Igien Sntatea Mediului

DETERMINAREA CONTAMINRII MICROBIENE A AERULUI I

SUPRAFEELOR
n aerul atmosferic exist
flor microbian proprie solului, apei (psihrofil), ce se dezvolt la 22C
flor microbian de contaminare de provenien animal/uman ce se dezvolt la
37C (flor mezofil)
Determinrile se realizeaz pentru aerul din ncperi, unde prezena germenilor
patogeni reprezint un risc de mbolnvire. Acest risc crete proporional cu densitatea
bacteriilor.
ncperi cu un control strict al numrului de germeni patogeni:
ncperi din spitale risc de infecii nosocomiale
industria farmaceutic, laboratoare galenice contaminarea produselor
industria (secii/fabrici) alimentar risc de contaminare a alimentelor i tia
uniti de ocrotire a copiilor - cree/grdinie unde exist copii de vrst
mic cu rezisten sczut
laboratoare de microbiologie
Germenii microbieni se gsesc n aer sub form de particule :
1. picturi Pflugge picturi de secreie nazal, buco-faringian i bronic
- conin mucus, resturi celulare rezultate din descuamarea epiteliilor i germeni
- sunt eliminate de orice persoan prin vorbit/strnut/tuse
- datorit existenei mucusului, ce acioneaz ca un strat protector, germenii i
pstreaz ntreaga puterea de contagiozitate (100%)
- datorit dimensiunilor mari (100 ) contaminarea se face pe distane mici 1-2
metri contaminare prin contact direct
2. nucleii de picturi
- picturile Pflugge pierd apa i devin nuclei de picturi, particule cu dimensiuni
mici care pot fi deplasate pe distane de 10-12 m modalitatea de contaminare
ntre ncperi, ntre etaje.
- puterea de contagiozitate este sczut la 50%, fiind deci o form prin care se
transmit germenii rezisteni n mediul exterior
- datorit acestor caracteristici
o se face izolarea copiilor cu boli contagioase (ale copilriei)
o spitalele de contagioase sunt distribuite pe pavilioane
3. praful microbian
- prin unirea nucleilor de picturi cu particule n suspensie din aer formnd
conglomerate de dimensiuni mari care se depun pe suprafee
- prin aceast form se transmit sporii agenilor patogeni
- datorit acestei forme n spaiile medicale
o nu se mtur i nu se scutur (s-ar readuce n aer praful microbian) ci se
spal
o nu se recomand n cabinetele medicale existena de ornamente (covoare,
erveele, bibelouri, etc)

Igien Sntatea Mediului

Pentru aprecierea contaminrii microbiene a aerului se utilizeaz 2 tipuri de indicatori:

direci se refer la determinarea agenilor etiologici transmii pe cale aerian.
Klebsiella, pneumococul, meningococul, bacilul Koch, Legionella etc
virusuri - rujeolic, rubeolic, gripal, paragripal, urlian, adenovirus etc.
Deoarece aceste microorganisme sunt dificil de evideniat, datorit diluiei a
acestora n masa de aer, aceti indicatori se determin numai n context
epidemiologic (exist boala i trebuie gsit calea de transmitere)
indireci (utilizai n mod curent, numii i indicatori sanitari bacteriologici)
1. Numrul total de germeni care se dezvolt la 37C
o Este un indicator cantitativ, global, orientativ
este cantitativ deoarece determin un numr de germeni
este un indicator global deoarece include att germeni patogeni i
nepatogeni din flora mezofil (care se dezvolt la 37c) dar i unii
germeni psihrofili de origine teluric
este orientativ deoarece cu ct valoarea este mai mare cu att crete
probabilitatea de existen a germenilor patogeni
o Se poate determina n paralel cu o determinare a NTG la 22C, temperatur la
care se dezvolt flora psihrofil, efectundu-se un raport care trebuie s fie n
favoarea florei telurice (3/1)
2. Streptococii
o Reprezint un indicator care ne arat contaminarea aerului cu flor nazofaringian i bucal
o Este un indicator indirect deoarece streptococii viridans sunt tulpini
nepatogene ce se gsesc la majoritatea persoanelor n nazo-faringe
o Prezena ns a streptococilor -hemolitici are o semnificaie epidemiologic
pe lng cea sanitar deoarece fiind germeni patogeni, semnaleaz prezena
unei persoane bolnave sau a unui purttor sntos. Purttorii sntoi pot fi
persoane care fac tratamente incomplete cu antibiotice (dispariia simptomelor
nu nseamn sterilizare) sau personal medical prin contactul permanent cu
persoane/germeni (neprotejare cu masc la efectuarea unor manevre)
3. Stafilococii
o Prezena n aer indic de asemenea o contaminare de origine uman.
o Tulpini nepatogene pot fi prezente n nazo-faringe i pe suprafaa cutanat
4. Bacterii coliforme
o Se utilizeaz pentru determinarea contaminrii obiectelor i suprafeelor
o Reprezint un indicatori de salubritate deoarece sunt germeni de origine
intestinal.
Mediile de cultur :
Geloz simpl pentru NTG
Geloz snge pentru streptococi i stafilococi

