutorul cililor, bacteriile se pot deplasa linear (flagelii se
mic sincron n sens antiorar) spre zone cu concentraii crescute
de substane nutritive sau se pot ndeprta de factori nefavorabili
prin micri de rostogolire (flagelii se mic asincron n sens orar).
ntr-o deplasare liniar bacteriile parcurg, de obicei, distane de 10 20 de ori mai mari dect lungimea corpului lor.
n situaii benefice (medii cu concentraii mari de nutrieni
i sczute de metabolii toxici), deplasrile liniare (fuga) sunt mai
lungi iar numrul rostogolirilor (tumbe) mai puine. n schimb,
n condiii neprielnice de mediu, numrul de rostogoliri crete,
bacteria schimbnd mereu direcia de deplasare, n cutarea unui
ambient optim.
Dac nu exist gradient chimic, bacteria se deplaseaz n
mod aleatoriu, schimbnd periodic direcia, prin rostogoliri.
Nu trebuie confundat deplasarea activ a bacteriilor, cu
ajutorul flagelilor, cu micarea brownian a acestora, vizibil
microscopic, pe preparate native.
Alt tip de micare, descris la multe bacterii neciliate (ex.:
cianobacterii, bacterii sulfuroase, unele specii de mycoplasme) este
alunecarea pe substraturi solide. Viteza de deplasare, n acest caz,
este mai mic, de 5msec. Mecanismul acesteia nu este descifrat

Morfologie i structur bacterian

56

n prezent. Ca urmare a studiilor efectuate, au fost emise diverse


ipoteze. Se pare c majoritatea speciilor secret slime (mucoziti),
material polizaharidic eliberat prin pori, care le nconjoar corpul
ca o teac permindu-le alunecarea. Unii autori consider c, la
unele specii, sunt implicate complexe proteice interne, din peretele
celular sau citoplasm.
Un tip particular de micare, denumit prin secuse este
considerat cea a speciei Pseudomonas aeruginosa care alunec
discontinuu pe suprafaa mediilor solide ca urmare a contraciilor
mnunchiurilor de cili dispui polar (lophotriche).
Spre deosebire de spirili care au perete rigid i se deplaseaz
prin rotaia cililor polari, spirochetele pot nainta n mediile lichide
i strbate medii semisolide datorit filamentelor axiale, structuri
interne specifice, formate din peste 100 de fibrile ce strbat tot
corpul bacteriei, situate ntre peretele celular i membrana extern.
Mecanismul acestei micri nu este complet descifrat dar se pare
c, prin rotaia filamentelor axiale, este antrenat i membrana
extern iar bacteria este propulsat prin mediul lichid din jur.
Numrul filamentelor axiale variaz n funcie de specie. Micrile
spirochetelor sunt de nurubare, de flexie i de translaie.
Motilitatea bacteriilor poate fi evideniat prin examinarea microscopic a unor preparate native sau frotiuri colorate
prin impregnare argentic ct i prin nsmnarea pe mediitest pentru aceast proprietate.

Morfologie i structur bacterian

57

4.3 NMULIREA BACTERIILOR


Pentru bacterii, cercetrile efectuate au ncercat s furnizeze
argumente referitoare la nmulirea prin diviziune, nmugurire, sexuat
sau complex.
Modalitatea de nmulire a bacteriilor cea mai obinuit
este diviziunea simpl, binar.
La bacteriile cilindrice (bacili, spirili, etc.), diviziunea este
transversal (perpendicular pe axul longitudinal).
n cazul bacteriilor sferice sau ovalare (coci, cocobacili),
diviziunea se realizeaz dup unul sau mai multe planuri,
paralele sau perpendiculare, rezultnd, n funcie de genul
cruia i aparin, diverse moduri de grupare (n lanuri, in
diplo, n tetrade, n structuri cu simetrie cubic, n ciorchini,
n palisade, etc.).
Creterea bacterian se datoreaz unei mriri cantitative
semnificative a tuturor componenilor. Multiplicarea reprezint
o consecin a creterii i are rolul de a restabili raportul ntre
suprafaa i volumul celular astfel nct acesta s redevin
optim pentru schimburile cu mediul.
n cazul bacteriilor cilindrice, diviziunea este precedat
de o cretere relativ ridicat a volumului i lungimii corpului.
La bacteriile sferice, aceast modificare preliminar este mai
puin evident constnd ntr-o mrire uoar a diametrului.
Iniial, bacteria i mrete dimensiunile i i dubleaz
cantitatea din fiecare constituient. Apoi se declaneaz procesul
de diviziune binar a celulei-mam din care vor rezulta 2 celulefiice. Se parcurg urmtoarele etape:

Morfologie i structur bacterian

58

A.D.N. se deplaseaz spre periferia celulei i se


ataeaz de membrana citoplasmatic (figura18 - a);

se realizeaz replicarea A.D.N. (figura 18 b);

de la nivelul membranei citoplasmatice, se formeaz


un sept transvers care crete centripet, n zona
median

celulei,

perpendicular

pe

axul

longitudinal, diviznd citoplasma;

prin constricia circular, progresiv, a peretelui celular


i ptrunderea acestuia n grosimea septului se formeaz
peretele transvers (figura 18 c);

peretele transvers se dedubleaz rezultnd 2 celule


fiice (figura 18 d);

cele 2 celule identice, nou formate se separ (figura


18 - e).

n condiii favorabile de mediu, diviziunea binar este un


proces foarte rapid (20 minute pentru majoritatea bacteriilor).
Excepie fac bacteriile cu cretere lent (ex.: Mycobacterium sp.).
Informaiile referitoare la celelalte moduri de nmulire
sunt srace n literatura de specialitate. nmugurirea a fost
semnalat la specia Francisella tularensis iar multiplicarea
complex, prin utilizarea unuia sau altuia dintre modalitile
prezentate anterior n funcie de condiiile de mediu, la
Mycobacterium sp. n ceea ce privete nmulirea sexuat, a
fost demonstrat experimental la puine specii bacteriene.

4.4 METABOLISMUL BACTERIAN


La bacterii, ca i la alte organisme, metabolismul include
reaciile biochimice prin care substane nutritive, asimilate din

Morfologie i structur bacterian

59

mediul de via, sunt transformate n constituieni ai celulei


bacteriene. Include procese catabolice i anabolice.
Procesul de catabolism (limba greac: cata = jos, ballein = a
arunca) const n degradarea substanelor nutritive transportate
din mediu n celula bacterian pe cile metabolice comune tuturor
organismelor vii (glicoliza, untul pentozo-fosfailor, ciclul acizilor
tricarboxilici, -oxidarea acizilor grai, hidroliza proteinelor, etc.),
urmat de eliberarea de energie.
Energia eliberat prin reaciile biochimice catabolice este
apoi stocat sub forma legturilor macroergice, n special de
A.T.P. (adenozin trifosfat).
Principalele ci catabolice din celula bacterian sunt:

Glicoliza - const ntr-o serie de reacii chimice prin care


1 molecul de glucoz este transformat n 2 de acid
piruvic, cu eliberare de energie, stocat sub forma a 4
molecule de A.T.P.; procesul prin care energia este stocat
n A.T.P. se numete fosforilare oxidativ.

untul pentozo-fosfailor - reprezint, de asemenea, o cale


de metabolizare a carbohidrailor, prin care glucoza 6fosfat este degradat pn la CO2 i NADPH (nicotinamid
dinucleotid fosfat);

-oxidarea acizilor grai - const n succesiunea de reacii


prin care grsimile acide sunt degradate pn la acetil-coenzima A;

Ciclul Krebs (ciclul acizilor tricarboxilici) - cuprinde o


succesiune de reacii prin care o molecul de acetil-

Morfologie i structur bacterian

60

coenzima A este metabolizat pn la CO2, cu producere


de energie stocat tot prin fosforilare oxidativ;

Proteazele sunt enzime care hidrolizeaz proteinele i


polipeptidele pn la aminoacizi care sunt utilizai prin
reacii de dezaminare i transaminare.

Procesul de anabolism (limba greac: ana = sus, ballein =


a arunca) se desfoar cu consum energetic i const n biosinteza structurilor celulare.
n cadrul acestuia se disting dou compartimente care
interfer, unul energetic i unul de sintez a constituienilor
celulari. Uneori acestea coincid, substanele oxidate ca surse
de energie fiind asimilate n mod direct i introduse n procese
de sintez.
Metabolismul energetic reunete toate reaciile biochimice
care conduc la aprovizionarea bacteriei cu energia necesar
supravieuirii, creterii i multiplicrii.
Bacteriile fotosintetizante triesc, de obicei, libere fiind
dependente doar de lumina solar. Cele chimiosintetizante i
obin energia prin oxidarea substanelor nutritive din mediu.
Practic, orice compus organic poate fi oxidat de anumite specii
bacteriene.
Metabolismul de sintez cuprinde totalitatea proceselor
chimice prin care bacteriile i procur substanele plastice
necesare pe care le transform n constutuieni proprii.
Metabolismul bacteriilor este foarte intens, permind o
cretere i o multiplicare rapid a bacteriilor i este flexibil, ceea ce
explic capacitatea crescut de adaptare la condiii foarte variate
de mediu a acestora.

Morfologie i structur bacterian

61

Reaciile catabolice i anabolice sunt catalizate de enzime


care sunt reutilizabile (dup ce o reacie chimic s-a terminat,
sunt eliberate i particip la un alt proces). Aciunea acestora
este, de obicei, specific. Substanele asupra crora enzimele
i exercit aciunea sunt substraturi iar, n urma reaciilor
chimice pe care le catalizeaz, rezult produi finali.
Situsurile active ale enzimelor (au grupri sulfhidril SH) pot fi ocupate de unele substane (sulfonamide, compui
de mercur, etc.) ceea ce blocheaz producerea reaciei chimice
catalizate de aceasta. Iniial, numele enzimelor s-a stabilit
pornind de la procesele chimice la care participau (hidrolaze,
oxidaze, transferaze, etc.) i sufixul aza. Unele enzime sunt
numite n funcie de substratul lor (ribonucleaz, lactaz, etc.).
Nevoile nutritive variaz n raport cu genul sau specia
bacterian. n cadrul unei specii, acestea se pot modifica ca
urmare a unei mutaii genetice ce conduce la absena unei enzime
implicate n sinteza metaboliilor eseniali (aminoacizi, acizi grai,
vitamine, baze azotate, etc.).
Din punct de vedere al capacitii de sintez, pot fi:

Bacterii prototrofe acestea pot sintetiza toi metaboliii


eseniali necesari creterii i multiplicrii lor.

Bacterii auxotrofe sunt mutante care nu pot sintetiza


un anumit metabolit esenial (factor de cretere) i se pot
dezvolta doar dac este prezent n mediu.

Bacteriile auxotrofe au dependen fa de unul sau mai


muli factori de cretere (aminoacizi, vitamine, pirimidine, purine,
etc.) putndu-se dezvolta doar n mediile care i conin. Dup unii
autori, acest tip de comportament al bacteriilor auxotrofe poate

Morfologie i structur bacterian

62

explica trecerea unor specii de la saprofitism la comensalism i


chiar parazitism.

5 CULTIVAREA BACTERIILOR
5.1 NOIUNI GENERALE
Cultivarea microorganismelor in vitro reprezint o etap
esenial pentru clarificarea diagnosticului etiologic al unei infecii
i are aplicaii largi n activiti industriale, semiindustriale i n
cercetarea tiinific fundamental.
n laborator, cultivarea majoritii bacteriilor patogene
este posibil prin nsmnarea pe medii de cultur acelulare.
Mult mai rar, pentru unii germeni, obligatoriu intracelulari, se
pot folosi sisteme biologice vii (culturi celulare, ou embrionate,
animale de laborator). Pentru a putea lua n discuie, n mod
corect, cultivarea bacteriilor, este necesar cunoaterea unor
termeni care fac parte din limbajul specific al microbiologiei.
Mediile de cultur sunt substraturi solide, semisolide sau
lichide ce pot asigura substanele plastice i energetice necesare
creterii i multiplicrii bacteriilor n laborator.
n bacteriologie, prin termenul de nsmnare este definit
manevra de depunere a unei cantiti de germeni n interiorul sau
pe suprafaa unui mediu acelular.
Inocularea este operaiunea de introducere a unei cantiti
de germeni ntr-un sistem biologic viu.

Morfologie i structur bacterian

63

O cultur bacterian este alctuit din toate bacteriile ce


cresc n interiorul sau pe suprafaa unui mediu de cultur.
Coloniile bacteriene sunt formaiuni de diverse forme i
dimensiuni care pot fi vzute cu ochiul liber pe suprafaa unui
mediu de cultur solid. Fiecare colonie reprezint o clon.
Clona este o populaie bacterian format din indivizi cu
un bagaj genetic identic, provenii dintr-un strmo comun.
O cultur monobacterian (pur) conine un singur tip de
colonii, corespunztoare creterii unei specii bacteriene.
O cultur este pluribacterian (mixt) atunci cnd aceasta
este alctuit din mai multe tipuri de colonii, corespunztoare
unor specii diferite.
Termenul de inocul se refer la o suspensie microbian,
cu o anumit concentraie (germeniml), preparat, de obicei,
prin introducerea, n laborator, a unei cantiti definite de
germeni ntr-un lichid steril (bulion de carne, ser fiziologic,
etc.) care este nsmnat pe suprafaa sau n interiorul unui
mediu acelular sau introdus ntr-un sistem biologic
Dispersia inoculului reprezint operaiunea de diseminare
a produsului de nsmnat, cu o ans-bucl, prin micri de
zig-zag, ntr-un strat ct mai subire, pe suprafaa unui mediu
de cultur solid, n scopul obinerii unor colonii bacteriene
izolate, necesare pentru identificarea de gen sau de specie i
pentru testarea comportamentului fa de antibiotice.
Creterea este procesul de mrire coordonat a structurilor
bacteriene prin sinteza de noi molecule identice care se poate
produce atta timp ct raportul ntre suprafaa i volumul celulei
este supraunitar.

Morfologie i structur bacterian

64

Multiplicarea bacteriilor reprezint procesul de diviziune


a celulei bacteriene care succede creterii acesteia permind
restabilirea unui raport ntre suprafa i volum favorabil
schimburilor intense cu mediul extern.

