Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
OMG TR
OMG TR
Central. Odat
cu
alte
sosirea
spaniolilor
pri ale
lumii i
n ultimii 200 de ani, bumbac comerciale au fost derivate n principal din bumbac mexican.
Gossypium arboretum (bumbac pakistaneze-indian ). Nativ la Nord-Vest India i
Pakistan. Unele soiuri sunt arbuti nali perene, altele scurte anuale. Unul dintre soiuri perene a
fost introdus la Africa de Est i de acum 2000 de ani era crescut de oameni Meroe de Nubia,
care sunt considerate a fi primul tesatorii de bumbac n Africa.Aceasta varietate de bumbac a
fost extins n alte pri din Africa, inclusiv Kano din Nigeria, care din secolul al noualea a
devenit un centru de producie de bumbac.
Gossypium herbaceum (
subsaharian
bumbac
de
Africa
probabil, domesticit n Etiopia sau sudul Arabiei Saudite i sa rspndit n Persia, Afganistan,
Turcia, Africa de Nord, Spania, Ucraina, Turkestan i China (cultivarea prima dat n China a
fost n aproximativ 600 d.Hr.). Domesticirea a inclus selectarea de soiuri care au crescut ca
anuale.
Gossypium barbadense ( bumbac America de Sud). Probabil c o dat pe scar larg de-a
lungul coastelor Pacific i Oceanul Atlantic din America de Sud, populaii slbatice ale acestei
specii sunt acum cunoscute doar de coast din Ecuador. Cele mai vechi textile din bumbac
nregistrate din America de Sud sunt de la spturile arheologice n deertul chilian de nord data
de la 3600 .Hr. Bumbacul a devenit tot mai larg rspndit n America de Sud i rspndit n
Indiile de Vest, unde Columb le-a ntlnit. n aproximativ 1670, plantarea de G. barbadense a
nceput n Marea Britanie de Nord, atunci cnd coloniile americane plantat bumbac au fost adui
din Barbados.
Bumbac este din genul Gossypium care se cultiv pe fiecare continent major i pe Indiile
de Vest i insulele din bazinul Pacificului . Exist aproximativ 39 de specii de Gossypium la
nivel
domesticite
i din
acestea, Gossypium hirsutum din Mexic a devenit specia dominant n producia de bumbac n
toat
lumea comercial.
Bumbacul
climatele
uscate irigarea produce bumbac de inalta calitate. Este una dintre cele mai vechi culturi agricole
cultivate,datnd de la aproape 5000 de ani.
Caracteristicile de Gossypium hirsutum L. (bumbac)
Centrul de
Reproducerea
Toxinele
origine
Alergenicit
ate
se crede c provin
din Mezo-America
mas
bumbac.
Ecuador-bolivian).
gosipol n
Cod Numel
Tipu
Promotor,
Terminator
Copii
Form de baz
ri
alte
cry1F
Cry1F delta-
IR
sintetazei
Semnal de
Cry1F insecticid i
endotoxin
mannopine
3 " poliadenilare
funcional
(Bacillus
(d mas 2 "),
din ORF25 )
thuringiensi
promotor de
(Agrobacterium
Cry1Ab1 i Cry1Ca3.
la pTi15955
tumefaciens)
Secven modificate
var.aizawai)
patru copii
pentru a optime n
ale sintazei
planta exprimare.
octopin (4OCS),
potenator de
pat
N-
SM
la pTiAch5
ubiquitin (Ubi) Z
3'polyadenylation
Alterarea secvenei
fosfinotricin
signal from
funcional
de codificare pentru
acetiltransfer
(Zeamays)
ORF25
; 1 parial,
expresia optim n
az
promotor i exon
(Agrobacterium
non-
celulele plantelor.
(viridochro
prima i intron
tumefaciens)
exprimat;
mogenes S.)
