Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Rezumat. În articol sunt prezentate rezultatele studiului influenței concentrației dioxidului de sulf și acidității
active (pH) asupra vitalității microorganismelor oenologice. Drept criteriu de bază a servit concentrația dioxidului de
sulf molecular, care reprezintă factorul primordial al efectului antiseptic pentru mediile studiate. Au fost determinate
concentrațiile dioxidului de sulf molecular în soluțiile decontaminante, necesare pentru asigurarea garantată a sterilității
tehnologice. S-a stabilit, că aceste concentrații nu trebuie să fie mai mici de 35 mg/dm3 pentru soluțiile cu termen scurt
de contact, și nu mai mici de 10 mg/dm3 în cazul soluțiilor utilizate pentru decontaminare prin păstrare îndelungată.
Rezultatele obținute au fost utilizate la optimizarea regimurilor tehnologice de fabricare a mustului de struguri
sulfitat-acidifiat, pentru care stabilitatea microbiologică este asigurată nu doar de concentrații bacteriostatice de dio-
xid de sulf, dar și prin diminuarea gradului de contaminare. De asemenea, a fost argumentată posibilitatea igienizării
comunicațiilor, recipientelor și aparatajului oenologic cu ajutorul vinurilor sulfitate și acidifiate care, devenind soluții
decontaminante, își păstrează nativitatea.
Cuvinte-cheie: dioxid de sulf molecular, soluții decontaminante, sterilitate tehnologică, microorganisme oenologice.
Akademos 4/2015| 45
TEHNOLOGII
Mecanismul activității antiseptice a dioxidului de ganismelor, iar pentru păstrarea garantată în condiții
sulf molecular nu este clar elucidat până în prezent. Se nesterile a mustului de struguri sulfitat, Skardovi și
consideră că acesta deteriorează reversibil sau irever- coautorii recomandă cca 8 mg/dm3 [citat după 7].
sibil enzimele vitale pentru microorganisme, iar acti- Studiile preliminare proprii au permis elabora-
vitatea sporită poate fi explicată prin particularitățile rea unei tehnologii de pregătire și păstrare în condiții
sale de transport prin membrana celulară, care fiind nesterile a mustului de struguri sulfitat. Stabilitatea
încărcată cu sarcină negativă este practic impermea- microbiologică este asigurată în acest caz prin ridica-
bilă pentru ioni de bisulfit. După cum se constată as- rea acidității active (diminuarea pH), fapt ce permi-
tăzi, dioxidul de sulf molecular este de 1 000 de ori te creșterea ponderii dioxidului de sulf molecular la
mai nociv decât ionul de bisulfit față de bacterii (Es- concentrații moderate de dioxid de sulf total [4]. În
cheria coli), de aproximativ 500 de ori față de drojdiile calitate de criteriu tehnologic reper, capabil să asigure
oenologice (Saccharomyces cerevisiae) și de peste 100 stabilitatea microbiologică a mustului, în condiții de
de ori față de mucegaiuri (Aspergillus niger) [3]. respectare strictă a normelor sanitare și igienice, a fost
În literatura de specialitate sunt prezentate relațiile stabilită concentrația dioxidului de sulf molecular de
echilibrului dinamic între concentrația ionului de bi- 5 mg/dm3 la temperatura de 15oC [8]. Regimurile tehno-
sulfit și concentrația dioxidului de sulf solubilizat (SO2 logice elaborate permit fabricarea și păstrarea mustului
molecular) în funcție de aciditatea activă a mediului, de struguri sulfitat-acidifiat, inclusiv a mustului de stru-
temperatură, concentrația alcoolului [4]. Însă ponde- guri extractiv cu diverse destinații de utilizare [9,10].
