Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Celula Procariotămod PDF
Celula Procariotămod PDF
Secu
CELULA PROCARIOTĂ
1. Noțiuni generale
2. Organizarea general a celulei procariote
2.1 Particularitățile peretelui celular:
2.1.1 Bacteriile Gram+
2.1.2 Bacteriile Gram-
2.2 Flagelii și pilii:
3. Genomul bacterian:
3.1 Funcţiile materialului nuclear :
4. Noțiuni despre expresia genetică la procariote:
5. Elemente mobile la procariote:
6. Plasmidele:
7. Reproducerea bacteriilor
8. Mutațiile. Recombinarea bacteriană.
9. Antibioticele
9.1 Mecanisme generale de acțiune a antibioticelor:
9.2 Mecanisme generale de rezistență a bacteriilor la antibiotic:
1
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
CELULA PROCARIOTĂ
1. Noțiuni generale
Procariot (προ «pina» și κάρυον «nucleu»): organism primitive (bacterii,unele alge) cu structura
celulară simpla la care nucleul nu este delimitat .
Plasmidă: Elemente genetice (molecule circulare de ADN) extracromosomiale, capabile de
replicare autonomă. Conferă bacteriei caractere suplimentare.
Nucleoid: Echivalentul nucleului la procariote.
Protoplasma: Citoplasma și nucleul celulei.
Mureina (peptidoglacan): Structură particulară rigidă a peretelui celular bacterian.
Spatiul periplasmic: este considerat un compartiment pericelular adaptativ, in care are loc
degradarea enzimatica a nutrientilor (eficiență mai mare a procesului de nutriție).
Genofor: cromosomul bacterian.
Transcripție: Process de sinteză ARN, folosind ca matrice, ADN.
Translație: Proces de sinteză a unui peptid în ribozom, utilizînd ca matrice ARNm, iar ca
material de construcție aminoacizi.
Transpozon: Secvență de ADN ce poate migra în genom.
Celulele procariote, deși au o organizare relativ mai simplă, posedă toate însușirile
organismelor vii și se supun postulatelor celulare. O deosebire esențială a procariotelor este
faptul că nu posedă membrane celulare interne, ci doar externă ce le delimitează de mediul
înconjurător, ca consecință în structura acestor celule nu se intîlnesc organite ca: mitocondrii,
aparat Golgi etc., tot de aici reiese și faptul ca nucleul nu este bine conturat (lipsa membranei).
Materialul genetic este reprezentat de o moleculă inelară de ADN numită nucleoid. Procariotele
sunt organisme foarte mici, iar reprezentanți ai acestora sun bacteriile și algele cianofite.
2
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
3
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Figura 3.
4
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
5
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Pilii: sunt niște excrescențe subțiri situate la suprafața bacteriilor Gram-, fiin formți
dintr-un grup de proteine umite, piline. Aceștia sunt de 2 tipuri: 1)Participă la adeziunea celulară.
2) Participă la conjugare
Flagelii: excrescențe filiforme, mai des prezente pe suprafaa bacililor, reprezentînd niște
tubuli cu grosimea de 10-60nm formți din 3-11 filamente asamblate din proteina globulară
flagelina, la procariote flagelii nu sunt acoperiți cu membrană plasmatică. Flagelina neavînd
activitate ATP-azică, flagelii nu sunt capabili de a efectua mișcări ondulatorii, doar rotiri în jurul
axului, datorate gradientului de pH. De menționat că flagelii posedă proprietăți antigenice.
În dependenţă de numărul de flageli deosebim următoarele tipuri de bacterii:
monotrihi – cu un singur flagel (Vibrio ohoterae);
lofotrihi – cu un mănunchi unipolar (situat la un singur capăt) de flageli (Bartonella
bacilliformis);
amfitrihi – cu mănunchiuri bipolare (la două capete) de flageli (Spririllum serpens);
peritrihi – cu flageli în jur (Escherichia coli).
Figura 5
6
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
3. Genomul bacterian:
Figura 6
Nucleoidul (analogul nucleului eucariot) după cum s-a menționat este compus dintr-o
moleculă circulară de ADN. De specificat terbuie faptul că:
o ADN este asociat cu proteine; dar mecanismul de condensare a ADN-ului diferă de modelul
eucariotic (nu se cunoaște mecanismul exact, însă se presupune implicarea moleculelor de
ARN specific). Una din ipoteze despre compactizarea acestuia ar fi modelul de împachetare
propus de Stonington şi Pettijohn, 1971 ce demonstrează că prin închiderea moleculei,
aceasta îşi reduce diametrul la 350 μm, apoi sub acţiunea topoizomerazelor molecula suferă o
pliere (engl. folding) în ~ 50 domenii sau bucle, diametrul reducându-se la 30-35μm, prin
suprarăsucirea (supercoiling) domeniilor diametrul se reduce la 3 μm, iar prin suprapunerea
acestora la 1μm. Spiralizarea moleculei se realizeaza cu ajutorul topoizomerazelor.
