Rezistena antiinfecioas nnscut (nespecific)

Prin imunitate sau rezisten natural, nnscut sau congenital se nelege capacitatea unui organism de a fi
rezistent fa de un agent infecios, n absena unui rspuns imun detectabil.
Starea de rezisten natural nu este condiionat de contactul anterior cu agentul patogen respectiv, ci este
consecina unei modaliti prompte de reacie a organismului. Ori de cte ori un agent patogen vine n contact cu un
organism neimunizat, iniierea procesului infecios este stopat, n primul rnd prin intrarea n aciune a mecanismelor
rezistenei constitutive, nespecifice, care nu necesit etapa de activare i sunt lipsite de specificitate.
Mecanismele rezistenei naturale sunt barierele mecanice (tegumentul i mucoasele); barierele chimice moleculare
antiinfecioase a cror sintez este amplificat n reacia inflamatorie (secreii, factori serici); componentele celulare
care au capacitatea de fagocitoz (fagocitele profesioniste i neprofesioniste) (fig. 1).

Fig. 1. Barierele mecanice, celulare i moleculare de a cror funcionalitate depinde aprarea nespecific a organismului
(dup Roitt, 1993).

Ulterior, dac barierele rezistenei nespecifice au fost depite, intr n aciune sistemul imunitar.
Strategia recunoaterii imune se bazeaz pe detectarea structurilor moleculare conservate ale agen ilor patogeni,
care lipsesc din structura chimic a gazdei, care constituie tabloul molecular asociat patogenilor (PAMP = pathogen
associated molecular patterns) = intele recunoaterii imune nnscute. Din categoria PAMP fac parte LPS, acizii
teichoici, peptidoglicanul, lipoproteinele generate prin palmitilarea cisteinei N-terminale ale unor proteine din peretele
celular bacterian, lipoarabinomananul. Beta-glucanii i mananii se gsesc n peretele celular fungic, dar nu sunt
sintetizai de organismul gazd. Aceste molecule au rolul de markeri moleculari i sunt recunoscui de sistemul
imunitar al gazdei.

Receptorii sistemului imunitar nnscut care recunosc PAMP formeaz tabloul receptorilor de recunoatere (PRR =
pattern recognition receptors).
PRR se divid n dou clase: receptori Toll-like (TLR); proteine cu funcie imunitar nespecific.
TLR sunt glicoproteine membranare integrate, de tip I. La om sunt cel puin 10 variante de TLR, ce recunosc
antigene virale, ADN viral bogat n CpG
Mucoasa gastric este protejat de gelul mucos care o tapeteaz.
Un alt mecanism nespecific care controleaz creterea microorganismelor la zona de contact cu mucoasa digestiv,
este peristaltismul intestinal, ce creaza un flux care deplaseaz microorganismele patogene, nainte ca ele s colonizeze
suprafaa epiteliului.
Hormonii au un rol esenial n rezistena nespecific fa de agenii patogeni. Un exemplu n acest sens este patologia
infecioas asociat cu diabetul. Bolnavii de diabet fac n mod frecvent infecii de tip tuberculos, infecii urinare i
tegumentare de tipul furunculozelor. Ele se datoreaz fie unor dezechilibre locale provocate de lipsa insulinei, fie
glicemiei crescute.
Hormonii tiroidieni influeneaz rezistena fa de infecii. Hipotiroidismul mrete incidena infeciilor.
Cortizolul are influen direct asupra limfocitelor. Hipofuncia cortexului glandelor suprarenale mrete rezistena
fa de agenii infecioi.
Moleculele de recunoatere secretate n circulaie, n special de hepatocite i mai puin de alte tipuri celulare
(fagocite) sunt proteine de faz acut. In funcie de compoziia chimic, se disting mai multe clase: colectine,
pentraxine, lipid-transferaze i proteine de recunoatere a peptidoglicanului.
Colectinele formeaz o familie de lectine plasmatice cu activitate opsonizant.
Proteina C reactiv i amiloidul seric A aparin familiei pentraxinelor. Ambele recunosc fosforil-colina i activeaz
calea clasic a C pentru c leag i activeaz C1q.

Serul normal de bovine conine o protein denumit conglutinin, care in vitro determin agregarea
(conglutinarea) eritrocitelor tapetate cu componente ale complementului.
Proteina care leag LPS (LBP) aparine familiei lipid-transferazelor.
Histatinele (peptide bogate n histidin) formeaz o familie mic de peptide bazice de 3-5 kDa, produse de celulele
acinare salivare i pancreatice. Ele inhib dezvoltarea celulelor de C. albicans, n forma infecioas sau neinfecioas.
Cistatinele sunt fosfoproteine ce conin cistein, secretate de celulele acinare. Au efect inhibitor asupra creterii
microorganismelor.
Capacitatea autosterilizant a umorilor este un factor decisiv al rezistenei nespecifice. In esuturi i n umori se
gsesc substane cu rol antibacterian: lizozimul, lactoferina etc.
Sisteme celulare cu rol n rezistena antiinfecioas nespecific

Rezistena antiinfecioas nnscut a organismului uman i animal este rezultatul aciunii unor sisteme
celulare cu aciune nespecific, independent de caracterul nonself al unei substane sau al unui agent
infecios. Funcia principal a sistemelor celulare cu aciune nespecific este fagocitoza*. Ele intr n aciune
dup ce agentul infecios a depit barierele mecanice protectoare ale organismului.
Fagocitoza este cel mai prompt mecanism de aprare i, n filogenie, deriv din funcia de nutriie a
protozoarelor i metazoarelor inferioare.
In 1970, fagocitele au fost mprite n dou categorii funcionale:
fagocite profesioniste, capabile s ingere particule strine tapetate cu Ig sau cu componente ale
complementului (C3). Ele au receptori pentru regiunea Fc a Ig i pentru C3. Grupul include fagocitele
mononucleare i polimorfonucleare;
fagocite neprofesioniste, cele care nu au astfel de receptori, funcia fagocitar fiind facultativ.
Aceast categorie include fibroblastele, celulele reticulare i celulele endoteliale.
Sistemul fagocitar mononuclear (SFM)

Fagocitele mononucleare se gsesc n toate esuturile, dar n condiii obinuite, proliferarea lor are loc
numai n mduva osoas.
Monoblastul este prima celul identificat, pe linia de difereniere a fagocitelor mononucleare. Are
receptori pentru regiunea Fc a Ig, fagociteaz i, in vitro, ader de suport. Monoblastul se divide o singur
dat n dou promonocite.

Promonocitul, localizat ca i monoblastul n mduva osoas, este o celul mai mare (15 m), citoplasma
este acidofil, bogat n poliribosomi. Granulaiile azurofile (culoare ro ie) conin mieloperoxidaz. Cele
dou celule rezultate din diviziunea unic a promonocitului sunt monocite.
Monocitul rmne n mduva osoas timp de 24 de ore de la difereniere, trece n snge i devine celul
circulant pentru alte 24-72 de ore. In condiii normale, celulele care circul la contactul cu endoteliul
capilar, migreaz spre diferite esuturi i caviti, unde devin macrofage rezidente sau migreaz spre un focar
de inflamaie:
- n plmn, monocitul se difereniaz direct n macrofagul alveolar, fr maturare n esutul interstiial;
- n sinusoidele ficatului, monocitul devine celul Kupffer;
- n cavitatea peritoneal, monocitul vine direct din capilare i devine macrofag al seroasei.
In condiii normale, puine macrofage rezidente se divid i rmn viabile 1-3 luni. Nu exist dovada c ele
recircul prin limf spre vasele sanguine. Probabil c mor n esuturi sau migreaz spre ganglionii limfatici.
In cazul unei infecii locale sau unui proces inflamator, factorii chimiotactici i ali mediatori ai inflamaiei
citochine i molecule icozanoidice stimuleaz monocitele s migreze spre situsul lezat, unde se difereniaz
n macrofagele exudatului.
Macrofagul

