Fenomene de transport prin membrana celular

1. Structura membranei celulare

2. Clasificarea modalitilor de transport membranar
3. Transportul pasiv
Difuzie
Difuzie facilitat
Difuzia prin canale ionice i pori
4. Transportul activ
Transportul activ primar
Transportul activ secundar
5. Receptori i traductori de informaie n membranele biologice
Definiia receptorului
Etapele semnalizrii intercelulare
Clasificarea semnalelor
Tipuri de receptori membranari, exemple

1. Structura membranei celulare

Membrana (7,5 nm) este un ansamblu de structuri supramoleculare aflat
la periferia celulei (sau a organitelor celulare) care separ mediul intern de cel
extern (celular de interstiial) i care ndeplinete diferite funcii legate n special
de procese metabolice fundamentale. Membranele vii au proprietile de
semipermeabilitate i selectivitate. Datorit acestor proprieti, membrana
celular nu reprezint o simpl barier care separ 2 medii cu proprieti diferite,
ci o structur activ care asigur:
transportul
unor
molecule,
ioni,
macromolecule,
complexe
supramoleculare, dintr-o parte n alta a ei;
- traducere i transfer de informaie adus de diferii stimuli (mecanici,
electrici, electromagnetici, chimici, termici etc.) prin receptorii specifici pe care i
conine;
- interconversia diferitelor forme de energie, prin enzimele sau complexele
enzimatice pe care le conine.
Actualmente se accept c, n general, structura membranei celulare este
cea descris de modelul mozaicului fluid proteolipidic al lui Nicholson i Singer
(1972). Conform acesui model, membrana este format dintr-un bistrat lipidic, n
care sunt inserate proteine i glicoproteine (figura, figura).
Bistratul lipidic este constituit n special din fosfolipide (fosfatidilcolin,
fosfatidilserin, fosfatidilinositol etc.) dar sunt prezente i glicolipide i colesterol.
Moleculele lipidice sunt amfifile. Ele au un cap polar (extremitate polar) i o
extremitate hidrofob (dou lanuri de hidrocarburi - cozi hidrofobe)(figura).
Moleculele de acest tip se organizeaz spontan, pe baza principiului de

minimizare a energiei poteniale, astfel nct cozile lor hidrofobe s evite

contactul cu apa. Ele realizeaz:
- structuri micelare (figura, figura)
- bistraturi (vezicule membranare sau membrane plane)(figura)
n acest fel, ntre cozile hidrofobe iau natere legturi hidrofobe, iar
capetele polare sunt expuse mediului apos. Bistratul lipidic este o structur
dinamic, prezentnd fluiditate: moleculele lipidice execut micri de translaie
i rotaie. De exemplu:
- translaie n stratul n care se afl (difuzie lateral)
- rotaie n jurul propriei axe
- basculare dintr-un monostrat n cellalt
- flexie (ndoire) (figura)
Proteinele membranare, n funcie de modul n care se nsereaz n
membrane sunt:
a) - proteine intrinseci (integrale) - traverseaz membrana celular o dat
(glicoforina) sau de mai multe ori (exemplu - proteinele transportoare, pompe
ionice constituite din mai multe helixuri)
b) - proteine extrinseci (periferice) - ptrund n membran pe o anumit
distan, pe una din cele dou fee, sau sunt ataate la suprafaa membranei
(receptorii membranari, proteine cu rol imunologic etc.)
i
proteinele
prezint
micri
de
difuzie
lateral
(http://bio.winona.msus.edu/berg) i rotaie, ntr-un mod mai restrictiv (depinznd
de interaciunile cu alte proteine).
Membrana se sprijin pe un citoschelet alctuit din proteine fibrilare
(exemplu: spectrina, anchirina i actina fibrilar - n hematii)(figura).
Membranele artificiale (model) - permit studiul unor procese membranare. Dintre
acestea fac parte lipozomii i bistratele lipidice, BLM (figura) sau SSM (figura).

2. Clasificarea modalitilor de transport membranar

1. Macrotransport (endocitoza,
transcitoza, exocitoza)
(http://bio.winona.msus.edu/berg) (figura, Alberts et al., The Cell):
- fagocitoza
- pinocitoza
2. Microtransport (Alberts et al., The Cell)
- pasiv
- activ
Fagocitoza - proces n care celula nglobeaz particule de substan solid,
nvelite n pseudopode (prelungiri citoplasmatice) care fuzioneaz n spatele lor.
Pinocitoza - nvelirea picturilor de lichid i macromoleculelor ntr-un bistrat
lipidic
i
formarea
de
vezicule
care fuzioneaz (http://bio.winona.msus.edu/berg/ANIMTNS/fusionan.gif)
cu
membrana
celular i prin aceasta pot fi transportate dintr-o parte n cealalt a membranei.

