Grupa cocilor

Fam. Staphylococcaceae
Genul Staphylococcus
Genul Staphylococcus
Stafilococii sunt bacterii de form rotund,
dispui n grmezi neregulate cu aspect de
chiorchine (staphylos gr.), Gram-pozitivi;
Prezint tropism ridicat pentru esutul dermic
i anexele pielii, cu posibilitatea de a invada
orice alt esut;
Au o larg rspndire n mediul ambiant.

Istoric
Billroth (1874) observ germenii n colecii
purulente umane;
Pasteur (1880) izoleaz germenele n cultur
pur;
Rosenbach (1884) introduce teremnul de
stafilococ i descrie specia tip (Staphylococcus
aureus).

Taxonomie
Specia tip : Staphylococcus aureus subsp.
aureus i susbsp. anaerobius (abcese, mamite,
dermatite)
Alte specii potenial patogene : S. hycus (S.
epidermitis, epidermita exudativ a porcului),
S. schleiferi (otite, piodermite la cini), S. felis
(otite, abcese, cistite, conjuctivite)
Specii considerate nepatogene : S. virulus, S.
carnosus, S. equorum, S. sciuri

Infecia natural
Diferite infecii purulente la om i animale
Infeciile cutanate (dermatitele) sunt cele mai
frecvente
Factori favorizani : plgi traumatice, arsuri, incizii
chirurgicale, infecii virale, administrarea
imunosupresoarelor
La animale : mamita gangrenoas a oilor i caprelor
(rsfugul negru), mamita stafilococic a vacilor,
epidermita exudativ a porcului, botriomicoza la cal. La
alte specii: dermatite, peritonite, otite, mamite, rinite
rareori septicemii.
La om : toxinfecii alimentare, furunculoza, abcese,
flegmoane, foliculite, piodermite, otite, cistite, sinuzite,
sau chiar septicemii (piemie)
Ecologie
Germeni foarte rspndii n mediul ambiant,
izolndu-se frecvent din sol, aer, ap;
Sunt comensali ai pielii i mucoaselor, la om i
animale;
Se izoleaz uneori i din diferite produse
alimentare (lactate, produse din carne)
Rezisten la factorii de mediu
Germeni foarte rezisteni comparativ cu alte
specii nesporulate;
Pot supravieui luni de zile pe diferite substraturi
din adposturi;
Majoritatea tulpinilor sunt distruse la 60C n 30
min., la 70C n 15 min., iar unele celule rezist
pn la 80C;
Sunt rezisteni la antiseptice uzuale;
Sunt sensibili la dezinfectante puternice : fenolul,
cresolul sau sublimat coroziv.
Sensibilitate la antibiotice
Tulpinile slbatice sunt sensibile fa de numeroase
antibiotice : penicilin, eritromicin, neomicin,
tetraciclin;
Se constat frecvent apariia de variante
antibiorezistente;
La ora actual peste 90% din tulpinile de stafilococi
sunt rezistente la penicilin, iar unele manifest
rezisten la meticilin (MRSA) i vancomicin
(antibiotice de rezerv);
Se recomand efectuarea de antibiograme, mai ales
cnd se fac tratamente n mas, ndelungate sau
repetate.
Conduita diagnosticului etiologic
I. Recoltarea produselor patologice : secreii
purulente, lapte, organele cadavrelor, urin,
alimente, etc;
II. Examenul bacterioscopic direct : efectuarea de
frotiuri din materialul patologic prin coloraia
Gram sau cu albastru de metilen. Se pot observa
coci grupai n grmezi caracteristice, aspect cu
valoare orientativ asupra etiologiei stafilococice;
III. nsmnarea produsului patologic recoltat n
vederea izolrii i identificrii germenilor.
Condiii de cultivare
Germeni aerobi, facultativ anaerobi, care se
dezvolt bine pe medii uzuale;
Germeni halofili, se dezvolt bine pe medii
hiperclorurate (7-10% NaCl);
Pentru izolarea din materiale patologice i
alimente se utilizeaz medii selective : Chapmann
(fermentarea manitolului), Bayrd-Parker, Vogel-
Johnson (activitatea coagulazic), care permit
multiplicarea stafilococilor datorit halofiliei,care
inhib restul florei bacteriene;
Caractere culturale
Pe medii lichide : turbiditate intens, depozit uor
omogenizabil;
Pe medii solide : colonii rotunde, n general mari,
cu diametru de 1-6 mm, opace cu suprafaa
neted i lucioas, pigmentate;
Pigmenii sunt de natur carotenoid, nedifuzibili
n mediu i au diferite culori : galben-auriu,
galben-citrin, alb-gri, alb-cretaceu;
Exist aproximative corelaii ntre felul
pigmentului i patogenitatea tulpinilor.

