GENETICA MD - Curs 9 Noiembrie 2014

GENETICA
MEDICINA DENTARA
CURS 9
4 decembrie 2014
AUTOR:
PROF.DR. EMILIA SEVERIN
UMF “Carol Davila”
Bucuresti
EXPRESIA GENICA
(FUNCȚIA GENEI)
EXPRESIA GENICA
(FUNCȚIA GENEI)
Expresia
informației
genetice
se realizează ADN PROTEINĂ
in
toate celulele
prin transferul
informației de
la:
3
Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright
EXPRESIA GENICA
(FUNCTIA GENEI)
1. TRANSCRIPTIA genei
structurale.
Transferul
informatiei 2. FORMAREA ARNm matur.
genetice de la
nivelul genelor la
nivelul caracterelor 3. TRANSPORTUL ARNm matur din
nucleu in citoplasma, la ribozomi.
fenotipice
corespunzatoare
implica mai multe
4. TRANSLATIA.
ETAPE:
5. PROCESAREA post-translationala si
asamblarea proteinei intr-o structura cu
activitate biologica.
6. FINISAREA caracterelor fenotipice,

proces la care participa pe langa
proteine si alte biomolecule.
Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 4
EXPRESIA GENICA
In cursul fiecarei etape

se pot produce ERORI
care perturbă transferul
informatiei genetice
generând
BOLI / ANOMALII
GENETICE.
5
EXPRESIA GENICA
EXPRESIA
GENICĂ
Este un proces Este un proces

molecular, controlat
biochimic. genetic.
6
GENETICA MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright
De la GENA la PROTEINA
ADN
CATENA
ADN
matrita
TRANSCRIPTIE
ARNm
TRANSLATIE
PROTEINA
7
GENETICA MD
FLUXUL INFORMAȚIONAL
ADN ARN PROTEINE CARACTER
PROTEINE CARACTERE
STRUCTURALE FIZICE
PROTEINE CARACTERE
ENZIMATICE METABOLICE
CONTROLUL
HORMONI CRESTERII SI
DEZVOLTARII
GENA
STRUCTURALA
(codifica un lant
polipeptidic)
8
FLUXUL INFORMAȚIONAL
Grosimea buzelor
9
ASEMĂNĂRI și DEOSEBIRI intre Pk și Ek
PROCARIOTE EUCARIOTE
ADN
Nucleu
ARN hn
MATISARE
ARNm
SINTEZA
PROTEICA
CITOPLASMA
GENETICA MD CURS 9 - A nu se copia sau distribui fara copyright 10

TRANSCRIPȚIA
ARN polimeraza ADN-catena 5’ – 3’
ribonucleotide
ARN
ADN-catena 3’ – 5’, matrita
Directia transcriptiei
Genetica MD 11
Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright
TRANSCRIPȚIA GENEI STRUCTURALE
ARN polimeraza
Situsuri de
Start site Splice sites Stop site
decupare
Promotor Exon 1 Intron Exon 2 Intron Exon 3 ADN
5´ 3´
Exon 1 Exon 2 Exon 3 ARNm
"Artwork originally created for the National Cancer Institute. Used here with the permission of the artist, Jeanne Kelly. Copyright Jeanne Kelly 2011."
12
GENETICA MD
PROCESAREA ARN inaintea TRANSLAȚIEI
ADN Exon 1 Intron Exon 2 Intron Exon 3
5´ 3´
TRANSCRIPTIE
ARNhn Exon 1 Exon 2 Exon 3
MATISARE
ARNm Exon 1 Exon 2 Exon 3
TRANSLATIE
Proteina
"Artwork originally created for the National Cancer Institute. Used here with the permission of the artist, Jeanne Kelly. Copyright Jeanne Kelly 2011."
13
GENETICA MD
MATISAREA ALTERNATIVĂ
ADN
ARNhn
MATISARE ALTERNATIVA
ARNm
TRANSLATIE TRANSLATIE TRANSLATIE
PROTEINA A PROTEINA B PROTEINA C
14
UNITATE TRANSCRIPȚIONALA
Activator
PROMOTOR ADN
TRANSCRIPT INITIAL TRANSCRIPTIE