Exemple: - n terminaiile nervoase i celulele secretorii (exocitoz)(exemplu:

diferii neurotransmitori cum ar fi acetilcolina, glutamatul etc.)
- trecerea proteinelor plasmatice din snge n spaiul extravascular transcitoz prin endoteliul capilar.

3. Transportul pasiv
Transportul pasiv este reprezentat de ctre deplasarea moleculelor i
ionilor n sensul gradientului electrochimic sau de presiune - aparent fr consum
de energie metabolic. Aparent, deoarece gradientul electrochimic respectiv este
rezultatul unor procese anterioare realizate cu consum de energie.
Prin transport pasiv sistemul are tendina de a ajunge la echilibru
termodinamic. Dac n expresia diferenei de potenial electrochimic notm:
c1 = cin, c2 = cex, V1 = Vin, V2 = Vex obinem:

W = Win - Wex = RT ln cin/cex + zF (Vin - Vex)

Dac W > 0 - ionii au tendina de a prsi celula.
Dac W < 0 - ionii au tendina de a ptrunde n celul, dac membrana
este permeabil pentru acetia. Transportul unei specii ionice nceteaz la
echilibru, cnd W = 0:
E = Vin - Vex = (RT/zF) ln cex/cin - ecuaia Nernst
Exist trei modaliti de transport pasiv: difuzia simpl, difuzia facilitat i
difuzia prin canale i pori.

Difuzia simpl
Difuzia simpl (http://bio.winona.msus.edu/berg)
se
produce
prin
dizolvarea speciei moleculare transportate n membran (figura) i depinde de
raportul dintre solubilitatea substanei respective n bistratul lipidic i
solubilitatea ei n ap, deci de coeficientul de partiie . Cum s-a artat, conform
legii lui Fick, n cazul membranelor coeficientul de permeabilitate P este P = D/

Difuzia facilitat
n acest caz, difuzia se realizeaz prin utilizarea unor molecule
transportoare existente n membran sau introduse artificial n aceasta.
Asemenea molecule transportoare au o anumit specificitate, recunoscnd specia
molecular sau ionic pe care o transport. Exist transportori pentru glucoz,
colin, pentru diferii ioni (n acest caz transportorul se numete ionofor).
Transportorii pot distinge speciile levogire de cele dextrogire. Ei acioneaz n
sensul gradientului electrochimic. Mecanismul de transport se bazeaz pe
proprietatea transportorului de a se putea gsi n dou stari conformaionale T 1 i
T2(figura).
Molecula transportat (substratul S) se leag pe una din feele membranei
(figura). Se produce n urma legrii o modificare conformaional n starea T 2 i
situsul de legare este expus prii opuse cu scderea afinitii pentru specia

respectiv i eliberarea acesteia. Prin eliberare se revine la conformaia iniial i

ciclul se repet. De exemplu, un model pentru transportul uniport al glucozei este
dat nfigur. Procesul se desfoar conform cineticii Michaelis-Menten pentru
reaciile enzimatice. Un exemplu de ionofor este antibioticul valinomicin,
molecul hidrofob care poate ncorpora ionii de K +, translocndu-i prin
membran (i Rb, mai slab). Valinomicina face ca ionii de K+ s ias din celula
bacterian, provocndu-i moartea. Un alt ionofor este nigericina care permite un
schimb neutru K+, H+.

