1

Biofizica - Conf. Dr. Constanta GANEA - Curs 7 BIOFIZICA CONTRACIEI MUSCULARE Musculatura - element activ care controleaz deplasarea structurilor osoase i micrile altor structuri. Micrile datorate muchilor se bazeaz pe capacitatea fibrelor musculare de a utiliza energia chimic procurat n procesele metabolice, de a se scurta i de a reveni la dimensiunile iniiale. 1. Elemente de structur a muchiului striat. Muchiul striat - alctuit dintr-un mnunchi (sute, chiar mii) de fibre musculare. Fibrele musculare sunt celule polinucleate mrginite de o membran plasmatic- sarcolema, care nvelete fascicule de miofibrile separate ntre ele de un sistem de tubuli i cisterne membranoase mitocondrii, care aparin etc reticulului (fig.). sarcoplasmic. n fibra a muscular exist un mare numr de nuclee i organite celulare ca ribozomi Unitatea morfofuncional miofibrilei este sarcomerul (la homeoterme - lungime 2,2 m). La microscop sarcomerul apare sub forma unei succesiuni de benzi luminoase i ntunecate, care corespund unor filamente longitudinale care se ntreptrund - aceste filamente formeaz aparatul contractil. Sarcomerele sunt separate prin aa-numitele linii Z. Filamentele aparatului contractil sunt de dou feluri: filamente subiri ( 50) care se nser pe linia Z i filamentele groase ( 100) (fig, fig). Banda luminoas I - filamentele subiri; banda ntunecata A - filamente groase care se ntreptrund cu cele subiri, iar n centru, banda H - numai filamente groase. n seciune transversal: fiecare filament gros este nconjurat de 6 filamente subiri i fiecare filament subire de 3 filamente groase. Filamentele subiri sunt alctuite din trei tipuri de proteine: actina globular (actina G) ( 42.000 D), tropomiozina i troponina. Filamentul propriu-zis este format din dou iruri paralele alipite formate din actina G, ca dou

lanuri torsionate (-helixuri) (150-200 molecule) care dau forma fibrilar (F-actina) (fig.) Aceste filamente sunt nsoite de cte dou filamente de tropomiozin (70000 D) situate n anurile formate de moleculele de actin. Din loc n loc, la capetele moleculelor de tropomiozin se gsesc moleculele de troponin (50.000 D)(formate din trei proteine). n general, o tropomiozin nsoete 7 molecule de actin. Filamentele groase - alctuite din molecule de miozin (500.000 D) (300-400 molecule) protein fibrilar, asemntoare cu o baghet subire, terminat prin dou capete globulare (aspect de cros de hochei) (fig.) Partea fibrilar: meromiozin uoar (MMU), cea globular - meromiozin grea(MMG). Aceasta are dou componente S1 (solubil n ap) i S2 - legtura cu cea uoar, ntre ele se poate face ndoirea moleculei (fig.). Filamentul de miozin este format din poriunea liniar, iar capetele globulare sunt orientate lateral, la exteriorul filamentului (fig.), formnd aa-numitele puni transversale miozinice (expansiuni laterale). S1 are mare afinitate pentru actin i prezint, n prezena Mg++, activitate ATP-azic. La rndul ei, actina are o mare afinitate pentru miozin. Prin legarea celor dou (actina i miozina) se formeaz complexul acto-miozinic care amplific activitatea ATP-azic a miozinei de 250 de ori. Fibra muscular este strbtut de 2 reele de canalicule - un sistem de canalicule dispuse longitudinal care strbat ntreaga sarcoplasm i sunt n contact strns cu miofibrilele: reticul sarcoplasmic. Acesta se dilat la nivelul liniei Z formnd cisterne terminale (fig.). A doua reea: canalicule transversale (tubulii T) de la nivelul miofibrilelor pna la suprafaa celulei, unde se deschid printr-un por. Acetia se afl n vecintatea liniei Z. Cisternele reticulului sarcoplasmic i cu tubulii alctuiesc o triad. Cisternele reprezint rezervoare de ioni de Ca++ (concentraia de 1000 ori mai mare dect n exteriorul lor )(conin vezicule n care concentraia ionilor de calciu este de cteva ori mai mare dect n structurile vecine) i acetia se elibereaz n cursul contraciei musculare.

