Anul I Medicina Generala

Dozarea hemoglobinei
Hemoglobina este o metaloprotein din eritrocitele vertebratelor i din esuturile unor nevertebrate, care conine fier, avnd rol de transport al oxigenului. Aspecte clinice Scderea hemoglobinei, cu sau fr scderea absolut a eritrocitelor, determin anemie. Anemia are multe cauze, dei deficiena de fier i afeciunea determinat de aceasta, anemia prin deficit de fier, sunt cauzele cele mai frecvente n occident. Datorit deficitului de fier eritrocitele devin hipocrome (lipsa pigmentului rou al hemoglobinei) i microcitare. Unele mutaii n lanul hemoglobinei duc la hemoglobinopatii, cum sunt talasemia i siclemia. Anumite erori n sinteza hemului duc la un grup de afeciuni genetice denumite porfirii. Regele George al III-lea al Angliei este cel mai cunoscut personaj care suferea de porfirie. Hemoglobina A1c apare prin combinarea hemoglobinei A cu glucoza. Hemoglobina A1c crete proporional cu valoarea glicemiei i astfel procentul HbA1c poate fi folosit ca un indicator reprezentativ de control al glicemiei la diabetici pe o perioad de 3 luni. Creterea nivelurilor de hemoglobin se asociaz cu creterea mrimii sau numrului eritrocitelor i se numete policitemie. Carbhemoglobina este un compus format din hemoglobin i CO 2, ceea ce duce la scderea afinitii hemoglobinei pentru oxigen. Cnd hemoglobina nu e legat de oxigen ea prezint o tendin accentuat de a se transforma n carbhemoglobin. Culoarea albastr a acesteia explic de ce venele, care conin o cantitate mai mare de carbhemoglobin, apar albastre. Carboxihemoglobina este un compus stabil al monoxidului de carbon cu hemoglobina, care mpiedic eliberarea oxigenului la esuturi. Fumatul crete de asemenea nivelul de carboxihemoglobin. n cantiti mari, CO poate s duc la deces, iar n cantiti mici, prin deprivarea organismului de oxigen, determin oboseal, ameeal i pierderea contienei. Afinitatea CO pentru Hb este de 200 de ori mai mare fa de cea a oxigenului. HbCO crete riscul de tromboz i astfel de AVC ischemic. Gravidele fumtoare pot da natere la copii hipotrofici datorit hipoxiei.

Pentru dozarea hemoglobinei dispunem de mai multe tehnici. 1) Metoda colorimetric Sahli Principiul metodei: const n compararea culorii clorheminei obinut n sngele de cercetat cu culoarea soluiei de clorhemin standard, sau cu culoarea etalon a baghetelor de sticl din construcia hemoglobinometrului. Materiale necesare: hemometru Sahli, pipet capilar de 20mm3, soluie de HCl N/10, ap distilat. Metoda de lucru: se pune n eprubeta de dozare a aparatului soluie de HCl N/10 pn la diviziunea 10. Cu pipeta se recolteaz 20mm3 de snge capilar; se introduce n soluia de HCl din eprubeta de dozare i se amestec. Se ateapt 3 minute pn ce are loc formarea clorheminei, dup care se dilueaz cu ap distilat, pn cnd culoarea devine identic cu cea a etalonului. Se citete apoi pe scala eprubetei cifra la care a ajuns meniscul lichidului. Eprubeta de dozare are dou feluri de gradaii: una n grame/100ml i cealalt n procente. Pentru 100% corespunde o valoare de 16g Hb/100ml de snge. Valorile normale: La brbatul adult sunt de 15-17g% (100%); la femei 13,5-15,5g% (90%); la copiii mici 17-20g% (n medie 115%). n general, variaiile fiziologice i patologice ale hemoglobinei urmeaz sensul variaiei numrului de hematii. Metoda colorimetric Sahli, mult utilizat n trecut n clinici, este astzi nlocuit cu tehnici mai precise, cum ar fi fotometria i spectofotometria. 2) Metoda cu cianmethemoglobin Principiul metodei: const n liza unei soluii de cianur de potasiu i fericianur de potasiu n prezena sngelui, cu formarea de cianmethemoglobin. Materiale necesare: soluie Drabkin (fericianur de potasiu 0,2g; cianur de potasiu 0,05g; bicarbonat de sodiu 1g; ap distilat ad 1000ml); etalon de hemoglobin (soluie de cianmethemoglobin 0,06g%, conform etalonului internaional); pipet capilar de hemoglobin 0,02ml; pipet gradat de 5ml; fotometru; snge recoltat pe anticoagulant uscat sau direct din pulpa degetului. ntr-o eprubet se pipeteaz 0,02ml snge, peste care se adaug 5ml soluie Drabkin. Se las n repaus 30 de minute pentru obinerea hemolizei totale. La un spectofotometru se citete extincia amestecului la lungimea de und 540nm. Cifra extinciei se nmulete cu factorul de corecie i cu cifra 250, care reprezint diluia. Pentru etalonarea aparatului se fac 3 diluii succesive din etalonul de hemoglobin, folosind soluia Drabkin ca mediu de diluie. Soluia etalon C1=sol. etalon C2=1,25ml C3=2,20ml Soluia Drabkin 0,85ml 0,70ml Concentraia 0,06g% 0,05g% 0,04g%