Datorit localizrii lor diverse i a condiiilor fiziologice locale foarte diferite (condiii cvasi-anaerobe
pentru cele peritoneale i o bun aerare pentru cele pulmonare), macrofagele sunt heterogene din punct de
vedere morfologic, dar au caracteristici structurale i funcionale comune:
sunt bogate n lizosomi (pentru digestia enzimatic a substanelor nonself);
membrana citoplasmatic formeaz prelungiri fine denumite voaluri hialoplasmatice, cu dimensiuni de
pn la jumtate din diametrul macrofagului. In microscopia scanning, suprafaa macrofagului se
aseamn cu petalele unui trandafir.
Datorit mobilitii membranei, macrofagul are dou proprieti importante:
ader de suportul solid
endociteaz (pinociteaz i fagociteaz).
Fagocitele sanguine au proprietatea de a migra din patul vascular, n esuturi, unde devin macrofage
rezidente, dar mobile n interiorul esutului.
Deplasarea tisular a macrofagului este ntmpltoare (neorientat de stimuli chimiotactici), i se numete
chimiochinez sau este orientat i se numete chimiotaxie. Deplasarea orientat este uurat de enzimele pe
care macrofagul le secret, active la pH tisular.
Receptorii membranari ai macrofagului

Macrofagul este o celul multifuncional, care primete o multitudine de semnale din mediul
extracelular, prin intermediul receptorilor membranari, capabili s recunoasc liganzi ai altor celule sau
liganzi moleculari solubili.
Fagocitele profesioniste (neutrofile i macrofage) leag antigenele de S. aureus ( acidul lipoteichoic
-LTA) prin intermediul receptorului membranar TLR-2* (Toll-like receptor-2).
Receptori pentru regiunea Fc a a IgG monomer, IgG agregat i IgG din complexele imune (Fc RI, Fc
RII, Fc RIII*). Aceti receptori constituie legtura crucial dintre celulele fagocitare efectoare i limfocitele
care secret imunoglobuline.
Receptorii pentru complement (CR1, CR3, CR4) leag fragmentele C3b, C4b, primul fiind foarte eficient ca
opsonin, dar mai puin eficient ca mediator al ingestiei.
Receptorii pentru limfokine leag mediatorii moleculari secretai de limfocitele activate: MIF, MAF, IFN.
Sub influena acestor mediatori, macrofagele devin foarte active n prezena celulelor nonself.

Receptorii membranari pentru lectine (glicoproteine) sunt foarte importani pentru recunoaterea
hematiilor mbtrnite, a celulelor strine, a fungilor, a bacteriilor, deoarece leag nespecific componentele
glucidice ale celulei nonself.
Receptorul de manoz (MR) cu rol important n fagocitoza levurilor i protozoarelor parazite.
Receptorii pentru fibronectin au rol n aderena monocitelor la zonele de
discontinuitate ale endoteliului vascular i n ingestia particulelor opsonizate cu
fibronectin.
Receptorii pentru proteinele care conin Fe, explic rolul macrofagului n metabolismul Fe.
Receptorii pentru hormoni: de exemplu, receptorul pentru insulin.
Receptorii pentru LPS.
Activarea macrofagului

Activarea macrofagului are loc n condiiile stimulrii antigenice i este un proces care decurge stadial:
recrutarea monocitului imatur din snge i diferenierea n celul capabil s reacioneze n prezena
limfokinelor;
dobndirea proprietii de citotoxicitate sub aciunea unor semnale secundare (cantiti mari de
limfokine, LPS etc.).
Limfocitele Th1 sunt principalele celule activatoare ale macrofagului, prin intermediul IFN.
Macrofagul activat prezint urmtoarele particulariti structurale i funcionale :
are dimensiuni mai mari, este mai mobil, voalurile membranare sunt mai evidente;
metabolismul oxidativ al glucozei este mult mai activ;
coninutul enzimatic lizosomal este crescut i crete secreia de proteaze;
crete rata procesului de endocitoz;
crete activitatea antibacterian i antitumoral;
crete sinteza de monokine: IL-1 i TNF.
Dac macrofagul este activat prin stimulare antigenic de durat sau nu reuete s elimine agenii
patogeni intracelulari, poate deveni refractar la stimularea ulterioar.
-

Endocitoza

Endocitoza const n nglobarea materialelor nonself particulate i solubile i este activitatea biologic a
macrofagului cea mai bine exprimat. In funcie de mecanismul aderenei particulei strine la suprafaa
celulei fagocitare se disting dou tipuri de endocitoz:
endocitoza nemediat de receptori, condiionat n principal de fore ionice. Astfel sunt ingerate prin
pinocitoz sau fagocitoz, moleculele de albumin, agregatele moleculare de albumin i de Ig n faza
solubil, particulele inerte (de latex, crbune, siliciu, azbest etc.);
endocitoza mediat de receptori (EMR) este un proces prin care macromoleculele i antigenele
particulate mici (virusuri) sunt nglobate dup asocierea lor cu un receptor membranar (receptori pentru
Fc, pentru manoz i pentru C3b i este activ n ingestia bacteriilor.
Opsoninele. Ingestia Ag este foarte ineficient ca mecanism de aprare, deoarece fagocitele nu recunosc epitopi
specifici ai antigenelor i patogenilor. Denumirea (opsein, grec = a aduce de mncare) semnific o categorie divers de
molecule care au rolul de a uura ingestia particulelor strine, funcionnd ca puni de legtur ntre fagocit i particula
nonself. Opsonina major termostabil este IgG, iar cea termolabil este reprezentat de proteinele complementului.
Cele mai importante opsonine sunt anticorpii specifici ai subclaselor IgG 1 i IgG3, deoarece se leag cu cea mai mare
afinitate de receptorii pentru Fc.
Componentele opsonizante ale complementului sunt C1q, C4b, C3b, iC3b (produsul de degradare al lui C3b).

Faza de ingestie este condiionat de mobilitatea receptorilor membranari ai fagocitului. Vacuola format
prin invaginarea membranei, se nchide asemenea unui fermoar.
Capacitatea unui fagocit de a ingera complexe imune (ingestie mediat de receptorii pentru Fc i C3b) se
numete imunofagocitoz.
Pinocitoza (pinos, grec = a bea) semnific ingestia macromoleculelor dispersate n faza lichid i are loc
prin intruzia membranei, dependent de clatrin.

Fagocitoza este procesul de ingestie a materialelor particulate, mai mari de 0,5 m, printr-un mecanism
dependent de actin i de obicei, independent de clatrin.
Capacitatea de endocitoz a macrofagului se materializeaz n urmtoarele funcii:
funcia citocateretic, adic de epurare sau de sechestrare a celulelor senescente (de exemplu, hematii).
Prin mbtrnire, hematiile i pierd acidul sialic din glicopropteinele membranare i expun componente
care sunt recunoscute de macrofag. In focarul inflamator, macrofagele cur terenul de celulele moarte
i asigur vindecarea leziunilor inflamatorii;
funcia antixenic (clearance), adic de ndeprtare a materialelor strine, prin fagocitoz;
funcia imunitar, const n participarea macrofagului la elaborarea rspunsului imun, prin prelucrarea
Ag i cooperarea cu limfocitele.
Dup ingestia unei bacterii sau a unei particule inerte, exist urmtoarele posibiliti de evoluie:
digestiacelulele bacteriene, inclusiv cele patogene, sunt degradate de enzimele lizosomale, active la pH
acid. Fagosomii formai pe calea endocitar iniiat de fagocitoza particulelor mari, pot fuziona cu
lizosomii i devin fagolizosomi
persistena particulelor inerte (pulberi de azbest, siliciu, crbune) sau bacteriei (ex. Mycobacterium
tuberculosis, L. monocytogenes) n fagocit;
multiplicarea n celula fagocitar (bacteriile intracelulare);
liza fagocitului i pstrarea viabilitii celulei bacteriene.
-

Bacteriile cu localizare intracelular au elaborat diferite strategii pentru supravieuire:

invazia fagocitelor neprofesioniste
localizarea n compartimente citoplasmatice bine delimitate
interferena cu reactivii intermediari ai reducerii O 2
inhibiia fuziunii fagosom-lizosom
rezistena la enzimele lizosomale
interferena cu maturarea fagosomilor prin inhibiia acidificrii.

