Sunteți pe pagina 1din 32

La final de secol XVIII, Mikhail Tswett a separat un amestec de pigmeni naturali n zone colorate

prin trecerea unui extract de plante peste o coloan umplut cu material adsor!ant" Mai t#rziu a
folosit termenul de cromatografie pentru a descrie procesul prin care a realizat acest lucru" $n ziua
de azi termenul de cromatografie a cptat un sens mult mai larg" %stzi prin cromatografie se
nelege ansam!lul de procese prin care su!stanele ce se separ sunt supuse unor partiii de
echili!ru ntre cele dou faze" $n ma&oritatea cazurilor una dintre faze este staionar 'i cealalt
mo!il"
(e o!icei c#nd se folose'te un gaz pe post de faz mo!il, alegerile optime pentru faza staionar
sunt cele solide sau lichide" )ele dou tehnici ce rezult se numesc cromatografie*gaz*lichid 'i
cormatografie*gaz*solid" +rima este mai util 'i este n general mai rsp#ndit c#t ,remea a doua
este mai intens folosit pentru a separa amestecuri foarte ,olatile sau gaze" $n general termenul de
cromatografie de gaze este folosit pentru a denomina am!ele situaii"
$n cromatografia de gaze, un film su!ire de faz staionar este fixat n coloan 'i un gaz purttor
-faz mo!il. este trecut continuu peste ea" /xist mai multe tipuri de astfel de coloane"
)oloanele mpachetate -packed columns. au cam 0*1 m lungime, un diametru interior de 2*1 mm, 'i
sunt umplute cu un suport granular inert, fiecare particul de suport fiind acoperit cu faz
staionar" )oloanele micro*mpachetate sunt o ,ersiune mai mic a coloanelor mpachetate cu
diametru interior su! 2 mm 'i cu granule mai mici" Lungimea unei coloane este limitat din punct
de ,edere practic de cderea de presiune pe care o genereaz datorit rezistenei pe care o opune la
trecerea gazului"
)oloanele de tip tu!*deschis sunt n general de trei tipuri" )el mai intens folosite sunt cele cu faza
staionar depus pe perei -wall*coated*open*tu!ular. n care faza staionar exist su! forma unui
film su!ire uniform ata'at de periferia interioar a unui tu! deschis -coloana." $n cazul coloanelor
cu tu! deschis cu strat poros -coloane +L3T * porous*la4er*open*tu!ular., faza staionar este fixat
su! forma unui strat poros de pereii coloanei, poriunea central fiind li!er" +orozitatea poate fi
o!inut prin dou modaliti, fie prin tratarea chimic a peretelui coloanei, fie prin depunerea de
particule poroase dintr*o suspensie" 5u!stratul poros poate fi un suport pentru faza staionar sau o
faz staionar n sine" )oloanele cu suport acoperit -5)3T*support*coated*open*tu!ular. sunt un
su!*tip de coloan +L3T" Materialele adsor!ante uzuale sunt de tip polimer poros, oxid de aluminiu
'i di,erse tipuri de zeolii" 6nele coloane de tip tu!*deschis au dimensiunea diametrului interior
ntre 7,1 'i 7,81 mm, totu'i ele nu pot fi pri,ite ca ni'te tu!uri capilare n ade,ratul sens al
cu,#ntului" (e o!icei termenul de coloane capilare este folosit pentru coloane al cror diametru nu
dep'e'te 7,91 mm, de'i nici aceste nu sunt ni'te capilare reale"
) ,or!im de coloane mpachetate sau de tip tu!*deschis, coloana, care este n mod normal
conectat cu un capt la portul de intrare 'i cu un capt la detector, este a&ustat la o temperatur
con,ena!il 'i prin ea este trecut n mod continuu un gaz purttor -faza mo!il." $n momentul n
care n partea conectat la portul de intrare este introdus un amestec de compu'i ,olatili, fiecare
component din acel amestec este supus unui proces de partiie de echili!ru foarte dinamic ntre faza
staionar 'i faza mo!il conform constantei sale de echili!ru -:
c
;c
5
<c
M
."
5 lum cazul unei !enzi de solut care trece printr*un punct din coloan n timp" Moleculele care se
afl n faza mo!il sunt preluate de gazul purttor, c#t ,reme moleculele adsor!ite n faza
staionar sunt mi'cate de ctre frontul de gaz purttor pe o distan scurt, finit" $n acel moment
din timp, constanta de distri!uie nu are sens la captul !enzii, unde c
5
este finit 'i c
M
este zero, 'i la
nceputul !enzii, unde c
5
este zero 'i c
M
este finit" +entru a se resta!ili constanta de distri!uie de*a
lungul !enzii, partiia predominant este dinspre faza staionar spre faza mo!il la captul !enzii,
'i dinspre faza mo!il spre faza staionar la nceputul !enzii" )u alte cu,inte, frontul de faz
mo!il interfer cu distri!uia, distrug#nd echili!rul la nceputul 'i la sf#r'itul fiecrei !enzi de
solut, produc#nd o e,aporare continu la captul coloanei 'i resta!ilizare la nceputul fiecrei !enzi
pe msur ce a,anseaz prin coloan" (eoarece toi soluii au ,alori diferite ale constantei :
c
, este
e,ident c fiecare solut se ,a mi'ca cu ,itez diferit prin coloan"
)antitatea de solut care este prezent n coloan la orice moment n timp este dependent de
presiunea de ,apori =net> a acestuia" Moleculele care au o presiune de ,apori mai mare ,or trece n
faza mo!il" /le au un parcurs scurt prin coloan 'i ,or ie'i la detector primele" ?estul de solui ,or
a,ea o presiune de ,apori mai mic, fie datorit faptului c au un punct de fier!ere mai ridicat, fie
datorit faptului c interacioneaz mai !ine cu faza staionar, reduc#ndu*'i astfel ,olatilitatea n
condiiile cromatografice folosite" Moleculele indi,iduale ale acestui solut intr mai puin frec,ent
n faza mo!il, concentraiile acestuia n faza mo!il sunt mai mici, 'i ,or aprea la detector dup
mai mult timp, n acest fel o!in#ndu*se separarea"
)romatografia de gaze este un fenomen care are de*a face cu ,olatilitatea componentelor, prin
urmare este aplica!il doar su!stanelor care pot fi ,olatilizate" @u se aplic proteinelor sau
metalelor" 6neori o su!stan greu ,olatil poate fi analizat prin tehnici de cromatografie de gaze,
folosindu*se o con,ersie a acesteia ntr*un deri,at mai ,olatil"
5epararea cromatografic este un proces ce depinde de constanta de partiie, care la r#ndul ei este
dependent de temperatur, iar o concluzie logic este c, n coloan, controlul termic riguros este
a!solut esenial" (ac temperatura este prea &oas, compu'ii rm#n parial sau integral n faza
staionar 'i intr mai greu, sau deloc, n faza mo!il" @u se separ unul de altul 'i nici nu prsesc
coloana" (ac temperatura este prea mare, soluii petrec un timp prea mare n faza mo!il 'i intr
rareori sau deloc n faza staionar, la ie'irea din coloan rezult#nd amestecuri neseparate sau
incomplet separate"
(e'i acest concept simplificat de ,izualizare a gradului de separare cromatografic ca un ansam!lu
de ,aporizrii 'i rezoluii ntre moleculele diferite de solut este foarte util pentru a nelege
conceptele de !az, tre!uie totu'i e,ideniat faptul c acest ta!lou este doar unul dintre aspecte"
+rocesul cromatografic este mai degra! un proces continuu 'i dinamic, nu o sum de procese
statice" $n condiii cromatografice fixe, gradul de separare este o funcie de factorul de retenie al
solutului 'i de concentraia acestuia"
+resiunea de ,apori a solutului este un factor important al separrii" (ac presiunea de ,apori a
solutului este prea mare, acesta ,a petrece prea mult timp n faza mo!il 'i nu se separ" (ac
presiunea de ,apori este prea mic, solutul petrece prea mult timp n faza staionar, cresc#nd
ne&ustificat timpii de analiz 'i afect#nd sensi!ilitatea" Temperatura coloanei este doar unul dintre
modurile n care se poate a&usta con,ena!il presiunea de ,apori" 3 alt metod este prin alegerea
con,ena!il a fazei staionare" 3 faz staionar =polar> reduce presiunea de ,apori a soluilor
polari prin intermediul interaciilor suplimentare a acestora, interacii ce pot fi de tip legturi de
hidrogen sau de tip dipol*dipol"
Ma&oritatea speciali'tilor n cromatografie sunt de acord c coloanele de tip tu!*deschis -open*
tu!ullar * =capilare>. au o putere de separare mult superioar coloanelor mpachetate" (esigur, n
ma&oritatea cazurilor, se apeleaz la cromatografie tocmai pentru puterea de separare, aceasta fiind
considerat o caracteristic important" /xist totu'i multe cazuri n care o putere de separarea prea
nalt poate fi duntoare" )a 'i exemplu, dac lum cazul unui amestec de A compu'i a cror
separare n mod normal pe o coloan capilar ar necesita 97 de minute, pe o coloan mpachetat cu
o faz staionar aleas n mod con,ena!il se poate o!ine separarea n doar 0 minute, iar timpul de
analiz n cele mai multe cazuri este esenial"
6n compus supus unui proces de separare cromatografic -un solut. prin in&ectarea n coloan este
imediat supus unui proces de partiie ntre faza staionar 'i faza mo!il" %cest proces este gu,ernat
de constanta de distri!uieB
:
c
;masa de solut pe unitate de ,olum de faz staionar< masa de solut pe unitate de ,olum de faz
mo!il

:
c
este o constant de echili!ru a crei magnitudine este dat doar de compus, de faza staionar 'i
de temperatur" 5oluii polari se dizol,, se disperseaz 'i se implic n interacii intermoleculare
ntr*un grad mult mai mare dec#t soluii de tip hidrocar!ur, mai nepolari, n cazul aceleia'i faze
staionare" Logic, constanta :
c
este mai mare n cazul compu'ilor polari dec#t n cazul celor
nepolari" 3 dat cu cre'terea temperaturii, constantele se modific, scz#nd semnificati,, dar
diferenierea ntre constante rm#ne ,ala!il -polar*nepolar."
6n compus in&ectat n coloan petrece un timp p#n la ie'irea din aceasta egal cu timpul petrecut n
faza mo!il plus timpul petrecut n faza staionar" Timpul petrecut n faza mo!il poate fi msurat
direct pe !aza timpului de retenie al unui compus nereinut de faza staionar, a unui compus care
petrece 277C din timp n faza mo!il 'i a crui ,itez n coloan este egal cu cea a fazei mo!ile"
6n astfel de compus este n ma&oritatea fazelor staionare metanul" Timpul de retenie a&ustat,
considerat a fi timpul petrecut de compus n faza staionar, este calculat ca fiind diferena ntre
timpul de retenie total al compusului n coloan 'i timpul petrecut de metan"
$n mod ideal, prin tehnica de in&ecie, o !and de solui este in&ectat n coloan n a'a fel nc#t
aceasta s ocupe o poriune foarte mic de coloan" /ste de dorit ca !anda de solut s creasc puin
pe parcursul tra,ersrii coloanei" %stfel, este necesar ca domeniul de timp de retenie pentru fiecare
tip de solut n parte s fie foarte mic, adic de,iaia standard pentru fiecare specie molecular s fie
mic" %stfel pe msur ce prsesc coloana, aceste !enzi concentrate de solut ies su! form de
picuri foarte ascuite 'i cu o lime la !az foarte mic" /xplicaia pentru acest fenomen este c,
chiar dac timpii petrecui de molecule n faza staionar 'i mo!il sunt exact la fel, sunt alte
fenomene care contri!uie la lrgirea !enzii, cum ar fi difuzia longitudinal" )entrele !enzilor cu
constante diferite se ,or diferenia treptat pe msur ce trec prin coloan, dar dac difuzia
longitudinal este mare sau timpul petrecut de molecule diferite este destul de mare, parte din !anda
final a primului compus poate intra peste partea de !and iniial a celui de*al doilea compus,
rezult#nd n picuri incomplet separate sau picuri care se suprapun" (eci, eficiena de separare a doi
compu'i nu este afectat doar de factorii de separare, ci 'i de alungirea !enzii care are loc"
(atorit faptului c, n mod similar cu distilarea fracionat, 'i cromatografia de gaze se ocup cu
separarea amestecurilor de compu'i ,olatili, termenii n cormatografie au fost preluai din distilarea
fracionat" %stfel pentru a descrie eficiena unei coloane cromatografice a fost folosit termenul de
=talere teoretice>" @umrul de talere teoretice este definit ca fiind ptratul raportului ntre timpul
total petrecut de o !and de solut de la intrarea n coloan p#n la ie'ire t
?
