Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Bacteriologie - Medicala Sacarea Targu Mures 2006 PDF
Bacteriologie - Medicala Sacarea Targu Mures 2006 PDF
ef de lucrri
Disciplina de Microbiologie-Virusologie-Parazitologie
Universitatea de Medicin i Farmacie Trgu-Mure
Medic primar medicin de laborator
Doctor n tiine medicale
BACTERIOLOGIE
MEDICAL
- 2006 -
Cuprins
Cuprins ..............................................................................................................................3
Coci gram pozitivi, aerobi..................................................................................................5
GENUL STAPHYLOCOCCUS .....................................................................................5
Staphylococcus aureus............................................................................................5
Genul Streptococcus ....................................................................................................12
Streptococcus pneumoniae ...........................................................................................22
GENUL enterococcus ..................................................................................................26
Coci gram pozitivi, anaerobi ............................................................................................31
GENUL Peptostreptococcus i genul peptococcus........................................................31
Coci gram negativi, aerobi ...............................................................................................36
Genul Neisseria............................................................................................................36
Coci gram negativi, anaerobi............................................................................................44
GENUL veillonella ......................................................................................................44
Cocobacili gram negativi, aerobi......................................................................................45
GENUL acinetobacter..................................................................................................45
Genul Bordetella ..........................................................................................................49
Genul Brucella .............................................................................................................57
Genul Francisella .........................................................................................................64
Genul Pasteurella .........................................................................................................69
Genul Haemophilus......................................................................................................72
genul gardnerella..........................................................................................................80
GENUL legionella .......................................................................................................83
GENUL moraxella .......................................................................................................87
Bacili gram pozitivi, aerobi, nesporulai ...........................................................................90
Genul Corynebacterium ...............................................................................................90
Genul arcanobacterium ................................................................................................94
Genul erysipelothrix.....................................................................................................96
Genul listeria................................................................................................................98
Genul nocardia...........................................................................................................102
Bacili gram pozitivi, aerobi, sporulai.............................................................................104
Genul Bacillus ...........................................................................................................104
Bacili gram pozitivi, anaerobi, nesporulai .....................................................................111
Genul lactobacillus.....................................................................................................111
Genul actinomyces.....................................................................................................113
Genul mobiluncus ......................................................................................................114
genul BIFIDOBACTERIUM .....................................................................................115
genul EUBACTERIUM .............................................................................................115
genul PROPIONIBACTERIUM.................................................................................115
Bacili gram pozitivi, anaerobi, sporulai .........................................................................116
Genul Clostridium......................................................................................................116
Clostridium tetani.......................................................................................................117
Clostridium botulinum ...............................................................................................120
G E N U L S T AP H Y LO CO C C U S
DEFINIIE. NCADRARE
Germenii din genul Staphylococcus sunt coci Gram-pozitivi, dispui n
grmezi neregulate, aerobi facultativ anaerobi, imobili, nesporulai, catalazopozitivi.
Grupe de interes medical:
- Stafilococi coagulazo-pozitivi
o Staphylococcus aureus
- Stafilococi coagulazo-negativi:
o Grupul Staphylococcus epidermidis cu speciile:
S.epidermidis sensu stricto
S.auricularis
S.capitis
S.hominis
S.lugdunensis
S.haemolyticus
S.warneri etc.
o Grupul S. saprophyticus cu speciile:
S.saprophyticus
S.xylosus
S.cohnii
o Grupul S. intermedius cu speciile:
S.scheleiferi etc.
o Grupul Staphylococcus simulans cu speciile:
S.simulans etc.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Staphylococcus aureus
Colonizeaz nrile i colonul de unde poate contamina tegumentul. Exist
starea de purttori sntoi de Staphylococcus aureus fiind ntlnit mai ales
portajul nazal, n proporie de 10-40% n colectiviti i pn la 40-70% n spital.
Rezervorul principal de este reprezentat de mamifere i psri care contamineaz
mediul. Suportul material al transmiterii este reprezentat de sol, nisip marin, apa
de mare i apa dulce, plante, fructe, alimente, mbrcminte, mobilier, covoare,
praful i aerul din ncperi.
Stafilococii coagulazo-negativi
Colonizeaz nrile i tegumentul, componeni ai florei cutanate normale
care se constituie n barier de aprare antimicrobian. Stafilococii coagulazonegativi sunt un rezervor de plasmide de rezisten (plasmide R) transferabile la
S. aureus i la ali coci Gram pozitivi.
S.epidermidis este ominiprezent pe tegumente n timp ce ceilali SCN au
tropism pentru anumite biotopuri:
- S.capitis pentru scalp i conductul auditiv extern;
- S.auricularis pentru conductul auditiv extern;
- S.hominis pentru zona axilar, inghinal, membre, tlpi.
Caractere morfotintoriale
Stafilococii sunt coci Gram-pozitivi, nesporulai, necapsulai. Pe frotiu
efectuat din cultur pe mediu solid stafilococii apar dispui n grmezi neregulate
asemntoare cu ciorchinii de strugure. Pe frotiul efectuat din cultur n mediu
lichid sau din produs patologic stafilococii sunt dispui extracelular, n lanuri
scurte, perechi sau coci izolai.
Caractere de cultur
Sunt germeni nepretenioi care pot fi cultivai pe medii nutritive simple, pe
medii complexe ca i pe medii hiperclorurate (Chapman). Mediile se incubeaz
timp de 18-24 ore, la temperatura de 35-37C, n aerobioz.
Crete sub form de colonii S pe medii solide; n medii lichide produce
tulburare uniform cu depozit moderat la fundul tubului.
Stafilococii produc pigment nedifuzibil, care coloreaz doar colonia
bacterian nu i mediul de cultur, de culoare galben-auriu (S.aureus), alb
(S.epidermidis) sau galben-citrin (S.saprophyticus). Pigmentogeneza (caracter
variabil) este mai intens la temperatura camerei i n prezena oxigenului.
Pe mediile cu snge apare hemoliz beta (datorat hemolizinei alfa) sau
cald-rece (datorat hemolizinei beta).
Caractere biochimice i de metabolism
Sunt germeni catalazo-pozitivi, oxidazo-negativi. Fermenteaz glucoza,
manitolul, lactoza, zaharoza etc. cu producere de acid. Hidrolizeaz proteinele
animale native: hemoglobina, fibrina, cazeina, gelatina etc., descompun
fosfolipoproteinele.
Rezistena fa de factorii fizici, chimici, biologici
Stafilococii sunt rezisteni fa de condiiile din mediul extern. Rezist n
culturi, la frigider cteva luni; n puroi uscat2-3 luni. Sunt relativ rezisteni la
antiseptice i dezinfectante (30 la alcool 70; 10 la fenol 2%), la radiaii gamma, la
aciunea coloranilor (violet de genian, fuxina acid, verde malachit etc.). Pot fi
distrui n 60 minute la temperatura de 60C, sunt sensibili la bacteriofagi, la
radiaiile UV.
Urmtoarele produse au efect bacteriostatic asupra tulpinilor de stafilococ:
suc de lmie, mr, ananas, caise, piersici, ciocolat, cacao.
Stafilococii sunt DEOSEBIT DE REZISTENI LA ANTIBIOTICE !!! Peste
95% din stafilococi sunt rezisteni la penicilin. Tulpinile de stafilococi rezistente la
meticilin (oxacilin) sunt tulpini polirezistente exterioriznd rezisten
concomitent fa de cefalosporine, eritromicin, clindamicin. Sunt nc sensibili
G E N U L S TR E PTO C O C CU S
DEFINIIE. NCADRARE. CLASIFICARE
Streptococii sunt coci sferici, pretenioi nutritiv, Gram-pozitivi, care
formeaz perechi sau lanuri n cursul diviziunii celulare. Sunt imobili i
nesporulai, unele specii au capsul. Cresc bine la presiuni reduse ale oxigenului,
unele specii chiar n prezena de 5% CO2. Sunt catalaz i oxidaz negativi,
majoritatea sunt hemolitici. Descompun glucoza cu formare de acid lactic i fr
eliberare de gaz.
Clasificarea familiei Streptococcaceae a suferit numeroase i repetate
remanieri n special dup aplicarea metodelor de biologie molecular.
Clasificarea streptococilor se poate face pe baza mai multor criterii:
a) morfologia coloniilor i .hemoliza produs pe agar snge;
b) specificitatea serologic a substanelor specifice de grup i de tip;
c) reaciile biochimice;
d) rezistena la factori fizici i chimici;
e) diferite caracteristici ecologice.
n activitatea curent se impune utilizarea a 2 criterii de clasificare: aspectul
hemolizei pe agar-snge i clasificarea antigenic Lancefield. O viziune
2. S. agalactiae.
Aparine grupului B Lancefield. Au ca habitat organismul bovinelor, crora
le cauzeaz mastit, i al omului. Sunt membri ai florei normale din tractul genital
feminin (1-40% dintre femei) fiind posibil i portajul faringian (12%) sau intestinal.
Reprezint o cauz important de pneumonie, sepsis i meningit aprute la nounscui. La aduli au fost implicai n infecii post-partum, infecii ale tegumentului,
esuturilor moi, osteomielite aprute la aduli cu imunodeficiene (diabet,
neoplasme, infecie HIV/SIDA). Sunt considerai beta-hemolitici dei produc de
fapt o hemoliz tradus prin zone de hemoliz care sunt doar puin mai extinse
dect coloniile (1-2 mm n diametru). Unele tulpini sunt chiar nehemolitice.
Streptococii de grup B hidrolizeaz hipuratul de sodiu i dau o reacie pozitiv n
testul CAMP.
3.Streptococi grupele C, G.
Streptococcus equi (cai, mgari), Streptococcus dysgalactiae (porci,
bovine, om), Streptococcus canis (variate animale), produc hemoliz beta pe
mediul cu snge, pot cauza angine, infecii grave ale pielii i esuturilor moi,
pneumonii, bacteriemii, meningite, endocardite, artrite septice dei implicarea lor
etiologic n afeciuni umane este nc neclar.
Streptococcus porcinus (porc), specie cu testul CAMP pozitiv, betahemolitic, a fost izolat rar n infecii umane din sfera genital.
Sunt identificai prin reacii cu antiser specific pentru grupele C sau G.
II. Grupul anginosus
Cuprinde specii care au ca habitat organismul uman: Streptococcus
anginosus (grup G, C, A), Streptococcus constellatus (grup C), Streptococcus
intermedius (grup G). Coloniile sunt mici, pulverulente, nconjurate de zon
ngust de hemoliz sau . Fac parte din microbiota oral, intestinal, genital.
Determin infecii purulente ale cavitii bucale, tractului digestiv i genito-urinar,
ale cilor respiratorii superioare, tegumentului, esuturilor moi i osului.
Streptococcus anginosus de grup C a fost izolat ca agent etiologic al faringitelor.
III. Grupul mitis
Reunete specii rezidente ale cavitii bucale i oro-faringiene ale omului,
cunoscute i sub numele generic de streptococi viridans pentru c sunt
hemolitice: Streptococcus mitis, Streptococcus oralis, Streptococcus gordonii,
Streptococcus sanguis etc. Prin leziuni ale mucoasei bucale (ex: extracii dentare)
ptrund n snge cauznd endocardit subacut la pacieni cu leziuni ale
endocardului valvular sau cu disfuncii ale dinamicii sanguine cardiace. Rareori pot
cauza meningit, pneumonie, septicemie.
Tot n grupul mitis este ncadrat i Streptococcus pneumoniae.
Pneumococii sunt alfa-hemolitici, creterea lor este inhibat de optochin i
coloniile sunt distruse de bil i sruri biliare. Pentru a-i marca semnificaia clinic
vom trata separat aceast specie de streptococ.
IV. Grupul salivarius
Cuprinde Streptococcus salivarius i Streptococcus vestibularis, specii
rezidente ale cavitii bucale i oro-faringelui, accidental patogene, cu implicaii
clinice asemntoare cu cele ale streptococilor viridans.
V. Grupul bovis
Are n componen 3 specii gzduite n microbiota intestinal a animalelor
dintre care S.bovis prezint interes medical. S.bovis este izolat de la bovine,
ovine, porci, cini, porumbei de la care se poate transmite accidental la om. Face
parte din streptococii de grup D. Aparine florei normale a colonului. Ocazional
produce endocardit subacut sau bacteriemie la pacienii cu leziuni ale colonului.
Sunt nonhemolitici, PYR-negativi i dau o reacie pozitiv la biI-esculin.
VI. Grupul mutans
Reunete specii care au ca habitat omul i unele animale (hamsteri,
obolani, maimue). Importan n patologia uman au speciile Streptococcus
mutans i Streptococcus sobrinus, rezidente n gur, implicate n formarea plcii
dentare i n cariogenez. Sunt izolate rar de la pacieni cu endocardit subacut.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Sunt larg rspndii n natur, gzduii de om i diverse animale. Unii fac
parte din microbiota indigen a tractului respirator, digestiv i genital; alii sunt
asociai cu afeciuni umane importante datorate parial infeciei streptococice i
parial rspunsului imun al gazdei.
Caractere morfotinctoriale
Streptococii sunt coci gram-pozitivi, sferici sau ovoidali, cu diametrul de
circa 1m. Se divid ntr-un plan perpendicular pe axa lor lung i sunt aranjai n
lanuri a cror lungime variaz i este condiionat de factori de mediu.
Unii streptococi elaboreaz o capsul polizaharidic comparabil cu cea
pneumococic. Cele mai multe tulpini din speciile de grup A, B i C produc
capsule din acid hialuronic. Capsulele sunt mai evidente n culturile tinere i
mpiedic fagocitoza. Pilii streptococici sunt acoperii de acid lipoteichoic i au rol
n aderen.
Caractere de cultur
Cei mai muli streptococi cresc pe medii solide i formeaz colonii mici, cu
diametrul de 1-2 mm. Streptococul piogen beta-hemolitic de grup A, formeaz
colonii punctiforme.
Tulpinile necapsulate formeaz colonii S (glossy), mici, rotunde, opace,
strlucitoare.
Speciile care produc material capsular deseori dau natere coloniilor
mucoide (de tip M), rotunde, strlucitoare, cu tendin la confluare. Acestea devin
colonii matt adic turtite, cu suprafaa mamelonat, contur neregulat (colonii R)
datorit lizrii acidului hialuronic capsular.
Cei mai muli streptococi sunt aerobi, facultativ anaerobi. Necesitile
nutritive variaz mult n funcie de specie. Streptococii implicai n patologia uman
sunt n general germeni pretenioi, necesitnd o varietate de factori de cretere,
motiv pentru care se cultiv pe geloz-snge cu snge de berbec sau de cal.
Pe acest mediu streptococii se pot diferenia n funcie de capacitatea de a
produce hemoliz:
- beta-hemoliz:
o distrugerea complet a eritrocitelor cu eliberarea de hemoglobin;
o reprezint un caracter util n identificarea streptococilor piogeni colonii mici, de tip S, nconjurate de o zon clar de hemoliz, cu un diametru mult
mai mare dect diametrul coloniei;
- alfa-hemoliz (sau hemoliz viridans):
o liza incomplet a eritrocitelor cu formarea de pigment verde;
- hemoliz :
o hemoliza incomplet fr nuan verzuie.
n cazul n care streptococii nu produc hemoliz sunt clasificai drept
streptococi gamma.
Caractere biochimice
Unul dintre caracterele biochimice importante este reprezentat chiar de
producerea hemolizei. Alte caractere biochimice utile i n identificarea
streptococilor sunt: sensibilitatea la vancomicin, la bil, hidroliza esculinei,
tolerana la sare, hidroliza L-pyrolidonyl--naphtylamid (PYR), sensibilitatea la
bacitracin, la optochin i la sulfametoxazol-trimetoprim, producerea unei
proteine difuzibile care acioneaz sinergic cu beta-hemolizina stafilococic
determinnd liza complet a hematiilor din mediul de cultur (testul CAMP) etc.
Rezistena fa de factori fizici i chimici
Pot supravieui n secreii faringiene uscate, la temperatura camerei i
ntuneric timp de cteva sptmni. Streptococul piogen este distrus n 30 de
minute la 56C c ldur umed. Deoarece nu sunt sensibili la aciunea coloranilor
de tipul trifenil-metan, cristalul violet poate fi utilizat n mediile selective. Este
sensibil la antisepticele i dezinfectantele uzuale.
Structur antigenic i caracterele de patogenitate
Streptococii hemolitici pot fi divizai n grupe serologice (peste 18 grupe
serologice notate cu literele mari ale alfabetului, A-U), anumite grupe putnd fi
subdivizate n tipuri pe baza urmtoarelor structuri antigenice:
- polizaharidul C, prezent n structura peretelui multor streptococi, st la
baza gruprilor serologice (grupele Lancefield A-U). Specificitatea serologic a
carbohidratului specific de grup este determinat de un aminozahar, care pentru
streptococii de grup A este rhamnos-N-acetylglucozamin, pentru grupul B
rhamnos-glucozamin polizaharid etc. Induce apariia anticorpilor implicai n
reacii imunologice ncruciate fa de esut conjunctiv i glicoproteine cardiace.
- proteina M, care reprezint cel mai important factor antigenic i de
patogenitate pentru streptococul beta-hemolitic din grupul A. Are specificitate de
tip. Deoarece sunt aproximativ 100 tipuri de protein M, o persoan poate face
infecii repetate cu S. pyogen de grup A de diferite tipuri. Proteina M a fost
identificat i la streptococi din grupul G.
Are structur asemntoare miozinei. Proteina M apare ca o excrescen la
nivelul peretelui celular. Are punct de plecare membrana citoplasmatic, strbate
peretele bacterian, se proiecteaz la suprafaa celulei. Filamentele ce protein M
mpreun cu acizii lipoteichoici alctuiesc o formaiune asemntoare cu pilii.
Acidul lipoteichoic interacioneaz cu gruprile hidrofobe ale celulei gazd iar
proteina M se ataeaz de receptorii specifici celulari, ambele elemente
contribuind la aderena bacteriei de celula gazd (factori de colonizare).
