Asfarviridae – Asfar – African

swine fever și virusurile inrudite

• Propietățile Asfar-virusurilor:
• Virion mare, sferic, cu anvelopă
• Capsida icozaedrală
• Genom linear, ds DNA
• Replicare intracitoplasmatică –
maturarea virionilor prin înmugurire
prin membranara cycitoplatică
• Efect incluziogen: incluzii acidofile
intracitoplasmatice
• Termolabil și sensibil la solvenții
lipielor (alcooli, eter)
 PESTA PORCINA AFRICANA - (ASF) boală de mare contagiozitate, boală
mortală pentru membrii familiei Suideae.

Pestis Africana Suum, Peste Porcine Africaine, Peste Porcina Africana, Maladie
de Montgomery, Warthog Disease, Afrikaanse Varkpes, Afrikanische
Schweinepest
Etiologie
• Virusul ASF – genul Asfivirus, familia Asfarviridae
• Anterior încadrat în familia Iridoviridae
• Virus mare, structură icosaedrală, DNA virus (see References: Wilkinson 1992)
• Inactivat la pH < 3.9 și pH > 11.5 sau mai mare în medii fără ser
• Își păstreză infecțiozitatea min. 7 zile la pH 13.4 în mediu cu 25% ser
• Viabilitate/infecțiozitate

 15 SĂPTĂMÂNI în sânge în putrefacție

 70 zile în sânge pe suport de lemn
 11 zile în fecale la temperatura camerei
 3 hours at 50°C
 18 luni în sânge la 4°C
 150 zile în carcasă 39°C
 140 zile în cărnuri conservate prin sărare(Referință: Kleiboeker 2008)
 PESTA PORCINA AFRICANA - ASF
Agent Etiologic – gen Asfivirus, fam Asfarviridae

• Au fost identificate 5 genotipuri distincte prin DNA – RFLP

• Toate izolatele Europene si Americane apartin aceluiasi genogrup, tulpinile Africane

prezentand o mai mare variabilitate.

• Variatiile de virulenta: unele tulpini determina boala severa cu mortalitate de cca. 100%,
alte tulpini determina boala tranzitorie sau infectie inaparenta

• Virus cu mare stabilitate genetica

• Se cultiva in culturi celulare dar replicarea virusului se realizeaza exclusiv in celule de

origine suina

• Efectul citopatic – sincitial. Exceptie unele tulpini

• Efect incluziogen intracitoplasmatic

• Virusul nu aglutineaza hematiile, dar celulelel din concentratul leucocitar (buffy coat cells)
adsorb pe suprafata lor hematiile de porc (proprietatea de hemadsorbtie)

• Pe membrana plasmatica a celulelor infectate, in fazele tarzii ale infectiei, se exprima o

proteina virala specifica
PESTA PORCINA AFRICANA - ASF

• Prima semnalare în 1921 in- Kenya

• Evoluție clinică de la acut la cronic
• Hipertermie severă
• Congestie cutanată
• Edeme
• Hemoragii în organele interne– ln.
• Avorturi
• Diaree sangvinolentă
• Prevalență pe mapamond – Africa
Sub-Sahariană, Europa, Republica
Dominicană, Haiti, Cuba, Brazilia
• Endemică în Africa și Sudul Europei
• Endemicizată în CSI după 2007
Georgia
Rezumatul evenimentelor în Rusia

• Debut 11/09/2009
• Confirmare 16/09/2009
• Raportare 25/09/2009
• Declarare 25/09/2009
• Evolutie : zonală
• Numar focare 209
• Data stingerii În evoluție
• Comentarii: Rusia a notificat și raportează ritmic
In 2007-2014 in the Russian federation at least
656 outbreaks and cases of ASF have been
detected (87 only in 2014)
(source: OIE, Rossielchoznadzor, 21.IV.2014)
ASF în Europa 11/6/2012

Lina Mur Gil & José Manuel Sánchez-Vizcaíno

SUAT-UCM
 Specii susceptibile la infecție

• Exclusiv suinele – porcul domestic susceptibilitate

maxima (de obicei evolutie letală).
• Gazde consacrate: porcii, porcul alergător, porcul
de tufiș, mistrețul European, mistrețul American
mistrețul uriaș de pădure (Referință: Kleiboeker
2008; OIE: Technical disease cards database).
• Omul NU este receptiv (Referință : FAO).
• Infectia are caracter persistent la prcii sălbatici
africani (alergtor si de tufiș), considerați rezervor
natural (Referință : Vallee 2001).
 PESTA PORCINA AFRICANA
Epidemiologie
Ciclul silvatic

