GENETICA UMAN I IMPORTANA EI N MEDICINA MODERN

Ereditatea
nsuirea organismelor vii de-a produce urmai asemntori genitorilor.
- se asigur continuitatea speciei, - diversitatea tipurilor individuale n populaie, - 2 laturi contradictorii: conservatorismul i variabilitatea, - proces informaional: - stocarea, - expresia i - transmiterea inform.genetice.

Variabilitatea
Ansamblul fenomenelor care produc diferenele genetice interindividuale i ntre diferite populaii. Condiionat genetic i mezologic. Surse: - mutaiile, - recombinrile genetice, - migraiile. Fiecare individ este UNICAT BIOLOGIC !

Genetica uman
Studiaz fenomenele ereditii i variabilitii fiinelor umane. Disciplin fundamental: studiaz structurile, mecanismele, legile ereditii Disciplin clinic: rolul mutaiilor n producerea bolilor/predispoziiei la boal. Genetica medical - specialitate clinic distinct: - diagnostic +ngrijirea pacienilor cu BG, - sfat genetic pentru familii, - diagnostic +screening prenatal, - diagnostic presimptomatic. Disciplin medico- social.

Domenii desprinse din genetica uman

Genetica formal studiaz modul de transmitere a caracterelor Genetica molecular studiaz ereditatea la nivel molecular Citogenetica analizeaz rolul cromozomilor n evoluie i patologie

Domenii desprinse din genetica uman

Radiogenetica analizeaz efectele radiaiilor ionizante:
Mutagene Teratogene Carcinogene

Psihogenetica fundamentele genetice ale comportamentului uman normal sau patologic Farmacogenetica studiaz rspunsul individual la medicamente

Impactul bolilor genetice

15% din indivizi au un handicap fizic, motor, mental determinat genetic; 30-50% din paturile de pediatrie afeciuni genetice; 10% din internrile n spitalele de aduli cazuri genetice; 22% din mortalitatea infantil se datoreaz anomaliilor genetice i congenitale; 30% din cazurile de sterilitate; Sunt cauzate de 50% din cazurile de avorturi spontane tulburri genetice

Clasificarea afeciunilor genetice

1. 2. 3. 4. 5.

Boli monogenice: AD, AR, HR, HD. Boli multifactoriale: anomalii congenitale izolate, bolile comune ale adultului. Boli cromozomiale: anomalii de numr sau structur cromozomial. Boli genetice ale celulelor somatice: cancere, boli autoimune. Boli mitocondriale.

Fenotip/Genotip
genotip structura genetic unic i caracteristic

unui individ, care se stabilete n momentul fecundrii i rmne stabil n cursul dezvoltrii, totalitatea caracterelor specifice produse prin interaciunea dintre ereditate (Genotip) i mediu se numete individualitate biologic sau Fenotip.
+mediu 1 GENOTIP FENOTIP 1 +mediu 2 FENOTIP 2

GENOTIP

Clasificarea etiopatogenic a bolilor

I.

Boli cu determinism exclusiv genetic: -factorul genetic uor identificabil, -factorul de mediu nu intervine nici n debutul bolii, nici n agravarea ei, -distribuie familial caracteristic, -mortalitate ridicat, -ex: bolile cromozomiale.

Clasificarea etiopatogenic a bolilor (2)

II.

Boli determinate genetic dar la care factorul de mediu contribuie la precipitarea debutului sau agravarea bolii: -debut la natere sau n prima copilrie, -severitate variat, -agravare cu vrsta, -distribuie familial caracterisitic, -ex.: deficitul de G-6 PD, galactozemie, fenilcetonurie.

Clasificarea etiopatogenic a bolilor (3)

III.

Boli cu etiopatogenie complex, la care contribuie att factorul genetic ct i cel de mediu: - factorul genetic = predispoziia genetic, - pot avea distribuie familial dar nu caracterisitic, - exist numeroase variaii cantitative, - ex.: HTA, boala coronarian, DZ tip II, ulcerul gastric, descpicturile labio-maxilopalatine, MCC.

Clasificarea etiopatogenic a bolilor (4)

IV.

Boli determinate de un agent patogen (infecii), uor de evideniat, avnd rol predominant. - componenta genetic = rezistena fa de aciunea patogen a agentului cauzal, - fiecare individ prezint un rspuns particular, specific la agresiune, - rol important: sistemul HLA de supraveghere, alarm i aprare a organismului

Clasificarea etiopatogenic a bolilor (5)

V.

