FMAM

Dr. Minodora Onisi

Clinica Hematologie SUUB

H EM ATO LO G IE C LIN IC A
IN TR O D U C ER E IN H EM ATO LO G IE
H EM ATO P O IEZ A
 Sangele

Doua componente majore:

Componenta plasmatica 55-60%

Contine plasma, electroliti, coloizi

Componenta celulara 40-45%

Contine eritrocite (celule rosii), leucocite
(celule albe), trombocite
Sintetizate de maduva hematogena osoasa
Evaluata cu ajutorul hemogramei si frotiului
de sange periferic
 Com ponenta plasm atica

Componentele majore: electrolitii si

proteinele

Electrolitii:
Pozitivi (cationi): Na+, K+, Ca+2, Mg+2
Negativi (anioni): Cl, bicarbonat, acizii
organici, proteinele, fosfati, sulfati, etc.
 Com ponenta plasm atica

Proteinele:
Albumine:
Determina presiunea osmotica; hipoalbuminemia
edeme!
Leaga diferite substante (nutritive, hormoni,
medicamente, etc)
Globuline
Notate in functie de greutatea moleculara (alfa, beta,
gamma)
Rol in formarea hemoglobinei si in raspunsul imun
Fibrinogen:
Glicoproteina cu rol vital in hemostaza (coagulare)
factorul I
 Com ponenta plasm atica

Proteinele:
Sintetizate major de catre ficat: albuminele,
fibrinogenul, circa jumatate dintre globuline
Restul globulinelor in tesutul limfoid si
sistemul reticulo-endotelial
Rol in: balanta acido-bazica, activitatea
hormonala, coagulare, mecanisme de
transport, presiunea osmotica, vascozitatea
sangvina
Deficite proteice in diferite boli, cum ar fi:
arsurile, afectare renala, denutritie importanta,
insuficienta hepatica, etc.
Com ponenta celulara:
eritrocite, leucocite, trom bocite
 Hematopoieza - Proprieti
Definiie: proces de formare a celulelor sangvine
Proces vital, continuu de-a lungul vieii
ncepe din VIU
Parcurge etape distincte
Proces adaptabil accelerare n condiii de stress
multiple bucle de reglare
Loc de desfurare: Mduva osoas
copil: oase lungi
adult: oase late
vrstnic: es. adipos, cel. hematologice
 Hematopoieza - Generaliti

Hematopoieza medular (MO) condiii normale

Hematopoieza extramedular (n afara MO) condiii
patologice: * thalasemia major (compensator)
* boli de celul STEM

Start: celula STEM pluripotent modelul piramidei

Organizare pe orizontal: mai multe compartimente

vertical: seriile medulare
Compatimente medulare (CM)

1. CM al celulelor STEM pluripotente

2. CM al celulelor STEM unipotente
3. CM al celulelor blastice cap de serie
4. CM de difereniere i maturaie
5. CM al celulelor efectorii/mature
 1. CM al celulelor STEM pluripotente

* Proprieti eseniale:
1. Autoreplicare/autorennoire
menine stocul de celule stem
o celul stem 2 celule pluripotente
activare: stimul puternic + depopularea MO (ex.: post transplant medular)
2. Difereniere celula stem mieloid : seria mieloid
limfoid : seria limfoid
3. Migrare : baza transplant celule stem
4. Homing : repopuleaz MO

* Celula STEM :
nu se identific morfologic n MO (asemntoare unui limfocit mic)
inciden f. slab 0.01% din populaia celular MO
recunoatere: markeri imunologici fenotipici CD 34 stem pluripotent
metoda culturilor colony forming units (CFU)
2. CM celule stem unipotente
difereniere mai limitat: neutrofile
Linii mieloide : granulocitar: granulocite eozinofile
bazofile

eritrocitar - eritroblastic
monocitar
trombocitar
Serii limfoide: B, T, NK (non B non T )

3. CM celule blastice cap de serie:

mieloblast
proeritroblast
megakarioblast
monoblast * Blati: primele celule identificabile morfologic
limfoblast
4. CM de difereniere i maturaie:
cel mai voluminos

diferenierea celular caractere morfologice specifice

produs final: celule efectorii /mature

5. CM celule efectorii /mature:

Segmentatele

Eritrocite

Monocite

Trombocite

LB, LT, NK

* Celulele mature : n MO i n SP (frotiu sangvin, HLG)

* Etapa tisular (diferenierea anumitor serii celulare):
LB n plasmocit secretant de Ig

monocit macrofag tisular

seria limfoid ggl. limfatici, timus

Markeri imunologici fenotipici caracteristici de serie:
s. granulocitar : CD 13, CD 33

s. megakariocitar: CD 61, CD 41, CD 42

s. monocitar: CD 14, 11b, HLA DR

s. eritrocitar: CD 36, glicophorina, R-transferina

Markeri caracteristici de etapa de diferentiere:

CD 34: celula stem marker de imaturitate;
se pierde pe masur ce se maturizeaz celula.

