Disciplina de Microbiologie UMF Tg.

Mure LP7

Diagnosticul de laborator al infeciilor produse de enterobacterii

Enterobacterii condiionat patogene: Escherichia coli, Klebsiella, Proteus patogene: Shigella, Salmonella

Patogenie i produse patologice

E. coli infecii ale tractului intestinal o EPEC, EHEC, EIEC, EAEC, EAggEC sunt tulpini patogene de E. coli i sunt implicate n enterocolite pp: materii fecale, bil, alimente, vrsturi infecii extraintestinale o infecii urinare (UPEC) pp: urin o infecii intra-abdominale i ale plgilor pp: puroi o meningit pp: LCR o bacteriemie pp: snge

Klebsiella (K. pneumoniae, K. oxytoca, K. ozaenae, K. rhinoscleromatis) pneumonii (K. pneumoniae) pp: sput infecii urinare (K. pneumoniae, K. oxytoca) pp: urin infecii din sfera ORL: ozena (K. ozaenae), rinoscleromul (K. rhinoscleromatis) pp: secreii nazale infecii ale esuturilor moi, ale urechii medii pp: puroi infecii digestive pp: materii fecale, bil, vrsturi, alimente meningit, septicemie pp: LCR, snge

Proteus (P. mirabilis, P. vulgaris) toxiinfecii alimentare pp: materii fecale, vrsturi, alimente infecii urinare pp: urin meningit pp: LCR abces cerebral (P. mirabilis) pp: puroi pneumonii pp: sput infecii din sfera ORL: pp: secreii nazale septicemie pp: snge

-1-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

Shigella (S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii, S. sonnei) dizenteria bacilar pp: materii fecale emise spontan (recoltate pe sond Nelaton de la purttori), vrsturi, alimente Salmonella (S. typhi, S. paratyphi, S. enteritidis) febra tifoid (S. typhi) pp: o de la bolnavi: n prima spt. snge n a II-a spt. materii fecale, bil, suc duodenal n a III-a spt. materii fecale, snge pentru serodiagnostic n a IV-a spt. - snge pentru serodiagnostic o de la purttor: materii fecale dup administrarea unui purgativ, bil gastroenterite (S. enteritidis) pp: materii fecale, vrsturi, alimente septicemii pp: snge

Diferenierea enterobacteriilor 1. Examen direct

se efectueaz doar din produse patologice normal sterile bacili G-, ciliai (E. coli, Proteus) sau capsulai (Klebsiella)

2. Izolare
pe medii selectiv-difereniale pentru enterobacterii (Leifson, Levine, SS - pentru Shigella i Salmonella) pe medii difereniale (geloz lactozat) pot fi cultivate pe geloz snge

-2-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

3. Identificare
caractere morfotinctoriale Coloraie E. coli Klebsiella Proteus Shigella Salmonella bacili Gcocobacili Gbacili polimorfi Gbacili Gbacili GDispoziie neregulat diplo neregulat neregulat neregulat Cili peritrichi peritrichi peritrichi Capsul + Spori -

caractere de cultur mediu solid colonii S, lactozo + o pe geloz lactozat: colonii galbene

E. coli

o pe mediu Levine: colonii violete cu luciu metalic o pe geloz snge: colonii cenuii, unele tulpini produc hemoliz

Klebsiella

colonii M, lactozo + pe medii cu bil: colonii S, transparente, lactozo pe medii fr bil: nu formeaz colonii (fenomenul de crare: colonii cu caracter invadant, margini dantelate ce pot acoperi toat suprafaa mediului)

Proteus

fenomenul Dienes o dac tulpinile provin de la aceeai specie i sunt nsmnate pe aceeai plac, prin cretere se suprapun o dac tulpinile sunt diferite, ntre ele rmne o zon de demarcaie

Shigella Salmonella

colonii S , transparente, lactozo colonii S , transparente, lactozo ochi de pisic pe mediu SS

-3-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

caractere biochimice o importante pentru diferenierea enterobacteriilor toate descompun glucoza enterobacteriile condiionat patogene sunt L+ o pe geloz lactozat: colonii galbene, culoarea mediului vireaz n galben o pe mediu Leifson: colonii roii, culoarea mediului vireaz n rou enterobacteriile patogene sunt Lo colonii transparente, culoarea mediului rmne neschimbat TSI G L + + Z + + H2S + + H2S + + SIM I + v v v M + + + + + + + + Simmons Uree

E. coli Klebsiella Proteus Shigella Salmonella

+ + + + +

4. Identificare antigenic
reacii de aglutinare pe lam E. coli o cu seruri polivalente o apoi monovalente pentru EPEC, EIEC, EHEC (O157H7 !) Klebsiella Proteus Shigella reacia de umflare a capsulei (determin prezena antigenului K) reacii de aglutinare pe lam cu seruri anti O, anti H reacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup reacii de aglutinare pe lam o cu seruri polivalente de Ag O Salmonella o cu seruri monovalente pentru serogrup A, B, etc. o cu seruri monovalente pentru serotip o determinarea antigenului Vi
-4-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

5. Determinarea patogenitii
K. pneumoniae inoculat la oareci intraperitoneal sau subcutanat determin septicemie mortal Shigella - testul keratoconjunctivitei la cobai (testul Sereny)

6. Antibiograma
se efectueaz la toate tulpinile izolate tulpinile de Proteus spp. pot prezenta multirezisten, mai ales cele izolate din infecii nozocomiale.

7. Diagnostic serologic
n febra tifoid: detectarea i titrarea anticorpilor fa de Ag O, Ag H ale S. typhi i paratyphi A, B (reacia Widal)

-5-