S-a dovedit experimental c atunci cnd proteina M este prezent,
streptococii sunt viruleni. Proteina M mpiedic interaciunea bacteriei cu celulele
fagocitare prin repulsie electrostatic i prin blocarea cii alternative a
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
Streptococcus pyogenes
Diagnosticul de laborator este n mod uzual bacteriologic (direct) i include
n mod necesar recoltarea i transportul (n maxim 2 ore) produsului patologic, cu
examinarea microscopic a acestuia, cultivarea de obicei pe geloz-snge i
identificarea pe baza caracterelor morfologice, de cultur, biochimice i antigenice
a microorganismelor din coloniile izolate. Antibiograma nu este necesar deoarece
streptococii piogeni i menin sensibilitatea la penicilin.
Microscopia este util n cazul prelevatelor normal sterile.
Izolarea se face pe agar-snge, incubat apoi aerob 24 ore. Pentru
prelevatele cu flor de asociaie se folosesc medii selective prin azid de sodiu,
cristal violet, trimetoprim-sulfametoxazol etc.
Identificarea pe baza caracterelor microscopice, culturale i biochimice
trebuie completat cu cea serologic prin reacii de precipitare, latex-aglutinare,
coaglutinare.
Diagnosticul serologic este util atunci cnd se presupune apariia unei stri
de hipersensibilitate i pentru diagnosticul pozitiv al RAA sau al GNA. n ambele
cazuri criteriile de diagnostic sunt mult mai complexe, dar includ i dovedirea prin
metode de laborator a unei infecii streptococice n antecedente.
Metoda cea mai bine standardizat este dozarea anticorpilor anti
streptolizin O (ASLO), pentru zona noastr geografic acceptndu-se ca normal
un titru de 200 (maxim 250) uniti ASLO. Exist teste serologice i pentru
evidenierea prezenei i titrului anticorpilor fa de alte structuri antigenice (de
exemplu streptodornaz, hialuronidaz, streptokinaz).
TRATAMENT
Tratamentul de elecie al infeciilor cu Streptococcus pyogenes este
penicilina iar pentru persoanele alergice la acest antibiotic pot fi utilizate
eritromicina, claritromicina, azitromicina, cefalosporine dar sub controlul
antibiogramei.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Aa cum am prezentat mai sus, muli streptococi fac parte din flora
microbian uman normal i pot fi implicai patologic atunci cnd se stabilesc n
zone ale corpului unde nu se gsesc n mod normal (de exemplu la nivelul valvelor
cardiace).
Sursa de infecie n cazul streptococilor beta-hemolitici de grup A este de
regul o persoan purttoare sau o persoan care are o infecie clinic ori
subclinic. Transmiterea se realizeaz prin picturi de secreie naso-faringian,
saliv, contact cu leziuni cutanate.
Pentru a preveni accidentele legate n special de contaminri i infecii
streptococice n urma interveniilor chirurgicale pe tractul respirator,
gastrointestinal i urinar care conduc la apariia unei bacteriemii, la persoanele
care prezint probleme valvulare cardiace cunoscute se administreaz antibiotice
n scop profilactic.
S TR E P TO C O CC U S P NE U MO NI AE
DEFINIIE. NCADRARE
Streptococcus pneumoniae, ncadrat n grupul filogenetic al MITIS, este
alfa-hemolitic, are ca habitat organismul uman. Se prezint sub form de coci
Gram-pozitivi, alungii, lanceolai, dispui n diplo pe axul longitudinal, nconjurai
de capsul, nesporulai, imobili, aerobi i facultativ anaerobi. Creterea lor este
favorizat n atmosfer de 5% CO2 la o temperatur de 37C. Streptococcus
pneumoniae este principalul agent patogen implicat n etiologia otitei medii i n
alte infecii respiratorii, incluznd pneumonia.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Fac parte din flora normal a tractului respirator superior (n special bucal,
nazal i faringian), frecvena portajului oro-faringian fiind estimat la 30-70%.
Poate coloniza i mucoasa genito-urinar sau intestinul.
Caractere morfotinctoriale
Sunt coci gram-pozitivi, alungii, lanceolai, dispui n general n diplo sau n
lanuri scurte. Tulpinile patogene prezint capsul ce nconjoar o pereche sau un
lan de pneumococi. Sunt imobili, nesporulai.
Caractere de cultur
Pneumococii sunt germeni pretenioi, care nu se dezvolt pe medii simple.
Necesit medii mbogite cu snge, ser, lichid de ascit, glucoz. Sunt aerobi i
facultativ anaerobi, multiplicarea lor fiind favorizat de o atmosfer de 5% CO2 la o
temperatur de 37C.
Pe geloz-snge formeaz colonii de tip R pentru tulpinile necapsulate sau
de tip M pentru tulpinile ncapsulate, nconjurate de o zon de -hemoliz
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
Se bazeaz pe izolarea i identificarea bacteriei din produsul patologic sau
pe depistarea antigenului polizaharidic capsular.
Diagnosticul pneumoniei pneumococice este clinic, radiologic i
bacteriologic (direct). n diagnosticul de laborator bacteriologic sunt deosebit de
importante etapele de recoltare i transportul ct mai rapid al sputei la laborator.
Examinarea microscopic este foarte important pentru c trebuie s
demonstreze calitatea produsului patologic i s realizeze o identificare
prezumtiv a microorganismului implicat pe baza aspectului de diplococi
lanceolai, Gram pozitivi, capsulai. Sputa examinat microscopic nu trebuie s
conin celule epiteliale scuamoase de contaminare oro-faringian i s fie bogat
n fibrin, macrofage alveolare i polimorfonucleare care s fie asociate cu cel
puin 10 perechi de coci lanceolai, Gram pozitivi, capsulai.
Izolarea bacteriei se face pe geloz snge, dup cultivare i obinerea
coloniilor izolate realizndu-se identificarea pe baza caracterelor morfologice, de
cultur, biochimice, antigenice i testarea sensibilitii la antibiotice. Este
semnificativ clinic izolarea a cel puin 106 UFC/ml sput.
Se poate testa patogenitatea tulpinii izolate prin inoculare intraperitoneal la
oarece.
Utilizarea reaciei de umflare a capsulei cu seruri specifice imune ce conin
anticorpi anti-capsulari poate grbi identificarea pneumococilor n sput, n serul
sanguin sau n urin.
TRATAMENT
Streptococcus pneumoniae prezenta o foarte mare sensibilitate la penicilin
pn n anul 1967. Modificrile aprute la nivelul unor structuri enzimatice au
condus la scderea afinitii penicilinelor pentru acestea i la apariia rezistenei
joase iar din 1977-1978 a rezistenei nalte la penicilin.
Tulpinile rezistente la penicilin pot prezenta rezisten i la alte antibiotice,
incluznd macrolide, rifampicina, cefalosporine, cloramfenicol, sulfametoxazoltrimetoprim, clindamicin, tetraciclin, etc.
Antibiograma este astzi strict necesar n infeciile pneumococice,
testarea sensibilitii fa de penicilin fiind realizat cu microcomprimate de
oxacilin de 1 g/ml. Diametrul zonei de inhibiie 20 mm corespunde tulpinilor
sensibile fa de penicilin n timp ce diametrul 19 mm definete tulpini
rezistente. Acestora din urm li se determin CMI care pentru tulpini cu nivel
sczut de rezisten la penicilin este de 0,1-1 g/ml iar pentru cele cu nivel nalt
de rezisten are valoare > 2 g/ml. Tulpinile cu rezisten nalt la penicilin
prezint asociat multirezisten fa de antibiotice i corespund anumitor serotipuri
capsulare de pneumococ: 6, 9, 14, 19, 23, serotipuri care sunt cuprinse n
vaccinurile disponibile actualmente.
EPIDEMIOLOGIE. PROFILAXIE. CONTROL
Infeciile pneumococice evolueaz endemic iar n colectivitile nchise
epidemic, de obicei n paralel cu o epidemie de grip.
Aa cum s-a menionat anterior, exist un numr important de persoane
purttoare de pneumococi viruleni, acetia fiind de fapt sursele de infecie cu
G E N U L E N TE R O C O C C US
DEFINIIE. NCADRARE
Germenii din genul Enterococcus sunt coci Gram-pozitivi, ovali sau cocobacili, dispui izolat, n perechi sau lanuri scurte. Sunt aerobi facultativ anaerobi,
imobili, nesporulai, catalazo-negativi, oxidazo-negativi.
Enterococii au fost iniial inclui n grupa D Lancefield a genului
Streptococcus. n 1984, pe baza diferenelor genetice, prin hibridarea ADN-ADN,
genul Enterococcus s-a separat din genul Streptococcus. n prezent genul
Enterococcus cuprinde 19 de specii dintre care 3 sunt mai frecvent implicate n
patologia uman: E.faecalis, E.faecium i E.durans (tabel).
CARACTERE GENERALE
Habitat
Sunt componeni ai florei comensale a tractului digestiv i genito-urinar, al
omului i animalelor de unde ajung n mediul extern. Pot fi prezeni de asemenea
n tractul biliar ceea ce atest capacitatea lor de a supravieui la concentraii mari
de bil. Supravieuiesc n ap, sol, alimente, insecte.
Caractere morfotinctoriale
Sunt coci sferici, ovalari sau coco-bacilari, Gram pozitivi, dispui n diplo,
lanuri scurte sau izolat. Sunt imobili, necapsulai, nesporulai.
Caractere de cultur
sorboz
sorbitol
arginin
arabinoz
rafinoz
telurit
mobilitate
pigment
zaharoz
piruvat
Grupa I
E.avium
E.malodoratus
E.raffinosus
E.pseudoavium
E.saccharolyticus
Grupa II
E.faecalis
E.faecium
E.casseliflavus
E.mundtii
E.gallinarum
Grupa III
E.durans
E.hirae
E.dispar
E.faecalis
E.faecium
Grupa IV
E.sulfureus
E.cecorum
Grupa V
E.casseliflavus
E.gallinarum
E.faecalis
E.columbae
manitol
Grup / Specii
Hemoliz pe
snge berbec
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
V
V
V
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
V
+
+
+
+
-
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
V
-
NH
+
+
+
+
+
V
+
V
+
-
+
+
+
+
+
-
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
V
+
+
+
+
+
+
+
+
V
+
-
+
+
-
+
-
+
+
+
+
V
+
+
PATOGENIE. BOALA LA OM
Enterococii sunt bacterii condiionat patogene care pot fi implicai etiologic
n:
- Infecii ale tractului urinar, nosocomiale (15%) sau
comunitare, la pacieni cu uropatii obstructive, mai frecvent la brbai vrstnici;
- Ocup locul al III-lea n etiologia endocarditei subacute
- Bacteriemie la vrstnici sau la pacieni cu imunitatea
deprimat;
- Infecii mixte (asocieri cu enterobacterii sau bacterii anaerobe)
ale plgilor chirurgicale sau ale ulcerelor de decubit, peritonite, infecii biliare,
abcese intraabdominale.
Specia mai frecvent implicat n patologia uman este E.faecalis (90%)
urmat de E.faecium (8%). Ocazional au fost izolai din infecii umane tulpini de
E.raffinosus, E.durans, E.casseliflavus, E.avium.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Produsele patologice din care poate fi izolat enterococul sunt urina,
materiile fecale, secreii din plgi etc. semnificaia clinic a prezenei enterococilor
n prelevatele patologice trebuie stabilit cu grij dat fiind uurina cu care
contamineaz prelevatele.
Examenul microscopic este util pentru prelevatele n mod curent sterile.
Izolarea bacteriei se face pe agar cu snge de berbec sau pentru
prelevatele contaminate pe medii selective: agar bil-esculin-azid sau medii cu
supliment selectiv colistin+acid nalidixic pe care sunt inhibate bacteriile Gram
negative.
Identificarea se face pe baza caracterelor microscopice, biochimice.
Identificarea preliminar se face pe baza urmtoarelor reacii pozitive:
testul la bil-esculin; tolerana la 6,5% NaCl, producerea de pyrolidonylarylamidaz, leucinaminopeptidaz, sensiblitate la vancomicin.
Identificarea definitiv are la baz caracterele fenotipice:
- fermentarea zaharurilor util n ncadrarea n grupe i pentru identificarea
speciilor n cadrul grupei;
- hidroliza argininei;
- testul toleranei la telurit;
- testul mobilitii;
- pigmentaia;
- utilizarea piruvatului din mediul de cultur.
- Identificarea unor markeri epidemiologici care permit tiparea i subtiparea
tulpinilor de enterococ:
Metode clasice: bacteriocinotipia, lizotipia, antibiotipia, serotipia;
Metode moleculare: determinarea profilului plasmidic, analiza
endonucleazei de restricie a ADN-genomic, analiza profilului de macrorestricie
prin electroforez n cmp pulsat.
Obligatoriu, dup izolarea i identificarea tulpinii de enterococ se
efectueaz antibiograma testnd antibiotice beta-lactamice, aminoglicozide,
glicopeptide etc. este indicat deteminarea CMI i a producerii de beta-lactamaz
n vederea conducerii unui tratament eficient care s duc la vindecarea
pacientului i totodat s evite selectarea de tulpini rezistente.
TRATAMENT
Tratamentul infeciilor cauzate de enterococi este indicat a se face sub
controlul antibiogramei dat fiind rezistena acestora fa de aciunea substanelor
antibacteriene.
n infeciile urinare poate fi util nitrofurantoina sau fluorochinolonele.
Este util asocierea unui antibiotic cu aciune asupra peretelui celular cu un
aminoglicozid datorit efectului sinergic i bactericid al acestei asociaii.
Pentru tulpinile vancomicino-rezistente sunt disponibile 2 antibiotice noi,
quinuprisin/dalfopristin i linezolid, dei s-au semnalat deja tulpini rezistente i fa
de aceste substane antimicrobiene.
G E N U L P E P TO S TR E P TOC OC C U S I G E N U L
P E P TO CO C CU S
DEFINIIE. NCADRARE
Genul Peptostreptococcus cuprinde numeroase specii: Peptostreptococcus
magnus, Peptostreptococcus asaccharolyticus, Peptostreptococcus anaerobius,
Peptostreptococcus prevotii, Peptostreptococcus micros, Peptostreptococcus
hydrogenalis, Peptostreptococcus tetradius (fosta Gaffkya anaerobia) etc. Este
unicul gen al grupei cocilor Gram pozitivi anaerobi implicat n infecii clinice.
Genul Peptococcus cuprinde o singur specie: Peptococcus niger.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Peptostreptococcus spp. face parte din flora normal a organismului uman
fiind prezent n cavitatea bucal, tractul intestinal, vagin, uretr i pe tegument.
Este izolat cu frecven mare din toate produsele patologice prelucrate i
poate fi implicat n infecii ale diferitelor situsuri ale macroorganismului alturi de
alte microorganisme aerobe sau anaerobe.
Peptococcus niger este gzduit n aria ombilical i vaginal.
Caractere morfotinctoriale
Peptostreptococcus spp. i Peptococcus se prezint sub form de coci
Gram pozitivi de diferite dimensiuni. Peptostreptococcus magnus are diametrul
cel mai mare n timp ce Peptostreptococcus micros este cel mai mic, prezentnd
tendina de a se dispune n lanuri scurte. Peptostreptococcus anaerobius,
Peptostreptococcus productus au form ovalar i sunt dispui n diplo sau n
lanuri.
Peptococcus niger cuprinde coci Gram pozitivi aezai n grmezi.
Caractere de cultur
Pentru a putea cultiva germenii din genul Peptostreptococcus i
Peptococcus pasul cel mai important este recoltarea i transportul rapid i corect
al produsului patologic la laborator. Produsele patologice trebuie obinute
obligatoriu necontaminate avnd n vedere prezena cocilor anaerobi n flora
normal a organismului uman. Important este de asemenea tehnica de cultivare
i mediile de cultur utilizate. Nerespectarea acestor condiii duce la obinerea
unor rezultate false i la concluzia greit conform creia infecia ar fi cauzat
doar de bacterii aerobe.
Cresc lent pe toate mediile neselective incubate 48 de ore la 37C, n
anaerobioz. Sunt inhibate pe mediile selective care conin vancomicin. Coloniile
sunt mici, de tip S, opace, alb-cenuii, nehemolitice cu unele variaii n raport cu
specia.
Peptococcus niger cultiv greu coloniile aprnd dup 96 de ore de la
nsmnare. Sunt mici, de tip S, lucioase, negre sau mslinii devenind cenuii
dup expunere la aer.
Caractere biochimice i de metabolism
Identificarea complet a germenilor din genul Peptostreptococcus i
Peptococcus este dificil din cauza dificultilor de cultivare. Pentru ncadrarea n
gen sunt necesare teste biochimice i metode cromatografice de identificare.
Peptostreptococcus spp. sunt catalaz negativi, descompun fermentativ
zaharurile (cu unele excepii care sunt azaharolitice), descompun peptonele i
aminoacizii cu formare de acid acetic i butiric, mai rar acid caproic, izocaproic i
lactic.
Peptococcus niger este catalaz pozitiv i azaharolitic, descompune
peptonele i aminoacizii cu eliberare de acid butiric i caproic.
Rezistena fa de factorii fizici, chimici, biologici
Marea majoritate a tulpinilor din genul Peptostreptococcus i Peptococcus
sunt nc sensibile fa de cloramfenicol, metronidazol, rifampicin, vancomicin,
fluorochinolone de ultim generaie.
Sunt rezisteni fa de peniciline prin producerea de proteine care leag
antibioticele beta-lactamice. Dup tratamentul cu clindamicin au fost izolate
tulpini care prezentau rezisten indus fa de macrolide-lincosamide.
Caractere de patogenitate
Patogenitatea tulpinilor din genurile Peptostreptococcus i Peptococcus
este asigurat de urmtorii factori:
o Capsula;
Specia
Peptostreptococcus anaerobius
Peptostreptococcus magnus, P.micros
Peptostreptococcus magnus, Peptostreptococcus
micros, Peptostreptococcus asaccharolyticus,
P.vaginalis, P.anaerobius
Peptostreptococcus magnus, Peptostreptococcus
micros
Peptostreptococcus magnus, Peptostreptococcus
micros, Peptostreptococcus anaerobius
P. asaccharolyticus, P.anaerobius, P. prevotii, P.
magnus, P. micros, P. vaginalis, P. tetradius
Peptostreptococcus magnus, Peptostreptococcus
prevotii, Peptostreptococcus asaccharolyticus,
P.vaginalis, P.anaerobius
infecii pleuropulmonare
infecii intraabdominale
infecii ale zonei pelviene feminine
sistem osos
infecii ale pielii i esuturilor moi
bacteriemie
Form clinic
empiem subdural, abces cerebral (ce apar
ca i complicaii ale infeciilor urechii,
mastoidei, sinusurilor, dinilor)
abcese periodontale, parotidit purulent,
abcese peritonsilare i retrofaringeale,
sinusit cronic, mastoidit cronic
pneumonia de aspiraie, abces pulmonar,
mediastinit
peritonit, abces hepatic, abces splenic
endometrit, abces pelvian, abces al
glandelor Bartholin, infecii postoperatorii n
sfera pelvian
osteomielit, artrit
infecii ale arsurilor, gangrena necrozant,
fasceit necrozant, ulcer de decubit,
abcese de sn, rect sau anus etc.
endocardit, abces paravalvular, pericardit
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Fiind germeni foarte pretenioi peptostreptococii sunt greu de izolat
adesea fiind scpai din vedere. Izolarea lor necesit metode speciale de recoltare
i transport a produsului patologic ca i medii i metode speciale de cultivare.
