BIOLOG PRINCIPAL SEVER GOGO

ORICE PROBA OBTINUTA DE LA UN SUBIECT IN VEDEREA ANALIZARII EI (EXSUDAT, PUROI, URINA, MATERII FECALE s.a) RECOLTATA CORESPUNZATOR BOLII PACIENTULUI RECOLTATA INAINTEA INCEPERII TERAPIEI CU ANTIBIOTICE RECOLTATA IN CONDITII ASEPTICE

RECOLTATA IN CANTITATE CORESPUNZATOARE INSOTITA DE UN BULETIN DE TRIMITERE:

Nume, prenume, data nasterii Solicitarea de examinare Data si ora recoltarii Eventualul tratament cu antibiotice Diagnosticul clinic prezumtiv Semnatura si parafa medicului

Nu se accepta in laborator prelevatele: Nemarcate Care nu au respectat conditiile de transport Duble, cu aceeasi solicitare Necorespunzatoare la triajul microscopic
3

Preferabil in decurs de 2 ore Pentru bacterii sensibile:

N. gonorrhoeae N. meningitidis H. influenzae Shigella se face insamantare imediata

Pastrarea se face in functie de natura

prelevatului : - la temperatura camerei - in mediu de conservare NU se pastreaza la frigider: prelevatele oculare, otice, genitale
4

Superioare Rinite Faringite(angine) Sinuzite Otite Laringite

Inferioare Traheite Bronsite Pneumonii Bronhopneumonii Pleurezii

5

 majoritatea
pot

sunt virale

apare suprainfectii bacteriene cu germeni conditionat patogeni

70% sunt virale restul sunt bacteriene: - frecvent: Streptococcus pyogenes - apoi: - Streptococi grup C,G - C. diphteriae - bacterii anaerobe: - N. gonorrhoeae - N. meningitidis - H. influenzae - C. pneumoniae - T. pallidum
7

Staphylococcus aureus flegmon amigdalian - asociat cu S. pyogenes fara semnificatie: - Enterobacteriaceae - Pseudomonas spp. Candida albicans:- interpretare in functie de: - aspectul clinic - abundenta culturii

Recoltare: - cu apasator de limba - de pe peretele posterior al faringelui - de pe amigdale din zonele inflamate

 Transport:-

in mai putin de 2 ore la temperatura camerei - pe mediu de transport in 24 h Pentru N. gonorrhoeae insamantare imediata

Examinare functie de solicitare S.pyogenes cultivare pe geloza-sange - rezultat pozitiv posibil in 24 h - rezultat negativ in 48 de ore - cultura pozitiva: - test la Bacitracina pozitiv pentru S. pyogenes - negativ necesita latexaglutinare pentru celelalte grupe de Streptococi(C, G etc) NU se recomanda frotiu

10

C.diphteriae frotiu: coloratie speciala de suspiciune - cultura mediu special(Tinsdale) cu rezultat in 4-7 zile Fusospirili diagnostic rapid: frotiu la patul bolnavului. NU se face recoltare pe tampon N. gonorrhoeae, N. meningitidis frotiu pentru diagnostic - cultura conditii de anaerobioza, 72 h

11

 Arcanobacterium

haemolyticum - cultiva pe geloza-sange ca si Streptococul (asemanator cu Streptococul de grup B) - da angina si posibil eruptie asemanatoare scarlatinei - este sensibil la Penicilina

12

- NU da complicatii postinfectioase - NU necesita profilaxie cu Moldamin(Retarpen) Diferentierea pe frotiu: exista bacili Gram pozitivi in loc de coci Gram pozitivi

Recoltare: - tampon inmuiat in SF steril - de obicei cate un tampon pentru fiecare fosa nazala - se introduce tamponul 1-2 cm in fosa nazala - se roteste ferm pe mucoasa Transport: in 2 h la temperatura camerei

13

24 h la temperatura camerei Scop: - portajul de S. aureus C. diphteriae Frotiu optional Cultura

Pastrare:

ACUTE
H. influenzae M. pneumoniae

CRONICE
S. pneumoniae H. influenzae H. parainfluenzae S. aureus Klebsiella pneumoniae E.coli Enterobacter spp. P. aeruginosa s.a Proteus spp. Citrobacter spp.
14

 Streptococcus

pneumoniae Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Chlamydia pneumoniae Mycoplasma pneumoniae etc. Anaerobi in pneumonii de aspiratie

15

 Enterobacteriaceae

frecvent

Klebsiella spp. S. aureus P. aeruginosa

16

 Alti

bacili Gram negativi nefermentativi - ex. Acinetobacter spp.

pneumonii de aspiratie

Anaerobi

EXPECTORATA -necesita supraveghere -clatire cu apa -tuse profunda -recipient steril cu capac insurubat -cantitate suficienta Transport: 2 h la temperatura camerei Pastrare: 24 h la 4C

