UNIVERSITATEA DUNREA DE JOS

FACULTATEA DE MEDICIN I FARMACIE

Proiect de Metodologia Cercetrii

Coordonator tiinific,

Studeni,

Conf. Dr. Petcu Lucian

Chiper Emilian

Galai
2015

UNIVERSITATEA DUNREA DE JOS

FACULTATEA DE MEDICIN I FARMACIE

Boala Viral Ebola

Coordonator tiinific,

Studeni,

Conf. Dr. Petcu Lucian

Chiper Emilian

Galai
2

2015
Cuprins

Contents
1. Introducere...................................................................................................................................1
2. Istoric...........................................................................................................................................2
2.1. Cronologia epidemiei de febr hemoragic Ebola................................................................2
2.2. Epidemia de Ebola din Africa de Vest, 2014-2015...............................................................4
3. Etiologie.......................................................................................................................................4
3.1. Taxonomie.............................................................................................................................4
3.2. Morfologie............................................................................................................................5
3.3. Nucleocapsida.......................................................................................................................6
3.3.1. Genomul.........................................................................................................................6
3.3.2. Nucleoproteine...............................................................................................................7
3.4. nveliul viral........................................................................................................................8
3.4.1. Glicoproteina GP............................................................................................................8
3.4.2. Glicoproteina GP solubil..............................................................................................8
3.4.3. Proteinele VP40 i VP24................................................................................................8
4. Epidemiologie..........................................................................................................................9
4.1. Rezervorul natural al virusului Ebola................................................................................9
4.2. Virusul Ebola la primate......................................................................................................11
4.3. Transmiterea........................................................................................................................12
4.4. Circulaia virusului Ebola ntre epidemii............................................................................13
5. Patogeneza i imunitatea............................................................................................................14
5.1. Infecia letal.......................................................................................................................15
5.1.1. Disfuncia imunitii nnscute.....................................................................................15
3

5.1.2. Prbuirea imunitii adaptive......................................................................................15

5.2. Infecia neletal...................................................................................................................16
6. Histopatologia............................................................................................................................17
7. Manifestri clinice.....................................................................................................................17
8. Date clinice i de laborator........................................................................................................19
8.1. Analizele de laborator de baz............................................................................................19
9. Diagnostic..................................................................................................................................19
9.1. Diagnostic pozitiv...............................................................................................................19
9.2. Definiia de caz de febr hemoragic Ebola.......................................................................20
9.3. Diagnostic de laborator.......................................................................................................20
9.3.1. Produse patologice recoltate.........................................................................................20
9.3.2. Examenul direct............................................................................................................21
9.3.3. Culturi de celule...........................................................................................................21
9.3.4. Diagnostic serologic.....................................................................................................22
9.3.5. Testele diagnostice rapide.............................................................................................23
10. Diagnostic diferenial...............................................................................................................24
11. Prognostic................................................................................................................................25
12. Tratament.................................................................................................................................25
12.1. Medicamente experimentale.............................................................................................25
12.2. Mutaiile i rezistena la tratament....................................................................................29
13. Prevenie..................................................................................................................................30
13.1. Msuri generale.................................................................................................................30
13.1.1. Controlul virusului Reston la animalele.....................................................................30
13.1.2. Msuri individuale......................................................................................................30
13.1.3. Msuri n instituiile medico-sanitare.........................................................................31
4

13.2. Profilaxie pasiv................................................................................................................33

13.3. Profilaxie activ (vaccinuri)..............................................................................................33
14. Virusul Ebola ca arm biologic..............................................................................................34
Referine........................................................................................................................................36

Boala Viral Ebola

1. Introducere
Boala viral Ebola sau febra hemoragic Ebola este o boal infecioas viral sever,
adesea fatal, provocat de virusul Ebola(Ebolavirus), care se manifest prin afeciuni
hemoragice severe la oameni, primate i antilopele duiker, survenind n focare epidemice
nAfrica Central i Africa de Vest. Are o rat de letalitate de pn la 90% la om (cea mai
mare mortalitate ntr-o boal infecioas, cu excepia rabiei). Se presupune c liliecii
frugivori din familia Pteropodidae sunt gazdele naturale ale virusului Ebola. Virusul Ebola
este introdus n populaia uman dup un contact strns cu sngele, secreiile, organele sau
fluidele biologice ale animalelor infectate:cimpanzei, gorile, lilieci frugivori, antilope de
pdure duiker i porci spinoi. Apoi, boala se propag n comuniti prin transmitere
interuman, ca urmare a contactului direct (piele lezat sau mucoase) cu sngele, organele,
secreiile sau lichidele biologice (urina, saliva etc.) ale persoanelor infectate sau prin contact
indirect prin intermediul mediilor contaminate cu aceste lichide. Ritualurile funerare n care
rudele i prietenii celor decedai se afl n contact direct cu corpul decedatului pot juca, de
asemenea, un rol n transmiterea virusului Ebola. Sperma poate continua transmiterea
virusului pn la apte sptmni dup nsntoirea clinic.
Virusul Ebola a fost identificat pentru prima dat n 1976, n dou focare simultane:
n Nzara (Sudan) i Yambuku (Republica Democrat Congo). Yambuku este situat n
apropiere de rul Ebola, de unde vine numele bolii.
Perioada de incubaie este n medie de 8 zile, cu extreme de 2-21 de zile. Debutul
bolii este brusc, cu febr nalt, frison, cefalee, mialgii, anorexie, asociat cu erupii cutanate
(exantem). n urmtoarele 2-3 zile se adaug grea, vome, diaree, faringit i fenomene
hemoragice: hematemez, melen, echimoze i peteii. Sunt afectate funciile renale i
hepatice. Apar i tulburri nervoase, prostraie, anxietate, confuzie, pierderi de memorie,
instabilitate. Moartea poate surveni la 6-9 zile de la debut, prin oc, hipovolemie i hemoragii
extinse generalizate. Rata de letalitate este estimat a fi intre 50-90%, cu mici diferen e n
funcie de speciile de virus Ebola.

n epidemia de febr hemoragic Ebola din Africa din 2014, pn la data de 1

februarie 2015 s-au nregistrat 22.495 cazuri de mbolnviri, din care 8.981 au fost decese.
Pe 30 septembrie 2014 a fost diagnosticat primul caz de infectare cu virusul Ebola n
Statele Unite, pacientul fiind spitalizat n Texas. Bolnavul era un brbat, care a cltorit n
Liberia. Fr intervenii suplimentare sau modificri ale comportamentului comunit ilor
btinae, CDC estimeaz c pn la 20 ianuarie 2015, va exista un total de aproximativ
550.000 de cazuri de febr hemoragic Ebola n Liberia i Sierra Leone sau 1,4 milioane de
cazuri dac se fac corecii pentru subraportarea cazurilor.
Rehidratarea suportiv pe cale oral sau intravenoas i tratamentul simptomatic
specific cresc ratele de supravieuire. Nu exist nc nici un tratament specific disponibil
mpotriva febrei hemoragice Ebola. Cu toate acestea, o serie de tratamente poten iale,
inclusiv produse din snge (seroterapia cu IgG anti-EBOV), terapii imunitare (ZMapp, Zmab)
i tratamente medicamentoas (oligonucleotide morfolino-fosforodiamidate, ARN interfereni
mici, analogi nucleotidici/nucleozidici etc.) sunt n curs de evaluare. Pn n prezent, nu
exist nc un vaccin omologat disponibil, dar se evalueaz n prezent inocuitatea a dou
vaccinuri poteniale (ChAd3-ZEBOV i rVSV-ZEBOV) la om.

2. Istoric
2.1. Cronologia epidemiei de febr hemoragic Ebola
Virusul Ebola a fost identificat pentru prima dat n 1976, n dou epidemii
concomitente, una n Zair (Republica Democrat Congo), cauzat de specia Zair a virusului
Ebola, i alta n Sudan, cauzat de specia Sudan. Epidemia din Sudan a atins n principal
oraeleNzara i Maridi, n apropiere de grania cu Republica Democrat Congo, i a provocat
284 de cazuri de mbolnviri cu o rat a mortalitii de 53%. Epicentrul epidemiei
dinZair (Republica Democrat Congo) a fost situat n oraul Yambuku, situat n apropiere
derul Ebola, care a dat numele noului virus. Aceast epidemie, cu un grad de mortalitate mai
mare dect cea din Sudan, a provocat decesul a 284 de persoane dintr-un total de 318 de
bolnavi identificai. Rata de mortalitate de 89%, asociat cu specia Zair, denot o
patogenicitate mai mare fa de cea a speciei Sudan.

Dup un caz izolat survenit n 1977 n satul Tandala din Zair, o nou epidemie cu
specia Sudan a fost localizat n oraul Nzara, n 1979, cu 34 de cazuri de mbolnviri i 22
decese.
Dup o perioad silenioas de cincisprezece ani, n care nu a fost notificat niciun
caz,virusul Ebola a reaprut aproape simultan n trei ri. Mai nti n iunie 1994, cnd un
etolog elveian s-a contaminat fcnd o autopsie unui cimpanzeu infectat, gsit mort
npdurea Ta din Coasta de Filde. Determinarea genomic a virusului la pacient i la animal
a permis identificarea unei noi specii de virus, specia pdurii Ta (specia Coastei de Filde).
Acest pacient este singurul caz cunoscut de infecie cu specia pdurii Ta.
O mare epidemie cu specia Zair s-a propagat n oraul Kikwit i regiunea
nconjurtoare n 1995, din sud-vestul Republicii Democratice Congo. Aceast epidemie, care
a provocat decesul a 256 de oameni dintr-un total de 315 de bolnavi (mortalitate 81%), a
afectat n principal personalul spitalicesc (transmisie nozocomial).
Alte trei epidemii cu specia Zair au afectat n mod succesiv nord-estul Gabonului ,
ntre 1994 i 1997. Cea din 1994 a avut loc ntr-o tabr de mineri din minele de aur
din Mekouka, a doua n 1996 n satul Mayibout, n care cele mai multe victime au fost copiii
care au transportat i tiat un cimpanzeu gsit mort, iar a treia ntre 1996 i 1997, un pic mai
la sud, n regiunea Boou. Aceast ultim epidemie, care a provocat 60 de cazuri de
mbolnviri cu 45 de decese, a produs un focar secundar cu 15 cazuri de mbolnviri, din care
11 decese n capitala Libreville, i un caz n Africa de Sud, la o asistent contaminat de un
pacient gabonez provenit din Libreville.
Perioada 2000-2008 a fost marcat de epidemii care au avut loc n mai multe ri
din Africa Central. Mai nti, cinci epidemii cu specia Zair au afectat regiunea de frontier
dintre nord-estulGabonului i nord-vestul Republicii Congo. Prima, responsabil de 143 de
cazuri de mbolnviri, din care 128 decese, s-a extins din Gabon la Republica Congo, de-a
lungul drumului care leag Mekambo i Mbomo. Aceast epidemie a fost de fapt subdivizat
n mai multe lanuri epidemice independente, fiecare avnd originea n surse de diferite
animale, care erau cadavrele infectate de gorile, cimpanzei i antilope.
Apoi, Republica Congo a fost atins de trei ori de epidemia cu specia Zair ntre 2003
i 2005: regiunea Mbomo i Kelle la nceputul anului 2003 (143 de mbolnviri din care 128

de decese), din nou regiunea Mbomo la sfritul anului 2003 (35 de cazuri de mbolnviri,
din care 29 de decese), apoi Etoumbi (11 cazuri de mbolnviri, cu 9 decese).
Simultan, specia Sudan a fost responsabil de dou epidemii, una mai mare
n Uganda, n 2000, cnd au fost nregistrate 425 de cazuri de mbolnviri, din care 173
mortale, i o alta nregistrat n Yambio din Sudan n 2004, aproape de Nzara, cu 17 cazuri de
mbolnviri din care 7 decese.
n anul 2007, o nou specie de virus Ebola, specia Bundibugyo, a fost identificat i
caracterizat n Uganda n timpul unei epidemii care a cauzat moartea a 30 de persoane din
116 cazuri de mbolnviri, cu o rat de mortalitate de 26%.
Cea mai mare epidemie de febr hemoragic Ebola determinat de virusul Zair
(tulpina Makon ), care este n curs de desfurare, a izbucnit la nceputul lunii februarie 2014
n Guineeai nordul Liberiei i s-a extins n Sierra Leone i Nigeria, fiind nregistrate 22495
cazuri de mbolnviri pn la 1 februarie 2015, din care 8981 decese.
Pe lng aceste patru specii care circul n Africa i care, la diferite nivele, sunt toate
patogene pentru om, o alt specie de virus Ebola, specia Reston, nepatogen pentru oameni, a
fost identificat n 1989 la maimuele macac (Macaca fascicularis) provenite din Filipine.
Aceste maimue au dezvoltat o boal mortal de tip hemoragic n timpul aflrii lor n
carantin ntr-un laborator din oraul Reston (Virginia, Statele Unite ale Americii). Acelai
virus a fost gsit n 1996 i la alte maimue macac bolnave n laboratoarele situate
n Austin (Texas, Statele Unite ale Americii), Siena (Italia) i Filipine. Cu toate c niciun caz
clinic la om nu a fost nregistrat, mai mul i ngrijitori de animale au dezvoltat
anticorpi IgG specifici pentru specia Reston. Specia Reston a fost din nou identificat n 2009
n Filipine n timpul unei epidemii de sindrom respirator care a afectat porcii domestici din
mai multe ferme.

2.2. Epidemia de Ebola din Africa de Vest, 2014-2015

Epidemia actual de Ebola din Africa de Vest (primele cazuri au fost notificate n martie
2014) este cea mai important i cea mai complex de la descoperirea virusului n 1976. Ea a
cauzat mai multe cazuri de mbolnviri i decese dect toate epidemiile precedente nsumate.
Aceast epidemie s-a extins de la o ar la alta, izbucnind iniial n Guineea, apoi
rspndindu-se n Sierra Leone i Liberia (traversnd frontierele terestre), Nigeria (printr-o

persoan care cltorea cu avionul) i Senegal (prin intermediul unui cltor sosit pe uscat).
rile cele mai afectate (Guineea, Sierra Leone i Liberia) au sisteme de sntate foarte
fragile, nu dispun de resurse umane i infrastructuri i au ieit cu greu din lungile perioade de
conflicte i instabilitate. La 8 august 2014, directorul general al OMS a declarat c aceast
epidemie constituie o urgen de sntate public de interes internaional.
Un focar separat de Ebola, fr legtur cu cel din Africa de Vest, a izbucnit n august 2014 n
Districtul Boende, o regiune izolat a provinciei Equateur din Republica Democrat Congo.