5.2 CONDIII NECESARE DEZVOLTRII BACTERIENE


In vitro, germenii necesit, pentru dezvoltare i multiplicare,
anumite condiii fizico-chimice:

Temperatura

n funcie de variaiile de temperatur pe care le tolereaz,


bacteriile se clasific n:

Bacterii stenotermale: necesit o temperatur relativ


constant;

Bacterii eurytermale: pot suporta variaii largi de


temperatur.

n raport cu temperatura optim, se disting:


Bacterii criofile (lb gr.: crios = ngheat) sau psihrofile (lb.
gr.: psikhros = frig): temperatura optim = 10-15C;
triesc n zonele reci ale globului reprezentnd i cauza
degradrii alimentelor sau medicamentelor pstrate n
frigidere; unele sunt condiionat patogene;
Bacterii mezofile: temperatura optim = 30-37C; sunt
cele mai rspndite, libere sau n organismul unei
gazde; sunt implicate n diverse infecii ale omului sau
animalelor cu snge cald;

Morfologie i structur bacterian

65

Bacterii termofile: temperatura optim = 50-60C; se


gsesc n zonele calde, puternic expuse la soare, ape
termale sau de nclzire; sunt nepatogene.
Pe msura apropierii de temperatura minim a intervalului
tolerat, metabolismul bacterian ncetinete i timpul de generaie
se prelungete treptat pn la un punct critic cnd multiplicarea
nceteaz. n schimb, spre temperatura maxim, metabolismul
este accelerat aprnd alterri ale celulei bacteriene. Temperatura
optim reprezint valoarea termic la care dezvoltarea bacterian
este cea mai activ.

Umiditatea

Dac nu este asigurat umiditatea necesar a mediului


de cultur, dezvoltarea bacteriilor nceteaz.

pH-ul

Majoritatea bacteriilor prefer valorile pH-ului (termen


generic dat logaritmului cu semn schimbat al concentraiei de
H dintr-o soluie ce indic gradul de aciditate sau alcalinitate
al acesteia) din zona neutralitii (7,2-7,6). Sunt i specii care
se dezvolt numai n medii acide (ex.: genul Lactobacillus) sau
alcaline (ex.:genul Vibrio). Bacteriile care necesit un pH acid
pentru dezvoltarea lor se numesc acidofile.

Presiunea osmotic

Majoritatea bacteriilor sunt osmotolerante (pot suporta


variaii largi ale presiunii osmotice). Au fost descrise i specii
halofile (necesit concentraii mari de clorur de sodiu ex.:
Vibrio parahaemolyticus) sau halotolerante (tolereaz concentraii
mari de NaCl ex.: stafilococii).

Condiii necesare unor categorii de bacterii

Morfologie i structur bacterian

66

n acest context, pot fi menionate absena sau prezena i


concentraia oxigenului (bacterii aerobe, anaerobe, microaerofile,
etc.), ntunericul (unele bacterii chimiosintetizante), atmosfera de
5-8 % dioxid de carbon (bacteriile pretenioase), etc..

5.3 CARACTERE DE CULTUR


Caracterele culturale ale bacteriilor se caracterizeaz printr-o
mare variabilitate existnd posibilitatea ca modalitile de cretere
bacterian pen interiorul unui mediu acelular s fie diferite chiar
n cazul unor bacterii din aceeai specie.
Astfel, pe mediile solide, n funcie de natura acestora, de
condiiile de incubare, de specie i de virulena tulpinii, bacteriile
adopt mai frecvent urmtoarele forme:

colonia S (limba englez: smooth = neted) reprezint,


n general, modul de cretere al tulpinilor bacteriene
virulente (care au capacitate de sintez a structurilor
speciale din stratul superficial al peretelui bacterian);
este lucioas, bombat, puin aderent, rotund, cu
suprafa neted, margini regulate i o consisten
cremoas sau apoas;

colonia R (limba englez: rough = aspru) n mod


obinuit, este caracteristic tulpinilor bacteriene nvechite, nevirulente; este mat, plat, aderent, de
form neregulat, cu suprafa rugoas, zbrcit, cu
margini dinate, uscat.

Exist excepii precum speciile Corynebacterium diphteriae,


Mycobacterium tuberculosis i Bacillus anthracis, la care tulpinile
virulente cresc sub forma R.
n afara acestor forme de cretere, se mai pot descrie:

Morfologie i structur bacterian

67

colonia M (mucoid) - corespunde unor specii nalt


virulente, capabile s formeze capsule de grosimi
mari (ex.: Klebsiella pneumoniae); are dimensiuni mai
crescute, este strlucitoare, rotund, bine delimitat,
bombat, cu suprafa neted, consisten mucoid
i tendin de confluare;

colonia G (pitic) - reprezint forma de cretere pe


medii solide a unor germeni care n mod normal
formeaz colonii mari dar n urma aciunii unor
substane antimicrobiene i-au pierdut din virulen;
este punctiform, transparent.

n medii lichide, semnele de cretere ale acestor forme


bacteriene sunt, de asemenea, distincte. Astfel:

forma S - tulbur omogen mediul;

forma R - formeaz depozit grunjos la fundul tubului.

Factorii care determin variaia de form de cretere sunt


calitile acestora (potenialul nutritiv, umiditatea, pH-ul), specia,
condiiile de incubare (temperatur, umiditate, timp), vrsta
culturii sau prezena unor inductori (antibiotice, bacteriofagi).

5.4 DINAMICA CRETERII BACTERIENE


n condiii de laborator, cultivarea bacteriilor se realizeaz
ntr-un volum de mediu limitat, deci culturile sunt discontinue.
Aprecierea unei culturi bacteriene poate fi calitativ sau
cantitativ. n primul caz, se pot observa cu ochiul liber caracterele de cultur. n al doilea caz, determinarea numrului de

Morfologie i structur bacterian

68

bacterii/ml de cultur se poate realiza prin metode colorimetrice


sau prin metoda diluiilor.
Creterea bacteriilor (n volum dup o raie cubic, n
suprafa dup o raie ptratic) in vitro este limitat de
aportul de nutrieni i de acumularea de metabolii rezultai
din procesele catabolice.
Atunci cnd raportul ntre suprafa i volum devine
subunitar, creterea nceteaz i bacteriile ncep s se multiplice.
Dinamica creterii i multiplicrii unei populaii bacteriene
in vitro a fost reprezentat printr-o curb cu 6 poriuni:

faza de laten (numit i faza de lag de la engl. to


lag = a ntrzia) bacteriile nu intr n diviziune,
numrul lor rmnnd aproximativ constant; aceast
ntrziere se datoreaz refacerii stocului de ribozomi
i enzime (dac inoculul provenea dintr-o cultur
veche), vindecrii unor leziuni celulare (dac germenii
au fost expui la antibiotice) sau selectrii unor mutante
care se adapteaz la noile condiii; n aceast faz,
bacteriile sunt mari, active metabolic i foarte sensibile la
agenii antimicrobieni;

faza de accelerare ncepe multiplicarea bacteriilor


ntr-un ritm din ce n ce mai rapid, pn la o valoare
constant a timpului de generaie;

faza exponenial (logaritmic) nmulirea bacteriilor


continu (timpul de generaie fiind constant) pn se
consum unul sau mai muli nutrieni sau se acumuleaz metabolii toxici; n aceast faz, bacteriile
au citoplasma intens bazofil, fr incluzii, sensibili-

Morfologie i structur bacterian

69

tatea la antibiotice este ridicat iar antigenele sunt


bine exprimate; din aceste motive, n cursul acestei
faze se recolteaz antigene pentru prepararea vaccinurilor i se efectueaz antibiograma;

faza de ncetinire multiplicarea bacterian continu


ns ntr-un ritm mai lent;

faza staionar numrul germenilor vii rmne nc


constant deoarece, n cazul epuizrii unui nutrient,
toate bacteriile mai sunt vii iar dac s-au acumulat
metabolii, numrul celor care nc se divid este egal
cu al celor care mor; bacteriile sunt mature, mai mici,
cu citoplasma slab bazofil i cu incluzii; la speciile
sporogene, acum ncepe formarea sporilor; sensibilitatea
la substane antimicrobiene este slab; aceast faz este
optim pentru identificarea bacteriilor;

faza de declin bacteriile mor progresiv; apar forme


de involuie, nepatogene i sporii maturi, la speciile
sporogene.

Morfologie i structur bacterian

70

Figura 27 Dinamica creterii i multiplicrii bacteriilor

6 AGENI ACTIVI PE MICROORGANISME


6.1 ACIUNEA AGENILOR FIZICI
Efectele pe care le pot produce agenii fizici depind, pe de
o parte, de concentraia acestora, de timpul de expunere, de
natura mediului n care se produce interaciunea i, pe de alt
parte, de specia bacterian, stadiul de dezvoltare i particularitile morfologice ale bacteriilor.
1. Temperatura

Cldura

omoar bacteriile prin coagularea proteinelor, i,


ntr-o mai mic msur, prin accelerarea proceselor
metabolice (cu eliberarea unor cantiti crescute de

Morfologie i structur bacterian

71

substane toxice) sau insuficiena acut de oxigen (n


cazul bacteriilor aerobe);

efectul acesteia este potenat de prezena apei;

omoar formele vegetative (n 10, la 30-60C prin


cldur umed i la 60-80C prin cldur uscat)
i sporii (n 20, la 100-120C prin cldur umed
i la 160-180C prin cldur uscat);

are aplicaie practic n sterilizare (nclzirea pn la


incandescen a instrumentelor metalice, sterilizarea
cu aer cald n cuptorul Poupinel sau cu vapori de ap
sub presiune n autoclav) fiind preferat, pentru toate
materialele care nu se degradeaz, datorit faptului c
este ieftin, rapid i eficient.

Desicarea (uscarea)

conduce la pierderea apei din celula bacterian;

efectele constau n creterea concentraiei srurilor i


denaturarea proteinelor;

comportamentul bacteriilor n aceste condiii este


diferit, unele fiind omorte rapid (ex.: spirochetele,
neisseriile, pneumococii) i altele rmnnd viabile
perioade ndelungate (ex.: stafilococii, sporii);

are aplicaie n liofilizare (deshidratarea n vid a unei


suspensii bacteriene n scopul transportrii la mari
distane, n condiii de securitate microbiologic, n
fiole de sticl nchise).

Frigul

Morfologie i structur bacterian

72

de obicei, produce ncetinirea reaciilor metabolice


i inhibarea multiplicrii, mai rar exercitnd un efect
bactericid;

moartea prin frig a bacteriilor se datoreaz creterii


vscozitii citoplasmei, formrii cristalelor de ghea
care lezeaz mecanic, concentrrii srurilor minerale
i denaturrii proteinelor;

are aplicaie practic n congelare, efectuat n scopul


conservrii germenilor respectivi.

2. Presiunea osmotic

aciunea este mai intens cnd se produc variaii


brute ale acesteia;

n medii hipertone se produce plasmoliza (pierderea


apei, urmat de retractarea citoplasmei i moarte) iar
n medii hipotone, plasmoptiza (acumulare de ap n
celul, balonizarea acesteia, lezarea peretelui celular i
moarte);

celulele tinere sunt cele mai sensibile;

are aplicaie n conservarea alimentelor.

3. Presiunea mecanic

determin denaturarea i coagularea proteinelor;

efectul este mai intens cnd variaiile sunt brute;

omoar formele vegetative la 6.000 atm. iar sporii


la 12.000 atm.

4. Radiaiile

stimuleaz funciile fiziologice, induce producerea


de mutaii genetice sau moartea;

Morfologie i structur bacterian

73

efectul acestora depinde de lungimea de und (),


de intensitatea sursei i de durata expunerii;

se pot utiliza:
o

radiaii ultraviolete afecteaz proteinele i acizii


nucleici; se folosesc pentru scderea ncrcturii
microbiene a suprafeelor i a aerului din anumite
sectoare medicale; utilizarea lor impune respectarea
normelor de protecie deoarece pot produce leziuni,
mai ales ale ochilor, nsoite de orbire;

oradiaii ionizante () au efect puternic, afectnd


acizii nucleici i proteinele bacteriene; ionizarea
structurilor; au aplicaii n sterilizare;
o

fasciculul laser (fascicul concentrat de fotoni cu o


lungime de und uniform) datorit concentrrii
unei energii foarte mari pe suprafee mici, distruge
bacteriile instantaneu;

omicrounde sunt utilizate n laboratorul de microbiologie n scopul resterilizrii mediilor de cultur


acelulare pstrate mult timp.
5. Ultrasunetele

undele ultrasonore cu frecven de 200 Hz omoar


bacteriile n cteva minute;

trecerea undei prin apa din celul produce dezintegrarea structurilor celulare;

au aplicaii n procesul de sterilizare i obinerea


unor constituieni celulari.

Morfologie i structur bacterian

74

6.2 ACIUNEA AGENILOR CHIMICI


Aciunea diverselor substane chimice asupra bacteriilor
depinde de compoziia chimic a acestora, de concentraie i
de timpul de aciune.
Ca i n cazul altor categorii de ageni antimicrobieni, n
raport cu intensitatea alterrilor pe care le produc, substanele
chimice pot fi:

bacteriostatice blocheaz multiplicarea bacterian;

bactericide omoar bacteriile prin alterri profunde ale


componentelor structurale sau interferarea unor procese
metabolice vitale.

n funcie de mecanismul de aciune, agenii chimici pot fi:

ageni care denatureaz starea coloidal a proteinelor


pot fi acizi (ex.: acid clorhidric), alcali (ex.: hidroxid de
sodiu) sau alcooli (ex.: alcool etilic de 50-70); cei mai
eficieni i mai larg utilizai n practic sunt alcoolii;
efectul este mai redus n cazul mycobacteriilor i sporilor;

ageni care acioneaz pe gruprile chimice libere ale


enzimelor (- NH 2 , - SH, - COOH, etc.) - mai sensibile
sunt gruprile sulfhidril (- SH) care pot fi suprimate
prin oxidare (ex.: peroxizi ca KMnO 4 sau H2O2, halogeni
ca iodul i clorul), prin blocare direct (ex.: mercur,
argint)

sau

alchilare

(ex.:

formaldehida,

glutaraldehida); unii sunt folosii ca antiseptice (ex.:


alcool iodat 1 %); clorul este bactericid fiind utilizat
pentru apa potabil (forma gazoas), ca dezinfectant
(cloramin

%,

acid

hipocloros)

sau

antiseptic

(cloramin 1 %); formaldehida, cu aciune intens

Morfologie i structur bacterian

75

bactericid, se folosete, n form gazoas sau soluii,


pentru dezinfectare sau n scopul micorrii ncrcturii
microbiene a aerului din ncperi, saltelelor, pernelor,
etc.;

ageni care lezeaz membranele celulare afecteaz


permeabilitatea selectiv a membranelor; din aceast
categorie fac parte fenolii (lizol, crezol, diclorfenol, hexaclorfenol, etc.) i detergenii cationici (sruri cuaternare
de amoniu);

ageni care altereaz acizii nucleici aciunea bactericid


a acestora este redus; cei mai importani sunt derivaii
de anilin (ex.: violet de genian, cristal violet, verdele
malahit, etc); pot fiutilizai cu succes i ca antiseptice
sau pentru prepararea mediilor de cultur selective
deoarece i menin capacitatea bacteriostatic chiar i la
diluii mari.

n raport cu natura aciunii lor, agenii chimici pot avea:

aciune nespecific prin aciunea asupra microorganismelor, altereaz i structuri sau funcii ale organismului
gazdei (antiseptice, dezinfectante, conservante);

aciune specific intervin n mod selectiv pe anumite


secvene din metabolismul bacterian (chimioterapice).

