Coloratia Ziehl-Neelsen

Coloratii speciale

Preparate colorate

- se realizeaza pentru evidentierea bacteriilor

din specia Mycobacterium

Tehnica: - etalarea produsului patologic

- uscarea
- fixarea (preparatul este trecut de 23x deasupra flacarii becului Bunsen)

Etapele coloratiei:

- fucsina Ziehl pura ( se acopera lama), 5-10 min.,

se incalzeste pina la emisia de vapori ( nu se ajunge
la fierbere)
- se decoloreaza cu acid sulfuric 20% - 30 sec( se
spala cu apa)
- se decoloreaza cu alcool etilic pina la indepartarea
colorantului 96% - 30 sec ( se spala cu apa)
- se recoloreaza cu albastru metilen 2 min.
- se spala frotiul cu apa
- se lasa la uscat in stativ

Citirea si interpretarea:
- se foloseste obiectivul de imersie
- Mycobacteriile (bacilul tuberculos, bacilul
leprei) apar colorate in rosu pe fond
albastru = bacili acido-alcoolo rezistenti =
BAAR , ceilalti germeni si elementele
celulare apar colorate in albastru.

Proprietatea de acido-alcoolo
rezistenta este caracteristica genului
Mycobacterium, si se datoreaza
structurii particulare a peretelui
celular, cantitatii mari de lipide pe
care acesta le contine si in special
acidului micolic.

Coloratii speciale

Coloratie Ziehj-Neelsen ( Mycobacterium

Tuberculosis)

Un frotiu colorat Ziehl-Neelsen

efectuat dintr-un produs patologic, ex.
sputa, in care se pun in evidenta
bacili acido-alcoolo rezistenti, permite
diagnosticul de tuberculoza.

Coloratia pentru capsula ( metoda Burri modificata

Gins )- cu tus de China = pe fond negru bacteriile
apar colorate in rosu, cu o zona clara, incolora in jur
( aceasta zona corespunde capsulei, care nu se
coloreaza).
Coloratia Mller pentru spori (fixare cu alcool etilic,
mordansare cu acid cromic, coloratia Ziehl-Neelsenfara decolorarea cu alcool, se spala se usuca si se
examineaza cu imersie)= sporii se coloreaza in
rosu, formele vegetative in albastru.
Coloratii pt. cili: metoda Leifson si impregnare
argentica Zettnov.

Coloratie Ziehl-Neelsen ( bacili acido-alcoolo

rezistenti intra si extracelulari )

Coloratia Gimenez ( Rickettsia rickettsii )

Coloratia Giemsa (leptospira)

Leptospira ( microscopie electonica)

Impregnare argentica = Coloratia Fontana

Tribondeau ( Treponema pallidum)

Preparat imunohistochimic ( Treponema

pallidum)

Borrelia burgdorferi (imunoflorescenta)

Pneumococcus ( dispozitie in diplo )

Test Neufeld-Quellung ( pentru umflarea

capsulei )- pneumococi

Pneumococi ( coloratie Gram)

Frotiu din sputa ( coloratie Gram -pneumococi)

Pneumococi ( imunoflorescenta)

Neisseria meningitidis

Neisseria meningitidis (ME)

Coloratie Gram ( coci Gram negativi )

Neisseria meningitidis

CLOSTRIDIUM BOTULINUM
SPOR SUBTERMINAL

CLOSTRIDIUM DIFFICILE

C. difficile endospores

Frotiu dintr-un abces ( infectie cu anaerobi)

Stafilococi

Streptococi

Escherichia coli ( ME)

E.Coli ( microscopie in contrast de faza;

preparat necolorat )

Klebsiella pneumoniae ( izolata dintr-un

abces pulmonar)

Klebsiella spp.

Klebsiella spp.

10

Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa (bacil piocianic)

Pseudomonas fluorescens ( ME )

Vibrio

11

Vibrio (imunofluorescenta )

Corynebacterium spp. ( coloratie Gramdispozitie caracteristica in litere chinezesti

)

12

Corynebacterium spp ( coloratie speciala pt corpusculii

Babes-Ernst = corpusculi metacromatici )

Spor ( microscopie electronica)

Fimbrie ( pil)- microscopie electronica

13