ARNhn
ARNm MATISARE
ARNm matur
MECANISMUL
TRANSCRIPTIEI
LA EK
Genetica MD 15
ARNm matur la Ek
(MONOCISTRONIC)
5’Cap UTR AUG Exon 1 Exon 2 Exon 3 UAA UTR POLI-A 3’
– 7 metil-guanina (m7Gpp)
asigura stabilitatea
ARNm,protectie impotriva 5’Cap
degradarii sale in citoplasma
si faciliteazarecunoasterea si
fixarea la ribozom.
– coada de adenozine
asigura stabilitatea ARNm si
transportul din nucleu in POLI-A 3’’
citoplasma.
Genetica MD 16
STRUCTURA UNEI GENE CARE CODIFICA O
PROTEINA
1. este flancata de 2
regiuni laterale sau
secvente de reglare a
genei 4. TIPURI de SECVENTE:
S.S.T. = situs de initiere
(regiunea laterala 5’ si a transcriptiei
regiunea laterala 3’).
• 5’ UTR= untranslated
region
REGIUNEA • ATG=codon initiator
• EXON1
CENTRALA 2. este transcrisa integral • INTRON1 (5’GT – AG3’)
(cadrul de lectura a informatiei in ARNhn. • EXON2
genetice)
• TAA, TAG, TGA =codoni
stop
• 3’UTR
• S.T.T., AATAAA= situsul
de terminare a
3. contine mai multe transcriptiei, semnal al
tipuri de secvente cu poliadenilarii
functie diferita.
17
STRUCTURA UNEI GENE CARE CODIFICA O
PROTEINA
1. regiunea
laterala 5’
(promotorul 2. regiunea
genei implicat laterala 3’
REGIUNI in initierea ( imprecis
LATERALE: transcriptiei delimitata si
este format putin
din TATA-box, cunoscuta).
CAAT-box si
GC-box).
18
PROMOTORUL GENEI STRUCTURALE Ek
5´ GC CCAAT TATA Exon 1 Intron 1 Exon 2 3´

~ 200 pb ~ 100 pb ~ 30 pb
STARTUL
TRANSCRIPȚIEI
19
PROMOTORUL
• TATA – box
Contine secventa 5’-TATAAAA-3’ situata la 25 pb amonte de S.S.T
- Locul unde se fixeaza ARN polimeraza
- Implicata in demararea exacta a transcriptiei
- Asigura transcriptia la nivel bazal;
- Prezenta in majoritatea genelor specifice de tesut.
• GC – box
Contine secventa 5’-GGGCGG-3’ in mai multe exemplare, al caror numar si
pozitie variaza in functie de gena, situate intre 50-100 pb in amonte fata de
S.S.T;
- Moduleaza transcriptia bazala a genelor specifice;
• CAAT – box
Contine secventa 5’-GGCCAAT-3’ situata in amonte de TATA – box , circa 80 pb
fata de S.S.T ;
- Este locul de legare al unor factori de transcriptie;
- Moduleaza transcriptia bazala.
20
MODULAREA ACTIVITĂȚII PROMOTORULUI
ACTIVATOR INHIBITOR
(ENHANCER) (SILENCER)
– stimuleaza transcriptia – suprima transcriptia
21
TRANSLAȚIA
(decodificarea informatiei genetice)
1. are loc in citoplasma, la nivelul ribozomilor;
2. este necesara prezenta apartului de

translatie;
3. intre secventa de nucleotide a ARNm matur si

secventa aminoacizilor din lantul polipeptidic
exista un sistem de corespondenta reprezentat
de CODUL GENETIC.

APARATUL TRANSLAȚIEI
1.ARNm matur 2.Ribozomii 3.ARNt
4.Proteine
5.Surse de
(factori de energie
initiere, elongatie
(ATP, GTP)
si eliberare)

CODUL GENETIC
Phe ARNt
RIBOZOM
TRIPLET
AAA ARNm
UUU
Este un sistem de corespondență intre o anumita

secventa de nucleotide din ARNm si un anumit
aminoacid din structura lantului polipeptidic.

CODUL GENETIC
Este codul tripletelor de

baze azotate din ARNm care
poartă informaţia genetică
necesară sintezei
aminoacizilor din catena
polipeptidică a proteinei
primare.
La Ek, numai ARNm

La Pk este o relaţie matur este coliniar cu
directă între ordinea proteina, adică, lipsesc
nucleotidelor ARNm şi pauzele sau
ordinea aminoacizilor. întreruperile în
secvenţa ARNm.