Pornind de la aceste aspecte, au fost definite noiunile:

Antisepticele: sunt substane cu aciune antibacterian


reversibil i toxicitate relativ redus ceea ce permite
aplicarea lor pe esuturi vii.

Morfologie i structur bacterian

76

Antisepsia:: const n ansamblul metodelor prin care se


ncearc distrugerea microorganismelor vii prezente la
nivelul tegumentelor, mucoaselor sau plgilor.

Asepsia:: acest termen se refer la totalitatea manoperelor prin care se previne contaminarea unui substrat.

Dezinfectantele: sunt substane cu aciune antibacterian ireversibil i toxicitate relativ ridicat ceea ce permite
utilizarea acestora doar pentru substraturi inerte, nevii.

Principalii ageni chimici sunt prezentai n tabelul 2:


Tabelul 2.
Substana

Hipocl

orit sodiu

Hipocl

orit calciu

Clora

Compui de clor
Mecanism de aciune
Oxideaz gruprile
sulfhidril
Timp de aciune 10-60
minute

Utilizare
Dezinfecie suprafee
Dezinfecie echipamente
Dezinfecie instrumente
Dezinfecia apei (clor)

mina
Dioxid
de clor
Avantaje: ieftin, accesibil, spectru larg, activ i la temperaturi sczute
Alcooli
Substana
Mecanism de aciune
Utilizare

Etanol Denatureaz starea


Antiseptizarea tegumentului

Izopro
coloidal a proteinelor
Dezinfecie suprafee
panol
Timp de aciune 10-30
minute
Avantaje: aciune rapid, necoroziv
Compui de fenol
Substana
Mecanism de aciune
Utilizare

Lizol
Distrug membrana
Dezinfecie suprafee

Morfologie i structur bacterian

Crezol
Diclorf

enol

celular
Timp de aciune 10-30
minute

77

Dezinfecie echipamente
Soluii i spunuri
antiseptice

Hexacl
orfenol
Avantaje: biodegradabili, las un reziduu activ pe suprafee
Peroxizi
Substana
Mecanism de aciune
Utilizare

KMnO Oxideaz gruprile


Dezinfecie suprafee
sulfhidril
4
Antiseptizarea tegumentului

H2O2
Timp de aciune 10-30
i mucoaselor
(soluie 3-30%)
minute
Avantaje: stabili, toxicitate sczut a diluiilor de lucru
Ageni alchilani
Substana
Mecanism de aciune
Utilizare

Formol Alchilarea gruprilor sulfhidril Dezinfecie ncperi


(soluie 37-40%
Timp de aciune de la
Dezinfecie echipamente
aldehid formic n
10-30 minute (echipamente) Dezinfecie instrumente
ap
pn la 1-8 ore (ncperi) Conservarea probelor

Formal
(formol)
dehida (gaz)

Glutaral
dehida (gaz)

Oxid
de etilen (gaz)
Avantaje: spectru larg, ieftin, nu corodeaz metalele, activ i pe pelicule organice
Agent chimic germicid (lb.gr.: cida = a omor): dezinfectant

activ asupra diverselor tipuri de microorganisme.

Agent chimic germistatic: (lb.gr.: statikas = stopare, oprire):


substan care blocheaz multiplicarea unor tipuri diferite
de microorganisme.

Agent chimic bactericid: substan cu aciune specific,


selectiv, care omoar bacteriile.

Agent chimic virulicid: substan ce inactiveaz virusurile.

Morfologie i structur bacterian

78

Inactivare: termen utilizat n loc de distrugere n cazul


virusurilor care nu sunt particule vii.

Agent chimic fungicid: substan cu aciune letal asupra


fungilor.

Agent chimic bacteriostatic: substan care blocheaz multiplicarea bacterian.

Agent fungistatic: substan ce inhib nmulirea fungilor.

Dezinfecia: const n ansamblul msurilor care vizeaz


distrugerea microbilor patogeni din mediul extern pn
la un nivel la care nu mai prezint pericol, pentru a
preveni transmiterea bolilor infecioase. Spre deosebire
de sterilizri, aceasta permite persistena, pe zonele de
aplicare, a unor microorganisme vii.

Sterilizarea chimic - const n ansamblul metodelor care


utilizeaz diverse substane chimice, n stare lichid sau
gazoas, n scopul distrugerii de pe dintr-un substrat
solid, lichid sau gazos, a tuturor microorganismelor vii,
capabile de multiplicare, att n form vegetativ ct i
sporulat.

Decontaminarea: acest termen se folosete relativ frecvent


n loc de dezinfecie dar are un sens mai larg incluznd
i inactivarea toxinelor bacterine.

Conservantele: sunt substane care se folosesc pentru


evitarea contaminrii unor preparate (seruri, vaccinuri,
medicamente, etc.).

Morfologie i structur bacterian

79

Conservarea: este procedeul efectuat n scopul prevenirii


contaminrii unor preparate i const n adugarea n
acestea a unor substane chimice.

Chimioterapicele: sunt substane chimice preparate n


mod sintetic care au aciune antibacterian i sunt
netoxice pentru organismul uman ceea ce permite
utilizarea lor n terapia infeciilor.

Chimioterapia: se refer la utilizarea anumitor substane


chimice n scop terapeutic.

n practic, alegerea unei substane antibacteriene se face n


funcie de mai multe criterii ca eficiena aciunii lor asupra
germenilor, toxicitatea pentru organismul uman, dificultatea
utilizrii, costurile economice, natura substratului, etc.

6.3 ACIUNEA AGENILOR BIOLOGICI


n categoria substanelor de origine biologic cu aciune
bacteriostatic sau bactericid pot fi menionate, n principal,
bacteriocinele i antibioticele naturale.
Bacteriocinele

sunt produse de diferite specii de bacterii Gram pozitive


i negative (peste 50), de unele levuri sau plante;

sunt de natur proteic;

au aciune bactericid asupra multor bacterii, chiar din


aceeai specie, dar nu i asupra celulelor care le-au produs;

sinteza lor este determinat plasmidic;

au capacitatea de a se ataa de receptori membranari


specifici, sunt adsorbite n celul, blocheaz sinteza
proteinelor i a acizilor nucleici i determin liza.

Morfologie i structur bacterian

80

Antibioticele
Antibioticele au fost definite ca fiind produi de metabolism
ai unor bacterii sau fungi capabili s distrug sau s inhibe
multiplicarea unor microorganisme (n special bacterii). De fapt,
aceast definiie se refer la antibioticele naturale. n prezent, de
multe ori, n practica clinic, aceast denumire este ns extins i
la chimioterapice (substane antimicrobiene de sintez).
Antibioticele pot fi clasificate dup mai multe criterii:
Dup origine:

naturale (ex.: peniciline, eritromicina, streptomicina,


kanamicina);

semisintetice (ex.: tetracicline, cefalosporine, amikacina,


rifampicina);

sintetice (ex.: cloramfenicol).

Dup natura aciunii lor:

bactericide (ex.: peniciline, cefalosporine, polimixine);

bacteriostatice (ex.: tetracicline, cloramfenicol).

Dup spectrul de aciune:

cu spectru ngust - pot fi de 2 tipuri:

de tip penicilinic: acioneaz pe cocii Gram pozitivi


i negativi i bacilii Gram pozitivi (ex.: peniciline,
eritromicina, vancomicina);

de tip streptomicinic: acioneaz pe cocii Gram


pozitivi i negativi i bacilii Gram negativi (ex.:
aminoglicozide, polimixine);

cu spectru larg: au aciune asupra cocilor Gram pozitivi i


negativi, bacililor Gram pozitivi i negativi, spirochetelor,

Morfologie i structur bacterian

81

rickettsiilor, chlamidiilor, etc. (tetracicline, cloramfenicolul,


cefalosporine).
Dup mecanismul de aciune:

cu aciuni asupra peretelui celular (ex.: cefalosporinele,


penicilinele, vancomicina, bacitracina);

cu aciuni la nivelul membranei citoplasmatice (ex.:


polimixinele);

cu aciuni pe proteine (ex.: tetraciclinele, aminoglicozidele,


cloramfenicolul, lincomicine);

cu aciuni pe acizii nucleici (ex.: rifampicina, metronidazolul);

cu aciune asupra enzimelor (ex.: chinolonele);

inhibitoare ale creterii prin antagonism competitiv (ex.:


sulfamidele).

Dup structura chimic:

-lactamine (ex.: peniciline, cefalosporine, carbapeneme,


monobactame);

aminoglicozide (ex.: amikacina, kanamicina, gentamicina,


streptomicina);

macrolide (ex.: eritromicina, spiramicina, oleandomicina);

tetracicline (ex.: tetraciclina);

polipeptide (ex.: vancomicina);

alte categorii (ex.: rifampicina, lincomicina, cloramfenicolul, clindamicina, lincomicina).

Antagonismul microbian implic, pe lng producerea de


bacteriocine, competiia pentru nutrieni sau pentru spaiu vital
i elaborarea de metabolii toxici pentru ali germeni (ex.: acizi
sau peroxizi de hidrogen). Acest mod al bacteriilor de a inte-

Morfologie i structur bacterian

82

raciona constituie un mecanism de protecie la nivelul zonelor


normal contaminate ale organismului (microbiota indigen).

7 NOIUNI DE ECOLOGIE BACTERIAN


7.1 LOCUL I ROLUL MICROBILOR N NATUR
Spre deosebire de eucariote care se dezvolt doar n anumite
biotopuri, bacteriile, microorganisme cu structur de tip procariot,
se pot adapta la cele mai diverse condiii de via. n pofida
dimensiunilor lor foate mici, au funcii similare cu orice organism
viu cu organizare mai complex (se nasc din prini, se hrnesc,
cresc, excret produse, rspund n mod specific la ageni externi,
se reproduc i mor).
Pe parcursul evoluiei vieii pe Terra, s-au selectat specii de
bacterii care pot tri n cele mai vitrege condiii (temperaturile mari
i lipsa de umiditate din deerturi, frigul i solul arid din zonele
polare, presiunea ridicat i salinitatea din apa oceanelor, aciditatea
sucurilor digestive, medii fr oxigen, etc.).
Capacitatea de adaptare a acestora, mai mare dect la orice
alt tip de organisme explic numrul imens, varietatea speciilor i
larga lor rspndire. Bacteriile se gsesc n sol, ap, aer, plante, pe
suprafaa i n cavitile naturale deschise din corpul omului i

Morfologie i structur bacterian

83

animalelor. Din aceste zone pot ajunge pe orice obiect sau element
al mediului extern.
De aceea, ubicvitatea bacteriilor (rspndirea lor universal)
este un concept de baz al microbiologiei, important n practica
diagnosticului bacteriologic.
Rolul bacteriilor n natur este fundamental. Ele descompun
materia organic moart (cadavrele de vegetale i animale, dejecte,
excreii) pn la elemente simple. Dac elementele fixate nu ar fi
eliberate prin aciunea microorganismelor, acestea ar fi epuizate i
viaa ar disprea de pe Terra. Bacteriile particip activ la ciclul
carbonului descompunnd majoritatea compuilor acestuia sau
chiar fixndu-l, prin procese de sintez.
n ciclul natural al azotului, bacteriile au un rol esenial prin
participarea la reacii de amonificare (descompunerea proteinelor
din cadavre n aminoacizi care, prin dezaminare, elibereaz NH 3),
nitrificare (NH3 nitrai), reducere a nitrailor (nitrai NH3),
asimilarea

azotului

(transformarea

NH3

sau

nitrailor

aminoacizi i proteine), denitrificare (n condiii de anaerobioz,


unele bacterii pot folosi oxigenul din NO3 elibernd azotul) sau
fixarea azotului gazos din aer n aminoacizi i proteine pentru a
putea fi utilizat de plante i animale.
Existena

bacteriilor

este

crucial

pentru

sntatea

mediului nconjurtor. Acestea nu triesc izolate, ca indivizi, ci n


populaii aflate n relaie permanent cu mediul.
Omul, ca i alte forme de via cu organizare mai complex,
triete ntr-o lume dominat de bacterii. Abundena i facilitatea
lor de a se dezvolta n orice mediu care asigur condiii minime de
adpost, hran i protecie influeneaz nemijlocit diverse domenii

Morfologie i structur bacterian

84

ale vieii umane. n prezent, bacteriile sunt utilizate pentru obinerea unor produse necesare omului n industria alimentar (pine,
brnzeturi,

buturi,

murturi),

farmaceutic

(antibiotice,

hormoni, mediatori, factori de coagulare, vitamine, etc.), chimic


(acid lactic, acid acetic, etanol, aceton), textil (prelucrarea inului,
cnepei, iutei), de pielrie (tbcrie), etc. sau pentru creterea
productivi-tii

mbuntirea

calitativ

plantelor,

agricultur.
Majoritatea speciilor bacteriene au aciuni benefice,
chiar vitale pentru om exercitndu-i funciile la nivelul
suprafeelor i zonelor normal contaminate ale organismului uman.
Doar o mic parte au efecte nocive determinnd, dup ptrunderea
n esuturi sau umori, stri morbide de tip infecios.
n natur, se estimeaz c raportul ntre bacteriile utile i
cele duntoare este de aproximativ 10001.
Bacteriile au un loc privilegiat n cadrul microorganismelor
cunoscndndu-se, pn n prezent, multiple aspecte referitoare
la acestea. Aceasta se datoreaz faptului c au fost implicate n
etiologia marilor flageluri (ciuma, holera, variola, difteria, etc.) care
au decimat, de-a lungul secolelor, populaia globului, sunt uor de
studiat datorit posibilitilor de a fi cultivate in vitro, succesele
terapeutice au fost importante dup descoperirea antibioticelor i
sunt utilizate din ce n ce mai mult n biotehnologie.

7.2 RELAII ECOLOGICE


n natur, organismele vii interacioneaz permanent pentru
a-i asigura elementele necesare supravieuirii. Organismele de tip

Morfologie i structur bacterian

85

eucariot au aprut i s-au dezvoltat ntr-o lume populat deja de


procariote (bacterii).
Prin urmare, se produc interacii complexe ntre bacterii i
organismele superioare sau alte tipuri de microorganisme, ca i
ntre acestea i mediul lor natural, numite generic relaii ecologice.
Studiul acestora face obiectul ecologiei.
Definirea acestor relaii ridic probleme n faa specialitilor
deoarece cultivarea in vitro nu permite reproducerea cu exactitate
a condiiilor naturale.
Sunt numite saprofite (limba greac: sapros = putred, phyton
= plant) speciile de microorganisme care se dezvolt pe corpurile
vegetale sau animale moarte hrnindu-se cu materie organic n
descompunere. Acestea nu necesit gazde vii ci triesc, n mod
independent, n mediul extern.
Termenul de simbioz (limba greac: syn = mpreun, bios
= via) definete interaciunea intim, de lung durat, ntre 2
organisme. Ca urmare a acestei asociaii, cel puin unul dintre
parteneri are de ctigat. n raport cu beneficiul (adpost, hran,
protecie, etc.) pe care l pot obine ca urmare a asocierii, ntre cele
dou microorganisme, numite simbioni, se pot stabili urmtoarele
tipuri de relaii:

Relaii de mutualism n cadrul acestora, cooperarea


celor 2 parteneri este reciproc avantajoas; (ex.: bacteriile
lactice elibereaz acizi, consumai de drojdii care refac
astfel pH-ul necesar dezvoltrii lor).

