Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

EFICIENA TRATRII ENZIMATICE A PASTEI DE FRUCTE CU PREPARATE CELULOZOLITICE I PECTOLITICE SINTETIZATE DE UNELE MICROMICETE DIN GENUL PENICILLIUM
Clapco S., Ciloci A., Tiurina J., Labliuc S., Dvornina E., Stratan M. Institutul de Microbiologie i Biotehnologie al Academiei de tiine a Moldovei Introducere Preparatele enzimatice sunt pe larg aplicate n diverse ramuri de producere. n anul 2000, vnzarea pe plan mondial a enzimelor industriale se estima la 1,6 miliarde de dolari SUA. De remarcat c, aproximativ 75% din enzimele industriale comercializate sunt prezentate de hidrolaze, printre care carbohidrolazele, situndu-se pe locul doi [3]. n ultimii ani, a crescut considerabil folosirea pectinazelor, celulazelor, care graie capacitii de a realiza degradarea rapid a polimerilor pectici, celulozici, hemicelulozici, sunt solicitate n procesele industriale de prelucrare a materiei prime vegetale industria alimentar, textil, fabricarea berei i vinului, industria celulozei i a hrtiei, etc. [12, 18, 22]. Numeroasele implicri practice ale hidrolazelor argumenteaz necesitatea obinerii lor pe cale microbian, mult mai avantajoas, comparativ cu extracia din surse vegetale, datorit variabilitii, adaptabilitii, potenialului biosintetic nalt al microorganismelor, ct i posibilitii de manipulare a metabolismului microbian [8]. Problema evidenierii i introducerii n cultur a noi surse de enzime cu proprieti superioare rmne a actual, de importan major pentru biotehnologie. Anterior, n cadrul laboratorului Enzimologie al Institutului de Microbiologie i Biotehnologie al AM au fost selectate dou tulpini fungice, reprezentante ale genului Penicillium: Penicillium viride CNMN FD 04P productoare perspectiv de pectinaze i Penicillium expansum CNMN FD 05C productoare de celulaze. Au fost stabilite regimurile optime de cultivare a miromicetelor productoare, elaborate procedee de sinteza orientat dirijat ce asigura randamente superioare ale enzimelor precutate [4-7].