INDUSA -curatare limba si gingii -clatire cu apa -inhalare sol. salina izotona 3-10%, aprox. 25ml -recipient steril cu capac Transport:2h la temperatura camerei Pastrare: 24h la 4C

17

 NU

se recomanda cultura pentru: - Candida albicans contaminare orala - mobilizare redusa - Aspergillus spp. mobilizare redusa - bacterii anaerobe
18

Prelucrare: - spalare de 3 ori in SF steril - 2 frotiuri triaj citologic:

Grupa Celule epiteliale scuamoase Celule inflamatorii

1 2 3* 4

<10

>25
>25 >25 10-25 <10 <25

10-25 >25

>25
>25 <25

5**
6 *Bolnavi cu metaplazie malpighiana

**Bolnavi imunocompetenti cu afectiuni acute(cea mai buna categorie)

19

Alte modalitati de recoltare: - prin bronhoscopie:

Aspirat hipofaringian Lavaj bronho-alveolar Periere bronsica

- aspirat transtraheal -aspirat pulmonar transtoracic

20

EXTERNA -curatarea conductului

cu tampon umezit in SF steril -recoltare prin rotire viguroasa -pe mediu de transport Transport: 2 h la temperatura camerei Pastrare: 24 h la 4C

MEDIE
-medicul ORL -timpan integru: -spalare cu apa/sapun -recoltare cu seringa prin aspirare -timpan perforat: -recoltare cu tampon flexibil prin speculum auricular -pe mediu de transport Transport: 2h la temperatura camerei Pastrare: 24h la 4C
21

EXTERNA Patogeni: - P. aeruginosa - ocazional S. aureus Flora normala: -Stafilococi coagulazonegativi -S. pneumoniae -Enterobacterii -P. aeruginosa daca nu se coreleaza cu frotiul(reactia inflamatorie)

INTERNA Patogeni: -S. pneumoniae -S. pyogenes -H. influenzae -mai rar: Enterobacterii, S. aureus

22

Frecvent: - S. pneumoniae - H. influenzae - S. pyogenes Rar: - Neisseria spp. - Moraxella catarrhalis - Anaerobi

23

 Recoltare:
Transport

medicul ORL rapid

microscopica si cultivare

Examinare

 NU

se investigheaza bacteriologic( poate apare spasm laringian la intrarea cu tamponul) Se administreaza terapie oarba

24

Flora normala: -Stafilococi coagulazo-negativi~94%

-hemofili

-corinebacterii
-neisserii

25

Semnificatie certa: - virusuri, fungi - H. influenzae biovar III (aegyptius) - Chlamydia - N. gonorrhoeae, N. meningitidis - Treponema pallidum - Mycobacterium tuberculosis - Corynebacterium diphteriae

 Semnificatie

posibila: - S. pneumoniae - S. pyogenes - S. aureus - Enterobacterii - bacili Gram negativi nonfermentativi (Acinetobacter spp, Pseudomonas spp.)

26

 Semnificatie

exceptionala/absenta:

- Stafilococi coagulazo-negativi
- Streptococcus viridans

CONJUNCTIVA
Recoltare cu tampoane umectate in SF steril ambii ochi - pe mediu de transport - cu ansa de platina Frotiu si insamantare imediat Transport: 2 h la temperatura camerei Pastrare: 24 h la temperatura camerei

27

RACLAT CORNEAN
Recoltare medicul oftalmolog Spatula sterila din ulcere, leziuni Frotiu si insamantare direct pe medii Transport: 15 min la temperatura camerei Pastrare: 24 h la temperatura camerei

JET MIJLOCIU -toaleta locala cu apa/sapun -la femei- indepartarea labiilor -la barbati- retractare preput -recoltare jet mijlociu in flacon cu gura larga Transport: 2h la temperatura camerei Pastrare: 24 h la 4C sau cu conservant 24h la temperatura camerei(acid boric)

CATETER toaleta locala cu apa/sapun se insera aseptic cateterul in vezica se lasa sa curga ~ 15ml recoltare in flacon steril

28

Comunicarea rezultatelor

Un singur izolat in concentratie >105UFC/ml urina semnificativ izolare, identificare, antibiograma

Doua tipuri de izolate, fiecare in concentratie >105UFC/ml urina cel mai frecvent = contaminare Mai multe bacterii izolate, in concentratie de cca. 105UFC/ml urina fiecare=contaminare grosiera sau multiplicare a germenilor

29

O singura specie izolata, in concentratie de 10 UFC/ml urina posibil semnificativ Levuri in concentratie 10 semnificativ UFC/ml urina