Boli n care factorul determinant este un singur factor de mediu, cu aciune deosebit de energic, uor de identificat: -nu se permite implicarea unor factori genetici -letalitate 100% -ex.: intoxicaii cu cianuri, toxina botulinic, venin de cobr, encefalita rabic.

Determinismul caracterelor fenotipice normale i anormale

Ereditate 100% Caractere pur ereditare
Grupe sanguine HLA Dermatoglife Culoarea pielii Talia Boala coronoarian HTA DZ Boala ulceroas Hemofilie Fenilcetonurie Schizofrenie

Caractere mutifactoriale

Greutatea TA sistolic

Dezvoltarea muscular

Caractere pur ecologice Mediu 100%

Infecii Intoxicaii Traumatisme

Omul obiect de studiu al geneticii

Dezavantaje: - diversitatea genetic a indivizilor mare i necontrolat, - studii genealogice greu de efectuat, - numr mic de subieci obsevai, - dispersia geografic, - prevalen redus a bolilor genetice. Omul este cea mai bine studiat fiin.

Scurt istoric al geneticii umane (1)

1. 2.

Etapa pretiinific (

1865)

- observaii privind transmiterea ereditara a unor boli

Etapa fundamentrii geneticii ca tiin (1865-1960)

- G. Mendel (1865) legile ereditii, - T.H. Morgan teoria cromozomic a ereditii, - F. Galton (1890) studiul gemenilor, - A. Garrod (1902) - primele erori de metabolism nscute: alcaptonuria - L. Pauling (1949) sicklemia - Avery et al (1944) - rolul genetic al ADN - Watson i Crick (1953) structura ADN - J.Lejeune (1959) trisomia 21= sindromul Down

Scurt istoric al geneticii umane (2)

3.

Dezvoltarea geneticii medicale (1960- 1970)

- perfecionarea diagnosticului bolilor metabolice, - depistarea la nou nscui a unor boli genetice tratabile, - dezvoltarea sfatului genetic, diagnosticului prenatal.

4.

Noua genetic uman i medicin molecular (1980 )

- analiza direct a ADN, a genei - tehnologia ADN recombinant - era geneticii moleculare -Proiectul Genomului Uman

Proiectul genomului uman

Iniiat n 1990, cu larg participare internaional, Prima etap: realizarea unei hri genetice. A doua etap: stabilirea hrii fizice, determinarea

distanei reale ce separ genele. A treia etap: secvenierea nucleotidelor. Aprile 2003: ncheierea secvenierii genomului uman. Implicaii: progrese n diagnosticul, prevenirea i tratamentul unor boli. Genom - set de instruciuni exprimate n cursul construciei, funcionrii i meninerii integritii organismului

Genom -definiie
Iniial definea setul haploid de cromozomi din gamei Ulterior a fost folosit pentru a desemna ansamblul genelor unui organism Definiie actual
Ansamblul complex al secvenelor de ADN a

unui individ sau specie.

Genetica i rolul su n practica medical

Diagnosticul genotipic:
- tehnici de citogenetic i genetic molecular,
- sonde specifice ptr. detectarea genomurilor virale, bacteriene.

Farmacologia genomic i terapia genic:

- fabricarea industrial a unor produse cu valoare terapeutic (GH, insulin, streptokinaz, eritropetin), - farmacologia genomic: blocarea funcionrii genelor mutante sau a genomurilor exogene ale unor virusuri, - terapia genic: fabricarea i introducerea de gene normale la bolnavii cu afeciuni genetice.

Profilaxia personalizat i medicina preventiv:

- identificarea unor gene de susceptibilitate la sntoi, - studiul unor markeri genetici individuali.

STRUCTURA I ORGANIZAREA CELULAR A ADN

STRUCTURA PRIMAR A ADN

ADN este purttorul informaiei genetice la aproape toate organismele vii, cu excepia unor virusuri ARN.
98% din ADN se afl n cromozomi nucleari i 2% la nivel mitocondrial

Cantitatea de ADN
variaz cu specia dar

e constant la indivizii aceleai specii i n toate

celulele somatice ale unui individ.

Acizii nucleici sunt macropolimeri alctuii din uniti mai simple denumite nucleotide.