rea dioxidului de sulf molecular în produse vinicole În același timp, minimizarea riscurilor de produ-
sulfitate reale poate fi cu o diferență semnificativă, cere la implementarea masivă a tehnologiei elaborate
fapt ce explică, în mare măsură, stabilitatea lor necesită concretizarea criteriilor tehnologice care ar
microbiologică diferită. Stabilitatea microbiologică a asigura nu numai efectul microbiostatic, dar și efectul
produselor este asigurată de proprietățile microbio- antiseptic (de sterilitate tehnologică) pentru o gama lar-
statice (care exclud dezvoltarea și activitatea micro- gă de microorganisme întâlnite în practica oenologică,
organismelor) și antiseptice (care asigură distrugerea fapt ce ar putea diminua cheltuielile legate de necesi-
microorganismelor) ale conservanților și în particular tatea respectării stricte a normelor sanitare și igienice.
ale dioxidului de sulf [5]. Scopul prezentei lucrării constă în determinarea
Actualmente în literatura de specialitate lipsesc criteriilor de asigurare garantată a efectului antiseptic
informații concrete despre concentrațiile de dioxid (de sterilitate tehnologică) la utilizarea dioxidului de
de sulf care asigură proprietăți microbiostatice și an- sulf în vinificație și elaborarea recomandărilor teh-
tiseptice garantate pentru microorganismele oenolo- nologice de folosire rațională a dioxidului de sulf în
gice în sisteme reale. În plus, datele prezentate nu pot soluții decontaminante.
fi întotdeauna interpretate univoc din cauza lipsei de
informație completă despre condițiile experimentale, MATERIALE ȘI METODE DE CERCETARE
ceea ce complică utilizarea lor în practica vinicolă. Efectul antiseptic (sterilizant) al dioxidului de sulf
Este cunoscut faptul că acțiunea dioxidului de sulf asupra microorganismelor întâlnite în practica oeno-
asupra microorganismelor depinde atât de concentrația logică a fost cercetat în soluții obținute pe apă distilată,
acestuia, cât și de gradul de contaminare microbiologi- must de struguri și vin sec alb, în prealabil sterilizate,
că a mediului [2]. În experimentele cu folosirea dioxi- denumite în continuare soluții decontaminante.
dului de sulf cu atomi marcați s-a demonstrat că vite- Soluțiile decontaminante au fost sulfitate cu soluție
za lui de penetrare în interiorul drojdiilor este destul concentrată de dioxid de sulf până la concentrații de
de redusă, iar concentrația de echilibru se stabilește 100-450 mg/dm3 și acidifiate cu acid tartric până la va-
în decurs de cel puțin 5 min, ceea ce explică faptul că lori ale pH 3,0-2,4. În soluțiile decontaminante astfel
acțiunea sa nu este momentană [6]. preparate au fost determinate concentrațiile dioxidului
Microorganismele oenologice sunt suficient de de sulf liber [4]. Ulterior s-au calculat concentrațiile
rezistente la concentrații ridicate de dioxid de sulf. În de dioxid de sulf molecular, conform relațiilor descri-
musturile de struguri sulfitate până la 600-2000 mg/dm3 se în literatura de specialitate [3].
au fost depistate drojdii Saccharomycodes ludwigii și Drept sursă de infecție microbiologică a servit
Schizosaccharomyces sp capabile să fermenteze zaha- amestecul de microorganisme oenologice, preparate
rurile cu acumularea a 0,5-1,0% de alcool. Se conside- prin fermentarea spontană a mustului obținut din stru-
ră că asemenea concentrații sporite de dioxid de sulf guri albi (păstrați îndelungat la frig) afectați de muce-
ar trebui să asigure cel puțin 4 mg/dm3 de dioxid de gai. În sursa de infecție (must cu fermentare spontană)
sulf molecular pentru inhibarea activității microor- au fost depistate drojdii oenologice în concentrații de
46 |Akademos 4/2015
TEHNOLOGII
120-150 mil/cm3 (g. Saccharomyces), drojdii contami- dificări vizuale (tulburare, degajare de gaz etc.), care
nante (g. Brettanomyces, g. Saccharomycodes), bacterii semnifică demararea procesului de dezvoltare a mi-
(g. Acetobacter, g. Streptococcus) și mucegaiuri (g. As- croorganismelor. Dacă schimbări vizuale nu s-au de-
pergillus, g. Mucor, g. Penicillium). pistat timp de 7 zile, mostra a fost considerată accep-
În calitate de mediu de cultivare pentru deter- tată, iar soluția decontaminantă care a asigurat acest
minarea stării microorganismelor după contact cu efect – corespunzătoare criteriilor de sterilitate tehno-
soluțiile decontaminante a fost utilizat mustul de logică. Mostrele mediului de cultivare din eprubetele
struguri vitaminizat comercial steril în care erau in- neacceptate (cu începutul procesului de dezvoltare a
troduse mostrele soluțiilor decontaminante. Sche- microorganismelor) au fost cercetate prin metode mi-
ma experimentelor prevedea introducerea în soluția crobiologice de rutină pentru depistarea genurilor de
decontaminantă (2 cm3, în eprubete sterile) a sursei microorganisme prezente [11, 12, 13].