Relaii de comensalism const n faptul c un simbiont


are un beneficiu din asociere fr a-i provoca daune

Morfologie i structur bacterian

86

celuilalt (ex.: Staphylococcus aureus elibereaz n mediu


factorul V = N.A.D. necesar creterii speciei H. influenzae).

Relaii de parazitism unul din simbioni triete i se


hrnete pe seama celuilalt aducndu-i daune (ex.: bacteriofagii, virusuri care paraziteaz bacteriile).

Parazitismul poate fi permanent sau temporar iar microorganismele parazite pot fi monoxene (i desfoar ciclul evolutiv
ntr-o singur gazd) sau heteroxene (necesit trecerea succesiv
prin mai multe gazde).
Aceste tipuri de relaii se pot stabili nu numai ntre diverse
microorganisme ci i ntre acestea i un organism superior cu
funcie de gazd (mutualism ex.: E. coli din intestin triete pe
seama gazdei, dar produce vitamine, mai ales din grupul B;
comensalism ex.: flora microbian a tegumentului; parazitism
ex.: germenii patogeni).
n mod succint, n tabelul 3 este prezentat efectul asocierii
pentru fiecare dintre simbioni i pentru fiecare relaie n parte
care poate fi benefic (), nociv () sau inexistent (0).
Tabelul 3.
Tipul de relaie
Microbul
Gazda

Mutualism

Comensalism
0

Parazitism
Relaiile ntre microorganisme i mediul de via au evoluat
pe parcursul dezvoltrii filogenetice. Datorit dispersiei pe glob i
schimbrilor climaterice, acestea nu au mai avut acces la anumii
nutrieni suferind permanente adaptri. Necesitatea obinerii unor

Morfologie i structur bacterian

87

nutrieni pe care nu-i puteau sintetiza, a creat grade diferite de


dependen fa de anumite gazde. Prin urmare, n mod treptat,
unele specii microbiene au trecut de la saprofitism la comensalism
sau chiar parazitism.
n funcie de influena asocierii asupra aciunilor microorganismelor, se disting:

Relaii sinergice constau n faptul c, datorit asocierii,


partenerii realizeaz aciuni pe care nu le puteau efectua
singuri sau efectul acestora este accentuat (ex.: culturi
mixte de bacterii i fungi ce necesit prezena n mediu a
tiaminei, fiecare partener sintetiznd doar un component
al acesteia, respectiv nucleul tiazolic sau pirimidinic).

Relaii antagonice se realizeaz cnd unul din parteneri


mpiedic dezvoltarea celuilalt prin competiia pentru un
nutrient (ex.: culturi mixte de stafilococi i gonococi), eliberarea unui metabolit nociv cu aciune nespecific (ex.:
bacteriile lactice produc acizi i alcooli care inhib majoritatea

germenilor

patogeni)

sau

specific

(ex.:

bacteriocinele excretate de unele specii inhib dezvoltarea


altora).

7.3 MICROBIOTE
Datorit rspndirii universale a microorganismelor, n toate
elementele mediului extern (sol, aer, ap, obiecte, vieuitoare, etc),
tegumentul i cavitile naturale deschise ale organismului uman
sunt populate, n mod constant, de o flor microbian divers.
Intrauterin, embrionul se dezvolt n condiii de sterilitate. La
natere, prin contact cu pereii vaginului i tegumentul matern,

Morfologie i structur bacterian

88

ncepe contaminarea organismului nou-nscut care continu pe


tot parcursul vieii. n acest mod, pe suprafeele i pe mucoasele
expuse ale organismului, ajung numeroase specii dar o mic parte
din acestea, adaptate filogenetic, se pot dezvolta n condiiile locale
participnd la constituirea microbiotelor specifice.
ntr-o prim faz, se realizeaz contaminarea care const n
simpla prezen a microorganismelor pe suprafeele organismului
gazd, urmat, n anumite condiii de mediu i n cazul unor
specii adaptate, de colonizare, procesul de multiplicare a acestora
fr a determina ns nici un fel de reacii.
Colonizarea este condiionat de existena unor condiii
favorabile de mediu (nutrieni, pH), eficiena aprrii antiinfecioase locale (clearance-ul muco-ciliar, fluxul unidirecional al
lichidelor, turn-overul celulelor epiteliale, imunoglobuline A),
prezena unor factori nocivi (antibiotice, antagonism microbian).
Denumirile generice de microbiot indigen sau flor
normal se refer la microorganismele prezente n mod obinuit
n organismul indivizilor sntoi. La om aceasta este variat i
extrem de abundent. Numrul de germeni a fost estimat ca fiind
de 1014, de 10 ori mai mare dect cel al celulelor organismului
uman (1013).
Microorganismele care colonizeaz suprafeele sau cavitile
organismului uman pot fi bine adaptate, persistente perioade lungi
de timp, formnd flora rezident (autohton) sau tranzitorii, fcnd
parte din flora flotant (allohton).
Flora rezident a tegumentului este localizat la nivelul unor
structuri mai profunde (foliculi piloi, canalele glandelor sebacee
sau sudoripare) neputnd fi nlturat, n totalitate, prin splare

Morfologie i structur bacterian

89

cu ap i spun, periaj sau antisepticele uzuale ceea ce explic


necesitatea utilizrii mnuilor sterile n chirurgie sau pentru alte
manevre medicale. n general, este nepatogen fiind eliminat cu
uurin de factorii aprrii antiinfecioase specifice i nespecifice
n cazul ptrunderii accidentale n esuturi. Poate determina boli
doar dac exist condiii favorizante (ex.: endocardit subacut
sau lent prin cantonarea germenilor n depozitele de fibrin de la
nivelul leziunilor endocardice).
Flora microbian flotant persist perioade mai scurte de
timp (zile, sptmni sau luni). Aceasta se situeaz superficial i
poate fi eliminat cu uurin prin procedeele uzuale de curare
sau antiseptizare a tegumentului. Poate fi implicat etiologic n
infecii doar dac exist soluii de continuitate (plgi, arsuri,
etc.) sau dac se nmulete excesiv n situaii particulare (lips de
igien local, exces de sebum, etc.).
Relaiile care se stabilesc ntre microbii din flora normal i
organismul-gazd sunt de mutualism sau comensalism.
Din punct de vedere al prezenei sau absenei florei normale,
zonele organismului se pot clasifica n:

Zone sigur sterile: cavitile seroase (pleural, articular,


peritoneal, pericardic), esuturile, mediul intern.

Zone normal sterile urechea medie i intern, sinusurile


feei, cile respiratorii inferioare (trahee, bronhii), cile
biliare, cile urinare pn la nivelul uretrei distale i
organele genitale interne.

Zone contaminate stomacul, duodenul, jejunul i partea


distal a ileonului.

Morfologie i structur bacterian

90

Zone colonizate tegumentul, urechea extern, mucoasa


conjunctival, cile respiratorii i digestive superioare,
ileonul terminal, colonul, uretra distal i vaginul.

n funcie de existena i abundena florei normale (flor


de asociaie), produsele patologice recoltate n scopul izolrii i
identificrii unui germen patogen, pot fi clasificate n:

Produse normal sterile fragmentele de esuturi recoltate


bioptic sau chirurgical, lichidele prelevate prin puncii
aspiratorii (lichid cefalorahidian, pericardic, peritoneal,
pleural, articular, snge, urin din vezica urinar), bila.

Produse posibil contaminate lichidul gastric i duodenal.

Produse moderat contaminate exudatele nazale, linguale


i faringiene, sputa, secreiile conjunctivale, otice, vaginale,
uretrale, din leziuni cutanate.

Produse intens contaminate materiile fecale i voma.

n continuare, sunt prezentate microbiotele (flora n relaie


cu mediul de via) prezente n organismul uman.
Cunoaterea acestora este esenial pentru a putea discerne
ntre prezena normal a unui germen ntr-un anumit prelevat i
implicarea sa patogenic.
Cavitatea nazal este greu de colonizat. La nivelul acesteia
au putut fi evideniate puine specii microbiene, aa cum rezult
din tabelul 4.
De menionat este ns portajul de Staphylococcus aureus,
prezent la aproximativ 20 % din indivizii sntoi.
Colonizarea este mai intens spre nazofaringe.
Tabelul 4.

Morfologie i structur bacterian

91

Microbiota nasului
Specii microbiene
Prezena

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus aureus

Streptococcus pneumoniae

Neisseria sp.

Enterobacteriaceae

Haemophilus sp.

Corynebacterium sp.

Mycobacterium sp.
Cavitatea bucal i orofaringele reprezint zone cu umiditate
i temperatur favorabile dezvoltrii germenilor i sunt mereu
strbtute de alimente (106-108 germeni).
Tabelul 5.

Microbiota orofaringelui
Specii microbiene
Prezena

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus aureus

Streptococcus viridans

Streptococcus pyogenes

Streptococcus sp. non grup A

Streptococcus pneumoniae

Enterococcus faecalis

Neisseria sp.

Enterobacteriaceae

Haemophilus sp.

Lactobacillus sp.

Treponema sp.

Peptococcus sp.

Peptostreptococcus sp.

Actinomyces

Morfologie i structur bacterian

92

Veillonella sp.

Bacteroides sp.

Fusobacterium sp.

Corynebacterium sp.

Mycoplasma sp.

Mycobacterium sp.

Candida albicans
Tegumentul nu este un mediu de via favorabil microorganismelor datorit umiditii reduse, aciditii (pH =3-5) i bogiei
n lipide, permind supravieuirea puinor specii, adaptate
filogenetic.
Numrul germenilor prezeni la acest nivel este de aprox. 106,
cantonai mai ales n anumite regiuni (scalpul, pavilionul urechii,
axila, regiunea perianal).
Tabelul 6.

Microbiota tegumentului
Specii microbiene
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus aureus
Streptococcus sp.
Enterobacteriaceae
Pseudomonas sp.
Peptococcus sp.
Corynebacterium sp.
Mycobacterium sp.
Propionibacterium acnes
Candida sp.
Malassezia furfur

Prezena

Datorit structurii sale, tegumentul intact este o barier


mecanic neputnd fi strbtut de nici un microorganism viu.

Morfologie i structur bacterian

93

Zonele mai vulnerabile sunt foliculii piloi i orificiile externe


ale glandelor sebacee i sudoripare.
n cazul unor soluii de continuitate, chiar microscopice,
pot apare infecii diverse cutanate, mai ales stafilococice (foliculite,
furuncule, carbuncule, sicozis, acnee pustuloas, piodermite,
impetigo, intertrigo, flegmoane, abcese, infeciile arsurilor, plgilor
sau escarelor, hidrosadenit, etc.).
Dei multe specii microbiene se pot adapta la condiiile
locale, flora normal a conjunctivelor este srac pentru c
secreia lacrimal spal mecanic zona la intervale de cteva
secunde eliminnd particulele strine, inclusiv bacteriile iar
lizozimul pe care l conine are efecte bactericide.
Flora normal a mucoaselor conjunctivale const n:
Tabelul 7.

Microbiota conjunctivei
Specii microbiene
Prezena

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus aureus

Streptococcus viridans

Streptococcus pneumoniae

Neisseria sp.

Enterobacteriaceae

Haemophilus sp.

Corynebacterium sp.

Propionibacterium acnes
Colonul reprezint cea mai important zon colonizat,
n mod normal, a organismului. Acest fapt se datoreaz cantitii

Morfologie i structur bacterian

94

mari de materie organic, rezultat din degradarea alimentelor


ingerate, pe care o conine.
Numrul de microorganisme care compun flora normal
a colonului este foarte mare, de ordinul 10 11-1012 germenig. de
materii fecale. De asemenea, microbiota indigen a colonului se
caracterizeaz printr-o mare diversitate (coci i bacili Gram pozitivi
i negativi, spirochete, actinomicete, fungi, virusuri, etc.).
Predomin bacteriile anaerobene sporulate, aa cum rezult
din tabelul 8.
Tabelul 8.

Microbiota colonului
Specii microbiene
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus aureus
Streptococcus sp.
Enterococcus faecalis
Escherichia coli
Klebsiella sp.
Enterobacter sp.
Proteus sp.
Pseudomonas aeruginosa
Lactobacillus sp.
Treponema sp.
Peptococcus sp.
Peptostreptococcus sp.
Bifidobacterium sp.
Propionibacterium sp.
Clostridium sp.
Veillonella sp.
Bacteroides sp.

Prezena

Morfologie i structur bacterian

95

Fusobacterium sp.
Corynebacterium sp.
Mycoplasma sp.
Mycobacterium sp.
Alcaligenes sp.
Acinetobacter sp.
Candida albicans
La termen, vaginul ftului de sex feminin

este steril, dar

n scurt timp de la natere este colonizat cu bacterii ca urmare


a contactului cu tegumentul matern i al personalului de
ngrijire sau cu diferite obiecte din ambient.
n primele sptmni, datorit existenei n snge a unor mici
cantiti de estrogeni de provenien matern, flora vaginal este
similar celei de la adulte.
Apoi, pn la pubertate, n absena estrogenilor responsabili
de ncrcarea cu glicogen a epiteliului vaginal, pH-ul este alcalin
iar flora lipsit de lactobacili. n perioada fertil a femeii, flora
alcalin are componena ilustrat n tabelul 9.
Dup menopauz, bacteriile acidofile dispar din nou, vaginul
fiind colonizat doar cu flor banal provenind din zona perineal.
Tabelul 9.

Microbiota vaginului adult


Specii microbiene
Staphylococcus epidermidis
Streptococcus sp.
Neisseria sp.
Enterobacteriaceae
Gardnerella vaginalis
Lactobacillus sp.
Peptococcus sp.

Prezena

Morfologie i structur bacterian

96

Peptostreptococcus sp.
Bacteroides sp.
Corynebacterium sp.
Ureaplasma urealyticum
Chlamydia trachomatis
Candida albicans
Microbiota de la nivelul uretrei anterioare este

alctuit din

specii microbiene care fac parte din flora normal a colonului i


tegumentului din zona perineal.
Tabelul 10.

Microbiota uretrei anterioare


Specii microbiene
Staphylococcus epidermidis
Streptococcus sp.
Enterococcus faecalis
Neisseria sp.
Enterobacteriaceae
Bacteroides sp.
Peptococcus sp.
Peptostreptococcus sp.
Fusobacterium sp.
Corynebacterium sp.
Mycobacterium sp.
Ureaplasma urealyticum

Prezena

Funciile principale ale microbiotei indigene (flora normal)


a organismului constau n:

participarea la digestie flora microbian intestinal i


exercit aciunea pe glucidele i fibrele provenind din
alimente degradndu-le pn la compui simpli (mono-

Morfologie i structur bacterian

97

i oligozaharide n poriunea terminal a ileonului i


polizaharide n colon);

protecia fa de germeni patogeni se realizeaz prin


antagonism microbian care implic competiia pentru
nutrieni sau pentru un spaiu vital i elaborarea unor
substane nocive (metabolii toxici sau bacteriocine);

furnizarea de vitamine bacteriile din flora intestinal


sintetizeaz cantiti crescute de vitamine din grupul
B, precum i vitaminele E i K (ex.: Escherichia coli);

stimularea sistemului imun antigenele bacteriilor din


microbiota indigen induc producerea de anticorpi care
reacioneaz ncruciat cu germenii patogeni mpiedicnd
colonizarea i invazia acestora n organism.

