Catedra Biochimie i Biochimie Clinic

CATEDRA BIOCHIMIE I BIOCHIMIE CLINIC

FACULTATEA STOMATOLOGIE, ANUL I

RED.:

01

DATA:

24.01.11

Pag. 1 / 4

Analizat i aprobat la edin a catedrei

din 23.04.2013, proces verbal nr. 17
eful Catedrei Biochimie i Biochimie Clinic ,
conf. universitar, dr. hab. n medicin

Olga Tagadiuc
____________________

Indica ia metodic nr. 14

Tema: Glucidele rolul biologic, clasificarea.
Digestia i absorb ia glucidelor. Metabolismul glicogenului.
Experien a 1. Determinarea activit ii amilazei n ser (metoda cinetic )
Principiul metodei: Amilaza hidrolizeaz substratul 2-cloro-4-nitrofenil- -maltotriozid (CNP-G3)
cu formarea polimerilor glucozei i 4-nitrofenolului. Viteza de cre tere a absorban ei datorit
acumul rii de 4-nitrofenol n mediul de reac ie este propor ional cu activitatea amilazei n serul
examinat.
Reagen i:
Reagentul de lucru, con ine:
Solu ie-tampon MES, pH 6,0 . 90,0 mmol/l
NaCl..500 mmol/l
Sulfocianid de potassium ...0,60 mol/l
Acetat de calciu .7,2 mmol/l
CNP-G3..2,7 mmol/l
Modul de lucru:
Reagent de lucru

1 ml

Ser sangvin

0,05 ml

se amestec i IMEDIAT se m soar extinc ia ini ial

a probei (E0) fa de ap distilat la 405 nm, n cuva de 1cm.
se incubeaz EXACT 5 min la temperatura camerei se
soar extinc ia final a probei (E1) fa de ap distilat la
405 nm, n cuva de 0,3 cm.
Rezultatul ob inut:

E0 = ________

E1 = ________

Calculare: Activitatea amilazei = (E1 E0) / 5 x 3178 U/L =_______________________

Valori normale: 35115 U/L
Semnifica ie diagnostic :
Valori crescute se constat n: pancreatita acut , leziuni inflamatorii ale pancreasului, necroza
extins a pancreasului, cancer de pancreas, afec iuni abdominale acute, oc, traumatisme
abdominale i cerebrale;
Valori sc zute se constat n atrofiile pancreatice; afectarea acut sau cronic hepatocelular .
Concluzie: ____________________________________________________________________
____________________________________________________________________

CATEDRA BIOCHIMIE I BIOCHIMIE CLINIC

FACULTATEA STOMATOLOGIE, ANUL I

1.
2.
3.
4.

5.

RED.:

01

DATA:

24.01.11

Pag. 2 / 4

ntreb ri pentru autopreg tire:

Rolul biologic al glucidelor.
Clasificarea glucidelor.
Structura i propriet ile glucidelor (ale principalelor mono-, di- i polizaharide).
Digestia i absorb ia glucidelor n tractul gastrointestinal. Deregl rile digestiei i
absorb iei glucidelor (intoleran a dizaharidelor). Rolul glucidelor alimentare n
dezvoltarea afec iunilor din ilor i ale esuturilor moi ale cavit ii bucale.
Sinteza i degradarea glicogenului: reac iile par iale, enzimele, coenzimele,
reglarea i interrela iile reglatoare ale proceselor.

Indica ia metodic nr. 15

Tema: Glicoliza i oxidarea aerob a glucozei. Gluconeogeneza.
Experien a 1. Dozarea glucozei - metoda cu glucozoxidaz
Principiul metodei: Glucozoxidaza catalizeaz oxidarea glucozei n acid gluconic (n prezen a
oxigenului): Glucoz + O2 <-- glucozoxidaza--> Acid gluconic + H2O2
Peroxidul de hidrogen format reac ioneaz cu 4- amino-antipirina i fenolul, n prezen a peroxidazei
i formeaz chinonimina.
2H2O2 + fenol + 4-amino-antipirina <--peroxidaza--> chinonimina +4H2O
Intensitatea culorii produsului rezultat este propor ional cu concentra ia de glucoz din proba de
analizat i se m soar spectrofotometric.
Reagen i:
Reactiv enzimatic de lucru:
Tampon fosfat pH = 7,470 mmol/l
Fenol ..5 mmol/l
Glucozoxidaza..> 10 U/ml
Peroxidaza .> 1 U/ml
4-amino-antipirina.0,4 mmol/l
Modul de lucru:
Reactiv enzimatic de lucru (1)

1,5 ml

se cite te extinc ia ini ial a probei (E0) fa de martor

(ap distilat ) la 500 nm, n cuva de 0,3 cm.
Ser sangvin

0,05 ml

se agit i se incubeaz 10 min la temperatura camerei

se cite te extinc ia final a probei (E1) fa de martor (ap distilat )
la 500 nm, n cuva de 0,3 cm. Colora ia e stabil 2 ore.
Rezultat:

E0 = _________

E1 = _________

Calcul: Glicemie (mmol/l) = (E1- E0) x 30 = _________

Not : Coeficientul 30 a fost calculat reie ind din concentra ia i extinc ia standardului.