Stafilococi in concentratie de 5 10 urina semnificativ

UFC/ml

Escherichia coli Proteus mirabilis Klebsiella pneumoniae Enterococi Enterobacter aerogenes Pseudomonas aeruginosa Proteus vulgaris Serratia marcescens Stafilococi coagulazonegativi Stafilococcus aureus

89% 3.5% 2.5% 2% 0.5% 0.5% 0.5% <0.1% 1.5%

<0.1%
30

Culturi de rutina Fecale proaspat emise Portiuni cu mucus, puroi, sange Cantitate ~ 2g Transport: - flacon fara mediu 1h la temperatura camerei - flacon cu mediu 24h la temperatura camerei Pastrare: - fara mediu 24h la 4C - cu mediu 48 h la 4C sau la temperatura camerei

31

CULTURI SPECIALE

Cu tampon rectal pentru:

-N.gonorrhoeae -Shigella - Campylobacter - portajul de

32

Streptococ grup B

Recoltare: - se introduce tamponul ~ 2.5 cm in rect - se roteste - necesar materii fecale vizibile pe tampon Transport: 2h la temperatura camerei Pastrare: in mediu de transport 24h la temperatura camerei

SECRETIE VAGINALA
-indepartarea secretiei vechi -2 tampoane de pe mucoasa(cu mediu de transport) Transport: 2h la temperatura camerei Pastrare: 24 h la temperatura camerei STERILET :recoltare in flacon steril numai pentru vaginoza (suficient frotiul).

SECRETIE CERVICALA
-vizualizare cervix speculum fara lubrifianti indepartarea mucusului cervical -recoltare cu alt tampon din canalul endocervical Transport: cu mediu 2h la temperatura camerei Pastrare: cu mediu 24h la temperatura camerei N. gonorrhoeae insamantare imediat Chlamydia indicatiile din trusa

33

URETRA
-se insera un tampon special 24 cm pe uretra -se roteste -se lasa ~ 2 sec. -se introduce in mediul de transport Transport: 2 h la temperatura camerei Pastrare: 24 h la temperatura camerei

PROSTATA
-spalarea meatului urinar cu apa si sapun -efectuarea masajului prostatic -recoltare in tub steril a lichidului prostatic Transport: 2 h la temperatura camerei Pastrare: 24 h la temperatura camerei Alternativ : - urina inainte/dupa masaj - sperma

34

Indicatii Orice diaree sau dizenterie Orice colopatie Orice sindrom dureros abdominal Orice enterita

35

DE EVITAT

Medicamentele opace nonabsorbabile Alimentele care produc multe reziduuri Consistenta anormala a materiilor fecale(prea dure sau prea diluate)

36

RECOMANDAT
3

ex. coproparazitologice la cateve zile interval (de preferat 7 zile) din scaun emis spontan - NU 3 zile consecutiv corecta a pacientului

Pregatirea

RECOLTARE
In

recipient de plastic, transparent, curat, uscat, cu capac (inchis ermetic) corespunzator

Etichetat

37

 Materiile

fecale nu trebuie sa fie amestecate cu urina, hartie igienica sau alte resturi va fi umplut (se evita astfel riscul exploziei datorita fermentarii)

Recipientul

NU DA INFORMATII

Cand calea de eliminare a parazitului nu este intestinala (ex. Trichomonas vaginalis) sau parazitoza este tisulara (ex. hidatidoza, toxocaroza)

Cand parazitul are ponta in pliurile anale(ex.Enterobius vermicularis)

38

Cand parazitul este imatur/steril si nu produce oua: - parazitism cu un mascul de Ascaris lumbricoides - parazitul este prea tanar sa se reproduca - prelevarea s-a facut intr-o faza "muta coprologic", prezenta la majoritatea parazitozelor digestive.

Recoltare corecta = Rezultat corect

3.1.1 Metode de laborator de uz curent, vol. II, 1977, pag.109 3.1.2 Bacteriologie medicala volumul I si II, editia 1985, Balbaie si Pozsgi 3.1.3 Pocket guide to Clinical Microbiology 2-nd Edition Patrick R. Murray, ASMPress, Washington DC1998 3.1.4 Clinical Manual of microbiology Patrick R. Murray, 2007 3.1.5 Clinical Microbiology Procedures Handbook Second Edition, Henry D. Isenberg, vol 1,2 si 3, 2004 3.1.6 NCCLS/CLSI 2007, Performance Standards for Antimicribial Susceptibility Testing ; Clinical and Laboratory Standard Institute 3.1.7 Asigurarea calitii microorganismelor Pstrare Procesare ntreinere MICROBIOLOGICS 3.1.8 Human Parasitology, Burton J. Bogitsh, Clint E. Carter, Thomas N. Oeltman, Academic Press 2005 3.1.9 RAPID REVIEW MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY, 2ND EDITION, KEN ROSENTHAL, MOSBY (PAPERBACK) 2007