STRUCTURA PRIMAR A ADN

Nucleotidul este alctuit din trei elemente distincte:
1. 2. 3.

Baz azotat, Glucid cu 5 atomi de carbon, Grup fosfat (sarcini negative, neutralizate in vivo prin fixarea proteinelor).

STRUCTURA PRIMAR A ADN

Polimerizarea nucleotidelor ntr-o succesiune caracteristic speciei duce la formarea configuraiei monocatenare, Legturi internucleotidice covalente 3- 5 fosfodiesterice, Grad mare de flexibiliate, Monocatenele au: o unitate nespecific invariabil (axul glucido fosforic) i una variabil (bazele azotate), Nu exist nici o restricie legat de ordinea bazelor ataate la C 1 al dezoxiribozei. Polaritate 5 3

Structura secundar a ADN (1)

Are la baz studiile difraciei cu raze X a moleculei de ADN (M. Wilkins, R. Franklin) precum i analizele chimice ale ADN. Configuraia bicatenar, dublu elicoidal format prin asamblarea complementar, coaxial i antiparalel, a celor dou monocatene.

Structura secundar a ADN (2)

Complementaritatea are la baz: mperechere riguroas a: A cu T (dou legturi de H - legturi electrostatice slabe) i C cu G (trei legturi de H) A+G/C+T=1; n schimb A+T/G+C diferit de 1, la om este1,7

Structura secundar a ADN (3)

Cele dou catene nu sunt identice ci complementare i strict codeterminate, Cunoaterea structurii unei catene permite determinarea secveneiei celeilalte, de ex: 5-ATGCCAG-3 3-TACGGTC-5 Legea complementaritii st la baza mecanismelor prin care se realizeaz replicarea, transcripia, recombinarea, repararea leziunilor, Se asigur stabilitatea dublului helix i o structur regulat.

Structura secundar a ADN (4)

Asamblarea antiparalel: Orientarea celor dou catene se face n sensuri opuse, ascendent i respectiv descendent, Apare ca urmare a legturilor stereochimice/spaiale necesare respectrii complementaritii. Cele dou catene se nfoar plectonemic (una n jurul alteia), Se formeaz o dubl spiral elicoidal coaxial

ADN de tip B
1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9)

Sens de rsucire dextru, Diametrul moleculei=2nm, Dou tipuri de incizuri (mic i mare) 10 pb /tur de spir, Pasul elicei de 3,4 nm, Distana internucleotidic 0,34 nm, Planul de nclinaie al bazelor perpendicular pe axul imaginar al moleculei, Se poate transforma reversibil n forma A sau Z, Prezint stabilitate metabolic.

Polimorfismul structural al moleculei de ADN

S-au descris alte conformaii, izoforme: A i C mai frecvente, D i E mai rare, Au acelai plan general de structur: elice dubl, orientat spre dreapta, Se deosebesc de forma B prin particulariti fizice
numr de baze pe un tur de spir, pasul elicei etc

Forma A este mai scurt i mai groas dect forma B, restul sunt mai lungi i mai subiri, n anumite regiuni ADN, se pot produce treceri A B C, care permit recunoaterea de ctre molecule exogene.

ADN de tip Z (1)

Descoperit n 1979, Rich, Dickerson. Molecul dublu elicoidal, orientat spre stnga, Axul glucido-fosforic form neregulat, n zig-zag, Molecula ADN apare deformat i alungit, Un sigur fel de incizuri, Diametrul 1,8 nm. Pasul elicei 4,5 nm. 12 pb/tur de spir. Aceiai componen a bazelor cu mperechere complemnetar.

ADN de tip Z (2)

Conformaia Z este o conformaie normal, exist in vivo. Apare n anumite condiii fizico-chimice n regiunile bogate n perechile de baze G-C. Se formeaz prin tranziia formei B, sub aciunea unei topoizomeraze i prin rotirea bazelor cu 180. Tranziia B Z este REVERSIBIL

Forma Z intervine n inactivarea unor gene (controlul expresiei informaiei genetice)

ADN de tip Z (3)

Conversia B Z se poate realiza prin: - fixarea intens a histonelor - metilarea citozinei - concentraii crescute de MgCl (in vitro) Prin tranziia spre forma Z se evideniaz unele situsuri ADN unde se fixeaz mai uor diferii ageni mutageni sau cancerigeni. Mutaiile apar mai frecvent la nivelul secvenelor GC care adopt conformaia Z.