3. Etiologie
3.1. Taxonomie
Virusurile Ebola se numr astzi printre cei mai viruleni agen ii patogeni pentru
specia uman.
Genurile Ebolavirus i Marburg sunt incluse n familia filoviride (Filoviridae, din
latin filum = fir, filament), denumit astfel datorit aspectului filamentos al acestor virusuri
la microscopul electronic. Asemnrile structurii genomului i mecanismele comparabile ale
expresiei genetice sugereaz c filovirusurile au o origine evolu ionist comun cu
familiile Paramyxoviridae (care

include

virusul

rujeolei

virusul

urlian)

iRhabdoviridae (care include virusul rabiei). Aceste trei familii au fost grupate n
ordinul Mononegavirales, un grup de virusuri care posed un genom cu ARN monocatenar,
linear, nesegmentat i de polaritate negativ (= de sens negativ)
Genul Ebolavirus este subdivizat n cinci specii diferite, din care patru circul n mod
specific n Africa subsaharian, n timp ce ebolavirusul Reston circul n Filipine i China.

Ebolavirusul Bundibugyo (BDBV, BEBOV)

Ebolavirusul Zair, denumit n prezent virusul Ebola (EBOV, ZEBOV)

Ebolavirusul Reston (RESTV, REBOV)

Ebolavirusul Sudan (SUDV, SEBOV)

Ebolavirusul pdurii Ta (TAFV) sau Ebolavirusul Coastei de Filde (CIEBOV)

Genomul acestor cinci specii de ebolavirusuri difer genetic cu 32-41% la nivel de

nucleotide. Spre deosebire de ebolavirusurile Reston i pdurii Ta, ebolavirusurile
Bundibugyo, Zaire i Sudan sunt asociate cu focare importante de febr hemoragic Ebola n
Africa. Specia Ebolavirusul Reston, gsit n Filipine i Republica Popular Chinez, poate
infecta oameni, dar nu au fost semnalate pn acum cazuri de boal sau deces cauzate de
acest virus.

3.2. Morfologie
Virionii virusurilor Ebola i Marburg la microscopia electronic au o form unic n
lumea virusurilor, cea a unui filament. Cu toate acestea, numeroase configuraii, cum ar fi
forme n "6", forme circulare, forme n "U" sau n "ac de pr" i forme ramificate sunt
frecvent observate att n culturile de linii celulare, ct i n seciunile histologice ale
organelor infectate. Virusul Marburg are adesea o form circular, n timp ce virusul Ebola
are mai frecvent o form de filament lung n form de "U" sau "6". Virusurile Ebola i
Marburg au aproximativ 80 nm (nanometri) n diametru i o lungime variind de la 600 nm
pn la 1000-1500 nm. Dei virusul Ebola este foarte pleomorf, adesea fiind ntlnite
structuri cu lungimi diferite, cu anse, ramificaii i alte neregulariti, exist dovezi c
particulele infecioase sunt reprezentate n principal de formele simple, lineare, cu lungime de
aproximativ 1 m. Virionii au o densitate de 1,14 g/ml n gradient de densitate de tartrat de K
i o greutate molecular de 3,6 x 108.
Examenul la microscopul electronic arat c virionii au la exterior un nveli lipidic
extern, provenit din membrana celulei gazd infectat, pe care se afl ni te proeminen e
numite peplomere (spiculi), de aspect globular cu diametrul de 7 nm, dispuse la intervale de
10 nm, care sunt n totalitate formate din proteine glicozilate - glicoproteine (GP), regrupate
n macromolecule trimerice responsabile de aspectul granulat vizibil la microscopia
electronic. n interior este situat nucleocapsida (ribonucleocapsida sau ribonucleoparticula,
RNP) de simetrie helicoidal, cu diametrul de 40-50 nm i pasul helixului de 5 nm, avnd n
interior un spaiu axial, vizualizat ca o zon clar de 20 nm.

3.3. Nucleocapsida
Nucleocapsida este un complex ribonucleoproteic, constituit din ARN genomic viral
i nucleoproteinele asociate acestuia.
3.3.1. Genomul
Genomul virusului Ebola este de tip ARN, liniar, monocatenar, de sens negativ, cu o
greutate molecular de aproximativ 4 x 10 6 Da. Constituie 1,1% din ntreaga mas viral.
Genomul este constituit dintr-o singur caten de ARN liniar cu aproximativ 19000
nucleotide (19 kb), de polaritate negativ (sens negativ) i are 7 gene transcrise n apte ARN
mesageri care codific apte proteine structurale: extremitatea 3' (cu o secven leader
necodificant), nucleoproteina (NP sau N), proteina virale VP35, VP40, GP, VP30, VP24,
ARN-polimeraza (L), extremitatea 5 ' (cu o secven terminal trailer necodificant). Partea
central a virionului este ocupat de un complex ribonucleoproteic (RNP) care este constituit
dintr-o caten ARN nconjurat de nucleoprotein (NP) ea nsi fiind legat de proteinele
matricei VP30 i VP35 i de ARN polimeraz. Acest complex este implicat n transcrip ia i
replicarea virionilor.
Compararea acestor secvene ale genomului cu genomul altor mononegavirale a artat
o organizare genomic foarte apropiat de cea a Paramyxoviridae i Rhabdoviridae i
sugereaz mecanisme de transcripie i replicare similare. Compus de aproximativ 19000 de
baze, genomul filovirusurilor posed dimensiunea genomic cea mai important n
ordinulMononegavirales.
Genomul are succesiv genele nucleoproteinelor NP, VP35, VP40, glicoproteinelor GP,
VP30, VP24 i polimerazei L. Secvenele codante ale virusurilor Marburg i Ebola sunt
separate de regiuni intergenice (secvene separatoare) de 3-7 nucleotide, cu excepia
regiunilor dintre genele VP30 i VP24 a virusului Ebola care sunt constituite din 142 i 97
nucleotide, n funcie de specie. n mod similar, genele GP i VP30 ale virusului Marburg au
o secven intergenic de 126 nucleotide.
Genele alturate, VP35-VP40, GP-VP30 i VP24-L, pot fi suprapuse n func ie de
tipul de virus. Prezena a trei regiuni scurte suprapuse de cinci nucleotide ntre genele VP35VP40, GP-VP30 i VP24-L caracterizeaz genomul ebolavirusurilor Zair i Sudan, n timp ce
genomul ebolavirusului Reston difer prin absena acestui tip de regiuni ntre genele GP i
VP30. La virusul Marburg, exist o singur zon suprapus ntre genele VP30 i VP24.
Poziia acestor zone suprapuse a fost utilizat ca un criteriu n clasificarea diferitelor specii

din familia Filoviridae. Diferena localizrii acestor regiuni la ebolavirusul Reston n

comparaie cu ebolavirusurile Zair i Sudan ar putea fi un indicator a unei divergene
evolutive de la un strmo comun.
Genele virusurilor Marburg i Ebola sunt delimitate prin secven e consens (3'-5') CUNCNUNUAAUU i (3'-5') - UAAUUCUUUUUN care au fost desemnate, prin analogie
cu genomurilor altor mononegavirale, ca semnale de iniiere i ntrerupere a transcripiei.
Pentamerul foarte conservat -UAAUU- la fiecare extremitate a regiunilor transcrise
caracterizeaz genomului filovirusurilor. Au fost descrise secvene complementare n
regiunea de iniiere a transcripiei care permite formarea unei structuri secundare n "ac de
pr" la extremitatea 5' a ARNm a virusului Marburg i Ebola. Structura secundar prezis
difer n funcie de secvena nucleotidic n aval de situsul de iniiere. Apariia mutaiilor
compensatorii n secvena de iniiere modificat prin mutagenez demonstreaz importana
acestei structuri secundare.
Secvena de terminare a transcripiei conine o serie de cinci (la virusul Marburg) sau
ase (la virusul Ebola) reziduri de uridin. Situsurile de poliadenilare (polyA), similare cu
cele observate la virusurile din genurile Paramyxovirus i Morbillivirus, funcioneaz ca o
matrice pentru adugarea unui cozi poliadenilate la extremitatea 3' a ARNm viral prin
mainria celular.
Regiunea Leader, alctuit din 55 de nucleotide la virusul Ebola i 48 de nucleotide la
virusul Marburg, ncepe de la prima nucleotid a genomului viral i se extinde pn la
semnalul de iniiere a transcripiei nucleoproteinei NP. Ea conine prima parte a promotorului
de iniiere a transcripiei ARNm. Regiunea Trailer (5') are o lungime variabil la filovirusuri.
Ea este constituit din 677 i 381 nucleotide la ebolavirusurile Zair i Sudan, 25 de nucleotide
la ebolavirusul Reston i 76 de nucleotide la virusul Marburg. Aceast regiune include
semnale necesare pentru sinteza de noi genoame n timpul replicrii virale. Extremit ile
genomice Leader i Trailer ale filovirusurilor au un grad ridicat de complementaritate ntre
ele.

3.3.2. Nucleoproteine
Complexul ribonucleoproteic (nucleocapsida) conine 4 proteine: NP, VP30, VP35 i
L, codificate de genele cu aceleai denumiri. Proteinele NP, VP35 i L sunt suficiente pentru

procesele de transcripie i de replicare a virusului Marburg, iar proteina VP30 este necesar
n etapa de transcripie a genomului ebolavirusului Zair.

Proteina NP (104 kDa) este o fosfoprotein strns legat de ARN, fosforilarea ei

permind meninerea stabilitii complexului. Funciile sunt similare celorlalte
proteine NP ale mononegaviralelor care fac parte din complexul polimerazic.

Proteina VP35 (35 kDa) este analoag proteinei P a paramixovirusurilor i

rabdovirusurilor, fr s fie fosforilat. n apropiere de N-terminal posed un domeniu
hidrofil, cu rol probabil n ataarea de ARN genomic. Legturile cu acesta sunt mai
slabe dect cele ale proteinei N.

Proteina VP30 (30 kDa) este o fosfoprotein minor, activ probabil n ncapsidare
sau cofactor al complexului polimerazic.

Proteina L sau ARN-polimeraza (270 kDa) este o protein mare, avnd n segmentul
N-terminal omologii importante cu proteinele L ale celorlalte mononegavirale. Are un
rol de ARN polimeraz -ARN dependent, replicaz i transcriptaz, posed la Cterminal segmentul peptidic nalt conservat, GDNQ, ncadrat de aminoacizi hidrofobi,
care este probabil situsul catalitic.

3.4. nveliul viral

nveliul viral este format dintr-un dublu strat lipidic derivat din membrana plasmatic a
celulei-gazd, are inserate peplomere globulare, proeminente la suprafa, alctuite din
glicoproteina GP codificat de virus. Proteinele nveliului viral includ glicoproteina unic de
suprafa (GP), glicoproteina GP solubil (GPS), proteina matriceal VP40 asociat
membranei, proteina matriceal VP24 asociat membranei.
3.4.1. Glicoproteina GP
Glicoproteina GP (130-170 kDa), singura glicoprotein structural constitutiv a
nveliului viral, este format din dou fragmente legate printr-o punte disulfuric, una
extracelular, GP1, i alta ancorat n membran, GP2.
Glicoproteina GP, care se leag preferenial de celulele endoteliale i celulele liniei
monocitare prin GP1, permite intrarea virionului n celula int, i este responsabil de

disjuncia celulelor endoteliale i de citotoxicitatea fa de vasele sanguine observate in vitro;

ea are n plus o aciune imunosupresiv prin intermediul unei secvene peptidice omoloag cu
o secven imunosupresiv a retrovirusurilor.
3.4.2. Glicoproteina GP solubil
Glicoproteina GP solubil (GPS sau sGP) (50-70 kDa) este o protein nestructural.
Are activiti distincte de cele ale glicoproteinei GP structural: 1) probabil de inhibi ie la
nivel efector umoral, blocnd Ac (anticorpii) dirijai anti GP; 2) induce energie la nivel
efector celular; 3) activitate imunosupresoare corelat cu concentraii mari, la pacienii cu
sfrit letal i absen a rspunsurilor imune; 4) inhib activarea timpurie a neutrofilelor, prin
ataare la CD16b.
3.4.3. Proteinele VP40 i VP24
Proteinele VP40 i VP24 sunt considerate proteine matriceale, datorit pozi iei n
genom, caracterului hidrofob i faptului c nu sunt asociate cu ribonucleoproteina, iar prin
tratare cu detergeni neionici rmn legate de membran. Proteinele VP40 i VP24 sunt legate
de complexul RNP, pe de o parte, i pe suprafaa intern a bistratului lipidic al nveli ului
virionului, pe de alt parte. Aceste proteine sunt implicate n formarea complexului RNP,
asamblarea i nmugurirea virionilor pe suprafaa celulelor infectate i selectarea celulelor
int.
Proteinele VP35 i VP24 joac un rol major n patogenitatea virusului neutraliznd
rspunsurile antivirale ale celulelor infectate printr-o activitate inhibitoare specific a sintezei
IFN (interferon uman) de tip I.

4. Epidemiologie
4.1. Rezervorul natural al virusului Ebola
Infecia cu virusul Ebola este o zoonoz (boal infecioas transmisibil de la animale
la om i invers).
Rezervorul natural al virusului Ebola nu este nc clar identificat. n Africa, se crede
c liliecii frugivori, mai ales cei care aparin speciilorHypsignathus monstrosus, Epomops
franqueti i Myonycteris torquata, sunt posibile gazde naturale (rezervor natural) ale virusului

Ebola. Prin urmare, distribuia geografic a virusului Ebola se poate suprapune cu cea a
liliecilor. Aceast ipotez se bazeaz pe mai multe argumente:

Mai multe cazuri de infectare cu virusul Marburg (virus asemntor cu virusul Ebola)
au survenit dup vizitele unor peteri sau mine n care se aflau lilieci infecta i. Liliecii
triau n fabrica de bumbac la care erau angajai cazurile index de Ebola n epidemiile
din 1976 i 1979.

n laborator, liliecii frugivori pot fi infectai cu virusul Ebola i n ei are loc replicarea
i eliminarea virusului prin scaune fr semne clinice de boal. Absena semnelor
clinice de boal la aceti liliecii infectai este caracteristic pentru speciile care
servesc ca rezervor. Din 24 de specii de plante i 19 specii de vertebrate inoculate
experimental cu Ebolavirus, numai liliecii s-au infectat. Liliecii pot susine replicarea
i circulaia unor concentraii mari de virus Ebola.

n zonele epidemice din Gabon i Congo au fost identificate secvene genetice ale
virusurilor Ebola prin amplificarea genomic RT-PCR i au fost observate numeroase
seroconversii la liliecii aflai n aceleai zone unde au fost gsite carcasele maimu elor
moarte infectate.
Rezervorul natural al virusului Ebola a fost identificat numai dup investigarea a mii

de specii din pdurile tropicale umede de pe continentul african.