• Virusul este mentinut intr-un ciclu alcatuit din

capusi si porci salbatici cu infectie Ciclul domestic
asimptomatica

• Consecutiv infectiei primare porcii alergatori • Odata intodus virusul in populatia de porci
(warthogs)-tineretul, realizeaza viremie la titruri domestici, porcii infectati devin cea mai
foarte mari, suficiente sa asigure infectia importanta sursa de infectie pentru porcii
capusilor. susceptibili

• Porcii alergatori (warthogs)- adulti, se

infecteaza, dar sunt rezistenti si nu dezvolta • Virusul este eliminat prin toate secretiile
viremie .

• Capusile din genul Ornithodoros sunt vector
biologic si rezervor de virus
• Virusul ASF se replica in capusi si astfel se
realizeaza transmiterea lui trans-stadial,
transovarian si sexual
• Durata de viata a capusilor este de cativa ani si
pot transmite virusul la porc la fiecare priza de
sange.
• Asfivirus este SINGURUL ARBOVIRUS INTRE
VIRUSURILE ADN
• Raspandirea rapida se realizeaza prin contact
dar si prin aerosoli (intre adaposturile fermei)
• Focarele de boala izbucnesc, fie:
- prin inocularea virusului de catre capusi
infectate
- prin consum de resturi alimentare neprocesate
termic sau consumul de tesuturi de la porcii cu
infectie acuta
 BOALA AFECTEAZĂ EXCLUSIV SUINELE – DOMESTICE
ȘI SĂLBATICE.
- Porcii domestici și cei sălbatici europeni sunt susceptibili
la infecție;
Animalele care au supraviețuit infecției pot deveni purtători
asimptomatici
- Speciile de Suideae sălbatice din Africa pot fi infectate pe
o perioadă îndelungată, fără a manifesta semne clinice;
- Căpușele din specia Ornithodoros - O.erraticus (Europa)
și O.moubata (Africa) reprezintă rezervoare virale și vectori
pentru transmiterea virusului.
ASF - modalități de transmitere

Aceasta este principala cale de introducere-

răspândire a bolii dintr-o țară în alta

• Direct
– Contact between sick and healthy animals
• Indirect
– Ingestion of garbage containing infected meat (this is the primary means by which the virus spreads from
country to country)
– Biological vectors: soft ticks of the genus Ornithodoros
– Fomites: premises, vehicles, implements, clothing
Ornithodorus
 PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
Patogeneza
• Asfivirusul se replica in cateva din celulele SRE si determina leucopenie severa

• Virusul ASF nu infecteaza celulele epiteliale

• In perioada de viremie virionul se replica in hematii, in celulele endoteliale si in

leucocite

• Virusul NU se replica in celulele epiteliului intestinal

• Leziunile macroscopice majore intereseaza sistemul limfatic si cel vascular

• Alterarile vasculare precum degenerarea endoteliului vascular, perturbarea coagularii,

trombocitopenia si tromboza, genereaza edeme si hemoragii in nuneroase tesuturi si
organe

• Edem pulmonar, splina marita si turgescenta, petesii si echimoze

 PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
Patogeneza/ Răspuns imun
• Fetușii avortați sunt liberi de virus

• Adesea mumifiati – din cauza

deshidratării – peste 5 zile
• Similar cu BVD-MD, B. abortus
• Scroafele mor adesea dupa 3-6 zile de la
avort
• Raspunsul imun umoral nu pare sa
protejeze deoarece serul hiperimun nu
neutralizeaza virusul
• Vaccinarea – fără succes !!! Incă!

• Mortalitate 95-100% la prima expunere

• Scade la 20-40%

• Infecții subacute/ cronice – în zone

endemice
• Necroze cutanate, artrite, pneumonie,
retard de creștere
 PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
tabloul clinic (1)

ASF este asemănătoare clinic si lezional cu pesta porcină clasica (hog

cholera) și cu PDNS (circovirus)
Referinta: Pig Disease Information Centre
Confirmarea laboratorului este necesară pentru diferențierea între acestea.

