Imunologie Curs 3

Variante antigenice ale Ig

Exist 3 variante antigenice ale Ig: izotipurile alotipurile idiotipurile Izotipurile epitopi codificai de segmente genetice identice la toi indivizii unei specii sunt localizai n principal pe domeniile constant de lanuri grele CH i uoare CL. Alotipurile epitopi codificai de genele alele (formelor alternative ale anumitor gene care codific domenii constante ale lanurilor grele i uoare , de asemenea codific i Alotipul GL pe lanurile H ale Ig G AM pe lanurile grele H ale Ig A Km sau IMV pe lanurile uoare L ale Ig Idiotipurile epitopi purtai de domeniile hipervariabile VL i VH ale Ig i de domeniile variabile ale lanurilor care formeaz receptorii TCR. Idiotipul = un set complet de idiotopi din regiunea variabila a anticorpuli i regiunea nevariabil a lanurilor care vor constitui TCR. Clase i subclase de Ig Ig se mpart n 5 clase principale pe baza diferenei n secvene de aminoacizi din regiunea constant a lanului greu. Ig G Ig M Ig A 1 2 Ig D Ig E Ig A 2 tipuri de subclase Ig A 1 i Ig A 2 - Ig A seric monomer, Ig A secretor dimer Ig G 4 subclase Proprietile Ig Ig G este cea mai abundent Ig din fluidele corpului fiind prezent i extravascular responsabil pentru rspunsul imun secundar combate microorganismele i toxinele lor activeaz complementul pe calea clasic strbate placenta (imunitatea neonatal) se leag la macrofage i PMN Exemple: izoaglutinine Rh factorul lupic Ig M sintetizat n rspunsul imun primar are rol de opsonin ca monomer reprezint receptorul pentru antigen de pe limfocitul B (BCR) efectiv n prima linie de aprare mpotriva bacteriilor particip n spaiul vascular la reacii imune fixeaz complementul pe calea clasic 1

Imunologie Curs 3 Exemple: izoaglutininele ABO factorul reumatoid Ig A este major n secreiile seromucoase apar suprafeele corpului de microorganisme fixeaz lizozimul (aciune bactericida) se leag la macrofage i PMN Ig D prezent pe suprafaa unor limfocite nu se gsete pe suprafaa celulelor de memorie factor de stimulare a celulelor T helper Ig E asigur protecia suprafeelor externe recruteaz agenii antimicrobieni cresc n infeciile parazitare se leag de celulele parazitare i particip la procesul de citotoxicitate sunt responsabile de manifestrile din alergiile atopice pentru c se fixeaza pe mastocite i produce degranulare Dpdv al migrrii electroforetice Valene pentru Migrare Lan Lan Concentraia % din Ig GM Structur legarea zon greu uor n ser total antigenului Ig 150 kD Monomer K+ 2 8 16 mg/ml 80 % G Monomer Ig ntre i 0,5 2 900 kD Pentame K+ 5 (10) 6% M mg/ml r Ig Monomer 1,4 4 160 kD K+ 24 13 % A Dimer mg/ml Ig 0 0,4 0,3 i 185 kD Monomer K+ D mg/ml 1% Ig 17 450 0,002 200 kD Monomer K+ E ng/ml % Ig A secretor prima linie de aprare prin fixarea antigenelor particulare favorizeaz fagocitoza opsonic i activarea macrofagelor mpiedic colonizarea mucoaselor activitate antibacterian prin fixarea lactoferinei mediaz procesul de citotoxiciate celular anticorp dependent (ADCC) prin fixarea prin intermediul fraciunii Fc la receptorii de pe suprafaa macrofagelor, neutrofilelor i limfocitelor B Functiile generale ale Ig legarea anticorpilor la antigen la nivelul situsului prin cooperarea celor 3 subyone hipervariabile de pe fiecare lan greu i uor 2