Funciile efectoare ale macrofagului se realizeaz prin urmtoarele mecanisme:

producerea intermediarilor reactivi ai O 2 i ai N2
limitarea disponibilitii Fe
acidifierea fagosomului prin fuziunea fagosom-lizosom
producerea defensinelor, polipeptide bazice alctuite din 29-34 aminoacizi, abundente n neutrofile i n unele fagocite
-

mononucleare, cu activitate microbicid i pot juca rol n aprarea fa de bacteriile intracelulare

Alte funcii ale macrofagului

Macrofagul este o celul care exercit efecte citotoxice asupra celulelor care poart pe suprafaa lor molecule
nonself(celule tumorale). Citotoxicitatea fa de celulele maligne se produce prin cteva mecanisme distincte:
citotoxicitatea natural, nespecific, se exprim la un nivel mai sczut. Efectul s-a demonstrat in vitro, prin
contactul macrofagelor cu celule alogenice i se intensific dup stimularea nespecific a macrofagelor cu diferii
factori chimici sau biologici;
citotoxicitatea mediat de limfochinele (MAF) secretate de limfocitele stimulate. MAF se leag att pe celulele
int (tumorale) ct i pe macrofag;
citotoxicitatea dependent de anticorpi (ADCC), mediat de moleculele de imunoglobulin fixate pe celula int.
- Funcia secretorie a macrofagului
produi enzimatici. Sunt enzime lizosomale active la pH acid, din categoria hidrolazelor: colagenaza i elastaza
hidrolizeaz colagenul i elastina, dar i imunoglobulinele, fibronectina, fibrinogenul. Macrofagele secret
proteina activatoare a plaminogenului la plasmin. Plasmina lizeaz fibrina din cheagul sanguin care se formeaz
la periferia focarului de inflamaie i uureaz diseminarea agentului patogen. In focarul inflamator, macrofagul
activat secret arginaza. Epuizarea argininei produce inhibiia creterii tumorale;
produi de secreie cu rol n reaciile de aprare. Macrofagul sintetizeaz i secret lizozim (spre deosebire de
granulocite care conin lizozim dar nu-l sintetizeaz, iar limfocitele nici nu conin i nici nu-l sintetizeaz). n
procesul infecios viral, macrofagul sintetizeaz interferon;

proteine plasmatice. 2-macroglobulina inhib activitatea enzimelor proteolitice i astfel moduleaz efectele
litice ale enzimelor lizosomale;
- proteine ale cascadei de coagulare sanguin (tromboplastina);
proteine structurale (fibronectina, intr n alctuirea membranei bazale);
compui cu efect reglator asupra altor celule: lipide bioactive (prostaglandine), factori reglatori ai rspunsului
imun (IL-1);
factorul stimulator al angiogenezei n focarul inflamator;
Funcii metabolice ale macrofagului. Macrofagul intervine n metabolismul urmtoarelor categorii de substane:
metabolismul Fe. Hematiile sunt distruse de macrofagele splenice, n momentul n care rezerva lor de ATP s-a
epuizat. Macrofagul preia Fe din hemoglobin i l cedeaz transferinei, care l transport la mduva osoas.
Transferina este sintetizat de macrofag:
metabolismul lipidelor. Macrofagul capteaz lipidele plasmatice i le degradeaz sub aciunea lipazelor proprii.
Inglobarea LDL (low density lipoproteins) de ctre macrofag este procesul central al aterogenezei. macrofagele
sintetizeaz colesterolul, unele substane carotenoide;
sintetizeaz un factor stimulator al diviziunii fibroblastelor i al biosintezei de colagen de ctre fibroblaste.
Activitile mitotic i de biosintez ale fibroblastelor sunt foarte importante n procesul reparator tisular
(vindecarea leziunii), ntr-un proces inflamator. Macrofagul particip n mod direct la vindecarea leziunii, prin
nglobarea i distrugerea resturilor tisulare moarte, a bacteriilor i a leucocitelor nefuncionale.
-

Sistemul fagocitar polimorfonuclear

Polimorfonuclearele (PMN) sau granulocitele sunt celule fagocitare profesioniste de tip microfag, din sngele
circulant, care constituie proporia majoritar (65-70%) a leucocitelor circulante. Numrul total al leucocitelor in
sngele periferic este de 5-8 x 103 celule/ mm3.
PMN se gsesc la toate organismele cu sistem circulator i au rol n eliminarea microorganismelor patogene cu
localizare extracelular. Funcia lor se suprapune parial cu a sistemului fagocitar mononuclear. SFM controleaz
microorganismele parazite cu localizare intracelular, fa de care PMN sunt ineficiente.
Dup caracterele tinctoriale ale granulaiilor se disting: PMN neutrofile (PMNN), eozinofile (PMNE) i bazofile
(PMNB).
PMN sunt adevrate sisteme celulare de asalt n procesele de aprare antiinfecioas. Durata vieii este scurt
(cteva zeci de ore), dar numrul lor n sngele circulant este relativ constant, ceea ce denot c producerea este
reglat de necesitile organismului. La om se distrug 5 miliarde de leucocite i 10 miliarde hematii ntr-o or.
Diferenierea neutrofilelor
Circa 3/4 din celulele nucleate ale mduvei osoase sunt destinate producerii de leucocite, iar dintre acestea, 2/3
sunt PMNN.
Neutrofilele (12-15 m) se difereniaz din celule precursoare din mduva osoas n circa dou sptmni. In
prima jumtate a intervalului, celulele precursoare se divid de 6 ori si se difereniaz, de la stadiul de mieloblast,
trecnd prin promielocit, la mielocitul neutrofil.
Mieloblastul este primul precursor recunoscut al seriei neutrofilului, cu sau fr coninut granular. Este de dou ori
mai mare dect neutrofilul matur.
Promielocitul este de 2,5 ori mai mare dect neutrofilul matur. Este cea mai mare celul din seria de maturare a
neutrofilului. Din suprafaa concav a cisternelor Golgi se matureaz granulaiile primare azurofile. Se numesc
azurofile deoarece se coloreaz albastru cu colorantul Wright i primare, deoarece sunt primele care apar n timpul
maturrii neutrofilelor. Odat cu diviziunea promielocitului, producerea granulelor nceteaz i granulele se distribuie
n citoplasma celulelor fiice.
Granulaiile primare (azurofile, descrise de Bainton) conin mieloperoxidaz, hidrolaze acide degradative (proteaze,
fosfataze, nucleotidaze) i substane cu aciune bactericid (lizozim, lactoferin).
Mielocitul rezult din diviziunea promielocitului. Are aceleai dimensiuni ca i mieloblastul. In mielocit apar
granulaiile specifice sau secundare. Se numesc granulaii specifice, deoarece se gsesc numai n neutrofile i sunt
secundare deoarece apar dup cele primare.
Granulaiile secundare (specifice ale lui Bainton) sunt mai mici, mai puin electrono-dense i conin fosfataz
alcalin i lizozim. Nu conin peroxidaz.
Mielocitul se matureaz i rezult neutrofilul, fr diviziune celular. In neutrofilul uman matur, raportul granulaiilor
primare/specifice este de .