Difuzia prin canale ionice i pori

Canalele ionice sunt proteine specializate care strbat bistratul i permit
trecerea unor substane care nu sunt liposolubile. Permit trecerea ionilor n
ambele sensuri i sunt selective. Porii sunt structuri neselective, conteaz doar
diametrul particulei. Specia transportat se leag de proteina canal, formnd un
complex enzim-substrat care evolueaz pe baza cineticii Michaelis-Menten.
Pentru ca ionul s treac dintr-o parte n cealalt este necesar ca un canal s fie
deschis (http://pb010.anes.ucla.edu/rp1.htm). n figur este reprezentat schematic
structura unui canal ionic. Filtrul recunoate un anumit tip de ion i l las s
treac n vestibul. Senzorul primete informaia din exterior, fie din partea unei
molecule receptoare, fie direct de la un semnal electric, i, dac informaia este
corespunztoare, comand deschiderea porii permind ionului s intre sau s
ias din celul, mpins de potenialul su electrochimic. n anumite situaii,
accesul ionului este interzis, chiar dac poarta este deschis, datorit
interveniei inactivatorului I.
Deschiderea i nchiderea canalului sunt rezultatul unei modificri
conformaionale care este comandat printr-un mecanism specific. Acesta poate
fi ;
- electric - modificarea potenialului membranar (ex. canalele de Na+, K+ n
membrana axonal);
- chimic (ex. acetilcolina, canalul de Na +, Ca++ controlat de GMPc n
membrana celulelor fotoreceptoare);
- alte mecanisme (de ex. mecanic: canalul de K+ din vrfurile stereocililor
celulelor ciliate din organul lui Corti).
Cnd canalul este deschis are loc o trecere pasiv, preponderent n sensul
gradientului electrochimic. Transportul prin canale poate fi inhibat cu ajutorul
unor blocani specifici cum ar fi unele toxine (tetrodotoxina inhib funcionarea
canalului de Na+ din membrana axonal, tetraetilamoniul blocheaz canalul de
K+). Asemenea blocani specifici permit studierea proprietilor canalelor sau
identificarea proteinelor canal.
Deosebiri ntre cele dou tipuri de difuzie (facilitat, canale):
- transportorii au o specificitate mai mare (pot distinge ntre speciile
levogire i dextrogire - n celul pot ptrunde prin difuzie facilitat numai glucoza
dextrogir i aminoacizii levogiri). Pot transporta mii de ioni/s.
- canalele au o vitez mult mai mare de transport al ionilor (milioane sau
chiar sute de milioane de ioni/s). Atunci cnd au loc procese care necesit
modificri brute ale concentraiei sau compoziiei ionice (de ex. n producerea

influxului nervos) canalele ionice sunt mai adecvate pentru transportul speciilor
implicate n aceste procese.
- transportorii sunt n numr mult mai mare;
- transportorii pot participa la transportul activ secundar.

4. Transportul activ
Transportul activ este o form de transport care necesit energie
metabolic - cuplare energetic imediat. Se realizeaz n sensul invers
gradientului de potenial electrochimic. Se disting dou forme de transport
activ: transportul activ primar i transportul activ secundar.

Transportul activ primar

Transportul
activ
primar
se
realizeaz
cu
ajutorul pompelor
ionice membranare, structuri proteice transportoare din clasa proteinelor
integrale. O pomp ionic este caracterizat prin prezena unui centru activ cu
acces alternativ spre partea extracelular i spre cea citoplasmatic. Accesul este
modificat ca urmare a unei tranziii conformaionale. Cea mai cunoscut pomp
ionic este Na+,K+- ATP-aza (figura). Este alctuit din patru subuniti proteice (2
subuniti i 2 subuniti ); subunitatea are activitate ATP-azic. Hidroliza
ATP furnizeaz energia care permite translocarea a 3 ioni de Na n exteriorul
celulei i a doi ioni de K n interior (http//:bio.winona.msus.edu/berg/ANIMTNS).
Este o pomp electrogenic ntruct are ca rezultat un transfer net de o sarcin
pozitiv per ciclu n exteriorul celulei.
Conform schemei Albers-Post, n esen mecanismul de transport
este urmtorul:
Enzima n conformaia E1 ia Na+ pe partea citoplasmatic i leag ATP (n
prezena Mg++). ATP este hidrolizat, complexul fosforilat sufer o tranziie
conformaional E1 - E2 n urma creia scade afinitatea pentru Na+ i crete pentru
K+. Ionii de Na+ se desprind, se ataeaz ionii de K+. Are loc o defosforilare i n
urma acesteia proteina pierde afinitatea pentru K +. Se desprind ionii de K + i
enzima revine n conformaia iniial E1 (figura).
Alte exemple de pompe ionice sunt pompa de H +, K+ din mucoasa
gastric, pompa de
Ca++ din
reticulul
sarcoplasmic
sau
pompa
protonic bacteriorodopsina (sub aciunea luminii pompeaz protoni din interiorul
n exteriorul celulei).