Relaiile dintre structura i funciile ADN

Molecula de ADN ntrunete urmtoarele funcii: Stocheaz o cantitate mare de informaie, ntr-o form stabil, Reproduce informaia pentru transmiterea cu maxim fidelitate de la o generaie la alta, Poate repara corect informaia genetic n cazul unor leziuni, Exprim informaia genetic prin sinteza unor proteine specifice, Este capabil de variaie.

PROPRIETI FIZICO-CHIMICE ALE ADN CU IMPORTAN BIOLOGIC DEOSEBIT

1. 2.

Absoria radiailor UV Denaturarea-renaturarea

1. Absoria radiaiilor UV
Determinat de prezena bazelor purinice i pirimidinice, Maxim pentru lungimea de und de 260 nm (care exercit o activitate mutagen maxim, cu apariia de alterri structurale sau funcionale), Efectul hipercromic- structurile monocatenare prezint o absorie mai mare dect cele bicatenare (efect hipocromic) UV determin apariia dimerilor de timin

2. Denaturarea- renaturarea
Fiziologic, molecula ADN are o stabilitate metabolic, n condiii naturale sau experimentale, cele dou catene se pot desface parial, pe segmente limitate

Denaturarea
Denaturarea termic = TOPIRE. Depinde de temperatura medie de topire (Tm= valoarea la care 50% din ADN dc este denaturat). Tm mai ridicat n cazul prezenei unui numr crescut de mperecheri de tip G-C.

Renaturarea
Reasocierea pe baz de complementaritate a structurilor monocatenare, Iniial are loc o nucleaie legarea complementar a ctorva baze C-G, Ulterior asocierea rapid a bazelor azotate dependent de concentraia lor n soluie i de timpul de contact, NU depinde de sursa monocatenelor ci numai de gradul de complementaritate.

Aplicaii practice
1)

Stabilirea indirect a hrilor de denaturare-renaturare. Hibridizarea molecular asocierea pe baz de complementaritate a unor secvene nucleotidice de origine diferit.

2)

Hibridizarea molecular
Permite obinerea unor molecule bicatenare hibride: ADN-ADN; ADN-ARN; ARN-ARN. Stabilitatea heteroduplexurilor este direct proporional cu gradul de omologie a secvenelor monocatenare.

Hibridizarea molecular aplicaii practice (1)

1.

Evidenierea gradului de nrudire a speciilor prin compararea omologiei acizilor nucleici provenii de la diferite specii. Astfel: - ADN om +ADN cimpanzeu= renaturare aproape complet; - ADN om + ADN oarece= renaturare 25%; - ADN om + ADN viral= renaturare la nivelul unor secvene comune (oncogene).

Hibridizarea molecular aplicaii practice (2)

2.

Prin identificarea catenei ADN complementare din heteroduplexul ADN-ARN se permite: - precizarea regiunii cromozomiale transcrise, - date despre starea funcional a unei gene, - date despre rata transcrierii, Evidenierea localizrii i extinderii deleilor (bucla de deleie) Realizarea hibridizrii moleculare in situ

2.

3.

Hibridizarea molecular in situ

Se realizeaz prin introducerea deliberat n mediul de renaturare a unor SONDE sau PROBE (catene ADN sau ARN la care s-a ataat un marker), Markerul poate fi: - izotopic ( I125, P32), - nonizotopic (biotin, digoxigenin). Reacia de hibridizare are o sensibilitate i specificitate ridicate, Constituie etap intermediar n multe tehnici de diagnostic molecular.

ORGANIZAREA ADN N CELUL

Aparatul genetic al unei celule este alctuit din:

structurile celulare care conin ADN (nucleul,

mitocondriile)
Structurile care intervin n realizarea funciilor

sale (ribozomii i centriolii)

Structura nucleului difer n I i DC (etape

principale ale ciclului celular)

2 forme reversibile de organizare diferit a ADN n nucleu:

Cromatina (n interfaz) Cromozomi (n diviziune)

CROMOZOMI/CROMATIN
Dou forme reversibile de organizare diferit a ADN, Asocierea ADN nuclear cu proteine = CROMATIN, Cromatina prezint grade diferite de condensare, corelate cu stadiile ciclului celular,