Cercetrile efectuate n scopul clarificrii faptului c anumite


bacterii colonizeaz strict aceste situsuri anatomice, au condus la
formularea urmtoarelor ipoteze:

au tropism tisular, datorat existenei n aceste zone a unor


factori de cretere necesari acestor bacterii;

au structuri de suprafa cu care se ataeaz de receptori


membranari ai celulelor gazd;

au capacitatea de a constitui un biofilm (microcolonii) pe


suprafeele gazdei sau de a coloniza unul construit de alt
specie microbian.

Eubioza reprezint starea de echilibru ntre microorganisme i organismul gazd.


n cadrul microbiotelor organismului uman se pot produce, n
anumite situaii, variaii considerate normale (ex.: la trecerea
sugarilor de la alimentaia cu lapte la cea diversificat, la

Morfologie i structur bacterian

98

lacto-vegetarieni sau alte persoane cu exces de lactate n diet,


la copiii introdui n colectiviti, la edentai sau n cazul unor
deficiene de igien).
Disbioza (disbacterioza) const n ruperea acestui echilibru,
urmat de colonizri anormale, datorat modificrilor condiiilor
locale sau generale ale gazdei sau unor factori de mediu extern.
ntrebuinarea prelungit a antibioticelor, n special a celor
cu spectru larg, poate conduce la inhibarea florei normale i
selectarea unor tulpini rezistente.
n cazul produselor cu flor normal, este dificil de interpretat
semnificaia clinico-etiologic a unor germeni considerai condiionat
patogeni (ex.: enterobacteriile n exudatele nazofaringiene). Unii
microbiologi consider c acetia trebuie luai n considerare
dac produsul patologic are un caracter net inflamator (multe
neutrofile) i specia respectiv este predominant.

8 PATOGENITATEA BACTERIILOR
8.1 NOIUNI GENERALE
Organismele superioare, cu structur de tip eucariot, au
aprut i au evoluat ntr-o lume populat de procariote. n
natur, s-au constituit ecosisteme, formate din toate organismele
vii care habiteaz n sectorul respectiv de mediu. Fiecare membru
al unui ecosistem exercit influene i este, la rndul su influenat,
pozitiv sau negativ, de alte organisme. Practic, orice organism viu
poate deveni habitat pentru alte forme de via.

Morfologie i structur bacterian

99

ntre organisme se pot stabili relaii ecologice complexe. Unele


dintre acestea sunt benefice pentru unul (comensalism) sau ambii
parteneri (mutualism). Altele, sunt nocive asupra unuia dintre ei
care este gazda (parazitism). n majoritatea cazurilor, gazda este
macroscopic iar parazitul, microscopic (bacterii, virusuri, fungi,
protozoare). Unele microorganisme parazite aduc prejudicii minore
gazdei. Altele induc alterri structurale sau funcionale majore,
exprimate printr-o stare morbid (boal) sau chiar letale.
Termenul de patogenitate se refer la capacitatea unui microorganism de a induce o stare morbid (boal = pierderea strii de
sntate) ntr-un organism receptiv. Este apanajul unor specii
microbiene, cu anumite caracteristici structurale, capabile de
elaborarea unor factori sau declanarea unor mecanisme care
pot nvinge aprarea gazdei. Reprezint un caracter dobndit de-a
lungul evoluiei filogenetice i este rezultatul interaciunii a doi factori:

gradul de dotare a microbului cu factori de agresiune;

eficiena mecanismelor de aprare antiinfecioas a gazdei.

Prin urmare, aceast proprietate a microorganismelor nu este


o constant ci este condiionat. Un microb agresiv nu produce boal
ntr-un organism imunizat, n schimb, unul cu un echipament de
patogenitate redus poate determina o stare morbid n condiii de
scdere a aprrii antiinfecioase, locale sau generale.
Patogenitatea unui microb este definit de virulena isau
toxi-genitatea

acestuia.

Unii

germeni

sunt

viruleni

(ex.:

Streptococcus pneumoniae), alii toxigeni (ex.: Clostridium sp.) iar o a


treia categorie beneficiaz de un arsenal complet putnd adopta
ambele mecanisme patogene (ex.: Staphylococcus aureus), cu
aciune sinergic.

Morfologie i structur bacterian

100

Termenul de virulen se refer la capacitatea unor germeni de


a ptrunde n gazd, de a persista prin neutralizarea mecanismelor
de aprare, de a se multiplica, de a invada n mod direct sau prin
produsele elaborate organismul acesteia i de a produce leziuni n
esuturi isau tulburri funcionale. Aceasta reprezint un caracter
individual, de tulpin fiind influenat de mediul de provenien.
Virulena permite evaluarea cantitativ a gradului de patogenitate
al unei tulpini microbiene. Este msurabil putnd fi exprimat n
DLM (cantitatea minim de microbi care ucide un animal inoculat
ntr-un anumit interval de timp) sau DL50 (cantitatea de microbi
care omoar 50 % din animalele inoculate). O tulpin bacterian
este cu att mai virulent cu ct DLM (sau DL50) este mai mic.
Bacteriile care colonizeaz anumite zone ale organismului
gazd se selecteaz n funcie de condiiile nutritive i fizico-chimice
locale i de capacitatea acestora de a adera la suprafee (adezivitatea).
Aceast proprietate se datoreaz prezenei pe suprafaa bacteriilor a
unor liganzi cum sunt fimbriile (ex.: Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa, Neisseria gonorrhoeae), glicocalixul (ex.: Streptococcus
mutans din placa dentar, Staphylococcus sp. care ader la catetere
sau implanturi) sau alte structuri cu funcie de adezine (ex.: acizii
lipoteichoici din peretele celular al stafilococilor, anumite proteine din
membrana extern a bacteriilor Gram negative).
n condiii normale, tegumentul intact nu permite ptrunderea
germenilor patogeni. Pentru a putea depi barierele de la nivelul
mucoaselor, bacteriile patogene abordeaz diverse strategii. Unele
elaboreaz bacteriocine n scopul anihilrii florei microbiene
normale.

Morfologie i structur bacterian

101

Altele degradeaz mucusul prezent la nivelul mucoaselor (ex.:


neuraminidazele produse de Vibrio cholerae sau de tulpinile de E. coli
enteropatogene, proteina 1 la Mycoplasma pneumoniae) facilitndu-i
astfel accesul la celulele int.
Ptrunderea germenilor n mucoase se realizeaz prin lezarea
celulelor epiteliale (ex.: Streptococcus pyogenes) sau prin endocitoz,
declanat ca urmare a stimulrii acestora (ex.: Shigella disenteriae,
Neisseria gonorrhoeae).
Unele specii secret enzime proteolitice care cliveaz imunoglobulinele A secretorii de la nivelul mucoaselor.
Bacteriile pot rmne cantonate la poarta de intrare sau pot
disemina n organismul gazdei pe cale sanguin, limfatic sau prin
continuitate (din aproape n aproape).
Invadarea tisular este posibil datorit echipamentului
enzimatic complex (invazine sau agresine) al germenilor patogeni.
Acetia posed diferite enzime care degradeaz esutul conjunctiv,
lizeaz reeaua de fibrin ce delimiteaz focarele inflamatorii sau au
efecte citotoxice. Secret i unele enzime care intervin indirect, prin
efecte citolitice, n patogenitate, potennd-o (ex.: Staphylococcus
aureus: lipaza - acioneaz pe lipidele plasmatice i pe cele de la
suprafaa tegumentului care sunt eseniale pentru metabolismul
bacterian, dezoxiribonucleaza degradeaz ADN celular, ureaza
descompune ureea, fosfataza acid - scade pH-ul tisular la nivelul
focarului inflamator).
De asemenea, au componente capabile s neutralizeze factori
ai aprrii antiinfecioase specifice (ex.: opsoninele proteina A a speciei

Morfologie i structur bacterian

102

Staphylococcus aureus, fraciunea C3b a complementului proteina M


a speciei Streptococcus pyogenes).
Supravieuirea n esuturi se datoreaz structurilor, produilor
de secreie sau diverselor mecanisme prin care bacteriile se sustrag
aprrii antiinfecioase specifice i nespecifice.
Unele specii bacteriene posed capsul (ex.: polizaharidic
S. pneumoniae, din acid hialuronic S. pyogenes) sau glicocalix (ex.
Staphylococcus sp., Streptococcus sp.), component cu aciune antifagocitar care reprezint un caracter de virulen.
n tabelul urmtor sunt prezentai principalii factori enzimatici
(invazine), elaborai de diferite specii bacteriene:
Tabelul 11.
Enzime
Coagulaza

Bacterii
Staphylococcus
aureus

Leucocidina

Staphylococcus
aureus
Staphylococcus sp.
Streptococcus sp.
S. pneumoniae
Clostridium sp.
Staphylococcus sp.
Streptococcus sp.
Staphylococcus sp.
Streptococcus sp.
S. pneumoniae
Clostridium sp.

Hemolizinele

Fibrinolizina
Hialuronidaz
a

Aciuni
catalizeaz transformarea fibrinogenului n fibrin formnd o reea ce
mpiedic ptrunderea fagocitelor n
focarul inflamator
degradeaz leucocitele (mai ales PMN)
i macrofagele limitnd fagocitoza
altereaz membrana hematiilor determinnd anemie i scderea oxigenrii
esuturilor
diger fibrina din focarul inflamator
permind invazia n esutul din jur
hidrolizeaz acidul hialuronic din
substana fundamental a esutului
conjunctiv permind progresia n
esut sntos

Morfologie i structur bacterian


Streptolizinele

Streptococcus sp.
grup A, C, G

Colagenaza

Clostridium sp.

Lecitinaza

Clostridium
perfringens
Clostridium
perfringens
Shigella dysenteriae
Vibrio cholerae

Fosfolipazele
Neuraminidaz
a

103

au aciune hemolitic i toxic asupra


fagocitelor determinnd descrcarea
enzimelor lizozomale
descompune colagenul de la nivelul
sistemului muscular
degradeaz lecitina din compoziia
membranelor celulare
acioneaz asupra fosfolipidelor din
compoziia membranelor celulare
descompune acidul neuraminic
din mucusul intestinal

Alte mecanisme de protecie care au fost adoptate de microbi


sunt dezvoltarea intracelular (ex.: Richettsia sp., Chlamidia sp.) i
schimbarea configuraiei antigenelor de suprafa (ex.: HIV).
Multiplicarea bacteriilor n organismul uman este condiionat
de capacitatea lor de a se adapta la condiiile nutritive existente.
Astfel, unele elemente eseniale, cum este fierul, este deficitar i greu
de utilizat la nivelul esuturilor gazdei (Fe+3 este stocat intracelular,
fixat n compui insolubili sau legat de proteine transportoare ca
lactoferina i transferina). Bacteriile patogene reuesc s depeasc
acest handicap prin creterea afinitii i elaborarea unor chelatori
de fier competitivi.
Producerea de leziuni tisulare se datoreaz, ntr-o mai mic
msur, efectului citotoxic direct fiind, de obicei, rezultatul aciunii
diverselor toxine bacteriene, a fenomenelor de inflamaie nespecific
i a hipersensibilizrii (prezena concomitent, n acelai loc i n
anumite proporii, a antigenelor bacteriene i a anticorpilor specifici
sau a limfocitelor T sensibilizate poate determina leziuni secundare
care complic evoluia bolii).

Morfologie i structur bacterian

104

Sugestive pentru aprecierea virulenei unei tulpini cultivate


n laborator sunt observarea microscopic a capsulei bacteriene,
forma de cretere pe medii (n general, formele S sunt virulente i
cele R, nevirulente) i testele de identificare biochimic care permit
evidenierea unor agresine.
Virulena unei tulpini bacteriene poate suferi influene, n
sensul exacerbrii (trecerea de la o gazd la alta, transfer genetic
sau sinergism microbian) sau atenurii ei (condiii neprielnice sau
prezena n mediu a unor ageni chimici nocivi, culturi vechi,
expunerea la factori fizici). Astfel, selectarea unor tulpini cu grad
nalt de virulen a fost observat n marile epidemii.
Sinergismul microbian se refer la faptul c, unele bacterii,
cu un echipament srac de factori de patogenitate, pot fi implicate
etiologic n infecii ca urmare a asocierii cu ali germeni, cu aceeai
caracteristic. Arsenalul patogen este utilizat n comun ceea ce
conduce la exercitarea unor efecte nocive asupra organismului.
Acest aspect are importan practic, un singur antibiotic, cu efect
bactericid pe unul dintre germeni, putnd rezolva infecia.
Toxigenitatea unei bacterii const n capacitatea acesteia de
a elabora toxine. Toxinele reprezint componente sau produi de
excreie ai bacteriilor, cu o compoziie chimic diferit i anumite
proprieti biologice care le permit exercitarea unor efecte nocive
asupra organismului uman. n funcie de modul n care ajung n
contact cu esuturile umane, se clasific n exotoxine i endotoxine.
Principalele diferene sunt ilustrate n tabelul 12:
Tabelul 12.
Caracteristici

Exotoxine

Endotoxine

Morfologie i structur bacterian

105

Natura
Localizarea
Sursa mai frecvent
Greutate molecular
Compoziia chimic
Aciunea
Toxicitatea
Rezistena la cldur
Imunogenitatea
Obinerea anatoxinei

produse de excreie
n citoplasm
bacterii Gram ()
50-1000kDa
proteice
specific
DLM(1 ngkg.corp)
termolabile
intens
posibil, prin tratare

component celular
n peretele celular
bacterii Gram ()
10kDa
lipopolizaharidice
nespecific
DLM(1 mgkg corp)
termostabile
slab
nu este posibil

Codificare genetic

cu formol la cald
cromozomial sau

cromozomial

Mod de eliberare

plasmidic
dup o perioad de

imediat, prin

Pirogenitate

laten
ocazional

lizarea bacteriei
constant

Exotoxinele sunt cele mai puternice otrvuri cunoscute. n


general, germenii toxigeni rmn cantonai la poarta de intrare iar
exotoxinele, care sunt difuzibile, se rspndesc n organism i, n
funcie de tropism, i exercit aciunile specifice.
Endotoxinele bacteriene au structur asemntoare i aciune
nespecific. Sunt formate din lipidul A (uniti dizaharidice de
glucoz- amin legate de acizi grai comuni unor bacterii), un miez
polizaha-ridic (core) i uniti monozaharidice a cror dispunere
variaz de la o bacterie la alta. Constituie antigenul somatic O,
caracteristic bacteriilor Gram negative.
Indiferent de specia de la care provin, endotoxinele exercit
efecte nocive similare asupra organismului uman.
Principalele aciuni biologice ale enterotoxinelor constau
n inducerea unui fenomen inflamator, urmat de recrutarea n
zon a celulelor imunocompetente i stimularea macrofagelor,
cu rol de prelucrare a antigenelor i de eliberare a unor mediatori.
Ca urmare a acestor procese patologice, apar efecte clinice
cum sunt febra (prin aciunea interleukinei1 i a factorului de necroz
tumoral asupra hipotalamusului), hipotensiunea (datorat extravazrii plasmei n esuturi), hipoglicemia (prin intensificarea reaciilor
catabolice intracelulare), coagulare intravascular diseminat i
scderea irigrii cu snge a esuturilor.
O entitate clinic distinct o reprezint ocul toxico-septic.
Este un sindrom clinic i biologic complex, de gravitate extrem, letal
n absena unui tratament prompt i corect.
Aceast urgen medical care poate complica evoluia oricrei
infecii este determinat frecvent de bacterii Gram negative i rar de
cele Gram pozitive sau fungi.

