DETERMINAREA AMILAZEI SANGUINE

Amilaza este o enzima ce se gaseste in sucul pancreatic si saliva, ce are rolul

fiziologic de a scinda legaturile amidonului, producand glucide cu molecule mai
mici: maltoza, glucoza, dextrina.
Determinarea nivelului de amilaza din sange este efectuat pentru stabilirea
eventualelor afectiuni ale pancreasului sau glandelor salivare. In general, in sange
regasim doar valori scazute ale amilazei, dar in cazul in care la nivelul
pancreasului sau al glandelor salivare se produce un blocaj, nivelul amilazei creste
simtitor.
Este important de stiut ca nou-nascutii au nivel foarte scazut de amilaza in
organism, sau pot chiar sa nu aiba deloc. La sfarsitul primului an de viata, nivelul
acestei enzime trebuie sa atinga limitele normale ale unui adult.
Amilaza este fabricata de pancreas si secretata in intestin pentru a ajuta la
digestia alimentelor provenite din cereale si cartofi (amidon). O cantitate foarte
mica trece in sange, iar din sange se elimina prin urina.
Enzima se masoara in unitati Wohlgemuth (UW) sau in unitati internationale (UI).
Determinarea activitii amilazei prin metoda Wohlgemuth
Principiul metodei
Amilaza catalizeaz hidroliza amidonului n compui cu mas molecular
din ce n ce mai mic, care pierd proprietatea de a se colora cu iodul. n 10
eprubete se fac diluii succesive ale probei de ser. Se pune apoi n fiecare din ele
amidon i iod i se observ coloraia. Se apreciaza cantitatea minima de ser
necesara hidrolizei amidonului.
Tehnica de lucru Se pregatesc 10 eprubete.
In prima eprubeta se pipeteaza 2 ml ser iar in celelalte 9 se pune cate 1 ml
NaCl. Din prima eprubeta se ia 1 ml si se pune in eprubeta 2, din eprubeta 2 se ia
1 ml si se pune in eprubeta 3, samd. In ultima eprubeta se ia 1 ml si se arunca. Se
adauga in toate eprubetele cate 2 ml solutie amidon. Se agita si se introduc in

termostat la 37 30 min. Dupa racire se adauga in fiecare eprubeta cate 3

picaturi de iod 0,1N. Eprubetele se agita si se observa culoarea.

Nr.
eprubeta
Dilutie
ser
UW

1/1

1/2

1/4

1/8

1/16

1/32

1/64

1/128 1/256 1/512

16

32

64

128

256

512

10

1024

Tehnica de lucru
Se pregatesc 10 eprubete.
In prima eprubeta se pipeteaza 2 ml ser iar in celelalte 9 se pune cate 1 ml
NaCl. Din prima eprubeta se ia 1 ml si se pune in eprubeta 2, din eprubeta 2 se ia
1 ml si se pune in eprubeta 3, samd. In ultima eprubeta se ia 1 ml si se arunca. Se
adauga in toate eprubetele cate 2 ml solutie amidon. Se agita si se introduc in
termostat la 37 30 min. Dupa racire se adauga in fiecare eprubeta cate 3
picaturi de iod 0,1N. Eprubetele se agita si se observa culoarea.
Calcul
Se calculeaza cantitatea de amidon (mg) hidrolizata de amilaza continuta in 1 ml
ser.
Rezultatul exprimat in UW se obtine inmultind titrul dilutiei ultimei eprubete in
care nu apare culoarea albastra cu 2.
Ex: eprubeta 4 este eprubeta dinaintea celei in care a aparut culoarea albastra
1/8 ml ser.........2 ml amidon 0,1%
1 ml ser............x
X = 2 x 8 = 16
Interpretarea rezultatelor
Culoarea eprubetelor reflecta gradul de hidroliza al amidonului:

- eprubetele colorate n albastru conin amidon nehidrolizat (diluia probei a fost

prea mare)
- eprubetele colorate n violet conin amilodextrine
- eprubetele colorate n brun-roscat au hidroliza incompleta, conin eritrodextrine
- eprubetele colorate slab glbui conin amidon partial hidrolizat, contin
flavodextrine
- eprubetele incolore conin amidon complet hidrolizat

Valori normale - Amilazemie ser: 16 32 UW

Valori crescute ale amilazei n ser: - pancreatite acute i cronice, insuficien
renal, carcinom de cap de pancreas, obstrucii intestinale, ulcer perforat, colici
biliare, afeciuni ale glandelor salivare, intoxicaii acute cu alcool;
Valorin sczute ale amilazei n ser - ciroze, carcinom hepatic, hepatite, alcoolism