In celula matur, adiacente membranei plasmatice se gsesc microfilamente (actina i miozina), ce genereaz forele
contractile necesare locomoiei. Neutrofilul segmentat nu se divide. Cromatina este condensat, iar nucleolul lipsete.
Lobulaiile caracteristice ale nucleului nu se coreleaz cu vrsta celulei.
La sfritul perioadei de maturare a neutrofilului, scade sarcina negativ de suprafa i crete gradul de
deformabilitate a membranei. Dup maturarea celular, un mare numr de neutrofile se depoziteaz n mduva osoas.
Aici se gsesc circa 90% din neutrofile. Pentru fiecare neutrofil circulant, n mduva osoas se gsesc 50 - 100
neutrofile de rezerv, care, sub aciunea stimulilor inflamatori, trec n circulaie. Din mduv, neutrofilul migreaz n
lumenul capilar, printre celulele endoteliale. Neutrofilul prezint adaptri speciale care-i permit trecerea din mduva
osoas n circulaie i diapedeza din vasul sanguin n esut: sub aciunea metaloproteazelor, creeaz spaii de circa 1 m
printre celulele endoteliale fr s le perturbe permeabilitatea. Datorit nucleului lobat, neutrofilul este foarte flexibil i
prin modificrile citoscheletului, trece prin aceste spaii.
In torentul sanguin, circa jumtate dintre neutrofile circul n zona axial a venulelor postcapilare, iar restul n zona
marginal. Cele marginale prsesc repede torentul sanguin sub aciunea epinefrinei eliberat de exerciiul fizic sau
injectat intravenos. In condiii obinuite, neutrofilele circul 6-10 ore, apoi trec n esuturi, unde rman active 2-6 zile.
Nu se cunoate situl i nici mecanismul apoptozei lor.
Chimiotaxia neutrofilelor este stimulat de C5a, de tripeptidul formil-Met-Leu-Phe, de IL-8, de endotoxine i de
leucotriena B4. Toi aceti factori stimuleaz expresia moleculelor de aderen: ICAM-1, VCAM-1, selectina E.
Creterea numrului de PMNN circulante este frecvent n infeciile cu localizare periferic. Creterea este
rezultatul, att al unei descrcri din depozite, ct i al hiperfunciei medulare. Hiperfuncia medular se manifest
prin creterea numrului de celule tinere (nesegmentate) n snge.
Arneth a stabilit proporia procentual a neutrofilelor n funcie de numrul segmentelor nucleare. Dup numrul
segmentelor nucleare, PMNN se mpart n 5 categorii:
1(nesegm)
5%
21%

2 (2 segm)
35%
65%

3 (3 segm)
41%
14%

4 (4 segm)
17%
0%

5 (5 segm)
2% (distribuie normal)
0% (apendicit)

Formula deviaz spre stnga, cu predominana celulelor tinere, ca semn al unei descrcri mai rapide i al
hiperfunciei medulare.
In bolile parazitare (cu protozoare i viermi intestinali), n boli de piele, afeciuni alergice, leucocitoza este nsoit
de eozinofilie. Leucocitoza poate fi rezultatul unor maligniti hematologice (leucemii), cazuri n care predomin
elementele tinere ale seriei afectate de transformarea malign.
Scderea numrului de leucocite (leucopenie) caracterizeaz infecia gripal, febra tifoid, infeciile grave, n care
forele de aprare ale organismului au fost paralizate. In cazurile extreme de leucopenie (agranulocitoz), numrul
PMNN scade pn la 200/ml, datorit epuizrii potenialului productor al mduvei osoase. Sensibilitatea la infecii
este foarte mare.
Neutrofilele sunt efectoare ale rspunsului imun nnscut, dar sunt conectate cu funcia imunitar adaptativ,
deoarece au rol n eliminarea complexelor Ag-Ac, prin intermediul receptorului pentru Fc i pentru complement.
Eozinofilele
Eozinofilele sunt leucocite ale liniei mieloide, care se recunosc pe preparatele colorate May Grunwald-Giemsa
prin nucleii bilobai i prin prezena granulelor mari cu afinitate pentru eozin (colorant acid). Sunt prezente la toate
vertebratele, cu excepia ciclostomilor. La om, eozinofilele sunt n numr de 100-70/L, dar numrul lor crete mult n
anumite stri patologice: alergii, astmul alergic, parazitoze, inflamaia cronic a diferitelor esuturi, n special n
esutul neoplazic, n cazul adugrii L-Trp ca supliment alimentar sau la pacienii SIDA.
Din punct de vedere morfologic, granulele citoplasmatice sunt de 3 tipuri:
- granulele mari, specifice eozinofilelor, au o regiune central electronodens, cristaloid;
- granule primare fr cristaloid. Se numesc primare pentru c se dezvolt timpuriu n cursul diferenierii;
- granule mai mici, cu aril-sulfataz i alte enzime.
Granulele citoplasmatice mari sunt formate din regiunea central cristalin, n care se gsete proteina cationic
specific a eozinofilelor - proteina bazic major (MBP). In matricea adiacent cristaloidului se gsete o protein
cationic nrudit cu MBP (proteina cationic a eozinofilelor =ECP), eozinofil-peroxidaza (EPO), neurotoxina
(neurotoxina derivat din eozinofile = EDN), elastaza, colagenaza, aril-sulfataza B, -glucuronidaza, histaminaza,
fosfataze, fosfolipaze, catalaza, esteraze nespecifice, proteoglicani. Primele 3 sunt toxine puternice pentru helmini i
sunt mediatori ai alergiilor: astmul alergic, dermatita atopic, rinita alergic. Neurotoxina (EDN) este o protein

cationic din granulele eozinofilelor din familia ribonucleazelor. Nu are activitate antibacterian, dar in vitro s-a
evideniat activitatea sa antiviral (4).
Formarea granulelor ncepe n stadiul de mieloblast i continu n stadiul de mielocit. Segmentarea nucleului ncepe
cu indentarea n stadiul de mielocit i este definitiv n stadiul de eozinofil matur n mduva osoas. Eozinofilele nu se
difereniaz la animalele private de limfocitele T prin timectomie neonatal i este redus sever la pacienii cu deficit
major al limfocitelor T (pacienii SIDA).
Funcia celulelor T const n eliberarea IL-3, GM-CSF i IL-5, cu rol de hematopoetine. Se pare c diferenierea
eozinofilelor necesit aciunea succesiv a celor trei factori.
In membrana eozinofilelor se gsesc receptori pentru C3a/C5a, C3b, iC3b, Fc, Fc, IL-3, IL-5, TNF i pentru alte
citokine. Stimularea eozinofilelor prin receptorii membranari induce eliberarea coninutului granulelor, intensificarea
brusc a respiraiei celulare, eliberarea ROI i a metaboliilor lipidici cu activitate biologic (leucotriene).
Proteina bazic major (MBP) activeaz plachetele, bazofilele i mastocitele, cu eliberarea histaminei. EPO este
diferit de MPO din neutrofile i macrofag: este format din dou subuniti i catalizeaz formarea acidului
hipobromos din H2O2 i Br.
Eozinofilele conin corpi lipidici, fr membran delimitant: sunt incluzii de glicogen i lipidice, care se gsesc n
mastocite i macrofage. Din lipide se sintetizeaz mediatorii icozanoidici.
Eozinofilul matur, dup ce a prsit mduva osoas, rmne n sngele periferic circa 13 ore. Dup acest interval,
eozinofilul ader de selectinele E i trece n esuturi.
Eozinofilele fagociteaz complexe imune i microorganisme (E. coli, C. albicans, Tripanosoma cruzzi), dar
capacitatea de endocitoz este mai mic dect a neutrofilelor. Un rol funcional deosebit l are capacitatea lor de a
elibera substanele toxice din granule, la contactul cu suprafee care nu pot fi fagocitate. Prin mecanismul exocitozei,
eozinofilele sunt efectori eseniali ai aprrii fa de paraziii helmini. Unele dovezi sugereaz c eozinofilele infiltrate
n masa tumorii lizeaz celulele neoplazice i infiltratul crete perioada de supravieuire a pacienilor cu anumite tipuri
de neoplazii. Eliberarea substanelor toxice are efecte lezionale asupra esuturilor adiacente situsului inflamator,
deoarece proteinele cationice sunt foarte toxice pentru celule in vitro i probabil efectul este acelai in vivo.
Descuamarea epiteliului traheal la pacienii cu astm este produs de proteinele eliberate din eozinofile i de radicalii
intermediari ai reducerii O2.
Lecotrienele induc contracia muschilor netezi i sunt factorii determinani ai exudrii vasculare: eliberarea
mediatorilor din eozinofile are ca efect constricia cilor aeriene la pacienii astmatici i acumularea lichidului i a
celulelor inflamatorii n esuturi.
Sisteme bactericide active n PMNN

