SUPORT TEORETIC LA CURSUL DE BIOCHIMIE STRUCTURAL (DESCRIPTIV)

Tema 2: Structura apei. Proprietile fizice ale apei. Ionizarea apei.

Produsul ionic al apei. Noiunea de pH. Sistemele tampon.

Corpul uman este reprezentat n proporie de aproximativ 65% de ap care

acioneaz ca solvent pentru substanele de care avem nevoie. Fiind un nucleofil

ic
bun, deseori apa este un participant direct n reacii de hidroliz i condensare.

lin
Apa este solvent ideal pentru organism, avnd rolul de transport al glucidelor,
vitaminelor hidrosolubile i al proteinelor de la locul de absorbie la diferite esuturi.

C
Apa intervine n purificarea organismului de produii finali de metabolism, precum i
particip la meninerea temperaturii corpului.

ie
Proprietile unice ale apei sunt derivate din structura sa.

m
Structura apei
Apa este o hidrur de oxigen, format din doi atomi de hidrogen i un atom de

hi
oxigen, unii prin legturi covalente; unghiul dintre cele dou covalene este de
104,5 o iar distana O-H - 0,965 .
oc
Bi
i
ie
m

n molecula de ap atomul de oxigen puternic electronegativ atrage

hi

electronii de la doi atomi de hidrogen. Aceasta conduce la legturi H-O polare n

oc

care atomii de hidrogen au o sarcin pozitiv i atomul de oxigen are o sarcin

negativ.
Molecula dipolar cu o distribuie inegal a electronilor ntre atomii de hidrogen i
Bi

oxigen, formeaz legturi de hidrogen cu alte molecule polare, funcionnd ca

solvent. Prin urmare, o molecul de ap este un dipol .
ra

Moleculele vecine al apei lichide interacioneaz ntre ele. Lipirea

ed

intermolecular ntre moleculele de ap rezult din atracia dintre sarcina parial

at

negativ de pe atomul de oxigen, cu sarcina parial pozitiv de pe atomul de

hidrogen a moleculelor de ap vecine. Aceasta se datoreaz formrii unor legturi
C

de natur electrostatic numite legturi de hidrogen

1

ic
lin
C
ie
m
hi
oc
Bi
i

Datorit aranjamentului tetraedric al electronilor n jurul atomilor de oxigen,

fiecare molecul de ap este potenial capabil s formeze legturi de hidrogen cu
ie

patru molecule de ap vecine. Acestea legturi sunt mai slabe comparativ cu

m

legturile covalente. O molecul de ap stabilete legturi de hidrogen cu alte patru

molecule numai la temperaturi foarte sczute (-183o C); la temperaturi ridicate o
hi

parte din legturile de hidrogen se rup din cauza agitaiei termice.

oc
Bi
ra
ed
at
C

Este surprinztoare diferena mic ntre numrul legturilor de hidrogen din

ghea (85%) i apa lichid (50%), comparnd fluiditatea apei cu rigiditatea gheii.
Explicaia este prin rapiditatea cu care moleculele de hidrogen se formeaz i se

2
Bobcova Svetlana
 desfac n apa lichid, timpul de njumtirii a fiecrei legturi fiind aproximativ de
10-11 s.
Exist numeroase modele pentru structura apei lichide; dar nici unul nu a
putut fi verificat experimental n totalitate. Totui, cele mai simple modele
sugereaz c apa lichid const din molecule de ap asociate ca n ghea, n
echilibru labil cu moleculele de ap libere.

Prezena legturilor de hidrogen ntre moleculele apei explic de ce cldura de

ic
vaporizare este att de mare. Starea lichid a apei a fcut posibil existena vieii.

lin
Proprietile fizice ale apei

C
Legturile de hidrogen i confer apei starea lichid pe un interval mare de

ie
temperatur (0o 100oC), totodat i un rol unic n desfurarea proceselor biochimice
din celulele vii: cldura specific, punct de topire i de fierbere ridicate; cldura de

m
vaporizare i conductibilitatea termic crescut; tensiunea superficial i constanta

hi
dielectric foarte mari.

oc
Cldura specific a apei este cldura necesar pentru a varia temperatura unitii de
mas cu un grad i este mai mare dect a oricrui alt lichid. Datorit acestui fapt apa
Bi
evit schimbrile brute ale temperaturii corpului.
i

Cldura de vaporizare - cantitatea de cldur, n calorii, necesar pentru

vaporizarea unitii de mas, este considerabil mai mare dect pentru oricare dintre
ie

lichidele obinuite.
m

Conductibilitatea termic este foarte mare; aceasta contribuie la rspndirea

hi

cldurii din regiunile situate n profunzimea corpului spre exterior.

oc

Constanta dielectric face ca apa s fie un solvent ideal i universal.