ASF se manifesta clinic in una din următoarele forme

( Referinta: OIE: Technical disease cards database; FAO).

Supraacut — Moarte subita fara semne prodromale

— Decubitul și hipertermia severă preced exitusul
 PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
tabloul clinic (2)
— Hipertermie (40.5°-42°C)
— Trombocitopenie și leucopenie timpuriu (48-72 h p.i)
— Animalele se aglomerează, caută întuneric și uneori apă
— Animalele se miscă cu greutate
— Semne de durere abdominală: coloana arcuită, mișcări anormale și decubit lateral
Acută — Congestie cutanata la marginile urechilor, coadă, extremitatea membrelor, fața
ventrală a abdomenului și toracelui.
(virus inalt — Anorexie, apatie, cianoza, și incoordonări cu 24-48 h înaintea exitusului
patogen) — Frecventa respiratorie și puls mărite
— Vomă, diaree (uneori cu sânge), secreție conjunctivală și jetaj mucopurulent
— Constipatie cu fecale dure, mici, acoperite cu sânge și mucus
— Dispnee, cu secreții nazale și bucale spumoase cu striuri de sânge
— Durata manifestărilor clinice scurtă : 2 – 7 zile în medie; pot fi si evoluții mai lungi cu
remitere aparentă urmată de recădere și exitus
— Exitus după 6-13 zile (până la 20 zile)
— Avort la scroafele gestante
— Mortalitatea la porci domestici atinge 100% frecvent
— Animalele recuperate nu prezintă sechele, dar supreviețuitori sunt purtători pe viață
PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
tabloul clinic (3)
— mai frecvent în Europa
— semne clinice mai puțin intense
— febră fluctuantă
— pierdere în greutate
— dispnee și tuse umedă (pneumonie interstițială)
Subacută — infecții bacteriene secundare
(tulpini virale de — articulații tumefiate și dureroase
patogenitate — durata bolii 5-30 zile
moderată) — Moarte prin insuficiență cardiacă, consecința leziunilor cardiace
— Avort
— Exitus în 15-45 zile
— Rata mortalității scăzută (30%-70%, variaza în limite largi)
— Porci se pot recupera sau progreseaza spre forma cronică a bolii
PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
tabloul clinic (4)
— Mai frecventă în Europa și Angola
— Diferite semne clinice: pierdere în greutate, variații de temperatură
corporala, semne respiratorii, necroze cutanate, ulcere cronice, artrite,
Cronică — Expus infecțiilor bacteriene secundare
— Evoluează 2-15 luni
— Mortalitate scăzută
— Remitere improbabilă
 PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
tabloul lezional
• Tipul leziunilor este corelat cu patogenitatea tulpinii si respectiv forma clinica
evolutiva, astfel: (Referinta: Kleiboeker 2008):
• Consecutiv evolutiilor acute
– PHemoragie severa in limfonodul gastrohepatic si cel renal
– Petesii in corticala, medulara si bazinetul renal
– Congestie splenica si splenomegalie(cf. Gray Book figure 2B, p 439)
– Cianoze si edeme cutanate in zonele glabre
– Echimoze pe pielea membrelor si abdomenului
– Lichid sero-sangvinolent in cavitatea pleurala, pericardica si peritoneala
– Petesii pe mucoasa laringiana si a vezicii urinare, precum si pe fata viscerala a
organelor .
– Edem al mezenterului, in zona adiacenta vezicii biliare si in peretele vezicii biliare
– Coloratie rosu intens a pielii in zona extremitatilor (cf. Gray Book figure 2A, p 439)
• Consecutiv evolutiilor cronice
– Focare cazeo-necrotice si mineralizari pulmonare (pot exista)
– Marirea in volum a limfonodurilor (cf. Referinta: OIE: Technical disease cards
database)
– Pericardita si aderente pleurale
 PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
Diagnostic diferential

