Genul Mycobacterium

1886 Robert Koch - identific bacilul tuberculozei

1896 Genul includea: M. tuberculosis i M. leprae
1901 BAAR n sputa unui subiect sntos
1954 identificarea altor BAAR potenial patogeni
1980 41 de specii
1994 > 55 de specii
1997 > 71 de specii
2002 > 80 de specii

2006 > 100 de specii i subspecii

Mycobacterium tuberculosis (complexul M. tb)

hominis

bovis
BCG
africanum
microti

Mycobacterium leprae

Principalele specii de NTM

(non tuberculous mycobacteria)
cu ritm lent de multiplicare, fotocromogene
(ex. M. kansasii, M. marinum) grupul I
cu ritm lent de multiplicare, scotocromogene (ex. M.
scrofulaceum, M. gordonae, M. szulgai) grupul al II-lea
cu ritm lent de multiplicare, nefotocromogene
(ex. complexul M. avium) grupul al III-lea

cu ritm de multiplicare rapid (ex. M. fortuitum, M. chelonae)

grupul al IV-lea

Importana mycobacteriilor non TB (NTM)

atipice - oportuniste

Studiu realizat n SUA

32.000 de mycobacterii izolate - 30% NTM
61% MAC (complexul M. avium- intracellulare)
10% alte specii
19% M. fortuitum- M. chelonae
10% M. kansasii

Principale manifestri clinice n infeciile cu NTM

Manifestari clinice
Pulmonare
Limfadenopatii

Cutanate

Diseminare

Specii
MAC
M. kansasii
M. abscessus
MAC
M. scrofulaceum
M. marinum
M. fortuitum
M. chelonae
M. abscessus
M. ulcerans
MAC
M. kansasii
M. chelonae
M. haemophilum

Rata de crestere Specii ntlnite mai rar

Lenta (> 7 zile)
Lenta
Rapida (< 7 zile )
Lenta
Lenta
Lenta
Rapida
Rapida
Rapida
Lenta
Lenta
Lenta
Rapida
Lenta

M. xenopi, M. simiae
M. szulgai,
M. fortuitum, M. chelonae
M. fortuitum, M. chelonae,
M. abscessus, M. kansasii
MAC, M. kans asii
M. nonchromogenicum
M. peregrinum
M. smegmatis
M. fortuitum
M. abscessus
M. xenopi
M. genavense

Tuberculoza n momentul actual

La nivel mondial - circa 2 miliarde de

persoane infectate cu M. tuberculosis
Circa 10 milioane cazuri noi de
TUBERCULOZ n fiecare an !

2-3 milioane decese prin TB n fiecare an

Evoluia incidenei tuberculozei n Romnia

comparativ cu Europa, n perioada 1980-2000
140

120

100

80
Romania
Total
60

40

20

0
1980

1985

1990

1995

2000

Incidena tuberculozei n Romnia,

n perioada 1978-2005

160
140
120
100
80
60
40
20
0
1978

1980

1982

1984

1986

1988

1990

1992

1994

1996

1998

2000

2002

2004

Evoluia mortalitii prin tuberculoz,

n ultimii 50 de ani, n Romnia

200

100

19
97

19
87

19
77

19
67

19
57

19
47

Mycobacterium tuberculosis
Habitat
- var. hominis
- om infectat
- de obicei la nivel pulmonar
- sput
- var. bovis
- animal infectat
- lapte i alte produse animale

Morfologie
- BAAR
- bacili roii pe fond albastru
- coloraia ZIEHL-NEELSEN
- Bacili galben verzui
- coloraia fluorescent

Caractere de cultur
- mare varietate de medii de cultur
- unele produse n mod special
- medii de cultur lichide (bulion)
- medii de cultur pe baz de ou ex.

Loewenstein
- medii de cultur bazate pe compoziia n
agar ex. 7 H 9
- rata de diviziune: 12-27 ore
- colonii de tip R (2-8 sptmni)
- CO2

Caractere biochimice
- numeroase
- unele au utilitate n identificare:
- testul producerii de niacin (Konno)
- testul reducerii nitrailor
- testul catalazei
- sensibilitatea la T2CH

Caractere de rezisten
- n strns legtur cu structura
- care explic i:
- rata lent de diviziune
- rezistena intra-macrofagic
- rezistena la numeroase Ab i Ct
- NaOH i H2SO4 - utile n decontaminare
- radiaiile UV - utile pentru distrugerea M. tb

Structura chimic i antigenic

- au de toate !
- lipide
- acizi mycolici
- ceruri (ex. ceara D) etc
- polizaharide
- glicolipide (ex. LAM)
- proteine (ex. PPD / tuberculina)

Rspunsul imun
- foarte complex
- incomplet elucidat
- RIU - fa de structuri proteice / glicolipidice
- ELISA
- RIC - premuniie
- hipersensibilitate de tip IV
- fenomenul Koch (istoric)
- RIC este esenial

Inhalare

Fagocitate de MF alveolare
Multiplicare intra-MF

Formarea leziunilor caracteristice

MF activate

Lichefiere
STOP multiplicare
ID

Reactivare

Bacteriemie
Diseminare
Deces

Eliminare
prin sput

Din 100 persoane infectate

90 infecie asimptomatic

n 5 dintre cazuri infecia boal

n 5 dintre cazuri .