Bi

Apa este un solvent excelent pentru ambii compui ionici i cu greutate molecular
mic - neionici compui polari, cum ar fi zaharuri, ureea i alcoolii.
ra

Compuii ionici sunt solubili, deoarece apa poate depi atracia electrostatic
ed

dintre ionii prin solvatarea ionilor.

Compuii polari neionici sunt solubili, deoarece moleculele de ap pot forma legturi
at

de hidrogen cu gruprile polare ale lor.

C

Presiunea osmotic. Presiunea osmotic este o msur a tendinei de molecule de

ap s migreze dintr-o soluie diluat ntr-o soluie concentrat printr-o membran
semipermeabil. Aceast migrare a moleculelor de ap este numit osmoz. O soluie
3
 care conine 1 mol de particule dizolvate n 1 kg de ap este o soluie mono-osmolar.
n plasma sanguin, concentraia total normal a substanelor dizolvate este
remarcabil constant (275- 295 osmol).

Osmolaritatea se schimb n anumite condiii patologice, cum ar fi deshidratarea,

insuficiena renal, diabetul insipid, hipo- i hipernatremia, hiperglicemia.

ic
Ionizarea apei. Produsul ionic al apei. Noiune de pH.

lin
Masa atomului de hidrogen este foarte mic, unicul lui electron este atras de

C
atomul mai electronegativ oxigen. Protonul format poate fi desprins de oxigen ntr-o
molecul i trecut la oxigenul moleculei vecine; cu alte cuvinte apa are proprietatea de

ie
a se ioniza.

m
hi
oc
Bi
H2O + H2O OH-+H3O+
i

Hidroniu ion H3O + este deseori abreviat ca H + , ambii nseamn acelai lucru.
ie

Reacia de mai sus se numete auto-ionizarea apei. Faptul c echilibrul reaciei se

m

deplaseaz mult spre stnga, are o mare importan pentru sistemele vii. S-a constatat
hi

c viteza de migrare a ionului hidroniu H3O+ ntr-un cmp electric este mult mai mare
dect ceea a cationilor monovaleni, fapt destul de curios avnd n vedere volumul
oc

mare al ionilor H3O+ fa de cel al cationilor. Aceast anomalie se produce deoarece un

proton poate sri rapid dintr-un ion de hidroniu spre molecula de ap vecin, cu alte
Bi

cuvinte are loc translocarea protonilor cu o vitez mai mare dect viteza de migrare a
ionului H3O+ . Acest fenomen explic de ce gheaa, n ciuda structurii sale rigide, are
ra

conductibilitatea electric egal cu cea a apei.

ed

Produsul ionic a apei

at

Apa este un electrolit slab care disociaz n ioni, chiar dac ntr-o foarte mic
msur, conform reaciei:
C

H2O + H2O OH-+H3O+

4
Bobcova Svetlana
 Dovada acestui fapt este c i apa foarte pur, care nu conine nici un electrolit
dizolvat, manifest o conductibilitate electric msurabil, chiar dac extrem de
sczut.

Valoarea acestei conductibiliti permite calcularea gradului de disociere al apei.

Aceast valoare este foarte mic. Astfel, la temperatura camerei (22oC) doar

ic
1/10.000.000 molg sau 10-7 molg de H2O disociaz dintr-un litru. Deoarece fiecare
molecul de H2O disociat elibereaz un ion H+ i un ion OH-, concentraiile acestor ioni

lin
n apa pur sunt aceleai:

C
.

ie
Ca i pentru ionii altor electrolii slabi procesul de disociere al moleculelor de ap n

m
ioni poate fi caracterizat prin valoarea constantei de disociere corespunztoare:

hi
oc
Bi
Aceast ecuaie se poate simplifica.
i
ie

Deoarece apa se gsete aproape exclusiv sub form de molecule de H2O

m

nedisociate, variaia gradului de disociere nu va avea practic nici o influen asupra

concentraiei. n ecuaia anterioar, putem considera concentraia [H2O] practic
hi

constant. Valoarea Kc este de asemenea invariabil. Deci, tot membrul stng al

oc

ecuaiei obinute i, prin urmare i produsul [H+][OH-] este constant. Aceast

constant se numete produsul ionic al apei i este notat cu KW.
Bi

Kw =[H3O+ ] [HO- ] = 10-14 MOL2 /L2

ra

Semnificaia relaiei [H+][OH-] = Kw const n faptul c: oricare ar fi variaiile

ed

concentraiilor ionilor H+ sau OH-, produsul lor n orice soluie apoas rmne o valoare
constant, egal cu 10-14 la temperatur ambiant (22oC). n apa pur:
at
C

n legtur de produsul ionic al apei se fac dou precizri:

5
 produsul ionic al apei depinde numai de temperatur. Valoarea Kw se
modific considerabil odat cu creterea temperaturii ;
produsul ionic al apei este acelai (nu se modific) n soluii neutre, acizi sau
bazice.
n funcie de concetraiile ionilor de hidroniu dintr-o soluie, ele se mpart n:

soluii neutre, unde:

ic
lin
soluii acide, unde:

C
ie
m
soluii bazice, unde:

hi
oc
Astfel, orice soluie apoas, indiferent de reacia acesteia, trebuie s conin att
ioni H+, ct i ioni OH-. Deoarece concentraiile lor sunt invers proporionale cum
Bi
rezult din ecuaia

[H3O+] [OH-] = Kw
i

Se poate caracteriza cantitativ reacia oricrei soluii prin cunoaterea concentraiei

ie

acesteia n ioni [H3O+].

m

Noiunea de pH
hi

n locul concentraiilor ionilor H+ este mult mai comod de folosit logaritmul zecimal
oc

cu semn schimbat numit indice de hidrogen sau pH.

Bi

pH = log H +[ ]
ra

Cunoscnd c protonul nu exist liber, dar n form de hidroniu [H3O+],

ed

pH = -log [H3O+].
at

Rezult, de exemplu, c pentru:

C

[H+] = 10-4 ion-g/L pH = -(-4) = 4

De asemenea, dac: [H+] = 510-10 ion-g/L;

pH = log 5 10 106 = 10 log 5 = 9,30
Bobcova Svetlana
 Este evident c prima soluie (pH = 4) are o reacie acid, deoarece [H+] este mai
mare dect 10-7 ion-g/L. Dimpotriv, reacia celei de-a doua soluii (pH =9,30) este
alcalin, deoarece [H+] este mai mic dect 10-7 ion-g/L.

n soluiile acide pH < 7, n soluiile alcaline pH > 7 i n soluiile neutre pH = 7.

ic
lin
Deducem uor c aciditatea unei soluii crete atunci cnd pH-ul scade, iar
alcalinitatea crete cnd pH-ul crete.

C
De exemplu, la pH = 2, soluia are o reacie mai acid dect la pH = 4, deoarece n

ie
primul caz concentraia ionilor H+ (10-2 ion-g/L) este de o sut de ori mai mare dect
n al dilea caz (10-4 ion-g/L). n soluiile acide pH < 7, n soluiile alcaline pH > 7 i n

m
soluiile neutre pH = 7.

hi
Valoarea pH-ului are o mare importan pentru sistemele vii, viaa fiind posibil

oc
numai n anumite limite de pH; pH-ul sngelui de exemplu are valoarea de 7.35
7,4. Aceasta se datoreaz faptului c enzimele i desfoar activitatea n anumite
Bi
limite de pH. Meninerea constant a pH-ului se realizeaz pe mai multe ci, un rol
important revenind sistemelor tampon.
i

Echilibrul acido-bazic
ie

Pentru a nelege aciunea sistemelor tampon avem nevoie de noiuni de acid i

m

baz. Dupa teoria lui Arrhenius acizii sunt substane care la disociere n ap
hi

produc ioni de H+ i bazele sunt substanele care la disociere produc ionii OH-
oc

NaOH (aq) Na+ (aq) + OH- (aq) Baz

Bi

HCl (aq) H+ (aq) + Cl- (aq) Acid

Teoria disociaiei electrolitice a lui Arrhenius definete: Acizii sunt substane care,
ra

n soluii apoase pun n libertate ioni de hidrogen H+ . Bazele sunt substane care, in
ed

soluii apoase pun in libertate ioni hidroxid HO.

n stare pur (n absena apei), acizii i bazele nu sunt substane disociate i nu
at

conduc curentul electric, sau l conduc foarte slab. n soluie apoas sunt bune
conductoare de electricitate.
C

Johannes Brnsted i Thomas Lowry revizuind teoria acido-bazic a lui Arrhenius

au definit noiuni de acid i baz, dup cum urmeaz:

7
 Acizii sunt substane capabile de a ceda protoni H+. Bazele sunt substane capabile
de a accepta protoni H+. Cele dou reacii se implic reciproc; acidul cednd un
proton se transform n baz conjugat ; baza, acceptnd un proton de la acid, se
transform n acid conjugat:

HA + H2O A + H3O+

ic
Acid ap baz ion conjugat

lin
hidroniu

C
B + H2O BH+ HO
Baz ap acid ion conjugat

ie
hidroxid

m
Cuplurile acid / baz conjugat (sau baz / acid conjugat) sunt cupluri acido-

hi
bazice. Protonul nu poate exista n stare liber n soluie deoarece el este o particul

oc
foarte mic i extrem de reactiv. n toate reaciile chimice protonul H+ cedat de
acidul dintr-un cuplu acid / baz conjugat (de exemplu, Acid1) este acceptat de o
Bi
alt specie chimic, avnd caracter de baz, din alt cuplu acid / baz conjugat (de
exemplu, Baza2):
i

Acid1 Baza1 + H+
ie

Baza2 + H+ Acid2
se adun echilibrele
m

Acid1 + Baza2 Baza1+ Acid2

hi

Se stabilesc astfel echilibre cu schimb de protoni n care se pot transfera unul sau
oc

mai muli protoni ntre acidul dintr-un cuplu ( Acid1 / Baza1) i baza din alt cuplu
(Acid2 / Baza2). Echilibrele cu schimb de protoni la care particip acidul dintr-un
cuplu i baza din alt cuplu sunt echilibre acido-bazice sau reacii acido-bazice.
Bi

Sistemele tampon
ra

Soluiile formate dintr-un acid slab i sarea lui cu o baz puternic, sau dintr-o
ed

baz slab i sarea acesteia cu un acid puternic, care au rolul de a se opune

variaiilor mari de pH la adaosul de acizi sau baze n cantiti limitate constituie
at

sisteme tampon.
C

Sistemele tampon se caracterizeaz prin doi parametri:

pH ul pe care-l menine constant un sistem tampon;
capacitatea de tamponare a sistemului tampon.
8
Bobcova Svetlana
 pH-ul, ecuaia lui Henderson-Hasselbalch

Pentru determinarea pH-ului optim pe care l menine constant un sistem

tampon, vom lua un sistem tampon format dintr-un acid slab i sarea acestuia cu o
baz puternic. Acidul slab este disociat puin:

ic
lin
Constanta relativ de aciditate va fi:

C
ie
din care reiese:

m
hi
oc
Logaritmm expresia de mai sus i nmulim cu(-1):
Bi
i

Ecuaia obinut poart denumirea de ecuaia lui Henderson-Hasselbalch i

ie

reprezint ecuaia fundamental a sistemelor tampon. n forma cea mai general se

poate scrie:
m
hi

[sare]
pH = pKa + log10
oc

[acid]

Aceasta este posibil deoarece acidul este puin disociat, iar sarea este total
Bi

disociat.
ra

HA H+ + A- (acidul este puin disociat)

ed

NaA Na++ A- (sarea este puin disociat)

at

Reiese c A- provine n cea mai mare parte din sare, acidul slab fiind foarte puin
C

disociat. Concentraia total a acidului HA din acelai motiv este egal cu

concentraia acidului nedisociat. Rezult c

pH = pKa + log101, sau pH = pKa

9
 deoarece concentraiile molare sunt egale:

[sare]= [acid]

Aadar, pH-ul optim pe care-l menine constant un sistem tampon este egal cu

valoarea pKa a acidului slab din sistemul tampon respectiv.

ic
n concluzie: un sistem tampon este mai eficient ntr-un interval de

lin
pH = pKa 1

C
Capacitatea de tamponare

ie
Capacitatea de tamponare a sistemelor tampon depinde de concentraiile

m
molare efective ale acidului i bazei conjugate din sistemul tampon respectiv. Cu

hi
mrirea concentraiei componentelor sistemelor tampon se mrete capacitatea de
tamponare.
oc
Mecanisme de aciune a sistemelor tampon
Bi
Sistemele tampon au rolul de a se opune variaiilor mari de pH la adaosul de
i

acizi sau baze n cantiti limitate. Pentru a lmuri mecanismul de aciune a

sistemelor tampon vom studia sistemul tampon format dintr-un acid slab i
ie

sarea acestuia cu o baz puternic H3C COOH/H3C COONa, care n soluie va

forma urmtorii ioni:
m

H3C COOH H3C COO- + H+ (puin disociat)

hi

H3C COONa H3C COO- + Na+ (total disociat)

oc

Adugm acizi, deci H+. Ca rezultat, are loc procesul de consumare a

protonilor H+, care vor fi unii cu CH3 COO-, formnd un acid slab puin
Bi

disociat CH3 COOH, iar pe de alt parte protonii adugai vor diminua i mai
mult disocierea acidului prin deplasarea echilibrului primei reacii spre stnga.
ra