139

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

Pornind de la ideia c, pectinazele i celulazele (n special -glucozidazele) prezint un instrument important n inuenarea cantitii i calitii sucurilor i sunt absolut necesare n extracia, limpezirea, depectinizarea sucurilor de fructe, extracia aromelor i a pigmenilor vegetali, etc. [8, 9, 13-16, 26], scopul cercetrilor prezente a constat n studiul posibilitii utilizrii noilor preparate enzimatice cu aciune pectolitic i celulozolitic sintetizate de micromicetele Penicillium viride CNMN FD 04P i Penicillium expansum CNMN FD 05C pentru prelucrea esuturilor vegetale (prune, mere, struguri), intru sporirea randamentului de suc i a proprietilor zico-chimice ale acestora. Materiale i metode Obiecte de studii au servit mostrele de preparate enzimatice cu aciune pectolitic i celulozolitic, sintetizate de ctre micromicetele Penicillium viride CNMN FD 04 P productor de pectinaze i Penicillium expansum CNMN FD 05C productor de celulaze [4, 5]. Cultivarea submers a productorilor s-a efectuat pe agitatoare cu viteza de rotaie 180-200 rot./min., la temperatura de 28-300C pe medii cu compoziie selectat individual pentru ecare tulpin. Dup dezvoltarea culturilor i biosinteza enzimelor lichidul cultural (LC) a fost separat de biomas prin ltrare, folosind ltre de hrtie. Ulterior ltratul de cultur a fost centrifugat la 3500-4000 r.p.m. timp de 20 minute. Separarea complexelor enzimatice din ltratul de cultur s-a realizat cu alcool etilic (AE) de 96% rcit ce permite obinerea preparatelor enzimatice cu grad de puricare 10 x [17, 19]. Sedimentarea complexului celulazic din lichidul cultural (LC) al micromicetei Penicillium expansum CNMN FD 05C s-a efectuat cu alcool etilic (AE) de 96 rcit pn la temperatura de -10. Temperatura lichidului cultural - +4 -+5o. Raportul LC : AE 1:4. Concentraia clorurii de calciu CaCl2 n amestecul de reacie a constituit 0,1%, temperatura sedimentrii - +4 -+5 ; pH mediului de reacie 6,8, durata de contact 2 ore. Sedimentarea pectinazelor din lichidul cultural (LC) al micromicetei Penicillium viride CNMN FD 04P s-a efectuat cu alcool etilic (AE) de 96 rcit pn la temperatura de -10o. Temperatura lichidului cultural - +4 -+5. Raportul LC : AE 1 : 3. Concentraia clorurii de calciu CaCl2 n amestecul de reacie a constituit 0,1%, temperatura sedimentrii - +4 -+5 ; pH mediului de reacie 3,0, durata de contact 1 or. Sedimentele enzimatice s-au separat din lichidul cultural prin centrifugare. Activitatea enzimatic a preparatelor obinute s-a determinat prin metodele acceptate n enzimologie dup aciunea asupra substraturilor standarde [21, 23, 24]. n vederea stabilirii posibilitii utilizrii noilor preparate enzimatice n tehnologiile de fabricare a sucurilor naturale limpezi, la nivel de laborator s-au realizat mai multe variante experimentale n funcie de: - tipul materiei prime mere, struguri, prune; - tipul preparatului enzimatic celulozolitic, pectolitic; - diverse dozaje de preparate enzimatice 0,02; 0,04; 0,06; 0,1; 0,2 i 0,3%. Preparatele enzimatice au fost folosite ca soluii apoase cu concentraiile menionate.

140

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