Numele latin
Gen
Patogenitate
e
Bacillus
cry1
thuringiensis var.aiz
awai
Streptomyces
pat
viridochromogenes
3. Caracteristicile Modificrii
3.1 .Introducera AND-ului
Analiza ADN-ului genomic de la linia 281-24-236 a indicat ncorporarea de exemplare
unice de gene Cry1F i pat, mpreun cu secvene lor de reglementare respective. Analiza
ulterioar a demonstrat un al doilea ,parial exemplar a genei Pat mpreun cu un al doilea
exemplar al promotorului Zm1 Ubi, totui, acest fragment genei Pat nu a fost asociat cu
terminator ORF25 Poly A. Nu a fost detectat expresia proteic de la fragmentul de gena.
Gena Cry1F este o gena sintetic, o gen optimizat pentru Cry1F, o versiune a lungimeicomplete himeric de Cry1Fa2, originar de la Bacillus thuringiensis. n aceast versiune
sintetic, primii 694 aminoacizi sunt din partea toxic a Cry1Fa2; partea rmas este format din
secvene C-terminal de la Cry1Ca3 (Bt var aizawai PS81I.), i Cry1Ab1 (Bt var.berliner 1715).
Aceste ultime dou fragmente fac parte din poriunea C-terminal al proteinei cristalizate, care
este desfcut de proteaze n intestinul lepidopterelor. Greutatea molecular a proteazei a proteinei
Cry1F a plantelor expresate este 65kDa.
Dup inserarea genei de rezisten la insecte, a fost evaluat stabilitatea acesteea n cadrul
i ntre generaii cu ajutorul analizei Southern blot. Prima generaie de plante , generate de
backcrosses cu una dintre liniile parentale, a segregat ntr-un raport de 1:1, de plante rezistente i
non-rezistente. Descendena rezultat din autopolenizarea plantelor din prima generaie au
5
segregat ntr-un raport de 3:1 de plante rezistente i non-rezistente. Aceste rezultate nu au fost
diferite semnificativ de raporturile ateptate dup segregare mendelian i a confirmat
motenirea stabil a trsturii dominante unice.
3.2.
Expresia Materialului
i n
evalua performanele
diferene
observate
mici,
au
caracteristicile
la linia 281-24-236.Susceptibilitatea
liniei 281-24-
236 de bumbac la boli , cum ar fi seminele de putregai, a fost evaluat i determinat similar cu
cea a PSC355 liniei parentale. Rezultatele de la aceste studii de teren demonstreaz c creterea
economic, de
similar cu
performan agronomic i
convenional.
susceptibilitatea la
Aceast linie de
prin
urmare, nu
6
se ateapt s devin un risc pentru duntorii plantelor, nici n a deveni o gazd mai
potrivit pentru bolile plantelor.
4.2.ncruciri
Bumbacul (G. hirsutum) este n principal o plant autogam, dar polenul este de asemenea
transferate i de ctre insecte, n special bondarii i albinele melifere.Polenul este greu i
lipicios i gama natural de trecere este limitat. Au fost observate rate ale ncrucisari de pn
la 28% la bumbac fa de alte soiuri cultivate n mod direct cu aceeai sursa de polen n
condiii de cmp, atunci cnd polenizatori insectele au fost prezente. Rata de ncrucisari
scade rapid proporional cu creterea distanei de la sursa de polen.Rezultatele studiilor de
cercetare privind ncrucirile n Statele Unite au artat c micarea polenului scade rapid de
la 12 metri de la sursa de polen. Cu toate acestea, cultivatorii de semine de bumbac
certificate n Statele Unite trebuie s menin o distan de izolare de 202 de metri ntre cmpuri .
n cazul n care linia de bumbac 281-24-236 urmau s fie cultivate n apropierea cu alte
soiuri de bumbac, i insectele polenizatoare ar fi prezente i active, gena Cry1F ar putea fi
introdus , eventual, n aceste soiuri. n caz de formare de hibrizi, nu ar exista niciun avantaj
concurenial conferit orice de descenden hybrid, n absena infestrii speciei de insecte
lepidoptere.