Muchiul relaxat. n repaus, concentraia sarcoplasmic a ionilor de Ca++ este foarte mic ( 10-7 M). n aceast situaie locurile de legare ale actinei cu miozina sunt mascate prin interpunerea moleculelor de tropomiozin. Punile transversale MMG fac un unghi drept cu direcia filamentelor (fig.) i nu sunt legate de actin. Deoarece miozina are activitate ATP-azic, poate s scindeze ATP n ADP i P i, cu un turnover foarte sczut ( 25 s sau 2-3/min.) scindare sunt eliberai n sarcoplasm. Contracia muscular. Contracia fibrei musculare implic trei etape succesive: 1. excitaia fibrei; 2. cuplajul excitaie contracie; 3. contracia propriu-zis a fibrei. 1. Nervul motor mielinizat are ramuri terminale nemielinizate. Acestea parcurg o formaiune specializat a sarcolemei formnd sinapse neuro-musculare (placa motorie). La nivelul acestor sinapse ncepe excitaia fibrei musculare prin eliberarea moleculelor de mediator chimic (acetilcolina) din terminaia nervoas n urma unui impuls nervos. Moleculele de acetilcolin se fixeaz pe moleculele receptoare ale membranei postsinaptice, determinnd deschiderea unor canale cationice ale acesteia. Cationii intr n fibr, interiorul acesteia devine local pozitiv i n felul acesta se produce potenialul de aciune. Acesta se deplaseaz prin sarcolem n lungul fibrei, iar prin membrana tubilor transversali n profunzime. 2. Cuplajul excitaie- contracie. Tubulii transversali sunt n legtur cu cisternele reticolului sarcoplasmic. Depolarizarea tubulilor duce, n momentul n care potenialul de aciune ajunge n dreptul cisternelor, la deschiderea canalelor de Ca. Ionii de Ca++ sunt eliberai din cisterne, iar concentraia lor n sarcoplasm crete de la cca 0,1 M i produii de

la 10 M (100 ori).. Troponina fixeaz ionii de Ca i n urma unei modificari conformaionale deplaseaz moleculele de tropomiozin din anurile filamentului subire astfel nct locurile de legare ale actinei cu miozina nu mai sunt mascate. 3. Contracia. Din acest moment se poate forma complexul actomiozinic i contracia ncepe. Contracia implic eliberarea energiei chimice necesare i fenomenele mecanice care stau la baza producerii forei, respectiv scurtrii fibrei. Etapele ei sunt: n urma rearanjrii troponinei i tropomiozinei extremitatea globular S1 a miozinei care dispune de 2 locuri de legare, unul pentru actin, altul pentru ATP, se fixeaz pe locul de legare actinic. Dup cum am spus mai nainte, miozina scindeaz ATP n ADP i P i i n repaus, dar eliberarea lor este foarte lent. Complexul ATPmiozin are mare afinitate pentru G-actin. Prin formarea complexului actomiozinic activitatea ATP-azic crete de 250 ori, produii de scindare sunt eliberai rapid, se elibereaz energie, eliberarea Pi induce o modificare conformaional a S2, iar puntea (n poziie perpendicular n stare de repaus) se nclin cu 450 fa de filament (fig.). Prin aceast nclinare ea antreneaz filamentul subire, deplasndu-l axial cu 7,5 nm n direcia zonei mediane i sarcomerul este scurtat. Se dezvolt for. Locul de legare rmnnd liber, o nou molecul de ATP este ataat (dup 10-3 s) i aceasta comand desprinderea punii de filamentul subire. ATP este din nou scindat, puntea se leag din nou de filament ntr-o poziie apropiat de linia Z i procesul se repet. n felul acesta, punile transversale se comport ca vslele unei brci i sarcomerul se scurteaz. Hidroliza ATP este mai rapid ca n repaus. Turnoverul crete la cca. 10/s. n felul acesta ciclul biochimic al miozinei este continuat, cnd ncepe contracia, de cel actomiozinic (fig.). Observaie: n timpul scurtrii sarcomerelor nu se scurteaz filamentele - ele se ntreptrund - gliseaz. Teoria glisrii: A. F. Huxley i H.E. Huxley - 1954. n lips ATP, cum se ntmpl dup moarte, ciclul se ntrerupe n faza n care puntea este legat de

filamentul subire, fiind nclinat la 450, legtura actomiozinic devenind permanent. Apare rigor mortis (rigiditatea cadaveric). Relaxarea. Dup ncetarea excitaiei se produce relaxarea n urmtoarele etape: - se nchid canalele de Ca++ din cisterne, se reface concentraia de 103 ori mai mare n cisterne dect n sarcoplasma, datorit pompei de Ca. Prin scderea concentraiei calciului, proteinele filamentelor subiri (troponina) si reiau conformaia, tropomiozina mascheaz locurile de legare. Att contracia ct i meninerea strii de repaus se fac cu consum de energie. Exist muchi ale cror sisteme contractile sunt reglate de ionii de Ca++ prin aciunea acestora asupra miozinei i nu prin intermediul sistemului troponintropomiozin, aa cum exist i muchi care pot apela la ambele sisteme de reglare a funciei contractile. Muchiul glicerinat - fibra muscular tratat cu soluie de glicerin devine parial (sau chiar total) lipsit de sarcolem, tubi transversali i reticul sarcoplasmic (o asemenea stare poate fi creat i prin tratare cu detergeni sau prin microdisecie). Se constat c i n asemenea fibre se pot desfura cele 2 cicluri dac se modific concentraia de ioni de Ca++ i ATP n soluia n care se afl fibra. n soluie lipsit de ATP -rigor mortis. La adugare de ATP - relaxare. La adugarea ionilor de Ca++ se produce contracia. ori rigor (depinznd de prezena ATP). Manifestrile mecanice ale contraciei musculare. Tipuri de contracie. Muchiul dezvolt o for de contracie egal i de sens contrar forei creia i se opune. n funcie de mrimea acestei fore muchiul se poate scurta, alungi sau poate pstra aceeai lungime. La ndeprtarea ionilor de Ca++ (cu EDTA, EGTA -chelatori) se produce ori relaxarea,