n circulaie, neutrofilele sunt celule n repaus, dar se activeaz sub aciunea a numeroi factori i sunt efectorii unei
varieti largi de reacii inflamatorii. Neutrofilele inger i lizeaz o varietate larg de bacterii, fungi, micoplasme i
probabil, virusuri, dup opsonizarea agenilor infecioi cu anticorpi specifici i/cu C, deoarece au receptori pentru Fc a
IgG pentru C3b i iC3b.
Neutrofilul activat ader de celulele endoteliale, migreaz prin bariera endotelial, inger i ncearc s distrug
agentul ingerat. Dup ingestia unui microorganism, granulaiile neutrofilului fuzioneaz cu fagosomul i ntr-un
interval de ordinul secundelor, elibereaz coninutul enzimatic .
In neutrofil se activeaz sistemele moleculare care omoar celula ingerat. In PMNN funcioneaz dou sisteme
bactericide: unul independent de O2 i altul dependent de O2.
Sistemul bactericid independent de O2 cuprinde o gam larg de activiti enzimatice: hidrolaze acide, proteaze
neutre, lizozim, lactoferina= o glicoprotein chelatoare a Fe.
Granulaiile azurofile ale neutrofilelor se aseamn cu lizosomii, deoarece conin hidrolaze active la pH acid,
proteine bazice (cationice), bogate n lizin, cu activitate bactericid, denumite generic fagocitine, MPO i un numr
mare de serin-proteaze, la care se adaug defensinele i proteine bactericide care produc creterea permeabilittii
membranei bacteriilor Gram negative.
Granulaiile specifice fuzioneaz foarte repede cu vacuola de fagocitoz, n timp ce aceasta este nc deschis n
spaiul extracelular. Din aceast cauz, peste 90% din coninutul lor se vars n mediul extracelular. Granulaiile
primare fuzioneaz mai trziu cu fagolizosomul. De aceea, circa 1/2 din coninutul lor se pierde, iar restul rmne n
fagolizosom.

Sistemul bactericid dependent de O2 -oxidarea moleculelor int. Imediat dup ingestia unei bacterii, n
neutrofil se produce o intensificare brusc a respiraiei, o adevrat explozie a metabolismului oxidativ.

O mare parte a O2 este convertit la intermediarii reactivi ai reducerii sale, care sunt toxici pentru organismul
ingerat, dar i pentru intele extracelulare. Sursa reductoare pentru producerea intermediarilor reducerii O2
n explozia metabolic independent de mitocondrii, pare a fi o oxidaz* complex cu FAD (NADPHoxidaza), legat de membrana PMNN.
.

Prin reducerea parial a O 2, rezult intermediarii reactivi. Dup ce molecula de O2 accept un singur electron
se formeaz anionul superoxid (O2-) (forma ionizat) sau radicalul perhidroxi (HO2.).
Cei doi radicali ai O 2, HO2. i O2- interacioneaz ntr-o reacie de dismutaie, n care unul se reduce iar cellalt se
oxideaz i rezult O2 i H2O2,
La pH alcalin predomin O2-. Dismutaia este catalizat de SOD.
O2- i H2O2 sunt bactericide.
Intr-o reacie catalizat de mieloperozidaz (MPO) eliberat din fagolizosom, H 2O2 reacioneaz cu Cl- i formeaz
HOCl (acidul hipocloros). Efectul bactericid oxidativ este atribuit O 2-, oxigenului singlet (1O2), H2O2, OH. i HOCl.
1
O2 se formeaz dup ce molecula de O2 absoarbe energie..
HOCl este oxidantul puternic, foarte toxic pentru microorganisme. HOCl poate reaciona cu diferii compui azotai
pentru a forma monocloramine i dicloramine.
Sistemul MPO poate fi eliberat la exteriorul celulei i s devin toxic pentru microorganismele adiacente (bacterii,
fungi, protozoare), pentru virusuri, pentru helmini, pentru celulele normale i maligne.
Nitric-oxid sintaza inductibil reprezint al II-lea sistem de generare a radicalilor liberi n macrofage. Oxidul nitric
(NO) rezult prin aciunea nitric-oxid sintazei, dependent de dezaminarea L-argininei. NO are efecte citotoxice
semnificative asupra unui spectru larg de ageni patogeni facultativi i obligat intracelulari: M. tuberculosis,
Plasmodium, Leishmania, C. neoformans, T. gondii, M. leprae, Chlamydia trachomatis etc.
Sistemul complement

Sistemul complement este un set de proteine i glicoproteine plasmatice, care reprezint circa 10% din
globulinele serului normal uman i al vertebratelor, cu rol esenial n aprarea organismului. Majoritatea
componentelor sale sunt proteine cu aciune enzimatic (proteaze). Ele nu sunt imunoglobuline i
concentraia lor plasmatic nu se modific dup imunizare.
Proteinele complementului C se gsesc n plasma tuturor vertebratelor, acioneaz nespecific i
completeaz efectele imunitare specifice ale anticorpilor.
Se cunosc 11 proteine ale cii clasice, 3 proteine suplimentare ale cii alterne i 6 proteine cu efect
reglator (inhibitorii). Componentele cii clasice sunt numerotate cu cifre arabe, n ordinea descoperirii lor,
de la 1 la 9 i se activeaz n secvena 1, 4, 2, 3, 5 9. Majoritatea lor sunt -globuline (-1, -2).
Proteinele complementului sunt alctuite din 1-2 catene peptidice, reunite prin puni S-S, cu excepia lui
C4, care are 3 catene, iar C1q are o structur particular unic.
Unele componente ale cii alterne sunt notate cu litere mari: B, P, D.
Fragmentele peptidice derivate din proteoliz sunt notate cu sufixele a, b (de exemplu, C3a, C3b) etc.
Fragmentele b sunt mai mari i se combin direct cu o int membranar, iar fragmentele a sunt mai mici, se
elibereaz n soluie i stimuleaz rspunsul inflamator. Starea activat a factorilor C se marcheaz cu o bar.
Mecanismul general de activare a sistemului complement

Proteinele componente ale C se activeaz n dou cascade enzimatice legate ntre ele, denumite calea
clasic i calea alternativ. Cele dou ci se intersecteaz ntr-un punct, clivajul lui C3, evenimentul cheie al
activrii sistemului C.
Fiecare component activat este o proteaz nalt specializat, care la rndul ei cliveaz un fragment
peptidic al unui precursor plasmatic. Consecutiv clivrii, rezult un fragment principal (b), care expune un
situs de legare la membran i un fragment mic (a). Fragmentul mare se leag pe membran i la rndul su
devine enzima activ urmtoare a secvenei de reacie. Excepia este C2, unde C2a este fragmentul mare cu
activitate enzimatic.

Cascada de fixare a C se amplific n fiecare etap, deoarece fiecare enzim poate activa numeroase
molecule ale reaciei urmtoare a secvenei. Ca mecanism general de aciune, activarea C este analog
cascadei de coagulare i de fibrinoliz. Principala diferen const n faptul c sistemul C este legat de
membrane sau de complexe imune i n condiii fiziologice acioneaz local.
In calea clasic, complexul proteic C1 se leag de complexele Ag-Ac i devine o proteaz activ, ce
cliveaz i activeaz C4 i C2. Se formeaz o enzim complex - C3-convertaza, care scindeaz specific C3.
Calea alternativ nu necesit prezena anticorpilor pentru activarea complementului. Unele componente
chimice, n special cele din peretele bacterian i fungic, nveliul unor parazii, peplosul viral, activeaz un
alt set de proteine serice, care la rndul lor cliveaz C3.
Efectele finale ale activrii sunt comune pentru ambele ci.
Calea clasic de activare a complementului

La om i oarece, C este fixat de IgM i IgG. La om IgG1 i IgG3 sunt eficiente.