Se prezint sub dou tipuri morfo-funcionale: eucromatin i heterocromatin

Eucromatina
Este puin condensat, Bogat n ADN nerepetitiv, proteine nehistonice i perechi G-C, Reprezint partea activ genetic (transcripional) a cromatinei Se replic precoce, la nceputul fazei S

Heterocromatina
Este foarte compactat (condensat sub form de cromocentrii), Bogat n ADN repetitiv, perechi A-T, histone Este inactiv genetic (transcripional), Prezint replicare tardiv

Heterocromatina rol, clasificare

Stabilizeaz centromerul i telomerele, Intervine n desfurarea meiozei, Rol n diferenierea celular, Este de dou feluri:
constitutiv i facultativ.

Heterocromatina constitutiv
Constant sub form condesat, La nivel cromozomial o gsim la nivelul:
- centromerului, - braului lung al cromozomului Y, - telomerelor acrocentricilor, - constricilor secundare.

Se poate evidenia prin tehnica de bandare C.

Heterocromatina facultativ
Poate fi activ sau inactiv transcripional. Heterocromatinizarea/inactivarea este reversibil
sub aciunea unor derepresori specifici, unele gene i redobndesc activitatea transcripional

Regiunile cu HC facultativ difer de la un tip celular la altul. Exemplu: lyonizarea = fenomenul de compensare de doz (Cromatina X).

ipoteza Lyon
la femeile normale (46,XX), unul din cei doi cromozomi X se inactiveaz
total; precoce; ntmpltoare, independent n celule diferite. Inactivarea este definitiv, ireversibil:

Astfel, organismul femeilor este un mozaic pentru toate genele situate pe acest cromozom.

ipoteza Lyon
Femeile heterozigote pentru gene situate pe cromozomul X
au o variabilitate considerabil n expresia fenotipic ex: daltonismul, hemofilia, distrofia muscular Duchenne, deficit de G-6-

PD.

Cromatina X
Rezult din inactivarea unui cromozom X, n celule somatice ale organismelor de sex feminin, corpusculul Barr- epiteliul bucal exist gene care se transcriu i pe X condensat

Cromatina X
n momentul intrrii n meioz ambii X sunt activi Inactivarea la zigoii de sex feminin este:

timpurie (ziua 14-16 de dezvoltarea intrauterin), independent n fiecare celul, ntmpltoare i definitiv

Cromatina X
Mecanismul inactivrii modificarea gradului de metilare a C n anumite gene

X inactivat se replic n faza S tardiv. Se determin din celulele mucoasei bucale = corpusculul Barr ( nr. corpusc= nr. X 1). Se poate determina i din PMN (apendici nucleari).

Cromatina Y
Reprezint aspectul interfazic ale celor 2/3 distale ale braului lung al cromzomului Y, Alctuit din heterocromatin constitutiv, intens fluorescent (UV)= corpusculul F Nr. Corpusculilor F = nr. cromozomilor Y.

Structura supramolecular a cromatinei (structura teriar a ADN)

Sistem ierarhizat de fibre de cromatin, de dimensiuni diferite, format din: - ADN - histone - proteine nehistonice Raportul ADN/histone=1

Histonele (1)
Proteine bazice, prezente numai la eucariote, Afinitate ridicat pentru ADN (fixare pe mica incizur), Genele se exprim n faza S, sincron cu replicarea,

Genele pentru histone nu au introni, se afl n multe exemplare (peste 20) pe cromozomii 1,6,12.
Cinci tipuri : H1, H2A, H2B, H3, H4

Histonele (2)
Structur stabil, nalt conservat (excepie H1) Rol structural important: organizarea i compactarea ADN n nucleu, Rol funcional:
reglarea expresiei genelor (transcripie):

acetilarea histonelor activare gene, metilarea histonelor inactivare genic.

Proteine nehistonice= hertone

Proteine acide, neutre, heterogene, puin abundente, Roluri funcionale preponderent:
reglarea i modularea activitii genelor,

Unele au rol structural, Se fixeaz de ADN n marea incizur, Exemplu: topoizomerazele, rol n reglarea replicrii
sectionare despiralizarea ADN si interventia enzimelor

implicate in replicare

Prima (I) etap de condensare a ADN

Fibrele subiri de cromatin = nucleofilamente (fibre primare de 10 nm)

Alctuite din:
nucleozomi i poriunile internucleozomale.