Sunt preferate produsele patologice lichide sau fragmente de organe
recoltate prin puncie. Metoda cea mai indicat de recoltare este cea prin aspiraie
utilizarea prelevatelor pe tampon fiind contraindicat.
Produsele biologice recoltate din situsuri normal sterile (snge, articulaii,
cavitate peritoneal, lichid cefalo-rahidian) sunt recoltate dup antisepsia
prealabil a tegumentului.
Urina este recoltat prin puncie suprapubian. Colecia sinusurilor maxilare
este recoltat prin puncie via fossa canina sau meatul nazal inferior.
Alte produse patologice utilizate n diagnostic sunt coleciile abceselor sau
ale plgilor adnci, recoltate prin puncie, aspirate transtraheale, esut pulmonar
recoltat prin puncie-biopsie, colecia recoltat prin puncia fundului de sac
Douglas etc.
G E N U L NE I S S E R I A
DEFINIIE, NCADRARE
Numele genului Neisseria provine de la cel care a descris pentru prima dat
germenul cauzator al gonoreei, medicul german A.L.S.Neisser.
Familia Neisseriaceae include mai multe genuri: Neisseria, Moraxella,
Acinetobacter, Kingella.
n genul Neisseria, speciile importante pentru patologia uman sunt N.
meningitidis (meningococul) i N. gonorrhoeae (gonococul).
Celelalte Neisserii sunt componente ale microbiotei indigene a mucoasei
buco-faringiene, uro-genitale i conjunctivale, au virulen limitat afectnd gazde
imunocompromise, cauznd:
Meningit N.lactamica; N.mucosa; N.flava;
Endocardit N.mucosa; N.sicca; N.subflava; N.cinerea; N.elongata;
Septicemie N.lactamica; N.subflava;
Osteomielit, artrit, sinuzit, otit medie, bronhopneumonie,
conjunctivit etc.
CARACTERE GENERALE
Habitat
N. lactamica a fost evideniat la 3-40% din persoanele sntoase, la nivel
nazal sau faringian. A fost izolat mai frecvent la copii dect la aduli.
Moraxella catarrhalis: 40-50% din copiii de vrst colar sntoi
adpostesc aceast bacterie ca i component a florei normale a tractului
respirator superior. Poate fi implicat i ntr-o serie de infecii (bronite, pneumonii,
sinuzite, otite, conjunctivite), n special la gazde cu deficiene ale capacitii de
aprare.
Pilina
Efectul biologic
Protein;
Mediaz ataarea la epiteliul mucoaselor umane
(epiteliul vaginal, al trompelor uterine, cavitatea oral)
Interfer efectul uciga al neutrofilelor
Proteina Por
(proteina I)
Porin
Promoveaz
supravieuirea
intracelular
prin
mpiedicarea fuziunii fagolizozozmilor n neutrofile
Proteina Opa
(proteina II)
Proteina de opacitate
Mediaz ataarea ferm la celulele eucariote
Proteina Rmp
(proteina III)
Proteine de legare a
transferinei
Proteine de legare a
lactoferinei
Proteine de legare a
hemoglobinei
LOS
Lipooligozaharid
Activitate de endotoxin
Proteaza IgA1
Distruge IgA1
Nu este cunoscut rolul n virulen
Efectul biologic
Pilii
De natur proteic;
Mediaz ataarea la receptorii
specifici de pe celulele columnare
non ciliate din nazo-faringe
Capsula polizaharidic
Endotoxina LOS
Lipooligozaharid
Activitate de endotoxin
Mediaz
manifestrile
clinice:
afectarea
epiteliului
vascular,
coagularea
intravascular
diseminat etc.
Proteaza IgA1
G E N U L V EI L LON E L L A
DEFINIIE. NCADRARE
Cuprinde urmtoarele specii de coci Gram negativi anaerobi:
- Veillonella alcalescens subsp. alcalescens
- Veillonella alcalescens subsp. criceti
- Veillonella alcalescens subsp. dispar
- Veillonella alcalescens subsp. ratti
- Veillonella atypica
- Veillonella caviae
- Veillonella criceti
- Veillonella dispar
- Veillonella montpellierensis
- Veillonella parvula
- Veillonella parvula subsp. atypica
- Veillonella ratti
CARACTERE GENERALE
Habitat
Speciile de Veillonella fac parte din flora normal a cavitii bucale. Nu sunt
patogene dar adesea sunt confundate n laborator cu tulpini de Neisseria. Cel mai
adesea se izoleaz Veillonella parvula.
Caractere morfotinctoriale
Sunt coci mici, Gram negativi dispui n diplo asemntori cu Neisseria spp.
Sunt imobili, nesporulai.
Caractere de cultur
Cultiv n condiii de strict anaerobioz. Dup 48 de ore de incubare la
37C formeaz colonii transparente sau opac-albe, nehemolitice.
Caractere biochimice i de metabolism
Sunt inerte biochimic. Ocazional unele tulpini pot fi catalaz pozitive,
oxidaz pozitive.
G E N U L AC I NE TO B AC TE R
DEFINIIE. NCADRARE
Genul Acinetobacter cuprinde 19 specii dintre care, mai frecvent implicate
n patologia uman sunt: Acinetobacter baumanii, Acinetobacter lwoffii,
Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus. Acinetobacter calcoaceticus are
ca habitat solul iar Acinetobacter johnsonii face parte din flora normal a
organismului.
Germenii din genul Acinetobacter fac parte din grupul cocobacililor gram
negativi nefermentativi. Sunt strict aerobi, catalaz pozitivi, oxidaz negativi,
nepigmentogeni.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Acinetobacter este un germen ubicuitar n sol i n apele de suprafa. Face
parte din microbiota flotant a tegumentului, este prezent n nazofaringe,
orofaringe, colon, vagin. n spital, tulpini de Acinetobacter au fost izolate de pe
instalaii tehnico-sanitare, aparate de climatizare, mna personalului, n instalaiile
de ap etc. A fost izolat de asemenea din sputa, secreiile tractului respirator,
A.calcoaceticus
A.baumanii
A.haemolyticus
A.junii
A.johnsonii
A.lwoffii
A.radioresistens
Caracterul
+
+
-
+
+
+
+
-
+
d
+
+
+
+
-
+
-
+
d
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
d
d
+
d
+
d
+
+
-
+
d
d
d
+
+
-
+
d
+
d
d
d
-
+
d
+
d
+
+
+
+
+
+
+
+
Cretere la:
44C
41C
37C
Acidifierea glucozei
Hidroliza gelatinei
Hemoliza
Utilizarea:
DL-lactat
DL-4-aminobutirat
Trans-aconitat
Citrat
Glutarat
Aspartat
Azelat
Beta alanin
L-histidin
D-malat
Malonat
Histamin
L-fenilalanin
Fenilacetat
G E N U L BO RD ETE L L A
DEFINIIE, NCADRARE
Numele genului omagiaz bacteriologul belgian J. Bordet care mpreun cu
Gengou, au izolat agentul etiologic al tusei convulsive n 1906.
Genul Bordetella cuprinde cocobacili Gram negativi asemntori celor din
genul Haemophilus, strict aerobi, imobili sau mobili cu flageli peritrich.
Specia tip este reprezentat de B. pertussis agentul etiologic al tusei
convulsive. n afar de B.pertussis, din cele 6 specii ale genului, prezint interes
medical i B.parapertussis, B.bronchiseptica, B.holmesii (tabel VII).
citotoxina
traheal
toxina dermo
necrotic
pili
adenilat
ciclaza
+
+
om
om
+
+
+
+
+
+
B.
holmesii
Bordatella
avium
Bordetella
bronchise
ptica
Bordetella
hinzii
mobilitate
afinitate tract
respirator
gazd
Bordetella
parapertu
ssis
Bordetella
pertussis
+
+
curcani i alte
psri
+
+
+
+
-
hema
glutinina
filamen
toas
pertractina
toxina
pertussis
factor
colonizare
trahee
boala
+
+
+
-
+
-
tuse
convulsiv
tuse
convulsiv
rinit atrofic,
brohopneumonie la porc
coriza
curcanilor
BORDETELLA PERTUSSIS
CARACTERE GENERALE
Habitat
Bordetellele colonizeaz cilii epiteliului respirator al mamiferelor. Cu toate
c se consider c nu are capacitate invaziv studii recente au demonstrat
prezena bacteriei n interiorul macrofagelor alveolare. Este un patogen al omului
i al primatelor superioare nici un alt rezervor nefiind nc identificat.
Caractere morfologice
Pe frotiurile din prelevate patologice sau din primoculturi, B. pertussis, este
un cocobacil gram negativ, cu dimensiunea de 0,5 m / 0,5-2 m, dispus izolat
sau n perechi, mai rar n lanuri scurte. Exist specii imobile (B.pertussis,
B.parapertussis, B.holmesii) i specii mobile (B.avium, B.hinzii, B.bronchiseptica).
Atunci cnd este recent izolat prezint capsul, n primele ore de cultivare
prezint pili ataai de peretele bacterian care dup 24 ore se pot gsi n mediul
de cultur.
Prin treceri succesive pe medii de cultur microorganismul devine pleomorf,
bacilar sau filamentos, lipsit de capsul i pili, dispus izolat sau n pereche, foarte
rar n lanuri.
Se coloreaz bipolar; prezint incluziuni metacromatice la coloraia cu
albastru de toluidin.
Caractere de cultur
Este o bacterie pretenioas nutritiv fiind cultivat pe medii mbogite cu
snge. Poate crete pe medii sintetice care conin sruri, aminoacizi, factori de
cretere (nicotinamida).
Cultivarea se realizeaz greu, B. pertussis fiind inhibat acizi grai, peroxizi
organici etc. fapt care mpiedic dezvoltarea bacteriei pe mediile uzual folosite n
diagnosticul bacteriologic. Pentru cultivare necesit:
o nicotinamid sau acid nicotinic
o substane nutritive aminoacizi, vitamine
o ageni reductori ioni de fier, glutation
o sruri minerale cloruri, fosfai
o neutralizani ai substanelor inhibitoare amidon, crbune activat
o snge.
Cel mai cunoscut mediu de cultur care ofer condiiile necesare cultivrii
este mediul Bordet-Gengou (agar, macerat de cartof, 30% snge defibrinat de
iepure, glicerol i penicilin sau cefalexin). Temperatura optim de incubare este
de 35-37C.
Dup 3-6 zile de incubare la 37C n atmosfer umed i 10% CO2 se pot
dezvolta colonii de tip S mici, convexe, uor transparente, cu strlucire metalic,
foarte aderente, nconjurate de un halou de hemoliz care n lumina transmis
oblic seamn cu picturile de mercur.
La izolare este necesar mediul Bordet-Gengou, ns prin treceri repetate
coloniile pot crete i pe geloz-snge sau pe geloz simpl. n subculturi
microorganismul se va dezvolta mai rapid, coloniile vor fi mai opace i vor aprea
modificri morfologice (pleomorfism), alterri structurale, virulena lor fiind sczut.
Pentru c mediul Bordet-Gengou este eficient doar 1-7 zile de la preparare,
unii autori recomand utilizarea unei geloze cu crbune activat i snge de cal pe
care cultura apare mai repede.
Caractere biochimice
Are metabolism strict respirator niciodat fermentativ. Temperatura optim
de dezvoltare este de 35-37C. Caracterele biochimice i de metabolism utilizate
n identificarea speciilor de Bordetella sunt redate n tabelul VIII.
Aciunea factorilor fizici, chimici
Rezistena n mediul extern este sczut: rezist maximum 2 ore la
temperatura camerei, lumina solar o distruge n 60 de minute, iar la 55C este
distrus n 30 de minute. Este puin rezistent la aciunea dezinfectantelor uzuale
i este sensibil la aciunea macrolidelor, ampicilinei, amoxicilinei,
cotrimoxazolului.
Structura antigenic
Structura antigenic este foarte complex incluznd:
- o hemaglutinin fimbrial de natur proteic;
- aglutinogene de suprafa (K);
- endotoxina.
n afar de aceste antigene mai exist i o serie de substane active cu rol
important n patogenia bolii:
a) toxina pertussis;
b) adenilatciclaza calmodulin-dependent;
c) toxina letal (dermonecrotic);
d) citotoxina traheal;
Bordetella
parapertussis
Bordetella
bronchiseptica
Bordetella
avium
Bordetella
hinzii
Bordetella
holmesii
creterea pe:
agar Bordet-Gengou (zile)
agar Regan-Lowe (zile)
agar Mac Conkey
agar cu pepton:
creterea
pigment brun
beta-hemoliz
mobilitate
catalaza
oxidaza
asimilarea citratului
reducerea nitrailor
ureaza
Bordetella
pertussis
Caractere
3-6
3-6
-
1-3
2-3
+
1-2
1-2
+
2
1-2
+
2
2
+
2
2
+
+
vb
+
-
+
+
+
+
v
- (24h)
+
v
+
+
+
+
+
+ (4h)
+
v
+
+
+
v
-c
-
+
?
+
+
+
+
v
+
+
+
-
Rspuns imun
Dup infecie apar titruri nalte de anticorpi anti-toxina pertussis i antihemaglutinina fimbrial de tip IgA secretori care sunt protectori. Anticorpii formai
fa de componentele toxinei pertussis previn colonizarea celulelor epiteliului ciliat
oferind protecie efectiv.
Titrul anticorpilor anti-toxina pertussis persist timp ndelungat, posibil pe
tot parcursul vieii, fiind corelai cu imunitatea fa de o nou mbolnvire. La
eliminarea bacteriei din plmn intervine i imunitatea mediat celular.
Pentru c subunitatea S3 a toxinei pertussis este capabil s se lege de
suprafaa fagocitelor i pentru c hemaglutinina filamentoas se ataeaz de
integrina CR3 a fagocitelor (receptorul pentru fraciunea C3b a complementului) s-a
speculat c bacteria se leag preferenial de fagocite pentru a facilita propria ei
nglobare. Rolul unei astfel de fagocitri auto-iniiat nu este clar. n orice caz
sunt dovezi c Bordetella pertussis poate utiliza acest mecanism pentru a
ptrunde i a persista n interiorul fagocitelor ca parazit intracelular ceea ce ar
explica de ce imunitatea n tusea convulsiv se coreleaz mai bine cu prezena
limfocitelor citotoxice T dect cu a anticorpilor antibacterieni.
Caractere de patogenitate
PATOGENIE. BOALA LA OM
B. pertussis este patogen numai pentru om. Boala cauzat se numete
tuse convulsiv (tuse mgreasc), boal cu evoluie uoar la adult dar cu rat
de mortalitate mare la copil pn la introducerea vaccinrii obligatorii.
Transmiterea se realizeaz n special pe cale aerian prin picturi nazofaringiene eliminate ntr-un acces de tuse. Contagiozitatea este maxim n primul
stadiu de boal i la nceputul stadiului al doilea (de tuse paroxistic).
Dup o incubaie de 7-10 zile, ncep manifestrile clinice care evolueaz n
dou faze.
Primul stadiu este acela de colonizare al epiteliului respirator, n care
manifestrile clinice sunt asemntoare cu cele ale unei afeciuni respiratorii
uoare (febr, strnut, tuse). Microorganismul ader de epiteliul respirator prin
fimbrii, mecanismele de aderen implicnd intervenia hemaglutininei
filamentoase i a toxinei pertusis. Se multiplic rapid, interfer cu activitatea
mucociliar normal, apar primele manifestri clinice care se agraveaz treptat.
n aceast faz cataral care dureaz 10 zile pacientul este foarte
contagios, elimin prin tuse un numr foarte mare de microorganisme.
Diagnosticul de laborator bacteriologic este posibil prin prelevri cu tampon steril
de la nivelul faringelui sau prin metoda "plcilor tuite". Gravitatea i durata bolii
pot fi reduse dac se face tratament antimicrobian corect, n caz contrar
simptomele se agraveaz treptat.
Faza a doua a (paroxistic) este stadiul toxemic, cu accese de tuse
paroxistic, accese de multe ori tipice (pot fi pn la 30 accese pe zi, mai
frecvente n timpul nopii). Accesul se poate termina cu vom i cu aspirarea
vomismentelor. Pot aprea cianoz, convulsii, anxietate, edem palpebral,
congestie palpebral.
La o parte dintre pacieni nu apar aceste accese paroxistice.
Pe parcursul stadiului toxemic apare i limfocitoza periferic caracteristic,
precum i hipoglicemia.
Datorit obstruciei bronhiolelor mici cu dopuri de secreii mucoase precum
i datorit tusei i inspirului amplu, pot aprea o serie de complicaii pulmonare.
Uneori apar i complicaii la nivelul sistemului nervos central, care pot fi foarte
grave (encefalita pertussis).
n aceast faz Bordetella pertussis este rareori izolat de la pacient iar
tratamentul antibiotic nu influeneaz progresia bolii.
Faza a doua dureaz 2-4 sptmni i este urmat de convalescen, care
se ntinde pe durata a 2-3 sptmni.
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
Diagnosticul de laborator poate fi bacteriologic sau imunologic.
Diagnosticul bacteriologic se poate realiza la bolnav n timpul fazei catarale
i n prima parte a fazei paroxistice precum i la pacienii asimptomatici i contaci.
Produsele patologice recoltate sunt: exsudat nazofaringian, sput, picturi de
secreie traheobronic eliminate n timpul tusei.
