Cromatografie – generalitati :

- F performante
- Aplicatii largi : separare (selectiv si eficient), detectie,
dozare
- A fost descop de botanistul rus Tswet
- Se baz pe repartitia unor analiti intre 2 faze:
stationara si mobila, care trb sa fie nemiscibile
- Cromatografia planara : CH, HPTLC, CSS
- Cromatografia pe coloana: HPLC, GC
- Alegerea F.S. se face in fct de :
1) analiti: masa molara, solubilitatea analitilor,
caract polar/nepol/ionic
2) tehnica de cromatografie aleasa
- Metode cromatografice f (procesele care stau la bz
separarii) : de adsorbtie, de repartitie, de schimb ionic
- Eficienta coloanei cromatogr :
-> dep de nr talere teor (N) – creste cu cresterea N
-> dep de geometria si natura chim a FS
-> Pick-urile sunt cu atat mai inguste cu cat eficacitatea
coloanei este mai buna
- Detectorul se alege in fct de sensibilitate, sepcificitate,
limita de detectie si timp de raspuns
 Cromatografia de adsorbtie:
- F.S = solid adsorbant
Cromatografia de repartitie:
- F.S = pelicula de lichid pe suport solid
Cromatografia de schimb ionic:
- F.S = rasina schimbatoare de ioni ( cationit sau
anionit)
Cromatografia de excludere sterica :
- F.S = gel care se comporta ca o sita moleculara
Cromatografia de elutie:
- Analitii pararesc FS
- Fractiunile de analiti de pot colecta separat
Cromatografia prin developare:
- Analitii raman pe FS
 - Developare – ascendenta/ descend –
bidimensionala- circulara
Rezolutia:
- Masura capacitatii efective de sep a 2 compusi ( 2
pick vecine) pe o coloana specif
- Marime ce caract. Separarea cromatogr
- Trb sa fie supraunitara pt ca separarea sa fie coresp :
(F.R x: >1, literatura specialitate >= 1,5)
Picul gromatografic- caracterizat de:
- Timpul si Vol. de retentie
- Largimea pick la baza
- Inaltime pick

Cromatografia HPLC
-> se sublcasif in HPLC in
1) fz normala( FS polara, FM nepol) – elueaza primul cel
mai putin polar
2) in fz inversa (FS nepol si FM pol) – elueaza primul cel
mai polar
-FS = lichid introdus in coloana sub presiune
- proba se introduce in stare lichida
-> tR:
- tR: timp scurs de la injectia amestecului in sistemul
cromatogr pana la mom detectiei unui rasp maxim,
la elutia fiecarei specii separate
- tM(mort): tp necesar frontului de faza mobila pt a
parcurge coloana cromatogr
- TR’ (tp de retentie corectat) = tR+tM
 Rf= dist migrare analit/ dist migr solvent

Standardul F254:
- Preciz ca FS este fluorescenta la rad UV de lung de
unda 254 nm