Patogenitatea bacteriilor

107

Tulburrile metabolice i hemodinamice care au ca rezultat


insuficiena pluriorganic se datoreaz ptrunderii n curentul
circulator a germenilor sau a toxinelor acestora.
Endotoxinele bacteriene sunt implicate n inducerea acestui
sindrom n peste 70 % din cazuri. Mecanismele prin care acestea
i exercit aciunile sunt complexe:

activarea unor sisteme enzimatice prin:

activarea complementului pe cale clasic i altern


eliberarea C3a i C5a (anafilotoxine) rol inflamator;

activarea factorului XII al coagulrii conduce la:


declanarea coagulrii pe cale intrinsec formarea
trombilor de fibrin (CID);
aciuni fibrinolitice ca urmare a transformrii plasminogenului n plasmin;
activarea sistemului kininelor plasmatice (kalicrein,
bradikinin) vasodilataie, creterea permeabilitii
vasculare;

eliberarea unor mediatori prin aciuni asupra:

neutrofilelor elibereaz proteaze lizozomale i


radicali liberi de oxigen vasodilataie, lezarea
endoteliilor i creterea permeabilitii vasculare;

macrofagelor elimin prostaglandine, tromboxan A2,


leucotriene (produc bronhoconsticie, vasodilataie i
creterea permeabilitii vasculare), interferon (imunomodulator), interleukin 1 (factor pirogen).

Ca urmare a acestor fenomene patologice, se produc leziuni


endoteliale capilare la nivelul mai multor organe i esuturi ceea
ce determin, ca ntr-un cerc vicios, eliberarea de mediatori care

Patogenitatea bacteriilor

108

ntrein i complic procesul morbid. n lipsa tratamentului adecvat,


se ajunge la MSOF (Multiple Systemic Organic Failure) i tulburri
hemodinamice severe cu evoluie spre exitus.
Toxinele bacteriene pot fi evideniate prin diverse metode, in
vitro (ex.: testul Elek exotoxina difteric) sau in vivo (ex.: testul
Dolman enterotoxina stafilococic).
Patogenitatea unui microb este influenat i de capacitatea
acestuia de a supravieui n mediul extern (ex.: forme vegetative
rezistente la uscciune sau sporularea), de abilitatea sa de a trece
de la o gazd la alta (adoptarea unor noi ci de transmitere ex.:
veneric Neisseria gonorrhoeae, Treponema sp.) sau de a-i mri
spectrul de gazd (ex.: antropozoonoze ca bruceloza sau pesta).

8.2 INFECIA
Progresele remarcabile din domeniul geneticii i biologiei
moleculare obinute n ultimele decenii au permis acumularea
unui volum enorm de informaie referitoare la microorganisme
i la relaiile acestora cu organismele superioare.
n acest context general, este foarte important cunoaterea
ct mai aprofundat, bazat pe metode noi, performante, a structurii
intime, a caracteristicilor metabolice, a sensibilitii germenilor la
diveri ageni i a echipamentelor de patogenitate a acestora n
scopul mbuntirii mijloacelor profilactice i terapeutice.
Bolile de etiologie microbian au constituit, n mod constant,
un domeniu de maxim interes pentru medici, nc din cele mai
vechi timpuri. Microorganismele au fost implicate etiologic n boli
care au constituit marile flageluri ale omenirii decimnd diverse
popoare de-a lungul timpului. nc se nregistreaz nivele ridicate

Patogenitatea bacteriilor

109

de morbiditate i mortalitate pe tot globul, cu precdere n rile


mai puin dezvoltate.
n prezent, abordarea bolilor produse de microbi pornete de
la premise noi necesitnd o reevaluare a cunotinelor referitoare
la ncadrarea taxonomic a acestora, la implicrile n patologie i
la antibioterapie care s-a mbogiti considerabil n ultimii ani.
O preocupare permanent a Organizaiei Mondiale a Sntii,
o constituie emergena unor boli infecioase noi i reemergena unora
considerate disprute sau, cel puin, meninute la nivele rezonabile
de morbiditate. De asemenea, un fenomen ngrijortor l constituie
dinamica apariiei rezistenei la diferite substane antimicrobiene
utilizate n terapie ce depete ritmul de descoperire a unora noi.
Termenul de infecie face referire la ansamblul proceselor care
au loc ntr-un organism viu ca urmare a interaciunii acestuia cu un
microb patogen. Rezultatul confruntrii poate fi diferit n funcie de
gradul de patogenitate a microorganismului i de eficiena aprrii
antiinfecioase a gazdei. Cnd se obine doar stimularea, de ctre
germen, a celulelor specializate, materializat printr-un rspuns imun
detectabil, este vorba despre o infecie inaparent. Dac, ns, alterrile
structurale i funcionale datorate prezenei acestuia depesc o
anumit intensitate i se nsoesc de apariia unor manifestri
clinice (pierderea strii de sntate), starea morbid rezultat se
numete boal infecioas.
Infeciile pot fi studiate sub mai multe aspecte. Astfel, n
raport cu originea germenilor implicai, pot fi exogene (produse de
microorganisme provenite dintr-o surs extern organismului) sau
endogene (cauzate de un component al florei normale, ce a suferit

Patogenitatea bacteriilor

110

o mutaie i a devenit mai agresiv sau acioneaz pe fondul unei


deficiene a aprrii locale sau generale).
n funcie de spectrul de gazd al microbilor implicai, bolile de
etiologie infecioas pot fi antroponoze (boli umane), zoonoze (boli
animale) sau antropozoonoze (afecteaz diverse specii, inclusiv omul).
innd cont de tipul de mecanism patogen adoptat, se disting
infecii (datorate virulenei ex.: Streptococcus pneumoniae sau
toxigenezei ex.: Clostridium sp.) i toxiinfecii (determinate de
germeni invazivi i toxigeni ex.: Staphylococcus aureus).
Dup modul de producere, infeciile pot fi primare (produse
de un germen nalt patogen) sau secundare (datorate suprainfeciei
cu germeni oportuniti, cu potenial patogen redus).
Din punct de vedere al numrului de germeni implicai n
producerea lor, infeciile pot fi simple sau mixte.
Datorit variabilitii potenialului de patogenitate al microbilor
i terenului gazdei au putut fi definite mai multe forme evolutive:
A. Infeciile subclinice - sunt asimptomatice sau se asociaz cu
manifestri clinice minore; pot fi de mai multe feluri:

infecii inaparente: agentul infecios i rspunsul imun sunt


decelabile paraclinic; sunt urmate de imunitate;

infecii latente: germenul rmne viabil n organism mult


vreme (ani sau toat viaa); pot deveni perioade scurte de
timp clinic manifeste, n momente de declin a aprrii locale
sau generale;

boli subclinice: sunt evolutive conducnd la apariia unor


tulburri funcionale i leziuni organice;

Patogenitatea bacteriilor

111

portajul de germeni: se realizeaz de persoane aparent


sntoase (pot avea leziuni minime, localizate) care au n
organism germeni viabili, capabili de multiplicare, pe care i
elimin continuu sau intermitent n mediul extern.

B. Infeciile clinic manifeste - au manifestri clinice evidente i


un tablou paraclinic sugestiv; pot fi clasificate din mai multe
puncte de vedere.

n funcie de intensitatea manifestrilor clinice: sunt


uoare, medii i severe.

n raport cu gradul de extensie n organism, pot fi:

infecii locale: germenii rmn la poarta de intrare, unde


se multiplic i i exercit efectele nocive (ex.: furunculul
stafilococic); pot evolua spre vindecare, cronicizare,
extindere regional sau sistemic; un caz particular l
reprezint infecia de focar (ex.: amigdalit), form
cronicizat, cu simptomatologie local minim dar
cu acuze la distan (subfebrilitate, mialgii, artralgii,
erupii cutanate, etc.) care prezint riscul generrii unei
septicemii;

infecii regionale: cuprind zonele din vecintatea porii de


intrare, mai ales vasele i ganglionii limfatici (ex.: limfogranulomatoza inghinal benign);

infecii generalizate (sistemice): se caracterizeaz prin larga


diseminare n esuturile organismului a microbilor
ptruni printr-o poart de intrare sau existeni ntr-un
focar; se pot manifesta ca:
boli ciclice: au evoluie regulat, stadial, cu incubaie (din
momentul infectrii pn la apariia semnelor de

Patogenitatea bacteriilor

112

boal), debut (primele manifestri clinice, frecvent


nespecifice), perioad de stare (semnele i simptomele
specifice

bolii)

i,

cazul

evoluiei

favorabile,

convalescen (refacerea organismului i instalarea


imunitii specifice); sunt urmate de vindecare,
recderi, cronicizare sau deces;
septicemii:: se caracterizeaz prin prezena persistent a
germenilor n snge; are o evoluie neregulat, de obicei
sever; implic existena unei pori de intrare, unui
focar septic primar (locul de multiplicare a germenilor),
unei bacteriemii iniiale (diseminarea germenilor pe cale
sanguin) i a metastazelor septice n diverse organe.
n funcie de mrimea perioadei de timp n care germenii rmn
viabili n organism i i exercit aciunile, infeciile pot fi acute,
subacute i cronice.
Procesul infecios este declanat de ptrunderea unui germen
ntr-un organism. n funcie de poarta de intrare a microbilor,
infeciile pot fi aerogene (nazofaringele), digestive (orofaringele), de
inoculare pe tegumente sau mucoase intacte sau lezate traumatic
sau prin intervenii i manevre medicale, transplacentare, etc..
Unii germeni rmn cantonai la poarta de intrare unde se
multiplic i elaboreaz toxine . Acestea difuzeaz n organism pe
cale sanguin (ex.: exotoxina difteric) sau nervoas (ex.: tetanospasmina) i i exercit aciunile, specifice sau nespecifice, n
zone diferite, n funcie de tropism (neurotropism, histotropism,
enterotropism).

Patogenitatea bacteriilor

113

Alii, mai invazivi, disemineaz n organismul gazdei pe cale


limfatic, sanguin sau prin continuitate (din aproape n aproape).
n funcie de gradul de virulen, produc infecii locale, regionale sau
sistemice. Prezena pasager a germenilor n snge, nsoit sau nu
de semne clinice minore definete bacteriemia. Spre deosebire de
aceasta, septicemia are evoluie clinic sever, imprevizibil, datorat
persistenei germenilor n curentul circulator. Termenul de septicopioemie denumete starea de extrem gravitate, caracterizat prin
abcese multiple n diverse organe, formate ca urmare a nsmnrilor septicemice.
Cile de eliminare ale germenilor din organism sunt multiple,
fiind determinate de localizarea acestora. n funcie de acestea se
aleg produsele patologice care se recolteaz de la pacieni n scopul
izolrii i identificrii germenului patogen i orientrii antibioticoterapiei (secreii nazale, faringiene, otice, oftalmice, din leziuni
cutanate, vaginale, uretrale, sput, urin, materii fecale, lichide
obinute prin puncii, fragmente de esut, etc.).
Procesul epidemiologic

al bolilor infecioase

transmisibile

(datorate germenilor exogeni) include 3 verigi:

Sursa de infecie: bolnavi sau purttori de germeni (om


sau animale).

Cile de transmitere: pot fi directe (contactul agentului cu


tegumentul sau mucoasele prin atingere, contact sexual,
srut, muctur, transplacentar) sau indirecte (prin aer,
ap, alimente, vectori, sol, obiecte, instalaii tehnicosanitare, mini murdare, parenteral, etc.).

Patogenitatea bacteriilor

114

Receptivitatea: unei populaii depinde de structura acesteia


pe vrste, de nivelul de imunizare (vaccinri profilactice),
de intervenia unor factori favorizani (profesie, mod de
alimentaie, tradiii, etc.).

Bolile contagioase sunt boli infecioase cu un risc crescut de


transmitere de la o gazd la alta.
Din punct de vedere epidemiologic, au fost definite diferite
modaliti de manifestare a bolilor infecioase n populaia uman.
Acestea pot evolua sporadic (numr mic de cazuri, pe un teritoriu
relativ ntins, la anumite intervale de timp, fr legtur ntre ele),
endemic (prezena relativ constant a bolii ntr-o anumit regiune,
dar cu frecven redus i fr legtur ntre cazuri), epidemic (numr
mare de cazuri, ntr-o perioad scurt de timp, cu legtur cert
ntre ele, grupate n focare) sau pandemic (numr mare de cazuri,
legate ntre ele, ntr-o anumit perioad de timp, pe un teritoriu foarte
vast, reprezentat de un continent sau chiar tot globul).
O problem deosebit, care trebuie s se afle permanent n
atenia medicilor de diferite specialiti, o constituie infeciile de
spital (nosocomiale). Denumirea se refer la infeciile dobndite n
perioada spitalizrii, favorizate fiind de actele medicale efectuate
sau de condiiile existente.
Infeciile nosocomiale s-au manifestat din momentul apariiei
primelor spitale determinnd, mai ales n seciile chirurgicale,
nivele nalte de mortalitate prin complicaii de tip infecios.
n secolul al XIX-lea, datele din literatura de specialitate
relev faptul c n Frana, ar european cu progrese importante

Patogenitatea bacteriilor

115

n domeniul medicinii, mureau mai mult de 60 % din bolnavii cu


amputaii i peste 20 % din luze, datorit febrei puerperale.
Preocupat de aceste aspecte, savantul francez Louis Pasteur a
introdus conceptul i metoda lucrului aseptic n bacteriologie,
aplicate apoi, cu succes, n chirurgie de englezul Joseph Lister.
Introducerea asepsiei i antisepsiei a micorat, ntr-o prim
instan, frecvena i gravitatea infeciilor de spital.
n prezent, problema se pune din nou, cu acuitate, datorit
nmulirii manevrelor efectuate n scop diagnostic sau terapeutic
care lezeaz integritatea tegumentului i a mucoaselor facilitnd
ptrunderea germenilor i utilizrii necorespunztoare a antibioticelor i chimioterapicelor care conduce la selecionarea tulpini lor
bacteriene rezistente.
Spitalizarea favorizeaz apariia infeciilor datorit existenei a
numeroase surse (bolnavi, purttori, independente de cea uman) i
de organisme receptive (copiii prematuri, distrofici, cu anomalii
congenitale, bolnavii tratai cu citostatice, imunosupresive sau
radioterapie, suferinzii de diverse boli debilitante, bolnavii cu
plgi traumatice sau post-operatorii, etc.).
Numeroi germeni pot fi implicai n producerea de infecii
nosocomiale, cu precdere unele enterobacterii (Escherichia coli,
Enterobacter sp., Klebsiella pneumoniae), Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa.