Nucleozomul
Unitate structural elementar, Alctuit din: miez=octamerul de histone = 2X(H2A + H2B + H3 + H4) n jurul lui se nfoar ADN de 1,75X =146 pb

Poriunile internucleozomale

Constiuite din ADN liber = ADN spacer/linker (60 pb) Se asociaz cu histona H1, Se formeaz o structur ce seamn cu un irag de mrgele.

Prima etap de condensare a ADN

Asamblarea nucleozomilor este mediat de o protein anionic: NUCLEOPLASMINA. Nucleozomii nu sunt structuri rigide, statice. Sunt fixai la o singur caten de ADN. Intervine n controlul expresiei genice: - factori reglatori difuzibili
poriunile

- conformaia Z
Rat de mpachetare de 10:1.

internucleozomale

A doua (II) etap de condensare a ADN

Formare fibre groase de cromatin (30nm)cromonem
Spiralizare n solenoide cu 6 nucleozomi/spir(particip histona H1 Unitatea fundamental de organiz. a cromatinei n interfaz

compactare de 5:1 Favorizeaz interaciunile genice

Al treilea (III) nivel de organizare al cromatinei

Plierea cromonemelor n bucle laterale (domenii) Lungimi diferite (20-100 kb). Diametrul fibrei astfel pliate fiind de 300 nm. Grad de compactare 10:1. Buclele au situsuri de legare la o armtur central proteic, non histonic (topoizomeraza II).

Al treilea (III) nivel de organizare al cromatinei

Fiecare bucl = unitate funcional, de transcripie i replicare = domeniu Un domeniu este alctuit din gene nlnuite fizic, Activarea coordonat a genelor nlnuite se face prin deplicaturarea buclei (de ctre factori inductibili). Buclele se fixeaz neregulat la armtura proteic Se formeaz n anumite regiuni aglomerri de bucle CROMOMERE-

Cromozomii
Compactarea suplimentar (20X) d natere cromatidei unui cromozom. Procesul ncepe n profaz, iar n metafaz atinge cel mai nalt grad de compactare. Cromatida- grosime 700 nm.

Cromozomii
Cel mai mic cromozom are 4,6 X107 pb,
n interfaz are 1,4 cm, n metafaz are 2 micrometri.

Compactare de 10.000 X a moleculei de ADN.

Necesar distribuiei corecte a materialului genetic n diviziune.

BENZILE CROMOZOMILAE
se formeaz prin unirea cromomerelor vecine, unite ntr-o structur mai mare. Benzile: reflect structura intern heterogen= regiuni din genom cu proprieti i funcii diferite.
Benzile G intens colorate, condensate Grmezi mai mari de cromomere.
Se formeaz prin unirea cromomerelor vecine, unite ntr-o structur mai mare

buclele dense, puncte de ataare mai multe, strns apropiate Bogate n A T

Benzile R clare, slab colorate Densitatea punctelor de ataare- redus buclele laxe Bogate n C G

Structura i localizarea genelor

CONCEPIA CLASIC DESPRE STRUCTURA GENEI

Gena: unitate structural

Definiia clasic a genei: Gena = segment cromozomial, precis delimitat, continuu, care determin un anumit caracter fenotipic Gena ocup o poziie fizic fix pe cromozom, denumit LOCUS (pl. LOCI) Loci - pot fi situai pe autozomi sau pe heterozomi Genele de pe X i Y sunt implicate n procesele de dezvoltare i difereniere sexual Cr.X are numeroase alte gene pentru caractere nesexuale.(gena pt G6PDH, factor VIII, distrofina)

Gene alele
Fiecare gen: form normal, standard sau de tip slbatic Gena alel = variant alternativ a unei gene, aprut ca urmare a unei mutaii, acelai locus influeneaz acelai caracter.

Un caracter monogenic este determinat de o pereche de gene alele ce ocup loci omologi i fiecare alel determin un efect fenotipic diferit asupra aceluiai caracter

Polialelia
Dac apar mutaii diferite n gena normal (A), vor exista mai multe variante alelice = ALELE MULTIPLE (A1, A2, A3....An). Fenomenul poart denumirea de POLIALELIE (n context populaional). Fiecare alel determin un efect fenotipic diferit asupra aceluiai caracter.

