FIZIOLOGIE BACTERIAN

1. 2. 3. 4.

5.

Compoziia chimic Nutriia bacterian Metabolismul bacterian Creterea i nmulirea bacteriilor Influena factorilor de mediu asupra nmulirii bacteriilor

1. Compoziia chimic
Cuprinde n jur de 20 de elemente ale sistemului periodic:

elemente de baz: H, C, O, P, S-cu rol primordial structural I energetic pentru orice celul vie
elemente <1%, sub form ionizant: K, Mg, Na, Cl, Ca -cu rol funcional n procesele de activare enzimatic, permeabilizarea membranei, etc. oligoelementele: Mn, Fe, Co, Cu, aflate n cantiti foarte reduse -intr n structura unor coenzime, necesare desfurrii metabolismului coninutul n ap:85% din masa celular; ea transport, solubilizeaz, electroliii, reprezint mediul n care se desfoar reaciile metablice.

2. Nutriia bacterian
Nutriia bacterian reprezint totalitatea proceselor prin care bacteriile i procur din mediul nconjurtor substanele necesare supravieuirii, creterii i nmulirii, Respiraia bacterian - modalitatea de a-i produce energia necesar activitii metabolice

Sursa de energie fotosintetizante - energia luminoas chimiosintetizante - reacii de oxido-reducere a unor substane lithotrofe - oxideaz substanele anorganice chemoorganotrofe - oxideaz subst.organice (glucoz, AA, purine, pirimidine, f.de cretere) Sursa de carbon autotrofe - substane anorganice, CO2 mixotrofe - substane organice ct i CO2 heterotrofe - substane organice Sursa de azot aminoacizii, sruri de amoniu (Escherichia coli, Salmonella etc.).

Necesitile bacteriilor de interes medical

chimiosintetizante heterotrofe (cu necesiti diferite) paratrofe sunt dependente de aparatul enzimatic al celulelor gazd, fiind bacterii cu habitat obligatoriu intracelular (chlamydii, rickettsii) auxotrofe pierd propr. de a sintetiza un compus (E.coli-timidina) prototrophe tulpinile originale din care provin

3. Metabolismul bacterian

Cuprinde totalitatea reaciilor biochimice care au loc n celula bacterian i n mediu reacii catabolice metabolizarea substratului nutritiv cu eliberare de energie reacii metabolice intermediare - energia rezultat din reaciile catabolice este nmagazinat n compui macroergici reaciile anabolice, prin care celula bacterian i sintetizez substanele propri, cu consum energetic

3.1 Reaciile catabolice

Parcurg n principiu 4 faze:

descompunerea extracelular a substanelor organice n uniti mai mici

absorbia substanelor din mediul extern: prin mecanism pasiv sau activ(fosforilarea glucozei - glucoza -6 fosfat) pregtirea substanelor pentru oxidare prin reacii de decarboxilare oxidarea substanelor cu eliberare de energie -respiraia bacterian

respiraia -acceptor final de H este O atmosferic

fermentaia -acceptor final este o substan organic respiraia anaerob -acceptor final este O prezent ntr -o sare anorganic.

Respiraia bacterian

Bacterii strict aerobe se dezvolt numai n prezena O atmosferic - respiraia aerob (Pseudomonas aeruginosa, M.tuberculosis, Bacillus) Bacterii strict anaerobe nu se dezvolt n prezena O atmosferic - fermentaia n condiii anaerobe (Clostridium, Bacteroides, Prevotella) Bacterii facultativ anaerobe -se dezvolt n prezena sau absena O atmosferic - enterobacteriile Bacterii anaerobe aerotolerante folosesc numai fermentaia n prezena aerului atmosferic, fr participarea oxigenului (Streptococcus pyogenes) Bacterii microaerofile - n prezena CO2, 6-10% (Neisseria)

4. CRETEREA I NMULIREA BACTERIILOR

Rezultat al nutriiei i metabolismului Creterea volumului celulei, dedublarea materialului nuclear, dezacord mas -volum Diviziune binar la bacili pe un plan perpendicular pe lungime la coci pe planuri variate Gram pozitive - formarea unui sept Gram negative - strangulare direct

4.1 Curba de cretere i multiplicare a bacteriilor n mediu limitat

Dac se introduce un inocul de celule bacteriene dintr-o cultur pur ntr -un mediu de cultur proaspt i se incubeaz , bacteriile vor crete i se vor multiplica -timpul scurs de la o diviziune la alta =timp de generaie Aprecierea nr de celule bacteriene la intervale de timp de la momentul inoculrii -grafic numr total de germeni (vii i moarte) numr de celule vii -apreciaz nr bacteriilor capabile s se multiplice n continuare

Curba de multiplicare a bacteriilor n mediu limitat

1. Faza de lag = adaptare la noile condiii

Durata n funcie de specie, condiii de mediu, de numrul de celule din inocul (1/2 h i 3-4 h la bacteriile sporulate) Numrul bacteriilor este staionar Metabolismul este intens Crete volumul bacteriilor Sensibilitate crescut la antibiotice