8.3 BACTERII DE IMPORTAN MEDICAL


Din punct de vedere al potenialului patogen, se disting:

Patogenitatea bacteriilor

116

germeni nepatogeni nu produc boli; n general, sunt


saprofii ai mediului extern care nu se pot adapta la
condiiile unei gazde vii, umane sau animale;

germeni condiionat patogeni (oportuniti) produc


boli doar n cazul apariiei, la un moment dat, a unei
deficiene a aprrii locale sau generale a gazdei sau
a unei mutaii care exacerbeaz patogenitatea microbului;
sunt saprofii sau componeni ai florei normale;

germeni accidental patogeni sunt puin invazivi, fiind


implicai n boli doar dac ajung n locaii unde se pot
sustrage factorilor aprrii antiinfecioase specifice sau
nespecifice; n general, aparin microbiotelor indigene

9 APRAREA ANTIINFECIOAS NESPECIFIC


9.1

BARIERE EXTERNE

Barierele externe sunt reprezentate de tegument i mucoase,


la nivelul crora, n condiii normale, este mpiedicat ptrunderea
germenilor n organism, prin mecanisme fizice, chimice i biologice.
Tegumentul constituie o barier eficient n calea germenilor
exogeni, datorit urmtoarelor mecanisme protectoare:

structura anatomic este complex, pluristratificat, keratinizat i i confer rezisten mecanic (tegumentul intact
poate fi strbtut de foarte puine microorganisme papovavirusuri, bacterii din genul Leptospira, unele protozoare);

turn-overul celulelor epiteliale stratul cornos se descuameaz permanent, ntregul epiderm rennoindu-se n 2630 zile;

Patogenitatea bacteriilor

117

uscciunea relativ este neprielnic dezvoltrii bacteriilor


care necesit anumite condiii de umiditate;

pH slab acid (3-5) se datoreaz acizilor grai nesaturai,


rezultai din aciunea florei normale a tegumentului asupra
sebumului (produsul de secreie al glandelor sebacee);

structura glandelor anexe (sebacee, sudoripare) impune


scurgerea n afar a secreiilor (sebumul, sudoarea) care
mpiedic ptrunderea microbilor n straturile profunde;

microbiota tegumentar este alctuit din puine specii,


adaptate filogenetic, care mpiedic colonizarea cu germeni
patogeni, prin antagonism microbian.

Mucoasele prezint o serie de mecanisme generale de protecie


antimicrobian precum i unele particulare anumitor localizri:

descoamarea epiteliilor malpighiene (mucoasele orofaringian, esofagian, vaginal) nu permite multiplicarea germenilor contaminani;

glicocalixul celulelor epiteliale reprezint o reea deas de


fibre polizaharidice care formeaz o barier mecanic cu
eficien redus, limitat doar la unele bacterii;

substanele bactericide se gsesc n epiteliile secretorii


i n produii acestora (ex.: lizozimul degradeaz peretele bacteriilor Gram pozitive; lactoferina chelator de fier);

microbiotele indigene (oro- i nazofaringian, conjunctival,


vaginal) n condiii normale, nu permit supravieuirea
i multiplicarea germenilor patogeni;

mecanismele specifice mucoasei respiratorii constau n


filtrarea aerului inspirat (la nivelul cornetelor nazale), reflexele
de strnut i de tuse, eliminarea impuritilor prin micarea

Patogenitatea bacteriilor

118

cililor, surfactantul, aciunea microbicid a macrofagelor


pulmonare, factori bactericizi proteici ca 2-macroglobulina, antiplasmina, lizozimul, transferina, lactoferina;

mecanismele specifice mucoasei digestive se datoreaz


secreiilor de la acest nivel (saliva, sucul gastric i pancreatic,
bila), cu aciune antitoxic i antibacterian i proceselor
de masticaie, deglutiie i peristaltism intestinal, ce permit
eliminarea din organism a microorganismelor patogene;

mecanismele specifice mucoasei urinare aciditatea i


concentraia crescut de uree a urinii nu permite dezvoltarea majoritii bacteriilor iar miciunea ndeprteaz
mecanic microorganismele;

mecanismele specifice mucoasei vaginale pH-ul vaginal


acid, rezultat al fermentrii glicogenului de ctre lactobacili, este bactericid la fel ca secreiile prostatice i ale
glandelor periuretrale;

mecanismele specifice mucoasei conjunctivale secreia


glandelor lacrimale are proprieti bactericide iar micrile palpebrale ndeprteaz germenii de la nivelul globilor oculari.

9.2 FACTORII INTERNI


Factorii interni ai aprrii nespecifice antimicrobiene sunt
celulari, umorali i tisulari.
Factorii celulari sunt implicai n fagocitoz i pinocitoz..
Fagocitoza se datoreaz celulelor de origine mezenchimal
numite fagocite care, datorit echipamentului enzimatic i potenialul lor energetic, au capacitatea de a recunoate, capta, ngloba
i digera particulele sau macromoleculele strine care ptrund n

Patogenitatea bacteriilor

119

organism. Principalele fagocite sunt granulocitele polimorfonucleare


neutrofile i mononucleare.
Neutrofilele sunt produse n mduva osoas, de unde sunt
descrcate n circulaie. Viaa lor este scurt. O importan mai
mare au cele marginate, ieite din curentul circulator, aderente la
endotelii, care trec cu rapiditate n esuturile agresate.
Mononuclearele sunt eliberate din mduva hematogen n
snge ca monocite. La nivelul esuturilor, se difereniaz morfologic
i funcional devenind macrofage. Ca urmare a ingerrii particulelor
strine, se activeaz, dobndind capaciti microbicide crescute.
i eozinofilele au capacitate fagocitar. La acestea, fagocitoza se desfoar dup un model comun cu neutrofilele, dar are
anumite particulariti. Factorii chemotactici sunt, n mare parte,
aceiai. Un efect chemotactic selectiv pentru eozinofile au IgG1, n
reacia anafilactic. Rolul chemotactic al histaminei a fost dovedit
prin faptul c injectarea acesteia a fost urmat de eozinopenie,
prin migrarea eozinofilelor n esuturi, la locul inoculrii. Se tie n
prezent c histamina, eliberat prin degranularea bazofilelor i
mastocitelor tisulare, n cursul unor boli parazitare sau alergice,
declaneaz migrarea eozinofilelor n intestin i focarele inflamatorii.
Recent, estrogenii au fost introdui n rndul substanelor chemotactice, datorit variaiilor eozinofiliei n diferite stadii ale ciclului
menstrual. Eozinofilele fagociteaz bacterii i fungi ca i neutrofilele, dar mai lent i mai puin eficient deoarece particip un
procent mai mic la acest proces i au aviditate mai sczut. Acest
comportament se datoreaz deficienei lor enzimatice care const
n absena lizozimului i fagocitinei demonstrnd c fagocitoza nu
constituie funcia lor principal.

Patogenitatea bacteriilor

120

Dup unii autori i bazofilele pot fagocita particule strine.


Procesul de fagocitoz parcurge urmtoarele etape:

Chemotaxia

Prin acest termen se nelege aciunea de atracie, pe care


o exercit unele elemente de natur organic sau anorganic,
asupra fagocitelor, urmat de migrarea acestora ntr-o singur
direcie, la locul de invazie. Acest lucru este posibil datorit motilitii lor. Micarea este de tip amiboidal, prin emitere de pseudopode (conin actomiozin) i se realizeaz cu consum de energie,
eliberat prin glicoliz, glicogenoliz sau fosforilare oxidativ.
P.M.N. sunt mai mobile, prin urmare ajung primele n
esuturi. Numeroase studii, n care s-a folosit injectarea la
animalele de experien a mai multor tipuri de complexe imune
sau agregate proteice au demonstrat c fagocitele pot fi atrase de
substane cu o anumit configuraie molecular. Principalii
factori chemo-tactici pentru acestea sunt complexele antigenanticorp, fibrina din focarele inflamatorii i produii de degradare
ai acesteia, enzimele proteolitice, C3a, C5a i complexul de atac C5b67,
formate ca urmare a activrii complementului pe cale clasic sau
altern,

kalicreina,

polizaharizii,

enzimele

sau

toxinele

bacteriene. Un efect chemo-actic selectiv pentru neutrofile l au


IgG2 care mediaz reacia Arthus. Acest aspect demonstreaz
nc o dat rolul receptorilor celulari n chemotaxie i n
fagocitoza particulelor opsonizate.

Recunoaterea intei de atac

Particulele strine se ataeaz la membrana fagocitelor.


Unele microorganisme se ataeaz direct (au ncrcare electric
i hidrofilie similar cu a fagocitelor), altele dup opsonizare (pro-

Patogenitatea bacteriilor

121

cesul de fixare a C3b sau a anticorpilor pe suprafaa unor microbi,


n scopul scderii hidrofiliei i electronegativitii acestora). Aceasta este posibil deoarece fagocitele au receptori pentru IgG i
C3b. P.M.N. au i receptori membranari pentru IgA.

Ingestia

Particula strin este nchis ntr-un fagozom(o vacuol


delimitat de o parte a membranei citoplasmatice), format prin
fuzionarea pseudopodelor.
Lizozomii din citoplasma celulelor fagocitare fuzioneaz cu
membrana fagozomului i i descarc enzimele n exterior (regurgitare nainte de nchiderea complet a fagozomului) sau n
interiorul fagozomului.

Omorrea microbilor

Ca urmare a degranulrii lizozomale i a eliberrii enzimelor (fosfatazele acide, arilsulfataza, -glicuronidaza, etc.), este
stimulat untul hexozomonofosfailor, din care rezult superoxid i peroxid de hidrogen. Produii toxici (O21, O2, OH1, H2O2)
se formeaz sub aciunea mieloperoxidazei, n aerobioz.
Omorrea microorganismelor n condiii de anaerobioz
se datoreaz acidului lactic din fermentarea glucozei, fixrii
fierului de ctre lactoferin, lizozimului i polipeptidelor bazice
din lizozomi.

Digerarea

Se produce prin aciunea enzimelor hidrolitice lizozomale


care descompun particulele nglobate n compui simpli.
n anumite zone ale organismului (ficat, splin, mduva
osoas, ganglioni limfatici, sistemul nervos), particip la fago-

Patogenitatea bacteriilor

122

citoz, cu mai puin eficien, i alte celule, nespecializate (endoteliale, reticulare, gliale).
Fagocitele reprezint prima linie de aprare fa de elementele non self, dar faciliteaz i intervenia celulelor imunocompetente (efectorii aprrii specifice).
Pinocitoza este un proces asemntor fagocitozei, utilizat
att de procariote ct i de eucariote, pentru substane macromoleculare solubile. Picturile pinocitabile se preling pn la fundul
invaginrilor membranare. Apoi se produc strangulri n zona
distal a invaginrilor care nchid comunicarea cu exteriorul.
Vezicula format fuzioneaz cu lizozomii celulari iar substana
strin este digerat, ca i n cazul fagocitozei, de enzimele hidrolitice. Procesul este discontinuu, datorit necesitii refacerii
membranei celulare consumate.
Factorii tisulari sunt reprezentai de barierele mecanice i
substane cu aciune antibacterian.
Barierele mecanice sunt constituite, n diferitele organe i
structuri anatomice ale organismului, din esut conjunctiv, a
crui densitate, destul de ridicat, se datoreaz unor proteine
fibrilare de tipul colagenului, elastinei i reticulinei.
Substanele antibacteriene tisulare sunt menionate doar de
unii autori (ex.: histonele secretate de tiroid).
Factorii umorali sunt reprezentai de complement i ali
mediatori ai inflamaiei.
Complementul constituie o unitate funcional, format din
11 componente proteice cu origine diferit (C1q, C1r, C1s epiteliul
intestinal; C2, C4 macrofagele; C3, C6, C9 - hepatocitele; C5, C8 celulele splenice). Acest sistem i exercit aciunile complexe doar

Patogenitatea bacteriilor

123

dup activarea pe cale altern (declanat de contactul cu anumite


componente microbiene) sau clasic (iniiat de complexele imune
formate). Rezultatul cascadei de reacii enzimatice este formarea
anafilotoxinelor (C3a i C5a), a opsoninei C3b i a complexului de
atac C5b6-9 (bactericid prin perforarea membranei externe a bacteriilor Gram negative). De asemenea, se formeaz factori chemotactici pentru fagocite cum sunt C5a i C5b67.
Mediatori ai inflamaiei sunt denumii generic factorii umorali
care se concentreaz la nivelul unui esut lezat ca urmare a unei
agresiuni exogene (agent fizic, chimic sau biologic). La acest proces
particip toi efectorii complementului, sistemul kininelor plasmatice,
prostaglandine i factori chemotactici microbieni. Din punct de
vedere patogenic, focarul inflamator se constituie ca urmare a
aciunii sinergice a mediatorilor. Vasodilataia i scderea vitezei de
circulaie a sngelui la nivelul acestuia permite diapedeza neutrofilelor i extravazarea plasmei n esutul agresat. Are loc degranularea
fagocitelor, cu eliberarea factorilor bactericizi. Delimitarea focarului
se datoreaz reelei de fibrin, produs din fibrinogenul plasmatic.
Focarul inflamator se exprim clinic prin roea datorat vasodilataiei, tumefiere a zonei prin acumularea de plasm i celule
sanguine, creterea temperaturii n zona afectat prin intensificarea
metabolismului fagocitelor i durere local, declanat ca urmare
a iritrii terminaiilor nervoase.
Interferonii reprezint factori umorali de natur glicoproteic,
produi de limfocite T sensibilizate (), fibroblati () sau fagocite (),
cu aciune antiviral indirect (induc sinteza unor substane care
blocheaz, la diferite nivele, multiplicarea virusurilor), imunomodulatoare i anticelular (inhib proliferarea acestora).

Patogenitatea bacteriilor

124

Febra, prezent n mod frecvent n cadrul tabloului clinic al


bolilor infecioase, reprezint creterea temperaturii organismului
ca urmare a aciunii interleukinei 1 (pirogenul endogen), secretat
de macrofage, asupra centrilor termoreglatori hipotalamici. Clasic,
era considerat benefic pentru anihilarea germenilor. Nu este
ns demonstrat experimental dect efectul inhibitor al acesteia
asupra multiplicrii virale i n sifilisul nervos.
La

nivelul

mucoaselor,

intervin

lizozimul

(lizeaz

mucopep-tidele din peretele celular al unor germeni) i IgA


secretorii.
Aprarea antiinfecioas nespecific, rezultat al dezvoltrii
filogenetice, este influenat de factori individuali (vrst, sex,
tip de nutriie, boli debilitante, etc.) sau de mediu (temperatur,
umiditate, cureni atmosferici, radiaii solare, etc.).

