Competente microbiologie virusuri

Sub.7 : Markeri serologici in suspiciunea de hepatita virala cronica cu VHB

VHB prezinta : -Ag de suprafata = Ag HBs (prezent in anvelopa virusului ) -Ag de miez = Ag HBc (din nucleocapsida ) -polimeraza = Ag HBe (din nucleocapsida ) Ag HBs si Ag HBe pot fi detectati in ser , in timp ce Ag HBc e present doar in hepatocite . Aceste antigene , impreuna cu Ac corespunzatori ( Ac anti HBs , Ac anti HBe , Ac anti HBc ) reprezinta markeri ai infectiei cu hepatita B . Ag HBs Ac antiHBs Ag HBc Ac antiHBc Ag HBe Ac antiHBe

Ag HBs = este primul marker care apare in serul pacientului dupa contactul infectant si semnifica infectiozitatea sangelui in boala acuta , boala cronica si in starea de portaj . (*boala cronica = atunci cand Ag HBs persista in ser mai mult de 6 luni ) (*stare de portaj = purtator sanatos , prezinta Ag HBs , dar nu prezinta simptome, risc de anturaj ) Ac antiHBs = ultimii care apar , sunt protectivi fata de o noua reinfectie si pot apare dupa o
hepatita acuta cu VHB sau postvaccinare . (indica imunizarea )

Ag HBc = NU SE GASESTE IN SER (se gaseste in hepatocit ) . Ac antiHBc = Pot fi de tip IgM sau IgG
IgM Pot apare in infectia acuta sau recenta sau reapar in acutizarile formelor cronice. IgG au rol anamnestic (de memorie ) =infectie acuta , recenta sau reactivarea unei hepatite cronice

Ag HBe = prezenta sa in ser sugereaza replicarea activa a virusului si deci prezinta contagiozitate periculoasa prin sange si secretii . Ac antiHbe = sugereaza un potential infectios al sangelui cu evolutie spre vindecare . Hepatita acuta cu VHB = presupune prezenta de Ag HBs , Ag HBe , Ac anti HBc de tip IgM si
Ac anti Hbc totali.

Purtator sanatos = prezinta transaminazele normale si deasemenea prezinta Ag HBs si Ac anti

HBe totali prezenti peste 6 luni in serul pacientului .

Hepatita cronica cu VHB = presupune cresterea valorii ALAT de 2,5 ori peste valorile normale
; = prezinta AgHBs , Ag HBe , si Ac anti HBc totali prezenti in ser peste 6 luni .

Vindecare cu imunizare = presupune prezenta de Ac anti HBc totali , Ac anti HBe si Ac anti
HBs .

Status post-vaccinare = sunt prezenti doar Ac anti HBs .

Markerii serologici in hepatita virala acuta si cronica cu VHB Ag HBs Hepatita acuta Hepatita cronica + + Ac anti HBs Ac anti HBc _ _ IgM IgG AgHBe + + Ac anti HBe _ _

Asadar , diagnosticul hepatitei cu virus B impune coroborarea metodelor de diagnostic : a)direct prin evidentierea de Ag HBs , Ag HBe (ELISA) si Ag HBc (in hepatocit prin M.E ) --evidentierea AND VHB prin PCR b)indirect evidentierea Ac anti HBs , Ac anti Hbe, Ac anti HBc (ELISA HEPATITA ACUTA CU VHB HEPATITA PERSISTENTA CU VHB

Sub.8 : Markeri serologici in suspiciunea de hepatita virala cu VHA

Anticorpii IgM anti VHA persista 2-4 luni si semnifica infectie acuta sau recenta . Anticorpii IgG anti VHA sunt persistenti si semnifica boala in antecedente . Depistarea Ac antiVHA o facem prin ELISA .

Un rezultat Ac anti-VHA/IgM(+) cu anti VHA totali (+) semifica infectie acuta - Ac anti VHA/IgM(-) cu anti- VHA totali (+) seminfica trecerea prin boala sau cu imunizare . Dg. Direct - este apanajul cercetarii ptr ca virusul este prezent in sange si in materii fecale cu 2 saptamani anterior debutului bolii si 1-2 saptamani dupa disparitia icterului . - la metode de diagnostic direct se realizeaza izolarea VHA si evidentierea virionilor in materiile fecale prin imunomicroscopie electronica . Dg. Indirect ELISA - Ac anti VHA /IgM -Ac anti VHA totali (IgM + IgG) + + + ~~~~~~~~~~ ~~~~~~~~~~~~ Hepatita Trecere prin boala cu imunizare

acuta

!!!!! HEPATITA A NU CRONICIZEAZA NICIODATA!!!!

Sub.9 : Markeri serologici in hepatita virala cu VHC

Detectarea genomului VHC prin amplificare genica (PCR) confirma boala in caz de rezultate serologice echivoce . Diagnosticul de hepatita C se bazeaza pe prezenta anticorpilor serici anti-VHC . Evidentierea anticorpilor anti-VHC se realizeaza prin teste ELISA confirmate prin RIBA (Recombinant Immuno Binding Assay ) prin care este stabilita si clasa Ac reactanti . Dg. Direct ARN-ul virusului C se detecteaza prin tehnici de biologie moleculara (RT-PCR) ; Sunt posibile teste calitative care confirma boala in caz de rezultate serologice echivoce; Aceleasi teste calitative evidentiaza infectia cu virusul C precoce la 2 sapt de la contact preinfectant ; Certifica vindecarea prin faptul ca sunt mult mai sensibile decat testele cantitative Teste cantitative de biologie moleculara masoara incarcatura virala , viremia si monitorizeaza terapia

evidentierea Ag de miez prin ELISA testul se pozitiveaza la 2 zile dupaPCR si este util in centrele de transfuzii ptr a decela persoanele aflate in perioada anterioara seroconversiei sau a cazurilor rare la care Ac anti VHC apar tardiv sau niciodata . Dg. Indirect Se poate realize prin : - Teste de tip screening ( ELISA de generatia a 3 a)-se folosesc Ag structurale si nestructurale adsorbite pe faza solida . -sunt mai sensibile si mai specifice decat testele de generatia a 2 a . - Teste de confirmare testul RIBA ~seamana cu WESTERN BLOT , doar ca Ag sunt asezate la distante egalepe banda de nitroceluloza ; ~poate specifica tipurile de Ac; ~este util in predictii evolutive si de raspuns la tratament. Interpretarea unui rezultat RIBA - pozitiv = daca sunt prezente cel putin 2 categorii de Ac ; - negativ = daca nu este prezenta nicio banda (Ac absenti); - indeterminabil = daca este o singura banda de Ac . ALGORITM : Negativ ELISAser pacient reactivTeste de confirmareRIBA IndeterminabilELISA RT-PCR Pozitiv