Pasta de fructe omogenizat a fost repartizat n variante a cte 50 g ecare, calculele efectuate i prezentate n tabele ind valabile pentru cantitatea dat. Operaia de macerare i limpezire enzimatica s-a realizat la temperatura 40 45C, timp de 2-4 ore, la pH-ul natural al sucului. Drept criterii de ecacitate a tratrii enzimatice fa de proba martor (nesupus tratrii cu enzime) au servit: - cantitatea de suc, ml; - densitatea sucului, g/ml; - cantitatea tescovinei, g; - viscozitatea sucului, determinat cu ajutorul viscozimetrului Oswald [22, 25]. Separarea sucului natural limpede de componentele solide s-a realizat n dou etape succesive. n cazul strugurilor i merelor, n prima etapa, sucul s-a separat prin scurgere, iar n a doua etapa, prin presarea tescovinei. n cazul sucului de prune separarea s-a realizat prin centrifugare timp de 20 min., la 4000 rpm. Rezultate i discuii Extracia sucurilor din fructe se realizeaz prin presare sau difuzie. Randamentul sucului este mai mare la extracia prin difuzie, dect la cea prin presare. Sucurile obinute prin difuzie, ns, au o arom mai atenuat i un coninut mai ridicat de pectine [28]. Tratarea enzimatic cu pectinaze exogene n mbinare cu celulaze asigur majorarea ecacitii preselor, reducerea considerabil a timpului necesar extraciei i confer sucului arom i proprieti senzoriale plcute [1, 3, 8, 11]. Astfel, aplicarea celulazelor sintetizate de micromiceta Trichoderma reesei, opional asociate cu pectinaze, pentru obinerea sucului de prune a asigurat sporirea cantitii de suc, ameliorarea calitii acestuia (coninutul substanelor uscate, diminuarea viscozitii), reducerea duratei extraciei [15]. Tratarea pastei de fructe (mere, portocale, banane) cu pectinliaze sintetizate de bacteria Bacillus pumilus a permis majorarea randamentului de suc cu 8-62,5%, n funcie de materialul tratat [13]. Utilizarea preparatului enzimatic pectolitic izolat din cultura submers de A. foetidus 379-K a asigurat creterea randamentului de suc de ane cu 10-20%, reducerea viscozitii sucului cu 45-50%, creterea concentraiei de acizi organici i substane solide cu 5-8% i, respectiv, 4-5% [27]. n cazul utilizrii a dou preparate enzimatice pectolitice comerciale, singular, sau n mbinare pentru tratarea pulpei de ananas, la cteva etape de extracie, randamentul sucului a crescut maxim cu 25%, viscozitatea a diminuat cu cca 40%, a crescut semnicativ coninutul zaharurilor solubile [2]. Investigaiile prezentate n lucrarea dat au fost axate pe studiul capacitii noilor preparate enzimatice cu aciune pectolitic i celulozolitic de a scinda polizaharidele structurale i substanele pectice din compoziia unor substrate native (struguri, mere, prune) n scopul evidenierii domeniilor de aplicare practic a acestora. Caracteristica procesului de extracie i parametrii sucului de prune sortul Stanly rezultat la tratarea pastei de fructe cu enzime pectolitice sintetizate de micromiceta Penicillium viride CNMN FD 04 P se prezint n tabelul 1. La tratarea pastei de prune cu preparatul pectolitic cantitatea de suc a crescut semnicativ 32,0-33,5 ml comparativ cu martorul nesupus tratamentului enzimatic 26,0 ml, sporul randamentului de suc variind ntre 23,0-28,9% n funcie de concentraia