10 APRAREA ANTIINFECIOAS SPECIFIC


10.1 SISTEMUL IMUN
Sistemul imun reunete un ansamblu de componente celulare
i umorale care recunosc subtanele strine organismului, rspund
prin eliberarea unor efectori specifici care tind s le elimine i au
capacitate de memorare imunologic. Este alctuit din organele i
celulele limfoide.
I. Organele limfoide sunt primare i secundare.
Organele limfoide primare sunt timusul (organ situat n zona
toracic superioar, activ doar la tineri) i mduva osoas.. La
nivelul lor, se produce maturarea celular antigen-independent (celulele

Patogenitatea bacteriilor

125

provin din celule stem multipotente i sunt orientate funcional, n


absena unor antigene).
Organele limfoide secundare sunt ganglionii limfatici, splina i
grupri de celule limfoide de la nivelul tractului digestiv (plcile Peyer,
apendice), respirator (amigdale, traheo-bronic) i urogenital. La nivelul lor, are loc maturarea celular antigen-dependent (n contact cu
antigenele, celulele limfoide se difereniaz funcional).
II. Celulele limfoide sunt limfocitele T i B icelulele nule.
Limfocitele T au markeri specifici de suprafa i pot fi, din
punct de vedere al funciei lor, reglatoare sau efectoare.
Complexul major de histocompatibilitate este format dintr-un
grup de gene din genomul celular, a cror expresie fenotipic este
reprezentat de un complex de glicoproteine, localizate la nivelul
membranelor celulare (idioantigene). n funcie de poziia n genom
i proteinele codificate, se disting 3 clase (1 antigenele prezente pe
suprafaa tuturor celulelor nucleate, 2 antigenele existente doar pe
suprafaa macrofagelor, 3 componente ale complementului).
Limfocitele T reglatoare au receptori specifici care pot lega
doar antigenele fixate pe membrana celulelor MHC (complexul major
de histocompatibilitate). Stimuleaz sau inhib expansiunea
clonal (creterea numeric) a limfocitelor B sau T. Din acest punct
de vedere, sunt ajuttoare (limfocite TH = limfocite T helper =
limfocite T4) sau supresoare (limfocite Ts = limfocite T supresor
= limfocite T8).
Limfocitele T efectoare sunt citotoxice (limfocitele Tc) sau
secretoare (limfocitele Tp).

Patogenitatea bacteriilor

126

Limfocitele T citotoxice i exercit aciunea prin contactul direct


cu antigene legate de MHC clasa 1. Atac celule proprii, modificate
datorit unor factori (virusuri, neoplazii, transplante).
Limfocitele T secretoare elibereaz, dup interaciunea cu
antigenul, mediatori solubili numii limfokine. Sunt implicate n reacii
de hipersensibilizare ntrziat.
Limfocitele B au markeri specifici de suprafa i capacitatea de
a se transforma, dup cteva zile de via, n plasmocite, celule cu
funcie de anticorpogenez, realizat n pulpa roie a splinei i zona
medular a ganglionilor limfatici.
Celulele nule au origine neclar i sunt lipsite de markeri
specifici. Sunt celulele K (lb. eng.: killer = uciga) i celulele NK (lb.
eng.: natural killer = uciga natural).
Celulele K sunt limfocite de mrime medie care pot ucide
celule acoperite cu anticorpi (frecvent IgG, rar IgE sau IgA).
Celulele NK sunt mononucleare care pot omor celulele n
mod spontan, n absena anticorpilor, complementului sau a altor
factori nespecifici.

10.2

REACII ANTIGEN-ANTICORP

Antigenele sunt entiti care, dup ptrunderea n organism,


determin apariia unui rspuns imunologic i reacioneaz specific
cu produii rezultai ca urmare a acestei stimulri. Se caracterizeaz
prin imunogenitate (capacitatea de a produce un rspuns imun) i
specificitate (proprietatea de a reaciona specific, cu efectorii imuni a
cror producere au stimulat-o). Termenul de antigen a fost introdus
n 1899, de ctre L. Deutsch.

Patogenitatea bacteriilor

127

Haptenele reprezint antigene incomplete care pot induce un


rspuns imun numai dup legarea de o molecul purttoare, dar
reacioneaz specific cu produii rezultai.
Imunogenitatea este dependent de calitatea de non self (molecul strin organismului sau proprie, dar care a suferit modificri
i nu mai este recunoscut ca atare), de greutatea molecular (ct
mai mare), de complexitatea compoziiei i structurii, de rigiditatea
moleculei:, de persistena n organism, de forma i calea de
inoculare i de localizarea determinanilor antigenici (ct mai expui).
Specificitatea se datoreaz unor zone de mici dimensiuni
de pe suprafaa antigenului numite determinani antigenici
(epitopi)

care sunt situsurile de legare la anticorpi. Restul

moleculei are rol de purttor (carrier) al acestora, nefiind implicat


n inducerea rspunsului imun.
Antigenele pot fi clasificate dup imunogenitate (complete i
haptene), dup modul de formare (naturale i artificiale), dup structura
chimic (proteice, glucidice, lipidice), dup intensitatea rspunsului
imun (puternice i slabe) i dup origine (bacteriene, parazitare, virale,
eucariote). Antigenele bacteriene sunt somatice (structuri ale
peretelui celular, cililor sau capsulei) sau solubile (toxine i enzime).
Dup ptrunderea n organism a unui antigen, intervine
prima linie de aprare, nespecific, format din macrofage i
polimorfonu-cleare neutrofile, care l pot degrada, elimina, sechestra
sau pre-zenta limfocitelor. Ulterior, n organele limfoide secundare,
intervine a doua linie de aprare, specific, reprezentat de celulele
imunocompe-tente, mai ales limfocitele T (prolifereaz i se
difereniaz n celule efectoare i de memorie) i B (se transform n

Patogenitatea bacteriilor

128

plasmocite i limfocite de memorie). n funcie de natura i doza


antigenului, predomin rspunsul imun umoral (n cazul antigenelor
exogene,

extracelulare)

sau

celular

(la

virusuri,

bacterii

intracelulare, elemente parazitare, esut transplantat, celule


maligne).
Rspunsul imun primar se refer la evenimentele (apariia de
anticorpi specifici i de limfocite T specializate) care au loc n organism
dup ptrunderea, pentru prima oar, a unui antigen.
Rspunsul imun primar umoral se desfoar secvenial, cu o
faz de laten (macrofagele capteaz, prelucreaz i prezint
antigenele limfocitelor), o faz exponenial (plasmocitele secret
anti-corpi, n principal IgM i n mai mic msur IgG, al cror titru
crete pn la un maximum) i o faz de declin (stoparea sintezei
datorit unor mecanisme multiple).
Anticorpii (imunoglobulinele) sunt proteine serice ( globuline
din punct de vedere al migrrii electroforetice) cu o mas molecular
mare, cu funcie de efectori imuni, elaborate de plasmocite, ca
rspuns la un stimul antigenic.
n organism, anticorpii se gsesc, n cantiti crescute, n
snge i umori. Prin urmare, acetia pot fi serici i secretori (la
nivelul mucoaselor respiratorii, digestive, conjunctivale, uro genitale, n saliv, secreia lacrimal sau laptele matern).
Structura moleculei de imunoglobulin include 4 lanuri polipeptidice, identice dou cte dou, 2 H (lb. engl.: heavy = greu),
cu greutate molecular mare (peste 50 000 D) i 2 L (lb. engl.:
light = uor), cu greutate molecular mai mic (25 000 D). Acestea
sunt

Patogenitatea bacteriilor

129

legate prin puni disulfidice (L-H-H-L). La unele imunoglobuline,


au fost identificate i lanuri suplimentare.
Lanurile H sunt de 5 tipuri (, , , , ) i, n funcie de
acestea, imunoglobulinele au fost mprite n clase (G, M, A, E, D).
Lanurile L sunt de 2 tipuri (k, ). Proporia acestora n imunoglobulinele umane este de 21. Niciodat, ntr-o molecul de imunoglobulin, nu se gsesc ambele tipuri de lanuri uoare.
Structura anticorpilor poate include una sau mai multe molecule de imunoglobulin:

imunoglobulina M pentamer (5 molecule);

imunoglobulina G monomer (1 molecul);

imunoglobulina A monomerdimer (1-2 molecule);

imunoglobulina E monomer (1 molecul);

imunoglobulina D monomer (1 molecul).

Lanurile suplimentare leag moleculele de anticorpi (lanul J la


imunoglobulinele M sau A, componenta secretorie SC a imunoglobulinelor A, elaborat de celulele secretorii de la nivelul mucoaselor i
ataat ulterior anticorpilor).
Din punct de vedere al structurii funcionale, molecula de
imuno-globulin, n forma literei Y, include o regiune constant,
prezent la toate clasele (domeniul C) i una variabil (domeniul V).
Acestea se gsesc att pe lanurile grele (CH cu segmentele CH 1,
CH2, CH3 i VH) ct i pe cele uoare (CL i VL). Zonele
funcionale ale moleculei sunt Fab (lb. engl.: antigen binding =
fragment de legare a antigenului) i Fc (fragment cristalizabil).
Fab reprezint zona amino-terminal a lanurilor i conine un
singur situs de combinare cu un antigen (ntre VL i VH). Acest situs,

Patogenitatea bacteriilor

130

numit paratop, are structur complementar epitopului antigenic ce a


indus producerea imunoglobulinei i se combin specific cu acesta.
Fc este constituit din zona carboxi-terminal a lanurilor i
prezint mai multe situsuri de combinare cu celule (macrofage,
monocite, neutrofile, mastocite, bazofile, etc.) sau cu fraciuni ale
complementului.
Cele 2 fragmente sunt unite printr-o regiune a lanurilor H
numit balama care este mobil, intervenind n reglarea unghiului
dintre braele anticorpilor. Astfel, cnd acetia sunt liberi, unghiul
este de 180 mascnd situsul de legare la complement, situat n
vecintatea zonei balama. Dup legarea la un antigen, acest unghi
poate varia pn la 0. Situsul pentru legarea complementului este
expus permind legarea acestuia la complexul antigen-anticorp.
n cazul antigenelor bacteriene, aciunile anticorpilor sunt:

opsonizarea microbii care au structuri de suprafa ce


mpiedic fagocitoza (ex.: capsula pneumococic) pot fi incorporai i distrui de ctre fagocite doar dup ce au
fost nvelii de anticorpi opsonizani (IgG sau IgM);

neutralizarea enzimelor i toxinelor - fixarea anticorpilor


mpiedic ataarea acestora la receptorii celulelor-int;
sunt implicate mai ales IgG (ex.: Staphylococcus sp.);

bacterioliz mediat de complement pe complexele imune


se fixeaz complementul care, activat pe cale clasic, i exercit aciunea bactericid, prin perforarea peretelui celular;
particip IgG sau IgM (ex.: bacteriile Gram negative);

blocarea adezinelor - prin fixarea pe aceste structuri, anticorpii mpiedic aderarea bacteriilor la mucoase i seroase;
sunt implicate mai ales IgA (ex.: enterobacteriile);

Patogenitatea bacteriilor

131

inhibarea motilitii bacteriilor se realizeaz prin ataarea la


cilii acestora; intervin toate clasele de Ig (ex.: Proteus sp.).

Proprietile anticorpilor - constau n:

specificitate reacioneaz doar cu acele antigene care au


determinat producerea lor.

afinitate se cuantific prin suma forelor de atracie ntre


un paratop i epitopul omolog.

aviditate se refer la rapiditatea i intensitatea legrii de


antigen, dependente de suma forelor de atracie dintre toi
paratopii unui anticorp i epitopii antigenului multivalent
omolog.

Funciile, caracteristicile, proprietile biologice i proporia


n organism a anticorpilor sunt diferite n funcie de clasa crora
aparin, aa cum rezult din tabelul 17.
Rspunsul imun primar celular include fenomenele ce conduc
la apariia de limfocite T specializate, efectoare sau de memorie, ca
urmare a ptrunderii n organism, prima oar, a unor antigene.
Dup etapa de inflamaie nespecific, stimulate antigenic,
limfocitele T prolifereaz i se difereniaz n celule efectoare i de
memorie. Efectele distructive ale celulelor se realizeaz prin contact
direct cu inta (limfocitele Tc, celulele NK), prin intermediul unor
mediatori solubili (limfocitele Tp) sau a anticorpilor (celulele K).
Celulele cu aciuni bactericide sunt:

macrofagele activate de limfokine au activiti complexe, de prezentare a antigenelor ctre limfocite, de reglare
a rspunsului imun (prin mediatori) i bactericide (prin
lizozim, peroxizi de hidrogen, radicali liberi, hidrolaze
acide, etc.);

Patogenitatea bacteriilor

132

limfocitele T citotoxice acioneaz pe bacteriile intracelulare;

celulele NK lizeaz bacteriile sau celulele parazitate.

Rspunsul imun secundar const n sinteza de anticorpi specifici i apariia limfocitelor T efectoare n organisme sensibilizate,
la un nou contact cu acelai antigen. Procesele sunt similare cu
cele din rspunsul imun primar, dar sunt mai rapide (fazele de
laten i de cretere exponenial a titrului se scurteaz) i mai
intense (cantiti mai mari de anticorpi i de limfocite efectoare).
Se sintetizeaz mai ales IgG.
Memoria imunologic const n capacitatea unui organism de
a recunoate un anumit antigen, la care a mai fost expus anterior.
Se datoreaz clonelor de limfocite de memorie, formate ca urmare a primului contact cu antigenul respectiv.
Imunitatea (lb. lat. immunus = scutit, aprat) este starea de
nereceptivitate specific a organismului la unii ageni infecioi.
Din punct de vedere a modului n care apare, poate fi:

imunitate natural : poate fi dobndit activ (dup infecii


aparente sau inaparente) sau pasiv (transplacentar sau
din laptele matern);

imunitate artificial:: poate apare n mod activ (dup vaccinri) sau pasiv (dup administrare de seruri imune n scop
profilactic sau terapeutic).

Se poate instala dup o perioad de laten mai lung sau


mai scurt i poate dura perioade de timp variabile n funcie de
germen, uneori chiar toat viaa.
n condiii de laborator, n prezent pot fi utilizate diverse
tehnici imunologice, bazate pe diferite principii fizice (aglu-

Patogenitatea bacteriilor

133

tinri, precipitri, seroneutralizri, reactani marcai cu enzime,


substane fluorescente sau izotopi radioactivi, etc.), n scopul
identificrii unor antigene sau depistrii (calitative) i stabilirii
titrului (cantitative) unor anticorpi specifici.

S-ar putea să vă placă și