Recoltarea secreiei traheobronice poate fi realizat prin metoda "plcilor
tuite": Se expune o plac Petri cu mediul Bordet-Gengou (cu adaos penicilin) la
aproximativ 20 cm n faa gurii bolnavului n timpul accesului de tuse.
Recoltarea se poate realiza i cu ajutorul tamponului din alginat de calciu
pentru
exsudatul
nazofaringian,
bumbacul
inhibnd
dezvoltarea
microorganismelor.
Din produsul patologic se efectueaz un frotiu colorat Gram i un frotiu
tratat cu anticorpi fluoresceni. Imunofluorescena are o sensibilitate de numai
50%, este limitat att de rezultatele fals pozitive ct i de cele fals negative, dar
are ca avantaj rapiditatea diagnosticului.
Coloniile apar pe mediul de cultur n 3-6 zile, maxim 12 zile. Coloniile
suspecte se repic pe mediul Bordet-Gengou i apoi se trece la identificarea lor pe
baza caracterelor morfologice, de cultur i biochimice mobilitatea, catalaza,
oxidaza, utilizarea citratului, reducerea nitrailor, ureaza.
Se trece la identificarea serologic prin reacii de aglutinare pe lam
utiliznd seruri specifice pentru identificarea serovarurilor ca markeri
epidemiologici.
Se poate face identificarea rapid a Bordetellei prin metode
neconvenionale, direct din prelevatul patologic prin reacia de imunofluorescen
direct sau cu sonde de acizi nucleici sau amplificare genic cu amorse specifice
genei care codific toxina pertussis, dar aceste metode sunt costisitoare.
Diagnosticul serologic este de o mai mic importan datorit faptului c o
cretere semnificativ a anticorpilor aglutinani sau precipitani se realizeaz abia
din a treia sptmn de boal, acest fapt avnd mai mult importan pentru
studiile epidemiologice, dect pentru diagnosticarea bolii.
TRATAMENT
Antibioticul de elecie este eritromicina att pentru tratament cr i pentru
profilaxie. Administrarea eritromicinei n faza cataral duce la blocarea multiplicrii
microorganismului, reduce gravitatea simptomelor i are valoare profilactic
diminund perioada n care pacientul este contagios.
Dac nu se poate administra eritromicin este indicat cotrimoxazolul.
Antibioticoterapiei i se asociaz tratamentul simptomatic constnd n
oxigenare, hidratare, administrare de sedative i aspirarea secreiilor.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Boala evolueaz endemic cu o periodicitate de 3-5 ani i sezonalitate de
primvar.
Izvorul de infecie este exclusiv uman reprezentat de bolnavul cu forme
tipice sau atipice de boal. Contagiozitatea este foarte mare, 30-90% din contaci
receptivi putnd face boala.
Transmiterea se realizeaz prin picturi-nucleosoli.
Receptivitatea este natural, general, de la natere. Multe cazuri apar
naintea vrstei de 5 ani, ns majoritatea cazurilor grave apar naintea vrstei de
un an. Boala este mai puin periculoas la aduli, dar la copii rata mortalitii este
destul de mare. Frecvena bolii a sczut dup 1930 odat cu introducerea
vaccinrii.
La noi n ar vaccinarea este obligatorie utilizndu-se vaccinul DTP care
conine anatoxin difteric, anatoxin tetanic i vaccin corpuscular pertussis
inactivat.
n prezent se utilizeaz urmtoarele vaccinuri antipertussis:
- vaccin corpuscular inactiv (suspensie de Bordetella pertussis)
- vaccin acelular combinaii de componente purificate ale
B.pertussis i toxoidul pertussis.
G E N U L BR U CE L LA
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Brucella cuprinde mai multe specii care infecteaz animalele i se
pot transmite omului. Se menine clasificarea n 6 specii acceptate de Bergeys
Manual of Systematic Bacteriology, ed. a 9-a:
Brucella melitensis cu 3 biogrupe (capre, oi), Brucella abortus cu 7 biogrupe
(vite), Brucella suis cu 5 biogrupe (porci), Brucella canis (cini), Brucella neotomae
(obolan), Brucella ovis cu cte un biogrup. Brucella maris este a aptea specie
din genul Brucella care reunete tulpinile izolate de la mamifere marine.
Primele trei sunt principalele specii patogene i pentru om iar a patra este
posibil implicat n patologia uman.
Cu toate acestea, rezultatele testelor de hibridizare ADN-ADN au
demonstrat c tulpinile de Brucella au omologie de peste 90%, deci aparin unei
singure grupe genomice. Aceast observaie contrazice existena celor 6 specii de
Brucella care ar fi de fapt biovaruri ale unei singure specii: Brucella melitensis.
Brucellele sunt cocobacili gram negativi, care se coloreaz frecvent bipolar,
eventual prezentnd capsul. Sunt imobili, nesporulai, strict aerobi, catalaz
pozitivi, oxidaz negativi, relativ inactivi metabolic. Nu produc acizi din carbohidrai
pe mediile care conin pepton. Sunt strict parazii pentru animale, caracteristic
localizai intracelular.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Sunt patogeni primari ai multor animale habitatul principal al brucellelor fiind
reprezentat de organismul infectat. Germenii pot rezista i n mediul datorit unor
mecanisme care le asigur persistena (posibilitatea transformrii n condiii
nefavorabile n forme L).
Caractere morfotinctoriale
Sunt cocobacili gram-negativi, imobili, nesporulai, izolai sau mai rar
prezeni n grmezi neregulate. Se coloreaz bipolar. n produsul patologic sunt
prezeni special intracelular. Cu tehnici speciale de colorare se poate evidenia o
capsul fin. n culturi vechi prezint un mare grad de polimorfism.
Caractere de cultur
Sunt bacterii pretenioase, toate speciile avnd cerine nutritive complexe.
Pentru cultivarea lor este nevoie de medii mbogite cu substane nutritive
(aminoacizi, proteine serice, glucoz, sruri, vitamine, factori de cretere etc.), de
un pH de 6,8 i o temperatur de 34C.
Microorganismele sunt aerobe facultativ anaerobe. Brucella abortus
necesit la prima izolare o atmosfer cu 5-10% CO2.
Cresc lent, mai ales la prima cultivare. Coloniile, iniial de tip S, devin
vizibile dup 2 sau mai multe zile. Trecerea de la forma S la forma R este nsoit
de scderea virulenei.
Aglutinare
cu
anticorpi
Cretere
pe mediu
cu
anti-M
+
+
+
anti-A
+
++
fucsin
+
-
tionin
B.abortus
B.melitensis
B.suis
Ureaz
Necesit
CO2
Produce
H2S
+
+
+
+
-
de
de
i
de
bacteriei. Aceste elemente lipsesc din serul altor specii ceea ce le face
nereceptive fa de infecia cu Brucella.
Cele mai patogene specii sunt Brucella melitensis, urmat de Brucella suis
i de Brucella abortus.
Brucellele sunt microorganisme parazite pentru o serie de animale sau
pentru om, capabile s determine infecii acute, cronice sau infecii inaparente.
Dintre animalele de laborator, cobaiul pare s fie animalul cel mai constant
sensibil. Cronicizarea depinde de capacitatea de multiplicare n celule fagocitare.
Au afinitate pentru placenta i esuturile fetale ale animalelor receptive
avnd capacitatea de a metaboliza un hidrocarbonat (eritritol) prezent n aceste
structuri. La animalele gestante provoac avort, dup care infecia se localizeaz
la nivelul glandei mamare, Brucella eliminndu-se timp ndelungat prin lapte.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Bruceloza este o zooantroponoz. La animale bruceloza are evoluie
asimptomatic, cu afectarea aparatului genital la femel nsoit de avort i cu
leziuni testiculare la mascul. Boala este caracteristic pentru ovine, caprine,
bovine, porcine dar poate afecta i alte animale domestice care vor prezenta
simptomatologie necaracteristic. n formele latente de infecie caprele, oile sau
vacile elimin Brucella prin lapte. Brucella este eliminat i prin urin, secreii
produse de sarcin (placent, lichide fetale, avortoni).
Bruceloza este o boal specific animalelor, omul contaminndu-se
accidental. Poarta de intrare este tractul digestiv sau tegumentul lezat, mai rar
bacteria ptrunznd prin conjunctiv sau pe cale respiratorie.
De la poarta de intrare, microorganismul trece n ganglionii limfatici
regionali unde se multiplic, apoi prin ductul toracic ajung n snge rspndinduse i localizndu-se n sistemul reticulo-endotelial al organelor parenchimatoase i
ale sistemului osos. Aici, ca patogeni intracelulari, declaneaz o reacie
inflamatorie cu constituirea de noduli granulomatoi cu tendin de abcedare.
Incubaia este n medie de 2-3 sptmni (maxim 1-6 sptmni), ns
uneori pot trece cteva luni ntre momentul infectrii i apariia fenomenelor
clinice.
Debutul este de obicei insidios, manifestat prin astenie, indispoziie,
cefalee, artralgii, febr moderat, transpiraii abundente.
n perioada de stare simptomele sunt polimorfe, bruceloza fiind una din
bolile extrem de greu de recunoscut clinic. Febra ondulant (care crete n cursul
dup amiezei i scade n timpul nopii) nsoit de frisoane are mai mult o valoare
istoric, n realitate, curba febril are un aspect variabil: ondulat, neregulat,
remitent i intermitent. Transpiraiile abundente nocturne, cu un miros
caracteristic, astenia, durerile sub diverse forme reprezint elemente comune n
cursul bolii.
S-au descris circa 200 de semne clinice care pot apare n bruceloz.
Durata bolii poate fi de 3-4 sptmni, dar cel mai frecvent depete 3
luni, ajungnd n formele cronice la ani de zile. n formele cronice diagnosticul se
stabilete foarte dificil. n formele cronice ale bolii, din focarele de infecie se
descarc periodic germeni n torentul sanguin unde sunt prezeni anticorpi
bactericizi anti-Brucella. Distrugerea unui numr mare de microorganisme n urma
reaciilor antigen-anticorp cu eliberarea de endotoxin poate cauza stri de oc
endotoxinic.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
n realizarea diagnosticului se pornete de la aspecte clinice i
epidemiologice, ns diagnosticul de laborator este esenial, reprezentnd unica
metod cert de diagnostic.
Metodele de diagnostic amintite au utilitate n raport cu stadiul de evoluie al
bolii (tabel X).
n cadrul diagnosticului bacteriologic, produsele patologice sunt
reprezentate de snge, mduv osoas, material recoltat prin puncie hepatic,
splenic sau ganglionar, urin, bil, lapte, materiale necroptice etc., n funcie de
localizarea procesului infecios.
I. Diagnosticul direct
1. Microscopia direct i chiar coloraia imunofluorescent rmne
frecvent negativ.
2. Izolarea bacteriei impune utilizarea mediilor speciale, bogate n
substane nutritive, a mediilor bifazice pentru hemoculturi. Pentru produsele
patologice bogate n flor de asociaie mediile sunt suplimentate cu amestecuri
selective. Incubarea se face aerob n atmosfer de 10% CO2, timp de 10 zile (3
sptmni pentru hemoculturi), timp n care culturile sunt urmrite zilnic.
3. Identificarea bacteriei se bazeaz pe caracterele de cultur, pe aspectul
microscopic al culturii, pe teste biochimice preliminare i pe aglutinarea pe lam
cu seruri anti-brucella forma S:
o fermentarea glucozei i lactozei prin metode clasice;
o producerea de oxidaz;
o hidroliza semicantitativ a ureei.
Testele specifice de identificare sunt efectuate n laboratoare speciale:
o producere de H2s;
o necesitatea CO2;
o creterea n prezena tioninei i fucsinei bazice;
o aglutinarea cu antiseruri monospecifice;
o sensibilitatea la fagul Tbilisi;
o sonde ADN.
II. Diagnosticul indirect
1. Diagnosticul serologic cuprinde aglutinarea pe lam (Huddleson,
reacie calitativ, de screening) care trebuie confirmat prin cuantificarea
aglutininelor anti-Brucella n tuburi (reacia de aglutinare Wright). Se preleveaz
cantitatea necesar de snge naintea efecturii intradermoreaciei cu
brucelin/melitin. Fiecare reacie utilizat n serodiagnostic identific anumite
categorii de anticorpi i de aceea rezultatele obinute pot fi discordante.
n primele sptmni ale infeciei crete titrul anticorpilor de tip IgM. Acest
titru rmne ridicat n infecia cronic i poate persista pn la 2 ani chiar dup
tratamentul antimicrobian eficient.
Anticorpii de tip IgG apar la 3 sptmni de la infecie, ajung la valori
maxime la 6-8 sptmni i persist pe toat durata infeciei latente.
Dup stadiul subacut al infeciei, persistnd ani de zile n infecia cronic i
latent, apar anticorpi tip IgA (anticorpi blocani) care interfereaz activitatea
aglutinant a anticorpilor IgM i IgG. Din acest motiv dup stadiul acut al
brucelozei diagnosticul serologic este dificil ntruct se obin deseori rezultate fals
negative prin reacia Wright. Anticorpii tip IgA se evideniaz prin testul de blocare
sau testul Coombs.
G E N U L FR AN C I S EL L A
DEFINIIE, NCADRARE
Francisella tularensis, agentul etiologic al tularemiei, a fost izolat n 1911
de Mac Coy i Chapin n regiunea Tulare din California. A fost descris pentru
prima dat n 1907 la om i n 1912 la roztoare. n 1919 Edward Francis descrie,
n SUA, primele cazuri de tularemie uman. Numele genului amintete de Edward
Francis care a studiat bacteria i boala iar numele speciei deriv de la Tulare
Country, California.
Microorganismele din genul Francisella sunt minusculi cocobacili Gram
negativi, la limita vizibilitii cu microscopul optic, aerobi, facultativi anaerobi,
pleomorfi, imobili, fr pili, cu o capsul fin de natur lipidic.
Produc tularemia, o boal infecioas a unor specii de animale (mai ales
roztoare), care poate fi transmis accidental pe diferite ci la om. Tularemia este
o zooantroponoz. Specia Francisella tularensis reprezint singura specie a
genului important pentru patologia animal i uman i singura specie dintre cele
3 ale genului care a fost izolat n Romnia.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Are larg rspndire n natur. A fost izolat de la mamifere, psri,
artropode, animale domestice, precum i din ap, noroi sau fecalele animalelor.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Diagnosticul de laborator bacteriologic este dificil, cu mari riscuri de
infectare a personalului de laborator. Manipularea produselor biologice infectate i
a tulpinilor de Francisella tularensis izolate este periculoas. De aceea
diagnosticul bacteriologic direct n tularemie se practic n laboratoare speciale, cu
dotri de securitate antiepidemic, de ctre personal instruit, care are obligaia de
a purta echipament special de protecie, masc i mnui.
Diagnosticul direct
Pentru diagnosticul bacteriologic produsele patologice sunt raclatele din
ulcerele cutanate, aspiratul ganglionar, spltura gastric, sputa, sngele.
Recoltarea acestora trebuie fcut ct mai repede dup ridicarea suspiciunii de
tularemie ntruct dup supurarea bubonului bacteria dispare rapid i nu mai poate
fi depistat.
Pentru
examinare
microscopic
se
procedeaz
la
coloraie
imunofluorescent.
Izolarea pe medii de cultur nu este o metod sensibil de diagnostic.
Cultivarea germenului este dificil. Mediile de cultur rmn adesea sterile chiar
dac produsul patologic este inoculat n mediu n condiii optime. Dac se
reuete izolarea tulpinii de Francisella pe cultur, identificarea se realizeaz prin
reacie de aglutinare pe lam cu ser imun specific sau prin inoculare la animal de
laborator.
Mai util este inocularea percutan a produsului recoltat la oarece sau
cobai. Animalele vor fi sacrificate dup 6-10 zile, autopsiate. Bacteria se
evideniaz pe frotiuri din snge, pe amprentele din splin, ficat, peritoneu colorate
cu coloraia Giemsa. Se poate face i izolarea bacteriei pe medii de cultur
speciale.
Diagnosticul serologic se poate practica i n laboratoarele unde nu se
pot realiza condiiile de securitate antiepidemic sau cnd nu se poate realiza
izolarea bacteriei pe mediul de cultur.
Se practic aglutinarea n tuburi, hemaglutinarea sau reacii de tip ELISA.
Din a 7-a zi de boal pot fi depistai anticorpi anti-Francisella tularensis de
tip aglutinine care ating un nivel maxim la 4-8 sptmni i pot persista n titruri
dozabile timp de mai muli ani.
Suspiciunea de tularemie este susinut de titruri de peste 1:80. Titruri ntre
1:20 i 1:80 sunt decelate muli ani dup infecie.
Confirmarea infeciei tularemice se face prin prelucrarea a dou probe se
snge recoltate la interval de 2 sptmni, n vederea evidenierii prezenei
anticorpilor, a titrurilor i a evoluiei lor n dinamic. O cretere a titrului de cel puin
4 ori la a doua recoltare confirm o infecie recent.
Un titru mai mare de 1:160 la un singur ser recoltat n convalescen poate
sugera diagnosticul n context clinic i epidemiologic.
Trebuie reinut posibilitatea unor reacii ncruciate cu Brucella sau cu
Yersinia enterocolitica O:3.
Diagnosticul se mai poate clarifica prin intradermoreacia la tularin care se
pozitiveaz dup a 5-a zi de boal. Aceat reacie depisteaz sensibilitatea de tip
ntrziat care persist ani de zile la fotii bolnavi.
TRATAMENT
Aminozidele, ciclinele, cloramfenicolul, fluorochinolonele sunt active in vitro
pe tulpinile de Francisella.
Antibioticul de elecie este streptomicina. Gentamicina pare a fi la fel de
eficace. Pot aprea recderi. Pot fi folosite i tetraciclina i cloramfenicolul, dar
recderile sunt mai frecvente, mai ales dac tratamentul este ntrerupt prematur.
Multiplicarea intracelular a F. tularensis creeaz dificulti n vindecarea
tularemiei.
Tratamentul antibiotic precoce este eficient n timp ce antibioticoterapia
aplicat n stadiul tardiv, dup abcedarea bubonului nu mai are sens. n aceast
faz este indicat tratamentul chirurgical al leziunii.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE I CONTROL
Tularemia exist n multe ri, cu precdere n emisfera nordic evolund
sporadic sau n epidemii.
