METODE

MICROSCOPICE DE DIAGNOSTIC

Diagnosticul histopatologic;
Citodiagnosticul.

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC
Definiie : Este diagnosticul stabilit pe baza examinrii microscopice a seciunilor

histologice.
Se efectueaz pe produse recoltate prin:
1. BIOPSIE (recoltarea unor fragmente de esuturi / organe n timpul vieii);

a. Microbiopsia:
Puncia biopsie (pentru organele profunde: ficat, splin, rinichi, mduv osoas);
Chiuretajul (pentru mucoase: endometru, col uterin, cavitatea bucal sau leziuni superficiale: piele);
Endobiopsia (mucoasa gastric, rectal, laringian, bronic).
b. Biopsia chirurgical:
Incizional (n scop diagnostic);
Excizional (n scop diagnostic i terapeutic).
2. EXEREZ

CHIRURGICAL piese de exerez chirurgical.

3.PRELEVARE DE FRAGMENTE DE ESUTURI / ORGANE N TIMPULNECROPSIEI

prelevate necropsice.

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC

Endoscop

Endobiopsie colonic

Puncia biopsie hepatic

Produs de chiuretaj uterin

Hiperplazie endometrial

Viloziti coriale (placentare)

BILET DE TRIMITERE CTRE LABORATORUL DE ANATOMIE PATOLOGIC

Serviciul medical n care s-a efectuat recoltarea............

Nr. de nregistrare / Data...........

Ctre
Laboratorul de Anatomie Patologic,
Numele i prenumele bolnavului...............................................................
Vrsta................Profesia.................Domiciliul............................................
Diagnostic clinic..........................................................................................
Antecedente fiziologice i patologice.........Tratamente efectuate.............
Produsul de biopsie.............................Fixator............................................

Semntura i parafa medicului (care a efectuat recoltarea)

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC
Timpii de prelucrare a prelevatului tisular:

Recoltarea (indicaii):
leziuni ntinse biopsii multiple,
leziuni ulcerate recoltare din margine
Fixarea: formol 10% tamponat, lichid Carnoy, Bouin

Includerea la parafin
Secionarea blocurilor tisulare la microtom (3 5)
Colorarea seciunilor histologice.

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC

Tehnici de colorare:
Tehnici uzuale:
Hematoxilin-Eozin,
Tricromice (van Gieson, Simionescu, Masson);

Tehnici histochimice:

PAS (MPZ neutre, glicogen, membrane bazale, fungi);

Fontana/Grimelius (granule neurosecretorii);
Gordon-Sweets, Gomori (fibre de reticulin, membrane bazale);
Perls (hemosiderina Fe3+);
Fontana (melanina);
von Kossa (calciu);
Negru Sudan, Sudan 3, Scharlach (lipide neutre);
Rou Congo (amiloid);
Albastru Alcian (mucine acide).

Unitatea (Laboratorul de anatomie-patologic)...................................

Nr. de nregistrare.................................................................................
Data examinrii.....................................................................................
Buletinul de diagnostic anatomo-patologic

Numele i prenumele bolnavului.............................Vrsta...................

CNP ..............................Clinica (n care este internat pacientul)..........
Diagnostic clinic....................................................................................
Descriere detaliat a modificrilor constatate la ex. microscopic........
.........................................................................................................
Concluzii finale (diagnostic histopatologic)...........................................
Semntura i parafa medicului anatomo- patolog

CITODIAGNOSTICUL
Definiie:

Este diagnosticul stabilit pe baza examinrii microscopice a

modificrilor morfologice ale celulelor (izolate) coninute de diferite produse
biologice etalate pe lame (frotiu).

Avantaje:

Ofer un diagnostic rapid;

Este ieftin;
Puin traumatizant;
Uor de repetat;
Util n aciunile de screening.

CITODIAGNOSTICUL

Tehnici de recoltare a produselor patologice

1.

Exfoliere (sput, secreie prostatic, mamar, vaginal, cervical);

2.

Puncie-aspiraie din revrsate seroase (lichid pleural, peritoneal, articular),

coninut structuri chistice;

3.

Grataj/periaj (col uterin, tract respirator);

4.