Virusul

fost

detectat

carcasele

de gorile, cimpanzei i antilope

de

pdure (subfamilia Cephalophinae) n timpul epidemiilor din 2001 i 2003, care mai trziu au
devenit surs de infecii umane. Primatele antropoide, cu toate c sunt la originea mai multor
epidemii, nu pot reprezenta rezervorul virusului Ebola, deoarece mortalitatea ridicat a
acestor specii infectate cu acest virus le face puin probabil s fie un rezervor natural. Virusul
Ebola pare a fi un pericol real de extincie a speciilor de maimu e antropoide. Popula iile de
primate antropoide (maimuele mari i maimuele mici) au fost decimate n zonele n care au
avut

loc

epidemiile

recente

din Africa (Gabon i Republica

Democrat

Congo)

cu Ebolavirusul Zair. Maimuele par s joace un rol amplificator al virusului i de gazd

intermediar pentru om.
Numeroase

studii

de

teren,

bazate

pe

capturarea

animalelor

slbatice

(vertebrate i nevertebrate), s-au desfurat ntre 1976-1998 n diferite ri pentru a ncerca s

se identifice speciile potenial rezervoare ale virusurilor Ebola i Marburg. Virusurile au fost
cercetate iniial prin izolare, apoi prin tehnici de biologie molecular.

n total, printre

aproape 7.000 de vertebrate (mamifere, mai alesroztoare, psri, reptile, amfibieni) i 30.000
de nevertebrate (artropode) analizate n regiunile epidemice pentru determinarea rezervorul
natural al fiolovirusurilor, au fost detectate numai secvene nucleotidice de ebolavirus Zair n
organele a ase roztoare (Mus musculus iPraomys sp.) i a unui chican de pdure
(Sylvisorex ollula) colectate n Republica Centrafrican n 1999. Din pcate, aceste rezultate
nu au fost confirmate i nici o concluzie nu a putut fi tras. n mod similar, numeroase
inoculri

experimentale

cu

virusul

Ebola

au

fost

ncercate

pe roztoare, lilieci, psri, reptile, molute, artropode i plante, dar toate au euat.
Cu

toate

acestea,

unii lilieci aparinnd

genurilor Epomophorus i Tadarida au

dezvoltat o viremie tranzitorie de circa 4 sptmni, dar din nou fr dovezi concludente
asupra rolului liliecilor ca gazde naturale ale filoviridelor. Datorit epidemiilor care au avut
loc ncepnd cu 2001, s-au fcut noi colecii n 2002 i 2003 n Gabon i Republica
Congo pentru virusul Ebola pe de o parte, i n 2002 n Republica Democrat Congo, n 2005
n Gabon i n 2007 n Uganda pentru virusul Marburg, pe de alt parte, n zonele afectate de
epidemii.
n 2005, trei specii de lilieci frugivori (Hypsignathus monstrosus, Epomops
franqueti i Myonycteris torquata) au fost identificate ca purttoare ale virusului, n timp ce
restul erau asimptomatice. n organele acestor 3 lilieci au fost detectate fragmente
de ARN ale ebolavirusului Zair. Secvenializarea fragmentelor amplificate au confirmat
specificitatea secvenelor. n plus, anticorpi IgG anti-EBOV au fost detectai n serul a 16
exemplare de lilieci: 4 exemplare de Hypsignathus monstrosus, 8 de Epomops franqueti i 4
de Myonycteris torquata, ns ei nu au fost gsii la alte specii de lilieci i la alte specii de
animale.
Aceste rezultate au fost confirmate ulterior prin studii de seroprevalen efectuate pe
2.147 de animale colectate n Gabon i Republica Congo ntre 2003 i 2007. Niveluri ridicate
i constante au fost obinute pe parcursul celor patru ani de capturi a celor trei
specii, Hypsignathus

monstrosus (7%), Epomops

franqueti (4%)

i Myonycteris

torquata (3%). n plus, un studiu a artat ca epidemia din Luebo din 2007 n Republica
Democrat Congo a fost legat de migraia masiv a liliecilor frugivori, sugernd cu trie c
oamenii pot fi infectai de lilieci.

n mod similar, anticorpi i secvene nucleotidice ale virusului Marburg au fost gsite
n organele indivizilor unei specii de lilieci frugivori (Rousettus aegyptiacus) n Gabon,
Republica Democrat Congo i Uganda i la alte dou specii de lilieci insectivori n
Republica Democrat Congo: (Rhinolophus eloquens i Miniopterus inflatus). Studiile din
2007 a liliecilor frugivori egipteni (Rousettus aegyptiacus) cavernicoli care triesc n petera
Kitaka din Uganda au izolat ARN virusului Marburg din esuturi i au demonstrat anticorpi
specifici virusului. Pn n prezent, Gabon este singura ar n care liliacul Rousettus
aegyptiacus s-a dovedit a fi rezervorul pentru ambele virusuri, Ebola i Marburg. Dei se tie
c maimuele au introdus virusul Marburg n Europa i virusul Ebola n Statele Unite i Italia,
ele nu sunt privite ca fiind rezervorul natural al virusurilor.
Ebolavirusul Reston spre deosebire de omologii si africani este nepatogen pentru om.
Marea mortalitate n rndul maimuelor i apariia sa recent la porci l face un rezervor
natural improbabil. Liliecii au fost implicai n infeciile cu virus Marburg din 1975 i 1980.
Ansamblul acestor date arat c unele specii de lilieci frugivori din Africa
Central sunt rezervoarele (gazdele naturale) ale filovirusurilor.

4.2. Virusul Ebola la primate

Cu toate c primatele au fost sursa de infecie la om, ele nu sunt considerate a fi
rezervorul, ci mai degrab gazde accidentale ale virusului, ca i fiinele umane. ncepnd cu
1994, s-au observat la cimpanzei i gorile focare de infecie cu 2 specii ale virusului Ebola:
ebolavirusul Zair i ebolavirusul pdurii Ta. Ebolavirusul Reston a fost cauza focarelor
severe de febr hemoragic Ebola la macaci crabivori (Macaca fascicularis) crescui n
Filipine i el a fost detectat la maimuele importate n Statele Unite ale Americii n 1989,
1990 i 1996, precum i la maimuele importate n Italia n 1992, provenite din Filipine. Din
2008, ebolavirusul Reston a fost identificat n timpul mai multor focare de o boal mortal la
porcii din Filipine i China
Virusul Ebola are un impact important asupra faunei slbatice. Mai multe studii au
artat c virusul Ebola a fost responsabil ntre 1995 i 2005 de marile epidemii printre
cimpanzei, gorile i antilope n Gabon i Republica Congo i a fost cauza unui declin brusc i
rapid a populaiilor de maimue mari care triau n aceste ri. Astfel, numrul de cimpanzei a

sczut cu aproape 80% n nord-estul Gabonului n ultimul deceniu i sute de mii de gorile au
pierit n nord-vest Republicii Congo.
Un studiu serologic, efectuat pe 790 prelevri de la douzeci de specii de primate din
Camerun, Gabon i Republica Congo a artat de asemenea c 12,9% dintre cimpanzei
slbatici aveau anticorpi IgG anti-Ebola, unele dintre eantioane pozitive fiind prelevate
nainte de primele epidemii din aceste regiuni. Pe de alt parte, un studiu efectuat n pdurea
Ta din Coasta de Filde a artat dispariia a 11 membri ai unui grup de 43 de cimpanzei (sau
a 26% din grup) ntr-o singur lun de noiembrie 1994. Analiza imunohistochimic pozitiv
a unui esut provenit de la un cadavru de cimpanzeu sugereaz c virusul Ebola (Ebolavirusul
pdurii Ta) este responsabil de dispariia unei pari a acestui grup. Ansamblul rezultatelor
epidemiologice i serologice sugereaz c maimuele mari care populeaz aceste regiuni sunt
n mod regulat n contact cu virusul Ebola, care este probabil prezent de foarte mult vreme
n blocul forestier din Africa Central.
Pentru a nelege modurile de contaminare a maimuelor mari, partea codant a GP
(gena cea mai variabil) a genomului viral, extras din esuturile carcaselor gorilelor i
cimpanzeilor, a fost sistematic amplificat apoi secvenat. Diferite secvene virale au fost
obinute pentru fiecare carcas, inclusiv la dou carcase de gorile gsite n aceea i zi la c iva
metri una de alta. Prin urmare, aceast diversitate genetic exclude o transmisie a virusului de
la un individ la altul, deoarece ea ar fi fost asociat n acest caz cu secven e identice. Ea
indic, din contr, c infecia maimuelor mari rezult din contaminare simultan i
independent din surse animale diferite, probabil din rezervorul natural al virusului Ebola. n
acest model de "multiemergen" trecerea virusului din rezervor la maimuele mari se
produce datorit unor condiii particulare ale mediului nconjurtor.
n afar de aceasta, existena a dou linii evolutive distincte n interiorul speciei Zair,
care s-au separat nainte de prima epidemie din 1976, i apariia unei recombinri genetice
ntre virusurile acestor dou linii, consolideaz nu numai modelul de "multi-emergen ", dar
i ipoteza potrivit creia virusul Ebola este prezent de mult timp n pdurile tropicale umede
din Africa Central. Aceast recombinare a dus la geneza virusurilor Ebola recombinante
ntre 1996 i 2001, care au provocat epidemiile de Ebola ntre 2001 i 2003 n Gabon i
Republica Congo.

4.3. Transmiterea
Noi dovezi demonstreaz c liliecii frugivori (Hypsignathus monstrosus, Epomops
franqueti i Myonycteris torquata), care sunt n mod natural rezisteni la infecie, sunt
gazdele-rezervor ale ebolavirusurilor, cu toate c cile de ntreinere enzootic local i de
transmitere a virusului Ebola n interiorul populaiilor de lilieci rmn necunoscute. Mai mult
dect att, aceti lilieci se afl n numr mare n arbori i consum fructele acestora, n special
n interiorul i n jurul satelor din Africa Central. Astfel, este posibil ca stenii s se infecteze
cnd manipuleaz sau consum fructele contaminate cu saliva liliecilor care poate conine
virusul Ebola. n mod similar se infecteaz i primatele. Epizootiile animalelor cauzate de
ebolavirusuri apar sporadic, producnd o mortalitate ridicat n rndul primatelor neumane i
antilopelor duiker (din subfamilia Cephalophinae) i pot preceda epidemiile umane.
Transmiterea interuman este o caracteristic predominant a epidemiilor. Dup infec ia
uman iniial prin contactul cu un liliac infectat sau alt animal slbatic, de multe ori are loc
transmiterea interuman de la om la om.
Transmisia interuman este asociat n principal cu reutilizarea echipamentelor de
injectare (acelor de sering, seringilor) sau prin contact direct i neprotejat cu sngele,
secreiile sau excreiile. n Kikwitt, nici o persoan care tria sub acelai acoperi cu bolnavii,
dar neexpus la contactele menionate mai sus, nu a fost infectat. Riscul de transmitere
interuman este maxim n stadiile tardive ale afeciunii. La transmiterea interuman i
rspndirea infeciei contribuie i ritualurile de nmormntare din Africa Central i Africa de
Vest cnd decedatul este splat de membrii familiei, care apoi i cltesc minile, mpreun cu
toi participanii la ritual, membrii familiei i prietenii, ntr-un vas cu ap. Nu a fost
comunicat infectarea persoanelor care au avut contact cu pacientul n timpul perioadei de
incubaie.
Transmiterea aerogen posibil n laborator se poate face doar prin aerosolizarea
picturilor de snge i nu prin clasicele picturi Flgge, i nu joaca nici un rol n practic n
transmisia interuman.
Printre persoanele care lucreaz n contact cu maimuele sau porcii infectai
cu ebolavirusul Reston, au existat mai multe cazuri de infecii umane asimptomatice clinic.
Ebolavirusul Reston pare mai puin patogen pentru om dect alte specii de virus Ebola.
Totui, datele disponibile se refer numai pentru persoane adulte sntoase. Ar fi prematur s
se trag concluzii cu privire la efectele acestui virus asupra sntii n toate grupurile de

populaie, mai ales a pacienilor imunodeprimai, la cei cu probleme medicale preexistente, la

femeile gravide sau la copii. Vor fi necesare noii studii asupra ebolavirusului Reston nainte
de a se putea trage concluzii definitive cu privire la patogenitatea i virulena acestuia pentru
oameni.
Personalul medical poate fi frecvent infectat ca urmare a utilizrii acelor i seringilor
contaminate sau neutilizrii msurilor de barier, mnuilor, mtilor sau a dezinfectantelor.
Epidemia din 1976 din Maridi a fost dramatic amplificat de infeciile intraspitalice ti (213
cazuri), ca urmare a internrii unui pacient din Nazara. Nouzeci i trei de cazuri (46%) au
contractat boala n spital i 105 (52%) n comunitate. Din personalul medical de 230 oameni
al spitalului din Maridi, 72 s-au infectat, 41 decednd. Rata maxim a infec iilor a fost
asociat cu ngrijirea pacienilor cu hemoragii, care, n vrful epidemiei, ocupau majoritatea
saloanelor. n epidemia din septembrie i octombrie 1976 din nordul Zairului dup ce 13
oameni din personalul medical din 17 au contractat boala i 11 pacieni au decedat, spitalul a
fost nchis. Principalul factor de risc s-a dovedit a fi reutilizarea acelor nesterilizate, care erau
n cantitate insuficien. n 1995, n epidemia din Kikwit o echip de resuscitare a fost
infectat dup ce a tratat un pacient greit diagnosticat cu febr tifoid. S-a produs
transmiterea rapid la personalul sanitar neprotejat i la ali pacieni, din care muli au
reintrodus boala n comunitate.

