Acizii nucleici

1
 Acizii nucleici
 ADN:
 molecule bicatenare;
 deţine informaţia genetică codificată
 despre....

 ARN – molecule monocatenare:

 ARNm – copia IG, matriţa pentru sinteza proteinelor
 ARNt – transportă aminoacizi, translatori ai codului genetic
 ARNr – component al ribozomilor, controlul translaţiei
 microARN – reglarea expresiei IG

2
 ADN
acid dezoxiribonucleic

 Monomeri
 Structura
 Primară

 Secundară

 Terţiară

 Localizare
 Proprietăţi
 Funcţii
 Sinteză
 Particularităţile ADN uman
 Metode de studiu

3
 Momomerul ADN

N – baza azotată

γ β α O -Pu – Adenina
N
5’ Guanina
C
P P P C1’
C -Py – Timina
4’
Citozina
C3’ C2’

nucleozid

dNTP – nucleotid – nucleozid trifosfat

5
dNMP = monomeri ADN
Monomer – nucleotidele (dNMP)
Structura primară:
catena polinucleotidică

Structura secundară:
bicatenară
 Structura ADN

 I – catena polinucleotidică
 II – dublul helix = două catene spiralizate
unite prin legături de hidrogen
 III – DNP = dezoxiribonucleoproteid

8
Structura primară a ADN

5' GCGT ... 3‘ 9

10
 Rosalind Franklin Maurice Wilkins

James Watson şi Francis Crick

alături de modelul structurii
secundare a ADN.

11
Complementaritatea ADN asigură:

 stabilitatea moleculei ADN;

 mecanismul replicării;
 mecanismul transcripţiei;
 mecanismul recombinării;
 mecanismul reparării leziunilor ADN

12
Conformaţia spaţială a moleculelor de ADN liniar
Tip Lungimea spirei Baze/tur Înclinarea faţă
de ax
A 24,6 Å ~11 +19°
B 33,2 Å ~10 -1,2°
Z 45,6 Å ~ 12 -9°

13
 Structura terţiară
 ADN + proteine = DNP
 ADN + proteine situs-specifice= complex funcţional

 ADN nuclear + proteine histone = cromatina ↔ cromozomii

14
 Proprietăţile ADN
 Replicare
 dublarea IG
 Reparaţie
 Identificarea, înlăturarea greşelilor
 Denaturare
 ruperea legăturilor de H
 Renaturare
 refacerea dublului helix
 Heterogenitate
 varietatea secv. nucleotidice
 Flexibilitate
 A↔B↔Z
 Fragilitate
 sensibilitate la factori mutageni
 Migrare în câmpul electric (ADN are ―—‖)
 Hibridizare
 molecule de diferită origine formează noi molecule
Replicarea

= dublarea ADN
= dublarea IG
= transmiterea IG

16
 Funcţiile ADN
 Deţine IG codificată:
 succesiunea b.a. în ADN determină succesiunea
aminoacizilor în proteină
 Păstrează IG:
 de acţiunea nucleazelor
 de citirea neautorizată
 de mutaţii
 Transmite IG prin dublare=replicare:
1ADN — replicare 2ADN
 Realizează IG
ADN — transcripţie  ARN — translaţie  proteină
17
Exemple
 globina
Hb

 globina

Reglează nivelul
Insulina glucozei

actina Asigură
contracţiile
musculare
miozina

Apărare imună
Imunoglobulina
 Concluzii:

 ADN are secvenţe codante = gene:

 Gene p/u proteine  ARNm ~ 30 000
 Gene preARNr ~ 250
 Gene ARNr 5S ~ 2000
 Gene ARNt ~ 1300
 Gene p/u microARN
 ADN are secvenţe necodante
 Secv. reglatoare
 Secv. spaţiatori
 Secv. satelit (cen, t)
 Secv. minisatelit (markeri crs)
 Secv. microsatelit (markeri individuali)
 Localizarea ADN

 În nucleu 95 - 98%
 molecule mari liniare de ADN
 asociate cu proteine histone
 sub formă de cromatină ↔ cromozomi
 În mitocondrii 2-5%
 molecule mici inelare

20
 Particularităţile ADN uman
ADN nuclear (nucleul celulei somatice, diploid)
 cu o lungime de ~ 6,4x109p.n.; 7 picograme
 fragmentat în 46 de molecule;
 asociat cu proteine histone;
 extrem de eterogen:
 secvenţe codificatoare şi necodificatoare;
 secvenţe repetitive şi unice;
 secvenţe active transcripţional şi inactive;
 secvenţe stabile şi instabile mutaţional;
 conţine ~ 30000 perechi de gene;
 se replică numai în perioada S a ciclului celular;
 50% este de origine maternă şi 50% de origine
paternă.