n Statele Unite, specii genetic compatibile cu 281-24-236 bumbac
(slbatice sau cultivate), G. barbadense
includ G. hirsutum
i G.
incompatibil
probabil ca
urmare
pentru
de
apar n sudul Floridei (G.hirsutum), Hawaii (G. tomentosum), Puerto Rico i Insulele
Virgine
SUA. n alte zone de cretere a bumbacului ale lumii, specii care ar putea fi ncruciate cu
G. hirsutum include G. mustelinum n Brazilia, i G. lanceolatum n Mexic.
4.3. Potenialul de Buruieni
Gossypium hirsutum cultivat nu este considerat, de obicei, o specie de buruieni n Statele
Unite sau alte ri, dar estenscris ca o buruian potenial n sudul Floridei.Dei planta de bumbac
este cultivat ca o cultur anual, se comport ca o planta perena n medii
neperturbate
i
7
condiii climatic adecvate. Bumbac nu tolereaz condiii de frig, limitnd astfel potenialul
de iernat n sudul Floridei, Hawaii, i Puerto Rico.
n comparaie cu alte linii de bumbac, linia de bumbac 281-24-236 nu a fost conferit un alt
avantaj competitiv dect producerea de proteinei insecticide Cry1F. Nivelurile de expresie a
proteinei PAT, la aceast linie de bumbac nu confer toleran la aplicaii erbicide glufosinat de
amoniu. Scopul de a introduce genei Pat a fost de a oferi un mecanism de selectare a
transformrilor. Nu a fost de ateptat ca linia de bumbac 281-24-236 s devin buruienoas
sau invaziv n habitate naturale, ntruct niciuna dintre caracteristicile de reproducere sau de
cretere a acestei linii nu au fost modificate n mod substanial. Dei nu s-au observat diferene
semnificative n unele caracteristicile de cretere vegetativ (numr de ramuri
vegetative i
lepidoptere, de exemplu, albinele, gandaci ,buburuze , viespi parazite; artropode din sol, rme,
i specii reprezentative terestre i acvatice, cum ar fi oareci, prepeli de Virginia, pstrvul
curcubeu i dafnie . Efectele toxicologice au fost determinate prin studii hrninduse organismele
non-int. Pstrvul curcubeu i prepelia de Virginia au fost hrnite cu Cry1F, fiind exprimat
prin fin din semine de bumbac. Studiile rmase au fost efectuate cu lungimea complet de
Cry1F dintr-o su microbien (Pseudomonas fluorescens). Datele au fost furnizate pentru a
demonstra echivalena ntre Cry1F vegetal i microbian , n limitele biochimiei si bioactivitatii.
Rezultatele acestor studii cu hrnire nu au artat efecte adverse observabile de care ar putea fi
atribuite proteinei Cry1F.
Proteina Cry1F n linia de bumbac 281-24-236 s-a dovedit a fi eficace mpotriva insectelor
lepidoptere- int. Cu toate c nu au fost evaluate direct n cmp, efecte insecticide asupra
lepidopterele non-int, cum ar fi Fluturele monarh, nu a fost de ateptat s dea o expresie att de
redus a proteinelor Cry1 n polen.Pe baza rezultatelor studiilor dietetice de larve ale fluturelui
monarh cu proteina Cry1F, concentraia estimat de Cry1F necesar pentru a reduce creterea
8
larverelor cu 50%, este de 450 de mii de ori mai mare ca concentraia n polen a acestei protein
de la linia 281-24-236. Acest lucru, combinat cu volumul redus de polen produs, ar fi un risc
foarte mic pentru lepidopterele non-int, cum ar fi Fluturele monarh. n timp ce bumbacul este
cea mai mare parte plant autogam, orice polenizare ncruciat ar fi realizat de ctre
insecte lepidoptere non-int, precum albinele, care nu sunt afectate de proteine Cry.