Lavaj organe cavitare (ci respiratorii, vezic urinar);

5.

Amprentare (leziuni cutanate, ganglioni limfatici);

6.

Puncie aspiraie cu ac fin (tiroid, prostat, gland mamar, pancreas),

tumori solide profunde, mduv osoas.

BILET DE TRIMITERE CTRE LABORATORUL DE ANATOMIE-PATOLOGIC

Serviciul medical n care s-a efectuat recoltarea............

Nr. de nregistrare / Data...........
Ctre
Laboratorul de Anatomie Patologic/Citodiagnostic,
Numele i prenumele bolnavului...................................................................
Vrsta............CNP..................Profesia.................Domiciliul...........................
Diagnostic clinic..............................................................................................
Antecedente fiziologice i patologice.........Tratamente efectuate................
Felul produsului din care s-a efectuat frotiul..................Nr. de frotiuri.........
Semntura i parafa medicului
(care a efectuat recoltarea)

CITODIAGNOSTICUL
Timpii de execuie a frotiurilor
1. Etalarea
Direct: secreii naturale, puroi, produse obinute prin puncie-aspiraie din
organe solide, amprentare;
Dup centrifugare

5-10 minute, apoi etalarea sedimentului: lichide din

revrsatele seroase, structuri chistice, lavaje i urin.

2. Fixarea
Agitare n aer cteva secunde i uscare (pentru coloraia May-Grunwald-Giemsa);
Alcool 96% (pentru coloraia Papanicolau);

3. Colorarea
MGG - foarte simpl
Papanicolau - pentru citologia cervico-vaginal, bronic
Speciale pentru a evidenia lipidele, glicogenul, mucinele
Imunocitochimie

Frotiu de snge

MGG

Frotiu lavaj bronic

Frotiu inflamator

Frotiu tumoral

Frotiu cervical

Amprent tumoral ganglionar

Laboratorul care a efectuat citodiagnosticul..............

Nr. de nregistrare.......................................................
Data examinrii...........................................................

Buletin de citodiagnostic
Numele i prenumele pacientului ............................................. Vrsta............
CNP......................Clinica ...................... Medicul care a trimis .........................
Diagnostic clinic................................................................................................
Descrierea modificrilor constatate la examenul microscopic ........................
Concluzii (diagnostic sintetic) ..........................................................................
Recomandri .....................................................................................................
Semntura i parafa medicului citolog

Tehnici speciale de diagnostic

Imunohistochimia
Imunofluorescena pentru detectarea (prin marcare cu colorani fluoresceni)

autoanticorpilor, antigenelor, complexelor antigen-anticorp sau fraciunilor

complementului.

Imunoperoxidaza (prin metoda peroxidaz-antiperoxidaz sau/i complex Avidin-Biotin)

utilizeaz anticorpi monoclonali/policlonali pentru detectarea:

Originii celulelor neoplazice (diagnosticul diferenial ntre carcinom-sarcom-

limfom):
o
o
o
o
o

Citokeratin - carcinom;
Antigen comun leucocitar - limfom;
Mioglobin - rabdiomiosarcom;
Vimentin - tumori conjunctive;
Antigenul factor VIII-tumori vasculare.

Antigenelor oncofetale n tumori (-feto-proteina, antigenul carcinoembrionar);

Hormonilor /receptorilor hormonali;
Oncogenelor, genelor supresoare tumorale (p53);
Tiparea imunofenotipic a limfoamelor maligne.

Tehnici speciale de diagnostic

Histoenzimologia
detectarea enzimelor;

Microscopia electronic pentru diferenierea ntre:

Carcinom-melanom-sarcom;
Adenocarcinom-mezoteliom;
Timom-limfom-seminom;
Tumori cu celule mici, tumori cu celule fusiforme;
Tumori endocrine i non-endocrine;
Nefropatii glomerulare cu mecanism imun.

Tehnici de biologie molecular:

PCR (Polymerase Chain Reaction);
Citometria n flux pentru analiza ADN (ploidia);
Hibridizarea in situ pentru identificarea fragmentelor de ADN;
Analiza rearanjrii genelor.