Diagnosticul HIV

Diagnosticul HIV

diagnostic de laborator:
teste de depistare teste de confirmare

indicaii pentru testarea HIV diagnosticul infeciei HIV la copil definitia de caz pentru raportarea infeciei HIV i SIDA la aduli si adolesceni monitorizare/ndrumare( practica curenta)

Diagnosticul de laborator al infectiei HIV (1) metode indirecte

Teste de depistare

detectarea Ac anti HIV prin metode imunoenzimatice ELISA teste ELISA - reactie Ag-Ac intre Ac serici ai subiectului infectat si Ag virale produse in lab - Sb si Sp de > 98% - nu detecteaza subtipurile O si N - rezultate fals negative- in fereastra imunologica
4 - 12 sapt repetarea testelor la 1, 3, 6 luni

- teste de generatia I, II pun in evidenta doar Ac de tip IgG - teste de generatia lll evidentiaza Ac de tip Ig G si Ig M - teste de generatia IV permit detectarea combinata a Ag p24 si a Ac de tip IgM si IgG anti HIV-1 si HIV-2

Diagnosticul de laborator al infectiei HIV (2)

teste rapide - Ora Quick, Uni-gold Recombigen HIV test - rezultate in 20 min test din saliva (OraSure) - Sb si Sp asemanatoare cu testele din ser test din urina - Calypte HIV-1 Urine EIA - testele pozitive verificate prin teste serologice standard

test din secretiile vaginale se recomanda in cazul persoanelor violate deoarece Ac IgG anti-HIV se gasesc in sperma

Diagnosticul de laborator al infectiei HIV (3)

Teste de confirmare - Western-blot

pune in evidenta prezenta Ac fata de anumite proteine specifice HIV

proteinele virale separate prin electroforeza dupa transferul printr-o membrana de nitroceluloza, se incubeaza cu serul pacientului. Ac din ser se leaga specific de proteinele virale si sunt identificati cu controale standard prezenta Ac impotriva unei proteine virale este evidentiata printr-o reactie imunoenzimatica care arata pozitia proteinei prin aparitia unei benzi colorate componentele antigenice sunt:

proteinele din core (p17, p24, p 55), polimeraza (p31, p51, p66) anvelopa ( gp 41, gp 120, gp 160)

interpretarea rezultatelor: test negativ: absenta tuturor benzilor test pozitiv: prezenta a cel putin 2 benzi coresp gp 120/160 si p 24 sau gp 41 test indeterminat - prezenta a 2 benzi dar nu cele coresp test

Diagnosticul de laborator al infectiei HIV(4)

metode directe

Detectarea Ag p 24
prin metoda standard si a disocierii complexelor imune (prin acidifierea plasmei) pentru cresterea Sb testului indicat in suspiciunea de primo-infectie HIV permite dg precoce in faza premergatoare seroconversiei

Detectarea ADN sau ARN viral - PCR

permite detectarea ADN proviral integrat in ADN celular ARN genomic din particula virala PCR - ADN proviral - util pentru dg infectiei neonatale HIV PCR - ARN - HIV plasm = incarcarea virala

util in dg infectiei acute HIV, monitorizarea tratamentului ARV, rol predictiv pentru aprecierea ratei de progresie si a probabilitatii de transmitere HIV

Diagnosticul de laborator al infectiei HIV (5)

Izolarea HIV in culturi de celule

din plasma sau din celule mononucleare din sangele periferic prin adaugarea de celule mononucleare de la donatori sanatosi care servesc ca suport pentru multiplicarea virala metoda dificila, costisitoare

Indicatii pentru testarea HIV

persoane cu anumite conditii medicale:

boli definitorii SIDA, tuberculoza, BTS,

sarcina, donatori de sange etc persoane cu risc crescut de infectie HIV:

homo/bisexuali, utilizatori de droguri iv,

persoane cu comportament sexual la risc

persoane care solicita testarea

persoane abuzate sexual persoane cu expunere profesionala

Diagnosticul infectiei HIV-1 la copil

Se face in functie de varsta copilului:

Copil 18 luni teste ELISA Copil 18 luni

1. PCR ADN- HIV, PCR ARN- HIV la 0, 1, 3, 6 luni ( Sb > 99% la 3 6 luni)

- copil neinfectat - 2 determ negative dupa varsta de 1 l in absenta ARV

2. Culturi virale

Seroreverter ( SR ) :

= copil nascut din mama cu infectie HIV cu 2 teste ELISA negative (la un interval de 6 luni) sau 1 test la > 18 luni si care nu are semne indicatoare de boala.

Expus perinatal infectiei HIV ( E ):

copil < 18 luni seropozitiv prin teste ELISA copil din mama cu infectie HIV la care nu s-a efectuat testarea.

Definitia de caz pentru raportarea infectiei HIV si SIDA la adulti si adolescenti (>13 ani):

Criterii de laborator:
Doua testari pozitive efectuate cu truse tip ELISA, la doua probe de snge prelevate separat, urmate de testul de confirmare Western Blot; SAU Rezultat pozitiv la oricare din urmatoarele teste virusologice pentru HIV:

Detectarea acidului nucleic prin PCR (ADN sau ARN); Antigen p24, inclusiv testul de neutralizare; Izolarea HIV (cultura virala);

SAU

Criterii clinice cu rezultatul pozitiv n unul din teste de laborator sus indicate:

Boli definitorii SIDA la care diagnosticul a fost stabilit prin criterii de certitudine. (Kaposi)

Definitia de caz pentru raportarea infectiei HIV si SIDA la copil (<13ani)

Copii 18 luni cazul raportat ca infectie HIV trebuie sa ntruneasca oricare din urmatoarele criterii: 1. Criterii de laborator: Doua testari pozitive efectuate cu truse tip ELISA, la doua probe de sange prelevate separat, urmate de confirmare prin Western Blot SAU

Rezultat pozitiv la oricare din urmatoarele teste virusologice pentru HIV:

Detectarea acidului nucleic prin PCR (ADN sau ARN); Antigen p24, inclusiv testul de neutralizare; Izolarea HIV (cultura virala);

SAU
2. Criterii clinice cu rezultatul pozitiv n unul din teste de laborator sus indicate Boli definitorii SIDA la care diagnosticul a fost stabilit prin criterii de certitudine.

Copil < 18 luni cu mama HIV pozitiva

Cazul raportat ca infectie HIV trebuie sa ndeplineasca oricare din urmatoarele criterii: Criterii de laborator: DEFINITIV POZITIVE

Rezultate pozitive la 2 probe separate (exceptia sngelui din cordonul ombilical), folosind unul sau mai multe din urmatoarele teste virusologice pentru HIV:

Detectarea acidului nucleic prin PCR (ADN sau ARN); Antigen p24, inclusiv testul de neutralizare; Izolarea HIV (cultura virala);