Transportul activ secundar

Transportul activ secundar const din ptrunderea speciilor transportate
ntr-un compartiment (extracelular sau intracelular) mpotriva gradientului lor
electrochimic, prin asocierea cu molecule care se deplaseaz normal conform
propriului lor gradient de concentraie. Gradientul este, ns, meninut prin
transport activ primar. Transportorul ntlnit n difuzia facilitat poate lega cele
dou molecule fie n aceeai stare conformaional (pe aceeai parte)
- simport sau co-transport, fie pe cele dou pri, n stri conformaionale diferite
- antiport (contra-transport).

n simport (http://bio.winona.msus.edu/berg) - enzima leag pe aceeai

parte, n conformaia T1, ambele specii i sufer tranziia T 1 - T2 numai dup
legarea ambelor.
Exemplu: glucoza n celulele mucoasei intestinale se asociaz cu Na+ care
intr pasiv. Ionii de Na+ sunt eliminai activ prin transport primar, prin hidroliza
ATP, iar glucoza rmne. Transportul este electrogenic deoarece are ca rezultat
net transportul unei sarcini pozitive dintr-o parte a membranei n cealalt.
n antiport (http://bio.winona.msus.edu/berg) proteina transportoare leag
n starea T2 un alt ion dect cel care sufer difuzia facilitat, care va fi evacuat n
compartimentul n care potenialul lui electrochimic este mai mare. Exemplu:
muchiul cardiac - antiport 3 Na+/ 1 Ca++ - electrogenic (sarcina net +1). Asigura
concentraia sczut a Ca++ n interior pe seama pomprii active a Na +de ctre
Na+,K+- ATP-aza. Un alt exemplu: transportorul de 1 Na+/2 H+ din membrana
bacteriei E. coli.

5. Receptori i traductori de informaie n membranele

biologice
Definiia receptorului
Receptorii membranari sunt structuri macromoleculare aflate n membrana
celular, care au capacitatea de a recunoate o molecul semnal din mediul
extracelular, numit mesager prim, i de a interaciona cu ea rapid i reversibil
(http://bio.winona.msus.edu/berg/ANIMTNS/Recep.htm). n urma interaciei, celula poate
sintetiza o alt molecul semnal mesager secund care declaneaz
rspunsul celular specific. Mesagerul secund poate fi, uneori, chiar complexul
receptor mesager prim. Dintre moleculele cu rol de mesager prim se pot
meniona: mediatorii chimici, hormonii, antigenii, medicamentele, drogurile etc.
Mesageri secunzi frecvent ntlnii sunt: acidul adenozin monofosforic ciclic (cAMP), acidul guanozin monofosforic ciclic (c-GMP), diacil glicerolul (DAG), inozitol
trifosfatul (InosP3).
Semnalizarea intercelular se realizeaz prin intermediul reelei complexe
de receptori membranari i al liganzilor specifici ai acestor receptori, liganzi care
reprezint semnalele.

Etapele semnalizrii intercelulare

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Sinteza moleculei semnal

Eliberarea moleculei semnal
Transportul moleculei semnal ctre int
Detecia semnalului
Rspunsul celular
Desprinderea moleculei semnal de receptor

Clasificarea semnalelor

- semnale endocrine,(Alberts et al., Molecular Biology of the Cell,

2002), reprezentate de hormonii produi n glandele endocrine, secretai n
snge i distribuii n organism;
- semnale paracrine, generate de celule, acioneaz local n vecintate;
- semnale de contact, necesit contactul intercelular;
- semnale nervoase, se transmit de-a lungul axonilor ctre celulele int;
- semnale autocrine (celulele secret molecule semnal care se leag de
receptorii proprii).

Clasificarea receptorilor membranari

I. Receptori asociai cu canale ionice (ionotropi)
II. Receptori care acioneaz prin intermediul proteinelor G
III. Receptori legai de enzime (sunt fie ei nii enzime, fie sunt asociai cu
enzime pe care le activeaz). Enzimele respective sunt, n marea lor majoritate,
protein kinaze.
Receptorii din ultimele dou clase mai sunt numii i receptori metabotropi.
Receptorii ionotropi
Receptorii asociai cu canale ionice au o zon receptoare de care se leag
mesagerul prim i o zon efectoare prin care comunic senzorului canalului
comanda de deschidere sau nchidere a porii; n urma activrii afecteaz direct
activitatea celulei prin deschiderea nemijlocit a unor canale ionice. Exemplu:
receptorul nicotinic de acetilcolin. Prin legarea Ach de subunitile ale
receptorului, are loc o modificare conformaional n urma creia canalul interior
format de cele 5 subuniti se deschide i permite trecerea nestingherit a ionilor.
Receptorii care funcioneaz prin intermediul proteinelor G
Receptorii care acioneaz prin intermediul proteinelor G sunt receptori
metabotropi care pot determina sinteza mesagerilor secunzi (prin intermediul
unei
proteine
efectoare). Un
exemplu
ar
fi
receptorul
de
epinefrin. Epinefrina (adrenalina), mesagerul prim, se leag de receptorul
specific (de zona receptoare a acestuia). n urma acestei legri, n urma unei
modificri conformaionale, receptorul devine apt s lege o protein G. Proteina
G, alctuit din 3 subuniti notate , i , i care n stare liber leag GDP,
sufer la rndul ei o modificare conformaional n urma creia elibereaz GDP i
leag GTP la subunitatea . Subunitatea se separ de subunitile i i
difuzeaz pna cnd ntlnete un efector (zona efectoare), adenilat ciclaza. Prin
legare de efector acesta se activeaz i catalizeaz transformarea ATP din celul
n c-AMP (mesager secund); c-AMP declaneaz o serie de reacii enzimatice prin
care este activat enzima fosforilaz i aceasta din urm determin
transformarea glicogenului n glucoz ce este eliberat din celul (rspunsul
celular). Dup activarea efectorului, subunitatea a proteinei G, prin hidroliza
GTP devine inactiv i se recombin cu subunitile i , refcnd proteina G.
Procesul se poate relua.