DESCIFRAREA CODULUI GENETIC
CODUL GENETIC
a fost descifrat
Experimentul experimental.
s-a realizat
“in vitro” S-a folosit un sistem
celular liber (cell-free
system) din care fac
parte componente ale
celulei E.coli
reprezentate de:
ARN
ARNt cu Factori proteici

RIBOZOMI
aminoacizi activaţi necesari translaţiei
26
CODUL GENETIC
Al doilea nucleotid
Al doilea
Second nucleotid
nucleotide
A A
T T
G
A
G
A
Phe Tyr Cys
C Ser
C
Leu Stop
G G Stop Trp
G
Primul nucleotid
G
nucleotide
A
A
His
G G Leu Pro Arg
C C
T Gln
T
nucleotid
T T
C C Ile Asn Ser
PrimulFirst
G G Thr
G G
Met Lys Arg
A A
G G
C
Asp
T
C Val Ala Gly
T
A A Glu
G G
DNAMonocatena
strand ADN
Adapted from: http://upload.wikimedia.org/wikipedia/en/d/d4/RNA-codons.png
Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 27

Genetica MD
Experimentele au fost realizate de NIRENBERG, 1961.

R.HOLLEY si H.G.KHORANA au adus contributii importante la descifrarea
codului genetic.
Primul pas în descifrarea codului genetic a precizat numărul

exact de nucleotide care specifică un aminoacid.
S-a utilizat drept mesaj pentru translatie un ARNm sintetizat

artificial avand o secventa nucleotidica cunoscuta.
S-a realizat sinteza unei proteine în prezenţa unui

HOMOPOLIMER (ARNm format din nucleotide sintetice de un
singur tip) sau HETEROPOLIMER (ARNm format din
polinucleotide sintetice cu secventa cunoscuta).

De exemplu,
1. ARNm sintetic poliuracil – un ARNm sintetizat artificial format

numai din uracil a fost introdus într-un sistem celular liber realizându-
se sinteza unui lanţ polipeptidic format numai din fenilalanină;
Concluzia, 5’- UUU -3’ este codonul pentru PHE (fenilalanină).
2. poli(A) - 5’- AAA -3’ este codonul pentru LYS (lizină).
3. poli(C) - 5’- CCC -3’este codonul pentru PRO (prolină).
4. poli(G) - 5’- GGG -3’este codonul pentru GLY (glicină).

Marshall NIRENBERG (1961)
National Institute for Health, USA
SISTEM CELULAR LIBER

(cell-free system)
RIBOZOMI
ARNt
eprubeta AMINOACIZI
ENZIME
ATP, GTP
+ ARNm ‘5-UUU-3’ = PROTEINA


ARNm
Corespondența intre o anumita secventa de 3 nucleotide din ARNm

si un anumit aminoacid din structura lanțului polipeptidic.

a facilitat cunoașterea:
1.Numărului de baze necesare

pentru specificarea unui
aminoacid ( 3 baze azotate, un
triplet);
2.Tipurilor de nucleotide care

formează codonul;
3.Ordinea acestor nucleotide în

codon.
4.Mecanismului si a
consecintelor unor mutatii
genice punctiforme ce produc
insertia/deletia unui nucleotid.
33
CARACTERISTICILE CODULUI
GENETIC
1. codonul este alcătuit din 3 nucleotide adiacente şi

corespunde unui aminoacid din lanţul polipeptidic.
2. numărul de codoni este 64; dintre aceştia 61 codifică

aminoacizi şi se numesc codoni sens, 3 sunt codoni nonsens.
3. codul are semnale de început AUG – codon iniţiator şi de

sfârşit UAA,UAG, UGA – codoni stop.
4. codul genetic este nesuprapus,

adică, doi codoni succesivi nu au nucleotide comune.

CARACTERISTICILE CODULUI GENETIC
5.citirea codului genetic se face într-un singur sens, unidirecţional de la

5’- la -3’ ; citirea se face continuu fără semne de separare între codoni.
6.codul genetic este specific – fiecare codon are o anumită ordine a

nucleotidelor si
semnifica totdeauna acelasi aminoacid.
7.codul genetic este degenerat (redundant) – toţi aminoacizii, cu excepţia

metionnei şi triptofanului, sunt specificaţi de mai mult de un codon. Un acelaşi
aminoacid este codat de mai mulţi codoni.
8.codul genetic este universal – aceiaşi codoni specifică aceiaşi

aminoacizi indiferent se specie.
35
*EXCEPTIE,
Codul genetic NUCLEAR se deosebeşte
de cel MITOCONDRIAL prin:
TABEL
CODONI MITOCONDRIE
standard / NUCLEU Mamifere Drosophila Neurospora Drojdie Plante

*CONVENȚIONAL, fiecare codon este indicat în
ARNm ;
In realitate, codonii sunt în secventa ADN.