4.4. Circulaia virusului Ebola ntre epidemii

Caracterizarea zonelor de circulaie ale filovirusurilor se bazeaz n principal pe
evenimentele epidemice. Aceste informaii sunt n mod inevitabil incomplete, deoarece ele nu
iau n consideraie circulaia natural a virusului printre speciile animale asimptomatic
infectate, nici circulaia virusului la persoanele care au numai forme clinice uoare care trec
neobservate deoarece sunt puin caracteristice. n consecin, au fost folosite mai multe
metode pentru a determina zonele de circulaie a virusurilor Ebola i Marburg n afar de
orice context epidemic. Metodele de teledetecie i calculele indicelui de vegeta ie ar putea
sugera indirect c ariile de circulaie sunt mult mai vaste dect cele delimitate de epidemii. n
mod similar, cercetarea anticorpilor specifici (IgG) n mijlocul diferitelor populaii umane a
permis identificarea cu mai mult precizie a zonelor de circulaie a acestor virusuri precum i
a factorilor de expunere la virusuri.

Un studiu serologic efectuat pe 4300 de persoane din 220 de sate rspndite n tot
Gabonul a artat o prevalen total de 15,3% a anticorpilor IgG anti-ZEBOV, fr nici o
diferen ntre satele epidemice i satele neepidemice. Cu toate acestea, valorile prevalenei
(morbiditii totale) a fost semnificativ mai mari n zonele de pdure (19,4%) dect n zonele
de cmpie (12,4%), de savane (10,5%) sau n zonele mltinoase (2,7%). Nici un alt factor de
risc nu a fost pus n eviden. Aceste rezultate corespund cu cele obinute n anii '80 n mai
multe ri din Africa Central, unde nici un caz clinic nu a fost nregistrat, cum ar fi Camerun
sau Republica Centrafrican, unde s-au gsit c valorile prevalenei variaz de la 2% la 21%.
Aceste rezultate, bazate pe o metod puin specific (imunofluorescena) au fost confirmate
ulterior prin ELISA, mai sensibil i mai specific. Un nivelul al prevalenei de 9,3% a fost
ntr-adevr gsit n mai multe sate indemne din Republica Democrat Congo n jurul ora ului
Kikwit dup epidemia din 1995 i niveluri de 13,2% au fost obinute n mai multe sate de
pigmei din Republica Centrafrican. Rezultatele obinute n Gabon au identificat prevalene
surprinztor de mari incompatibile cu epidemiologia virusului Ebola, caracterizate printr-un
numr redus de epidemii, epidemii de mic anvergur (mai puin de 100 de cazuri) i o
letalitate ridicat (80%), care las puini supravieuitori dup fiecare epidemie. Prin urmare,
aceste valori ridicate exclud ipoteza dup care aceste persoane IgG+ nu sunt dect nite
supravieuitori a unei infecii cu virusul Ebola i sugereaz din contra o expunere regulat la
virus i/sau contacte frecvente cu o surs (surse) animal (animale), gazde naturale sau
rezervoare poteniale, care probabil populeaz din abunden regiunile din Africa Central.
Aceste rezultate au permis emiterea mai multor ipoteze explicative: expunerea la virus
poate avea loc n timpul consumului de fructe contaminate cu saliva liliecilor (gazdele
naturale ale virusurilor Ebola i Marburg); puterea patogen (patogenitatea) real a
ebolavirusului Zair ar putea fi mult mai mic dect cea cunoscut pn n prezent (nivelul
letalitii de 80%); imunitatea dezvoltat de ctre aceste persoane IgG+ poate fi protectoare.
ntr-adevr, memoria imunitar indus la maimuele macac de vaccinurile candidate este
susinut de IgG+ specifice i de limfocitele T CD8+ secretoare de IFN- (interferon )
component al sistemului imunitar detectat la persoanele IgG+ recent identificate n Gabon.

5. Patogeneza i imunitatea
Infecia pe cale subcutanat a maimuelor (Cercopithecus aethiops) i babuinilor
(Papio hamadryas) a artat c principala int a virusului Ebola dup intrarea n organism
sunt celulele prezentatoare de antigen, celulele dendritice, macrofagele i monocitele. Aceste
celule, prezente n numr mare la nivelul pielii i mucoaselor, sunt infectate precoce i apoi
disemineaz virusul n interval de 3-4 zile n ntregul organism prin circulaia sanguin i
limfatic, virusul fiind detectat n parenchimul i spaiile interstiiale ale viscerelor. Are loc
infecia hepatocitelor, fibroblastelor i endoteliocitelor.
Viremia se observ la maimu la 24 h dup inoculare, iar la bolnavi dup 4-5 zile,
replicarea viral fiind prezent n toate organele ntr-un interval de 6-8 zile, cu producere
masiv de virus infectant i liz celular. n esuturi i organele interne virusul se multiplica
n organele limfoide secundare i n hepatocite, apoi, n faza terminal, infecteaz alte celule
cum ar fi celulele endoteliale i epiteliale i fibroblastele.
La babuin, examenele biochimice relev disfuncii hepatice i renale ncepnd din a 3a zi, datorit creterii permeabilitii vaselor.

5.1. Infecia letal

La pacieni i la animalele infectate experimental sau natural, cu o evoluie letal a
bolii, se constat o viremie nalt i rspunsuri imune absente. Infecia fatal provocat de
filovirusuri este caracterizat printr-o disfuncie a imunitii nnscute i o prbuire a
imunitii adaptive.
5.1.1. Disfuncia imunitii nnscute
n primul rnd, infecia monocitelor duce la hiperactivarea imun cu eliberare
excesiv de mediatori inflamatori i chemokine, ca IL-1, TNF, IL-6, IL-15, IL-16, IL-1RA,
sTNFR, IL-10, NO-, IL-8, GRO-, CCL3, CCL4, CXCL10, MCP-1 i eotaxin. Aceast
"furtun inflamatoare", deosebit de important n faza terminal a bolii, are o aciune nefast
pentru organism.
n al doilea rnd, unele proteine virale au un efect imunosupresor i sunt capabile s
neutralizeze imunitatea nnscut prin inhibarea aprrii antivirale a celulelor. Proteina viral
VP35 inhib sinteza de interferon IFN/ mpiedicnd activarea factorului de reglare al
interferonului IRF-3 i IRF-7 i interfereaz cu activarea dsARN-protein kinazei dependente

(PKR), iar proteinele virale VP30 i VP40 inhib "RNA silencing" (interferen a ARN). n
plus, proteina viral VP24 mpiedic acumularea nuclear a proteinei STAT1 fosforilate,
neutraliznd prin urmare rspunsul la interferonii IFN/ i IFN. Astfel, inhibarea sintezei
de interferon IFN de tip I pare a fi un element fundamental al virulen ei virusului Ebola. De
fapt, anumite mutaii ale genei care codific proteina VP35 au dus la atenuarea virulen ei
virusului Ebola in vitro i in vivo. La pacienii cu evoluie letal s-au observat creteri ale
interferonului IFN de peste 100 pg/ml. Aceasta ar contribui la sindromul hemoragic al
capilarelor, rash hemoragic i stare de oc nsoit de febr, polipnee, insuficien renal i
alterri ale sistemului nervos central.
5.1.2. Prbuirea imunitii adaptive
Forma fatal a infeciei cu filovirusuri este, de asemenea, caracterizat printr-o
prbuire a imunitii adaptive care se manifest printr-o depleie a celulelor limfoide din
ganglionii limfatici, splin i timus, apoptoz intravascular a limfocitelor T i B i celulelor
NK i absena produciei de anticorpi IgG specifici.
Limfocitele nu sunt infectate de virus i apoptoza rezult din interaciunile cu markerii
de suprafa (Fas/FasL, TNF/TRAIL) i/sau cu mediatorii solubili apoptogeni i/sau cu o
activitate superantigenic a anumitor proteine virale.
Colapsul imunitii adaptive poate, de asemenea, rezulta dintr-un defect al activrii i
maturrii celulelor dendritice infectate care vor fi deci incapabile de a ini ia rspunsuri
imune.
n absena rspunsurilor imune eficace, letalitatea mare de 50-90% se datoreaz
hemoragiilor ntinse i ocului consecutiv. Este probabil ca i sindromul de coagulare
intravascular s fie o cauz important, dar la om intervenia acestuia este controversat.
5.1.3. Hipercoagulabilitatea
Parametrii sistemului de coagulare sangvin relev fenomene similare sindromului de
coagulare diseminat intravascular: se constat o hipercoagulabilitate pn n ziua a 4-a
(indicele de trombin 148% i protrombin 156%), urmat de o hipocoagulabilitate naintea
decesului. Se constat diferene specifice n funcie de speciile de maimu e, la unele
observndu-se tromboze fibrinoase generalizate, pe cnd la babuini predomin hemoragiile.
Hemoragiile masive observate la om i la animalele de experien s-ar datora nu numai

leziunilor extensive ale endoteliilor, ci i hiperactivrii imune, cu interven ia supraproduciei

de interferon IFN care are originea n macrofagele / monocitele infectate.
TNF, NO- i ali compui vasoactivi favorizeaz o exsudare vascular prin creterea
permeabilitii endoteliale, reducerea tonusului vascular i prin alterarea funciilor celulelor
endoteliale.
Infectarea macrofagelor favorizeaz, de asemenea, coagulopatii, inducnd coagularea
intravascular diseminat prin intermediul unei expresii semnificative a factorului tisular
(TF).

5.2. Infecia neletal

Din contr, infecia neletal, ca i infecia asimptomatic, este asociat cu un rspuns
inflamator precoce i moderat i implic rspunsuri adaptative care au drept consecin
rspunsuri IgG i citotoxice specifice. Nu s-a observat nici un eveniment apoptogen al
celulelor sistemului imunitar.
Rspunsul umoral a fost studiat la animale i pacieni care au supravieuit bolii.
Anticorpii IgM au fost detectai la maimue (Macaca mulatta i Macaca fascicularis) la 6 zile
dup infecie, cu o persisten de pn la 400 zile. ntr-un studiu efectuat la 29 de
convalesceni care au supravieuit epidemiei din Kikwit-Congo din 1995 (315 cazuri cu 244
de decese) s-a constatat pe o perioad de supraveghere de 21 de luni c n cursul bolii,
anticorpii IgM au aprut la 2-9 zile de la debut i s-au meninut timp de 30-168 de zile, iar
anticorpii IgG au fost detectai la 6-18 zile, persistnd pn la sfritul perioadei de
supraveghere. Anticorpii IgG s-a dovedit c pot persista pe o durat de minimum 10 ani dup
mbolnvire. IgG au fost detectai n concentraii mici la unele persoane infectate n cursul
epidemiei de la Marburg din 1967 i s-au meninut peste 20 ani. Nu au fost eviden ia i
anticorpi de tip neutralizant, ci numai anticorpi fixatori de complement (titrurile fiind extrem
de mici) sau anticorpi evideniai prin tehnici imunoenzimatice sau prin imunofluorescen
indirect.
La convalescenii umani dup infecia cu virus Marburg sau Ebola, virusurile au fost
izolate 3-4 luni mai trziu n lichidul seminal sau, la un pacient cu uveit, n fluidul camerei
anterioare a ochiului. Nu au existat dovezi de persisten pe termen lung, laten sau afec iuni

degenerative tardive la numrul mic de cazuri observate sau la maimuele n curs de

vindecare.

6. Histopatologia
Exsudatele viscerale extinse, edemul pulmonar interstiial i disfunc ia tubular renal
ce apar consecutiv leziunilor endoteliale, ducnd la oc hipovolemic, sunt elemente ce
contribuie la deces. Pierderea acut i sever de lichid, acompaniat de hemoragii n esuturi
i tractul gastrointestinal este caracteristic i duce la deshidratare i perturbarea echilibrului
acido-bazic.
Leziunile histopatologice observate sunt asemntoare la animalele infectate
experimental i la oameni, caracterul lor predominant fiind acela de diatez hemoragic care
este extins la toate organele.Se observ necroze focale, diseminate n ficat, organele
limfatice, splin, rinichi, testicule i ovare. Caracteristice sunt necrozele hepatice, cele mai
afectate fiind celulele Kupffer, care conin nite incluzii virale eozinofile intracitoplasmatice.
n focarele de necroz sunt prezeni corpusculi Councilman i o infiltraie sczut de celule
inflamatoare. Ca rezultat al replicrii virusului apar necroze masive caracteristice ale
ganglionilor limfatici. Datorit permeabilitii vasculare crescute se observ numeroase
focare hemoragice n creier, leziuni ale tubulilor renali, pneumonie interstiial, edeme
tisulare. n vasele sangvine se constat trombusuri i depozite de fibrin. Leziunile de tip
inflamator n organe sunt minime.

7. Manifestri clinice
Virusul Ebola induce o viroz acut sever cu o evoluie rapid marcat de o febr
ridicat i o diatez hemoragic generalizat care survine n stadiu terminal, asociat cu o rat
a mortalitii care poate s se ridice pn la 90%.
Perioada de incubaie, adic timpul ntre momentul infectrii cu virus i debutul
primelor simptome, este de la 2 la 21 zile, n medie 4-12 zile, iar n cazul transmiterii prin ac
de sering, 5-7 zile. Nu se cunoate doza infectant.