Segregarea genelor alele

Un caracter (monogenic) este determinat de o pereche de gene alele ce ocup loci omologi, n anafaza meiozei I, genele alele segreg (se separ) odat cu cr.omologi pe care se afl Gameii rezultai la sf meiozei- nr haploid de cr- sunt "puri" genetic- au o sg. gen din perechea de alele

Segregarea genelor alele

Genele alele situate pe o pereche de cromozomi omologi, segreg INDEPENDENT de genele alele situate pe alt pereche de cromozomi (n meioz)

Homozigot, heterozigot, hemizigot

Homozigot = Gene alele identice (NN, AA) Heterozigot = Gene alele diferite (NA) Heterozigot compus = dou alele mutante diferite (A1A2) Hemizigot = exist o singur gen pentru un caracter (gene de pe X sau Y la brbai)

Dominant, codominant, recesiv

Gena i caracterul care se manifest la heterozigoi = DOMINANTE Gena i caracterul care se manifest numai n stare homozigot = RECESIVE Genele alele care se manifest fenotipic la heterozigoi = CODOMINANTE.
Gr sangv. AB

Gene sintene
gene nealele, situate pe loci distinci, dispuse liniar, n monom, pe un cromozom Prezena a dou sau mai multe gene distincte pe acelai cromozom = SINTENIE.

nlnuirea genic = linkage

Fenomenul prin care gene nealele, apropiate, au tendina de-a se transmite mpreun, fr segregare n succesiunea generaiilor. Haplotip = genele dintr-un grup de nlnuire, care se transmit mpreun n succesiunea generaiilor
ex: HLA

Structura i localizarea genelor

CONCEPIA ACTUAL DESPRE STRUCTURA GENEI

Definiia actual a genei

Gena = o colecie liniar de secvene dezoxiribonucleotidice, necesar pentru a produce un polipeptid sau o molecul de ARN funcional, care realizeaz mpreun cu elementele de control adiacente ambelor capete o unitate structural i funcional. Gena = este o unitate de transcripie, astfel se poate explica:
poligenia (implicarea mai multor gene n determinismul aceluiai

caracter) Pleiotropia (efectul fenotipic al unei gene unice asupra mai multor caractere)

~ 10 000 loci cunoscuti ~ 25 000 gene >18 000 caractere/boli monogenice cunoscute

Cauzele acestor diferente?

nu toate genele si locii sunt cunoscuti anumite boli/caractere sunt determin. de interventa mai multor gene = caractere/ boli complexe mutatii diferite in aceeasi gena responsabile de caractere/boli diferite

Clasificarea genelor
Gene de clas I (ribozomale) - transcrise de ARN polimeraza I - codific precursori sau molecule de ARN ribozomal Gene de clas II - transcrise de ARN polimeraza II. - codific proteine Gene de clas III - transcrise de ARN polimeraza III - codific ARNt i alte molecule mici de ARN

Genele care codific proteine

Sunt alctuite din: Partea central:
cadru de lectur, se transcrie.

Dou regiuni laterale:

secvene de reglare a expresiei genice, nu se transcriu.

Regiunea central a genei

Se transcrie integral n ARN mesager precursor sub aciunea ARN polimerazei II La eucariote- structur discontinu: - EXONI, - INTRONI (secvene necodante).

Regiunea central a genei

ncepe cu situsul de iniiere al transcripiei (Inr) Dup Inr urmeaz o regiune necodant 5 UTR, transcris dar netranslatat
conine codonul start

Se termin cu secvena 3 UTR, necodant, care conine

unul din codonii stop situsul de poliadenilare - AATAAA

Exonii
Secvene transcrise n ARN mesager precursor i pstrate n ARNm matur,
Codific DOMENII (subuniti polipeptidice distincte) ale proteinelor din care fac parte, avnd funcii specifice Nr exonilor e variabil Lungima medie 150 pb, Gene diferite pot avea exoni identici, Nu e obligatorie translaia ex: pt exonul 1 al genei pentru insulina

Intronii
Secvene transcrise n ARN mesager precursor dar ndeprtate ulterior din ARNm matur, Nr introni e cu o unitate mai mic ca al exonilor (I = E 1); orice gen ncepe i se termin cu un exon Lungime variabil, neconcordant cu cea exonilor (sutemii de pb), Aproape toi ncep cu dinucleotidul 5'-GT i se termin cu 3'-AG.