De exemplu,
ARNm 5’- AUG -3’

ADN 3’- TAC -5’
ADN 5’- ATG -3’

TRANSLAȚIA
- este complexă şi implică

mai multe componente - fiecare aminoacid este
recunoscut de către o moleculă
celulare diferite (ARNm, de ARNt specifică şi se fixează
ribozomi, ARNt, - are loc formarea la capătul
aminoacizi, enzime şi complexului ARNm –
CCA -3’ al acestuia cu ajutorul
cofactori proteici – factori ribozomi (complex unei enzime (complexul
de iniţiere, elongaţie, de poliribozomic). aminoacid-ARNt).
terminare).
- se formează o proteină
primară care suferă un
- codonul ARNm este
proces post-translaţional
recunoscut de anticodonul
- etapele translaţiei sunt : de transformări până
complementar din ARNt.
iniţierea, elongaţia şi apare proteina finală,
terminarea şi se funcţională.
desfăşoară în citoplasmă.

ETAPELE TRANSLATIEI
INITIEREA
ELONGATIA
TERMINAREA

TRANSLAȚIA
Lant polipeptidic in crestere
ARNt E – situs de ieșire
P – situs peptidil
A – situs aminoacil
Subunitate
mare
Subunitate
mica
ARNm
Decodificarea: CODON- AMINOACID
40
GENETICA MD CURS 9 - A nu se copia sau distribui fara copyright ES

REGLAREA EXPRESIEI GENICE
41
GENETICA MD
REGLAREA EXPRESIEI GENICE
Toate celulele corpului indiferent de structura și

funcția lor au aceiași informație genetică, dar
expresia genelor lor este diferită (nu toate genele
sunt exprimate in fiecare celula).
GENELE COMUNE –sunt exprimate continuu,

in toate tipurile celulare.
Unele GENE sunt exprimate limitat iar altele

sunt complet si permanent inactivate in
celule sau țesuturi specifice.
42
CONTROLUL GENETIC al FENOTIPULUI CELULAR
Prin CONTROL GENETIC se stabilește ce gene se

exprimă intr-o celula ceea ce determina
FENOTIPUL CELULAR.
42
GENETICA MD
GENE DIFERITE :
EXPRESII FENOTIPICE DIFERITE
Celule din creasta neurala
MIGRAȚIE
DIFERENȚIERE
MELANOCIT NEURON Alte tipuri de celule
44
TEORIA REGLAJULUI GENETIC
Francois JACOB & Jaques MONOD

1961
Descoperă mecanismele reglajului genetic la

procariote (Pk).
45
GENETICA MD CURS 9 - A nu se copia sau distribui fara copyright
MODELUL OPERONULUI
- s-a urmărit
- a fost elaborat pe abilitatea E.coli de a
baza experimentelor metaboliza lactoza
cu E.coli; din mediu (reglarea
utilizarii lactozei).
GALACTOZA
LACTOZA
GLUCOZA
46
OPERON
DEFINIȚIE:
grup de gene care ELEMENTELE
asigura reglarea OPERONULUI:
coordonata a
expresiei genice
1.PROMOTOR 2.OPERATOR 3.GENE

STRUCTURALE
(locul de legare a (locul de legare al implicate in aceiasi
ARN polimerazei represorului activ) cale metabolica
1.Promotor 3.Gene structurale
2.
ARN
polimeraza
47
MEDICINA DENTARA CURS 9 GENETICA - A nu se copia sau distribui fara copyright
OPERON lac+
Gena OPERON lac+
REGLATOARE (PROMOTOR – OPERATOR – GENE STRUCTURALE z, y, a)
TRANSCRIPȚIE
ARNm
TRANSLAȚIE
Beta-galactozidaza Permeaza Transacetilaza
48
MECANISMELE REGLAJULUI GENETIC
REPRESIA – absența inductorului INDUCȚIA – prezența inductorului
Represorul se leaga
de operator
ARNm ARNm
ARNm impiedicand
Transcripția.
proteina REPRESOR INDUCTOR Beta-galactozidaza

Permeaza
Tiogalactozid
transacetilaza
Transcriptia si
Complexul inductor- translația genelor
represor nu se poate structurale ale
REGLAREA UTILIZĂRII LACTOZEI lega de operator operonului lac
la E.coli
(lactoza este inductor) http://www.tulane.edu/~biochem/lecture/pvtgif/601
49
CONCLUZIE
La bacterii activitatea genelor este sub control:
Producția de proteine/enzime nu este constantă