Pe baza acestor informaii, s-a concluzionat c, n comparaie cu soiurile convenionale de
bumbac, cultivarea liniei 281-24-236 nu ar prezenta nici un risc mai mare pentru interaciunea
organismelor, cu excepia duntorilor specifici bumbacului, insectele lepidoptere.
Componentele nutriionale ale liniei 281-24-236 de bumbac, boabe, fin, pleav i uleiul
au fost comparate cu cele de control non-transgenice (un segregat nul rezult din mai multe
backcrosses de 281-24-236 cu ambele linii parentale ). Analiza seminelor de bumbac a artat
c acestea includ protein brut, celuloz brut, cenu ,grsime, ap ,minerale, aminoacizi,
acizi grai i anti-nutrieni. Analiza uleiului menioneaz c include grsime brut, protein
brut, ap,acizi grai, anti-nutrienti si anti-oxidanti. Compoziia uleiului de bumbac, de
asemenea, a fost comparat cu cel non-transgenice i cel comerciale de bumbac. Nivelurile antinutrienti din 281-24-236 au fost similare cu cele non-transgenice i fa de valorile publicate
n literatura de specialitate.
9. Toxicitatea i Alergenitatea
Potenialul de toxicitate i alergenitatea al proteinelor Cry1F i PAT n linia 281-24-236 a
fost evaluat de urmtoarele date i informaii: rezultatele cercetrii asemnrii secvenelor de
aminoacizi ntre proteinele
glicozilare posibil a Cry1F, studii privind digestibilitate in vitro folosind fluid gastric simulat;
evaluarea stabilitii termice; studiile de toxicitate oral i acut cu oareci.
Att proteina Cry1F ct i cea PAT nu au prezentat secvena asemntoare de aminoacid la
alergenii cunoscui. Ambele aceste proteine au
fost degradate n
termen
de
un minut
de
expunere la fluid gastric simulate. Proteina Cry1F nu a mai fost biologic activ dup expunerea
la temperaturi mai mari de 75 C. Niveluri de toxine natural din bumbac (de exemplu, gossypol)
nu au fost semnificativ diferite n 281-24-236 bumbac, comparativ cu control non-transgenice
i soiuri convenionale de bumbac.
Rezultatele studiilor privind hrnirea
281-24-236 de
bumbac nu a
demonstrat
Referine:
1. Referin USDA-APHIS Nr 95 - 256-01P.
2. Willrichsiebert,M; Babock,JM; Nolting,S; Santos,AC; Adamczyk,JJ; Neese,PA; King,JE;
Jenkins,J.; McCarty,J.; Lorenz,G.M.; Fromme,DD; Lassiter,RB (2008). Efficacy of
Cry1F insecticidal protein in maize and cotton for control of fall armywork (Lepidoptera:
noctuidae). Florida Entomologist91(4): 555-565.
3. Betz, F.S., Hammond, B.G. & Fuchs, R.L. (2000). Safety and advantages of Bacillus
thuringiensis-protected plants to control insect pests. Regulatory Toxicology 32, 156173.
4. US Food and Drug Administration (1994). Secondary Food Additives Permitted in Food
for Human Consumption; Food Additives Permitted in Feed and Drinking Water of
Animals;
Aminoglycoside
3'-Phosphotransferase
II;
Final
Rule. Federal
Register, 59:26700-26711.
5. US Food and Drug Administration (1994). Secondary Food Additives Permitted in Food
for Human Consumption; Food Additives Permitted in Feed and Drinking Water of
Animals;
Aminoglycoside
3'-Phosphotransferase
II;
Final
Rule. Federal
Register, 59:26700-26711.
6. Compositional Analysis
Hamilton, K.A., Pyla, P.D., Breeze, M., Olson, T., Li, M., Robinson, E., Gallagher, S.P.,
Sorbet, R. and Chen, Y. (2004). Bollgard II cotton: compositional analysis and feeding
studies of cottonseed from insect-protected cotton (Gossypium hirsutum L.) producing
the Cry1Ac and Cry2Ab2 proteins. J Agric Food Chem. 52(23):6969-6976.
11