'i gradul de lrgire al
unei !enzi D"
@;-t
?
< D.
0
+entru a se e,ita necesitatea determinrii factorului D, se presupune c picul este gaussian ideal,
pentru care ltimea la !az este egal cu AD, iar limea la semi*nlime este agal cu 0,91AD" %stfel
ecuaia se poate rescrie
@;-At
?
<w
!
.
0
;2E-t
?
<w
!
.
0
sau
@;-0,91t
?
<w
h
.
0
;1,1A-t
?
<w
h
.
0
unde w
!
'i w
h
sunt limile la !az respecti, la semi*nlime" $ntruc#t limea la semi*nlime
poate fi determinat cu o mai !un precizie, muli experi prefer aceast form de exprimare a
ecuaiei" Totu'i e demn de menionat faptul ca aceast ecuaie are la !az presupunerea de
gaussicitate a picului, 'i, de'i a!aterile sunt negli&a!ile de o!icei, n unele cazuri n care asimetria
este e,ident aceast ecuaie este foarte greu de aplicat"
$n relaia de calcul a numrului de talere teoretice, prin folosirea timpului de retenie, se introduce n
ecuaie un termen t
M
, timpul de retenie al compusului neseparat, metanul, care are o contri!uie
constant la fiecare compus n parte" %ceast contri!uie, aparin#nd unui compus neseparat, nu
contri!uie deloc la eficiena separrii, dar produce o cre'tere a numrului de talere teoretice" (in
acest moti, de o!icei se prefer folosirea unui timp de retenie a&ustat, care este diferena ntre
timpul de retenie real si timpul dat de compusul nereinut"
t
?
F
;t
?
*t
M
%stfel putem rescrie formula numrului de talere teoretice pentru un numr de talere teoretice
eficiente, @
eff
, n modul urmtorB
@
eff
;1,1AG-t
?
*t
M
.<w
h
H
0
;1,1A-t
?
F
<w
h
.
0

Modul n care doi compu'i se separ este dat de timpul lor de retenie, sau mai !ine zis de diferena
ntre timpii de retenie a&ustai ai celor doi compu'i, 'i de ascuimea picului" ?aportul ntre timpii de
retenie a&ustai ai celor doi compu'i se nume'te factor I" %cest factor determin doar separarea
ntre ,#rfurile celor doi compu'i"
I;t
?-0.
<t
?-2.
+rin con,enie, I este tot timpul supraunitar, 'i timpul de retenie al celui de*al doilea compus este
raportat la primul" +erechile de solut ce au un factor I mare se pot separa chiar 'i pe coloane cu
rezoluie sla!, dar pe msur ce I se apropie de 2, separarea necesit coloane cu un numr mai
mare de talere teoretice" (esigur c acest lucru se poate rezol,a 'i prin schim!area fazei staionare a
coloanei cu una la care timpii de retenie sunt mai departe unul de altul"
Jradul la care dou componente sunt separate se nume'te rezoluie, se noteaz cu ?
5
'i are formulaB
?
5
;0-t
?-0.
*t
?-2.
.<-w
!-2.
Kw
!-0.
.
(e notat c n cazul rezoluiei se folose'te lrgimea la !az, nu la semi*nlime" (esigur, n multe
situaii, lrgimea la !az necesit extrapolare pentru o determinare exact" (ac se aplic prezumia
de pic gaussian, ecuaia se poate rescrie pentru lrgimea la semi*nlimeB
?
5
;2,2L-t
?-0.
*t
?-2.
.<-w
h-2.
Kw
h-0.
.
?ezoluia este puternic afectat de asimetrie, totu'i, n cazul picurilor gaussiene perfect simetrice, o
rezoluie de 2,1 de o!icei nseamn c cei doi compu'i sunt separai ntre ei la linia de !az"
+entru orice tehnic cromatografic, lrgimea la !az este un factor foarte important" $n cazul ideal,
aceast lrgime este afectat doar de difuziile longitudinale" $n realitate ns, sunt destul de muli
parametri care afecteaz lrgimea picurilorB
efecte discriminatorii care au loc n momentul transferului de la sering la portul de intrare
-acestea se nt#mpl mai des n cazul porturilor nclzite.
efecte discriminatorii ce au loc la momentul transferului de la portul de intrare ctre coloan
-porturile de intrare de o!icei a!und n situri acti,e.
lungimea coloanei ocupat iniial de pro!a in&ectat -toate modurile.
rata 'i eficinea e,aporrii pro!ei n portul de intrare -modul de e,aporare, splitarea pro!ei,
etc.
,iteza de intrare a pro!ei de la portul de intrare la coloan
procenta&ul de pro! transferat de la portul de intrare la coloan
omogenitatea temperaturii 'i a fazei de*a lungul ntregii !enzi cu pro!
Tehnica de in&ecie poate introduce diferene mari n cromatogram" Transferul de temperatur de la
portul de intrare nclzit la sering poate duce la o fracionare a pro!ei" $n porturile de intrare
fier!ini, ,iteza mare de introducere a pro!ei este de importan ma&or" $n modul split, in&ecia
manual nu este niciodat suficient de rapid pentru a e,ita fracionarea pro!ei" (in fericire
in&ectoarele automate elimin aceast pro!lem aproape complet" La in&ectoarele automate, seringa
petrece n portul de intrare su! 177 msec" Tehnica splitless -fr splitarea pro!ei. este de o!icei de
preferat n cazul porturilor nclzite"
)hiar n cazul unei in&ecii n coloan ideal, la momentul c#nd sol,entul mpreun cu
componentele supuse separrii intr n coloan, are loc o lrgire spaial a !enzii cu pro!" %ceasta
se produce datorit proceselor de difuzie care au loc n coloan" +rintre altele, un factor important
poate fi ,aporizarea incomplet n portul de intrare sau un port de intrare cu un ,olum prea mare
comparati, cu pro!a folosit" 6n alt factor care poate afecta lungimea !enzii este ,iteza fazei
mo!ile prin coloan, mai precis omogenitatea ,itezei"
(ac o !and de solut a,anseaz prin coloan n condiii de neomogenitate a constantei de
distri!uie, aceast neomogenitate cauzeaz o neomogenitate a ,itezei prin coloan, afect#nd astfel
lungimea !enzii" +entru acest tip de fenomene a fost ales termenul de efect al constantei de
distri!uie" %cest efect este folosit n tehnicile de focalizare criogenic sau focalizare termic" +e
msur ce temperatura cre'te, :
c
cre'te, datorit cre'terii concentraiei n faza staionar 'i scderii
concentraiei n faza mo!il" $n toate cazurile de focalizare, pro!a e,olueaz de la o zon mai cald
a coloanei spre o zon mai rece" ?cirea secundar, care este folosit n cazul porturilor de intrare n
coloan, n mod normal scade eficiena de separare, fenomen pus parial pe seama defocalizrii
constantei de distri!uie cauzat de gradientul poziti, de temperatur" /ste foarte important de
reinut faptul c programarea de temperatur nu produce acest efect" $n cazul programrii de
temperatur, schim!area temperaturii induce o schim!are a constantei de distri!uie care este
uniform pe toat lungimea coloanei"
In&eciile directe n coloane, printre care cele cu splitare a pro!ei sau fr splitare a pro!ei, intr ntr*
o categorie numit in&ecii prin e,aporare cu zon cald" %cestea implic de o!icei in&ectarea pro!ei
prin intermediul unei seringi ntr*un port de intrare care se poate nclzi" ?olul sistemului de in&ecie
este de a ,aporiza c#t mai rapid pro!a pentru a facilita accesul ctre captul coloanei" $n cadrul
procesului de ,aporizare, cei mai importani factori sunt transferul de cldur, timpul necesar
transferului de cldur 'i ,olumul de ,apori produ'i de ctre procesul de nclzire"
In&ecia n coloan cu splitarea pro!ei este de o!icei mai intens folosit n cazul coloanelor capilare"
+ro!a este introdus ntr*un port de intrare cald unde este ,aporizat 'i omogenizat" Ma&oritatea
gazului generat prin ,aporizare este direcionat ctre exteriorul sistemului printr*un port de
e,acuare, doar o mic poriune fiind direcionat ctre coloan" (atorit faptului c un capt al
coloanei este situat n portul de in&ecie fier!inte iar restul coloanei se afl n cuptorul
cromatografului care este rece, pro!a a,anseaz printr*un gradient negati, de temperatur, iar !anda
este scurtat, focalizat termic" +orturile de intrare de tip cu programare termic -+TV. 'i cu splitare
a pro!ei ofer n mod direct o scurtare a !enzii prin modul de operare" %lte tipuri de porturi de
intrare necesit pa'i suplimentari pentru o!inerea acestui a,anta& important"
Modul de in&ecie =split> e,apor pro!a 'i este important ca acest pas s nu genereze o presiune
prea mare, care s foreze pro!a nspre coloan sau nspre septum, prin urmare alegerea ,olumului
interior n care are loc e,aporarea este foarte important" %,anta&ul mai important legat de modul de
operare =split> este legat nu neaprat de reducerea cantitii de pro! care intr n coloan, c#t de
curarea eficient a portului de intrare de reziduurile de pro!, asigur#nd un flux de gaz curat ctre
coloan dup momentul in&eciei"
6n aspect important legat de aceste porturi de intrare este ,iteza de e,aporare" /,aporarea tre!uie
s ai! loc instant, pentru a pre,eni lungirea !enzii cu pro!" +entru ca acest lucru s fie realiza!il,
de o!icei porturile de intrare sunt nclzite la temperaturi mai mari, care pot s asigure o e,aporare
rapid 'i complet, acest gen de temperaturi fiind o soluie proast pentru compu'ii care sunt
insta!ili termic"
+arametri de in&ecie, cum ar fi ordinul de splitare -care influeneaz timpul de staionare al pro!ei
n portul de intrare., temperatura portului, sol,entul n care este dizol,at pro!a, sunt de o!icei un
set de parametri care se influeneaz reciproc 'i a cror alegere este sta!ilit prin echili!ru 'i
compromis" 5pre exemplu o rat de splitare ridicat a pro!ei, care n mod normal ar conduce la o
omogenitate mai mare a pro!ei, conduce de fapt la o posi!ilitate mai mare de a pierde unii dintre
componeni datorit e,acurii unei cantiti mari de pro!"