Secvena evenimentelor fixrii complementului cuprinde urmtoarele etape: a) recunoaterea; b) activarea
enzimatic; c) atacul membranar.
Unitatea de recunoatere a sistemului C este complexul C1, alctuit din 3 proteine: C1q, C1r i C1s,
asociate lax, necovalent, ntr-un complex cu Ca2+.
C1q este o protein de 400 kDa, format din 18 catene polipeptidice, reunite n 3 subuniti de cte 6
lanuri fiecare. Fiecare subunitate C1q este format din dou helice triple (Fig. 2), n form de Y, reunite la
un capt printr-o structur n form de tij, iar la captul opus se termin printr-o conformaie globular,
nehelical. Primii 80 de aminoacizi care formeaz helicea fiecrui triplu helix (peduncul) conin numeroase
secvene de tipul Gly-Pro-Ileu-hidroxilizin, foarte asemntoare cu a fibrilelor de colagen. Radiar se
proiecteaz 6 domenii globulare ce conin secvene ce se leag la regiunea Fc a Ig din complexul Ag-Ac.

Fig. 2. Structura lui C1q. Cele 18 catene polipeptidice sunt reunite n 3 subuniti de cte 6 catene fiecare. Fiecare subunitate
este format din 2 helice triple, legate n forma literei Y la o extremitate, iar la cealalt se termin printr-un cap globular.
Receptorii pentru fixarea complexului imunoglobulinic sunt situai la extremitile globulare.

Molecula de Ig expune situsul de legare pentru C1q, numai dac este legat de complexele Ag-Ac. C1q
interacioneaz prin domeniul su globular cu domeniul C2 al IgG i respectiv cu domeniul C3 al IgM din
complexele imune. Molecula de IgG conine un singur situs de activare a C, astfel c legarea C1q este
realizat numai cnd 2 molecule de IgG se gsesc la 30-40 nm una de alta pe suprafaa unei inte antigenice
sau ntr-un complex Ag-Ac, care furnizeaz 2 situsuri de legare pentru C1q (fig. 3). C1q nu are activitate
proteazic.

Fig. 3. Fixarea lui C1qrs. O pereche de molecule de IgG este fixat la un antigen proteic cu epitopi repetitivi, din membrana
celulei. C1 se fixeaz la regiunea CH2 a IgG. Activarea lui C1r i C1s are loc prin clivarea intern (reprezentat aici de
modificarea orientrii lor fa de C1q).

In prezena Ca2+, C1q se asociaz cu 2 catene C1r i cu 2 catene C1s (83 kDa fiecare). C1r i C1s sunt
monocatenare, fiecare avnd 2 domenii:
- unul se asociaz cu C1q
- cellalt are activitate proteazic, dup clivarea unui fragment.
Pentru schimbarea conformaional a lui C1, cel puin 2 domenii globulare C1q trebuie legate simultan.
Legarea lui C1q de situsul de legare pe molecula de IgM sau IgG, induce autoclivarea C1r i conversia n
serin-proteaz*. Fragmentul C1r activat poate cliva i activa cealalt protein C1r. Ambele pot aciona
proteolitic asupra proteinelor C1s i genereaz serin-proteazele C1s asemntoare.
C1s are dou substraturi: C4 i C2.
Activarea lui C1 se face dup reacia global: EA + C1 + Ca2+ EAC1 (EAC1qrs).
Sistemul de activare enzimatic

C1s are activitate esterazic i activeaz componenta C4 (fig.4).

C4 este activat de enzima C1s ce cliveaz fragmentul amino-terminal C4a, din lanul . C4a este o
anafilatoxin mediatoare a inflamaiei..
Reacia global a activrii lui C4: EAC1 + C4 ------- EAC14b + C4a
In prezena ionilor de Mg2+, C4b din complexul EAC14b leag C2, pe care C1s l cliveaz n dou
fragmente: cel mare, C2b, de 70 kDa rmne legat pe C4b i formeaz complexul C4b2b, denumit
convertaza lui C3.

Fig. 4. Formarea complexului C4b2b (convertaza lui C3 n calea clasic). C1s cliveaz C4 i elibereaz fragmentul C4a.
Fragmentul C4b se fixeaz pe membrana adiacent, prin intermediul punii tioesterice care se expune. C2 seric se leag de C4b n
prezena Mg2+ i este clivat de C1s, elibernd C2a i formnd C42b (convertaza lui C3 pe calea clasic).

C2b din complexul EAC14b2b este relativ instabil (timpul de njumtire, 10 min., la 37 o) i se disociaz
ca fragment inactiv, dar restul complexului EAC14b leag i cliveaz o alt molecul de C2 i reface
complexul EAC14b2b. Reacia global a activrii lui C2 este:
EAC14b + C2 EAC14b2b + C2a

Clivarea lui C3 este evenimentul central al fixrii C, pe calea clasic sau altern. C3 const din dou
catene polipeptidice: , (fig. 5).

C4b2b (convertaza lui C3), dintr-un situs membranar adiacent sau din complexul C1qrs4b2b detaeaz un
peptid de 77 aminoacizi (C3a), de la captul N-terminal al lui C3 i relev un situs de legtur tioesteric pe
fragmentul mare C3b.

Fig. 5. Aciunea convertazei C4b2b asupra lui C3. Complexul C4b2b cliveaz anafilatoxina C3a de la extremitatea Nterminal al peptidului al lui C3. Anafilatoxinele au activitate chimiotactic pentru PMN, dar C3a are activitate chimiotactic
slab. C3 clivat expune o punte tioesteric intern i determin legarea moleculelor de C4b2b. Unele molecule de C3b se leag
chiar la complexul C4b2b i formeaz C4b2b3b - convertaza lui C5 n calea clasic.

Peptidul de 9 kDa este anafilatoxina C3a, iar C3b este principala opsonin a serului.
Fiecare unitate C1qrs4b2b cliveaz sute de molecule C3, deoarece C3 are o concentraie plasmatic
ridicat. Majoritatea moleculelor de C3b rmn n plasm i au rol opsonizant. Receptorii pentru C3b se
gsesc pe toate celulele fagocitare (neutrofile, macrofage, eozinofile), dar i pe eritrocite i pe celulele
epiteliului glomerulului renal.
O parte a moleculelor C3b se leag la complexul C4b2b de la situsul membranar i formeaz urmtoarea
unitate catalitic, C4b2b3b convertaza lui C5.
C3b cliveaz C5 i rezult un peptid de 9 kDa, adic C5a, din lanul al lui C5, iar restul este C5b.
Reaciile urmtoare ale cii au ca rezultat formarea complexelor moleculare progresiv mai mari, fr
ruperea legturilor peptidice.
Activarea complexului de atac al membranei (CAM) (fig. 6, 7). Secvena terminal a activrii C implic
C5b, C6 -C9, care interacioneaz secvenial pentru a forma o structur macromolecular denumit CAM.
Acest complex disloc fosfolipidele membranare, formnd un canal membranar care perturb funcia
membranei celulei int, deoarece permite difuzia liber a ionilor i a moleculelor mici.
C5b se fixeaz pe membrana suport activatoare (fig. 6) i iniiaz formarea CAM. C5b liber este instabil
(se inactiveaz n 2 min.) i se agreg. Stabilitatea este conferit de complexarea cu C6. Complexul C5b6
este hidrofil. Pn n acest punct, toate reaciile C au loc pe suprafaa hidrofil a membranei sau pe
complexele imune n faza fluid.
Fig. 6. Fixarea lui C5.
C4b2b3b detaeaz fragmentul C5a
(un peptid de 15kDa), din catena a
lui C5. Se formeaz fragmentul
principal C5b, care expune un situs
de legare la membran. Fixarea lui
C5 iniiaz activarea celorlalte
componente care duc la formarea
complexului de atac membranar
(CAM).