141

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

preparatului. De asemenea, s-a nregistrat o diminuare semnicativ a viscozitii sucului cu 73,8-87,2%, fa de martor. Creterea randamentului de suc se datoreaz unei presri mai bune a pulpei, explicat prin faptul ca pectinele degradate pierd capacitatea de a lega apa. Hidroliza pectinei stimulat de adaosul de pectinaze exogene conduce la o descretere rapida a viscozitii, o mai buna presare a pulpei i un randament mai mare n suc.
Tabelul 1. Modicarea randamentului i parametrilor sucului de prune soiul Stanley la tratarea pastei de fructe cu enzime pectolitice obinute din lichidul cultural al micromicetei Penicillium viride CNMN FD 04 P.
Concentraia preparatului, %* 0,04 0,06 0,1 0,3 martor Randamentul de suc* ml 32,0 33,0 33,5 33,0 26,0
*

Reziduu uscat* g 2,70 2,61 2,61 2,63 3,79 %, fa de martor 71,2 68,9 68,9 69,4 100,0

%, fa de martor 123,1 126,9 128,8 126,9 100,0

Diminuarea viscozitii, % 85,1 87,2 87,8 88,7 100,0

Densitatea g/ml 1,347 1,469 1,427 1,347 0,287

calcule efectuate la 50 g past de fructe

Graie creterii cantitii de substane hidrosolubile formate ca urmare a hidrolizei, probele de suc obinute la tratarea enzimatic se disting prin densitate de cca 4-5 ori mai nalt comparativ cu martorul, 1,272-1,469 g/ml, fa de 0,287 g/ml. Astfel, aplicarea preparatelor enzimatice n procesul de obinere a sucului asigur nu doar majorarea randamentului acestuia, dar i mbuntirea calitii. De marcat i diminuarea cantitii de tescovin, care n condiiile experienei a constituit 26,7-31,6% fa de proba martor. Deoarece deeurile de producere constituie o problem major pentru industrii, reducerea cantitii de tescovin la producerea sucurilor reprezint un beneciu in plus. Utilizarea diferitor concentraii de preparat enzimatic (0,02; 0,04; 0,06; 0,1; 0,2 i 0,3% la masa de fructe) a permis de a scoate n eviden raportul optim enzim : substrat. Ecacitatea maxim dup toi parametrii studiai a fost nregistrat n probele tratate cu preparatul pectolitic n concentraii ce variau ntre 0,06-0,1%. Astfel, la dozele menionate randamentul de suc a crescut cu 26,9-28,8%, densitatea pn la 1,427-1,469 g/ml, fa de 0,287 g/ml n martor, viscozitatea sucului a diminuat cu 87,2-87,8%, iar cantitatea de tescovin cu 31,1%. Aplicat n concentraii superioare celor optime preparatul enzimatic pectolitic practic nu modic cantitatea de suc i parametrii zico-chimici ai acestuia. Complexitatea structural a peretelui celular vegetal constituit dintr-o reea de microbrile de celuloz legate prin molecule de hemiceluloz i alt reea format din molecule de pectin legate ncruciat, sugereaz ideia c pectinazele nu sunt unicele enzime cheie n degradarea ecient a lor, ind necesar aciunea mai multor tipuri de fermeni celulaze, hemicelulaze [8, 20, 28]. Reieind din cele menionate, au fost iniiate cercetri de apreciere a ecienei utilizrii preparatului enzimatic celulozolitic separat din ltratul de cultur al micromiceti Penicillium expansum CNMN FD 05 C pentru majorarea randamentului de suc de prune i ameliorarea calitii lui. Rezultatele studiului sunt prezentate n tabelul 2.

142

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

Tabelul 2. Modicarea randamentului i parametrilor sucului de prune soiul Stanley la tratarea pastei de fructe cu enzime celulozolitice obinute din lichidul cultural al micromicetei Penicillium expansum CNMN FD 05C
Concentraia preparatului, %* 0,02 0,04 0,06 0,1 0,2 0,3 martor Randamentul de suc* ml 26,0 28,0 30,0 33,0 33,0 33,0 26
*

Reziduu uscat* g 3,54 3,03 2,85 2,75 2,75 2,74 3,79 %, fa de martor 93,4 79,9 75,2 72,6 72,6 72,3 100,0

%, fa de martor 100,0 107,7 115,4 126,9 126,9 126,9 100,0

Diminuarea viscozitii, % 69,5 73,2 75,9 78,0 75,9 77,4 100,0

Densitatea, g/ml 0,562 0,597 0,776 0,798 0,809 0,798 0,287

calcule efectuate la 50 g past de fructe

S-a constatat c preparatul celulozolitic aplicat pentru macerarea pastei de prune asigur creterea cantitii de suc cu pn la 26,9%, fa de martor. A fost marcat modicarea parametrilor zico-chimici ai sucului obinut, valorile lor ind ns mai reduse comparativ cu cele a probelor tratate cu pectinaze: - viscozitatea sucului a diminuat cu 75,9% (la conc. 0,06%) i 78,0% (la conc. 0,1%); - densitatea a crescut pn la 0,776 g/ml (la conc. 0,06%) i 0,798 g/ml (la conc. 0,1%), fa de 0,287 g/ml n proba martor; - cantitatea de tescovin a sczut cu 27,5% (la conc. 0,1%); Conform rezultatelor obinute raportul optim enzim : substrat este nregistrat la concentraia preparatului 0,1% la masa de fructe. Datele privind tratarea mustuielii de struguri soi Aligote cu preparatele enzimatice noi sunt reectate n tabelul 3 i 4.
Tabelul 3. Modicarea randamentului i parametrilor sucului de struguri soiul Aligote la tratarea pastei de fructe cu enzime pectolitice obinute din lichidul cultural al micromicetei Penicillium viride CNMN FD 04 P
Concentraia preparatului, %* 0,02 0,04 0,06 0,1 0,2 0,3 martor Randamentul de suc* ml 35,0 36,0 37,0 37,0 37,0 37,5 33,0
*

Reziduu uscat* g 2,62 2,55 2,18 2,23 2,22 2,20 2,90 %, fa de martor 90,3 87,9 75,2 76,9 76,6 75,9 100,0