Modul de in&ecie fr splitarea pro!ei, similar cu cel cu splitare, folose'te tot o e,aporare a pro!ei
n portul de in&ecie" +ro!lemele legate de transfer termic, expansiune termic, eficien de
e,aporare, se aplic 'i la acest mod de operare" (atorit faptului c pro!a care este in&ectat merge
n totalitate ctre coloan, se elimin pro!lemele legate de cantitatea de pro! care este transferat
sau de posi!ilitatea pierderii unor compu'i" Metoda fr splitarea pro!ei este mai intens folosit
atunci c#nd se dore'te analizarea unui grup de compu'i cu punct de fier!ere ridicat diluai ntr*un
sol,ent cu punct de fier!ere relati, &os" Temperatura de operare pentru acest mod de operare
necesar unei e,aporri complete 'i rapide a pro!ei este de regul mai &oas dec#t n cazul modului
de operare cu splitare"
Indiferent de modul de in&ecie ales, hidrogenul este o alegere mult mai !un pentru un gaz purttor,
deoarece separarea o!inut este mult mai !un 'i timpii de analiz sunt mai scuri"
+orturile de in&ecie cu temperatur programa!il ofer suficiente a,anta&e" (e o!icei pe aceste
tipuri de porturi de in&ecie se introduc cantiti mari de pro!, fie prin in&ecie multipl, fie prin
folosirea unei seringi de ,olum mare" In&ecia are loc la temperaturi &oase, n portul de in&ecie rece,
timp n care ,al,a de ,entilare este deschis iar sol,entul n exces iese" (up un timp suficient de
lung pentru ca portul s fie suficient de saturat n su!stane de analizat 'i suficient de srcit n
sol,ent se nchide ,al,a de ,entilaie 'i se nclze'te gradual portul pentru a permite eluarea
compu'ilor de analizat n coloana cromatografic"
$n cromatografie, deseori termenii =selecti,itate> 'i =polaritate> sunt folosii a!uzi,, 'i uneori
confundai ntre ei" 3 su!stan polar -faz staionar sau su!stan de analizat. posed un moment
de dipol permanent" Mazele staionare polare sunt cele care posed o grupare funcional, de tipul
*)@, *3N, *)3, *)*3" Multe faze staionare de tip hidrocar!ur -ex" 5Oualan 'i grsimile %piezon.
sunt nepolare, 'i sunt de o!icei folosite n coloane mpachetate" @u sunt de o!icei folosite n
coloanele tu!ulare" Mazele staionare cu polaritate redus -277C polidimetilsiloxan 'i P1C dimetil
1C difenil polisiloxan. sunt intens folosite 'i se !ucur de o larg rsp#ndire" +e msur ce
procenta&ul de difenil polisiloxan cre'te coloana de,ine din ce n ce mai polar" Mazele staionare cu
97*91C difenil polisiloxan sunt considerate a fi de polaritate medie" 3 polaritate mai ridicat poate
fi o!inut su!stituind o proporie din gruprile metil -17*277C. cu grupri cianopropil sau
cianoetil" Mazele extrem de polare -2,0,9,A*tetrakis-0*cianoetoxi.*!utan, 2,0,9*tris-0*
cianoetoxi.propan. sunt exclusi, folosite n cazul coloanelor mpachetate, pe peretele coloanelor
capilare conduc#nd la formarea de filme insta!ile"
/ste important de precizat faptul c n cromatografia de gaze, compu'ii elueaz din coloan n
ordinea presiunii lor de ,apori =nete>, presiune care este diminat de suma interaciunilor care au
loc ntre compus 'i faza staionar a,#nd n ,edere un set de parametri cromatografici fixai" Tria
interaciunilor care au loc ntre compu'i 'i faza staionar depidne foarte mult de solu!ilitatea acelui
compus n faza staionar" (e exemplu, ntr*un amestec de compu'i, octanolul -punct de fier!ere
2PA,1 Q). ,a elua mereu naintea nonanalului -punct de fier!ere 2P0Q)." %ce'tia sunt compu'i
relati, polari 'i nici unul dintre ei nu este complet solu!il n faza staionar" %m!ii compu'i
e,oleaz mai repede prin coloan, dar efectul de excluziune este mai mare pentru alcoolul cu L
atomi de car!on n molecul dec#t pentru aldehida cu nou atomi de car!on n molecul"
$n ceea ce pri,e'te selecti,itatea, at#t faza staionar, c#t 'i compusul de analizat &oac un rol
important" 3 coloan care se ,a do,edi extrem de selecti, pentru un compus s*ar putea s nu fie
suficient de selecti, pentru un altul cu alt grupare funcional" 6n lucru rm#ne general ,ala!il,
anume cu c#t constanta :
c
are o ,aloare mai mare n faza staionar, cu at#t acea faz staionar este
mai selecti, pentru compusul respecti,"
Mazele staionare polisiloxanice sunt intens folosite 'i au o arie larg de rsp#ndire datorit faptului
c sunt cele mai =tolerante la a!uz>" Totu'i natura gruprilor funcionale, gradul de puritate al fazei
staionare 'i omogenitatea acestor tipuri de faze staionare e,olueaza n condiii de stress, nu sunt
indistructi!ile" 3 suprafat de sticl sau silice ce nu a fost deacti,at corespunztor sau gruprile
silanolice li!ere prezente n faza staionar pot cauza deterioararea fazei staionare" )alitatea unei
faze staionare const n puritatea extrem a fazei staionare folosite, omogenitatea fazei staionare
pe tot parcursul coloanei 'i reproducti!ilitatea de la lot la lot" (eza,anta&ele acestor tipuri de faze
staionare este c sunt foarte puin selecti,e, separea depinz#nd aproape exclusi, de forele de
dispersie"
Mluxul de gaz care trece prin coloan este o consecin direct a cderii de presiune ntre intrarea n
coloan 'i ie'irea din coloan" %ceast diferen se poate msura aplic#nd o presiune pe portul de
intrare 'i msur#nd presiunea cu un flaumetru la ie'irea detectorului 'i muli consider c aceast
diferen msurat reprezint cderea de presiune real pe coloan" )eea ce nu este mereu ade,rat"
/ste foarte important ca msurtorile s ai! loc la exact aceea'i temperatur -temperatura coloanei
s fie aceea'i cu temperatura mediului am!iant" (iferenele de temperatur ntre coloan 'i
flaumetru pot fi totu'i compensate prin folosirea unor factori de corecie"
/xist o diferen sesiza!il ntre flux ,olumetric 'i ,itez liniar a gazului prin coloan" (e'i
presiunea la captul coloanei rm#ne constant at#t timp c#t presiunea pe portul de intrare,
presiunea la ie'ire 'i temperatura coloanei rm#n sta!ile, ,iteza liniar nu rm#ne constant pe tot
parcursul coloanei, ci ,ariaz n anumite puncte" (atorit proprietii de compresi!ilitate a gazului
purttor, ,olumul de gaz rspunde la schim!rile de presiune care au loc datorit cderilor de
presiune calculate pentru a trimite gazul de*a lungul ntregii coloane" (ac ar fi posi!il s secionm
coloana n x segmente infinitezimale a cror presiune s nu depind de presiunea anterioar 'i cea
ulterioar, s*ar putea scrie pentru fiecare astfel de segment o ecuaie de formaB
p-x.;p
7
x R-p
i
<p
o
.
0
*-x<L.G-p
i
<p
o
.
0
*2HS
2<0
unde p
i
'i p
o
sunt presiunea pe portul de intrare respecti, presiunea la ie'irea din coloan, L este
lungimea coloanei, x este distana fa de portul de intrare, p-x. este presiunea la distana x de portul
de intrare" ?elaia -p
i
<p
o
. este numit deseori coeficient de compresie al fazei mo!ile"
$n cazul unui sistem n care presiunea este reglat atent, cre'terea temperaturii descre'te ,iteza
liniar" $n cazul n care se regleaz de!itul masic, cre'terea temperaturii cre'te ,iteza liniar"
%legerea gazului purttor este important din dou puncte de ,edere" +rimul este ,iscozitatea
gazului purttor" %l doilea este rolul gazului purttor asupra constantei de distri!uie" $n unele
cazuri, azotul poate genera mai multe talere teoretice pentru un anumit compus, dar mai multe talere
teoretice folosind azot rezult n mrirea timpului de analiz" )ele mai comune alegeri de o!icei
sunt hidrogenul datorit faptului c poate fi generat u'or si relati, ieftin, dar cu potenial explozi,,
sau heliul, datorit faptului c este neexplozi,"
Lungimea coloanei are un efect asupra eficienei separrii prin relaia ntre de!itul pe coloan 'i
cderea de presiune pe coloan necesar pentru a produce acel de!it n coloan" (iametrul interior
afectez ,olumul de gaz purttor care trece prin coloan n unitatea de timp" (iamtrele mici ale
coloanei m!untesc separarea, dar las mai puin loc pentru gre'eli" +uritatea fazei staionare este
critic cu c#t diametrul interior al coloanei scade" $n ce pri,e'te selectarea grosimii de faz
staionar, mai multe conisderente tre!uie luate n calcul" )apacitatea pentru pro! cre'te cu
cre'terea grosimii fazei staionare, dar la fel ,a cre'te 'i =!leed>*ul coloanei -faz staionar care
prse'te coloana 'i care nu poate fi e,itat." =Tleed>*ul ,a genera o alungire a fiecrui pic
cromatografic -=tailing>. 'i o cre'tere a zgomotului de fond"
$n ceea ce pri,e'te alegerea temperaturii, tre!uie reinut faptul c n alegerea temperaturii corecte
este mult mai important impactul temperaturii asupra timpilor de retenie dec#t impactul
temperaturii asupra eficienei cromatografice"

Ti!liografie
Uennings, V", Mittlefehldt, /", 5tremple, +", %nal4tical gas chromatograph4, 5econd edition,
%cademic +ress limited, 2PP8
2 Identificare V3) din aer prin J)*M5
2"2 5cop
5copul acestei lucrri practice este de a analiza calitati, Wi cantitati, conXinutul de compuWi organici
,olatili din aer folosind tehnici de cromatografie Wi de extracXie"
2"0 Termeni Wi definiXii cuprinWi
2"0"2 V3) Y Volatile 3rganic )ompound Y )ompus organic ,olatil Y lichid Wi<sau
solid organic care se e,apor spontan la temperatura Wi presiunea atmosferei cu care
este n contact"
@ota 2 B $n cazul folosirii termenului de V3) n cadrul soluXiilor de acoperire, cum ar fi ,opselurile
Wi lacurile, termenul V3) denot de fapt conXinutul n V3)"
@ota 0 B )onform legislaXiei 56%, termenul de V3) denot doar compuWii care sunt acti,i
fotochimic n atmosfer" 3rice alt compus este definit ca Wi compus exceptat"
@ota 9 B )onform directi,ei europene 077A<A0</) termenul de V3) se refer la su!stanXe care au
punct de fier!ere mai mic sau egal cu 017Z) msurat la presiunea standard de 272,9 k+a"
2"0"0 )onXinut de V3) Y mas total de compuWi organici ,olatili prezent n
pro!a de analizat"
2"0"9 )ompus exceptat Y compus ,olatil care nu particip n atmosfer la reacXii
fotochimice"
2"9 5umarul metodei
(up etapa de pregtire a pro!ei, V3)*urile sunt separate printr*o tehnic cromatografic" +entru a
se putea atinge limitele de cuantificare ale sistemului J)<M5, a,#nd n ,edere concentraiile extrem
de mici ale compu'ilor de interes n atmosfer, se ,a folosi o mediere n timp" +e post de agent
a!sor!ant se ,a folosi car!unele acti," $nainte de folosire, cr!unele se ,a reacti,a la 271Z) n etu,
timp de 0A de ore" +entru a!sor!ie se ,a lsa cr!unele acti, expus la o atmosfer timp de A
sptm#ni" +entru desor!ie se ,a folosi alcool metilic" 5e spal cr!unele acti, cu o cantitate mic
de alcool, se filtreaz, si se introduce n fiola de analiz" 5e foloseWte un sistem de introducere a
pro!ei cu zon cald" (up ce compuWii au fost identificaXi, aceWtia pot fi cuantificaXi din aria picului
prin folosirea unui standard intern" %poi printr*un calcul matematic se poate o!Xine conXinutul de
V3) din pro!"