de infecție (0,2 cm3). După păstrarea variantelor ex-
perimentale în decurs de 5 min, 1 oră, 4 ore și 24 de REZULTATE ŞI DISCUŢII
ore, în amestec era introdus mediul de cultivare steril Rezultatele observațiilor asupra mediului de cul-
(18 cm3). Experimentele au fost efectuate în trei rân- tivare din eprubete cu informația despre dezvoltarea
duri, la temperatura ambiantă (20-22oC), fără termos- microorganismelor în funcție de concentrația dioxi-
tatare și agitare. dului de sulf și aciditatea activă în soluția decontami-
Observațiile asupra mediului de cultivare din nantă, precum și durata de contact a sursei de infecție,
eprubete erau efectuate până la apariția primelor mo- sunt prezentate în tabelul 1.
Tabelul 1
Influenţa duratei de contact a sursei de infecţie cu soluţia decontaminantă
asupra dezvoltării microorganismelor în mediul de cultivare
Akademos 4/2015| 47
TEHNOLOGII
Tabelul 2
Concentraţii minime de dioxid de sulf molecular
în soluţii decontaminante cu sterilitate tehnologică
Concentrația minimă de dioxid de sulf molecular care a asigurat sterilitatea
Soluția decontami- tehnologică la temperatura 20oC, după contactare (în mg/dm3)
nantă, pe bază de:
5 min 1 oră 4 ore 24 ore
apă distilată 38,4 23,1 19,2 12,0
must de struguri - 31,1 22,0 13,9
vin sec 36,2 27,6 17,2 9,4
Mediile de cultivare, unde în calitate de soluție malț agarizat (condițiile de cultivare +24±2°C, durata
decontaminantă a fost utilizat vinul sec sulfitat-acidi- 5 zile). Identificarea genurilor de microorganisme în
fiat, după premisele de activitate microbiologică sau izolatele obținute s-a efectuat pe baza analizei caracte-
după 7 zile de păstrare au fost supuse microscopiei și risticilor morfologico-culturale [13, 14].
însămânțării în cuve Petri pe mediul nutritiv must de
48 |Akademos 4/2015
TEHNOLOGII
Tabelul 3
Rezultatele testelor microbiologice ale variantelor experimentale
SO2 SO2
Durata contactului sursei de infecție cu soluție decontaminantă
total mg/dm3
pH
mg/ liber/
dm3 5 min 1 oră 4 ore 24 ore
mol.
Drojdii – 4 colonii Drojdii – 2 colonii Drojdii – 1 colonie Drojdii – 1 colonie
g.Saccharomyces g.Saccharomices g.Saccharomycodes
g.Saccharomycodes
g.Saccharomycodes g.Saccharomycodes
2,8 40/5,2 Mucegaiuri – Mucegaiuri – Mucegaiuri – Mucegaiuri –
2 colonii 2 colonii 2 colonii 2 colonii
Drojdii – 1 colonie
g.Saccharomycodes
Akademos 4/2015| 49
TEHNOLOGII
50 |Akademos 4/2015
TEHNOLOGII
Akademos 4/2015| 51