Sursa de infecie o constituie animalele slbatice i domestice infectate cu
F.tularensis. Afecteaz iepurii de cas i slbatici, roztoarele slbatice mici,
cprioara, porcul mistre. Animalele domestice cum ar fi cinele i pisica sunt doar
purttoare ale bacteriei. Transmiterea germenului ntre animale se realizeaz prin
intermediul cpuelor, nepturii de insecte, canibalismului.
Infecia uman este accidental, transmiterea agentului patogen de la
animalul bolnav la om se face printr-una din urmtoarele ci:
o
contactul direct cu animalele
bolnave sau cu produsele lor (jupuire, tranare),
agentul ptrunznd uor prin tegumente sau mucoase;
dup muctura de animal;
o
pe cale digestiv, prin ingestia de ap sau alimente
contaminate;
o
prin intermediul unor artropode hematofage: cpue, mute,
nari, plonie;
o
pe cale respiratorie, prin aerosoli (foarte rar).
Boala are caracter profesional survenind la persoane care vin n contact cu
animalele bolnave: vntori, paznici de vntoare, muncitori forestieri, pdurari,
agricultori, cresctori de animale, mcelari. n unele ri 90% din cazurile de
tularemie apar prin contact cu iepurii slbatici infectai.
Boala apare mai frecvent n perioada sezonului de vntoare dar persist i
n afara acestei perioade. Aceast situaie se explic prin braconaj dar i prin
manipularea de carne de vnat congelat ntruct Francisella este rezistent la
congelare.
Pentru c nu exist un control al circulaiei acestei bacterii n natur,
singura metod nespecific de profilaxie const n evitarea contaminrii. Ca
profilaxie specific se poate face imunizare prin administrarea intradermic a unui
vaccin viu atenuat la persoanele cu risc crescut. Persoanele vaccinate nu sunt
protejate complet dar n caz de infecie vor face o form mai uoar de boal.
Rspunsul imun umoral persist 3-5 ani iar cel celular ani de zile dup vaccinare.
G E N U L P AS TE U R E LL A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Pasteurella cuprinde specii responsabile de boli ale animalelor,
transmise ocazional omului. Aceste bacterii au un istoric interesant, o taxonomie
n continu schimbare i o patogenie complex.
n 1879 Toussaint i apoi Pasteur au reuit s cultive bacilul holerei
ginilor demonstrnd etiologia microbian a bolii. Louis Pasteur este cel care a
identificat una din speciile genului ca agent etiologic al holerei ginilor preparnd
un vaccin mpotriva acestei maladii. Pentru aceasta, n 1887 Trevisan propune ca
genul din care face parte bacteria respectiv s se numeasc Pasteurella.
Microbii din genul Pasteurella sunt cocobacili Gram negativi, pleomorfi,
imobili, nesporulai.
Specia tip este reprezentat de P. multocida. Interes medical prezint i
Pasteurella haemolytica, Pasteurella dagmatis, Pasteurella ureae.
PASTEURELLA MULTOCIDA
CARACTERE GENERALE
Habitat
P. multocida poate fi izolat de la nivelul cilor aero-digestive superioare al
animalelor slbatice i domestice, importante surse de infecie pentru om fiind
pisica i cinele. Persoanele care vin n contact strns cu aceste animale pot fi
purttoare nazo-faringiene ale bacteriei.
Caractere morfotinctoriale
Este un cocobacil Gram negativ, colorat bipolar, imobil, nesporulat, poate fi
capsulat.
Caractere de cultur
Bacteria se dezvolt la 37C pe medii de cultur obinuite n aeroanaerobioz. Sunt aerobi facultativ anaerobi Creterea este stimulat dac mediul
conine i snge sau ser. Pe agar coloniile sunt de tip S, mici, rotunde,
neuniforme, bombate, semitransparente, cu opalescen albstruie. Pe gelozsnge coloniile sunt mici, cenuii, nehemolitice. Dup repicare coloniile pot deveni
de tip R. Tulpinile de origine uman, capsulate, formeaz colonii mari, mucoide,
de tip M.
Caractere biochimice
P. multocida posed oxidaz, catalaz i nitrat-reductaz dar nu produce
lizin-decarboxilaz i nici arginin-dezaminaz.
Fermentarea zaharurilor este corelat cu tipul antigenic i cu originea
tulpinii. Fermenteaz glucoza, zaharoza, xyloza, arabinoza i manitolul, nu i
G E N U L H AE M OP HI L U S
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Haemophilus reunete un grup larg de cocobacili polimorfi, imobili,
nesporulai, Gram negativi, aerobi i facultativ anaerobi i carboxifili.
Le place s creasc pe medii cu snge pentru c aceste medii le ofer doi
factori de cretere de care multe specii de Haemophilus au strict nevoie:
- factorul X (hemina, feroprotoporfirina) component termostabil, rezist
45 minute la 120C, este prezent n snge i n derivatele sale cu hemin;
- factorul V component termolabil, rezist 15 minute la 90C. Eliberat din
hematii, este distrus repede de pirofosfataza i ADN-aza prezente n sngele de
om, oaie, capr, bovin. Este alctuit din coenzime din clasa dehidrogenazelor
care sunt prezente n globulele roii, n esuturile animale i vegetale i n
majoritatea bacteriilor (stafilococ, enterococ, E.coli, levuri etc.). n componena sa
intr:
o fie
din
nicotinamid-adenin-dinucleotid
(NAD)
sau
diphosphonucleotid (DPN) sau coenzima I
o fie din nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat (NADP) sau
triphosphonucleotid (TPN) sau coenzima II
Specia care necesit pentru cretere numai factorul V primete la denumire
prefixul para (H.parainfluenzae).
Mediile de cultur care permit izolarea tulpinilor de Haemophilus trebuie s
conin, n funcie de specie, fie factor X, fie factor V fie ambii factori n concentraii
cuprinse ntre 0,5 25 mg/ml de mediu, n funcie de specia de Haemophilus.
Pentru c sngele proaspt conine o DNA-z i pentru c factorul V este prezent
intraglobular i nu va putea migra n mediu, este necesar nclzirea moderat a
sngelui (75C). La aceast temperatur DNA-za este distrus, eritrocitele se rup
i elibereaz hemina care este termostabil i factorul V care rezist la
temperaturi de pn la 90C.
Mediile utilizate pentru izolarea speciilor de Haemophilus sunt:
- geloza chocolat;
- geloza Fildes obinut prin adugarea n mediu a extractului Fildes
(extract care conine factorii X i V eliberai din sngele de berbec prin digestie
peptic) este un mediu transparent;
- geloza Levinthal;
- Haemophilus Test Medium (HTM) etc.
Unele bacterii cum este Staphylococcus aureus produc o cantitate mare de
NAD. Se poate obine o cultur de Haemophilus pe geloza snge (care furnizeaz
factorul X) de-a lungul unui striu de cultur de Staphylococcus aureus care
furnizeaz factor V. Acest fenomen se numete satelitism.
Pentru a mpiedica dezvoltarea microorganismelor de contaminare mediile
pot fi suplimentate cu substane antibiotice: bacitracin, vancomicin, lincomicin,
oxacilin etc.
Din punct de vedere medical sunt importante speciile pe care omul le
adpostete n patru ecosisteme: faringe, cavitatea bucal, placa dentar i
sporadic intestinul i aparatul uro-genital.
Haemophilus influenzae este, de departe, specia cel mai frecvent implicat
n infecii umane, n special la copii.
Celelalte specii izolate de la om sunt comensale oportuniste care pot fi
implicate ocazional n infecii din sfera oto-rino-laringian sau, la pacieni
imunodeprimai, n septicemie sau endocardit: Haemophilus aegyptius,
H.ducreyi, H.haemolyticus, H.parainfluenzae, H.aphrophilus, H.parahaemolyticus,
H.paraphrophilus, H.segnis H.paraphrohaemolyticus,.
Haemophilus ducreyi i Haemophilus aegyptius sunt patogeni ai
mucoaselor genito-urinar respectiv conjunctival i nu au fost izolai de la
persoane sntoase.
Haemophilus nu se gsete liber n natur.
Clasificarea speciilor de Haemophilus ine cont de exigenele de cretere i
de caracterele biochimice (tabel XI).
Factor V
oxidaza
catalaza
ureaza
indolul
H.influenzae
H.haemolyticus
+
+
+
+
+
+
+
+
(+)
(+)
(+)
+ sau -
H.parainfluenzae
H.paraphrophilus
H.segnis
+
+
+
+
+
-
+ sau -
(-)
-
H.aphrophilus
H.haemoglobinophilus
H.ducreyi
+
+
+
+
-
+
(+)
-
+
-
Specia
Factor X
HAEMOPHILUS INFLUENZAE
A fost considerat GREIT ca agentul etiologic al gripei n pandemia de
grip din anii 1890-1892. Numele bacteriei amintete permanent aceast
ASOCIERE GREIT: haima = snge; philios = iubitor; influenza = grip (bacterie
iubitoare de snge care determin gripa). A fost observat n 1890 i izolat n 1892
de Pfeiffer motiv pentru care se mai numete i bacilul lui Pfeiffer.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Colonizeaz mucoasa tractului respirator uman la 75% din copii i la 40%
din aduli. Poate coloniza i mucoasa conjunctival precum i tractul genital la 3080% din persoanele sntoase.
Caractere morfologice
n produsul patologic germenii sunt prezeni sub form de cocobacili Gram
negativi, mici (1-1,5 / 0,3 m) sau bacili scuri, drepti, cu capete rotunjite, uneori
dispui n lanuri scurte.
Pe frotiul efectuat din culturi n medii bogate, la 6-8 ore, predomin formele
cocobacilare, care au i capsul. Pe frotiul din culturile vechi bacteria se
caracterizeaz prin pleomorfism; se pierde capsula ceea ce creaz probleme de
diagnostic diferenial microbiologic.
Caractere de cultur
Se cultiv pe mediile amintite mai sus, Haemophilus influenzae necesitnd
pentru iniierea creterii 5-10% CO2, atmosfer umed, temperatur de 35-37 C,
i un pH = 7,6. Durata incubrii este minim 24-48 de ore. Prezint fenomenul de
satelitism.
Pe geloz chocolat crete sub form de colonii cenuii, opace sau
transparente, netede, cu margini bine delimitate asemntoare cu picturile de
rou (de condens), care ating 1-3 mm abia dup 36-48 ore. Tulpinile capsulate
formeaz colonii mucoide cu tendin de confluare.
Pe geloz-snge cu infuzie de inim-creier apar colonii mici, rotunde,
convexe, de tip S, care n primele 24 ore prezint irizaii puternice, caracteristice.
Nu apare hemoliz.
Pe mediile transparente (geloza Fildes, geloza Levinthal, mediul HTM etc.)
coliniile sunt rotunde, convexe sau conice, transparente sau albastru-verzui.
Caractere biochimice i de metabolism
Sunt germeni aerobi - facultativ anaerobi i carboxifili. Posed o catalaz i
o oxidaz, 70% din tulpini sunt indol pozitive. Fermenteaz slab i inconstant
carbohidraii: descompune glucoza, maltoza, xiloza, nu descompune lactoza i
zaharoza. Pe baza unor teste biochimice specia a putut fi mprit n 8 biotipuri
numerotate de la I la VIII. Biotipul I este cel mai frecvent izolat.
- meningita Este mai frecvent la copii mici (3-30 luni). Este precedat
de infecii ale cilor respiratorii superioare sau oto-rino-laringologice, urmate de
stare septicemic.
- epiglotita Este mai frecvent la copii mari (2-7 ani). Debuteaz brusc,
are un tablou clinic impresionant cu semne generale de septicemie i grave
dificulti respiratorii.
- stri septicemice Caracterizate prin temperatur ridicat, frisoane
nsoite sau nu de semne de localizare a infeciei: artrit, otit, pericardit,
pneumonie etc.
- infecie neonatal generalizat Se datoreaz contaminrii nounscutului n timpul naterii i are evoluie sever.
Tulpinile necapsulate de Haemophilus influenzae au fost izolate din diferite
infecii: otite medii acute, infecii bronhopulmonare, conjunctivite.
La adult tulpinile izolate din infecii sunt de obicei necapsulate, cauznd:
- infecii respiratorii Sunt cele mai frecvente, Haemophilus influenzae
determinnd instalarea unei brohopneumonii pe fondul unei bronite cronice sau a
unei pneumonii adesea nsoit de bacteriemie.
- meningit La adult meningita cu Haemophilus influenzae este rar i
apare n special la persoane cu vrste naintate.
- Mai rar pot fi identificate diverse localizri ale infeciilor cu Haemophilus
influenzae la adult: articular, osos, oto-rino-laringologic, ocular, genito-urinar.
Importante sunt infeciile puerperale sau localizrile vaginale ale bacteriei care pot
cauza infecii ale nou-nscutului.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Pentru diagnosticul de laborator al infeciilor cauzate de Haemophilus
influenzae se recolteaz snge, LCR, sput, lichid recoltat prin puncie
intraarticular, secreii otice care trebuie transportate urgent la laborator.
Examenul direct al produsului patologic fie sub forma unui frotiu colorat
Gram fie dup coloraie imunofluorescent poate optimiza diagnosticul.
Un diagnostic rapid poate fi obinut prin evidenierea antigenelor solubile
prezente n LCR, ser, urin cu ajutorul testului de latexaglutinare. Pentru
realizarea unui diagnostic rapid al meningitei cu Haemophilus, se poate face
contraimunoelectroforeza pornind de la LCR.
Pentru cultivare este de preferat nsmnarea produsului patologic imediat
dup recoltare, germenul fiind foarte sensibil n mediul extern. Se folosete geloza
chocolat sau un mediu selectiv cu antibiotice, se incubeaz la 36C timp de 24-48
de ore. Coloniile sunt mici, albe sau cenuii, mucoase dac tulpina este capsulat.
Identificarea se face pe baza morfologiei i a exigenelor de cretere. Se
practic testul de satelitism sau se pot utiliza discuri impregnate n factor V, factor
X, i asociere de factor V+X. Haemophilus influenzae nu va crete n jurul discului
V+X.
Studiul caracterelor biochimice (producerea de indol, ornitindecarboxilaza,
ureaza) permit ncadrarea n biotipuri iar reaciile de aglutinare pe lam cu seruri
imune specifice stabilesc serotipul tulpinii sau prezena capsulei.
n final se realizeaz testarea sensibilitii la antibiotice (antibiograma).
TRATAMENT
Multe din tulpini sunt sensibile la ampicilina, dei 25% produc lactamaze
sub control plasmidic i din 1980 este cunoscut rezistena la ampicilin prin
modificarea proteinelor de legare a penicilinelor ceea ce determin creterea CMI
pentru toate -lactaminele. Multe din tulpini sunt susceptibile la cloramfenicol.
Importana tratamentului bine deriv din faptul c peste 90% din copiii cu
meningit cu Haemophilus influenzae netratat decedeaz i sunt posibile
implicri ulterioare neurologice i intelectuale.
Infeciile grave sunt tratate parenteral cu ceftriaxon sau cefotaxim.
Tratamentul celorlalte tipuri de infecii este util s se fac sub controlul
antibiogrameii al detectrii beta-lactamazelor.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Rezervorul de infecie pentru Haemophilus influenzae este strict uman.
Haemophilus influenzae tip b are ca rezervor de infecie bolnavii sau purttorii
sntoi de la care se transmite pe cale aerian, prin picturi Flgge, interuman.
Infeciile sub vrsta de 2 luni sunt extrem de rare, copilul fiind protejat de
anticorpii materni, dar peste aceast vrst copilul este obligatoriu contaminat
dat fiind rata mare a portajului asimptomatic de Haemophilus influenzae n
populaie.
Receptivitatea este general boala fiind dependent de vrst i de factori
legai de gazd: deficit de complement, splenectomie, imunosupresie, alcoolism,
boli pulmonare cronice etc.
Infeciile cu Haemophilus influenzae sunt mai frecvente iarna, n colectiviti
nchise sau aglomerate, cu condiii de igien precare.
Profilaxia specific se realizeaz prin vaccinare sau/i n anumite situaii
prin chimioprofilaxie (rifampicin).
HAEMOPHILUS DUCREYI
Haemophilus ducreyi este agentul patogen al ancrului moale, maladie
venerian specific uman, frecvent n zonele tropicale i subtropicale. Dei este
ntlnit n toat lumea, boala are inciden mic n rile industrializate. Incidena
raportat poate fi pus sub semnul ntrebrii innd cont de dificultatea
diagnosticului bacteriologic al infeciei.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Este strict patogen pentru specia uman, gsindu-se uneori n leziunile
bolnavului. Se dezvolt intra- i extracelular, este facultativ anaerob.
Caractere morfologice
Este un bacil scurt, Gram negativ, colorat bipolar, dispus n perechi sau
lanuri paralele.
Caractere de cultur
Crete optim pe medii care au factorul X, pe geloz chocolat cu adaos de
vancomicin i polimixin, pe geloza cu snge de iepure i ser fetal de viel,
incubate la 33-35C i n atmosfer de 10% CO2. Este un germen facultativ
anaerob. Coloniile apar trziu, dup 72 de ore, sunt mici, netede, cenuii,
lucioase, nconjurate de hemoliz beta pe geloza snge.
Aciunea agenilor fizici i chimici.
Prezint sensibilitate la aciunea cldurii, uscciunii i dezinfectanilor
obinuii. Este sensibil la ampicilin, cloramfenicol, rifampicin, biseptol,
eritromicin dar poate dezvolta rezisten fa de antibiotice.
Structur antigenic
Toate tulpinile posed un antigen identic cu capacitate sensibilizant
precum i antigenul O.
PATOGENITATE. BOALA LA OM
Este strict patogen pentru om cauznd ancrul moale, o boal cu
transmitere sexual. Haemophilus ducreyi produce o toxin cu efect citocid care
pare a fi responsabil de manifestrile toxice ale infeciei.
Dup 5-7 zile de la contactul sexual infectant, n regiunea genital apare
iniial o papul sensibil, cu eritem n jur, care se transform n pustul i apoi n
eroziune care ulcereaz. Leziunile sunt dureroase, nconjurate de eritem i edem.
Leziunea sngereaz uor la atingere. ancrul poate fi singular (mai ales la
brbat) sau multiplu (n special la femeie), fiind raportate pn la 10 ulceraii la un
pacient.