• ASF frecvent confundata cu pesta porcina clasica

In afara PPC se impune discriminarea fata de:
• Rujet
• Septicemia salmonelica
• Pasteureloza
• Infectia cu Streptococcus suis
• Infectia cu Circovirus tip 2 – PDNS (Porcine dermatitis and
nephropathy syndrome)
• PRRS (Porcine reproductive and respiratory syndrome) mai ales in
formele “atipice”
• Boala Aujeszky
• Pleuropneumonia contagioasa ( Actinobacillus suis)
• Toate starile septicemice
• Intoxicatia cu cumarinice
• Intoxicatia cu sare
 PESTA PORCINA AFRICANA
(ASF)
Diagnosticul de confirmare
Trebuiesc recoltate si trimise laboratorului (la cat mai scazuta temperatura, fara congelare)
urmatoarele probe (specimene)):
• Sange pe anticoagulant
• Splina
• Amigdale
• Rinichi
• limfonoduri

Pentru identificarea virusului se utilizeaza:

• Testul de hemadsorbtie (HAD)

• Polymerase chain reaction (PCR)
• bioproba (eliminata in prezent)

Detectia anticorpilor poate fi utilizata in cazul subiectilor ce se remit dar nu mai devreme de 8, optim 21
zile dupa infectie. :

• ELISA (recomandata pentru comertul international)

• Imunofluorescenta indirecta pentru detectie de anticorpi (FAT)
• Imunoblot-ul
• Contraimunelectroforeza (imunoelectroosmoforeza)
CONTROLUL PESTEI PORCINE AFRICANE: PUNCTE - CHEIE

NU există disponibil un vaccin ANTICORPI = INFECŢIE

NU induce anticorpi neutralizanţi.

PPAv – anticorpii specifici nu neutralizează virusul în
sensul clasic de neutralizare=inactivare,
fiind demonstrată doar o neutralizare parţială in vitro.

VIREMIA SE MENŢINE O PERIOADĂ ÎNDELUNGATĂ.

Prezenţa anticorpilor persistă luni, uneori chiar ani de zile. Anticorpii = markeri de
infecţie !!
(de la 7-12 zile post infecţie).

. Formarea complexului imunologic Ac-Ag

Sensibilitate scăzută a tehnicilor de detecţie a antigenului.

 PESTA PORCINĂ AFRICANĂ
DETECŢIE ANTICORPI:
CE SE UTILIZEAZĂ ÎN EUROPA?
RING TRIAL 2005/06 19 din cele 25 de ţări (17 din UE) fac testul Ring

TEHNICI DE DETECŢIE ANTICORPI 80% în 2004

ELISA: 5 laboratoare practică tehnica “in house” sau teste OIE

Restul utilizează kit-uri comerciale.

Tehnici de confirmare: 66% în 2004/05

IB: 90% NRLs, 40% failed in the limits

IIF 1, IIP 1.

DIAGNOSTIC DE CONFIRMARE
TEHNICI DE DETECŢIE VIRALĂ 80% în 2004
- Izolare virală la 48% NRLs 33% în 2004/05 - Identificarea agentului cauzal:
- PCR la 76% NRLs 60% în 2004/05 – 4 noi NRLs - Izolare pe culturi celulare: HA cu leucocite din sângele periferic al
animalelor infectate.
- Kit-uri comerciale ELISA la 23% NRLs
(la 3 din 5 nu a putut fi aplicat PCR-ul)

- Imunofluorescenţă directă
(sensibilitate redusă în forme subacute şi cronice)

-Ag ELISA
(sensibilitate mare datorită formării complexului Ag-Ac. Nu se
recomandă la analiza probelor de ser sau ţesuturi omogenizate,
Detectarea virusului prin PCR, Real time King et al, 2003 după prima săpt. post infecţie, datorită unor rezultate fals negative.
 NU EXISTĂ VACCIN ÎMPOTRIVA VIRUSULUI !
DIFICULTĂŢI ÎN INDUCEREA IMUNITĂŢII DATORATE: DE CE?
- Variabilităţii mari observată în toate izolatele virale;
-Faptului că virusul se replică chiar în celulele Agentul cauzal nu este un virus “unic”;
responsabile cu răspunsul imun. se poate vorbi de o adevărată “familie”
(familii multigenice)

-Se cunosc puţine informaţii despre răspunsul imun şi mecanismul de protecţie.