Debutul este brusc, cu simptome nespecifice: febr mare, frison, cefalee (mai ales
cefaleea frontal sever), mialgii, anorexie, astenie intens i disconfort general.
Aceste semne prodromale nespecifice sunt apoi rapid urmate n urmtoarele 2-3 zile
de manifestri cutanate (exantemul cu o erupie cutanat eritematoas, maculopapular,
morbiliform sau veziculoas timp de 5-7 zile, cu descuamare la supravieuitori), simptome
digestive violente (dureri abdominale, grea, vome severe, diaree profuz), tulburri
respiratorii (faringit cu dureri n gt, tuse uscat, dureri toracice) i semne neurologice
(prostraie, anxietate, confuzie, pierderi de memorie, instabilitate, delir, convulsii,
tremurturi), indicnd o difuziune generalizat a virusului i o atingere multivisceral.
Semnele precoce includ i tahicardia i conjunctivita. Apare o insuficien renal i hepatic
care se exprim prin teste de laborator modificate (fr icter).
La gravide se produce avort n 66% dintre cazuri, iar la nou-nscuii mamelor bolnave
infecia este letal. Mortalitatea la gravide este 95,5%.
Manifestrile hemoragice cu sngerri pronunate interne i externe apar ntre zilele
cinci i apte (melena, hematemeza, hemoptizii, echimoze i peteii, hemoragii conjunctivale
cu congestie conjunctival, epistaxis, hemoragii necontrolabile la locurile de puncie venoas)
numai la aproximativ o treime din pacieni cu boala sever, de obicei n faza terminal a bolii
(vezi imaginile de pe sit-ul Illustrated lecture notes on Tropical Medicine). La necropsie n
acest caz se constat exsudate hemoragice viscerale.
n formele fatale, decesul survine de obicei ntre zilele 7-10 de la debut (limite 1-20
zile), prin oc, hipovolemie i hemoragii externe i interne severe extinse i generalizate.
n formele nefatale, simptomele se atenueaz rapid, la 7-10 zile de la debut, simultan
cu dispariia virusului din circulaia sangvin. Convalescena dup boal este n general
ndelungat (cteva sptmni sau luni) i dificil, nsoit de accese febrile episodice,
cderea abundent a prului timp de 3 luni, astenie extrem, anorexie, pierdere ponderal,
dureri abdominale, mialgii i artralgii, prostraie, amnezie, pierderea auzului dup 6 luni de la
episodul acut. Mialgiile i artropatiile sunt descrise i dup 21 de luni.
Pacienii atini de boal rmn contagioi, atta timp ct virusul este prezent n
sngele i secreiile lor. Nu au fost comunicate infectri ale persoanelor care au avut contact
cu pacientul n timpul perioadei de incubaie.

Virusul Ebola persist la pacienii n convalescen. ARN viral al virusului Ebola a

fost izolat din prelevatele vaginale, rectale i conjunctivale la interval de 33 de zile. n
lichidele seminale prezena ARN virusului Ebola s-a demonstrat n diverse studii, dup 61, 82
i 91 de zile de la mbolnvire. Semne de orhit sau uveit, legate de persisten a virusului n
locurile protejate imunologic, sunt uneori observate timp de cteva sptmni dup dispariia
simptomelor.

8. Date clinice i de laborator

8.1. Analizele de laborator de baz
Analizele de laborator efectuate la animalele infectate experimental nu prezint
modificri specifice ale parametrilor sanguini.
Examenele de laborator arat c infecia cu virusul Ebola sau virusul Marburg este
adesea asociat cu o leucopenie precoce i uoar, limfopenie precoce, urmat de o
neutrofilie important i o trombocitopenie marcat (<100.000 plachete/mm3).
Anomaliile de agregare plachetar ca prelungirea timpului de protrombin i cre terea
derivailor de fibrin n snge sunt indicatori ai coagulrii intravasculare diseminate.
Nivelele serice ale transaminazelor hepatice, aspartat aminotransferaza (AST) i
alanin aminotransferaza (ALT), sunt crescute i caracterizate de un raport AST/ALT crescut,
caracteristic (10-3 : 1). Se constat o bilirubinemie peste normal, fosfataza alcalin poate fi
crescut sau normal, ca i -glutamiltransferaza. n paralel exist o hiperproteinemie,
proteinurie i o hematurie.

9. Diagnostic
9.1. Diagnostic pozitiv
Diagnosticul de infecie cu virus Ebola trebuie luat n considerare la pacienii care
prezint o afeciune acut febril i care au cltorit n regiuni rurale epidemice cunoscute sau
regiuni endemice suspectate din Africa subsaharian, mai ales dac sunt prezente manifestri
hemoragice. Confirmarea suspiciunii de febr hemoragic Ebola este posibil prin
identificarea rapid a antigenelor virale sau prin izolarea virusului pe culturi de celule.
Diagnosticul indirect, serologic, este posibil prin evidenierea anticorpilor IgM i ulterior a
anticorpilor IgG.

9.2. Definiia de caz de febr hemoragic Ebola

Depistarea precoce este primordial pentru controlul infeciei. Personalul medical
trebuie s fie atent i s evalueze toi pacienii suspectai de a fi contractat febra hemoragic
Ebola (FHE).

9.3. Diagnostic de laborator

Toate esuturile, sngele i serul recoltate n fazele acute ale bolii con in mari cantit i
infectante de virus. Trebuie avut o grij deosebit la recoltarea sau manipularea probelor de
snge, ntruct virusul este stabil timp ndelungat la temperatura camerei. Datorit severit ii
extreme a bolii i riscului de transmitere a bolii prin intermediul sngelui se impune
manipularea probelor patologice infecioase i efectuarea diagnosticului doar n laboratoare
cu nivel de siguran microbiologic 4 (biohazard de nivel 4), ce dispun de dotare tehnic
corespunztoare. Toate acele i seringile trebuie aruncate n containere cu capac, rezistente la
perforare, i incinerate.
9.3.1. Produse patologice recoltate
Se vor recolta urmtoarele produse patologice:

n stadiul acut febril se recolteaz ser, plasm heparinizat, snge, splturi nazofaringiene, urin, efuziuni lichidiene acumulate n esuturi moi, sufuziuni sangvine din
esuturile moi, biopsii cutanate. n cazul febrei hemoragic Ebola produsul patologic

optim pentru diagnostic este sngele recoltat n timpul puseelor de febr. Probele de
snge trebuie recoltate fr anticoagulant.

n convalescen se recolteaz lichid seminal, secreii oculare, lichid din camera

anterioar a ochiului (conjunctivita apare frecvent n a 2-a sptmn de boal).

Postmortem se recolteaz pentru izolarea virusului fragmente de organe pentru

biopsie din splin, ganglioni limfatici, ficat, rinichi. La autopsie, produsele patologice
trebuie recoltate doar de personalul medical experimentat i instruit n privina bolilor
infecioase cu risc maxim de transmitere.
Dup recoltare, produsele patologice (sngele, serul etc.) se transfer n pungi de

plastic impermeabile perfect nchise cu inscripionri clare i se pun n containere rezistente,

care nu permit scurgeri n afar, pentru transportul la un laborator de maxim securitate. Se
va avea grij ca exteriorul recipientelor s nu fie contaminat. Prelevatele vor fi conservate
prin ngheare n azot lichid sau zpad carbonic la temperatura de -40C. Transportul
trebuie efectuat n condiii de securitate biologic, conform regulamentelor de transport
internaionale sau naionale, dup consultarea cu oricare din laboratoarele de referin de
maxim securitate.
9.3.2. Examenul direct

Examinare direct la microscopul electronic. n epidemiile produse de filoviride,

examinare direct la microscopul electronic s-a dovedit util pentru identificarea
virusurilor Marburg sau Ebola n fluidele i esuturile organismului i n supernatantul
culturilor

celulare.

timpul

epizootiei

cu

virus

Reston,

microscopia

imunoelectronic, utilizat n asociere cu microscopia de transmisie standard (TEM) a

celulelor infectate, a furnizat rezultate concludente. Cu toate acestea, tehnica nu poate
diferenia speciile de filoviride. Virionii sunt vizualizai la microscopul electronic prin
coloraie negativ a probelor de snge heparinizat i urin provenite de la bolnavi sau
a lichidelor de culturi infectate i pe seciuni ultrasubiri de organe. Morfologia
particulelor virale este caracteristic pentru diagnosticul de filovirus. Prin microscopie
electronic a fost demonstrat prezena virusurilor Marburg sau Ebola n esuturile
maimuelor, att n epidemii, ct i experimental.

Antigenele virale. n izbucnirile epidemice se utilizeaz diagnosticul direct rapid prin

evidenierea antigenelor virale. Antigenele virale sunt detectate pe amprente de snge,

sediment urinar sau amprente de organe prin imunofluorescen direct sau pe seciuni
de esuturi bioptice fixate cu formol, prin imunohistochimie cu metode de colorare cu
streptavidin-biotin i anticorpi monoclonali. Anticorpii monoclonali de oarece, cu
care s-a cptuit o suprafa solid de plastic, capteaz antigenul Ebola prezent n
probele de esut sau snge. Rezultate foarte bune s-au obinut prin aplicarea acestor
metode la biopsii de tegument fixate cu formol. Preparatele de tegument relev leziuni
specifice histopatologice (edem dermic, extravazare eritrocitar, necroza endoteliilor
etc.) i au avantajul c, prin fixare, infeciozitatea este anihilat.

Genomul viral. Genomul viral este detectat n esuturi infectate prin hibridizare in
situ, cu sonde avnd secvene ale genelor NP, GP, VP30 i VP35 (aceast tehnica nu
este aplicat n mod curent) sau prin polimerizare n lan cu revers-transcriptaz (RTPCR) pe probe de snge de la bolnav, care este la fel de sensibil ca i izolarea
virusului, cu avantajul confirmrii rapide a diagnosticului. Utilizarea sondelor cu
reactivitate ncruciat i a celor cu specificitate de specie viral pentru reac ia RTPCR s-a dovedit deosebit de promitoare ca instrument de diagnostic precoce al
infeciilor cu filovirusuri.

9.3.3. Culturi de celule

Virusul Ebola poate fi izolat cu uurin prin inocularea probelor de snge sau ser
recoltate n fazele acute ale bolii, proaspete sau depozitate (- 70C), pe culturi de celule Vero
de esut renal de maimu. Liniile de celule Vero (mai ales clona E6) i MA-104 s-au dovedit
cele mai sensibile i utile tipuri celulare pentru propagarea i testarea izolatelor proaspete i
pentru pasajul n laborator al speciilor de filovirusuri. Linia de celule Vero este sensibil att
pentru virusul Marburg, ct i pentru virusul Ebola, iar linia MA-104, de rinichi fetal de
maimu Rhesus, ca i linia celular SW-13, pentru ebolavirusulul Sudan i ebolavirusulul
Zair. Mai puin susceptibile sunt linia BHK-21 i culturile diploide MRC5.
Efectul citopatic apare de obicei la intervale de 2-7 zile, dar n majoritatea cazurilor
sunt necesare pentru exprimarea acestuia pasaje oarbe. Izolarea primar prin utilizarea
culturilor celulare produce rareori un efect citopatic specific, astfel nct dovezile de infec ie
se bazeaz pe apariia incluziilor citoplasmatice, evideniate prin imunofluorescen la 2-5
zile dup inoculare, utiliznd antiser policlonal sau anticorpi monoclonali specifici pentru
specia viral. Antigenele virale se identific prin imunofluorescen direct n monostraturile

celulare, iar n lichidele de cultur prin ELISA de captur sau RT-PCR; mai rar prin RFC, iar
virusul prin microscopie electronic.
Unele specii virale, cum ar fi ebolavirusulul Sudan, sunt dificil de cultivat pe culturi
primare, reuita fiind ameliorat prin inocularea intraperitoneal la cobaii tineri. Cobaiul
inoculat intraperitoneal rspunde printr-o reacie febril, iar dup treceri repetate dezvolt
boala cu sfrit letal. Virusul se evideniaz n sngele i organele cobaiului prin microscopie
electronic i prezen de anticorpi. oarecele nou-nscut inoculat intracerebral este
susceptibil numai la infecia cu ebolavirusulul Zair.
Inocularea animalelor n scop diagnostic se va face numai dac izolarea n culturi nu
este posibil i dac exist condiii corespunztoare de pstrare a animalelor infectate, fr
riscuri ulterioare de contaminare.
9.3.4. Diagnostic serologic
Pentru efectuarea testelor seroimunologice, serul poate fi manipulat n siguran dup
inactivare prin iradiere sau nclzire la 60C timp de 30 minute. Anticorpii sunt absen i n
cazurile severe decedate rapid, astfel nct diagnosticul serologic este utilizat ca test primar
sau n convalescen. La pacienii care supravieuiesc mbolnvirii se constat prezena
anticorpilor, evideniat prin:

Imunofluorescen (IF) - un test diagnostic fundamental pentru infeciile cu

filovirusuri i singurul unanim acceptat pentru diagnosticul infeciei umane cu virus
Ebola. Se folosete imunofluorescena indirect, considerat test de elec ie, ncepnd
din a 10-a zi de la debut. Infecia recent se atest prin: demonstrarea cre terii
titrurilor pe specimene duble de ser recoltate la debut i n convalescen sau pe o
singur prob de ser avnd anticorpi IgM specifici cu titru mai mare de 1/256. Cnd
se utilizeaz imunofluorescena, problema reaciilor fals pozitive cu titru sczut face
dificil interpretarea testului atunci cnd se ntreprind anchete seroepidemiologice ale
primatelor i oamenilor. Imunofluorescena indirect, dei folosit n mod curent,
ridic probleme de reproductibilitate privind interpretarea subiectiv a titrului limit
pozitiv.

ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) se utilizeaz pentru detectarea

anticorpilor IgM i IgG i are o specificitate nalt i se preteaz la aplicare n
investigaii serologice rapide din izbucniri epidemice. Creterea titrului anticorpilor n

serurile pereche sau un titru nalt al anticorpilor IgG (> 64) i prezen a anticorpilor tip
IgM, mpreun cu simptome clinice compatibile cu o febr hemoragic, susin
diagnosticul.

Western-blot, care relev benzi pozitive pentru proteinele virale NP, VP30 i VP24,
este considerat test de confirmare a diagnosticului i nu este folosit de rutin.

RIA (radioimmunoassay) este, de asemenea, un test de confirmare, dar nu se aplic n

mod curent.

9.3.5. Testele diagnostice rapide

ntreruperea lanurilor de transmitere a virusului Ebola este foarte mult tributar de
sprijinul laboratoarelor. Acest sprijin este necesar pentru a confirma sau infirma cazurile
suspecte, a ghida triajul cazurilor i a deciziilor clinice, a ajuta investigaiile contactailor i a
facilita

depistarea

precoce

persoanelor

cu

antecedente

de

expunere.