2"A Mactori de rspuns
+entru calculul factorilor de rspuns se dilueaz compuWii puri n sol,ent folosind !alanXa analitic"
$n soluXia final se introduce Wi elementul de standard intern" +entru diluXie se foloseWte o fiol de 0
mL pentru J)" 5e introduc 2 Y 2,1 mL de sol,ent, dup care se adaug prin in&ecXie prin septum
fiecare compus" +entru in&ecXie de foloseWte o sering de de 27 [L" 5e folosesc 1 [L din fiecare
compus pentru care se doreWte calculul factorilor de rspuns" 5e c#ntreWte fiecare compus n parte
dup fiecare in&ectare" Miecare c#ntrire se efectueaz la zecime de mg"
2"1 Important de Wtiut
$nainte de a introduce o pro! la J)*M5 este !ine de urmrit o serie de parametri pentru a se
asigura !una funcXionare a J)*ului pe perioada rulrii pro!elor c#t Wi pe ,iitor"
Miola cu pro! este cel puXin pe &umtate plin
Miola cu pro! este centrat n autosampler, nu este nclinat sau str#m! iar septumul folosit
este perfect plan"
+oziXia pro!elor n autosampler coincide cu poziXia pro!elor din sec,enX
Mlacoanele cu sol,ent de splare conXin minim A,1 mL de sol,ent -ni,el maxim.
5eringa din in&ectorul autosampler*ului st ferm Wi nu &oac
5eringa este nou sau a fost splat corespunztor
Liner*ul este nou sau curat Wi corespunde cu tehnica de in&ecXie folosit
(etectorul M5( este su! ,acuum de mai mult de A ore naintea rulrii pro!ei
5e ,a rula o sec,enX de autotune Wi se ,a sal,a pentru a ase asigura c detectorul se afl n
parametri standard de operare
2"E )alcule matematice
V3);-m
2
Km
0
Km
9
K"""Km
n
.x277
V3) este conXinutul total de V3), n procente de mas
m
i
este masa n grame a compusului i ntr*un gram de pro!
277 este un factor folosit pentru con,ersia din gram pe gram n procenta&e de mas
m
i
;-r
i
x %
i
x m
I5
.<-m
5
x %
I5
.
m
i
este masa n grame a compusului i n 2 g de amestec
r
i
este factorul de rspuns pentru compusul i
%
i
este aria picului pentru compusul i
%
I5
este aria picului de standard intern
m
I5
este masa n grame a compusului folosit ca 'i standard intern
m
5
este masa n grame a amestecului de analizat ca 'i pro!
$n cazul n care coeluXia a doi sau mai mulXi compuWi nu poate fi e,itat din moti,e de separare
cromatografic, compuWii respecti,i tre!uie trataXi ca un singur pic Wi se ,a calcula factorul de
rspuns ca atare"
+entru a se ,erifica puterea de separare cromatografic, pentru fiecare pereche de picuri se
,a calcula rezolutia cromatografic"
? ; 0 -t
?!
Y t
?a
.<-w
!
* w
a
.
? este rezoluia cromatografic a dou picuri a 'i !
t
?!
este timpul de retenie pentru compusul !
t
?a
este timpul de retenie pentru compusul a
w
!
este limea la !az a compusului !
w
a
este limea la !az a compusului a
+entru ca o pereche de picuri s poat fi considerate !ine separate din punct de ,edere
cromatografic, rezoluia celor dou picuri tre!uie s fie mai mare de 2,1"
5e ,a calcula de asemenea pentru c#te,a dintre picuri 'i numrul de talere teoretice"
@umrul de talere teoretice este o mrime care caracterizeaz eficiena coloanei cromatografice 'i
este un parametru adec,at pentru urmrirea n timp a gradului de uzur" @umrul de talere teoretice
scade n timp"
@ ; -t
?
.
0
< -w<A.
0
@ este numrul de talere teoretice
t
?
este timpul de retenie
w este limea la !az
2"8 /xprimarea rezultatelor
6n rezultat se exprim ca Wi media a dou rezultate o!Xinute de ctre un operator n condiXii de
repeta!ilitate" (ac cele dou rezultate difer ntre ele prin mai mult de LC fa de medie se poate
considera analiza suspect Wi ar tre!ui repetat"
)ondiiile de repeta!ilitate pre,d ca aceea'i pro! s fie analizat de acela'i operator, pe acela'i
aparat, n aceea'i zi 'i n acelea'i condiii" $n mod uzual, pro!ele se prepar 'i se analizeaz
simultan, sau, n cazul n care pregtirea pro!ei dureaz prea mult, at#t de repede una dup dup alta
pe c#t e posi!il din punct de ,edere experimental"
3 analiz considerat suspect poate a,ea multiple cauze, printre care, fr a se limita laB
neomogenitatea pro!ei
pro!a este insuficient de omogen
pro!leme n funcionarea aparatului
schim!ri drastice n condiiile de mediu din imediata ,ecintate a aparatului de msur
operatorul nu are suficient experien de lucru cu metoda n cauz
standardele de cali!rare expirate sau stocate n condiii improprii
su!stane folosite la prepararea pro!ei expirate sau stocate n condiii improprii
erori de procedur sau mod de calculare a rezultatelor
2"L Ti!liografie
- Agilent 7890A gas chromatograph Advanced User Guide
- Agilent 5975 Series MSD Operation manual
- Agilent 7890A gas chromatograph rou!leshooting
- Agilent G"70"#A G$%MSD $hemstation Getting Started
- Agilent 5975 series MSD rou!leshooting and Maintenance Manual
- Agilent 7890A Gas $hromatograph Operating Manual
-$&S #' (SO ""890-)*)00+ ,aints and varnishes - Determination o. volatile organic -
compound /0O$1 content

2 %naliza nitraXilor din ap prin metoda 6V<VI5
2"2 +rincipiul metodei
)#nd o pro! de ap ce conXine ioni de nitrat este tratat cu !rucin n mediu de acid sulfuric se
o!Xine o soluXie de culoare gal!en" )oncentraXia de ioni nitrat din soluXie poate fi calculat pe !aza
a!sor!anXei la A27 nm"
2"0 ?eacti,i Wi aparatur
soluXie standard de ioni nitrat -7,772 mg<mL.
soluXie de clorur de sodiu -97C procente masice.
soluXie de acid sulfuric AB2 -A prXi acid sulfuric 2 parte ap distilat.
soluXie !rucin*acid sulfanilic
spectrometru 6V*VI5
cu,e de 27 mm drum optic
+entru prepararea soluXiei de acid sulfuric se ,a turna acidul n ap Wi nu in,ers"
+entru soluXia de !rucin*acid sulfanilic, se ,or c#ntri 2 g de !rucin Wi 7,2 g de acid sulfanilic n 9
ml de acid clorhidric concentrat" 5e dilueaz p#n la 277 de mL cu ap distilat"

2"9 /taloane Wi procedura de lucru
5e ,or prepara o serie de etaloane prin diluXii succesi,e pornind de la un etalon mai concentrat" @u
se ,a uita includerea unui punct de zero -un !lanc, ap distilat, care s nu conXin ioni de nitrat la
un ni,el detecta!il." $n condiXii normale de lucru E etaloane sunt de regul suficiente pentru a o!Xine
o cur! de cali!rare"
5e ,a proceda la msurarea pro!elor cresctor, pornind de la concentraia cea mai mic, p#n la
concentraia cea mai mare"
+entru ca o cur! de cali!rare s fie considerat satisfctoare, o ,aloare minim a coeficientului de
corelare este de 7,PP" $n cazul n care criteriul minim nu este atins, se ,or prepara din nou soluiile
de cali!rare 'i se ,a repeta operaia de msurare"
2"A +regtirea pro!elor
(in orice pro! se ia o cantitate -ntre 2 Wi 1 mL. Wi se dilueaz p#n la 27 mL cu soluie de acid
sulfuric AB2 cu agitare continu su! &et de ap rece" @u se ,a acoperi recipientul" (ac pro!ele sunt
saline se adaug la fiecare nainte de diluXia cu ap distilat 0 mL de solutie de clorur de sodiu"
%tenXie\ %cest pas al reacXiei este puternic exoterm" @u se ,a acoperi recipientul deoarece se poate
genera presiune Wi e,entual explozia recipientului"
5e adaug 7,1 mL de soluXie de !rucin<acid sulfanilic Wi se agit prin rotire"
5e nclzeWte la 277Z) pe !aie de ap"
5e rceWte soluXia su! &et de ap rece, se dilueaz p#n la 01 ml cu ap distilat, se pune capacul Wi
se agit foarte !ine"
5e introduc aproximati, 9 mL n cu,a de msurare a aparatului Wi se nregistreaz a!sor!anXa"
0 %naliza nitriXilor din ap prin metoda 6V*VI5
0"2 +rincipiul metodei
3 pro! de ap este tratat cu reacti, Jriess n mediu de acid acetic, n urma reacXiei form#ndu*se
un complex roWu cu a!sor!anX maxim n &urul ,alorii de 107 nm"
0"0 ?eacti,i Wi aparatur
5oluXie etalon de ioni nitrit
5oluXie de acid acetic 20C procente masice
?eacti,i Jriess -dup preparare se ,or stoca n recipiente din sticl maro ferite de lumin.
Taloane cotate de 01 mL, 277 mL, respecti, 217 mL
acid sulfanilic
I*napht4lamin
h#rtie de filtru
p#lnie de sticl
pahar Terzelius de 17 mL
?eacti, Jriess I B 5e dizol, 1 g de acid sulfanilic n soluXie de acid acetic 20C" 5e toarn
aproximati, 17 mL de soluXie ntr*un !alon cotat de 217 ml" 5e c#ntareWte acidul sulfanilic pe
!alanXa tehnic Wi se dizol, n !alonul cotat n soluXia de acid acetic" (up ce s*a dizol,at complet
se umple p#n la semn cu soluXie de acid acetic, se pune dopul Wi se agit energic" 5e pstreaz n
recipienXi de sticl maro feriXi de lumin"
?eacti, Jriess II B 5e c#ntresc 7,01 g de I*napht4lamin pe !alanXa tehnic" 5e pun 07 de mL de
ap la fiert ntr*un pahar Terzelius de 17 mL" 5e adaug cantitatea c#ntrit de I*napht4lamin Wi se
mai las nc 1 minute" (up se filtreaz ntr*un !alon cotat de 217 mL Wi se umple la semn cu
soluXie de acid acetic"
5oluXie de ioni nitrit B 5e dizol, 7,21 g de nitrit de sodiu n 2 L de ap distilat" %ceast soluXie
conXine 277 mg<L de ioni nitrat" 5e agit soluXia foarte !ine nainte de folosire"
0"9 /taloane Wi procedura de lucru
5e ,or prepara o serie de etaloane prin diluXii succesi,e pornind de la un etalon mai concentrat" @u
se ,a uita includerea unui punct de zero -un !lanc, soluXie de acid acetic, care s nu conXin ioni de
nitrat la un ni,el detecta!il." $n condiXii normale de lucru E etaloane sunt de regul suficiente pentru
a o!Xine o cur! de cali!rare"
5e ,a proceda la msurarea pro!elor cresctor, pornind de la concentraia cea mai mic, p#n la
concentraia cea mai mare"
+entru ca o cur! de cali!rare s fie considerat satisfctoare, o ,aloare minim a coeficientului de
corelare este de 7,PP" $n cazul n care criteriul minim nu este atins, se ,or prepara din nou soluiile
de cali!rare 'i se ,a repeta operaia de msurare"
0"A +regtirea pro!elor
La 1 mL de pro! limpede se adaug 1 mL de reacti, Jriess I" 5e agit puternic Wi se las la un loc
ferit de lumin timp de 27 minute" 5e adaug 2 mL de reacti, Jriess II, se agit puternic Wi se las
nc 27 minute" +ro!ele pentru cur!a de etalonare se ,or pregti n aceeaWi manier ca Wi pro!ele de
lucru -la 1 mL de etalon, 1mL de reacti, Jriess I, agitare, W"a"m"d." 5e ,a prepara Wi o pro! de
referinX care se ,a face cu ap distilat n loc de pro!"