Caractere morfologice
Coci cu de 0,8-1 m, nesporulai, neciliai,
majoritatea necapsulai, Gram-pozitivi grupai n
grmezi cu aspect de ciorchine de strugure,
datorit separrii incomplete a celulelor fiice de
cele parentale;
Aglomerrile constituite sunt mai mari i mai
caracteristice n frotiurile de pe medii solide;
n frotiurile din materiale patologice i din culturi
lichide, cocii .apar izolai cte 2-3 sau n grmezi
mici

Stafilococ imagine microscop electronic

Caractere biochimice
Majoritatea stafilococilor fermenteaz fr
producere de gaz, glucoza, lactoza, zaharoza,
manitolul.Practic se examineaz activitatea
enzimatic fa de manitol, ca factor de
patogenitate(pe mediul Chapmann), dar cu o
valoare aproximativ;
Ca teste de patogenitate se mai determin
capacitatea de a produce hemolizine (activitatea
hemolitic) i producerea de coagulaz
(activitatea coagulazic);
Stafilococii produc catalaz, o enzim
caracteristic, care permite diferenierea de ali
coci patogeni, ca streptococul i pneomococul



Medii de mbogire: bulion hipersalin cu manit i indicator, bulion hipersalin
dublu concentrat cu lactoz, bulion cu telurit-piruvat-glicocol-manit i bulion cu
tripton soia i 10% clorur de sodiu.
Medii selective de izolare i identificare: mediile Chapman, Baird Parker, Vogel-
Johnson i geloz-snge

Determinarea prezenei de stafilococi coagulaz-pozitivi
Manitol Salt agar (7,5% NaCl, manitol
i indicator de pH rou fenol)
Agar cu snge
Caractere antigenice
O component antigenic major a peretelui
celular este polizaharidul A, derivat al acidului
teichoic, ce confer o specificitate de specie,
fiind prezent la tulpinile de S. aureus i absent
la celelalte specii
Factori de patogenitate
Prin virulen i toxicitate;
Virulena este dat de factori de natur
enzimatic (agresine), ce faciliteaz difuzarea
germenilor n esuturi sau neutralizeaz
mecanismele defensive ale organismului;

Factori de agresivitate
Coagulaza enzim extracelular care induce
formarea unui manon de plasm coagulat,
n jurul celulelor bacteriene, cu rol
antifagocitar. Este prezent preponderent la
tulpinile patogene de S. aureus;
Se pune n eviden prin testul coagulrii
plasmei citratate de iepure (test de
patogenitate)


Factori de agresivitate
Hialuronidaza enzim complex care
difuzeaz extracelular i acioneaz prin
descompunerea acidului hialuronic din
substana fundamental a esutului
conjunctiv, favoriznd difuzarea germenilor n
esuturi;
Stafilococii patogeni sunt productori de
hialuronidaz n proporie de peste 90%.
Factori de agresivitate
Fibrinolizina (stafilochinaza) enzim
proteolitic care acioneaz prin liza coagulilor
de fibrin, permind astfel progresia
stafilococilor n esuturi;
Favorizez producerea emboliilor n formele
septicemice de boal
Factori de agresivitate
Deoxiribonucleaza produce leziuni tisulare
acionnd asupra ADN-ului din celulele diferitelor
esuturi;
Fosfataza enzim care se evideniaz n special
pentru testarea stafilococilor din alimente;
Lipazele sunt active asupra lipidelor plasmatice
i a grsimilor de pe suprafaa tegumentelor, ceea
ce explic tropismul germenilor pentru zonele
tegumentare unde glandele sebacee sunt mai
active
Factori de agresivitate
Hemolizinele acionez prin liza globulelor roii. Sunt
descrise 4 tipuri de hemolizine :
-hemolizina alfa, prezent de obicei la tulpinile umane,
este activ fa de hematiile de iepure i oaie. Are i o
aciune dermonecrotic, letal pentru iepure;
- hemolizina beta are o activitate litic mai pronunat
fa de hematiile de oaie. Procesul de hemoliz se
accentueaz la 4C;
- hemolizina gama, activ fa de hematiile de oaie i
iepure, dar hemoliza nu poate fi evideniat, datorit
diametrului foarte mic;
-hemolizina delta, elaborat numai dac incubarea se
face n atmosfer de CO2.
Factori de toxicitate
Enterotoxinele exotoxine difuzibile, cu tropism
pentru mucoasa intestinal, fiind prezente numai
la tulpinile capabile s produc toxinfecii
alimentare;
Acioneaz asupra centrilor nervoi declannd
contracii peristaltice i antiperistaltice,
responsabile de producerea sindromului diareic i
a vomei;
Sunt de natur proteic, rezistente la aciunea
enzimelor digestive i la temperaturi de 117C;
Cele mai sensibile specii sunt omul, maimua i
pisica;
Evidenierea lor se face prin testul Dolman


Teste de patogenitate
Este important de demonstrat dac tulpinile
izolate sunt patogene.Pentru a demonstra
aceast proprietate, n practica curent de
laborator se efectueaz :
- testul de coagulare a plasmei citratate;
- testul de hemoliz;
- infecia experimental (bioproba). Aceasta se
realizeaz pe iepure care n urma inocularii iv.
face o infecie septicemic mortal.
Imunoprofilaxie
Imunoprofilaxia specific (prin vaccinare) nu
are o extindere prea larg.
La ovine, n cazul mamitei gangrenoase se
poate face vaccinarea cu o anacultur, n
perioada de gestaie.