Imunofenotipare: a 2-a metod fundamental

pentru studiul populaiilor celulare
 Hematopoieza intramedular
* Micromediu specific: nisa medular componente:
1. Reteaua fibrilar: matricea extracelular: colagen, PG, fibronectin
2. Celular: - celule fixe: macrofage, adipocite, fibroblaste, endoteliu capilar
- celule mobile: limfocite, monocite
3. Factori de cretere, CK:
secretai de componenta celular a micromediului + torent sangvin
asigur o retea informaional cu bucle de feedback + si
multiple categorii de factori de reglare hematopoietici
acioneaz la nivelul celulei stem, progenitori : CK / IL - IL 3, IL 6, IL 1
seriilor: GMCSF, MGCSF, GCSF
roluri: celule imature diviziune
celule mature mbuntesc funcionalitatea
utilitate farmacologic / hematologic (aplazie medular)
Neulasta, Filgrastim, Neupogen,

Eritropoietina specific pentru seria eritroid (anemii din insuf. renal,

inflamatii cronice, neoplazii hematologice)
Trombopoietina: factor de cretere pentru seria megakariocitar
 Seria eritrocitar
Produs final: ERITROCIT
Etape: (1) proeritroblast (2 ) eritroblast bazofil (3)
policromatofil (4) acidofil (5) reticulocit (6) eritrocit
Procese de baz:
progresiv dimensiunea: proeritroblast 18 - 20 ; eritrocit 7.2
modificri nucleare: progresiv n dimensiuni (proeritroblast nucleu
80% din suprafata celular eritroblast oxifil nucleu mic) se
pierde complet (reticulocite celule anucleate)
modificarea tinctorialitii: (1), (2) extrem de bazofile ARN ribozomal,
(3) progresiv acidofil acumulare Hb, (4) deja incarcat cu Hb, (5) mai
pstreaz urme de ARNr, neidentificabil cu coloraii obisnuite (coloraii
specifice albastru de briliant crezil )
modificarea formei: (1) rotund, (6) disc biconcav, 7.2 , elastic (form
absolut necesar trecerii prin microcirculaie; capilare ~ 4, strbtute
datorit elasticitii eritrocitului
 SP -Seria rosie

Eritrocite celule rosii

Rol major:
Contin hemoglobina, care transporta oxigenul
catre tesuturi
Participa la transportul dioxidului de carbon
(contin anhidraza carbonica)
Productia: dupa nastere, exclusiv de catre
maduva hematogena
Celule anucleate, cu forma de disc biconcav,
foarte elastice; dimensiuni: aprox 7.5 microni
Durata de viata aprox 120 de zile.
Sinteza este controlata de eritropoietina
 Eritropoieza

Eritropoieza: celula se divide pn la reticulocit maturaie

Durat eritropoiez: 5 7 zile
Durat de via eritrocit: 120 zile
Distrucie = Hemoliza - fiziologic:
intramedular (10-15% din precursori distrui intramedular)
extramedular (sinusoide splenice - eritrocite senescente)
Echilibru eritropoiez / hemoliz menine constant indicii
eritrocitari (Hb, Ht, nr. Eritrocite, % reticulocite)
! Defect de producie / distrucie excesiv rupe echilibrul
anemie
 Granulopoieza

Celul cap serie: mieloblast

Produs final: GRANULOCITE
Etape: (1) mieloblast (2) promielocit (3) mielocit (4) metamielocit
(5) nesegmentat (6) segmentat (neutrofil)
Modificri form & nucleu: (1) 80% nucleu, multi nucleoli; (2) nucleu excentric,
oval; (3) bob de fasole; (4) covrig (5) nucleu polilobat
Achiziia de granule primare/azurofile mieloperoxidaza (din etapa 2)

secundare/specifice (din etapa 3):

s. neutrofile: coloraie neutr
s. bazofile: tinctorialitate bazofil
s. eozinofile: colorani acizi
Durat granulopoiez: 10 zile
Durat de via granulocite: ~ 8-12 ore in circulatie
2 compartimente: circulator, marginal
MO : raport G/E 3/1
 SP -Leucocitele

Functia primara aparare rapida si puternica

impotriva organismelor straine
Origine si maturare: MO si organe limfoide
6 tipuri majore mature:
Neutrofile (granulocite, segmentate)
(granulocite) Eozinofile
(granulocite) Bazofile
Limfocite
Monocite
Plasmocite
2 grupuri mari: granulocite si leucocite fara
granulatii
 SP -Leucocitele

Durata de viata in SP este limitata si

variabila, diferite tipuri de leucocite
fiind mobilizate la nevoie:
Granulocite: 12 ore; diapedeza!
Monocite: saptamani / luni; macrofage.
Limfocite: cateva ore in sange, dar pot
trai ani de zile in organele limfoide
(limfocite de memorie)
 SP -Leucocitele