Ganglionii regionali, unilateral, sunt mrii, dureroi i pot supura. Nu sunt
depite limfaticele nvecinate. Diagnosticul diferenial trebuie fcut cu sifilisul,
infecia cu herpes simplex, limfogranulomatoza venerian.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Produsul patologic destinat examenului bacteriologic se obine prin raclarea
secreiei de sub marginea ancrului i prin recoltarea de puroi din abces.
Pe frotiul din produs patologic Haemophilus ducreyi apare ca bacili fini,
gram negativi, dispui n perechi sau lanuri asemnate cu bancurile de peti,
frecvent n asociere cu alte microorganisme piogene.
Cultivarea n vederea izolrii este relativ dificil: crete slab pe geloza
chocolat, necesit doar factor X, crete mai bine pe medii agarizate suplimentate
cu 20-30% snge de iepure i 5% ser fetal de viel. Incubarea se face la 33C, n
prezena a 10% CO2, n atmosfer cu 90-95% umiditate. Coloniile apar dup 72
de ore, pe geloza chocolat sunt mici, cenuii, plate, netede, lucioase iar pe geloza
snge sunt nconjurate de hemoliz beta. Identificarea se face pe baza
caracterelor metabolice, a producerii de indol, ureaz i ornitindecarboxilaz,
necesitatea factorilor de cretere. Este indicat efectuarea antibiogramei.
n diagnosticul ancrului moale se mai poate folosi reacia n lan a
polimerazei (PCR) i imunofluorescena indirect cu anticorpi monoclonali dar
aceste metode nu sunt la ndemna fiecrui laborator.
IMUNITATE
G E N U L G AR D N E R E L L A
Cuprinde o singur specie, Gardnerella vaginalis (fost Haemophilus
vaginalis).
GARDNERELLA VAGINALIS
DEFINIIE. NCADRARE
Gardnerella reunete cocobacili Gram variabili, imobili, nesporulai,
facultativ anaerobi (exist i tulpini anaerobe), catalaz, oxidaz, ureaz i indol
negativi. Au un metabolism fermentativ lent cu formare de acid acetic.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Este o bacterie prezent n vaginul a 5% din fetele virgine i a 14 69% din
femeile active sexual. Poate fi izolat din flora uretrei anterioare a partenerilor
sexuali ai femeilor cu vaginoz bacterian. A fost izolat rar din flora ano-rectal a
adulilor heterosexuali i a copiilor, din sperma cuplurilor sterile i din orofaringe.
Caractere morfologice
Pe frotiul din cultur aspectul morfotinctorial apare diferit n funcie de
compoziia mediului i vrsta culturii. Din cultura de 24 de ore pe geloz snge
apare ca bacili fini Gram variabili sau cocobacili. Sunt bacterii imobile. Pe agar
Gardnerella vaginalis apare ca bacili scuri, Gram negativi (nu apar forme
filamentoase!) iar pe mediul cu amidon are aspect polimorf, cu corpul bacterian
striat.
n hemocultura de 48 de ore i n cultura tnr de pe mediii cu ser apar
frecvent forme Gram pozitive.
G E N U L LE G I O N E L L A
DEFINIIE. NCADRARE
Familia Legionellaceae cuprinde peste 42 de specii ncadrate n 64
serogrupe. Dintre acestea, doar 20 de specii au fost izolate din infecii umane.
Legionella pneumophila este responsabil de 90% din cazurile de legioneloz,
urmat de Legionella micdadei, Legionella bozemanii, Legionella dunoffii,
Legionella longbeachae etc.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Nu face parte din flora saprofit uman izolarea ei din produsele patologice
umane fiind asociat cu boala. Nu a fost izolat niciodat n pmnt uscat, n apa
de mare sau la animal.
Se dezvolt n apele dulci: lacuri, ruri, noroaie ca i n bazinele i
rezervoarele de ap artificiale, n reeaua de canalizare unde triete n simbioz
cu componenii microbiocenozelor respective. A fost izolat n apa menajer fiind
asociat cu temperatura sczut a apei calde (sub 55C), temperatur insuficient
pentru distrugerea bacteriei.
Poate infecta i se poate replica n organismul protozoarelor care triesc n
bazinele de ap sau n sistemul de alimentare cu ap (Acanthamoeba,
Hartmanella spp.). n interiorul amibelor, nu sunt distruse de enzimele lizozomale
i se replic n fagozom. Legionella supravieuiete n amibe ceea ce i permite s
persiste n natur i s se rspndeasc prin intermediul chisturilor de amibe.
Colonizarea i multiplicarea Legionellei n bazinele de ap artificiale este
favorizat de: temperatura de 25-42C; stagnarea apei; sedimente; prezena
protozoarelor rizopode sau flagelate n bazinele respective.
Caractere morfotinctoriale
Germenii din genul Legionella sunt bacili gram negativi, mici, cu forme
filamentoase n culturile vechi. Se coloreaz greu cu coloraiile obinuite fiind mai
uor de evideniat prin impregnare argentic. n funcie de temperatur, pot avea
Sursa de infecie este apa din rezervoarele naturale sau artificiale, apa din
instalaiile de aer condiionat, din nebulizatoare, din turnurile de rcire, din sistemul
de alimentare cu ap etc. Transmiterea se realizeaz prin inhalarea de aerosoli
contaminai. Nu exist transmitere interuman.
Receptivitatea este general, mai mare la persoane care prezint anumii
factori de risc: vrsta peste 50 de ani, imunodeprimai (prin neoplazii, infecie HIV,
corticosteroizi), fumtori, alcoolici, boli cronice pulmonare sau cardiace, diabet
zaharat, sexul masculin, boli renale sau hepatice, intervenii chirurgicale etc.
Boala este mai frecvent n lunile de var cnd funcioneaz intens
instalaiile de aer condiionat. De asemenea sunt frecvente infeciile nosocomiale
care apar prin aspiraie, prin intermediul aparaturii de susinere a respiraiei, a
materialelor cltite cu ap de robinet, a nebulizatoarelor, umidificatoarelor etc.
Profilaxia const n controlul i dezinfecia apei din rezervoare i n
furnizarea apei calde menajere la temperaturi mari care s distrug Legionella,
clorinarea corespunztoare a apei, utilizarea apei sterile pentru splarea anumitor
instalaii etc.
G E N U L M OR AX E L L A
DEFINIIE. NCADRARE
Pe baza studiilor de secveniere a ARNr 16S i de hibridare a ADN s-a
constituit o nou familie: Moraxellaceae n care au fost incluse genurile Moraxella,
Acinetobacter, Psychrobacter.
Genul Moraxella reunete dou subgenuri: Moraxella i Branhamella. n
subgenul Moraxella au fost incluse 6 specii din care patogene pentru om sunt:
M.lacunata, M.osloensis i M.nonliquefaciens. Subgenul Branhamella cuprinde o
singur specie, oportunist, B. catarrhalis, care a fost cunoscut i sub numele de
Micrococcus catarrhalis, Neisseria catarrhalis. n prezent se folosete numele de
Moraxella catarrhalis.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germenii din genul Moraxella colonizeaz mucoasele omului i animalelor
fiind localizai n special n tractul respirator superior.
n primul an de via un procent de 28-100% din copii vor avea tractul
respirator colonizat cu M. catarrhalis, procent care scade la 1-10% la aduli.
Transmiterea se realizeaz pe cale aerogen prin picturi naso-faringiene.
M.osloensis este o specie comensal a tractului genital.
Caractere morfotinctoriale
G E N U L CO RY NE B AC TE R I U M
DEFINIIE, NCADRARE
Difteria este descris nc din antichitate de Hippocrate. n 1821
Bretonneau face descrierea clinic a bolii, difereniind difteria de alte infecii ale
tractului respirator. n 1883 Klebs a identificat, n exsudatul membranos al
pacienilor cu difterie, agentul responsabil pe care Loeffler reuete s-l cultive n
1884. n 1888 Roux i Yersin demonstreaz rolul toxinei n patogeneza bolii. n
1890, Behring descoper antitoxina iar n 1923 Ramon produce anatoxina
difteric. n anul 1970 este precizat mecanismul molecular de aciune al toxinei.
Bacilii din genul Corynebacterium se definesc ca bacili mici sub form de
mciuc: coryne = mciuc; bakterion = baston mic.
Genul cuprinde bacili gram-pozitivi, uor ncurbai, mciucai, aezai sub
form de litere sau n palisade, nesporulati, necapsulai, imobili, aerobi i facultativ
anaerobi.
n genul Corynebacterium se distinge grupul Corynebacterium diphtheriae
care include specia cea mai important Corynebacterium diphtheriae (bacilul
difteric), i C. ulcerans, C. pseudotuberculosis.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Habitatul este strict uman, Corynebacterium diphtheriae fiind prezent n
tractul respirator superior uman la 3-5% din persoanele sntoase, precum i la
nivel tegumentar.
Caractere morfotinctoriale
Corynebacterium diphtheriae se prezint ca bacil gram pozitiv, neramificat
nesporulat, necapsulat, imobil. Bacteria are adesea form de mciuc i se
prezint sub form de grmezi asemntoare cu palisada, cu pachete de ace cu
gmlie, cu literele alfabetului latin (V, L) sau cu literele chinezeti.
Unele tehnici de colorare (Del Vecchio, Neisser) evideniaz granulaii
metacromatice n interiorul corpului bacterian (granulaii Babe-Ernst).
Aceste aspecte morfologice sunt destul de caracteristice permind
diferenierea de corynebacteriile comensale (bacili difteroizi) care sunt mai scuri i
mai groi.
Caractere de cultur
Rspuns imun
Rspunsul imun n difterie este umoral. Anticorpii antimicrobieni, specifici
de tip, nu ofer protecie. Anticorpii antitoxin neutralizeaz toxina, au caracter
protectiv dac titrul lor atinge valoarea de 0,03 UA/ml.
Statusul imun post-boal sau post-vaccinare se apreciaz prin dozarea
titrului de anticorpi antitoxici prin reacii ELISA (protector la peste 0,03 uA/ml) sau
prin hemaglutinare pasiv (titru protector peste 1/640).
Caractere de patogenitate
Bacilul difteric poate fi patogen prin multiplicare la poarta de intrare i
toxinogenez.
Toxina difteric este aceeai pentru toate tulpinile productoare. Este o
exotoxin de natur proteic constituit dintr-un lan polipeptidic termolabil cu
greutatea molecular de 62 kDa. Exotoxina are 2 fragmente:
fragmentul A (24 kDa) care constituie suportul pentru
activitatea toxic
fragmentul B (38 kDa) care permite fixarea de receptorul
celular i ptrunderea fragmentului A.
Dup fixarea toxinei de receptorul celular, fragmentul A clivat de enzimele
membranare ptrunde n celul prin endocitoz. n citoplasma celulei, activat,
fragmentul A desfoar activitate enzimatic de ADP riboxilaz care, n prezena
NAD-ului celular, inhib factorul de elongare 2 necesar constituirii lanurilor
polipeptidice. n acest fel este blocat sinteza proteinelor celulare.
Exotoxina difteric este produs doar de tulpinile care posed gena tox+
purtat de bacteriofagul temperat . Gena tox+ este inhibat de un represor
prezent pe cromozom, activ n prezena fierului.
Exotoxina difteric poate afecta toate celulele organismului, n primul rnd
ale inimii (miocardit), nervilor (demielinizare) i rinichilor (necroz tubular).
PATOGENIE. BOALA LA OM
Boala este specific omului, se numete difterie i se manifest prin leziuni
locale datorate colonizrii esuturilor i prin leziuni generale, la distan, datorate
aciunii exotoxinei.
Poarta de intrare a bacilului difteric poate fi reprezentat de tractul
respirator (faringe, nas), de leziuni tegumentare sau, mai rar, de mucoasa
genital.
Corynebacterium diphtheriae nu are capacitate invaziv. Se multiplic la
poarta de intrare unde cauzeaz o inflamaie local. n acelai timp, n cazul
tulpinilor infectate cu bacteriofagi tox+ ncepe sinteza toxinei.
Toxina elaborat local induce apariia unei "structuri" compuse din fibrin,
leucocite, eritrocite, celule epiteliale respiratorii moarte i bacterii, respectiv falsa
membran de culoare gri-maronie, foarte aderent de esutul subiacent.
ncercarea de a ndeprta falsa membran duce la sngerri la nivelul
submucoasei prin ruperi de capilare.
Falsa membran poate s apar la nivel amigdalian, faringian, nazal,
genital, sau se poate extinde, acoperind faringele, obstrucionnd arborele
traheobronic.
La adpostul falsei membrane, baciIul i continu multiplicarea i sinteza
de toxin care difuzeaz pe cale sanguin i conduce la apariia unor tulburri la
G E N U L AR C AN O B AC TE R I U M
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Arcanobacterium cuprinde o singur specie de germeni gram
pozitivi, Arcanobacterium haemolyticum, specie care nainte era numit
Corynebacterium haemolyticum.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Arcanobacterium haemolyticum face parte din flora comensal a tractului
respirator superior.
Caractere morfotinctoriale
G E N U L E RY SI P E LO TH R I X
DEFINIIE, NCADRARE
Genul cuprinde o singur specie Erysipelothrix rhusiopathie, specie foarte
rspndit n natur, izolat n 1883 de L.Thuiller i Pasteur n sngele porcilor
bolnavi de rujet. Este agentul etiologic al infeciei numite "erizipelul lui Rosenbach"
descris n 1909 de F.J.Rosenbach i a unor infecii la animale.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Este o bacterie larg rspndit n natur, prezent mai ales n materiile
organice aflate n descompunere, n gunoiul de grajd. A fost izolat ca i bacterie
comensal sau patogen de la o mare varietate de animale, principalul rezervor
fiind porcul. Gazdele naturale (crustacee, peti, psri, mamifere) contamineaz
solul, apele de suprafa i reziduale.
Caractere morfotinctoriale
Este un bacil fin, gram pozitiv, nesporulat, necapsulat, neciliat, cu tendin
de cretere filamentoas. La coloraia gram se poate decolora uor ceea ce face
ca pe frotiu s apar gram negativ. Este dispus izolat, n perechi sau lanuri
scurte, de multe ori fiind confundat cu Listeria.
Caractere de cultur
Este facultativ anaerob i carboxifil n primocultur, aerob prin subcultivare,
pretenios nutritiv. Crete lent pe geloza snge sau pe geloza ocolat, n
atmosfer mbogit cu 5-10% CO2, la 35-37C. Poate crete pe medii cu telurit
de potasiu coloniile fiind mici i negre.
Crete sub forma coloniilor de tip S, mici, rotunde, convexe, lucioase,
transparente. Pe geloz cu snge de oaie produce hemoliz de tip . Creterea
este mult mbuntit dac se adaug glucoz, ser de cal, acid oleic n
compoziia mediului de cultur.
n subculturi poate prezenta colonii R, mari, plate, cu contur neregulat.
Caractere biochimice i de metabolism
Prezint o slab activitate fermentativ. Nu produce catalaz, oxidaz,
ureaz, indol, nu reduce nitraii, nu crete pe mediul cu citrat. Nu descompune
esculina. Pe mediu TSI fermenteaz glucoza, lactoza i produce H2S.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Produsele biologice prelucrate pentru diagnosticul bacteriologic al infeciei
cu Erysipelothrix rhusiopathie provin din leziunile tegumentare: lichid vezicular,
biopsie profund a pielii, ser fiziologic injectat i reaspirat din leziune. Se mai
practic i hemocultura n formele sistemice.
Diagnosticul bacteriologic const n cultivarea bacteriei, izolarea n cultur
pur, identificarea pe baza caracterelor morfologice i biochimice.
TRATAMENT
Tratamentul de elecie
rhusiopathie este penicilina G.
pentru
infeciile
cauzate
de
Erysipelothrix
G E N U L LI S TE RI A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul cuprinde 7 specii: Listeria monocytogenes, L.ivanovii, L.inocua,
L.welchimeri, L.seeligeri, L.grayi, L.murrayi dintre care doar primele 2 specii sunt
patogene.
Cea mai important specie este Listeria monocytogenes, specie care dei
produce rar infecii acestea sunt grave, cu atingeri meningiene mai ales la nounscui i vrstnici sau la aduli cu imunitate deprimat.
A fost descris pentru prima dat n 1926 fiind considerat o curiozitate
bacteriologic pn n anii '50.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Este prezent peste tot n natur: la nivelul solului, plantelor, animalelor i
omului. Infecteaz animale domestice (mai ales ovine) i slbatice, psri, reptile,
peti, crustacee. Poate fi izolat din alimente, cu precdere din brnzeturi.
Caractere morfotinctoriale
Listeria monocytogenes este un bacil gram pozitiv, necapsulat, nesporulat.
Prezint flageli peritrichi n special la temperatura de 20C.
n culturi tinere are aspect pleomorf: forme cocoidale, cocobacilare i
bacilare pleomorfismul fiind i mai accentuat n culturi btrne. Poate fi dispus n
perechi sau lanuri scurte.
Pe frotiul din produs biologic poate fi dispus izolat, intra- sau extra-celular.
Caractere de cultur
G E N U L NO C AR D I A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Nocardia cuprinde actinomycete aerobe cu rspndire ubicuitar ca
saprofii ai solului, apei i ai materiilor organice n descompunere.
Au fost identificate peste 12 specii dintre care mai frecvent implicate n
patologia uman sunt: complexul N.asteroides (N.asteroides sensu stricto,
N.farcinica, N.nova), N.brasiliensis i mai rar N.otitidiscaviarum, N.transvalensis,
N.pseudobrasiliensis, N.seriolae.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germenii din genul Nocardia sunt rspndii ubicuitar ca saprofii ai solului,
apei dulci sau marine i ai materiilor organice n descompunere.
Caractere morfotinctoriale
Nocardia este un germen gram variabil (frecvent gram pozitiv), care pe
frotiul din produs patologic sau din cultur ca i pe preparatele de esut apar ca
filamente subiri, ramificate, care se fragmenteaz n cursul manipulrii dnd
natere la forme bacilare sau cocoide.
Sunt slab acido-alcoolo-rezistente. Pot fi colorate cu metoda Ziehl-Neelsen
cu condiia s nu se insiste pe timpul de decolorare cu alcool acidulat.