5e introduc aproximati, 9 mL n cu,a de msurare a aparatului Wi se nregistreaz a!sor!anXa"
0"1 Ti!liografie
httpsB<<www"google"ro<url]
sa;t^rct;&^O;^esrc;s^source;we!^cd;P^,ed;7)IMT/T_w)%^url;httpC9%C0M
C0Mpgepm"o,h"orgC0MdownloadC0Mfood`Oualit4C0Mla!`old
C0MexL`nitrates`and`nitrites"doc^ei;/7c56_5?JAOLA%T1to(w%g^usg;%Ma&)@/!/Axtm2N
5:z!+ahbLOx8,AL?OMw^sig0;h30aa,595u_u/T?ofONIww
9 +esticide din ap prin J)*M5
9"2 Materiale Wi sticlrie necesare
soluXie stoc de amestec de pesticide
!aloane cotate de 01 ml
p#lnii de separare de 2 L
cilindru gradat de 2 L, 277 mL
pahare Terzelius de 017 mL
!aloane cu fund rotund de 017 ml
h#rtie de filtru
p#lnie de sticl
sulfat de sodiu anhidru
sticl de ceas
sistem de tip e,aporator rotati, cu ,acuum
seringi de plastic de 17 mL de unic folosinX
silicagel E7*077 mesh puritate analitic
!alanX tehnic
dichlorometan, hexan, puritate analitic
fiole pentru autosampler J) -aprox 0 mL.
pipete +asteur de unic folosinX
9"0 +rincipiul metodei
6n ,olum fix de ap -177*2777 mL. este supus unei extracXii cu sol,ent -dichlorometan." (up
separarea straturilor n p#lnia de separare, faza organic este colectat Wi uscat pe sulfat de sodiu
anhidru" Volumul de sol,ent este adus la aproximati, 27 mL la e,aporatorul rotati," Toate
transferurile se fac cantitati," Volumul de pro! adus la 27 mL se supune unui proces de purificare
pe coloan de silicagel, unde are loc Wi schim!area de sol,ent la hexan" MracXia o!Xinut dup
purificare este concentrat din nou la e,aporatorul rotati, Wi adus la un ,olum de aproximati, 7,1
mL care este transferat ntr*o fiol de J) care este pus la aparat pentru a fi analizat" (ac analiza
nu are loc imediat se recomand stocarea la rece pentru a e,ita e,aporarea sol,entului care poate
conduce la rezultate eronate"
9"9 /taloane de lucru
/taloanele de lucru se ,or prepara prin diluXie n diclorometan pornind de la un etalon mai
concentrat" 5e ,a prepara un set de cel puXin 1 etaloane de lucru" 5e ,or folosi 1 !aloane cotate de
01 mL n care se ,a introduce o cantitate mic de sol,ent -aproximati, 1 ml." 5e ,a introduce n
fiecare cantitatea de etalon concentrat rezultat din calcul dup care se ,a aduce la semn cu sol,ent"
5e pune dopul Wi se agit energic" 5e preia o cantitate -aproximati, 0 mL. cu a&utorul unei pipete
+asteur Wi se transfer ntr*o fiol de J)*M5 dup care se introduce n caruselul autosampler*ului
pentru analiz"
9"A +regtirea pro!ei
5e msoar cu cilindrul gradat o cantitate de pro! de ap -177 mL." 5e introduce n p#lnia de
separare" 5e ,a ,erifica n preala!il ca ro!inetul p#lniei de separare s fie pe poziXia nchis" 5e
msoar 97 mL de dichlorometan Wi se introduc peste pro!a de ap n p#lnia de separare" 5e agit
energic timp de minimum 27 minute" 5e pune ntr*un stati, Wi se aWteapt separarea straturilor" 5e
colecteaz faza organic" 5e introduc nc 97 mL de diclorometan Wi se repet de nc dou ori
extracXia" 5e arunc apa Wi se clteWte p#lnia cu nc 97 ml de diclorometan care se adaug la faza
organic" 5e adaug agent de uscare -sulfat de sodiu anhidru." 5e agit cu !agheta pentru ca agentul
de uscare s acXioneze mai !ine" 5e filtreaz soluXia ntr*un !alon cu fund rotund"
5e trece !alonul la sistemul de e,aporare" 5e monteaz !alonul Wi se fixeaz !ine cu clema de
prindere" 5e seteaz !aia de ap la temperatura potri,it -E7Z)." 5e porneWte apa de rcire de la
refrigerent" 5e nchide ro!inetul de aerisire Wi se regleaz ,acuum*ul pe aproximati, E77"
5e ia o sering de plastic de unic folosire de 17 mL Wi se ndeprteaz pistonul" 5e introduce n
corpul seringii goale un dop din ,at de sticl"
%tenXie\ @u se ,a manipula ,ata de sticl fr mnuWi\
5e mpacheteaz seringa cu 27 g de silicagel, !t#nd uWor corpul seringii, pentru a uWura
mpachetarea silicagelului" La final se mai pune un strat de 0 g de sulfat de sodiu anhidru !ine
mo&arat Wi se !ate din nou uWor pentru a a&uta sedimentarea"
5e monteaz seringa ntr*un stati, cu un pahar Terzelius de aproximati, 077 mL su!"
5e transfer cu gri& conXinutul !alonului cu a&utorul unei pipete +asteur" 5e mai clteWte !alonul de
dou ori cu c#te 0 mL de hexan Wi se adaug n sering" 5e mai adaug n porXii 17 mL de hexan Wi
se las s curg n paharul Terzelius de 17 de mL"
%tenXie\ @u se ,a lsa nici un moment silicagelul s se usuce" (ac silicagelul s*a uscat Wi nu s*a
terminat procedura, se repet etapa de extracXie"
5e transfer cantitati, conXinutul paharului ntr*un !alon cu fund rotund Wi se duce la e,aporatorul
rotati, pentru concentrare la aproximati, 7,1 mL" %poi conXinutul !alonului dup etapa de
concentrare se transfer cantitati, ntr*o fiol de J) Wi se mai folosesc dou porXii de aproximati,
7,1 mL pentru cltirea !alonului Wi recuperarea urmelor de analit e,entual rmase pe !alon"
5e pune fiola n autosamplerul de la J)*M5 pentru analiz cantitati,"
9"1 )alcule
+entru a se ,erifica puterea de separare cromatografic, pentru fiecare pereche de picuri se ,a
calcula rezolutia cromatografic"
? ; 0 -t
?!
Y t
?a
.<-w
!
* w
a
.
? este rezoluia cromatografic a dou picuri a 'i !
t
?!
este timpul de retenie pentru compusul !
t
?a
este timpul de retenie pentru compusul a
w
!
este limea la !az a compusului !
w
a
este limea la !az a compusului a
+entru ca o pereche de picuri s poat fi considerate !ine separate din punct de ,edere
cromatografic, rezoluia celor dou picuri tre!uie s fie mai mare de 2,1"
5e ,a calcula de asemenea pentru c#te,a dintre picuri 'i numrul de talere teoretice"
@umrul de talere teoretice este o mrime care caracterizeaz eficiena coloanei cromatografice 'i
este un parametru adec,at pentru urmrirea n timp a gradului de uzur" @umrul de talere teoretice
scade n timp"
@ ; -t
?
.
0
< -w<A.
0
@ este numrul de talere teoretice
t
?
este timpul de retenie
w este limea la !az
9"E +arametri de metod cromatografic
+arametri de in&ectorB
Volum de in&ecXie Y 9,7 [L
5plri cu pro! Y 7
5plri cu sol,ent % Y 27 nainte de in&ecXie, 27 dup
5plri cu sol,ent T Y 27 nainte de in&ecXie, 27 dup
+ompri n pro! nainte de in&ecXie Y 1
Introducere pro!B
TemperaturaB 0L7Z)
Mod de operareB 5+LITL/55
?at de pur&areB 9E,7 mL<<min la 7,L7 min
)oloanB 2,1 mL<min constant
+rogram de temperaturB
87Z) iniXial timp de 9 minute
9Z)<min p#n la 977Z)
977Z) timp de 97 de minute
Temperatura pe linia de transfer ctre M5B 017Z)
$nt#rziere pentru sol,entB 1 minute
Mod de operare M5B Jain Mactor 27 5IM -single ion monitoring.
+arametri 5IMB
Timp pe
cromatogram
Ioni monitorizaXi (well time
7*1 min 20L 177
1*02 min 27P 177
02*01 min 18,208,20L,2AE 017
01*0L,L7 min 20E,21E 977
0L,L7*90,17 min L9,207,208,21L 077
90,17*9E,77 min 0P0,97E 917
9E,77*98,E7 min 2PE,077,072,027,02A 217
98,E7*9P,LL min 11,18,LL,27P,2E2,289 217
9P,LL*A0,77 min 2PL 177
A0,77*AA,77 min 2E7,029,008,0A2 077
AA,77*A1,17 min 071,00E 917
A1,17*AE,17 min 18,2E0 917
AE,17*AL,77 min 2EA,2E8 977
AL,77*AL,87 min 010,0L7 977
AL,87*17,77 min 80,28E,2LP,979,992 217
17,77*10,L7 min 2A9,2EP,281,010 077
10,L7*11,77 min 282,979 917
11,77*E7,77 min 29P 177
E7,77*E1,77 min 90L 177
9"8 %naliza J)*M5
$n caruselul autosamplerului se ,or pune urmtoarele pro!eB o pro! !lanc, constituit din sol,entul
folosit pentru extracXie, minim 1 pro!e de etalonare Wi pro!a rezultat n urma extracXiei" 5e ,or nota
cu atenXie numerele poziXiilor din autosampler n sec,enXa de lucru Wi se ,a sal,a sec,enXa cu
numele grupei Wi numele masterului"
9"L Ti!liografie
- Agilent 7890A gas chromatograph Advanced User Guide
- Agilent 5975 Series MSD Operation manual
- Agilent 7890A gas chromatograph rou!leshooting
- Agilent G"70"#A G$%MSD $hemstation Getting Started
- Agilent 5975 series MSD rou!leshooting and Maintenance Manual
- Agilent 7890A Gas $hromatograph Operating Manual
- #,A Method 508 2 Determination o. $hlorinated ,esticides in 3ater !4 gas
chromatograph4 3ith an electron-capture detector 2 5ev6 76"
#,A Method 5)7 2 Determiantion o. selected ,esticides and .lame retardants in
drin8ing 3ater !4 solid phase e9traction and capillar4 column gas chromatograph4%mass
spectrometr4 /G$%MS1
#,A Method +08 2 Organochlorine pesticides and ,$:;s
A +%N din ap prin J)*M5
A"2 Materiale Wi sticlrie necesare
soluXie stoc de amestec de +%N -hidrocar!uri aromatice polinucleare.