-Rolul imunităţii mediate umoral sau celular este insuficient elucidat.
-Experimental, animalele trecute prin boală au un nivel normal de anticorpi neutralizanţi ASF.
- Au fost evidenţiaţi anticorpi specifici pestei porcine africane ce întârzie apariţia semnelor
clinice, reduc nivelul viremiei şi preîntâmpină moartea.
NU OFERĂ PROTECŢIE
STRATEGIILE ANTERIOARE, BAZATE PE:

Imunizare cu vaccinuri vii atenuate Experimental, unele animale se imunizează

împotriva unor tulpini virale omoloage, dar
devin purtători şi exprimă leziuni cronice.
Vaccinuri inactivate şi imunizare cu
-Ac împotriva p73 şi p54 neutralizează capsida virală (in
proteinele virale p54, p30, şi HA –
vitro);
omolog CD2
- Ac împotriva p30 inhibă pătrunderea virusului în celulă (in
vitro);
Mutanţi prin deleţie
- HA virală poate induce un răspuns puternic al celulelor T.
PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
Prevenire si Control
Tari indemne ASF
• Prohibirea importurilor din tari contaminate
• Monitorizarea stricta a neutralizarii
deseurilor alimentare ce provin de pe nave
si aeronave de circulatie internationala
• Eradicarea eventualelor focare ASF
PESTA PORCINA AFRICANA (ASF)
Controlul
Masuri de aplicat in cazul izbucnirii unui focar:

• Uciderea rapida a tuturor porcilor din focar si neutralizarea carcaselor si a surselor secundare
de infectie
• Curatenia si decontaminarea adaposturilor si inventarului
• Delimitarea zonei infectate ( de focar) si a zonei de protectie pentru miscarea animalelor
• Ancheta epidemiologica detaliata, pentru identificarea sursei(originii) (upstream) infectiei si
pentru identificarea posibilelor directii de diseminare (downstream) a infectiei
• Supravegherea zonei de protectie si in zona de supraveghere

In teritoriile in care ASF este endemica se recomanda:

• Evitarea contactului porcilor cu vectori (Africa) ( Referinta: OIE: Technical disease cards
database).
• Evitare contact porcilor salbatici cu cei domestici.
• Interzicerea utilizarii resturilor de la procesarea alimentelor netratate termic
• Separarea incintelor cu pereti dublii pt. a impiedica accesul vectorilor
ASFv - potential de arma biologica

• Valorile mari ale mortalitatii si morbiditatii

la subiectii expusi.
• Usurinta cu care se realizeaza transmiterea
directa si indirecta.
• Absenta unui tratament specific si a unui
vaccin
 ///F:/ASF%20EPIZONE%2025%20sept%202014.pdf
- 8th Annual EPIZONE meeting
23-25 September 2014, Copenhagen, Denmark

Targeted research effort on African swine fever

Carlos Martins, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade de Lisboa, Portugal

Development of protection tools against ASF (Theme 4)

• Cercetari pentru obtinerea unui vaccin folosind doua strategii:

• 1) deletia genelor de patogenitate pentru a obtine o tulpina atenuata si

incapabila de replicare ca si tulpina vaccinala ASFV;

• 2) identificarea antigenelor de protectie si clonarea determinantilor lor

genomici intr-un genom vector

Ambele strategii urmate de:

- testarea efectului protector fata de infectia cu tulpini patogene,
- testarea capacitatii de a induce instalarea portajului
- Realizarea unor produse de diagnostic pt.detectie de antigen si anticorpi cu
performante superioare
 •
Poland confirms case of African swine fever in farm pigs
• BY ANNA WLODARCZAK AND MARCIN GOETTIG
• WARSAW Wed Jul 23, 2014 11:58am EDT
• inShare
• Share this
• Email
• Print
• Pigs are seen in a piggery at a. village near Warsaw April 10, 2014
• CREDIT: REUTERS/KACPER PEMPEL

• RELATED TOPICS
• Health »

• (Reuters) - Polish authorities have identified the country's first ever case of African swine fever
(ASF) to be found in farm pigs, the chief veterinary officer said on Wednesday.
• Previous cases of ASF, in wild boars, promoted Russia and China to impose restrictions on
Polish pork exports, causing a fall in domestic pork prices.
• "This is the first case of ASF in farm pigs in Poland," Chief Veterinary Officer Marek Pirsztuk
told Reuters. "The area lies 3-6 km from the border with Belarus."
• He also said that about 200 farm pigs from the danger zone of 7 km (4.3 miles) around the
county of Grodek may have to be put down. This is the same area where nine cases of ASF in
wild boars were identified earlier this year.