Figura 7
o Celula bacteriană nu posedă microtubuli, ceea ce face imposibilă diviziunea de tip mitoză, iar
rolul de segregator al materialului genetic în timpul diviziunii celulare î-i revine membranei
plasmatice.
o Segvențe repetitive sunt foarte puține sau nu sunt deloc, majoritatea segvențelor fiind
codante, unice.
o Dimensiunile diferă de la un procariot la altul.
Spre exemplu genomul E. Coli constă din 4,6 Mb pe cînd genomul unei celule umane conține
3200Mb.
În general genomul procariot conține 139 Kb-13,000 Kb.
7
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Conform unor studii, genomul bacterian are un nivel foarte mare de organizare, contrar ideei
înalt acceptată că acesta ar avea o organizare aleatorie.
8
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Astfel pentru procariote, specific este operonul, acesta reprezentînd un lanț de gene ce nu au
spații între ele sau acestea sunt foarte mici și care de regula codifica pentru un lanț metabolic, ca
exemplu poate fi adus operonul lactozei la E. Coli
Transcripția și Translația la procariote este cuplată, adică aceste procese pot avea loc
simultan, ceea ce este imposibil în celula eucariotă (datorită membranei nucleare).
Figura 10
9
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Figura 11
Translația la procariote nu diferențiază mult de cea întîlnită la eucariote, însa sunt cîteva
particularități: ribozomul la procariote 70) este compus din 2 subunități, cea mare, 50S, compusă
din ARNr 23S, ARNr 5S și 31 proteine, iar subunitatea mică, 30S, conține ARNr 16S și 21
proteine.
Viteza de translație este de 12-17 aminoacizi pe secundă.
10
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Transpozonii: sunt elemente mai complicate, care au la capete IS-elemente și pot fi de 2 tipuri:
composite și noncomposite, adică compuși și simpli. De obicei aceștia duc gene sensibile la
antibiotice sau alți factori contra cărora se necesită rezistență.
11
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
6. Plasmidele:
12
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
7. Reproducerea bacteriilor
Complexul primozom:
Complexul primozom este format dintr-o serie de proteine ce determină iniţierea
replicării ADN. Cele mai importante proteine sunt:
• Primaza: la bacterii este denumită DnaG şi este codificată de gena dnaG; această enzimă
sintetizează scurte fragmente de ARN ce au funcţie de primeri, adică oferă capul 3’-OH liber
pentru polimerizare.
• Proteinele de iniţiere: n’, n, n”, DnaA, DnaB, DnaC şi DnaT Iniţierea replicării
presupune detaşarea secvenţei oriC de membrana plasmatică, după ce, în prealabil, a fost atinsă o
anumită masă celulară (denumită masă de iniţiere) şi în urma acumulării unei cantităţi
substanţiale de fosfolipide acide pe faţa internă a membranei plasmatice.
Secvenţa oriC din nucleoidul de E.coli are 245 bp şi prezintă 2 regiuni importante:
- o regiune cu 4 „cutii” dnaA (sunt formate din câte 9 bp) la care se va ataşa proteina
DnaA
- o regiune cu 3 „cutii”, bogate în adenină-timină, la care se vor ataşa complexe proteice
DnaB-DnaC Zece până la 12 molecule de DnaA se leagă la „cutiile” dnaA, determinând
buclarea moleculei de ADN şi, ca atare, desfacerea dublului helix în „cutiile” dnaB.
13
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Replicarea plasmidelor:
Indiferent dacă conferă bacteriei gazdă caractere esenţiale sau neesenţiale, toate
plasmidele au în structura lor o regiune foarte importantă pentru replicarea şi menţinerea stabilă
a plasmidului respectiv în populaţia bacteriană. În prezent se consideră că această regiune
esenţială ar conţine secvenţe de origine a replicării plasmidiale, denumite convenţional oriV (fata
de oriC (originea replicării nucleoidului bacterian). O secvenţă oriV trebuie să indeplineasca
urmatoarele conditii:
regiunea ADN minimală, cu activitate în cis, ce poate susține replicarea
plasmidială
regiunea ADN în care cele 2 catene se despart pentru a iniţia procesul de
replicare
nucleotidul/nucleotidele la care incepe sinteza catenei lider
gene implicate în controlul replicării plasmidiale (multe plasmide codifică
o proteină implicată în iniţierea replicării plasmidiale, denumita proteina
de tip Rep).