In prezena lui C7 se formeaz complexul C5b67, cu proprieti amfifile: este hidrofob pentru c expune
grupri nepolare i nu formeaz legturi de H cu moleculele de ap, dar are i grupri hidrofile, care sunt
situsuri de legare cu fosfolipidele membranei. Situsurile hidrofobe permit inseria C5b67 n dublul strat
fosfolipidic al membranei celulei int. Existena simultan a gruprilor hidrofobe i hidrofile n acelai
complex poate explica tendina sa de polimerizare. In soluie, C5b67 este instabil (timpul de njumtire
este 0,1 secunde), dar se stabilizeaz prin inseria n dublul strat lipidic membranar i are proprieti de
detergent.

La complexul C5b67 se polimerizeaz C8. C8 sufer o tranziie structural hidrofil-amfifil i expune o

regiune hidrofob care interacioneaz cu membrana plasmatic. Complexul C5b678 creeaz un por cu
diametrul de 10 Ao. Formarea porului este suficient pentru liza hematiei, dar nu i a celulei eucariote.
Treapta final a formrii MAC este legarea i polimerizarea lui C9, o molecul asemntoare perforinei, la
complexul C5b678. Un singur complex C5b678 polimerizeaz 10-17 molecule de C9. C9 sufer tranziie
hidrofil-amfifil, astfel c ele se inser n membran i formeaz un canal transmembranar cilindric, vizibil
la microscopul electronic prin tehnica criofracturrii, n membrana hematiilor. Moleculele de C9 sunt
eseniale pentru distrugerea celulei.
Canalul penetreaz stratul lipidic al membranei, pe direcie perpendicular i permite intrarea rapid a
cationilor (Ca2+, Na+) i a apei. Hematiile se umfl i se sparg, iar celulele nucleate devin permeabile,
pierznd iniial moleculele mici (K+) i apoi pe cele mari (nucleotide, proteine). Coloranii ionici, care sunt
exclui de celulele intacte, ptrund n citoplasm (colorarea cu tripan blue sau eozin se folosete pentru a
detecta celulele nucleate lezate prin fixarea complementului).
Formarea canalului transmembranar prin polimerizarea lui C9 are loc numai la nivelul situsului
membranar. Complexul C5b6789 este instabil n soluie, ceea ce explic restrngerea efectului litic numai la
situsul la care s-au iniiat evenimentele.
Ansamblul CAM format din C5b-C9 a fost cunoscut ca avnd funcie litic asupra bacteriilor. Asamblarea
CAM pe membrana leucocitar nu produce efect citotoxic. Dup inseria CAM n membrana leucocitar,
celula se activeaz deoarece CAM acioneaz ca ionofor, producnd creterea concentratiei Ca2+. Se
genereaz radicalii toxici ai reducerii O2 i se activeaz metabolismul acidului arachidonic pe calea
ciclooxigenazei i respectiv a lipooxigenazei. Leucocitul elimin o mic vezicul membranar care conine
complexul CAM.

Fig. 7. Formarea complexului de atac membranar C5-9. Dup legarea lui C5b la membran, C6 i C7 se leag pentru a forma
complexul stabil C5b67, care acioneaz cu C8, formnd complexul C5b678, cu capacitatea de a disloca componentele
membranare. Complexul induce polimerizarea lui C9, ce formeaz structurile tubulare care traverseaz membrana. Dislocarea
componentelor membranei permite schimbul liber al ionilor i al apei, rezultatul fiind liza.

Orice structur care permite asamblarea CAM poate fi lizat de cascada C:

majoritatea bacteriilor Gram negative, n special cele care sintetizeaz LPS incomplet din care lipsete
polizaharidul regiunii externe;
- virusurile nvelite i celulele infectate cu virusuri care exprim Ag virale n membran i devin tapetate
cu Ac;
- eritrocitele heterologe transfuzate.
Capacitatea de amplificare a cii clasice este foarte mare. O molecul de IgM legat de un epitop, leag
la rndul ei, o molecul de C1. C1s activat cliveaz circa 100 molecule de C4, din care numai circa 20
molecule C4b se leag de complexul Ag-Ac. Numai 5% din fragmentele C2b sunt legate pentru a forma
C4b2b. Acest complex cliveaz sute de molecule C3.
-

Calea alternativ a fixrii complementului

Calea alternativ sau properdinic a complementului se activeaz n absena complexelor imune, fiind o
component a imunitii nnscute. Este activat de cristalele de urai (la persoanele cu gut), de suprafaa
unor bacterii i parazii, de diferite polizaharide, mai ales de origine microbian (zimosan, inulin, LPS ale

bacteriilor Gram negative, acizii teichoici ai bacteriilor Gram pozitive, polizaharidul pneumococic), de
molecule agregate de anticorpi (chiar ale izotipurilor care nu fixeaz complementul, IgG 4, IgA), generatoare
ale C3b, de proteina C reactiv, detectabil n snge n faza acut a maladiilor infecioase. Calea altern este
prima linie de aprare humoral fa de infecii, nainte de activarea rspunsului imun.
Secvena alternativ a activrii C este dependent de fragmentul C3b i de trei proteine serice care nu
particip la secvena clasic: properdina (P), factorul B i factorul D (fig. 8). Este necesar prezena ionilor
de Mg2+.
Properdina este considerat ca un tip special de anticorpi naturali ai serului normal, cu un titru mic, ce
se sintetizeaz n cursul vieii ca rezultat al stimulrilor cu antigene ale microbiotei intestinale normale. Este
o globulin de 150 kDa, alctuit din trei subuniti identice, asemntoare structural cu imunoglobulinele
i are mobilitate . Are aciune litic asupra bacteriilor, ce se exercit n cooperare cu proteinele sistemului
complement i n prezena ionilor de Mg2+.
Calea alternativ pare a fi fiziologic activ la un nivel sczut. C3 nativ, cu cea mai mare concentraie
plasmatic dintre componentele C (600-1800 mg/l) este instabil i se rennoiete. Cele mai multe molecule
de C3b rmn n faza lichid i sunt inactivate de factorul H, dup formarea complexului C3bH. O form
modificat a lui C3b, denumit C3i este echivalentul funcional al lui C3b, pentru c are o legtur tioester
care se leag covalent cu gruparea NH2 sau OH a proteinelor membranare.
C3i, fixat pe o suprafa activatoare, leag o protein seric - factorul B n prezena Mg2+ formnd un
complex C3iB. Factorul B este o protein monocatenar (93 kDa), omolog cu C2.
Complexul C3iB este substratul unei proteine serice cu aciune enzimatic - factorul D, o protein
plasmatic cu activitate serin-proteazic. Substratul acestei proteaze este numai factorul B. Cnd se asociaz
cu factorul B, situsul catalitic al factorului D se deschide i cliveaz factorul B legat de C3i, elibernd
factorul Ba care difuzeaz i se formeaz C3iBb. Bb rmne legat de C3b. Complexul C3iBb este
convertaza lui C3, analogul funcional al lui C4b2b al cii clasice.
C3iBb are timpul de njumtire de circa 90 de secunde, dar prin legarea proteinei serice P se formeaz
complexul C3iBbP, relativ stabil, cu activitate serin-proteazic i cliveaz C3 genernd aceleai fragmente,
C3a i C3b ca i n calea clasic. C3iBbP are afinitate nalt pentru C3, pe care l cliveaz
C3b este att component a complexului enzimatic, ct i produs al aciunii sale.

Fig. 8. Ilustrarea schematic a cii alternative activrii complementului. C3b i factorul B se asociaz i formeaz
C3bB, care este convertit n convertaza activ a lui C3 C3bBb, prin clivarea fragmentului Ba, sub ac iunea factorului
D. C3bBb amplific conversia lui C3 n C3b, care se combin din nou cu factorul B i perpetueaz bucla retroactiv
pozitiv. C3b leag factorul B pe o suprafa activatoare. n faza lichid pe o suprafa neactivatoare, C3b leag
preferenial factorul H, npiedicnd formarea lui C3bB.