CATEDRA BIOCHIMIE I BIOCHIMIE CLINIC

FACULTATEA STOMATOLOGIE, ANUL I

RED.:

01

DATA:

24.01.11

Pag. 3 / 4

Valori normale: Ser: 3,3 5,5 mmol/l

Valoarea diagnostic a determin rii concentra iei glucozei n ser.
Hiperglicemia se ntlne te la pacien ii cu diabet zaharat, pancreatita acut , n cazurile de exita ie
a sistemului nervos central, n hiperfunc ia hipofizei, glandelor suprarenale i tiroidei.
Hipoglicemia se ntlne te n hipofunc ia glandelor endocrine enumerate mai sus, n hiperfunc ia
insulelor Langerhans, la supradozarea insulinei, n bolile de rinichi cnd este dereglat procesul de
reabsorb ie al glucozei.
Concluzie:

____________________________________________________________________
____________________________________________________________________

ntreb ri pentru autopreg tire:

1. Glicoliza reactiile, reglarea i rolul biologic.
Sistemele naveta glicerolfosfat i malat-aspartat de transport a NADH-ului din
citozol n mitocondrie (f formule).
2. Bilan ul energetic al oxid rii anaerobe i aerobe a glucozei.
3. Gluconeogeneza substratele, etapele de ocolire (n cuvinte), enzimele,
necesit ile energetice i reglarea.

Indica ia metodic nr. 16

Tema: Metabolismul fructozei i galactozei. iclul pentozofosfa ilor.
Reglarea metabolismului glucidic.
Experien a 1. Reac ia Seliwanoff (Reac ia de diferen iere a cetozelor de aldoze)
Principiul reac iei: Cetozele (fructoza), prin nc lzire n prezen a acidului clorhidric i a rezorcinei,
coloreaz solu ia n ro u-vi iniu sau n ro u. Fructoza prin nc lzire n mediu puternic acid pierde trei
molecule de ap transformndu-se n oximetilfurfurol. Aceasta reac ioneaza cu rezorcina formnd un
compus colorat n ro u-vi iniu sau ro u.
Modul de lncru: n dou eprubete se pun cu pipeta 1 ml solu ie Seliwanoff la care se adaug n
prima eprubet 2-3 pic turi de fructoz , iar n eprubeta a doua - 2-3 pic turi solu ie de glucoz .
Eprubetele se nc lzesc. Se noteaz i se explic rezultatele reac iilor.
Rezultatul ob inut:
Concluzie:

____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________

ntreb ri pentru autopreg tire:

1.
2.

Metabolismul fructozei c ile hepatic i muscular : reac iile par iale, enzimele,
rolul biologic.
Metabolismul galactozei: reac iile par iale, enzimele, rolul biologic.

CATEDRA BIOCHIMIE I BIOCHIMIE CLINIC

FACULTATEA STOMATOLOGIE, ANUL I

3.

4.

5.

RED.:

01

DATA:

24.01.11

Pag. 4 / 4

Ciclul pentozofosfa ilor. Reac iile par iale ale etapei oxidative, enzimele,
coenzimele, reac ia stoichimetric a I etape i a ntregului proces, rolul biologic,
topizarea organic .
Reglarea metabolismului glucidic n organism:
influen a sistemului nervos simpatic i parasimpatic;
influen a hormonilor pancreatici (insulina, glucagonul), structura lor,
mecanismul de ac iune, efectele biologice;
influen a catecolaminelor i glucocorticoizilor;
rolul principiului retroinhibi iei (feed back) n reglarea metabolismului
glucidic.
Perturb rile metabolismului glucidic:
hiperglicemia, hipoglicemia, glucozuria;
diabetul zaharat: cauze, deregl ri ale metabolismului glucidic, lipidic i proteic.
no iuni generale despre deregl rile ereditare ale metabolismului glucidelor:
galactozemie, fructozurie, glicogenoze i aglicogenoze.

Indica ia metodica nr. 17

Totalizare pe capitolul V Chimia i metabolismul glucidic