Alt exemplu: ciclul biochimic al rodopsinei n excitaia vizual. Receptorul

pentru lumin, rodopsina, leag n urma fotoactivrii traductina (protein G) i, n
mod analog, traductina activeaz o protein efectoare (PDE). PDE convertete cGMP (mesager secund) n GMP. Prin aceast conversie se nchid canalele de Na i
Ca. Celula se hiperpolarizeaz i informaia este transmis creierului pe cile
nervoase.
Mesagerul secund c-AMP poate activa o serie de protein kinaze care, la
rndul lor, determin n ultim instan eliberarea de hormoni, neurotransmitori
etc.
Ali receptori folosesc drept mesageri secunzi DAG sau InosP 3 (IP3)
(schema).
De exemplu, anumii receptori leag molecule semnal cum ar fi
angiotensina, glucoza, Ach etc i activeaz apoi o protein G care, la rndul ei,
activeaz o enzim numit fosfolipaza C. Substratul acestei enzime este
reprezentat de fosfolipide, n special fosfatidil inositol 4-5 difosfat (PIP2). Enzima
descompune PIP2 in inositol 1,4,5-trifosfat (IP3), eliberat in citosol, i diaciglicerol
(DAG) care rmne ataat de bistratul lipidic. IP3 se leag de un receptor specific
situat in membrana reticulului endoplasmic, receptor care este un canal de
calciu. La legarea IP3 canalul de Ca se deschide. La rndul sau, calciul eliberat
poate aciona si el ca mesager secund pentru alte procese celulare. Unul dintre
acestea este activarea, mpreun cu DAG, a protein kinazei C- Ca dependente i
aceasta poate fosforila diverse proteine. Un alt proces declanat de Ca este
activarea calmodulinei care poate apoi interaciona cu alte proteine etc. etc.
Receptori asociai cu enzime
III. Se activeaz o protein kinaz citoplasmatic (schema)(alt schem).
Activitatea celulei este influenat n etape: mai nti are loc o modificare
metabolic a celulei. Aceasta poate n final s duc la deschiderea sau nchiderea
unui canal ionic ori poate modifica o alt activitate a celulei (de exemplu
transcripia unei proteine ori alt rspuns celular specific). Exemplu: receptorul de
insulin poate activa o tirozin kinaz, se fosforileaz alte proteine i n final se
produce rspunsul celular care poate fi creterea permeabilitii pentru glucoz.
-----------Nota:
In plus fata de cele indicate in bibliografie, imaginile si animatiile din acest curs (ca si cele din prezentarea din
amfiteatru), sunt selectate din multiple surse, criteriul fiind simplitatea si concizia.
Carnegie Mellon, Department of Biological Sciences, "Animating Biology":
http://telstar.ote.cmu.edu/biology/animation/
Stanford Univ, Sea Urchin Embryology Group:
http://www.stanford.edu/group/Urchin/GIFS/

Winona State University, Biology Department, Dr. Steve Berg:

http://course1.winona.edu/sberg/Free.htm
http://course1.winona.edu/sberg/ANIMTNS/Directry.htm
(observatie link-ul vechi: http://bio.winona.msus.edu/berg/ANIMTNS/Directry.htm )
Wikimedia Foundations Inc.,
http://commons.wikimedia.org
Campbell N, Reece J, Biology, 7th Edition, Ed. Pearson, Benjamin, Cummings, ISBN: 978-0805371710, 2005
Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P, Molecular Biology of the Cell, Ed. Garland
Science, ISBN: 978-0815332183, 2002
Eremia D, Curs de Biofizica Medicala, Ed. UMF Carol Davila, 1993
Daca observati linkuri nefunctionale sau erori / omisiuni, va rugam sa ni le semnalati pentru a le putea corecta.