!aloane cotate de 01 ml
p#lnii de separare de 2 L
cilindru gradat de 2 L, 277 mL
pahare Terzelius de 017 mL
!aloane cu fund rotund de 017 ml
h#rtie de filtru
p#lnie de sticl
sulfat de sodiu anhidru
sticl de ceas
sistem de tip e,aporator rotati, cu ,acuum
seringi de plastic de 17 mL de unic folosinX
silicagel E7*077 mesh puritate analitic
!alanX tehnic
dichlorometan, hexan, puritate analitic
fiole pentru autosampler J) -aprox 0 mL.
pipete +asteur de unic folosinX
A"0 +rincipiul metodei
6n ,olum fix de ap -177*2777 mL. este supus unei extracXii cu sol,ent -dichlorometan." (up
separarea straturilor n p#lnia de separare, faza organic este colectat Wi uscat pe sulfat de sodiu
anhidru" Volumul de sol,ent este adus la aproximati, 27 mL la e,aporatorul rotati," Toate
transferurile se fac cantitati," Volumul de pro! adus la 27 mL se supune unui proces de purificare
pe coloan de silicagel, unde are loc Wi schim!area de sol,ent la hexan" MracXia o!Xinut dup
purificare este concentrat din nou la e,aporatorul rotati, Wi adus la un ,olum de aproximati, 7,1
mL care este transferat ntr*o fiol de J) care este pus la aparat pentru a fi analizat" (ac analiza
nu are loc imediat se recomand stocarea la rece pentru a e,ita e,aporarea sol,entului care poate
conduce la rezultate eronate"
A"9 /taloane de lucru
/taloanele de lucru se ,or prepara prin diluXie n diclorometan pornind de la un etalon mai
concentrat" 5e ,a prepara un set de cel puXin 1 etaloane de lucru" 5e ,or folosi 1 !aloane cotate de
01 mL n care se ,a introduce o cantitate mic de sol,ent -aproximati, 1 ml." 5e ,a introduce n
fiecare cantitatea de etalon concentrat rezultat din calcul dup care se ,a aduce la semn cu sol,ent"
5e pune dopul Wi se agit energic" 5e preia o cantitate -aproximati, 0 mL. cu a&utorul unei pipete
+asteur Wi se transfer ntr*o fiol de J)*M5 dup care se introduce n caruselul autosampler*ului
pentru analiz"
A"A +regtirea pro!ei
5e msoar cu cilindrul gradat o cantitate de pro! de ap -177 mL." 5e introduce n p#lnia de
separare" 5e ,a ,erifica n preala!il ca ro!inetul p#lniei de separare s fie pe poziXia nchis" 5e
msoar 97 mL de dichlorometan Wi se introduc peste pro!a de ap n p#lnia de separare" 5e agit
energic timp de minimum 27 minute" 5e pune ntr*un stati, Wi se aWteapt separarea straturilor" 5e
colecteaz faza organic" 5e introduc nc 97 mL de diclorometan Wi se repet de nc dou ori
extracXia" 5e arunc apa Wi se clteWte p#lnia cu nc 97 ml de diclorometan care se adaug la faza
organic" 5e adaug agent de uscare -sulfat de sodiu anhidru." 5e agit cu !agheta pentru ca agentul
de uscare s acXioneze mai !ine" 5e filtreaz soluXia ntr*un !alon cu fund rotund"
5e trece !alonul la sistemul de e,aporare" 5e monteaz !alonul Wi se fixeaz !ine cu clema de
prindere" 5e seteaz !aia de ap la temperatura potri,it -E7Z)." 5e porneWte apa de rcire de la
refrigerent" 5e nchide ro!inetul de aerisire Wi se regleaz ,acuum*ul pe aproximati, E77"
5e ia o sering de plastic de unic folosire de 17 mL Wi se ndeprteaz pistonul" 5e introduce n
corpul seringii goale un dop din ,at de sticl"
%tenXie\ @u se ,a manipula ,ata de sticl fr mnuWi\
5e mpacheteaz seringa cu 27 g de silicagel, !t#nd uWor corpul seringii, pentru a uWura
mpachetarea silicagelului" La final se mai pune un strat de 0 g de sulfat de sodiu anhidru !ine
mo&arat Wi se !ate din nou uWor pentru a a&uta sedimentarea"
5e monteaz seringa ntr*un stati, cu un pahar Terzelius de aproximati, 077 mL su!"
5e transfer cu gri& conXinutul !alonului cu a&utorul unei pipete +asteur" 5e mai clteWte !alonul de
dou ori cu c#te 0 mL de hexan Wi se adaug n sering" 5e mai adaug n porXii 17 mL de hexan Wi
se las s curg n paharul Terzelius de 17 de mL"
%tenXie\ @u se ,a lsa nici un moment silicagelul s se usuce" (ac silicagelul s*a uscat Wi nu s*a
terminat procedura, se repet etapa de extracXie"
5e transfer cantitati, conXinutul paharului ntr*un !alon cu fund rotund Wi se duce la e,aporatorul
rotati, pentru concentrare la aproximati, 7,1 mL" %poi conXinutul !alonului dup etapa de
concentrare se transfer cantitati, ntr*o fiol de J) Wi se mai folosesc dou porXii de aproximati,
7,1 mL pentru cltirea !alonului Wi recuperarea urmelor de analit e,entual rmase pe !alon"
5e pune fiola n autosamplerul de la J)*M5 pentru analiz cantitati,"
A"1 +arametri de metod cromatografic
+arametri de in&ectorB
Volum de in&ecXie Y 2,7 [L
5plri cu pro! Y 7
5plri cu sol,ent % Y 27 nainte de in&ecXie, 27 dup
5plri cu sol,ent T Y 27 nainte de in&ecXie, 27 dup
+ompri n pro! nainte de in&ecXie Y 1
Introducere pro!B
TemperaturaB 0L7Z)
Mod de operareB 5+LITL/55
?at de pur&areB 9E,7 mL<<min la 7,L7 min
)oloanB 2,1 mL<min constant
+rogram de temperaturB
87Z) iniXial timp de 9 minute
9Z)<min p#n la 977Z)
977Z) timp de 07 de minute
Temperatura pe linia de transfer ctre M5B 017Z)
$nt#rziere pentru sol,entB E minute
Mod de operare M5B Jain Mactor 9 5IM -single ion monitoring.
+arametri 5IMB
Timp pe
cromatogram
Ioni monitorizaXi (well time
7*09 min 20L 177
09*0E min 210 177
0E*0P min 219 177
0P*9E min 2EE 177
9E*AA min 28L 177
AA*1A min 070 177
1A*EA min 00L 177
EA* 89 min 010 177
89* end time min 08E 177
A"E )alcule
+entru a se ,erifica puterea de separare cromatografic, pentru fiecare pereche de picuri se ,a
calcula rezolutia cromatografic"
? ; 0 -t
?!
Y t
?a
.<-w
!
* w
a
.
? este rezoluia cromatografic a dou picuri a 'i !
t
?!
este timpul de retenie pentru compusul !
t
?a
este timpul de retenie pentru compusul a
w
!
este limea la !az a compusului !
w
a
este limea la !az a compusului a
+entru ca o pereche de picuri s poat fi considerate !ine separate din punct de ,edere
cromatografic, rezoluia celor dou picuri tre!uie s fie mai mare de 2,1"
5e ,a calcula de asemenea pentru c#te,a dintre picuri 'i numrul de talere teoretice"
@umrul de talere teoretice este o mrime care caracterizeaz eficiena coloanei cromatografice 'i
este un parametru adec,at pentru urmrirea n timp a gradului de uzur" @umrul de talere teoretice
scade n timp"
@ ; -t
?
.
0
< -w<A.
0
@ este numrul de talere teoretice
t
?
este timpul de retenie
w este limea la !az
A"8 %naliza J)*M5
$n caruselul autosamplerului se ,or pune urmtoarele pro!eB o pro! !lanc, constituit din sol,entul
folosit pentru extracXie, minim 1 pro!e de etalonare Wi pro!a rezultat n urma extracXiei" 5e ,or nota
cu atenXie numerele poziXiilor din autosampler n sec,enXa de lucru Wi se ,a sal,a sec,enXa cu
numele grupei Wi numele masterului"
A"L Ti!liografie
- Agilent 7890A gas chromatograph Advanced User Guide
- Agilent 5975 Series MSD Operation manual
- Agilent 7890A gas chromatograph rou!leshooting
- Agilent G"70"#A G$%MSD $hemstation Getting Started
- Agilent 5975 series MSD rou!leshooting and Maintenance Manual
- Agilent 7890A Gas $hromatograph Operating Manual
- #,A Method 87"0 2 ,ol4nuclear aromatic hidrocar!ons
- #,A Method 5506" 2 Determination o. pol4c4clic aromatic hidrocar!ons in drin8ing 3ater
!4 li<uid-solid e9traction and =,>$ 3ith coupled ultraviolet and .luorescence detector
- #,A Method +"0 2 ,ol4nuclear aromatic h4drocar!ons
1 Nidrocar!uri totale prin MT*I?
1"2 +rincipiul metodei
3 pro! de ap de 177 mL este supus unor operaXii de extracXie Wi concentrare, folosindu*se
tetraclorur de car!on Wi un sistem de tip MT*I? pentru analiza cantitati,"
1"0 ?eacti,i Wi aparatur
cilindru gradat de 177 mL, 17 mL
p#lnie de separare de 2 L
!alon cu fund rotund de 177 mL
p#lnie de sticl
tetraclorur de car!on
sulfat de sodiu anhidru
filtru de h#rtie pentru filtrare lent
!aloane cotate de 27 mL
n*hexadecan
isooctan
cloro!enzen
1"9 /taloane Wi procedur de lucru
(e o!icei, o cur! de cali!rare este format dintr*un numr de 1*E puncte de cali!rare Wi un punct
de zero, reprezentat de sol,entul folosit pentru extracXie, n cazul de faX de tetraclorura de car!on"
+entru analiza spectral se ,or folosi cu,e cu ferestre din @a)l iar pentru introducerea pro!ei se ,or
folosi seringi din metal sticl -se prefer e,itarea plasticului datorit posi!ilitXii ridicate de a
contamina pro!a cu hidrocar!uri conXinute n plastic." +entru cali!rare se ,or dilua cantitXi
cunoscute de n*hexadecan, isooctan Wi cloro!enzen n tetraclorur de car!on"
1"A +regtirea pro!ei
3 cantitate de 177 mL de ap msurat cu cilindrul gradat este introdus ntr*o p#lnie de separare de
2 L"
%tenXie\ 5e ,a ,erifica ro!inetul p#lniei nainte pentru a se o!ser,a dac nchide etanW sau dac
permite reglarea curgerii la ,iteza dorit"
5e ,or introduce n p#lnie 97 de mL de tetraclorur de car!on Wi se ,a agita energic timp de minim
27 minute" (up terminarea operaXiei de agitare, p#lnia de separare se ,a fixa ntr*un stati, Wi se ,a
aWtepta separarea fazelor" (up ce fazele s*au separat, se ,a colecta faza organic ntr*un pahar
Terzelius de 077 mL" 5e introduc n p#lnie din nou nc 97 de mL Wi se repet procedura de agitare*
separare*colectare a fazei organice de nc dou ori" (up finalizarea a trei operaXii de agitare*
separare*colectare a fazei organice se ,a arunca apa din p#lnia de separare Wi se ,a clti p#lnia cu 97
de mL de tetraclorur de car!on care se adaug la celelalte trei precedente" 5e adaug agent de
uscare p#n la eliminarea complet a apei din tetraclorura de car!on" 5e filtreaz ntr*un !alon cu
fund rotund de 177 de mL cu a&utorul unei p#lnii de sticl Wi al unui filtru pentru filtrare lent" 5e
trece la sistemul de e,aporare rotati, pentru concentrare la aproximati, 1 mL" 5istemul de
e,aporare rotati, se ,a seta pe un ,acuum de aproximati, A77" 5e transfer cantitati, n flacon de
21 mL Wi se aduce la un ,olum de 27 mL, care se ,a duce la spectrometru MT*I? pentru analiz
cantitati,"
%tenXie\ @u se ,a porni sistemul de tip e,aporator*rotati, fr deschiderea ro!inetului de ap de
rcire" @u se ,a porni sistemul de ,acuum fr nchiderea ro!inetului de etanWeizare"
%tenXie\ 5pectrometrul MT*I? este foarte sensi!il la impuritXi" 5e ,or spla cu atenXie ferestrele
pentru pro! cu sol,ent at#t nainte c#t Wi dup fiecare folosire"
1"1 %naliza MT*I?
