1- Prezentarea proiectului ( titlul)

2- Introducerea -Termenul vegetal se refer de obicei la partea comestibil din

planta erbacee (fructe, tuberculi, bulbi, frunze) consumat crud sau fiart. Legumele
conin n general o mic parte de proteine sau grasimi i propor ii diferite de minerale,
fibre, carbohidra i, sau fitochimicale antioxidante,precum compu i polifenolici.
Compuii fenolici vegetali prezint o grup neomogen de compu i organici
diversifica i dup structura chimic. Compuii fenolici sunt elemente constitutive ale
plantelor i din cauza efectelor lor asupra sntii ca i antioxidani au atras un mare
interes public i tiniific.
Polifenolii au structuri chimice organice care sunt cuprinse ntr-un inel aromatic cu
o legtur de hidrogen i o legtur de oxigen. Exist diferite tipuri de polifenoli care
includ mai multe clase de compu i .

3- Obiectivul principal al acestui studiu a fost cuantificarea compuilor

fenolici din urmtoarele produse vegetale: Spanac ,Rucola,Ppdie Urzic
Ptrunjel Leutean Cimbru Ment

4 - Pornind de la informaiile existente n literatura de specialitate

determinarea coninutului total de compui fenolici din extractele de plante
s-a realizat folosind metoda spectrometric UV-VIS cu reactiv Folin
Cioclteau.
Metoda permite determinarea coninutului total de compui fenolici pe
baza reaciei de culoare cu reactivul Folin-Cioclteau. Folosind aceast
metod s-a urmrit evoluia coninutului total de compui fenolici n
extractele de plante supuse analizei pe parcursul a trei sptmni. Pentru a
separa, identifica i cuantifica compuii fenolici din extractele de plante s-a
folosit cromatografia lichid de nalt performan (HPLC).

5- Reactivi i echipamente
Reactiv Folin-Cioclteau, reactiv de culoare care este un amestec de acid
fosfo-tungstic (H3PW12O40) i acid fosfo-molibdenic (H3PMo12O40 ).
Na2CO3 de concentraie 20%, utilizat pentru meninerea pH-ului, preparat
prin cntrirea a 20 g substan n 80 mL ap bidistilat.
Spectrometrul de absorbie molecular UV-VIZ Schimadzu V550 cu sistem
optic cu dublu fascicul
Aparatur: HPLC Agilent 1200, cu pomp cuaternar, DAD, termostat, sistem
de degazare, autosampler

6- Pentru Pregtirea probei materialele Au fost achiziionate din comer

S-au cntrit 15 g prob de Urzic Leutean Rucola Spanac i s-au adugat
pentru macerare 100 ml de etanol;
10 g prob de Ment Ppdie i 100 ml de etanol;
6 g de Ptrunjel cu 70 ml etanol;
3,5 g Cimbru cu 50 ml etanol.
S-au lsat la macerat timp de trei sptmni.. Extractele obinute dup
filtrarea maceratelor s-au pstrat la rece, la 4C pe parcursul analizelor.

7- metoda efectuata- n baloane cotate de 50 mL s-au adugat n ordine:1

mL de prob, 1 mL reactiv Folin-Cioclteau i 1 mL soluie de Na2CO3 20%.
Amestecul a fost omogenizat i lsat 10 minute la temperatura camerei,
dup care balonul cotat a fost adus la semn cu ap distilat. n final
amestecul omogenizat a fost lsat 30 de minute la temperatura camerei
pentru stabilizarea culorii i apoi s-au citit absorbanele soluiilor preparate la
lungimea de unda 675 nm, folosind spectrometrul monofascicul DR 2800,
fa de o prob martor. n figura3.1 este prezentat curba de etalonare
obinut.

8- prezentarea curbei de etalonare

9- prezentarea tabelului cu Evolutia continutului total de compusi fenolici

10- Pentru separarea, identificarea i cuantificarea compuilor fenolici din

extractele de plante s-a folosit cromatografia lichid de nalt performan cu
detector cu reea de diode (HPLC-DAD). S-a lucrat dup o metod HPLC
standardizat de determinare a polifenolilor totali, descris n monografia
USP 30-NF25.
Pentru trasarea curbelor de calibrare s-au folosit soluii standard
S-a lucrat n gradient de faz mobil: soluia A acid fosforic 0,1%; soluia B
acetonitrile
Identificarea i determinarea cantitativ a compuilor fenolici din extarctele
analizate s-a efectuat prin compararea cromatogramelor amestecului de
standarde (figura 3.2.) i a soluiei de analizat.

11- n urma analizei HPLC-DAD, a fost detectat acidul galic n toate extractele
de plante.
Msurtorile au fost efectuate dup 21 de zile de macerare a
plantelor.
Scopul utilizrii HPLC-DAD a fost de a separa i cunatifica fiecare
compus fenolic. Acidul galic i esterii acidului galic sunt antioxidani folosii n
industria farmaceutic datorit efectelor cardioprotectoare.

12- Dup cum se observ din figura 3.3 cea mai mare concentraie de acid
galic a fost detectat n rucola.
S-a observat c cea mai mare concentraie o are acidul elagic (un
antioxidant puternic anticancerigen) detectat n leutean
Acidul clorogenic n ment, ppdie i urzic
acidul cumaric n cantitate mica doar n ppdie
Acidul cinamic a fost detectat doar n urzic

Acidul cafeic a fost detectat n spanac

13, 14,15,16, -sunt prezentate cromatogramele obinute pentru fiecare

extract

17- S-a ncercat separarea compuilor fenolici folosind metoda descris

anterior i cu un cromatograf HPLC Agilent 1200, cu pomp cuaternar, DAD,
fr termostat i cu injecie manual. Dintre toi compuii fenolici studiai nu
s-a detectat dect acidul galic, deoarece cromatograful nu este prevazut cu
termostat (figura 3.12).

18- Concluzii -Conform informaiilor existente n literatura de specialitate

determinarea coninutului total de compui fenolici din extractele de plante
s-a realizat folosind metoda spectrometric UV-VIS cu reactiv Folin
Cioclteau. Iar pentru a separa, identifica i cuantifica compuii fenolici din
extractele de plante s-a folosit cromatografia lichid de nalt performan
(HPLC).
Folosind aceast metod s-a urmrit evoluia coninutului total de
compui fenolici n extractele de plante supuse analizei pe parcursul a trei
sptmni.
Din datele obinute rezult c acidul galic i elagic sunt compuii cei
mai reprezentativi n extractele de plante analizate, iar menta are cel mai
mare coninut de compui fenolici. Leuteanul are un coninut total de
compui fenolici aproximativ constant pe toat perioada de macerare.
Acidul clorogenic, un antioxidant ce poate preveni apariia unor boli
cum ar fi cele cardiovasculare i diabetul de tip II a fost detectat doar n
ment, ppdie i urzic
Acidul cumaric are un rol important, de a mpiedica formarea
substanelor cancerigene n organism i a fost detectat n cantitate mica
doar n ppdie .
Acidul cinamic a fost detectat doar n urzic ceea ce demonstreaz
efectul activitii antimicrobiene i potenialul antioxidant al speciei.

Acidul cafeic a fost detectat n spanac, urzic i ppdie n concentraii

mai mici de 0,4 mg/100g produs vegetal.