Caractere de cultur
Sunt greu cultivabile din urmtoarele considerente:
- n produsele patologice pstrate prin refrigerare nocardiile i pierd
viabilitatea;
- n esuturi nocardiile pot suferi alterri structurale i funcionale care
prelungesc timpul de adaptare al bacteriei la condiiile de mediu;
- flora de asociaie invadeaz mediul de cultur, lucru valabil mai ales
pentru sput; decontaminarea chimic i fluidifierea sputei omoar nocardiile.
Se pot cultiva pe medii cu infuzie de cord, infuzie cord-creier, agar
Sabouraud glucozat, agar snge, agar ocolat sau Loewenstein dac prelevatele
nu sunt contaminate.
Pentru prelevatele cu flor de asociaie se folosesc medii selective (agar
DST Oxoid, agar BCYE Oxoid sau Merck).
Mediile se incubeaz aerob, la 37C. Coloniile apar dup 48 de ore, sunt
mici, nconjurate de o discret zon de hemoliz beta (N.brasiliensis,
N.otitidiscaviarum) sau de hemoliz alfa.
Nocardiile formeaz hife vegetative ramificate care cresc pe suprafaa i n
profunzimea mediilor agarizate. Din aceast cauz, dup 3-4 zile coloniile devin
aderente de mediu, mai mari, netede sau granulare, neregulate, ncreite.
Unele specii de Nocardia produc pigment:
- carotenoid care coloreaz colonia n galben, portocaliu, roz, rou;
- difuzibil care coloreaz colonia i mediul de cultur de la glbui la
brun.
G E N U L B AC I L LU S
DEFINIIE, NCADRARE
Germenii din genul Bacillus sunt germeni ubicuitari datorit faptului c sporii
le confer o rezisten crescut la factorii de mediu. Se gsesc n sol (principalul
rezervor), n apa mrii, n apa dulce, pe plante. Se gsesc de asemenea n
produsele alimentare i medicamentoase, chiar i n cele care poart inscripia
sterilizate, datorit termorezistenei sporilor bacterieni.
Germenii din genul Bacillus se prezint sub form de bacili lungi, sporulati,
Gram pozitivi, cei mai muli mobili, cu cili peritrichi, cu sau fr capsul. Sunt
aerobi facultativ anaerobi, oxidaz pozitivi i majoritatea catalaz pozitivi.
Genul aparine familiei Bacillaceae, este foarte heterogen, cuprinde un
numr foarte mare de specii (cel puin 36), dintre care n patologie sunt mai
frecvent implicate B. anthracis, B. cereus i B. subtilis.
Un mod artificial dar convenabil de organizare a membrilor genului Bacillus
este acela de ncadrare n grupe ecofiziologice cum ar fi:
- specii alcalifile: B.alcalophilus, B.pasteurii care au pH-ul optim de
dezvoltare de 8 sau pentru unele tulpini chiar de 11;
- specii halofile: B.pantothenticus, B.pasteurii. Unele tulpini cresc la
concentraii de 10% NaCl;
- specii psichrofile: B.globisporus, B.insolitus, B.marinus, B.megaterium,
B.polymyxa;
- specii termofile, cu limita temperaturii maxime de 65C: B.
acidocaldarius, B. stearothermophilus;
BACILLUS ANTHRACIS
CARACTERE GENERALE
Habitat
Bacillus anthracis este agentul etiologic al unei zoonoze care afecteaz
ierbivorele (vite, oi, cai, catri, capre). Bacillus anthracis se gsete n esuturile i
umorile animalelor bolnave. Este eliminat n mediu prin dejeciile acestora
contaminnd elementele de mediu extern. Pe sol condiiile fiind nefavorabile
germenul sporuleaz, supravieuind astfel zeci de ani. Sporii sunt extrem de
rezisteni, rezervorul principal pentru B. anthracis fiind reprezentat de sol.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram pozitivi, mari (3-5 m lungime/1-1,2 m grosime), cu
capetele tiate drept sau uor concave, imobili. Pe frotiurile din esuturile
animalelor bolnave apar dispui n lanuri scurte sau n perechi nconjurai de o
capsul unic. Pe frotiurile din cultur bacilii sunt dispui n lanuri paralele i sunt
sporulai. Sporul, format numai n prezena oxigenului, are diametrul egal sau mai
mic dect grosimea bacilului, este oval i este dispus central.
Caractere de cultur
Este o bacterie aerob facultativ anaerob, nepretenioas nutritiv, se
dezvolt pe medii simple, la 35-37C. Limitele de temperatu r la care se poate
dezvolta sunt foarte largi: 12-40C. Sporularea are loc la temperatura camerei.
Pe mediul cu agar formeaz colonii relativ mari (2-3 mm diametru), albcenuii, de tip R, rugoase. Examinate la stereomicroscop, periferia coloniilor are
aspect de uvie de pr mpletit, aspect ce a fost denumit cap de medusa.
Pe geloza snge nu produce hemoliz.
n bulion, las mediul limpede i formeaz flocoane care se depun la fundul
eprubetei.
Din punct de vedere genotipic i fenotipic B. anthracis este asemntor cu
B.cereus i B. thuringiensis de care se poate diferenia pe baza caracterelor
cuprinse n tabelul XII.
Caractere biochimice
Este o bacterie catalaz pozitiv. Are activitate proteolitic, lichefiaz
gelatina dar nu produce ureaz. Fermenteaz unele zaharuri (glucoza, maltoza,
zaharoza). Produce acetil-metil-carbinol (reacia Vogues-Proskauer pozitiv)
proprietate util n clasificarea speciilor de Bacillus. Reduce nitraii, hidrolizeaz
cazeina, este indol negativ.
Rezistena fa de factori fizici i chimici
Rezistena formelor vegetative este similar cu a celorlalte bacterii, fiind
distruse de exemplu n 30 de minute la 60C c ldur umed.
Sporii sunt deosebit de rezisteni la aciunea acizilor, dezinfectantelor,
radiaiilor, temperaturilor nalte (rmn viabili i dup fierbere timp de cteva ore).
Supravieuiesc cteva sptmni n dezinfectantele pe baz de fenol. La
temperaturi de -5C pot rezista pn la 10 ani. S-a reuit germinarea sporilor
pstrai la ntuneric i la temperatura camerei dup mai mult de 30 ani.
B.anthracis
+
-
B.cereus,
B.thuringiensis
+
+
+
+
+
+
+
-
Structur antigenic
Bacillus anthracis posed diverse structuri antigenice:
o componente ale complexului exotoxinic (componenta B):
Exotoxina este determinat plasmidic (plasmidul pOX1) const dintr-un amestec
de trei proteine imunogene: factorul edematos i factorul letal care formeaz
componenta A a toxinei; antigenul protectiv (componenta B), capabil s induc
producerea de anticorpi.
o antigenul capsular polipeptidic (antigenul K): Toate tulpinile
virulente formeaz un singur tip de antigen polipeptidic capsular (poli-D-glutamat).
Producerea antigenului capsular este codificat de plasmida pOX2 a crei transfer
la tulpini necapsulate este posibil prin transducie.
o antigenul somatic polizaharidic din peretele celular, responsabil
de reacia de precipitare n inel care are loc n prezena anticorpilor specifici
(reacia Ascoli).
Rspuns imun
Infecia cu baciIul antraxului este urmat de apariia de anticorpi fa de
componenta B a exotoxinei, anticorpi care mpiedic endocitarea factorilor
edematogen i letal. n felul acesta este suprimat activitatea toxic a complexului.
Apar de asemenea anticorpi i fa de polipeptidul capsular.
Caractere de patogenitate
Este patogen prin virulen (capsula) i prin toxigenez (exotoxina
crbunoas).
Formarea capsulei este codificat plasmidic (plasmidul pOX2); are
proprieti antifagocitare, protejeaz microorganismul de anticorpii litici i pare s
aib un rol important n patogenitate n primele faze ale constituirii focarului
infecios.
n fazele avansate i terminale ale bolii patogenitatea tulpinii de B.anthracis
este asigurat de exotoxina crbunoas. Producerea exotoxinei este mediat de o
ierbivorele (ovine, caprine) sunt cele mai predispuse la infecie, cea mai frecvent
form a bolii fiind cea digestiv. Boala are evoluie hiperacut animalul decednd
n interval de 1 or pn la 2-3 zile de la ingestia alimentului contaminat, semnele
caracteristice fiind hemoragiile prin gur, nri, anus. Laptele poate deveni de
asemenea hemoragic.
Bacillus anthracis poate fi patogen i pentru unele insecte i larvele lor.
Contaminarea solului cu spori din excretele i din cadavrele animalelor
bolnave, rezistena sporilor care rmn viabili zeci de ani ntrein lanul epidemic al
antraxului. Animalele se contamineaz pscnd pe punile contaminate cu spori
de Bacillus anthracis. Infecia nu se transmite direct de la animal bolnav la animal
sntos.
Boala la animal este rar observat n Europa. Apare mai frecvent n India,
Africa, Orientul Mijlociu, America de Sud.
Omul se contamineaz accidental venind n contact cu animalul bolnav sau
cu carne, oase, piele, blan, pr, excremente provenite de la animalul bolnav.
Antraxul uman este de obicei o boal cu caracter profesional, aprnd de exemplu
la ngrijitorii de animale, la ciobani, lucrtorii din abatoare, mcelari, tbcari,
blnari etc.
Profilaxia la animale este posibil prin vaccinare cu vaccinuri atenuate i
prin sacrificarea animalelor bolnave. Cadavrele de animale moarte din cauza
infeciei crbunoase se ngroap la mare adncime, acoperite cu var nestins sau
mai bine se incinereaz.
Lucrtorii din sectorul veterinar i din alte sectoare cu risc crescut pentru
antrax pot fi imunizai cu un vaccin preparat din antigenul capsular protectiv. Este
de asemenea important aplicarea msurilor de igien n aceste locuri de munc,
pentru a pstra incidena bolii la un nivel sczut.
n spital sunt suficiente msurile standard ntruct nu exist transmitere
inter-uman a infeciei crbunoase.
Un vaccin pentru administrare uman este disponibil n SUA unde este
produs n cantiti mici administrarea lui fiind limitat i totodat obligatorie pentru
soldai.
BACILI ANTRACOIZI
Bacillus cereus
Este o bacterie prezent n mediul extern, contaminnd orezul, legumele,
fructele uscate, brnzeturile. Este recunoscut ca agent etiologic al toxiinfeciilor
alimentare ncepnd din anul 1955.
Caracterele microscopice i de cultivare sunt asemntoare cu ale
B.anthracis cu meniunea c este mobil i pe medii cu snge produce -hemoliz.
Izolarea din prelevatele polimicrobiene se face pe mediul cu manitol,
glbenu de ou, polimixin i rou fenol, pe care se poate evidenia absena
fermentrii manitolului i producerea de lecitinaz.
Este implicat n toxiinfecii alimentare iar la pacieni imunodeprimai poate
cauza infecii ale plgilor, pneumonii, pleurezii, endocardite, septicemii, meningite,
infecii respiratorii, mionecroze i ocazional infecii oculare. Antibioticul de elecie
este vancomicina, dei B.cereus este sensibil la o gam larg de antibiotice.
G E N U L L AC TO B AC I L L US
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Lactobacillus cuprinde bacili gram pozitivi, fini, alungii sau polimorfi.
Sunt germeni nesporulai i n cea mai mare parte imobili. Nu posed catalaz iar
sensibilitatea fa de oxigenul atmosferic este variabil.
Foarte rar este patogen fiind izolat din endocardite sau din supuraii bucale
sau pulmonare
Sunt recunoscute 56 de specii de Lactobacillus clasificate n 3 grupe:
- obligat heterofermentative
- facultativ heterofermentative
- obligat homofermentative
CARACTERE GENERALE
Habitat
Unii lactobacili fac parte din flora normal a
PATOGENIE. BOALA LA OM
Multe specii de Lactobacillus fac parte din flora vaginal normal. Prin
capacitatea lor de a elibera acid lactic din glucoz creeaz un pH acid care inhib
creterea majoritii microorganismelor implicate etiologic n infecii uro-genitale.
Lactobacillus este n general nepatogen pentru om, cauznd rareori infecii.
Foarte rar este patogen fiind izolat din endocardite, din supuraii bucale sau
pulmonare, meningite, infecii ale tractului urinar. n aceste cazuri este necesar
identificarea corect i argumentarea semnificaiei clinice a izolatului.
TRATAMENT
Este rezistent fa de vancomicin. Rarele infecii cauzate de specii de
Lactobacillus pot fi tratate cu doze mari de penicilin asociat cu gentamicin.
G E N U L AC TI N O MY CE S
DEFINIIE, NCADRARE
Sunt bacterii de form filamentoas, adesea confundate cu levurile
comensale ale florei bucale sau digestive. Fac parte din flora comensal bucal i
intestinal. Sunt bacili Gram pozitivi ramificai, nesporulai, neciliai., microaerofili
sau strict anaerobi.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germenii din genul Actinomyces fac parte din microbiota cilor aerodigestive superioare. Reprezint 20% din bacteriile salivei i limbii, 35% din
germenii crevaselor gingivale i 40% din cei ai plcii dentare. Cele mai frecvente
specii componente ale microbiotei orofaringiene sunt: A. israelii, A.naeslundii,
A.viscosus, A. odontolyticus i A. meyeri. n criptele amigdaliene se identific A.
israelii, A.naeslundii.
Sunt de asemenea, n cantiti mai mici, componente ale microbiotei
tractului genito-urinar i digestiv.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram pozitivi polimorfi:
- pe frotiurile din cultura pe geloz snge apar ca filamente
ramificate care prin fragmentare dau natere la bastonae
mciucate cu aspect difterimorf sau forme cocobacilare;
- pe frotiul din produs patologic apar ca filamente Gram pozitive
aezate radial. Capetele lor prezint formaiuni piriforme Gram
negative care nconjoar filamentele ca o coroan.
Caractere de cultur
Cultiv pe agar- infuzie cord-creier- snge incubat
- anaerob, la 37C, timp de 21 de zile pentru speci ile anaerobe;
- aerob, la 25, 30 i 37C , timp de 14 zile pentru speciile aerobe
Cresc pe medii cu snge sau ser incubate n anaerobioz i n prezena
CO2. Coloniile apar lent, dup 3-4 zile.
Coloniile sunt mari, pigmentate, rugoase, aderente de mediu.
Caractere biochimice i de metabolism
Sunt catalaz, indol, ureaz, lipaz i DN-az negativi, atac zaharurile
fermentativ (glucoza, zaharoza, lactoza, maltoza).
Rezistena fa de agenii fizici, chimici i biologici
Actinomicetele sunt sensibile la aciunea antibioticelor beta-lactamice,
macrolidelor, vancomicinei, tetraciclinelor, cloramfenicolului. Sunt rezistente la
aminoglicozide.
Caractere de patogenitate
G E N U L M OB I LU N C U S
Genul Mobiluncus cuprinde bacili strict anaerobi, mobili, ncurbai. La
coloraia Gram apar adesea Gram negativi dei peretele lor are structura
bacteriilor Gram pozitive. Sunt ageni etiologici ai vaginitelor adesea n asociere cu
alte microorganisme anaerobe sau cu Gardnerella spp. prezena lor n flora
vaginal este marker de vaginoz. Tratament eficace al acestor afeciuni se poate
face cu ampicilin sau eritromicin.
G E N U L BI FI DO B AC TE R I U M
Membrii genului Bifidobacterium sunt bacili sub forma unor bastonae
mciucate, Gram pozitivi, anaerobi, imobili, catalaz negativi.
Speciile din genul Bifidobacterium sunt considerate nepatogene pentru om,
10 din speciile genului fiind componente ale microbiotei intestinale umane. Fac
parte din flora intestinal a nou-nscuilor hrnii cu lapte de mam, au efect
protector fa de infeciile digestive i fa de cancerul de colon.
Singura specie patogen a genului este Bifidobacterium dentium,
component a microbiotei intestinale.
G E N U L E U B AC TE R I UM
Germenii din genul Eubacterium nu au importan n patologia uman fiind
componeni ai microbiotei intestinale. Cu toate acestea pot cauza infecii
oportuniste.
Eubacterium lentum i Eubacterium limosum sunt patogeni oportuniti
izolai din infecii respiratorii adesea n asociere cu alte microorganisme,
endocardite, infecii ale plgilor.
G E N U L P RO PI O N I B AC TE R I UM
Propionibacterium acnes este comensal al pielii coloniznd glandele
sebacee. Este un contaminant frecvent al hemoculturilor.
Este ntlnit mai frecvent n infecii tegumentare alturi de ali germeni
(acnee juvenil) i mai rar este izolat din infecii grave (meningit, osteomielit,
endocardit).
Pe frotiu apar n grmezi iar bastonaele au tendin de ramificare. Crete
bine pe agar snge n anaerobioz sau microaerofilie. Este catalaz i indol
pozitiv.
Este rezistent la imidazoli dar sensibil la beta-lactamine.
G E N U L CL O S TR I DI U M
DEFINIIE. NCADRARE
Reunete bacili Gram pozitivi, majoritatea prezentnd cili peritrichi. Sunt
germeni anaerobi, foarte puine specii fiind aerotolerante.
Sunt bacili sporulai, sporul fiind ovalar sau rotund, dispus central,
subterminal sau terminal. Sporul este termorezistent, mai mare dect corpul
bacteriei pe care l deformeaz.
Sunt catalaz negativi, unele specii fermenteaz zaharurile altele nu.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Sunt prezeni n intestinul animalelor i al omului, de unde, eliminai cu
materiile fecale ajung pe sol. Datorit endosporilor supravieuiesc timp ndelungat,
unele specii chiar multiplicndu-se n sol.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram pozitivi sau Gram variabili, cu capetele rotunjite, cu corpul
bacterian deformat de endosporul mai mare dect corpul bacteriei. Unele specii
prezint capsul.
Caractere de cultur
Pot fi cultivate pe medii uzuale, incubate la 37C, n anaerobioz. Cresc
lent, sub form de colonii S (unele specii au caracter invaziv). Pe geloza snge
majoritatea speciilor produc hemoliz beta.
Identificarea speciilor din genul Clostridium se face pe baza caracterelor
biochimice i de metabolism: fermentarea zaharurilor i identificarea metaboliilor
finali rezultai, elaborarea de enzime proteolitice, coagularea i acidifierea laptelui
turnesolat etc.
Rezistena la ageni fizici, chimici, biologici
Formele vegetative de Clostridii nu sunt foarte rezistente n mediul extern n
timp ce sporii au o rezisten marcat (tabel XIII)
C L O S TR I DI U M TE T AN I
DEFINIIE, NCADRARE.