+entru analiza tuturor pro!elor, at#t cali!rare c#t Wi msurare se ,a crea o metod care s fie unic
pentru toate pro!ele" In acest scop se ,a folosi un gain*factor fix Wi nu se ,a lsa pe auto" @egli&area
acestui aspect poate duce la diferenXe ntre pro!e care nu corespund cu realitatea, fiind doar un
rezultat al modificrii de factor multiplicati," Toate achiziXiile de spectre se ,or face n inter,alul
177*A777 cm
*2
" Lungimile de und folosite pentru cali!rare sunt 0L77*9777 cm
*2
-hidrocar!uri.,
2E77*2L77 cm
*2
-esteri."
+recauXii speciale pri,itoare la su!stanXele implicateB
)lorura de sodiu -@a)l.
)ile cunoscute de intrare n corp sunt prin ingerare, inhalare sau contact cu pielea"
+raful poate irita sau chiar arde mucoasele mem!ranelor" +raful irit ochii"
)ondiXii de prim a&utorB se spal zona afectat cu ap din !elWug timp de minim 21 minute"
(ac persoana afectat a inhalat o cantitate mare se ,a muta persoana ntr*o zon !ine ,entilat Wi se
,a contacta medicul" (ac persoana a ingerat cantitXi mari Wi e conWtient i se ,or da s !ea cantitXi
mari de ap, dup care se ,a contacta medicul"
$n timpul utilizrii se ,or e,ita contactele cu ochii, pielea Wi m!rcmintea" 5e ,or spla
m#inile dup folosire" )#t timp nu se foloseWte se ,a Xine mereu nchis"
5e ,a e,ita stocarea n imediata ,ecintate a agenXilor oxidanXi, litiu, halogenuri -/x TM
9
."
5oluXie standard de ioni nitrat
$n general nepericuloas n manipulrile normale, cu condiXia s se respecte normele de
protecXie normale n la!orator" 5e ,a e,ita expunerea ndelungat pe piele sau prin inhalare"
+entru prim a&utor, se ,a spla zona expus din a!undenX cu ap Wi spun" (ac iritaXia
persist se ,a apela la a&utorul medical de specialitate"
$n caz de contact cu ochii, se ,or spla cu ap din a!undenX timp de minim 21 minute,
ridic#nd pleoapele ocazional" 5e ,a apela la a&utor medical"
$n caz de inhalare, se ,a scoate persoana n cauz la aer curat" (ac nu respir, se ,a face
respiraXie artificial" (ac respir greu, i se ,a administra oxigen"
$n caz de ingerare, se ,a induce ,oma imediat dup ce se administreaz dou pahare de ap"
@u se ,a da niciodat ce,a s !ea unei persoane inconWtiente"
+entru limitarea expunerii se ,or folosi niWe potri,ite Wi mnuWi din latex sau ,inil" 5e ,or
folosi ochelari de protecXie" 5e ,or folosi halate de la!orator pentru limitarea expunerii pe piele"
$n caz de expunere acut poate aprea o posi!il iritaXie a ochilor sau a stomacului"
%cid sulfuric
Moarte periculos n caz de contact cu pielea -corozi,, iritant, permea!il., cu ochii -iritant,
corozi,., n caz de ingerare sau inhalare" Lichidul sau ceaXa pot produce daune la ni,el de Xesut pe
mem!ranele mucoase ale ochilor, gurii Wi sistemului respirator" )ontactul cu pielea poate produce
arsuri" Inhalarea ceXii poate produce iritarea sistemului respirator, caracterizat prin tuse, nnecare
sau scurtare a respiraXiei" 5upra*expunerea se,er poate pro,oca moartea" Inflamarea ochilor este
caracterizat prin nroWire, lcrimare Wi usturime" Inflamarea pielii este caracterizat prin usturime,
descuamare, nroWire sau ocazional de !Wicare"
%re potenXial cancerigen de clasa 2 conform clasificrii 35N% Wi I%?)" @u se cunosc
efectele mutagenice sau teratogenice" 5u!stanXa poate fi toxic pentru rinichi, plm#ni, inim,
sistemul cardio,ascular, sistemul respirator superior, ochi Wi dantur" @u se cunosc date despre
limite" /xpunerea repetat sau prelungit poate pro,oca distrugerea organelor Xint" /xpunerea
repetat sau prelungit a ochilor cu ceaXa poate produce iritarea se,er a ochilor Wi a pielii"
/xpunerea repetat sau prelungit poate cauza iritarea sistemului respirator urmat de infecXii
!ronWice oportuniste" /xpunerea repetat sau prelungit poate duce la o degenerare a sntXii prin
acumularea n unul sau mai multe organe umane"
$n caz de contact cu ochii se ,a spla imediat zona afectat cu ap timp de minim 21 minute
Wi se ,or ndeprta hainele Wi papucii contaminaXi" 5e ,a acoperi pielea iritat cu o su!stanX cu
proprietXi emoliente" 5e poate folosi ap rece" 5e ,a spla m!rcmintea nainte de a se refolosi"
5e ,or spla foarte atent papucii nainte de folosire" 5e ,a apela la a&utor medical imediat"
$n caz de contact mai serios cu pielea, se ,a spla zona cu spun dezinfectant Wi se ,a acoperi
cu crem anti!acterian" 5e ,a apela imediat la a&utor medical de specialitate"
$n caz de inhalare, se ,a scoate persoana n cauz la aer curat" (ac nu respir, i se ,a face
respiraXie artificial" (ac respiraXia este ngreunat, i se ,a da oxigen" 5e ,a apela la a&utor medical
de urgenX"
$n caz de inhalare se,er, se ,a e,acua ,ictima ntr*o arie sigur c#t mai repede posi!il" 5e
,or relaxa hainele care pot pro,oca o!strucXionri, cum ar fi colier, cra,at, centur sau curea" (ac
respiraXia este dificil, i se ,a da oxigen" (ac ,ictima nu respir, i se ,a administra respiraXie
artificial" %tenXie\ /ste posi!il ca respiraXia artificial gur*la*gur s prezinte un pericol pentru
persoana care o administreaz n cazul n care su!stanXa inhalat este toxic, infecXioas sau
corozi," 5e ,a apela la a&utor medical specializat"
$n caz de ingerare, nu se ,a induce ,oma dec#t dac este cerut n mod expres de personalul
medical prezent" @u se ,a administra nimic !ucal unei persoane inconWtiente" 5e ,a relaxa
m!rcmintea care poate o!strucXiona cum ar fi colier, cra,at, centur sau curea" 5e ,a apela la
a&utor medical n cazul n care apar simptome"
+roduWi de com!ustieB necunoscuXi c#t ,reme produsul este n general neinflama!il" TotuWi
produWii de descompunere includ ,apori Wi oxizi de sulf" %ceWtia reacXioneaz cu apa sau cu ,aporii
de ap Wi produc ,apori corozi,i Wi toxici" ?eacXioneaz cu car!onaXii Wi genereaz dioxid de car!on
gazos" ?eacXioneaz cu cianurile Wi sulfiXii Wi formeaz acid cianhidric Wi acid sulfhidric care sunt
otr,itoare"
%re potenXial explozi, n prezenXa materialelor oxidante"
%cetilurile metalelor -monocesiu sau monoru!idiu. Wi car!urile iau foc mpreun cu acidul
sulfuric concentrat" Mosforul al! mpreun cu acidul sulfuric la fier!ere sau cu ,aporii de acid
sulfuric ia foc la contact" +oate incendia alte materiale inflama!ile" +oate genera incendiu c#nd este
amestecat mpreun cu ciclopentadiena, oxima de ciclopentanon, aminele de nitroaril, siliciura de
hexalitiu, oxidul de fosfor -III. Wi agenXii oxidanXi cum ar fi B cloraXi, halogenii sau permanganaXi"
%mestecurile de acid sulfuric cu una dintre urmtoarele su!stanXe are potenXial explozi,B p*
nitrotoluen,penta*argint*trihidroxi*diaminofosfat, percloraXi, alcooli cu peroxid de hidrogen
concentrat, tetraperoxicromat de amoniu, nitritul de mercur, cloratul de potasiu, permanganatul de
potasiu cu clorura de potasiu, car!uri, compuWi nitro, nitraXi, fosfor, ioduri, picraXi, fulminaXi, diene,
alcooli -la nclzire." @itroamida se descompune explozi, la contactul cu acidul sulfuric concentrat"
%mestecul 2,9,1 Y trinitrozohexahidro*2,9,1*triazin Wi acid sulfuric duce la descompunere
explozi,"
$n cazul unor de,ersri minore, se dilueaz cu ap, se adsoar!e cu a&utorul unui material
inert Wi se stocheaz ntr*un container potri,it n ,ederea eliminrii" (ac este necesar, se
neutralizeaz reziduul cu o soluXie diluat de car!onat de sodiu"
$n cazul unor de,ersri ma&ore, se ,or a,ea n ,edere coroziunea, faptul c este otr,itor, Wi
se ,a ncerca stoparea curgerii dac nu implic riscuri" 5e ,a a!sor!i cu pm#nt uscat, pm#nt
simplu sau alte materiale non*com!usti!ile" @u se ,a turna ap n container" @u se ,a atinge
materialul contaminat" +entru a se e,acua ,aporii de acid se ,a folosi o cortin de ,apori de ap
pul,erizat" Tot ,apori de ap prin spra4ere se ,or folosi pentru a reduce ,aporii" 5e ,a e,ita
penetrarea n canalizare, pi,niXe sau spaXii nchise" 5e ,a cere asistenX specializat de la companii
care se ocup cu deWeurile" 5e ,a neutraliza reziduul cu o soluXie diluat de car!onat de sodiu"
5e ,or menXine recipientele nchise Wi uscate n permanenX" % nu se ingera" @u inhalaXi
,aporii, gazele sau ceaXa" @u adugaXi niciodat ap acestui produs" $n caz de ,entilare insuficient,
purtaXi echipament de respiraXie adec,at" $n caz de ingerare accidental, cereXi imediat a&uot medical
specializat Wi artaXi medicului eticheta Wi recipientul" 5e ,a e,ita permanent contactul cu pielea Wi
ochii" 5e ,a menXine distanXa faX de produsele incompati!ile, cum ar fi agenXii oxidanXi, agenXi
reductori, materialele com!usti!ile, materiale organice, metale, acizi, alcalii Wi umiditate" +oate
coroda suprafeXele metalice"
%cidul sulfuric este foarte higroscopic" ?eacXioneaz ,iolent cu apa" 5e ,a menXine
recipientul !ine nchis, ntr*o zon rcoroas, !ine ,entilat" % nu se stoca la pese 09Z)"
?utele cunoscute de intrare n organism sunt a!sor!Xie prin piele, contact dermic, contact
olfacti,, ingerare Wi inhalare"
+rintre efectele potenXiale asupra sntXiiB
+ieleB +roduce iritaXii se,ere Wi arsuri" )ontactul prelungit poate cauza necrozarea Xesuturilor"
3chiB )auzeaz iritaXii se,ere Wi arsuri" +oate cauza daune irepara!ile ale ochiului Wi Xesutului
n,ecinat"
IngerareB (untor n caz de ingerare" +oate cauza perforarea stomacului, s#ngerare intern,
inflamarea esofagului, necrozare Wi cicatrizare Wi colaps circulator local" +oate cauza toxicitate
sistemic cu acidoz"
InhalareB +oate cauza iritare se,er a sistemului respirator Wi a mem!ranelor mucoaselor cu senzaXie
de g#t uscat, tuse, scurtarea respiraXiei Wi edem pulmonar nt#rziat" )auzeaz arsuri chimice la
ni,elul sistemului respirator" Inhalarea poate fi fatal ca rezultat al spasmelor, inflamrii, edem la
ni,elul laringelui Wi !ronhiilor, pneumonie chimic Wi edem pulmonar" %re acXiune corozi, asupra
mucoaselor" +oate afecta sistemul cardio,ascular -hipotensiune, depresie cardiac, !radicardie."