In mod normal, sangele periferic

contine urmatoarele tipuri de
leucocite evaluabile de catre
analizorul automat:
Neutrofile (granulocite segmentate)
Eozinofile
Bazofile
Limfocite
Monocite
 Seria trombocitar

Precursor: megakarioblast Produs final: TROMBOCIT

Etape: (1) megakarioblast (2) megakariocit (3) trombocit
1 megakariocit 4000 trombocite
Durat megakariopoiez: ~ 10 zile
Durat de via trombocit: ~ 7 zile in circulaie
Megakarioblast: - sufer progresiv replicare nuclear cu
endomitoze se dubleaz materialul nuclear i citoplasma
Megakariocit: - celul gigant, cu multinucleu (16 - 32 nuclei)
Trombocit: - celul matur anucleat, dimensiuni ~ 4 ,
- formare: fragmentarea citoplasmei scuturare
- structur: membran cu R glicoproteici I-IX,
citoplasm cu granule (serotonin, factori procoagulanti)
- roluri: hemostaza primara, infl., remaniere plgi
 SP -Trom bocite

Trombocite = Plachete
Sunt fragmente celulare
anucleate, ce rezulta din
fragmentarea Megakariocitelor
medulare
Sinteza este controlata de
trombopoietina
Rol in hemostaza: aderare,
activare, agregare, eliberare
substante active (ex: serotonina
vasoconstrictie)
 Seria monocitar
Celula cap sere: monoblast Produs final: MONOCIT
Etape: (1) promonocit (2) monocit tnr (3) monocit adult
(nucleu faldat in steag)
Durata de via n circulaie: ~ 20 24 ore
Apoi se cantoneaz n esuturi macrofag tisular
Rolurile monocitelor: RI, inflamaie, procese specifice
Hematopoieza
Funcie fagocitar: esteraze (coloratii
specifice), lizozim (* lizozim seric/urinar marker proliferri)
Sistemul monocito-macrofagic / tipuri de macrofage:
M ggl limfatici celule Kupffer
Celule mezangiale R Celule Langerhans (piele)
Microglia SNC M splenice
M seroase perit., peric., pl. M medulare
M alveolare
 Seria limfoid
*Celule greu de identificat morfologic.
Celula cap serie: limfoblast Produs final: LB, LT, NK
LB RIU secreie Ig : neutralizare, opsonizare, activare C
5 10% din populaia limfocitar n sngele periferic
Ontogeneza seriei LB: majoritar n MO; exprim Ig pe suprafa
Element final = plasmocit:
celul oval, nucleu rotund, excentric, cromatin n roat
dinta,citoplasm intens bazofil
localizare: ggl. limfatici, MO
Markeri imunologici:
prezena Ig pe suprafaa celular
CD 79a: marker timpuriu; leucemii acute
CD 20: marker de maturitate; dispare pe plasmocit
 Seria limfoid
LT ~ 60 70 % din limfocitele circulante n sngele periferic
LTh CD 4
LTcs CD 8
LT organ majoritar de limfopoiez (timus)
rol n ordonarea i reglarea rspunsului imun
Markeri = Tcell Receptor ancorat pe suprafaa LT (R tip IG):
CD 3 de suprafa pt. celule mature
citoplasmatic pt. celule imature
CD 7, CD 2, CD 5
CD 4, CD 8 etapa maturitii

Celula stem afectarea ei det. afectarea tuturor seriilor

patologic: blocaj total(maturatie+diferentiere): leucemii acute
hematopoieza displazic: sd. mielodisplazice
o TDT marker de celul stem unipotent limfoid, de absolut
imaturitate
FR O TIU R I D E S A N G E
P ER IFER IC
FR O TIU R I D E M A D U V A
 Investigatiispecifi
ce in
H em atologie
Hemograma
Frotiul de sange periferic
Numaratoarea reticulocitelor
Medulograma; aspiratul medular si biopsia osteomedulara
Biopsie ganglionara, cutanata
Imunofenotiparea
Examenul citogenetic si molecular
Testul Coombs
Electroforeza de proteine serice
Electroforeza de hemoglobina
Vascozitatea plasmatica
Coagulograma
H EM O G R A M A
 H em ogram a

Primul pas in evaluarea functiei hematologice

si in diagnosticul patologiei hematologice.
Hemograma si frotiul de sange periferic ofera
informatii diagnostice importante, permite
efectuarea diagnosticului diferential si
oportunitatea testelor aditionale.
Elementele din sange:
eritrocite, leucocite si trombocite.
Cuantificarea acestor elemente prin metode manuale
si automatice
 H em ogram a

Probele de sange trebuie obtinute in conditii

optime
Factori ce pot influenta rezultatele: gradul de
activitate, nivelul de hidratare, medicatie, sex,
varsta, rasa, fumatul, vechimea probei.
Sangele este recoltat pe anticoagulant, de
preferinta EDTA (ethylenediaminetetraacetic
acid) inlatura calciul si previne formarea
cheagului de sange, cu efecte minime
morfologice si fizice asupra celulelor.