Genul Staphylococcus

Stafilococi coagulazo-pozitivi: S. aureus Stafilococi coagulazo-negativi (SCN) cu importan clinic: S. lugdunensis, S. schleiferi, S. epidermidis, S. haemolyticus, S. saprophyticus .a. Produs patologic - portaj: secreie din cavitatea nazal anterioar, secreie faringian, probe de pe tegumente (zona axilar, perianal) - plgi, otite, infecii tegumentare puroiul (S. aureus) - infecii urinare urin (S. saprophyticus, S. aureus) - infecii gastro-intestinale, toxiinfecii alimentare materii fecale, vomismente, alimente. - meningite LCR - septicemie, febr puerperal snge (S. aureus, SCN) - pneumonie sput. - infecii nosocomiale - S. aureus meticilino-rezistent (MRSA, SARM), SCN meticilino-rezistent 1. Examenul direct al pp: - macroscopic: puroi cremos, filamentos, glbui. - microscopic: coloraia Gram: coci Gram pozitivi, dispui n grmezi asemntoare ciorchinilor de strugure 2. Izolare: - mediul de mbogire: mediul hiperclorurat lichid - geloz-snge - Chapman (Ch) Incubare aerob la 37C, 18 24 ore. 3. Identificarea bacteriei: Caractere morfotinctoriale: frotiu din cultur pur coci Gram pozitivi, n grmezi. Caractere de cultur: colonii S pigmentate sau nepigmentate Caractere biochimice: - catalaz pozitiv - oxidaz negativ - coagulaza liber pozitiv: S. aureus; - coagulaza liber negativ: stafilococi coagulazo-negativi (SCN) - coagulaza legat (clumping factor - CF) +: S.aureus, S. lugdunesis, S. schleiferi - producerea de DN-az: S. aureus, S. schleiferi - descompunerea manitolului pe mediul Chapman manito-pozitiv (de ex. S. aureus) - producere de pigment: de la auriu la portocaliu (S. aureus, S. lugdunensis, S. chromogenes, .a.) - producerea de hemolizine pe geloz-snge hemoliza (S. aureus, S. haemolyticus, .a.) nu prezint hemoliz (majoritatea tulpinilor SCN) identificare pe baza rezistenei la novobiocin a speciei S. saprophyticus identificare antigenic: determinarea enterotoxinei produs de stafilococ

4. Tipizarea bacteriilor: pentru identificarea sursei de infecie, compararea tulpinilor izolate - prin lizotipie (determinarea sensibilitii stafilococului fa de bacteriofagi;) - prin metode de biologie molecular 5. ABG.

Genul Streptococcus
S. pyogenes, S. agalactiae (streptococi beta hemolitici) Streptococi grup viridans Enterococcus faecalis, E. faecium S. pneumoniae (pneumococ) Produs patologic: S. pyogenes: secreie faringian, secreie din leziuni cutanate, snge pentru serologie S. grup viridans: se gsesc n mod normal n secreia faringian snge (n endocardit) Enterococi: urin, secreie uretral, secreie prostatic, secreia canalului cervical, puroi din plgi, bil , snge. S. agalactiae : secreie vaginal, secreia canalului cervical la mam LCR, snge, aspirat bronic la nou-nscut Pneumococ: sput, LCR, snge 1. Examen direct a. macroscopic: Pneumococ sput ruginie b. microscopic: - col GRAM coci gram(+) S. pyogenes: coci rotunzi, dispui n lanuri S. de grup viridans: coci rotunzi sau ovalari dispui n lanuri Enterococii: coci ovalari, mai mari, dispui tot n lanuri Pneumococii: coci lanceolai, dispui n diplo cu capetele ascuite spre exterior i nconjurai de o capsul proprie. 2. Izolarea bacteriei: - medii de mbogire - Geloz-snge 3. Identificare: Cmt: (vezi anterior) Caractere de cultur - pe geloz snge: - col S cu hemoliz (clar, transparent, total) Streptococi -hemolitici sensibilitate fa de BACITRACIN identificare grup A Determinarea hidrocarbonatului C din peretele bacterian prin reacii de precipitare i aglutinare stabilirea grupelor Lancefield Testul CAMP pentru identificarea S. de grup B

Antibiograma Streptococii beta hemolitici: i-au pstrat sensibilitatea fa de penicilin nu se efectueaz antibiogram (numai n situaii speciale, de ex. alergie la penicilin sau monitorizarea rezistenei la penicilin i alte antibiotice, fr comunicarea rezultatului)

- col S cu hemoliz (incomplet, de culoare verde datorit reducerii Hb la MetHb): se identific n continuare pe ABE i se testeaz sensibilitatea la optochin Bil Rezistent Rezistent Sensibil Optochin Rezistent Rezistent Sensibil Esculin + -

S. de grup viridans Enterococi* Pneumococi

Not: * Enterococii pot fi nehemolitici. Dup identificare se realizeaz antibiogram difuzimetric pentru enterococi i pneumococi. Evidenierea Ac: - Streptolizina O = SLO = Ag determin formarea de Ac anti-SLO = ASLO ASLO crete n primele 7 zile pn n sptmnile 3-4 cnd se menine n platou i apoi scade titrul pn la valori normale pn la 6 luni, dac s-a intervenit cu un tratament corespunztor (vindecare); sau poate s creasc titrul Ac dac nu a fost tratat bolnavul sau s-a produs o complicaie (RAA, afectare cardiac, glomerulonefrit renal acut, coreea minor etc.). Tehnica clasic: - diluii succesive ale serului bolnavului (AC anti-SLO) i SLO (timp de reacie) + hematii - dac exist Ac acetia se leag de SLO, SLO se neutralizeaz: eritrocitele nu se lizeaz reacie (+). - dac nu exist Ac SLO lizeaz eritrocitele hemoliz reacie (-). Se caut ultima eprubet n care exist hematii nelizate este titrul de Ac cutat. Dg (+) la titrul de 1/200 UI/ml Val < 1/200 UI/ml nu exist infecie streptococic Val > 1/200 UI/ml este infecie streptococic n evoluie. Metode rapide de detectare a ASLO: latexaglutinare. - Ac anti-streptokinaz = ASK - Ac anti-streptodornaz = ASD