%, fa de martor 106,1 109,1 112,1 112,1 112,1 113,6 100,0

Diminuarea viscozitii, % 50,0 59,1 65,9 64,8 68,2 63,6 100,0

Densitatea, g/ml 0,541 0,592 0,954 0,941 0,967 0,941 0,350

calcule efectuate la 50 g past de fructe

143

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

Tabelul 4. Modicarea randamentului i parametrilor sucului de struguri soiul Aligote la tratarea pastei de fructe cu enzime celulozolitice obinute din lichidul cultural al micromicetei Penicillium expansum CNMN FD 05C Concentraia preparatului, %* 0,02 0,04 0,06 0,1 0,2 0,3 martor Randamentul de Reziduu uscat* suc* %, fa de %, fa de g ml martor martor 35,0 106,1 2,76 95,2 35,0 36,0 37,0 37,0 37,0 33,0 106,1 109,1 112,1 112,1 112,1 2,68 2,46 2,33 2,35 2,37 92,4 84,2 80,3 81,0 81,7 Diminuarea viscozitii, % 31,8 38,6 50,0 59,1 56,8 56,8 Densitatea, g/ml 0,541 0,592 0,677 0,683 0,673 0,673 0,350

100,0 2,90 100,0 100,0 * calcule efectuate la 50 g past de fructe

S-a stabilit c, n ambele cazuri randamentul de suc a crescut cu cca 12%, ceea ce este semnicativ mai puin n comparaie cu datele xate la prune, fapt explicat prin coninutul sczut de substane pectice n compoziia peretelui celular al strugurilor, ceea ce face posibil separarea mai uoar a sucului chiar i n lipsa enzimelor exogene. Procesul de extracie i parametrii zico-chimici ai sucului de struguri s-a modicat dup cum urmeaz: - scderea viscozitii a constituit 64,8-65,9% n cazul aplicrii pectinazelor i 56,8-59,1% n cazul celulazelor, respectiv (conc. 0,06-0,1%); - densitatea a variat ntre 0,941-0,954 g/ml n primul caz i 0,677-0,683 g/ml n al doilea caz , respectiv (conc. 0,06-0,1%), fa de 0,350 g/ml n martor; - cantitatea de tescovin a sczut cu 24,8% i 19,7%, corespunztor. Raportul optim enzim : substrat a fost marcat pentru preparatul enzimatic pectolitic la concentraia 0,06% la masa de fructe, iar pentru celulaze la concentraia de 0,1%, concentraii ce asigur ecacitate maxim. La etapa ulterioar a fost studiat inuena preparatelor enzimatice pectolitice i celulozolitice asupra procesului de extracie a sucului din pulpa de mere soi Talisman. Conform datelor cuprinse n tabelul 5 i 6 tratarea enzimatic inueneaz semnicativ randamentul sucului de mere, n special la utilizarea preparatului enzimatic pectolitic. Astfel, la aplicarea pectinazelor cantitatea de suc a crescut cu 20-22,9%, iar la variantele prelucrate cu celulaze cu 14,3%. Pentru ambele tipuri de enzime concentraiile optime au fost de 0,06; 0,1% la masa de fructe. n concentraiile menionate preparatele enzimatice au provocat modicri eseniale ale parametrilor zico-chimici ai sucului: - viscozitatea sucului a diminuat cu 89,1-90,6% la aplicarea pectinazelor i cu 56,9-59,4% - la probele tratate cu celulaze; - densitatea sucului a crescut de la 1,514 g/ml pn la 2,302 g/ml i 1,897 g/ml, respectiv; - cantitatea reziduului uscat a sczut cu 30,1-35,5% i 23,6-28,96%, corespunztor.