Igien Sntatea Mediului

Metodele de determinare a microorganismelor din aer

Metoda sedimentrii
Sunt reinui germenii microbieni din aer de la nivelul particulelor sedimentabile (picturi
Pflugge, praf microbian)
Tehnic :
const n expunerea plcilor Petri cu medii de cultivare n ncpere astfel :
n cele 4 coluri ale camerei i n centru pentru fiecare indicator
Camere mici - 1 n centru i 1 n col
Timpul de expunere variaz ntre 5-15 minute pn la 1 or n funcie de gradul
presupus contaminare a aerului (n acest timp plcile nu se manevreaz, personalul i
desfoar activitatea normal)
Factori n funcie de care se apreciaz timpul de expunere
o gradul de aglomerare
o ventilaia
o starea de sntate a persoanelor
o condiiile igienico-sanitare ale mediului
Dup expunere se acoper i se termostateaz la 37C, 24 de ore (pentru NTG la
22C se incubeaz la 22C)
se numr toate coloniile de pe plac pentru NTG sau coloniile cu aspect specific
pentru ceilali indicatori lund n considerare numai plcile Petri care au mai puin de
300 de colonii. Din acest considerent expunem un timp variabil.
Avantaje :
este simpl (poate fi efectuat de orice laborator de microbiologie)
ieftin
se pot efectua un numr mare de probe
Dezavantaje :
reine numai microbii de la nivelul particulelor sedimentabile (nucleii de picturi nu
sedimenteaz) deci nu obinem ntregul spectru bacterian
n acelai loc pot sedimenta 2 sau mai muli germeni vom avea o singur colonie
pentru mai muli microbi
nu ine cont de volumul de aer ci numai de timpul de expunere
Pentru a rezolva acest aspect prin determinri experimentale comparative s-a ajuns la
concluzia c n 5 minute pe o suprafa de 100 cm 2 sedimenteaz microbii din 10 l de aer.
Se calculeaz dup formula (Omelianski):
N (germeni/m3) =

n (numr colonii) x 10.000

S (suprafaa plcii Petri) x K ( timpul expunerii/5)

Igien Sntatea Mediului

Metoda prin aspirare

Dispozitivele constau din :
pomp de aspirare a aerului
gazometru msoar volumul de aer aspirat rezolvnd problema anterioar
dispozitiv de reinere
n funcie de dispozitivul de reinere se deosebesc :
1. metoda prin filtrare
filtre
o nisip steril fenomen de atracie electrostatic a bacteriilor
o solubile - zaharoz
o dup aspirarea unui volum de aer se spal nisipul cu lichid steril care
se nsmneaz, filtrele din zaharoz se dizolv,
membrane filtrante sterile care se aplic direct pe medii solide de cultur
2. metoda prin barbotare
aerul aspirat se barboteaz direct ntr-o soluie steril care se nsmneaz
3. metoda prin impact
se folosesc aparate speciale care proiecteaz aerul aspirat direct pe suprafaa
mediului de cultur
4. metoda electroprecipitrii
se ionizeaz particulele din aer i se depun pe electrozi unde se gsesc medii
de cultur solide
Avantaje :
metoda este foarte exact
se obin i nuclei de picturi
Dezavantaje :
numrul de probe obinute este mic (1h 6-7 probe)
Normele stabilite pentru ncperile de spital difer n raport de funcia spaiilor
controlate i de momentul determinrii i anume la 15 minute dup dezinfecie sau n timpul
lucrului.
Exist 3 categorii de ncperi riguros controlate :
I categ. laborator de soluii perfuzabile, depozite de materiale sterile, salon de prematuri
II categ. sli de operaie, sli de natere, saloane nou-nascui
III categ. saloane de copii sub 1 an, saloane ATI
Numrul de germeni admis n spitale
La 15' dup dezinfecie
Spaii
controlate NTG/m3
Stafilococi
I
200
0
II
300
0
III
500
0

Streptococi
0
0
0

n activitate
NTG/m3 Stafilococi
300
0
600
0
1.000
0

Streptococi
0
0
0

Igien Sntatea Mediului

! Nu se admite prezena Steptococului hemolitic i a Stafilococilor patogeni n aceste

spaii.
Determinarea contaminrii microbiene a obiectelor i suprafeelor
Se utilizeaz aceeai indicatori inclusiv coliformii.
n mediul spitalicesc aceste determinri se refer la:
verificarea sterilizrii materialului sanitar
echipament de protecie a personalului
lenjeria bolnavilor
alte obiecte i suprafee (mese, vesel, noptier)
Metodele de determinare
1. Metoda tamponului (tergerea unei suprafee delimitate)
- un ablon metalic steril cu aria interioar de 100 cm2 (l=10cm)
- se terge cu un tampon steril de vata (tergerea umed este mai eficient dect cea
uscat)
- tamponul se descarc n lichidul din eprubet
- se nsmneaz
- utilizat pentru mese, halate, pturi
2. Metoda peliculelor adezive
- se aeaz pelicula pe suprafaa obiectelor
- se ridic cu ajutorul unei pense sterile i se aplic pe suprafaa mediului de cultur
3. Metoda splrii
- frecvent pentru controlul bacteriologic al minilor - se fac micri de splare ntrun vas cu lichid steril
4. Metoda prin contact direct (amprentelor)
- const n aplicarea suprafeei de cercetat direct pe suprafaa mediului de cultur
(police, alte obiecte)
Suprafeele pot avea pn la 2 germeni/cm2, cu lipsa celorlali indicatori
Pe minile personalului sanitar care vine n contact cu bolnavii pot exista pn la 40
germeni/suprafaa unei mini, iar pentru medicii chirurgi se admit maxim 15 germeni/mn.