Treptele ulterioare ale activrii complementului sunt aceleai, descrise n calea clasic.
Enzimele de clivare a lui C3 (C4b2b n calea clasic sau PC3bBb n calea altern) se combin cu una sau
mai multe molecule de C3b i formeaz convertazele lui C5.
Calea lectinic

Resturile glucidice ale suprafeei microorganismelor invadante sunt recunoscute de 2 lectine ale
gazdei, care iniiaz activarea C pe calea clasic, n absena Ac: lectina care leag manoza (MBL) o protein

seric sintetizat de hepatocite asemntoare cu C1q i proteina C reactiv (CRP), produs de hepatocite n
faza acut a rspunsului inflamator, face parte din familia pentraxinelor
Mecanismul cii lectinice este mai apropiat de calea clasic, pentru c dup iniiere, progreseaz prin
activarea lui C4 i C2, pentru a produce C4bC2a, convertaza lui C3. Dup ce MBL se leag pe suprafaa unui
agent infecios, se activeaz MASP-2, care cliveaz C4 i C2. MASP-1 i MASP-2 au rol necunoscut.
Activarea lui C4 i C2 genereaz convertaza lui C3, fr legarea anticorpilor specifici, ceea ce reprezint un
mecanism important de aprare nnscut, comparabil cu calea altern.
Funciile complementului

Componentele sistemului C realizeaz 3 categorii de funcii eseniale:

citoliza (liza celulelor eucariote i bacteriene) i liza virusurilor nvelite;
opsonizarea, proces care implic tapetarea celulelor strine cu molecule derivate din activarea
proteinelor complementului i uurarea ingestiei lor de ctre celulele fagocitare;
activarea celular reunete efectele generate de peptide derivate din activarea C, care se leag specific
de receptorii unor celule i determin degranularea mastocitelor, migrarea unor celule mobile n focarul
inflamator, intensificarea sau inhibiia rspunsului imun.
Anafilatoxinele C3a i C5a sunt peptide eliberate de la extremitatea N-terminal a lui C3 i respectiv
C5, prin clivarea catalizat de convertazele specifice. Efectele acestor peptide sunt multiple, dar n esen au
funcie de anafilatoxine.
C3a, C4a i C5a sunt foarte asemntoare ca structur: C3a i C4a au 77
aminoacizi, iar C5a are 74 aminoacizi. La captul COOH toate au Arg. C3a produce urmtoarele efecte:
contracia musculaturii netede n unele organe
eliberarea histaminei din mastocite (histamina este vasoconstrictoare n faza iniial i prin constricia
celulelor endoteliale mrete permeabilitatea capilar cu producere de edem; n faza a II-a histamina
produce vasodilataie periferic i scderea brutal a tensiunii arteriale).
C3a este rapid inactivat n umorile organismului, sub aciunea carboxipeptidazei B, care cliveaz Arg
terminal. C5a este de 10-20 de ori mai activ dect C3a i are activiti biologice mai extinse, dar
eficacitatea sa in vivo este mai redus deoarece cantitatea de C5a format n cascada de activare este mult
mai mic dect cantitatea de C3b. C5a produce urmtoarele efecte:
este factorul major al chimiotactismului pentru neutrofile
determin fenomenul marginaiei lor n vase i neutropenie circulatorie
activeaz neutrofilele, declannd creterea metabolismului oxidativ al glucozei i producerea H 2O2 cu
efect bactericid;
stimuleaz sinteza leucotrienelor de ctre neutrofile (LTB4), care prelungesc faza de permeabilitate
crescut indus de C5a;
stimuleaz degranularea mastocitelor;
stimuleaz contracia musculaturii netede.
Proprietile sale persist n restul peptidic, dup scindarea Arg.
Proteine reglatoare ale activitii sistemului C

Amplificarea excesiv a activitii C este controlat de un set de 7 proteine reglatoare: 5 proteine ce

inactiveaz complexele C n soluie i dou proteine de membran ce inactiveaz complexele C pe celulele
normale. Aceste proteine acioneaz n principal, prin inhibarea formrii, prin accelerarea degradrii sau prin
inactivarea lui C3b i a convertazelor lui C3 i C5. Cea mai mare parte a C1 circulant este legat de o
glicoprotein (105 kDa) denumit inhibitor C1, din familia inhibitorilor serin-proteazelor denumite serpine.
C1-inh se leag cu C1 liber, neasociat n complexe Ag-Ac, formnd un complex ireversibil cu C1r i C1s.
Proteina care leag C4b (C4bp) acioneaz ca un cofactor al proteazei serice (factorul I), care degradeaz
C4b.
Factorul I este o serin-proteaz care cliveaz i inactiveaz C4b i C3b (n C3c i C3d). C3c este eliminat,
iar C3d se asociaz cu C3b i i inhib activitatea enzimatic.

Factorul H este elementul cheie care controleaz funcionarea cii alterne. El regleaz asocierea dintre C3b
i factorul B. Formarea complexului C3bH blocheaz legarea factorului B. Factorul H disociaz complexul
C3bBb i se cupleaz cu C3b n oricare din localizrile sale, dar n special cu C3b liber n faza fluid.
Factorii H i I (inactivatorul lui C3b) controleaz enzimele ce cliveaz C3 i C5. Factorul I inactiveaz
C3b i C4b, iar factorul H accelereaz degradarea C3-convertazei din calea altern, prin disocierea Bb de
complexul enzimatic. Factorii H i I au rol n clivarea C3b, la forma inactiv C3bi, clivat ulterior n C3c i
C3d. C3b n faza fluid este inactivat de factorii H i I.
Proteina inactivatoare S se combin cu complexele C5b67 n soluie i blocheaz inseria lor n membrana
celular. Se formeaz complexul C5b67S, care poate s interacioneze cu C8 i C9, dar nu mai are efect litic.
Proteine reglatoare asociate membranei celulare. Pe suprafaa majoritii celulelor sanguine (cu excepia
celulelor NK, a monocitelor medulare) i a altor categorii de celule se gsete factorul accelerator al
disocierii (DAF) celor dou convertaze ale lui C3. Sub aciunea sa are loc disocierea complexelor C4b2b i
C3bBb (rezultnd C4b, C2b, C3b, Bb).
Cofactorul proteic membranar este o protein integrat, care se gsete pe aceleai categorii de celule ca i
DAF. Funcioneaz ca un cofactor proteolitic pentru disocierea proteolitic a lui C4b i C3b.
Funcionarea cascadei de activare este controlat chiar de unele dintre propriile sale componente. De
exemplu, C3bBb este o convertaz relativ instabil, cu timpul de njumtire de 5 minute. Disocierea
factorului Bb produce inactivarea convertazei, cu efect sever de limitare a amplificrii cii alterne asupra lui
C3.
Properdina este un factor stabilizator al convertazelor lui C3 i C5, prelungind activitatea lor.
Biosinteza componentelor sistemului complement

Aproape toate componentele complementului sunt sintetizate n cea mai mare parte (peste 90%) n ficat,
de ctre hepatocite: C3, C6, C8, factorul B. Fac excepie componentele C1, locul sintezei fiind epiteliul
gastrointestinal i urogenital. In vivo, monocitele sanguine i macrofagele tisulare sintetizeaz C1, C2, C3,
C4, C5, factorii D i B, properdina, factorii H i I, numai pentru propriile lor necesiti, fr s influeneze
concentraia complementului seric. Sinteza acestor componente se intensific n macrofagele activate n
procesele inflamatorii, furniznd un mediu favorizant al al procesului inflamator.
Rolul complementului n aprarea antiinfecioas

Complementul este cel mai important sistem molecular de aprare nscut, constituind prima linie de
aprare humoral a vertebratelor fa de microorganismele invadante, deoarece recunoate materialul nonself
imediat dup infecie. Complementul este un sistem primar de supraveghere, independent de anticorpi I
celule. In al II-lea rnd, sistemul complement este un efector al imunitii mediate humoral.
Funcia esenial a C este aceea de opsonizare a celulelor nonself i a virusurilor infecioase, prin
componenta C3b, dar are i funcii litice n cooperare cu IgM i IgG, specifici fa de diferite componente ale
agenilor infecioi (bacterii, fungi, virusuri).