Contracie izotonic - muchiul se contract contra unei fore exterioare constante (ridicarea unei greuti). Contracie neizotonic - fora variaz ca mrime - ntinderea unui resort. Contracie izometric - contracie n care lungimea muchiului nu se modific, dar tensiunea n el crete. Fora dezvoltat este egal cu cea care trebuie nvins (contracia postural sau pentru susinerea unui obiect). Muchiul nu efectueaz lucru mecanic. Contracia tetanic - Prin stimulare cu un impuls unic muchiul se contract sub forma unei secuse unice (intervalul ntre stimuli trebuie s fie mai lung dect timpul necesar contraciei i relaxrii); la stimulare repetitiv cu o anumit frecven, peste o limit dat, contraciile individuale fuzioneaz ntr-o contracie unic contracie tetanic (fig.) Frecvena depinde de tipul de muchi (mai mare la muchii rapizi)(musculatura ocular 350 stimuli/secund, muchi solear 30). Alungirea muchiului - dac fora exterioar este mai mare dect valoarea maxim a forei pe care o poate dezvolta muchiul, acesta se alungete cu toate c se contract activ. Relaia for-lungime. Fora generat ntr-o contracie muscular depinde de distana dintre extremitaile sale - deci de lungimea sarcomerelor sale. Ea are valoarea maxim pentru o lungime iniial a fibrei (n repaus). Dac este ntins peste aceast lungime i determinat s se contracte, sau contracia pornete de la o lungime mai mic, fora de contracie descrete (fig.) Explicaie. Este vorba de numrul de puni transversale implicate n contracie. Muchi ntins peste o lungime a sarcomerelor de 3,6 m - nu mai are loc ntreptrunderea filamentelor groase i subiri, nu se produce complexul actomiozinic, fora va fi nul. Fora maxim toate punile sunt implicate n interaciunea actomiozinic. Muchi scurtat - apare o interptrundere suplimentar a filamentelor subiri aparinnd aceluiai sarcomer obstacol n interaciunea

actomiozinic. F =0 cnd filamentul subire atinge linia Z din partea opus. Relaia fora-vitez de scurtare (A.V.Hill) Viteza de scurtare a unui muchi depinde de fora exterioar ce trebuie nvins (deci de fora de contracie la un Ecuaia care reprezint acest proces, ecuaia Hill: (F+a)(v+b) = (Fmax +a)b Este ecuaia unei hiperbole (fig.). F- fora de contracie, v-viteza, a,b, -constante (a-dimensiune de for, b de vitez). Fmax - fora maxim dezvoltat de muchi pentru o anumit lungime iniial la care se declaneaz contracia (izometric). De aici, viteza v = (Fmax -F)b/(F+a) vmax pentru F=0 La fore mari muchiul se lungete i nu mai respect relaia Hill. Puterea dezvoltat de muchi: P = Fv = F(Fmax -F)b/(F+a) Puterea este 0 pentru F = 0 i F = F max (izometric). Ecuaia Hill corespunde unei curgeri vscoase (frecarea la nivelul punilor n glisare). Aplicarea principiului I n cazul contraciei musculare: La scurtarea unui muchi cu x, mpotriva unei fore F, se efectueaz un lucru mecanic L = Fx. Att n repaus, ct i n contracie, muchiul degaj cldur. Cldur disipat (fig) de muchi este : - cldura de repaus; - cldura de contracie, care la rndul ei este cldura de meninere a moment dat). Astfel, un obiect uor este ridicat mai rapid, unul mai greu, mai lent.

forei de contracie i cldura de scurtare (proporional cu gradul scurtrii); - cldura de relaxare, care se produce imediat dup ncetarea stimulrii; - cldura de restabilire, care se produce n urma reaciilor chimice de regenerare a ATP. ntruct pentru acest din urm proces este necesar un timp mult mai lung, el nu apare reprezentat n grafic. Cldura degajat de muchi este rezultatul reaciilor chimice i proceselor mecanice (ntinderea unor structuri elastice din muchi, frecri interne). Energia intern a muchiului este rezultatul unor reacii chimice (hidroliza ATP, reacia creatinchinazei, fiecare reacie : U = iUmol i = Q - Fx unde: i - numrul de moli de reactani consumai (gradul de avansare a reaciei) Umol i - energia molar a reaciei respective, luat din tabele. a miochinazei etc.) Variaia energiei chimice se calculeaz pentru