14
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Transferul și recombinarea genetică este cea de a doua cale de a obține mutanți, prin
care, o celula donoare face transfer de material genetic la o celulă receptoare, prin transmiterea
unor fragmnte de ADN sau al întregului genom al celulei donoare la celula receptoare.
Transferul și recombinarea genetică pot fi realizate prin trei modalități: transformare, transducție
și conjugare, pe care le vom descrie în continuare.
În cazul transformării, mutantul preia ADN-ul din cromozomul donorului, în starea fiziologică
numită starea de competență, în care ADN-ul transformat străbate peretele și membrana
plasmatică. Este un mecanism genetic care determina, de exemplu, rezistența la antibiotice.
Figura 18.
15
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
Figura 19.
În fine, cea de-a treia metodă de transfer și recombinare genetică o constituie conjugarea, care
reprezintă un proces ce determină unirea (sinapsa) unor cromozomi în meioza de la materialul
donor la acceptor prin episomi F+ si F(plasmide autonome libere în citoplasmă cu funcții
sexuale). Celula donoare
posedă factorul “F+” pe care îl
trece în celula receptoare care
conține factorul “F-”, prin pilii
sexuali. Spre deosebire de
celulele ființelor superioare, la
care zigotul se formează din
genoamele integrale ale celor
doi parteneri, la bacterii,
donorul lasă, de obicei, numai o
parte din genomul sau
acceptorului. În acest caz,
fenomenul de transfer parțial
genetic se numește meromixis,
iar zigotul parțial merozigot.
Figura 20
16
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
9. Antibioticele
Antibiotic: substanță organică solubilă, produsă de unele microorganisme animale și
vegetale, care are capacitatea de a distruge anumiți microbi sau de a le opri dezvoltarea, fapt
pentru care se utilizează în tratamentul bolilor infecțioase.
Antibioticele au fost clasate și in funcție de modul lor de acțiune distingem patru categorii de
molecule:
antibiotice care inhibă sinteza peretelui bacterian;
antibiotice care inhibă sinteza proteinelor;
antibiotice care inhibă functionarea acidului dezoxiribonucleic (ADN);
antibiotice care antrenează distrugerea membranei citoplasmice.
Există mai multe mecanisme prin care acest fenomen se poate manifesta:
Inactivarea sau distrugerea antibioticului - de exemplu inactivarea Penicilinei prin producerea
unor enzime (beta-lactamaze) care rup o legătură beta-lactamică din molecula acesteia;
Modificarea țintei (locului de legare a antibioticului) asftel încât molecula antibioticului să nu
mai poată reacționa cu componentele celulare - de exemplu ribozomi sau enzime implicate în
sinteza peretelui bacterian;
Modificarea căilor metabolice la nivelul cărora acționează antibioticele - cazul unor bacterii
rezistente la sulfamide, care în loc să sintetizeze acidul folic pornind de la acid para-
aminobenzoic, folosesc acid folic preformat, ca celulele mamiferelor;
Inhibarea pătruderii antibioticului în celulă prin modificarea membranei externe (deficit de
expresie a porinelor)- de exemplu mecanismul de rezistență a E. coli la macrolide;
Eliminarea antibioticului (efluxul activ, gena norA codifica o pompa de eflux, iar expresia
acesteia se intensifică) - observat la unele specii de E. coli și S. aureus;
Operonul MAR (Multirezistenta la antibiotice).
Aceste mecanisme sunt înlesnite de specifice de recombinare genetică a bacteriilor, dar și de
necesitatea sporită de a supravețui a acestora în urma utilizării foarte intense a antibioticelor în
scopuri curative, iar rezultatul este că la momentul actul un număr foarte mari de bacterii posedă
rezistență la un spectru foarte larg de antibiotice.
Bibliografie/Webografie:
1. Galeţchi P., Buiuc D., Plugaru Ș.. Ghid practic de microbiologie medicală. Chişinău, Bucureşti,
1997.
2. Universitatea din București, Facultatea de biologie, Curs: Microbiologie generală, 2014
18
Biologie Moleculară Celula Procariotă S.Capcelea Gh.Secu
19