21
22
 Anemia cu hematii falciforme

A→T 17

23
 Indivizii homozigoţi
recesivi

Hemoglobină anomală

Hematii falciforme (în formă de seceră)

Distrugerea rapidă a Lipirea celulelor şi Acumularea celulelor

celulelor falciforme blocarea circulaţiei falciforme în splină
sanguine
Anemie
Dereglări locale în alimentare sanguină

Supraactivitatea Defecte Defecte în Defecte în

măduvei osoase cardiace activitatea tractul
musculară gastrointestinal
Dilatarea
Creşterea cantităţii
cordului Afectarea Dereglări Defecte
măduvei osoase
plămânilor cerebrale renale

Diminuarea
activităţii Pneumonie Paralizie Dereglări
mintale renale

Deformări Dereglări Dureri Fibroza

24
scheletice cardiace nespecifice splinei
 Particularităţile ADN uman
ADN mitocondrial
 Are o lungime de 16,6 kb
 Este inelar
 Numărul moleculelor este variabil (2-10)
 Conţine 37 de gene
 Genele sunt dispuse compact
 Se replică în dependenţă de metabolismul
celular
 Este de origine maternă

25
 Particularităţile genomului uman

Genomul nuclear Genomul mitocondrial

n=3,2 Gb / 2n=6,4 Gb 16,6 kb
(~ 30000 gene/perechi) 37 de gene

ADN genic ADN extragenic

25% 75%

ADN ADN Secvenţe unice Secvenţe

codant necodant sau în număr moderat sau
10% 90% mic de copii înalt repetitive
60% 40%

26
 Genomul nuclear
SECVENŢE OBLIGATORII SECVENŢE FACULTATIVE

-Gene structurale
Elemente mobile
(codificatoare de proteine)
Pseudogene
-Gene pentru ARNt, ARNr;
ADN viral
-Palindromi;

- ADN satelit (c,t…)

27
Secvenţele necodificatoare ale genomului uman
SINEs – transpozoni; situsuri de iniţiere a replicării

LINEs – retrotranspozoni; situsuri de împerechere

corectă a crs în timpul meiozei I
ADN satelit – rol structural, formează regiunile de
heterocromatină constitutivă (c, t, h, s)

ADN minisatelit – markeri genetici ai crs

ADN microsatelit – markeri genetici individuali

SINEs (Short interspersed elements) – 11%

LINEs (Long interspersed elements) – 16%

28
 Studiul ADN pentru:

 Stabilirea structurii genelor normale şi

mutante
 Depistarea mutaţiilor
 Diagnosticul bolilor genice
 Analiza polimorfismului individual

29
 ARN –
acid ribonucleic
 Monomeri – NTP (ATP, GTP, CTP, UTP);
 Structura primară – catena polinucleotidică;
 Structura secundară – bucle;
 Structura terţiară – RNP (ARN+proteine)

30
31
Monomeri ARN - NTP

32
 1 2 3 4

Transcripţie

Processing
ARNm ARNr ARNt ARNm

!!! Toate tipurile de ARN sunt transcrise de pe ADN

!!! ARN - este complementar unei catene de ADN

- este identic cu cealaltă catenă
 1 2 3

Transcripţie

Processing
ARNm ARNr ARNt
 preARNm
ADN preARNr ARNhn
preARNt
transcripţie

ARN precursor
processing

ARNr ARNt ARNm

f f
u u
n n
ARNr + proteine c c
ribozomale = ţ ţ
ribozomi i i
e e
•Transportă •Copia codului genetic
aminoacizi spre despre structura proteinei
Sediul sintezei ribozomi
•Matriţă pentru sinteza
proteinelor •Translează proteinei în timpul
codul genetic translaţiei
din ARNm
ARNm – ARN mesager (informaţional,
matricial)
 Molecule monocatenare, heterogene
 Se obţin prin transcrierea catenei anticodogene
a genei structurale şi processing-ului
pre-ARNm
 Conţine informaţia despre un polipeptid şi
serveşte ca matriţă p/u sinteza polipeptidului
 ARNt
• Molecule monocatenare;
• Forma – 3 bucle funcţionale (anticodon, D, Ѱ);
• Se sintetizează prin transcripţia genelor ARNt,
• Conţin nucleotide cu baze azotate obişnuite şi
minore (timina, pseudouracil, dihidrouridina)
• Asigură transportarea aminoacizilor spre locul
de sinteză a proteinelor
• Reprezintă translatori ai codului genetic
• În celulă se conţin 61 tipuri
Structura
secundară a
ARNr
 ARNr – ARN ribozomal

 Molecule monocatenare
 ARNr se sintetizează prin transcripţia
genelor ARNr, în regiunea nucleolului
 Intră în componenţa ribozomilor
 18S + 33 proteine = 40S
 5S + 5,8S + 28S + 49 proteine = 60S
 Asigură interacţiunea dintre subunităţile
ribozomale, ribozom-ARNm, ribozom-ARNt.
 ARNr
Tipul celulelor Coeficientul de sedimentare
5S
Procariote 16S
23S
5S
Eucariote, 5,8S
nucleu 18S
28S
12S
Eucariote, mitocondrii
16S

40
microARN

 ARNsn
 ARN-primer

 ARN-telomerazic

 ARN din componenţa spliceosomei

 ARNsc
 Ribozime

 ARN de interferenţă

41