Introni i exoni
Genele mici au 2 introni:
Gena beta globinei (1,5 kb), Insulinei (1,7 kb)

Una din cele mai mari gene (a distrofinei):

2500 kb, 79 exoni

Gene fr intoni:
Genele histonelor, interferonilor, SRY, Xist, gena ptr.

receptorul de tip I al AG II,ptr. receptorul alfa 2 adrenergic. Nu depesc 6% din totalul genelor.

Rolul intronilor
Nu doar pasiv, de spaiatori !! 1. Guverneaz procesul de prelucrare a ARN premesager n ARNm matur,
2.

Pot funciona ca transpozoni (fragmente mobile de ADN, ce-si schimba pozitia), Intervin n reglarea expresiei genice, Menin i coordoneaz diferenierea celular i tisular.

3. 4.

Genele care codific proteine

Sunt alctuite din: Partea central:
- cadru de lectur, - se transcrie.

Dou regiuni laterale

rol n reglarea expresiei genice, nu se transcriu.

Secvenele de reglare a genei

Dou regiuni laterale, netranscrise:
Regiunea lateral 5= PROMOTOR Regiunea lateral 3

Rol:
semnalizeaz iniierea transcripiei, regleaz intensitatea ei.

Amplificare atenuarea

Promotorul
Conine mai multe elemente cis activatoare Locul de unde se iniiaz transcripia, prin fixarea factorilor de transcripie (FT) Are trei regiuni:
Miezul promotorului Regiunea promotor proximal Regiunea distal a promotorului

Miezul promotorului
Conine module care formeaz complexul transcripional bazal TATA box (la circa 25-30 pb n amonte de situsul de Inr), alctuit din hexanucleotidul TATAAA TATA box este prezent la aproape toate genele specifice de esut.

TATA box
Asigur demararea precis a transcripiei, Asigur expresia genei la nivel bazal, Mutaia secvenei TATA produce o deplasare a punctului start.

Regiunea promotor proximal

Conine elemente care moduleaz transcripia bazala.

CAAT box (la circa 75 pb de inr)-rol modulator n transcripia

bazal. GC box (la 100 pb de inr)-acelai rol. Se mai gsesc secvene ADN implicate n:
Specificitatea stadiului de dezvoltare, Specificitatea tisular.

Regiunea distal a promotorului

Conine elemente de reglare de tip cis:
Intensificatorii: elemente de reglare pozitiv, care cresc nivelul bazal al transcripiei, La distan de sute sau mii de nucleotide de inr, Funcia lor nu depinde de orientare sau localizare. Sileniatorii: Reduc nivelul transcripiei, Pot represa funcia unor gene.

Regiunea lateral 3
cu aceasta se termin gena, nu se transcrie Imprecis delimitat i cunoscut, Secvene semnal care afecteaz:
Procesarea ARNm, Stabilitatea ARNm, Durata de via a ARNm.

La unele gene se pot gsi activatori.

Gene care codific proteine

1.

Gene comune Gene specifice

2.

Gene comune (houskeeping)

Grup restrns de gene
codific proteine comune, indispensabile fc celulare

Se exprim n toate celulele,

transcriere continu, dar la nivele sczute

Reprezint circa 1/5 din numrul total de gene la om Se gsesc n benzile G- sau R Promotorul lor e alctuit numai din una sau mai multe cutii de tip CG.

Gene specifice
Reprezint aproximativ 4/5 din genele umane Au expresie limitat: Spaial:
n anumite esuturi, Linii celulare, Tipuri celulare, Celule individuale.

Temporal (n anumite stadii ale dezvoltrii,

diferenierii sau ciclului celular).

Gene unice
Marea majoritatea a genelor Unele au fost duplicate: Dou copii cvasiidentice, folosite aleatoriu n transcripie - ex genele 1 i 2 globina
Copii defective, nefuncionale Pseudogene notate cu Gene trunchiate, fragmente de gene
Exemple gena NF 1 are 11 pseudogene/fragmente

Familii i superfamilii de gene

Gene funcionale cu secvene similare 1. Familiile clasice de gene
Origine comun duplicaia succesiv a unei gene ancestrale
Dispersate Grupate -clusters

Ex: genele pentru histone (1300), ARNr (>2000), FT

2. Superfamilii de gene Intervin n procese corelate Au un motiv structural identic Ex: genele imunitii : IG, receptorii, HLA