Factori de risc
Vrsta (copii foarte mici i aduli tineri)
Sexul (masculin)
Etnia (ex. rrom)
Un anumit status socio-economic
Condiii improprii
Anumite activiti
- mineri
- muncitori praf de siliciu
Malnutriia
Consumul cronic de - Tutun
- Alcool
- Droguri
Detenia
Infecia cu HIV / SIDA

Date clinice
Incubaia 3-12 sptmni

Semne care pot atrage atenia

- Subfebrilitate (prelungit sau intermitent)
- Transpiraii nocturne
- Astenie
- Scderea apetitului i a greutii corporale
- Alterarea lent progresiv a strii generale

Tuse
Expectoraie

Diagnostic
Clinic
Epidemiologic
Paraclinic (laborator, imagistic)
Anatomopatologic
Microbiologic
- Bacteriologic

- Imunologic
-- Imunobiologic (IDR cu PPD)
-- Serologic

Coloratie Ziehl-Neelsen
B A A R

Metode conventionale

Metode rapide

cultivare pe medii de cultur

(un tub se mpacheteaz n folie de aluminiu)

sonde nucleotidice, PCR, spoligotyping

creste n 5-10 zile

creste dup 10 zile

BACTEC, MGIT, MB-BACT

testul Konno

tubul neacoperit se expune la lumin

HPLC

reducerea nitratilor

fotocromogen

scotocromogen

ne-cromogen

testul catalazei

reducerea nitratilor

reducerea nitratilor

testul Konno

testul aril-sulfatazei

crestere la 30-35C

hidroliza Tween 80

reducerea nitratilor

preluarea de Fe

hidroliza Tween 80

testul ureazei

testul catalazei

testul aril-sulfatazei

testul aril-sulfatazei

sensibilitatea la TCH

sensibilitatea la PAS
sensibilitatea la PNB

Diagnosticul
clasic

Examenul microscopic - esenial

Coloraia Ziehl-Neelsen - metod simpl, rapid, ieftin i foarte

util n diagnosticul prezumtiv
.

identificarea prezumptiv
confirmarea prezenei BAAR n colonia izolat
aprecierea corectitudinii decontaminrii
"monitorizarea" tratamentului

Cuantificarea examenului microscopic al

Coloraie ZIEHLNEELSEN
(mrire 800-1000)
0
1-2/ 300 cmpuri
1-9/ 100 cmpuri
1-9/ 10 cmpuri
1-9/ 1 cmp
9/ 1 cmp

Notare
semi-cantitativ
negativ pentru BAAR
(se repet)
+
++
+++
++++

sputei

Coloraie
FLUORESCENT
(mrire 250-250)
0
1-2/ 30 cmpuri
1-9/ 10 cmpuri
1-9/ 1 cmp
10-90/ 1 cmp
90/ 1 cmp

Antibiograma ?

 Diagnosticul imunobiologic
- IDR cu PPD

Diagnosticul serologic
- ELISA

Diagnosticul
modern

Tehnica de amplificare genetic enzimatic (PCR)

utilizarea unor amorse oligonucleotidice specifice ADN-ului int

denaturarea termic a catenelor de ADN

hibridizarea amorselor cu secvene complementare
copierea ADN-ului int
o caten complementar situat n prelungirea amorselor hibridate

Repetarea procedeului milioane de copii ale

fragmentului de ADN definit de amorse

Analiza fragmentelor de ADN cromozomial

obinute prin restricie enzimatic (REA)

Analiza prin hibridizare molecular a fragmentelor de

ADN cromozomial obinute prin restricie enzimatic
(ribotipaj, RFLP)

SSCP
- PCR

Tratament
Linia 1
- HIN (hidrazida acidului izonicotinic)
- Rifampicin
- Pyrazinamid
- Ethambutol
Linia 2
- Ethionamid
- Prothionamid
- Cicloserin
- Amikacin
- Ciprofloxacin

Medicamente n asociere (3-5)

Timp de 6 luni

Medicamente n asociere (3-5)

Timp de 6 luni
Strict supravegheat (TSS, DOTS)

Streptomicin

1945

Izoniazid

1952

Pyrazinamid

1952

Ethambutol

1961

Rifampicin

1966

Prevenire i control
Identificarea i tratarea surselor

Vaccinare (BCG)
Chimioprofilaxie
Msuri speciale

- pacieni infectai HIV

- n nchisori
- personal medical
- situaii epidemice