144

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

Tabelul 5. Modicarea randamentului i parametrilor sucului de mere soiul Talisman la tratarea pastei de fructe cu enzime pectolitice obinute din lichidul cultural al micromicetei Penicillium viride CNMN FD 04 P
Randamentul de suc* Concentraia preparatului %* 0,02 0,04 0,06 0,1 0,2 0,3 martor ml 40,0 41,0 42,0 42,0 42,0 43,0 35,0
*

Reziduu uscat* g 1,95 1,90 1,81 1,71 1,67 1,67 2,59 %, fa de martor 75,3 73,4 69,9 66,0 64,5 64,5 100,0

%, fa de martor 114,3 117,1 120,0 120,0 120,0 122,9 100,0

Diminuarea viscozitii, % 50,0 59,4 78,1 89,1 90,6 90,6 100,0

Densitatea, g/ml 1,714 1,771 2,302 2,207 2,207 2,302 1,514

calcule efectuate la 50 g past de fructe

Tabelul 6. Modicarea randamentului i parametrilor sucului de mere soiul Talisman la tratarea pastei de fructe cu enzime celulozolitice obinute din lichidul cultural al micromicetei Penicillium expansum CNMN FD 05C
Concentraia preparatului, %* 0,02 0,04 0,06 0,1 0,2 0,3 martor Randamentul de suc* ml 37,0 38,0 40,0 40,0 40,0 40,0 35,0
*

Reziduu uscat* g 2,21 2,14 1,98 1,93 1,84 1,90 2,59 %, fa de martor 85,3 82,4 76,4 74,5 71,0 73,4 100,0

%, fa de martor 105,7 108,6 114,3 114,3 114,3 114,3 100,0

Diminuarea viscozitii, % 20,3 31,3 56,9 59,4 57,8 59,4 100,0

Densitatea, g/ml 1,714 1,771 1,897 1,832 1,897 1,832 1,514

calcule efectuate la 50 g past de fructe

De remarcat c, n cazul tuturor tipurilor de substraturi vegetale studiate (prune, struguri, mere) majorarea concentraiei enzimelor (pectinaze, celulaze) pn la 0,2; 0,3% la masa de fructe nu determin intensicarea efectului urmrit la concentraiile optime (0,06-0,1%) i, deci, este inecient. Explicaia teoretic a efectului dat const n inhibiia enzimei prin feedback sau inhibiia prin produs nit. Aa, produsele nite ale reaciei se pot lega cu unul din componentele sistemei enzimatice (coenzim, activator), ca urmare inactivnd enzima i reducnd viteza reaciei [10]. Obinerea efectului maxim cu aplicarea unor concentraii mici de preparate enzimatice prezint interes practic, conducnd la reducerea consumului de preparate i asigurarea rentabilitii economice. n concluzie menionm c preparatelor enzimatice pectolitice i celulozolitice sintetizate de micromicetele Penicillium viride CNMN FD 04 P i Penicillium expansum CNMN FD 05C posed capacitatea de a scinda polizaharidele din compoziia unor substraturi vegetale native (struguri, mere, prune). Aplicate n concentraii optime