Imunologie Curs 3 determin activarea complementului cu liza celulelor i eliberarea de molecule active biologic activarea diferitelor celule (fagocite, limfocite, trombocite, bazofile) care au pe suprafaa lor receptori pentru fraciunea Fc a Ig unele Ig leag receptorii de pe trofoblatii placentei ( Ig G n imunitatea neonatal) activarea complementului o legarea la membranele celulelor prin Fc crete rata de catabolizare

n urma fixrii Ig intervin n procesul de citotoxicitate prin NK, n fagocitoz (macrofage i PMN) , n degranularea mastocitelor i a plachetelor sanguine . Anticorpii monoclonali Reprezint o categorie de Ig omogeni derivai dintr-o singur clon de limfocite B identice n ceea ce privete izotipul i receptorul pentru antigen. Ig omogene sunt proteinele mielomatoase care apar n sngele pacienilor cu mielom ca rezultat a unor procese neoplazice instalate la nivelul celulelor sintetizatoare de anticorpi. Obinerea unor Ig omogene in vitro se realizeaz printr- un proces de hibridizare somatic cu obtinerea unor hibrizi celulari (de exemplu prin fuzionarea unor celule limfatice capabile s sintetizeze anticorpi cu o specificitate cunoscut cu celule dintr-o linie mielomatoas meninute n laborator au capacitate de proliferare indefinit. Prin clonarea acestor hibrizi somatici se obin hibridoame derivate fiecare dintr-o singur celul hibrid care vor produce o singur specie molecular de anticorpi i anume anticorpi monoclonali. Aplicaii practice ale anticorpilor monoclonali: tehnica de imunofluorescen; ELISA; RIA citometrie n flux evidenierea antigenelor: carcinoembrionar, -fetoproteina, subpopulaiilor limfocitare, specificitile HLA studiul structurii unor proteine antigen specifice detectarea grupelor sanguine stabilirea idiotipului limfocitar profilactic o obinerea unor anticorpi IgG anti RhD pentru prevenirea anemiei hemolitice a nounascutului o protecie mpotriva infeciilor cu unele virusuri (varicela zoster, citomegalic), streptococul hemolitic (RAA, glomerulo-nefrit) terapeutic o tratamentul tumorilor prin legarea celulelor tumorale acoperite cu anticorpi specifici de celulele NK Markerii i receptorii celulari Markeri = semne caracteristice unei populaii celulare. Exist 3 categorii de markeri: morfologici funcionali antigenici Markerii morfologici i funcionali permit identificarea unor populaii celulare, dar nu ajut la identificarea i diferenierea subpopulaiilor celulare. Markerii antigenici sunt cei mai importani. Sunt caracteristici celulelor sistemului imun glicoproteine de suprafa, sunt notai cu CD pe baza identificrii lor cu ajutorul unui grup de anticorpi monoclonali. Realizeaz o caracterizare fix a subpopulaiilor celulare implicate n 3

Imunologie Curs 3 rspunsul imun i se caracterizeaz prin modulaie antigenic care semnific alternane dintre exprimarea i lipsa de exprimare a unei molecule pe suprafaa unei celule n diferite stadii de leziune a acesteia. Sunt asociai unor funcii celulare. Ex: CD3 un complex trimeric alctuit din: , i care mpreun cu homodimerul (zeta) acioneaz ca o unitate semnal transductoare pentru receptorul LT. CD 4 glicoprotein de suprafa deobicei ntalnit pe suprafaa celulelor T helper i care recunoate MHC clasa II de pe celulele prezentatoare de antigen CD 8 glicoprotein de suprafa aflat pe suprafaa LT citotoxice care recunoate MHC clasa I de pe celulele int Moleculele de adeziune intercelulara sunt glicoproteine membranare care intervin n recunoaterea intermolecular din sistemul imun: o CD 54 care se leaga de ICAM 1 o selectinele CD 62, E, L, P exprimate pe leucocite, pe celulele endoteliale activate sau pe plachetele sanguine. Selectina L are rol n procesul de homing limfocitar (orientarea L spre focarul inflamator). receptori pentru diferii liganzi: o RFc - receptori pt complement RC 3, P, interleukine o antigeni ai Ly B (BCR) sau T (TCR) Structura receptorilor BCR Ig transmembranar de suprafa care este de tip monomer Iniial poate fi de tip Ig M, apoi de tip Ig D, Ig A, Ig G prin rearanjament de gene VJC (variable joint constant) K sau i VDJC . Ig secretate de limfocitul respective au aceiai specificiate cu Ig de suprafa prin mecanismul de mbinare genic diferenial. Este complexat cu glicoproteine de membrane Ig i Ig care interacioneaza cu Ig de suprafa i transducer, semnalul antigenic intervenind n activarea celulei. TCR molecul de membrane compus din 2 lanuri transmembranare: i legate printr-o legatur disulfidic fiecare lan are 2 domenii: o un domeniu constant o un domeniu variabil conine zona de interaciune cu antigenul constituind regiuni complementare notate cu CLR i care asigur suportul variabilitii TCR. Complexul CD3 este parte integrant a TCR i esre altctuit din lanurile ,, + dimerul lanurilor (zeta) care pot fi nlocuite cu lanurile . Elementele sistemului imun Organele limfoide a. primare (centrale) maduv osoas i timus + ficat la ft b. secundare (periferice) Limfocitele sunt produse n organele limfatice primare i funcioneaz n organele i esuturile secundare. Organele primare rol n ontogenez prin aprovizionarea cu precursori celulari sedii primare de difereniere din celulele stem, de proliferare i maturizare a celulelor n celule funcionale. 4