Obiectivele OMS pentru depistarea energic a cazurilor i izolarea riguroas a lor depinde de
asemenea de suportul laboratoarelor. Eforturile de a stpni epidemiile de Ebola din Africa de
Vest sunt n prezent frnate de testele diagnostice complexe, lente i greoaie, sursa unui
numr de probleme logistice suplimentare, inclusiv exigenele unei securiti biologice
maxime n laboratoare i a unui personal competent pentru a folosi utilajele sofisticate din
laborator. Testele moleculare standard utilizate n prezent n laboratoarele mobile i alte
laboratoare pentru identificarea virusurilor Ebola includ testul RT-PCR (reverse-transcriptase
polymerase chain reaction, reacia de polimerizarea n lan cu revers-transcriptaz). Acest test
care folosete proceduri laborioase, dar furnizeaz rezultate extrem de precise atunci cnd
este efectuat de un personal calificat. Fiecare test necesit un tub plin cu snge i 2-6 ore
pentru executare i cost aproximativ 100 dolari. Aceste cerine sunt dificil de ndeplinit n
unele ri din Africa de Vest ale cror resurse sunt foarte restrnse i limiteaz sever
efectuarea acestor analize.
Timpul pierdut pentru transportul eantioanelor provenite de la pacieni pe drumurile
proaste permit accesul la un numr mic de laboratoare disponibile n Africa de Vest i n
consecin pacienii i familiile lor trebuie s atepte cu nelinite cteva zile pentru a cunoate
rezultatele testelor. Aceast pierdere de timp nseamn c persoanele infectate vor rmne n
comunitate, cu un risc crescut de a transmite virusul la alte persoane, fr a fi con tiente de
acest fapt. n plus, n lipsa unui suport de laborator analitic rapid, persoanele purttoare a

altor boli infecioase curente, cum ar fi malaria i febra denga, care au primele simptome
similare cu cele din febra hemoragic Ebola, pot fi izolate n mod nejustificat ntr-un centru
de "tranzit" pentru Ebola ca o msur de precauie. Dac ei nu sunt atini de febra hemoragic
Ebola atunci cnd ei intr n acest centru, pot, din nefericire, s-o contracteaz n interiorul
acestor centre. Mai mult, pacienii nediagnosticai i fr asisten medical reprezint un risc
serios pentru familia lor i comunitate i contribuie la schema de transmitere ciclic a
infeciei observat n prezent, n care cazurile ncep s scad dac msurile de lupt au efect,
pentru a crete din nou dac apar noi lanuri de transmitere a infeciei.
OMS a stabilit un profil detaliat al testului diagnostic "ideal", care trebuie s fie rapid,
sensibil, sigur i simplu. Testul ideal trebuie s fie potrivit pentru utilizarea n centrele de
sntate periferice, lipsite de o infrastructur de laborator. Procedurile testrii trebuie s aib
mai puin de 3 etape, s ofere rezultate n mai puin de 30 de minute i s nu impun exigen e
n ceea ce privete securitatea biologic dincolo de purtarea echipamentului de protec ie
individual. Cerinele operaionale suplimentare impun o facilitate a conservrii i
reconstituirii reactivilor i o perioad a formrii a personalului care s nu depeasc o
jumtate de zi. Testul ideal i echipamentul portabil asociat nu trebuie s necesite alimentare
cu energie electric i ntreinere.
aisprezece dosare documentare pentru testele diagnostice rapide au fost primite de
ctre OMS la mijlocul lunii octombrie 2014 pentru evaluare. Ele includ kituri de diagnostic
de tipul RT-PCR clasice, sisteme de PCR automatizate de un computer de birou cu procesarea
integrat a eantioanelor i teste noi capabile s detecteze o infecie cu virusul Ebola n timp
de cteva minute pe un eantion de snge prelevat prin n eparea degetului n locul unei
eprubete pline cu snge.
Pe 20 februarie 2015 OMS a aprobat primul test pentru depistarea rapid a infeciei cu
virusul Ebola - ReEBOV Antigen Rapid Test.

Testul a fost realizat de ctre o companie

american, Corgenix Medical Corp. Acest test este mai puin precis dect metodele clasice de
depistare a virusului Ebola, ns este mult mai uor de utilizat, nu necesit alimentare cu
curent electric, poate oferi rezultatul n mai puin de 15 minute, necesit o mostr minim de
snge aplicat pe o bandelet de hrtie special (dipstick) i poate identifica aproximativ 92%
dintre pacienii infectai cu Ebola i 85% dintre cei care nu aveau acest virus n snge. Testul
rapid cu antigen ReEBOV se efectueaz ca un test imunologic cu bandelet (dipstick). El
detecteaz prezena antigenului viral EBOV VP40 nativ (adic a proteinei matriceal VP40)

n serul, plasma sau sngele integral a pacienilor suspectai de a fi contractat febra

hemoragic Ebola cu ajutorul anticorpilor specifici EBOV VP40, care sunt nite anticorpi
policlonali caprini purificai prin afinitate, impregnai o pe membran de nitroceluloz i
conjugai cu nanoparticule de aur.

10. Diagnostic diferenial

Afeciunile produse de virusurile Marburg (febra hemoragic Marburg) i Ebola
(febra hemoragic Ebola) nu pot fi practic difereniate clinic.
ntruct diagnosticul diferenial n faza acut iniial este dificil, trebuie luate n
considerare alte cauze. Cele mai frecvente cauze de infecii evolund ca o afec iune febril
acut, sever, suntmalaria i febra tifoid. n consecin, diagnosticul diferenial i
tratamentul precoce nu trebuie amnate. Cauzele alternative includ afec iuni bacteriene, cum
ar

fi

septicemia

meningococic

(meningita

meningococic),

infecia

cu Yersinia

pestis (pesta), holera, shigeloza, leptospiroza, antraxul, febra recurent, rickettsiozele, cum ar
fi tifosul exantematic i tifosul murin, i afeciuni virale, ca febra pappataci, febra
galben, febra de Chikungunya, febra Vii de Rift, infeciile cu hantavirusuri, febra
hemoragic de Crimeea-Congo, hepatita.

11. Prognostic
Prognosticul pentru pacienii cu infecia cu virusul Ebola este nefavorabil. Cei care
supravieuiesc timp de 2 sptmni au o convalescen ndelungat (cteva sptmni sau
luni) i dificil.
Cu excepia speciei Reston, virusul Ebola este asociat cu o morbiditate i mortalitate foarte
mare printre pacienii care prezint boal clinic, dei acestea variaz n funcie de specia
virusului Ebola. Cea mai letal specie a virusului Ebola este ebolavirusul Zair, care are o
mortalitate de pn la 90%. Ebolavirusul Sudan are, de asemenea, o mortalitate ridicat,
variind de la 41% la 65%.

12. Tratament
Tratamentul se limiteaz la tratamentul suportiv care const n primul rnd n
meninerea constant a volemiei, echilibrului electrolitic, combaterea hemoragiilor, a
insuficienei renale, edemului cerebral, suprainfeciilor bacteriene, hipoxiei i a ocului.
Administrarea unui factor VIIa/TF inhibitor al cii TF (= factor tisular), sau de
protein C activat recombinant permite activarea cii anticoagulante a proteinei C naturale,
sau administrarea de mici catene ARN interferente sau de oligonucleotide antisens pentru a
inhiba replicarea viral, au avut rezultate promitoare.
Nu exist tratament omologat antiviral specific mpotriva acestei boli. Ribavirin nu
are efect asupra filovirusurilor, iar administrarea IFN (interferonul uman) nu a dat rezultate
consistente nici n boala experimental a maimuelor, nici la pacieni.

12.1. Medicamente experimentale

Febra hemoragic Ebola nu a fost niciodat o prioritate pn n prezent pentru
companiile farmaceutice, deoarece aceast boal, foarte letal, era rar i se limita la rile
srace din Africa. "Probabil c nu este un lucru foarte greu fabricarea unui vaccin mpotriva
febrei hemoragice Ebola, dar nu exist nici un interes comercial, deoarece guvernele nu i
pot permite s le cumpere", declara profesorul Didier Raoult, specialist n boli infecioase
emergente de la Facultatea de Medicina din Marsilia.
Elaborarea unor tratamente eficiente noi pentru febra hemoragic Ebola este n prezent
obiectul unor cercetri intense, motivate n special de gravitatea bolii, mortalitatea extrem de
nalt, extinderea rapid a epidemiei din 2014 i riscurile utilizrii virusului Ebola ca arm
biologic sau n bioterorism. Moleculele candidate pentru tratament sunt variate i adesea
promitoare pe modelele animale, dar sunt nc n stadiul experimental i cteva dintre ele au
ajuns n stadiul de studii clinice pe voluntari. Dificultatea major, n afar de crearea de noi
tratamente i protecia lor care trebuie fie eficient, fr efecte secundare inacceptabile,
const n necesitatea de a dezvolta molecule care pot fi transportate i stocate n zonele
epidemice, mai ales n Africa ecuatorial; aceste dificulti se refer n special la tratamentele
elaborate pe baz de acizi nucleici, ca ARN interfereni mici, care sunt molecule instabile.
Mai multe medicamente experimentale pot fi aprobate pentru tratarea febrei hemoragice
Ebola la om.

Seroterapia const n transfuziile de ser, care conine IgG anti-EBOV, pacienilor cu

febra hemoragic Ebola luat de la persoanele vindecate de aceast boal. Avnd n
vedere caracterul urgent al situaiei din Africa i a lipsei unui tratament eficient
mpotriva febrei hemoragice Ebola, Organizaia Mondial a Sntii (OMS) a
ncurajat seroterapia i transfuziile de snge integral pe 5 septembrie 2014 la o edin
din Geneva la care au participat aproape 200 de experi. ntre 6 i 22 iunie 1995, 8
pacieni din Kikwit, Republica Democrat Congo, care erau bolnavi de febr
hemoragic Ebola, au fost transfuzai cu snge donat de 5 pacieni convalescen i.
Sngele donat coninea anticorpi IgG anti-EBOV, dar nici un antigen EBOV.
Antigenele EBOV au fost detectate la toi primitorii de transfuzii sanguine chiar
nainte de transfuzie. Cei 8 pacieni transfuzai aveau simptome clinice similare cu
cele ale altor pacieni bolnavi de febr hemoragic Ebola. Toi erau n stare grav cu
astenie sever, 4 prezentau manifestri hemoragice, iar 2 au devenit comatoi n faza
avansat a bolii. Din cei 8 pacieni transfuzai 7 s-au nsntoit doar un singur
pacient a decedat (12,5%); acest numr este semnificativ mai mic fa de nivelul
mortalitii globale (80%) pentru epidemia Ebola din Kikwit i fa de nivelul
mortalitii n alte epidemii Ebola. Cauza acestui nivel de mortalitate sczut rmne
de explicat. Pacienii transfuzai nu au primit ngrijiri mai bune dect cele din faza
iniial a epidemiei. Din pcate, ipoteza beneficiului seroterapiei nu a fost confirmat
prin studii ulterioare. Cnd a fost testat aceast ipotez ntr-un laborator, transfuznd
sngele animalelor convalescente animalelor infectate cu virusul Ebola, toate
animalele transfuzate au murit.

Medicul american Rick Sacra, 51 de ani, infectat n

2014 cu virusul Ebola n Liberia, unde lucra n cadrul unei organizaii caritative
cretine, a fost internat la un spital din Omaha n Nebraska (SUA) i s-a vindecat.
Vindecarea s-ar putea explica prin dou transfuzii de plasm sanguin de la colegul
su de la organizaia caritativ "Samaritan's Purse", doctorul Kent Brantly, care s-a
vindecat de infecie. Brantly s-a contaminat tot n Liberia, fiind transferat n Statele
Unite. n afara transfuziilor de snge, Rick Sacra a fost supus i unui tratament
experimental cu TKM-Ebola.

Un studiu din 1998 a artat c analogii adenozinei carbociclice (3-deazaadenozina

carbociclic), funcioneaz ca inhibitori al SAH (S-adenozil-homocisteinhidrolaza sau
adenozilhomocisteinaza) i au fost utilizai n tratarea infeciei experimentale cu doze

letale de virus Ebola la oarece, cu rezultate promitoare: supravieuire pn la 90%

cnd tratamentul a nceput dup 2 zile de la infecie i de 40%, dup 3 zile.

Dou studii publicate n primvara anului 2014 au artat c antiviralul favipiravir (T705) (comercializat ca Avigan), un inhibitor al ARN-polimerazei ARN-dependente,
utilizat experimental mpotriva virusurilor ARN (inclusiv virusul gripal), a fost
eficace la oarecii infectai cu virusul Ebola, chiar dac a fost administrat la ase zile
dup expunerea la virus. Favipiravirul a fost produs de compania japonez Toyama
Chemical, o filial a Fujifilm cu sediul la Tokyo, i este un tratament posibil al febrei
hemoragice Ebola din Africa de Vest.

Brincidofovirul (CMX001) este un antiviral oral dezvoltat de Chimerix, o companie

biofarmaceutic american. El este un analog nucleotidic cu un spectru antiviral
larg in vitro mpotriva a cinci familii de virusuri ADN care afecteaz oamenii, inclusiv
cei din familia herpesviride i adenoviride. Acest tratament este n studiu clinic de
faza

ca

antiviral

mpotriva

adenovirusurilor

citomegalovirusurilor.

Brincidofovirul a fost testat numai n laborator mpotriva virusului Ebola. El

blocheaz virusul mpiedicndu-l s se nmuleasc. Thomas Eric Duncan, primul
pacient diagnosticat cu Ebola n SUA, a fost tratat cu brincidofovir, ns el a murit pe
8 octombrie 2014, la un spital din Dallas.

La studiul brincidofovirului particip i

Diana Florescu, specialist romn n boli infecioase de la Nebraska Medical Center,

SUA.

BCX4430 este un nucleozid, produs de BioCryst Pharmaceuticals, cu un spectru larg

de activiti antivirale (inclusiv virusul Ebola) care acioneaz ca un inhibitor al ARN
polimerazei ARN-dependente (sau ARN replicazei) - o enzim indispensabil pentru
replicarea virusurilor ARN cu polaritate negativ fr etapa ADN. Aceasta previne
astfel transcripia i replicarea genomului viral. Acest tratament a beneficiat de o
finanare de 22 milioane dolari de la Institutul Naional de Alergie i Boli Infecioase
(NIAID) n septembrie 2013, reevaluat la 26 de milioane n septembrie 2014. Testele
pe animale au artat o rat de supravieuire de 83-100% la oareci. Testrile clinice de
faza 1 pe oameni sunt planificate pentru sfritul anului 2014/nceputul anului 2015.
BioCryst Pharmaceuticals este o companie cu sediul n Durham, Carolina de Nord,
specializat n producia de medicamente pentru tratamentul bolilor orfane, bolilor
autoimune i medicamentelor antivirale. Ea este mai cunoscut pentru dezvoltarea

unui antiviral, Peramivir, autorizat de FDA pentru utilizare de urgen mpotriva

virusului gripal H1N1.