)olapsul circulator se manifest prin colorarea pielii n roz, puls rapid Wi sla!, respiraXie sla! Wi
insuficienX urinar"
Trucina
%tenie, otra,\ +oate a,ea efect asupra sistemului ner,os central" +oate cauza tul!urri de ,edere"
+oate irita pielea 'i ochii" +oate cauza iritarea sistemului digesti, superior 'i a sistemului respirator"
+oate cauza tremurturi 'i con,ulsii" +oate fi fatal dac este inhalat sau ingerat"
+oate cauza o iritare moderat a ochilor"
+oate cauza iritarea pielii" +oate fi noci, dac se a!soar!e prin piele"
+oate fi fatal dac este nghiit" +oate cauza iritarea sistemului digesti," Ingerarea duce la otr,ire"
+oate cauza tremurturi 'i con,ulsii" +oate cauza paralizarea sistemului respirator 'i oprirea !tilor
inimii"
+oate fi fatal la inhalare" +oate cauza iritarea sistemului respirator" +oate cauza efecte similare cu
ingerarea"
Msuri de prim a&utorB
3chiB 5e spal ochii cu ap din a!unden timp de minim 21 minute, ridic#nd ocazional pleoapa
superioar 'i cea inferioar" 5e ,a apela imediat la a&utor medical de specialitate"
+ieleB 5e apeleaz la a&utor medical specializat de urgen" 5e spal zona cu ap din a!unden timp
de minim 21 minute, ndeprt#nd m!rcmintea 'i nclmintea contaminat"
IngerareB (ac ,ictima este con'tient 'i alert, i se dau s !ea 0*A cni pline cu lapte sau ap" 5e ,a
apela la a&utor medical specializat imediat" Viteza este crucial\ 6n medic tre!uie notificat imediat"
InhalareB 5e ,a apela la a&utor medical imediat" 5e ,a scoate ,ictima la aer curat n afara expunerii"
(ac nu respir i se ,a face respiraie artificial" (ac respiraia este dificil, i se ,a administra
oxigen" Viteza este esenial, apelai la a&utor medical imediat\
$n caz de de,ersri accidentale, acestea se ,or cura imediat cu material a!sor!ant" 5e ,a a,ea n
,edere ,entilarea camerei"
(up fiecare manipulare se ,or spla minuios m#inile" 5e ,a ndeprta pe loc m!rcmintea
contaminat 'i se ,a spla nainte de refolosire" 5e ,a e,ita contactul cu ochii sau cu pielea,
ingerarea sau inhalarea" 5e ,a manipula numai su! ni'" 5e ,a stoca n camera cu otr,uri su! cheie"
@u se ,a folosi dac n dotarea la!oratorului nu exist du' ocular sau du' de securitate" 5e ,a folosi
o ,entilare adec,at anti*ex pentru a limita expunerea la inhalare"
)ompu'ii cancerigeni sunt marcai ca toxici 'i foarte toxici" %lchilii sulfai sunt cancerigeni" Luai
msuri speciale pentru a e,ita inhalarea sau contactul cu pielea" +entru neutralizarea alchilsulfailor,
ace'tia se adaug n picturi -cu o p#lnie de picurare. n soluie concentrat de amoniac rcit cu
ghea agit#nd puternic"
www"merckmillipore"com
%cidul sulfanilic
+ro,oac iritarea pielii" +oate pro,oca o reacie alergic a pielii" +ro,oac iritarea gra, a ochilor"
+urtai mnu'i de protecie" $n caz de contact cu pielea, splai zona din a!unden cu ap 'i spun"
$n caz de contact cu ochii, cltii cu atenie cu ap timp de mai multe minute" 5coatei lentilele de
contact, dac este cazul 'i dac acest lucru se poate face cu u'urin" )ontinuai s cltii"
Iritant pentru ochi 'i piele" +oate cauza sensi!ilizarea pielii la contact"
% se e,ita contactul cu pielea\ 5e ,or purta mnu'i de protecie adec,ate"
L(17 pe 'oareci 20977 mg<kg"
www"merckmillipore"com
@itrit de sodiu
+oate agra,a un incendiu, oxidant" Toxic n caz de nghiire" Moarte toxic pentru mediul ac,atic"
/,itai dispersarea n mediu" $n caz de expunere sau dac nu , simii !ine apelai la un centru
medical specializat"
)ontactul cu materiale com!usti!ile poate duce la incendii"
/ste oxidant, toxic, periculos pentru mediu"
L(17 oral L1mg<kg"
www"merckmillipore"com
%cid acetic
Lichid 'i ,apori inflama!ili" +ro,oac arsuri gra,e ale pielii 'i lezarea ochilor"
+urtai mnu'i de protecie, m!rcminte de protecie, protecie pentru ochi 'i echipament de
protecie a feei\
$n caz de inghiire, cltii gura, nu pro,ocai ,oma"
$n caz de nghiire sunai imediat la un centru pentru otr,iri 'i apelai la a&utor medical specializat"
$n caz de contact cu ochii, cltii atent cu ap timp de mai multe minute" 5coatei lentilele de contact
dac este cazul sau dac acest lucru se poate face cu u'urin" )ontinuai s cltii"
(ate toxicologiceB L( 17 oral pe 'oareci 9927 mg<kg" L( 17 cutanat pe iepuri 27E7 mg<kg"
www"merckmillipore"com
I*naftilamin
@oci, n caz de nghiire" +oate pro,oca cancer" Toxic pentru mediul ac,atic cu efect pe termen
lung"
/,itai dispersarea n mediu" $n caz de expunere sau posi!il expunere, consultai medicul"
L( 17 oral pe 'oareci EL7 mg<kg"
www"merckmillipore"com
diclorometan
5uscepti!il de a pro,oca cancer" 6tilizai echipament de protecie conform cerinelor" $n caz de
expunere sau posi!il expunere, consultai medicul"
@ecom!usti!il, toxicitate acut categoria 9<toxic sau su!stane cu efecte cronice"
+recauiiB a nu se stoca de'eurile n containere de aluminiu" (e asemenea, n cazul sol,enilor
clorurai cu urme de ap nu se ,a folosi recipient de stocare din oel inoxida!il -,asul se poate
coroda pro,oc#nd scurgerea lichidelor."
/xist do,ezi limitate n ceea ce pri,e'te efectul carcinogen" 5e ,a pstra n mediu rcoros" 5e ,or
purta mnu'i la manipulare 'i m!rcminte de protecie"
L( 17 oral pe 'oareci 2E77 mg<kg" L( 17 dermal pe 'oareci c0777 mg<kg"
www"merckmillipore"com
Nexan
Lichid 'i ,apori foarte inflama!ili" +oate fi mortal n caz de nghiire sau de ptrundere n cile
respiratorii" +ro,oac iritarea pielii" +oate pro,oca somnolen sau ameeal" 5uscepti!il de a duna
fertilitii" +oate pro,oca leziuni ale organelor n caz de expunere prelungit sau repetat" Toxic
pentru mediul ac,atic cu efecte pe termen lung"
% se pstra departe de surse de cldur<sc#ntei<flcri deschise<suprafee ncinse" Mumatul interzis"
Legtur la pm#nt<conexiune echipotenial cu recipientul 'i cu echipamentul de recepie" /,itai
dispersarea n mediu" $n caz de nghiire accidental sunai imediat un centru de toxicologie sau un
medic de specialitate" $n caz de contact cu pielea splai cu mult ap 'i spun"
@u pro,ocai ,oma\
% se depozita ntr*un loc rcoros 'i !ine ,entilat"
L( 17 oral pe 'oareci 01777 mg<kg" L( 17 dermic pe iepuri c0777 mg<kg"
www"merckmillipore"com
5ilicagel 87*097 mesh %5TM
@u inspirai praful"
@u prezint pericol pentru ap"
?eziduurile cromatograficeB su!stanele explozi,e -ex" peroxizii., agresi,e sau toxice din straturi
sau sor!eni tre!uie eliminate prin metode adec,ate -ex splare sau eluare. nainte de a fi colectate
'i depozitate" 5ol,enii utilizai pentru eluie pot fi, n multe cazuri, reutilizai" )antitile mai mari
de sor!eni -ex" din coloane. ,or fi eli!erate de sol,eni -filtrare sau uscare. 'i colectate n saci de
plastic rezisteni la rupere" )oloanele 'i fazele staionare TL) ,or fi colectate mpreun cu
reziduurile corespunztoare -aluminiu, sticl, materiale plastice."
www"merckmillipore"com
Tetraclorur de car!on
Toxic n caz de nghiire, n contact cu pielea sau prin inhalare" 5uscepti!il de a pro,oca cancer"
+ro,oac leziuni ale organelor n caz de expunere prelungit sau repetat" @oci, pentru mediul
ac,atic cu efecte pe termen lung" (uneaz sntii pu!lice 'i mediului ncon&urtor prin
distrugerea ozonului n atmosfera superioar"
/,itai dispersarea n mediu" +urtai mnu'i de protecie 'i m!rcminte de protecie" $n caz de
contact cu pielea, splai din a!unden cu ap 'i spun" $n caz de inhalare, transportai ,ictima la
aer curat 'i meninei*o n stare de repaus, ntr*o poziie conforta!il pentru respiraie"
In caz de expunere sau n cazul n care nu , simii !ine sunai imediat un centru de informare
toxicologic sau un medic"
%runcai coninutul<recipientul numai la staii de de'euri apro!ate"
Luai msuri speciale pentru a e,ita inhalarea sau contactul cu pielea"
L( 17 oral pe 'oareci 2887 mg<kg" L( 17 dermal pe 'oareci 1787 mg<kg"
www"merckmillipore"com
sulfat de sodiu anhidru
5la! contaminare a apei" L( 17 pe 'oareci oral c0777 mg<kg"
www"merckmillipore"com
n*hexadecan
+oate fi fatal n caz de nghiire sau de ptrundere n cile respiratorii" /xpunerea repetat poate
pro,oca uscarea sau crparea pielii"
@u inspirai ,aporii" /,itai orice contact cu ochii, pielea sau m!rcmintea" $n caz de nghiire
sunai imediat un centru de informare toxicologic sau un medic" @u pro,ocai ,oma"
+oluare puternic a apei"
www"merckmillipore"com
izooctan
Lichid 'i ,apori foarte inflama!ili" +oate fi mortal n caz de nghiire 'i ptrundere n cile
respiratorii" +ro,oac iritarea pielii" +oate pro,oca somnolen sau ameeal" Moarte toxic pentru
mediul ac,atic cu consecine pe termen lung"
% se pstra departe de surse de cldur<sc#ntei<flcri deschise<suprafee ncinse" Mumatul interzis"
+strai recipientul nchis etan'"
Legtur la pm#nt<conexiune echipotenial cu recipientul 'i cu echipamentul de recepie"
/,itai dispersarea n mediu"
$n caz de nghiire sunai imediat la un centru de informare toxicologic sau la un medic"
$n caz de contact cu pielea splai zona din a!unden cu ap 'i spun"
$n caz de inhalare transportai ,ictima la aer li!er si meninei*o n stare de repaus, ntr*o poziie
conforta!il pentru respiraie"
@u pro,ocai ,oma"
% se depozita ntr*un spaiu !ine ,entilat" % se pstra la rece"
L( 17 pe 'oareci pe cale oral c0177 mg<kg"
www"merckmillipore"com
clor!enzen
Lichid 'i ,apori inflama!ili"
@oci, n caz de inhalare"
Toxic pentru mediul ac,atic cu efecte pe termen lung"
% se pstra departe de cldur" /,itai dispersarea n mediu" $n caz de inhalare transportai ,ictima
la aer li!er 'i meninei*o n stare de repaus, ntr*o poziie conforta!il pentru respiraie"
L( 17 pe 'oareci pe cale oral 2277 mg<kg"