Faza de accelerare bacteriile ncep s se nmuleasc

2. Faza de multiplicare exponenial

Bacteriile se nmulesc n progresie logaritmic. T/Nr.b liniar Este posibil doar in vitro Durata (n general 2-3 ore n funcie de TG) Escherichia coli TG 10 minute Mycobacterium tuberculosis 25 ore Bacteriile prezint toate caracterele speciei Sensibilitate mare la antibiotice Compoziia mediului se schimb Perioad de ncetinire

3. Faza staionar

Durata cteva ore Numrul de bacterii este constant (ele nu se nmulesc, nu mor) Sensibilitate sczut la chimioterapice Modificri ale morfologiei i caracterelor tinctoriale Produc anumii metabolii secundari cu distribuie taxonomic foarte riguroas Antibiotice (Actinomyces) Colicine (b.piocianic) Exotoxine (b. difteric, b. tetanic, b.botulinic, etc.) Sporogeneza la bacteriile sporulate

4. Faza de declin
Durata zile Numrul de bacterii scade constant (epuizarea substratului nutritiv i acumularea de metabolii toxici) Modificri morfologice Autosterilizare sau sporulare complet Cultivarea bacteriilor n mediu limitat este utilizat n laboratoarele de bacteriologie medical, pentru stabilirea diagnosticului unei infecii bacteriene.

Cultivarea bacteriilor n laborator

Medii lichide Mediile solide colonii

Colonii izolate

Caractere culturale

4.2 Curba de cretere i nmulire a bacteriilor n culturi continui

Cultivarea bacteriilor n sisteme deschise chemostate - pentru obinerea unei mase mari celulare Vaccinuri Produi bacterieni (exotoxine, enzime, antibiotice, interferoni, etc) pentru industria alimentar, farmaceutic, etc. Cercetare Mediul este nlocuit n permanen Bacteriile sunt mereu n faz logaritmic

4.3 nmulirea bacteriilor n organism

Condiiile pe care microorganismele le ntlnesc n organism le selecteaz pe acelea care cresc n anumite limite de temperatur, osmolaritate i pH. dup ptrunderea n organism a unui numr mic de microbi acetea se pot nmuli rapid i produc o infecie grav cu evoluie acut (meningita) Bacteriile cu timp de generaie lung vor produce o infecie cu evoluie insidioas, cronic (TBC)

nmulirea bacteriilor n organism

n organism, creterea i multiplicarea bacteriilor este stresat necesiti nutritive (prin competiie cu flora normal) prin mecanismele aprrii antiinfecioase

nmulirea bacteriilor n organism

Pretenii nutritive mai mari la bacteriile cu habitat exclusiv uman (gonococ) dect la celelalte (E.coli...) bacteriile cu habitat extracelular sunt expuse aciunii anticorpilor, complementului, fagocitozei, bacteriile ce se nmulesc intracelular sunt protejate de aciunea acestor factorii i scap uneori supravegherii imunologice bacteriile dezvolt mecanisme adaptative care s ocoleasc barierele ce se opun nmulirii lor

5. INFLUENA FACTORILOR DE MEDIU

ASUPRA NMULIRII BACTERIILOR

Temperatura Psihrofile - optim la 20C dar i sub aceast temperatur Mezofile - optim ntre 20-40C. Sunt cele patogene deoarece se nmulesc la temperatura organismului, fiind denumite i bacterii homeoterme. Termofile, care se nmulesc optim la peste 45C temperaturile ridicate distrug bacteriile, aplicaia practic a acestui aspect fiind sterilizarea

INFLUENA FACTORILOR DE MEDIU

ASUPRA NMULIRII BACTERIILOR

temperaturile moderat sczute, de +4oC din frigidere, nu distrug bacteriile dar opresc nmulirea lor prelungindu-le viabilitatea. Tulpini criofile!!!
ngheul la temperaturi nu prea mici fa de 0oC determin cristalizarea apei ce determin leziunea structurilor membranare a celulelor bacteriene.

Conservarea prin congelare. Temperatura optim este cea realizat de CO2 (-78C) sau de azotul lichid (-180C).

INFLUENA FACTORILOR DE MEDIU ASUPRA NMULIRII BACTERIILOR

pH 7,2-7,4(excepii:Brucella, v.holeric) CO2 :0,03% (10% la Neisserii) Umiditatea

n funcie de specie Liofilizarea(desicare brusc la -78C)pentru conservare

Presiunea osmotic

n mediu hiperton -pierd apa - plasmoliza

n mediu hipoton -apa intr n celule - plasmoptiz exist bacterii halofile -cresc n soluii hipersaline(m.

INFLUENA FACTORILOR DE MEDIU ASUPRA NMULIRII BACTERIILOR

Ultrasunetele Presiunea hidrostatic, osmotic Electricitatea Radiaiile : neionizante(UV -cu efect bactericid) ionizante -formeaz n celul radicali cu via scurt
i protoni