ZMapp, un amestec de trei anticorpi monoclonali anti-Ebola umanizai (anticorpii

c13C6 + c2G4 + c4G7) produi n Nicotiana benthamiana (o specie de tutun) a fost
testat n 2012, cu rezultate bune pe maimuele rhesus ( Macaca mulatta).

ZMapp,

produs de companie californian Mapp BioPharmaceutical cu sediul n San Diego, a

fost administrat pentru prima dat pe 31 iulie 2014 n Liberia unui om, Kent Brantly,
un medic american care lucra pentru o organizaie de caritate cretin Samaritan's
Purse, la care au aprut la 22 iulie simptoamele febrei hemoragice Ebola; colega lui
Nancy Writebol contaminat, de asemenea, cu virusul Ebola a primit dou doze de
acest tratament experimental pe 3 i 4 august. Cei doi americani au fost repatriai n
urmtoarele zile la Spitalul Universitar Emory din Atlanta pentru a fi supraveghea i n
colaborare cu CDC. Ambii pacieni americani tratai cu ZMapp au prsit spitalul
vindecai pe 21 august. Cu toate acestea, preotul spaniol Miguel Pajares, n vrst de
75 de ani, care a primit, de asemenea, acest tratament experimental, a murit pe 12
august n spitalul Carlos III din Madrid, unde a fost repatriat cu cinci zile mai
devreme din Liberia, o ar n care el a contractat boala efectund o misiune din partea
unei ONG. Ca urmare a mediatizrii internaionale oferit de acest tratament, s-au
ridicat voci pentru a impune utilizarea acestui medicament pe o scar mai
mare, constrngnd autoritile americane pentru a permite utilizarea sa n Liberia de
la 11 august, cu toate c Barack Obama a spus cu patru zile mai nainte c aceast
opiune ar fi prematur. OMS a autorizat pe 12 august utilizarea medicamentelor
experimentale n epidemia de Ebola din 2014 numai n anumite condiii, deschiznd
calea pentru concuren ntre companiile farmaceutice pe o pia nou.

TKM-Ebola este un ARN interferent mic (ARNsi) care inhib expresia genelor virale
L (ARN-polimeraza), VP24 i VP35 ale virusului Ebola Zair. n ianuarie 2014,
Tekmira a inceput un studiu clinic de faza I a TKM-Ebola pentru a evalua siguran a
lui la persoanele sntoase. FDA a oprit studiul clinic n iulie 2014, pentru a evalua
rezultatele, dup ce unii voluntari au avut simptome asemanatoare gripei. Pe 7 august
FDA a anulat parial ntreruperea testrilor clinice, permind utilizarea sa eventual
ca tratament n epidemia din Africa de Vest.

AVI-7537, AVI-6002 i AVI-6003 produse

de

Sarepta

Therapeutics,

sunt oligonucleotide morfolino fosforodiamidate (nite oligonucleotide antisens) cu

sarcini pozitive (PMOplus) care se leag de ARNm-ul viral pentru a inhiba sinteza
proteinelor virale i astfel ntrerup replicarea viral. Testele pe animale au aratat un
nivelul ridicat de supravieuire ntre 60% i 80% la primate. 20-25 de doze vor fi
disponibile la mijlocul lunii octombrie 2014 pentru a fi eventual testate pe pacien ii
infectai. O producie de 100 de doze este prevzut pentru nceputul anului 2015.
Sarepta Therapeutics este o companie cu sediul n Cambridge. n 2010, un contract de
291 milioane dolari a fost alocat de ctre Pentagon pentru dezvoltarea unor tratamente
n lupta mpotriva virusilor Marburg i Ebola. Cu toate acestea, programul a fost oprit
n 2012 din cauza restriciilor bugetare. Compania a primit doar 80 milioane de dolari,
i a fost nevoit s anuleze un studiu clinic pentru a testa inocuitatea, tolerabilitatea i
farmacocinetica medicamentului AVI-7537 pe pacienii sntoi care au fost
programate pentru august 2012.

Alte medicamente care avut o activitate promitoare mpotriva virusului Ebola in

vitro sau la oarecii infectai cu virusul Ebola, dar pentru care sunt necesare date
suplimentare nainte de a trece la studiile clinice, includ:

Blocante ale canalelor ionice (amiodarona, dronedarona i verapamil) inhib intrarea

virusului Ebola n celul.

Modulatori ai receptorilor estrogenici (clomifenul i toremifenul), inhib intrarea

virusului Ebola n celul la oareci infectai.

Clorochina este un medicament antimalaric care poate inhiba intrarea virusului Ebola
n celule gazd.

Inhibitorii protein kinazei (erlotinib, sunitinib), azitromicina, sertralina.

12.2. Mutaiile i rezistena la tratament

Impactul mutaiile genomice ale virusului Ebola asupra eficienei tratamentelor
experimentale ce conin secvenele virusului Ebola a fost evaluat ntr-un studiu recent
publicat de cercettori de la Harvard, Maryland i MIT n mBio, la 20 ianuarie 2015. ARN-ul
interferent mic (SiARN) i oligomerii morfolino-fosforodiamidai (OMF) intesc transcrierea

genelor L, VP24 i/sau V35 ale genomului EBOV, iar imunoterapia pasiv bazat pe anticorpi
sau pe un cocktail de anticorpi (ZMapp) au ca inta epitopii EBOV. Ei inhib pe termen scurt
replicarea virusului: SiARN intete transcrierile virale pentru degradare, OMF blocheaz
translarea, iar imunoterapie pasiv neutralizeaz virusul, permind gazdei s produc un
rspuns imun eficient mpotriva patogenului viral. Zece mutaii ale virusului Ebola au
modificat secvena siturilor de legare a anticorpilor monoclonali: (MAb) 13F6, MAb 1H3,
MAb 6D8, MAb 13C6 si a intelor SiARN EK-1, VP24 i VP35. Unele muta ii pot avea un
impact negativ asupra eficienei agenilor terapeutici experimentali. Siturile de legare pentru
agenii terapeutici experimentali bazai pe SiARN i OMF au fost create cu ajutorul unor
secvene virale derivate din tulpina Ebolavirusului Zair (EBOV) care a cauzat epidemia de
Ebola din Zair (Congo) n 1976 . De atunci virusul Ebola s-a schimbat i continu s se
schimbe. Anticorpii monoclonali folosii pentru imunoterapia pasiv din ZMapp au fost crea i
cu ajutorul glicoproteinei tulpinii EBOV care a produs epidemia de Ebola din Kikwit n 1995.
Virusul utilizat pentru testarea eficienei tratamentelor n studiile postexpunere, a fost cel care
a provocat epidemia din Kikwit. Epidemia de febr hemoragic Ebola din Africa de Vest din
2014-2015 a fost provocat de tulpina Makona a virusului Ebola (EBOV/Mak). ntre tulpina
actual Makona a virusului Ebola i cea din Kikwit au fost identificate 640 de polimorfisme
uninucleotidice. Patru mutaii au fost localizate n regiunea de legare a agenilor terapeutici
experimentali siRNA sau OMF, iar 21 mutaii induc schimbri nonsinonimice n epitopii
recunoscui de anticorpii monoclonali din cocktailurile de imunoterapie pasiv (ZMapp).
Niciunul dintre polimorfismele uninucleotidice descoperite nu a fost asociat cu rezisten a
virusului Ebola la tratament. S-a demonstrat c 18 dintre modificri sunt tolerate de cocktailul
ZMapp, care are o afinitate de legare crescut fa de secven a glicoproteinei tulpinii
Makona, ceea ce minimizeaz potenialul impact al mutaiilor.

13. Prevenie
13.1. Msuri generale
13.1.1. Controlul virusului Reston la animalele
Nu exist un vaccin veterinar contra acestui virus. Curenia i dezinfectarea sistematic a
fermelor de porci i maimue (cu hipoclorit de sodiu sau al i detergeni) trebuie s fie
eficiente pentru inactivarea virusului. n caz de suspiciune a unui focar, localurile trebuie

instituit imediat carantin. Sacrificarea animalelor infectate, cu o supraveghere riguroas a

nhumrii sau incinerrii carcaselor poate fi necesar pentru a reduce riscul de transmitere a
virusului de la animale la om. Restricionarea sau interdicia deplasrii animalelor din fermele
infectate spre alte zone pot reduce propagarea bolii.
ntruct focarele de infecie cu virusul Reston la porci i maimu e au precedat cazurile de
infecie la om, punerea n aplicare a unui sistem de supraveghere activ a snt ii animale
este esenial pentru o alert precoce a autoritilor de sntate public i veterinar.
Deoarece se tie c primatele neumane au introdus virusul virusul Reston n Statele Unite ale
Americii i Italia, administraia transporturilor i a unitilor de carantin trebuie s se asigure
c personalul nelege pericolele asociate cu manipularea primatelor. Maimu ele importate
vor fi meninute n carantin. Apariia deceselor la animalele carantinate i mbolnvirile
ngrijitorilor, cu febr peste 38,5, pe o durat mai mare de dou zile, sunt elemente de
suspiciune a unei infecii cu virusul Ebola i se vor lua msuri n consecin. Personalul care
se ocup de animale bolnave trebuie s poarte echipament de protecie, incluznd mnu i de
cauciuc i respiratoare cu masc facial.
13.1.2. Msuri individuale
Nu exist dect tratament simptomatic, iar vaccinul este un deziderat. n lipsa tratamentului
eficient i vaccinului pentru oameni, gradul de contientizare la factorii de risc i cunoaterea
msurilor de protecie care trebuie luate individual sunt singura modalitate de a reduce
infecia i mortalitatea la oameni.
n Africa, n timpul focarelor de boal viral Ebola, mesajele educative de sntate public
care urmresc reducerea riscului se vor axa pe urmtoarele puncte:

Reducerea riscului de transmitere ntre animale slbatice i oameni prin contact cu

liliecii sau maimuele/primatele infectate i prin consumul de carne crud provenit de
la ele. Animalele vor fi manipulate cu mnui i se va purta o mbrcminte
protectoare adecvat. Produsele (sngele i carnea) se vor fierbe bine nainte de a fi
consumate.

Reducerea riscului de transmitere interuman n comunitatea care rezult din

contactul direct sau apropiat (strns) cu persoanele infectate, mai ales cu fluidele lor
corporale. Se va evita orice contact apropiat cu pacienii infectai cu virusul Ebola. Se

vor purta mnui i un echipament individual de protecie adecvat n timpul ngrijirii

pacienilor la domiciliu. Este indispensabil splarea regulat a minilor dup vizita
rudelor bolnave aflate n spital sau dup ngrijirea lor la domiciliu.

Comunitile afectate de virusul Ebola trebuie s informeze populaia despre natura

bolii i msurile luate pentru a controla focarul, inclusiv n timpul ritualurilor
funerare. Persoanele decedate prin aceast infecie trebuie s fie ngropate rapid i
fr asumarea unor riscuri. n cazul decesului, este obligatorie incinerarea cadavrelor.
Fermele de porci din Africa pot juca un rol n amplificarea infeciei din cauza

prezenei liliecilor la aceste ferme. Trebuie luate msuri de biosecuritate adecvate pentru a
limita transmiterea infeciei.
Pentru ebolavirusul Reston, mesajele educative de sntate public trebuie s se axeze
pe reducerea riscului de transmitere de la porci la oameni care rezult din practicile de
cretere i sacrificare periculoase, precum i din consumul de snge proaspt, lapte sau
esuturi animale crude. Trebuie purtate mnui i mbrcminte de protecie adecvat n
timpul manipulrii animalelor bolnave, esuturilor lor sau sacrificrii lor. n regiunile n care
au fost semnalate ebolavirusul Reston la porci, toate produsele de origine animal (snge,
carne i lapte) trebuie s fie fierte bine nainte de a fi consumate.
13.1.3. Msuri n instituiile medico-sanitare
Transportul cazului suspect sau a probelor biologice suspecte se va face cu transport
special destinat n acest scop. Personalul care transport cazul (medic, ofer) va purta
echipament personal de protecie.
Pacienii vor fi meninui n izolare strict, eventual cu dispozitive izolatoare ale
patului. Izolarea cazurilor se va face ntr-un pavilion sau cldire a spitalului separat de alte
secii. Pacientul se va ala singur n camer, iar camera va fi dotat cu baie proprie. Ua de la
camera va fi nchis. Se vor lua n considerare postarea permanent a unei persoane la u a
salonului pentru a mpiedica intrarea sau ieirea n salon a persoanelor neechipate
corespunztor.
Transmiterea interuman a virusului Ebola este n primul rnd legat de contactul
direct sau indirect cu sngele i fluidele corporale. El a fost semnalat la personalul medical
atunci cnd nu au fost respectate msurile suficiente de control al infec iei. Nu este
ntotdeauna posibil de a identifica rapid pacienii cu febr hemoragic Ebola, deoarece