Adugm baze, deci HO-. Ca rezultat, are loc procesul de consumare a HO-;
aceti ioni vor fi legai de protoni (H+) din prima reacie, formnd apa. Prin
ed

consumarea H+, echilibrul primei reacii este deplasat spre dreapta i prin
urmare H+ rezultai vor fi n msur s neutralizeze ionii HO-.
at
C

Sisteme tampon biologice

pH-ul sangvin este meninut ntre 7,36 i 7,44 cu un pH intracelular de
aproximativ 7,1 ( ntre 6,9 i 7,4). Pn la excreia acidului produs sub form de CO2

10
Bobcova Svetlana
 n aerul expirat sau de ioni n urin, este nevoie de neutralizare la nivelul sistemelor
tampon majore ale organismului:

Sistemele tampon funcionale din organismul uman sunt:

H2CO3/NaHCO3 - extracelular, plasm

Protein/Proteinat de Na - extracelular, plasm

ic
NaH2PO4/Na2HPO4- extracelular, plasm

lin
Deoxi-Hb/Oxi-Hb- intracelular, eritocite

C
KH2PO4/K2HPO4 - intracelular

ie
Sistemul tampon al bicarbonatului - cel mai important

m
Principala surs de acizi metabolici a organismului o reprezint CO2, produs n

hi
principal prin oxidarea acetilCoA la nivelul ciclului Krebs. n condiii metabolice

oc
normale, sunt generai 13 moli de CO2 pe zi ( aproximativ 0,5- 1kg). Dizolvat n ap,
va reaciona cu aceasta producnd acid carbonic, reacie accelerat de anhidraza
Bi
carbonic. Acidul carbonic obinut este un acid slab care disociaz parial n H+ i
HCO3- .
i

CO2 + H2O H2CO3 H+ + HCO3-

ie

pKa pentru acidul carbonic este 3,8. La un pH sangvin de 7,4 acidul este
m

aproape complet disociat i teoretic incapabil s neutralizeze i s genereze

hi

bicarbonat, adic s menin constant pH-ul sngelui. Explicaia acestui fapt va fi

oc

prezentat mai jos.

Acidul carbonic poate fi refcut din CO2 deoarece concentraia de gaz dizolvat
Bi

n snge este de 500 de ori mai mare dect a acidului carbonic.

ra

pKa pentru sistemul tampon al bicarbonatului combin astfel Kh ( constanta

de hidratare sau de solubilitate a CO2 n ap n vederea formrii de H2CO3) cu
ed

valoarea chimic a pKa obinndu-se 6,1

at
C

[HCO3-] concentraia bicarbonatului n snge

[H2CO3] concentraia acidului carbonic n snge, care se calculeaz din relaia:

11
 Kh este aproximativ 0,03 (mmol/L)/mmHg, iar pCO2 este presiunea parial a
gazului n sngele arterial.

Din cele dou relaii va rezulta una singur i anume

ic
lin
C
n care pH- exprim aciditatea sngelui.

ie
Din ultima formul reiese c puterea de tamponare a sngelui depinde numai
de concentraia bicarbonatului dizolvat n snge i de presiunea parial a bioxidului

m
de carbon n alveolele pulmonare.

hi
Dac pH-ul sngelui scade, ca urmare crete concentraia de H+, va crete

oc
pentru scurt timp i concentraia H2CO3; dar va reveni rapid la nivelul normal prin
descompunerea sa cu generarea de ap i CO2. Prin urmare creterea concentraiei
Bi
H+ se transform n final n creterea de pCO2. Dac din contra pH-ul sngelui crete
va crete temporar i concentraia ionului bicarbonat (HCO3-), datorit disocierii
i

H2CO3; dar se va restabili rapid cnd CO2 din atmosfer se dizolv i se hidrateaz la
ie

H2CO3. Aadar, orice modificare a pH-ului sangvin la nivel pulmonar va fi rapid

echilibrat de rezerva de CO2 gazos prin modificarea ventilaiei pulmonare.
m
hi
oc
Bi
ra
ed
at
C

12
Bobcova Svetlana