145

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

(0,06-0,1%), preparatele asigur majorarea randamentului de suc cu 12,1-28,8%, a densitii cu 0,33-1,18 g/ml, diminuarea viscozitii i a cantitii de tescovin cu 59,189,1% i, respectiv, 19,7-31,1%. Preparatele enzimatice pectolitice i celulozolitice noi pot recomandate (aplicate singular sau n combinaii) n industria alimentar, oenologie pentru optimizarea proceselor tehnologice de macerare pelicular, mbuntirea extraciei, limpezirea, ameliorarea calitii i stabilitatea sucurilor, vinurilor. Bibliograe
1. Bhat M.K. Cellulases and related enzymes in biotechnology // Biotechnology Advances, no. 18, 2000, p. 355383. 2. Bitange N., Zhang W., Shi-Ying Xu, Wenbin Z. The inuence of a pectinase and pectinase/ hemicellulases enzyme preparations on percentage pineapple juice recovery, particulates and sensory attributes // Pakistan Journal of Nutrition, no. 8 (8), 2009, p. 1184-1189 3. Demain A L. Microbial biotechnology. Trends Biotechnol 2000, 18, p. 2631. 4. Deseatnic A., Clapco S., Tiurin J., Paa L., Labliuc S. Brevet de invenie. 2613, MD, Tulpin de fungi Penicillium viride productoare de pectinaze // BOPI nr.11/ 2004. 5. Deseatnic A., Paa L., Clapco S., Tiurin J., Labliuc S. Brevet de invenie. 2588, MD, Tulpin de fungi Penicillium expansum productoare de celulaze // BOPI nr.10/ 2004. 6. Deseatnic A., Clapco S., Dru V., Tiurin J., Labliuc S., Grdinaru J., Grblu N. Brevet de invenie. 2837, MD, Mediu nutritiv pentru cultivarea tulpinii de fungi Penicillium viride CNMN FD 04 P, variante // BOPI nr.8/2005 7. Deseatnic A., Paa L., Bologa O., Tiurin J., Labliuc S, Grblu N., Rudic V. Brevet de invenie. 2747, MD, Mediu nutritiv pentru cultivarea tulpinii de fungi Penicillium expansum CNMN FD 05 C // BOPI nr.2/ 2005. 8. Dinu D., Enzimele pectolitice de origine microbian, http://www.unibuc.ro/eBook/ capitolul6 9. Grigoric L., Namoloanu I., Antoce A., et. al. Inuena tehnologiei de vinicare asupra caracteristicilor senzoriale ale soiului // Lucrri tiinice, seria Horticultur, anul XLIX (49), Editura Ion Ionescu de la Brad, Iai, 2006, p.695-700. 10. Lungu C., Biochimia produselor alimentare, 133 p., http://www.idd.ugal.ro 11. Mantovani C. F., Geimba M. P., Brandelli A. Enzymatic clarication of fruit juices by fungal pectin lyase // Food Biotechnology, 2006, no. 19 (3), p 173181; 12. Mantyla A, Paloheimo M, Suominen P. Industrial mutants and recombinant strains of Trichoderma reesei // Harman GF, Kubicek CP, editors. Trichoderma & Gliocladium Enzymes, biological control and commercial applications, Vol. 2. London: Taylor & Francis, 1998. p. 291309 13. Nadaroglu H., Takin E., Adiguzel A. et al. Production of a Novel Pectin Lyase From Bacillus pumilus (P9), Purication and Characterization and Fruit Juice Application // Romanian Biotechnological Letters Vol. 15, No.2, 2010, p.5167-5176. 14. Pinelo Manuel, Birgitte Zeuner, Anne S. Meyer, Juice clarication by protease and pectinase treatments indicates new roles of pectin and protein in cherry juice turbidity, Food and Bioproducts Processing, 2009, www.elsevier.com/locate/fbp 15. Posorske L.H., Prune juice production using cellulase, United States Patent, 322, 1981. 16. Sandeep Singh, Reena Gupta, Apple juice clarication using fungal pectinolytic enzyme and gelatin // Indian J. Of Biotechnology, Vol. 3, 2004, p. 573-576. 17. .. , . , 1987, 335c.

146

Microbiologia i Biotehnologia

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 3 (315) 2011

18. .., .., , . 2000, c. 8. 19. .., .., ., . . .. 1982. 20. .., .., .., .., , , . , 1981, . 191-197. 21. .., ... Aspergillus terreus 17p // ,, .5, 1975, . 676-677. 22. .. , ., , 2002, . 163-165. 23. . ., .. , .. . // . .2, .2, 1966, .197-205. 24. .., .. // . 6, - 1973, - c.922. 25. .., .., .. ., // . . ., . 42, 6, 2006, . 681-685. 26. .., .., .., . ., 1993, . 25, . 30-37 27. .., Aspergillus foetidus 379-K, . , , 2008, 26 . 28. ., .-., ., . , : , 18, 1995, 49 c.

147