simptomele iniiale pot fi nespecifice. Din acest motiv, este important ca personalul medical
s aplice msurile de precauie uzuale fa de toi pacienii, indiferent de diagnostic, n orice
practic profesional i n orice moment.
Aceste msuri de precauie includ igiena minilor, igiena respiratorie, purtarea unui
echipament personal de protecie (n funcie de lichidul infecios eliminat de bolnav sau de
alte contacte cu materiile infectate), sigurana injeciilor i ritualurile funerare. n prezen a
unui caz suspect sau confirmat de infecie cu virusul Ebola, personalul medical care ngrijete
bolnavul trebuie, n plus fa de msurile de precauie uzuale, s ia alte msuri de lupt
antiinfecioas pentru a evita orice expunerea la sngele sau fluidele corporale ale pacientului
i orice contact direct cu mediul susceptibil de a fi contaminat. n timpul contactelor
apropiate cu pacienii cu febr hemoragic Ebola (adic la mai puin de un metru), trebuie de
purtat o protecie facial (ecran facial sau masc chirurgical i ochelari de protec ie), un
halat curat, nesteril, cu mneci lungi i mnui (sterile pentru unele proceduri medicale).
Echipamentul personal de protecie adecvat (EPP) este alctuit din mnu i, ochelari
de protecie, masc de protecie care acoper complet partea din fa i prile laterale ale
feei, halat de unic folosin impermeabil sau combinezon impermeabil, masc FP3. n caz
de sngerri masive, vome sunt necesare n plus nc o pereche de mnui, protec ia
picioarelor (cipici de unic folosin care acoper pantofii). Procedurile invazive, care pot
expune personalul medico-sanitar la infecie trebuie s se desfoare n condiii stricte de
siguran. La ieirea din camera pacientului sau zona de ngrijire, echipamentul personal de
protecie trebuie s fie ndeprtat cu grij, fr a contamina ochii, mucoasele sau hainele cu
material potenial infecios. Nu este permis reutilizarea mtii sau mnuilor dect dup
prealabila lor decontaminarea riguroas.
Igiena minilor de ctre personalul medical trebuie efectuat ct mai frecvent: nainte
i dup contactul cu pacientul, cu materialele potenial infecioase, nainte i dup scoaterea
echipamentului personal de protecie, inclusiv a mnuilor. Igiena minilor se va asigura prin
splare cu ap i spunuri sau cu substane dezinfectante pe baza de alcool, prin frecarea
minilor.
Se va atrage atenia mai ales asupra riscului transmiterii virusului prin ace i alt
instrumentar, contaminate cu snge, secreii sau excrete. Injeciile vor fi administrate n
siguran cu respectarea cu strictee a precauiunile standard. Echipamentul de administrare

parenteral a tratamentului, dup utilizare trebuie colectat ntr-un container special dedicat
pacientului i va fi transportat la punctul de neutralizare.
Toate produsele provenite de la bolnavi, obiecte i instrumentele contaminate cu
snge sau cu alte produse de la bolnavi, trebuie manipulate cu grij i aplicate msuri
riguroase de dezinfecie i de sterilizare. Rufele murdare se vor eticheta n mod clar n pungi
etane i trimise direct la spltorie. Echipamentele, suprafeele i obiectele contaminate se
vor dezinfecta cu un dezinfectant de utilizare n spital sau cu o diluie 1:100 de hipoclorit de
sodiu (clor). Toate acele i obiectele ascuite vor fi manipulate cu grij i vor fi strnse n
containere sigilate i etichetate. Se vor limita utilizrile acelor i obiectelor ascu ite ct mai
mult posibil, iar flebotomiile, procedurile i testele de laborator vor fi limitate la minimum
necesar pentru evaluare, diagnostic i tratament. Este de dorit pentru prevenirea contaminrii
cu aerosoli, ca aerul s fie filtrat cu filtre de tip HEPA (high-efficiency particulate air). Pe ct
posibil se vor evita procedurile generatoare de aerosoli de ctre pacient.
Externarea pacienilor confirmai cu boala viral Ebola se va face dup recuperarea
clinic, nu mai devreme de 42 de zile. Pacienii dup externare vor evita contactul sexual
timp de 3 luni de la boala clinic. n caz de deces cadavrul va fi manipulat n acelea i condi ii
de siguran i transportat de la morga spitalului direct la cimitir sau crematoriu ntr-un
cosciug nchis.
Personalul de laborator este, de asemenea, expus la risc. Eantioanele prelevate pentru
diagnosticul cazurilor suspecte (fiine umane sau animale), trebuie s fie manipulate de ctre
un personal calificat i prelucrate n laboratoare dotate corespunztor.

13.2. Profilaxie pasiv

Imunizarea pasiv cu plasma pacienilor vindecai sau cu anticorpi monoclonali s-a
dovedit ineficace de multe ori, confirmnd c rspunsurile umorale nu joac un rol important
n controlul infeciei cu EBOV. n mod similar, administrarea de IFN recombinant
maimuelor macac nu le protejeaz mpotriva infeciei. Cu toate acestea, mai multe scheme
terapeutice s-au dovedit eficiente recent. Vaccinul candidat VSVG/ZEBOV, administrat
imediat dup inoculare, protejeaz macacii de boal.

13.3. Profilaxie activ (vaccinuri)

Cu toate c izolarea bolnavilor i punerea n aplicare a msurilor de protec ie a
anturajului pacienilor sunt suficiente pentru a opri epidemiile, numeroase echipe i
concentreaz eforturile pe viitor asupra elaborrii de tratamente i vaccinuri. Cu toate acestea,
infrastructura necesar pentru manipularea virusului Ebola, precum i lipsa de modele
animale pentru evaluarea vaccinurilor candidate sau moleculelor terapeutice, frneaz
considerabil progresele. Vaccinurile sunt n stadiu experimental, fiind implicate diverse
metodologii de obinere: preparate vaccinale inactivate cu formol, vaccinuri coninnd
antigenele NP sau GP, ori vaccinuri recombinante care s exprime GP, GPS i NP.
n domeniul vaccinal, mai multe vaccinuri candidate s-au dovedit eficiente la cobai,
ns parial, ba chiar complet, ineficiente la macac, de exemplu preparatele virale inactivate
prin cldur, formol sau raze , plasmidele care codific GP sau NP, particule virale
recombinante ale virusului encefalitei ecvine venezuelene care exprim GP, vaccinurile
variolice recombinante care exprim GP, i particulele virale Ebola ncapsulate n lipozomi.
Recent, utilizarea de vectori virali vii, sau de particule virale, pentru a produce GP a
permis elaborarea a dou vaccinuri candidate care au fost eficace att la cobai ct i la
maimua macac. Dou protocoale vaccinale au fost testate, unul bazat pe administrarea unic
a unei doze de 2x1012 particule de adenovirus 5 recombinant, care exprim n acelai timp GP
i NP (ADV-GP/NP), altul bazat pe dou injecii la interval de 9 sptmni. Ambele
protocoale asigur o protecie total i induc un rspuns CD8+IFN+ i un rspuns umoral
dup inocularea cu doze mici (13 pfu) i cu doze mari (1500 pfu) la 1 sau 4 sptmni mai
trziu (pfu = plaque forming units). Varianta simpl ofer o protec ie mai rapid, dar mai
puin durabil dect varianta dubl. n mod similar, imunizarea unic cu o doz de 10 7 pfu de
particule a virusului stomatitei veziculoase recombinant, viu i atenuat, care exprim GP
Ebola (VSVG/ZEBOV), asigur o protecie total a macacilor mpotriva unei inoculri de
virus Ebola cu o doz mare (1000 pfu) la 28 zile mai trziu. Ele induc o cre tere moderat a
IgG anti-GP i o cretere accentuat a CD8+IFN+, CD8+TNF+, CD4+IFN+ i CD4+
TNF+. Pn n prezent, aproape 30 de macaci au primit acest imunizare i la nici unul
dintre ei nu au aprut semne clinice.
Primul test clinic al unui vaccin mpotriva ebolavirusului Zaire realizat n SUA la
nceputul lunii septembrie 2014 pe un grup de voluntari nu a provocat pn n prezent reac ii
adverse.

Vaccinului

mpotriva

virusului

Ebola

fost

dezvoltat

de

compania

farmaceutic GlaxoSmithKline de mai muli ani, mpreun cu Institutele Naionale americane

pentru Sntate (NIH) i a dat rezultate foarte bune pe maimu e i face n prezent obiectul
unui studiu clinic asupra a zece persoane de la 2 septembrie 2014. A fost folosit serotipul 3 al
adenovirusului cimpanzeului (ChAd3). S-a recurs la adenovirusul de cimpanzeu i nu la
serotipul uman 5 (Ad5) care poate infecta oameni i neutraliza vaccinul prin anticorpi
prezeni n oameni. ChAd3 poart gena glicoproteinei (GP) a ebolavirusului Zaire.
Experimental, macacii au fost inoculai iniial cu serotipul 3 al adenovirusului cimpanzeului
(ChAd3), care codific proteina GP a virusului Ebola, iar dup opt sptmni s-a administrat
alt vaccin, MVA (modified vaccinia Ankara), ce conine tulpina Ankara a virusului vaccinia
(care provoac variola vacilor) pentru a oferi o protecie complet i de lung durat. Tulpina
Ankara codific de asemenea proteina GP.

14. Virusul Ebola ca arm biologic

Virusul Ebola este clasificat ca arm biologic de categoria A, conform
nomenclatorului agenilor patogeni cu potenial bioterorist.
Au existat suspiciuni c Uniunea Sovietic i SUA dezvoltau o arm biologic bazat
pe virusurile Ebola i Marburg. Pentagonul se temea nc de la sfritul anilor '70 c virusul
Ebola poate fi folosit ca o arm bioterorist. ns speciali tii cred c riscul este sczut. Cu
toate c are o rat de letalitate de pn la 90%, febra hemoragic Ebola este din fericire mai
puin contagioas dect alte boli virale, deoarece se transmite mai ales prin contactul cu
fluidele corporale: saliv, snge, urin.
n anul 1992, membrii sectei japoneze apocaliptice Aum Shinrikyo, profitnd de o
epidemie de febr hemoragic Ebola, a ncercat, fr succes, s procure virusul Ebola Zair n
cadrul unei misiuni umanitare n Africa, conduse de eful sectei, la care au participat 40 de
membri ai sectei. Ei au preferat n cele din urm gazul sarin, pe care l-au folosit pentru a
comite atentatul din metroul din Tokyo n 1995.
Guvernul american ia n serios riscul Ebola ca un agent al bioterorismului i a
investit zeci de milioane de dolari n elaborarea unor vaccinuri i terapii n ultimul deceniu ,
a declarat Peter Walsh, profesor la Universitatea din Cambridge, citat de Washington
Post. Existena unor tratamente experimentale pentru febra hemoragic Ebola la ora actual

se datoreaz n oarecare msur riscului folosirii virusului Ebola de ctre teroriti. n 2010 de
exemplu, Departamentul Aprrii al Statelor Unite a acordat 140 milioane de dolari pentru
societatea canadian Tekmira pentru dezvoltarea unui tratament pentru febra hemoragic
Ebola. n 2013, Pentagonul a dat 4,4 milioane dolari Centrului de Vaccin Vanderbilt
(Vanderbilt Vaccine Center) pentru studiul virusurilor Ebola i Marburg. ZMapp a fost
dezvoltat de ctre o companie necunoscut pn atunci, Mapp BioPharmaceutical, care are
legturi cu Departamentul Aprrii al Statelor Unite.

Referine
1. WHO. Manual for the care and management of patients in Ebola Care Units/ Community
Care Centres. Interim emergency guidance. 30 January 2015
2. Infecia cu virus EBOLA. Institutul Naional de Sntate Public.
3. Hotrre nr.4 privind aprobarea procedurilor operaionale pentru managementul cazului
suspect/confirmat cu boala produs de virusul Ebola. Guvernul Romniei. Comitetul
naional pentru situaii speciale de urgent. 08.10.2014
4. Elvira Snziana Ciufescu. Virusologie medical. Editura Medical Naional. 2003
5. Aurel Ivan. Tratat de epidemiologie a bolilor transmisibile. Polirom 2002
6. S.R. Palmer, Lord Soulsby, D.I.H. Simpson. Zoonoze. Editura tiinelor Medicale. 2005
7. A. Cupa. Boli infecioase transmisibile. Curs universitar i recomandri pentru activitate
practic. Ediia medical, Universitatea Craiova, 2007.
8. Costin Cernescu. Virusologie medical. Editura Medical. 2012
9. Viorel Alexandrescu. Informatii despre Ebola. Curs. INCDMI Cantacuzino. Facultatea de
Medicina - Universitatea Titu Maiorescu
10. Klenk, Hans-Dieter. Marburg and Ebola Viruses (Current Topics in Microbiology and
Immunology). Berlin: Springer-Verlag Telos. ISBN 978-3-540-64729-4
11. Klenk, Hans-Dieter; Feldmann, Heinz (2004). Ebola and Marburg viruses: molecular
and cellular biology. Wymondham, Norfolk, UK: Horizon Bioscience. ISBN 978-09545232-3-7
12. Kuhn, Jens H. (2008). Filoviruses: A Compendium of 40 Years of Epidemiological,
Clinical, and Laboratory Studies. Archives of Virology Supplement, vol. 20. Vienna:
SpringerWienNewYork. ISBN 978-3-211-20670-6
13. McCormick, Joseph; Fisher-Hoch, Susan (iunie 1999). Level 4: Virus Hunters of the
CDC. Horvitz, Leslie Alan (ed. a 3-a). Barnes & Noble. ISBN 978-0-7607-1208-5

14. Pattyn, S. R. (1978). Ebola Virus Haemorrhagic Fever. Amsterdam: Elsevier/NorthHolland Biomedical Press. ISBN 0-444-80060-3
15. Ryabchikova, Elena I.; Price, Barbara B. (2004). Ebola and Marburg Viruses: A View of
Infection Using Electron Microscopy. Columbus, Ohio: Battelle Press. ISBN 978-157477-131-2
16. Virusul Ebola. Informaii pentru personalul medical. Institutul Naional de Sntate
Public, Ministerului Sntii
17. Ebola virus disease. World Health Organization (WHO)
18. Ebola Virus Infection. eMedicine, Medscape.
19. Ebola Hemorrhagic Fever. Center for Disease Control and Prevention USA
20. About Ebola Hemorrhagic Fever. Center for Disease Control and Prevention USA
21. Ebola Hemorrhagic Fever. Fact Sheet. Center for Disease Control and Prevention USA
22. S.R. Palmer, Lord Soulsby, Paul Torgerson, David W. G. Brown. Oxford Textbook of
Zoonoses: Biology, Clinical Practice, and Public Health Control (2 ed.). 2011
23. Jeremy Farrar, Peter Hotez, Thomas Junghanss. Manson's Tropical Diseases: Expert
Consult - Online and Print, 23ed, 2013
24. Mandell Douglas And Bennett's - Principles And Practice Of Infectious Diseases - 7th
Edition 2010
25. Brian W.J. Mahy, Marc H.V. van Regenmortel. Desk Encyclopedia of Human and
Medical Virology. 2010
26. Jean-Marie Huraux, Jean-Claude Nicolas, Henri Agut, Hlne Peigue-Lafeuille. Trait de
virologie mdicale, 2003