Imunologie Curs 3 Organele secundare populate tardiv cu limfocite care i-au dobndit componente funcionale n organele limfatice primare = suportul anatomic al rspunsului imun splina i ganglionii limfatici structuri difuze alctuite din populaii celulare care constituie esutul limfoid asociat mucoaselor (MALT) MALT la nivelul mucoaselor pentru protejarea prilor prin care microorganismele ptrund n organism esut limfoid GALT asociat tractului intestinal esut limfoid asociat tractului respirator (BALT) esut limfoid asociat ductului urinar esut limfoid asociat tractului uro-genital agregate de esut limfoid se afl att n lamina proprie, dar i n ariile submucoase. GALT amigdale, tonsile, apendicele vermiform, plcile Payer = structuri specializate de la nivelul intestinului subtire care colecteaz antigene de la suprafaa epiteliului, prin intermediul unor celule specialiyate multifenestrate notate cu M se constitui un folicul reprezentat dintr-un dom larg de LB nconjurate de un numr unic de LT. Limfocite care se gsesc n lamina proprie sunt limf T activate + lim B activate + plasmocite. Limfocitele intraepiteliale sunt n majoritate LT , dar sunt diferite de cele din lamin fiind L n proporie mare LT de tip n procent de 10-40% Lz CD8+ 70%. Ganglioni limfatici situai pe traseul vaselor limfatice n grupuri cu dimensiuni de caiva mm la 1 cm Capsula conjunctiva din care pornesc trabecule ce strabat parenchimul ganglionar Stroma celule i fibre reticulare o celule reticulare sunt fibroblaste mari ramificate care produc fibrele reticulare, n ochiurile reelei se afl celule limfoide, macrofage, vase limfatice i sanguine care formeaz parenchimul ganglionar. o ganglionii limfatici au vascularizaie dubl sanguin i limfatic. Limfa adus prin cele 5-6 vase limfatice aferente care se vars n sinusul subcapsular trabecule conjunctive pornesc radiar sinusurile corticale care devin sinusuri medulare care se continu cu vasele limfatice eferente. Parenchimul prezint 2 zone o zona cortical extern domin limf B profund (paracortical) domin limfocitele T. n corticala extern numeroase aglomerri de limfocite B mici i celule foliculare dendritice denumite foliculi primari dup stimularea antigenic foliculi limfoizi secundari folicul limfoid central centru germinativ cu limf B de memorie, macrofage, celule foliculare dendritice zona medular cordoane printre sinusurile medulare (predomina limfocite B productoare de anticorpi plasmocite asociate cu macrofage i limfocite T)

Splina Capsul conjunctiv cu rare fibre musculare de aici pornesc trabecule conjunctive care mpart splina ntr-o serie de compartimente comunicante; n fiecare compartiment avem pulpa alba i pulpa roie a splinei. 5

Imunologie Curs 3 n trabecule se gsesc arterele trabeculare ramificaii ale arterei splenice, ele prasesc trabeculele i ptrund n parenchim. Dau ramificaii laterale - arteriole, fiecare arteriol fiind nconjurat de esut limfoid dens distribuit ntr-o stroma conj teci limfoide periarteriolare; totalitatea lor formeaz pulpa alba a splinei. Aceste manoane au o zon intern bogat n limfocite T i o zon extern bogat n limfocite B grupate n aglomerri denumite foliculi. Pulpa roie cordoane de esut splenic (cordoanele Bilorth) printre sinusurile venoase. n pulpa alb avem foliculi limfatici primari. Limfocitele prsesc splina prin vena splenic.