Sub 4 : Diagnosticul virusologic in gripa

Diagnostic direct: -se recolteaza tampon faringian , nazal, spalatura nazala -produsele patologice se recolteaza in primele zile de boala -metoda clasica: izolare pe culture de celule sau oua embrionate; se folosesc colonii primare maimuta-sau linii permanente -efect citopatic nespecific -oua embrionate in cavitatea amniotica pentru adaptare-pasaje successive in cavitatea alantoida lichid alantoidian (se evidentiaza virusurile)=r. de hemaglutinare -prin r. de hemaglutinare: se realizeaza titrarea virusurilor si cuantificarea -identificarea : se realizeaza prin inhibarea hemaglutinarii -metode rapide : detectarea antigenelor virale( imunofluorescenta, ELISA) sau detectarea genomului PCR Diagnosticul indirect serodiagnosticul : -se cauta anticorpii in serul pacientului -reactii antigen-anticorp, ELISA, RIH, fixare a complementului -se urmareste aparitia dinamicii semnificative, seroconversie Reactie de hemaglutinare: Lichid alantoidian Hematii + + ! Umbreluta ( r+) Reactive de inhibitie a hemaglutinarii: Lichid alantoidian Hematii Ac specifici h1n1 + + (r+) buton + (r-) umbreluta
1

+ ! buton rosu(r-)

h2n3

Sub 5.- Diagnosticul virusologic in rabie

Rabia este determinate de virusul rabic ce se gaseste in saliva, fiind transmisa de animale sau prin aerosoli-liliecii-. Diagnosticul se face atat la om cat si la animalul bolnav. Diagnosticul efectuat este cel direct. Diagnosticul indirect se realizeaza pentru evidentierea ac eficacitate vaccin. La om se recolteaza raclat cornean, saliva, biopsie cutanata, mucoasa bucala. La animale, post mortem , se recolteaza fragmenet de creier sau saliva. In fragmenetele de creier, in M.O se vad corpusculuii Babes-Negri, incluziuni virale, iar in imunofluorescenta ac marcati cu o substanta fluorescent sau elisa- sunt metode rapide pentru detctarea antigenelor virale. Pentru detectarea genomului viral : PCR.mai putin rapida este izolarea pe culture de celule, soricei n.n. paralizii spastic. Identificare : reactii de neutralizare, IF, ELISA.

Sub 6. Markeri serologici in suspiciunea de hepatita virala acuta cu VHB

2

markerii serici ai hepatitei cu virus B (Ag i Ac) evideniai prin reacii imunologice (ELISA, HAP, IF, RIA) prezint importan diagnostic i prognostic:
-

diagnostic direct: AgHBs(infectiozitate in boala acuta, cronica sau portaj-fals pozitiv), AgHBe-contagiozitate (AgHBc este prezent numai intrahepatic) diagnostic indirect: Ac anti-HBc (IgM infectie acuta/recenta si recaderi- cel mai important marker ; Ig G anamnestici) si Ac totali anti-HBc trecerea prin boala sau cronicizare), anti-HBe, anti-HBs (ultimii care apar si singurii protectori);

PCR pentru decelarea virusului infecios.

Ag HBs + +(>6 luni)

Ag HBe +

Ac antiHBc- Ac anti ig m Hbc totali + + Hepatita acuta +(>6 luni) Purtator sanatos

Ac anti HBs

Ac anti HBe ALAT normal Alat >2-5 ori

+ Hepatopatie cronica

+ Trecere prin boala cu imunizare+ vaccinarepostinfectie

VHB- are un antigen de suprafata HBs, unul specific corpului HBc, si unul enzimaticHBe+ anticorpi anti HBs, HBc,HBe. -prezinta AND viral Diagnosticul direct se pune prin PCR(id. De genom), ELISA( id ag virale), imunofluorescenta ( id ag virale),sau indirect, prin detectarea anticorpilor (ELISA)