și este influențată de factorii de mediu;
Bacteriile au abilitatea de a produce

proteinele/enzimele necesare unei căi metabolice
in cantitatea necesară și la momentul potrivit.
50
REGLAREA EXPRESIEI GENICE la Ek
Există mai multe

nivele/etape de reglaj
(pretranscripțional,
Ek NU au operoni; transcripțional, post-
transcripțional,
translațional, post-
translațional).
1. Selecția si activarea
anumitor gene in celule
Reglarea
in cursul embriogenezei
pretranscripțională si organogenezei;
presupune:
2. Menținerea expresiei
genice in celulele
descendente.
51
REFERINTE ELECTRONICE
Pentru ilusrarea experimentelor si a mecanismelor

moleculare prezentate s-au preluat imagini de pe
site-ul:
http://images.google.com
www.google.com
http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/N/Nucleus.html
Pentru clarificarea unor probleme legate de

tematica predata la curs se pot trimite
intrebari la adresa:
geneticaintrebari@gmail.com
GENETICA MD
NE REVEDEM SĂPTĂMÂNA VIITOARE !
LUNI
8 decembrie
1000 a.m.

GENETICA MD - Curs 9 Noiembrie 2014

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

GENETICA MD - Curs 9 Noiembrie 2014

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

GENETICA

6. FINISAREA caracterelor fenotipice,

In cursul fiecarei etape

Este un proces Este un proces

ADN ARN PROTEINE CARACTER

GENETICA MD CURS 9 - A nu se copia sau distribui fara copyright 10

ARN polimeraza ADN-catena 5’ – 3’

ADN-catena 3’ – 5’, matrita

Promotor Exon 1 Intron Exon 2 Intron Exon 3 ADN

ADN Exon 1 Intron Exon 2 Intron Exon 3

ARNhn Exon 1 Exon 2 Exon 3

ARNm Exon 1 Exon 2 Exon 3

PROTEINA A PROTEINA B PROTEINA C

TRANSCRIPT INITIAL TRANSCRIPTIE

5’Cap UTR AUG Exon 1 Exon 2 Exon 3 UAA UTR POLI-A 3’

5´ GC CCAAT TATA Exon 1 Intron 1 Exon 2 3´

1. are loc in citoplasma, la nivelul ribozomilor;

2. este necesara prezenta apartului de

3. intre secventa de nucleotide a ARNm matur si

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 22

1.ARNm matur 2.Ribozomii 3.ARNt

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 23

Este un sistem de corespondență intre o anumita

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 24

Este codul tripletelor de

La Ek, numai ARNm

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 25

ARNt cu Factori proteici

Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 27

Experimentele au fost realizate de NIRENBERG, 1961.

Primul pas în descifrarea codului genetic a precizat numărul

S-a utilizat drept mesaj pentru translatie un ARNm sintetizat

S-a realizat sinteza unei proteine în prezenţa unui

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 28

1. ARNm sintetic poliuracil – un ARNm sintetizat artificial format

2. poli(A) - 5’- AAA -3’ este codonul pentru LYS (lizină).

3. poli(C) - 5’- CCC -3’este codonul pentru PRO (prolină).

4. poli(G) - 5’- GGG -3’este codonul pentru GLY (glicină).

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 29

SISTEM CELULAR LIBER

+ ARNm ‘5-UUU-3’ = PROTEINA

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 30

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 31

Corespondența intre o anumita secventa de 3 nucleotide din ARNm

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 32

1.Numărului de baze necesare

2.Tipurilor de nucleotide care

3.Ordinea acestor nucleotide în

1. codonul este alcătuit din 3 nucleotide adiacente şi

2. numărul de codoni este 64; dintre aceştia 61 codifică

3. codul are semnale de început AUG – codon iniţiator şi de

4. codul genetic este nesuprapus,

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 34

5.citirea codului genetic se face într-un singur sens, unidirecţional de la

6.codul genetic este specific – fiecare codon are o anumită ordine a

7.codul genetic este degenerat (redundant) – toţi aminoacizii, cu excepţia

8.codul genetic este universal – aceiaşi codoni specifică aceiaşi

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 36

In realitate, codonii sunt în secventa ADN.

ARNm 5’- AUG -3’

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 37

- este complexă şi implică

Genetica MD Curs 9 - A nu se copia sau distribi fara copyright 38