Sunt germeni strict anaerobi sporulai, necapsulai, mobili, cu cili peritrichi,
care se pot identifica pe sol (germeni telurici). Clostridium tetani reprezint o
specie patogen prin exotoxinele neurotrope elaborate.
CARACTERE GENERALE.
Habitat.
n stare vegetativ sunt prezeni n intestinul omului i al animalelor de
unde, cu materiile fecale, ajung n mediul extern (pe sol) unde sporuleaz. Sporii
sunt foarte rezisteni.
n mediul spitalicesc poate contamina bandaje, aa chirurgical, pudra de
talc, lenjeria etc.
Caractere morfotinctoriale
Este un bacil mare, cu capetele rotunjite, Gram pozitiv, cu cili peritrichi. n
prezena oxigenului formeaz un spor sferic terminal, mai mare dect diametrul
celulei bacteriene, care confer germenului aspectul de b de chibrit, b de tob,
ac de gmlie.
Caractere de cultur
Cresc pe medii simple, n condiii de de strict anaerobioz, la temperatura
de 37C. Coloniile pe geloz snge apar dup 48 de ore, sunt colonii rotunde, 4-6
mm diametru, mate, de tip S, nconjurate de o zon pufoas i de o zon ngust
de -hemoliz.
Caractere biochimice
Elaboreaz o hemolizin, o exotoxin neurotrop, proteaze, gelatinaze, etc.
Rezistena fa de factori fizici i chimici
Formele vegetative sunt distruse de expunerea timp de 15-20 de minute la
temperaturi de 55-60C i de substane dezinfectante.
Sporii rezist la temperatura de 100C, dar sunt distru i prin autoclavare la
120C i 1 atm, timp de 30 de minute i la Poupinel timp de 1 or la 180C. n
mediul extern, n condiii de uscciune sporii rmn viabili zeci i chiar sute de ani.
Structur antigenic
Prezint antigene flagelare de tip H, antigenul somatic O din peretele
bacterian i o exotoxin cu structur proteic. Toi bacilii tetanici elaboreaz un
singur tip de toxin, codificat plasmidic.
Rspuns imun.
Rspunsul imun const n producerea anticorpilor antitoxin care nu sunt
utili din punct de vedere al proteciei i nici n scop diagnostic.
Caractere de patogenitate
CI. tetani este patogen prin:
- multiplicare la poarta de intrare unde rmne cantonat
neavnd capacitate de invazivitate;
- prin toxinogenez - produce o exotoxin neurotrop numit
tetanospasmin;
- prin producerea unei hemolizine oxigen labile numite
tetanolizin.
Tetanolizina (asemntoare structural i funcional cu streptolizina O) are
aciune litic asupra unui numr mare de celule: polimorfonucleare, macrofage,
eritrocite, fibroblati etc. Este inhibat reversibil de oxigen i reactivat de
tioglicolat i cistein, efectul ei toxic i letal fiind neutralizat de steroli. Rolul
tetanolizinei n producerea i progresia tetanosului nu este pe deplin elucidat.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Sporii de Clostridium tetani ptrund n organism prin intermediul unor plgi
numite tetanigene: plgi adnci care asigur anaerobioz, cu esut zdrobit. Sporii
ptrund n aceste plgi cu pmnt, obiecte (inclusiv instrumente medicale,
materiale sanitare) contaminate cu spori.
Sporii germineaz, forma vegetativ care ia natere elaboreaz cei 2 factori
de virulen:
- tetanolizina, care produce liza hematiilor unor specii animale;
- tetanospasmina, care are urmtoarele aciuni:
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Diagnosticul de laborator al tetanosului nu este un diagnostic de rutin.
Gravitatea bolii i necesitatea aplicrii rapide a unui tratament eficace impun
stabilirea precoce a diagnosticului pe baze clinice. Diagnosticul bacteriologic de
cele mai multe ori se practic post-mortem.
Diagnosticul este clinic, epidemiologic i bacteriologic.
Produsul patologic este constituit de puroiul de la nivelul plgii, esutul
excizat de la poarta de intrare.
Se realizeaz frotiuri colorate cu albastru de metil sau prin coloraia Gram.
Se realizeaz cultivarea n strict anaerobioz. Bacteria se identific pe
baza caracterelor biochimice i prin demonstrarea toxigenezei.
Pentru testarea capacitii tulpinii de a produce toxin se inoculeaz
intramuscular, la oarecele alb, cultur n bulion. Apariia la 24 48 de ore de la
inoculare a unei paralizii spastice la membrul inoculat i extinderea ei la restul
grupelor musculare demonstreaz capacitatea de toxinogenez a tulpinii
bacteriene.
Ca martor se folosete un alt oarece alb care primete n prealabil antitoxin tetanic fiind apoi inoculat cu cultura bacterian. Acest animal va rmne
sntos datorit neutralizrii toxinei de ctre anticorpii specifici.
Antibiograma nu este necesar, sensibilitatea la penicilin fiind pstrat.
TRATAMENT
Tratamentul const n administrarea n paralel a serului antitoxic i a
antibioticoterapiei. Antibioticele administrate vor distruge bacteriile cantonate la
poarta de intrare iar anticorpii specifici vor neutraliza toxina. La tratamentul
specific se asociaz administrarea anatoxinei tetanice.
Tratamentul trebuie realizat de urgen administrndu-se ser antitetanic
nainte de fixarea toxinei n esut. Se impune de asemenea toaleta chirurgical a
plgii tetanigene.
C L O S TR I DI U M B O TU LI N UM
DEFINIIE, NCADRARE
Sunt germeni strict anaerobi, sporulai, necapsulai, patogeni prin
producerea de exotoxine neurotrope.
CARACTERE GENERALE
Habitat.
Este prezent n intestinul omului i al animalelor n stare vegetativ de unde
se elimin n mediul extern o dat cu materiile fecale. Dup eliminare n mediul
extern, pe sol, sporuleaz unele specii putndu-se chiar multiplica. Sporii sunt
foarte rezisteni, la adpost de radiaiile solare i de umezeal supravieuind zeci
de ani.
Caractere morfo-tinctoriale
Sunt bacili mari (3,0-20,2 m / 0,6-1,4 m), Gram pozitivi, ciliai peritrichi,
necapsulai. Prezint spor ovalar, situat central sau subterminal, mai mare dect
diametrul bacteriei. Bacteria este deformat de spor, lund aspect de brcu.
Caractere de cultur
Pot fi cultivate pe medii uzuale cu condiia incubrii la 37C n strict
anaerobioz. Dup 1-2 zile formeaz colonii de tip S, mari, fimbriate, transparente,
nconjurate de o zon pufoas iar pe mediile cu snge coloniile sunt nconjurate
de hemoliz beta.
Caractere biochimice
Produc enzime care descompun glucoza cu eliberare de acid, produc
lipaz, gelatinaz, lecitinaz. Diferenierea tipurilor de C.botulinum se face pe
baza reaciilor de descompunere a maltozei, zaharozei, a hidrolizei esculinei i a
descompunerii proteinelor cu eliberare de indol.
C L O S TR I DI I LE G AN G R E NEI G AZ O AS E
DEFINIIE, NCADRARE
Clostridiile gangrenei gazoase sunt bacili Gram pozitivi, anaerobi, sporulai,
prezeni n pretutindeni n natur, mai ales n solurile cultivate. Nu au fost gsite n
deertul Africii de Nord (Sahara). Au fost identificate peste 150 specii de Clostridii
dar numai 6 sunt capabile s declaneze gangrena gazoas:
denumire actual
Clostridium perfringens
Clostridium novyi
Clostridium septicum
denumire veche
Clostridium welchii
Clostridium oedematiens
implicare etiologic
80 90% din cazuri
40% din cazuri
20% din cazuri
Clostridium histolyticum
Clostridium bifermentans
Clostridium fallax
CARACTERE GENERALE
Habitat
Sunt germeni ubicuitari fiind prezeni cu precdere n solurile cultivate. Au
fost izolai ca i componeni ai microbiotei colonului, tegumentului, vaginului.
Formele vegetative eliminate din organism sporuleaz contaminnd solul care
devine astfel sursa principal de Clostridii.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili mari (1 / 6-10), Gram-pozitivi care formeaz endospori n
condiii de anaerobioz. Endosporii sunt mai mari dect diametrul bacililor, sunt
localizai central sau terminal. Cu excepia speciei C. perfringens care este
ncapsulat i imobil ceilali reprezentani ai genului implicai n gangrena gazoas
sunt mobili prezentnd cili peritrichi.
Caractere de cultur
Clostridiile gangrenei gazoase cresc pe medii simple n strict anaerobioz.
Celulele vegetative sunt ucise de expunerea la oxigen n timp ce sporii sunt
capabili s supravieuiasc lungi perioade n aerobioz. Se pot folosi:
- mediul VF
- agar snge suplimentat cu glucoz, extract de levur, vitamina K1 etc.
Pe medii cu snge produc hemoliz. C.perfringens produce hemoliz de tip
cald-rece: o prim zon de hemoliz care apare la termostat va fi nconjurat de o
a doua zon de hemoliz mai larg, dup meninere la ghea.
Coloniile speciilor mobile sunt rotunde, convexe, transparente, invazive iar
n coloana de agar moale coloniile sunt pufoase sau dendritice.
C.perfringens fiind imobil formeaz colonii fr caracter invaziv, de tip S
iar n coloan de agar moale cresc sub form de colonii lenticulare.
Caractere biochimice
Toate speciile implicate n gangrena gazoas au un metabolism strict
fermentativ. Sunt catalaz negativi. Speciile productoare de -toxin opacifiaz
mediul cu geloz, glucoz i glbenu de ou prin descompunerea lecitinei.
Rezistena fa de factori fizici i chimici
Formele vegetative sunt mai sensibile la aciunea factorilor fizici, chimici.
Sunt distruse de dezinfectantele uzuale i de temperatura de 55-60C la care s
fie expuse timp de 15-20 minute.
Formele vegetative sunt sensibile la antibiotice: sunt 100% sensibile la
penicilin asociat cu metronidazol, la eritromicin, clindamicin, cloramfenicol.
Toate speciile de Clostridium sunt rezistente la colistin i sensibile la vancomicin
(test de identificare).
Sporii sunt rezisteni supravieuind timp ndelungat pe sol. Sunt distrui prin
autoclavare la 120C timp de 30 minute sau la Poupi nel la 180C timp de 1 or .
Structura antigenic
Antigenele germenilor din genul Clostridium sunt:
- antigene somatice (parietale);
- antigene capsulare K ( C.perfringens);
- antigene flagelare H (C. histolyticum, C. septicum, C. novyi i C.
sporogenes);
- antigene solubile (exotoxine).
Rspuns imun
n cursul infeciei organismul uman sintetizeaz anticorpi tip anti-toxin,
anticorpi fr eficien n cursul bolii.
Caractere de patogenitate
Clostridiile gangrenei gazoase sunt patogene prin multiplicare, invazivitate
i toxinogenez. Germenii se multiplic la poarta de intrare.
esutul sntos este invadat prin aciunea unor exotoxine eliberate de
Clostridii care acioneaz ca antigene solubile histo-toxice. Astfel de toxine sunt:
lecitinaze, colagenaze, fibrinolizine, hialuronidaze, hemaglutinine, hemolizine.
Alfa-toxina eliberat de majoritatea speciilor de clostridii ale gangrenei
gazoase are aciune litic asupra hematiilor, miocitelor, fibroblastelor,
trombocitelor i a leucocitelor. De asemenea scade capacitatea de agregare a
trombocitelor impiedicnd formarea trobului.
Kappa-toxina produs de Clostridium perfringens este o colagenaz care
distruge esutul conjunctiv favoriznd extinderea necrozei n esut sntos.
Theta-toxina are efecte distructive directe asupra vaselor, cauzeaz
citoliz, hemoliz, degenerarea leucocitelor i distrugerea polimorfonuclearelor.
Aceste efecte asupra leucocitelor explic rspunsul inflamator minim al
organismului fa de infecie.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Clostridiile gangrenei gazoase determin gangrena gazoas, o infecie a
esuturilor moi, a musculaturii scheletale, cu mortalitate ridicat. Pentru aceast
afeciune se mai utilizeaz sinonimul mionecroz clostridian.
Afeciunea apare dup traumatisme, intervenii chirurgicale pe tractul
gastrointestinal sau genitourinar, dup avorturi, amputaii, injecii, arsuri termice
sau electrice etc.
Pentru apariia infeciei sunt necesare 2 condiii:
- ptrunderea sporilor clostridieni n esut;
- anaerobioza sau cel puin o presiune sczut de oxigen de maximun 30%.
Aceste specii sunt strict anaerobe creterea lor fiind inhibat de o tensiune de
70% a oxigenului dar exist unele specii aerotolerante care se pot multiplica la o
valoare a tensiunii de oxigen de pn la 30%.
Perioada de incubaie este de 12 24 de ore cu limite maxime de 1 or 6
sptmni dup care microorganismele se transform n form vegetativ, se
nmulesc i elibereaz exotoxinele cu aciune local i sistemic.
AL TE B O LI C AU Z A TE D E S P EC I I D I N G E N U L
C L OS TR I D I U M
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
Clostridium perfringens este implicat n toxiinfecii alimentare cauzate de
consumul de carne de pasre semipreparat, refrigerat apoi renczit pentru a fi
servit. Contaminarea crnii se face cu spori ce Clostridium perfringens prezeni n
Familia Enterobacteriaceae
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Citrobacter:
Citrobacter freundii
Citrobacter amalonaticus
Citrobacter diversus
Citrobacter farmeri
Citrobacter youngae
Citrobacter braakii
Citrobacter werkmanii
Citrobacter sedlakii
Genul Klebsiella
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella oxytoca
Genul Enterobacter
Enterobacter aerogenes
Enterobacter agglomerans
Enterobacter cloacae
Enterobacter sakazakii
Enterobacter gergoviae
Genul Providencia:
Providencia alcalifaciens
Providencia rettgeri
Providencia stuartii
Genul Hafnia
Hafnia alvei
Genul Morganella:
Morganella morganii
Genul Proteus:
Proteus mirabilis
Proteus vulgaris
Genul Escherichia:
ETEC = enterotoxigenic E.coli
EIEC = enteroinvasive E.coli
Genul Salmonella:
EPEC = enteropathogenic E.coli
Salmonella enterica
EHEC=enterohaemorrhagic E.coli
EaggEC=enteroaggregative E.coli
Genul Yersinia:
UPEC=uropathogenic E. coli
Yersinia enterocolitica
NMEC=neonatal meningitis E.coli Yersinia pestis
Yersinia pseudotuberculosis.
Genul Serratia:
Serratia marcescens
Genul Shigella:
Serratia liquefaciens
Shigella dysenteriae
Serratia rubidaeae
Shigella flexneri
Serratia odorifera
Shigella boydii
Serratia plymuthica
Shigella sonnei
Serratia ficaria
Serratia fonticola
CARACTERE GENERALE
Habitat
Enterobacteriile au fost evideniate n flora intestinal normal, unele n
flora tractului respirator superior, n ap, pe sol, pe plante etc.
Enterobacteriile sunt responsabile de o mare parte a infeciilor
nosocomiale.
Ele pot fi mprite n dou mari categorii:
- saprofite, condiionat patogene (E. coli spp., Klebsiella spp.,
Enterobacter spp. etc.)
- patogene (Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia spp.).
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram-negativi, cu dimensiuni de 0,3-1,0 x 1,0-6,0m, ciliai sau
neciliai, nesporulai, cu sau fr capsul.
Caractere de cultur
Enterobacteriile sunt germeni nepretenioi, cresc pe medii simple. Sunt
germeni aerobi, facultativ anaerobi care necesit, pentru o cretere optim,
temperaturi de 22-37C. Pe mediile neselective, for meaz colonii de culoare gri
(exceptnd Serratia marcescens, de culoare roie), de tip S, M (excepie
Proteus spp., fenomen de crare). Pe geloz-snge, unele specii determin
hemoliz .
Caractere biochimice i de metabolism
Enterobacteriile sunt catalazo pozitive i oxidazo negative. Sunt bacterii
chemoautotrofe avnd ambele tipuri de metabolism: respirator i fermentativ. n
urma fermentrii glucozei se formeaz acid cu sau fr gaz. Unele enterobacterii
utilizeaz fermentativ lactoza.
Structura antigenic
Membrii Familiei Enterobacteriaceae au o structur antigenic complex.
Antigenul somatic O (endotoxina) reprezint unitile terminale repetitive
polizaharidice ale lipopolizaharidului (LPS) din peretele bacteriilor Gram-negative.
LPS mai este format dintr-un miez (core), similar la toate bacteriile Gram-negative,
i lipidul A, prezent la toate enterobacteriile, care este responsabil de activitatea
toxic a acestora n organismul gazd. Antigenul somatic O este termostabil,
rezistent la alcool. Poate fi detectat prin reacii de aglutinare. Determin, n
organismul gazd, formare de anticorpi tip IgM.
Antigenul H (flagelar) este de natur proteic determinnd, n organismul
gazd, formarea de anticorpi tip IgG care imobilizeaz bacteria, ceea ce duce la
atenuarea virulenei acesteia. Se gsete la nivelul flagelilor. Este denaturat de
alcool 50 i temperatur de 70C. Poate fi eviden iat prin reacii de aglutinare.
Antigenul K (capsular) este de natur polizaharidic i este prezent la
bacteriile capsulate. Asigur bacteriilor rezistena la fagocitoz i caracterul de
invazivitate. Prezena acestuia duce la inaglutinabilitate n reaciile de evideniere
a antigenului somatic O.
Antigenul Vi (de virulen), de natur polizaharidic, l ntlnim la
Salmonella serovar Typhi. Este un antigen de nveli, mascnd antigenul somatic
- febrei,
- activrii cii alternative a sistemului complement (C3a, C5a),
- efectelor asupra sistemului circulator; leucopenia, vasodilataia,
scderea circulaiei periferice, microhemoragii, peteii, hipotensiune,
- efectelor de coagulare sangvin (CID, tromboze, trombocitopenie),
- afectrii metabolismului i a funciilor hepatice,
- scderii sideremiei,
- hipoglicemiei,
- citotoxicitii,
- necrozei de organ
- ocului endotoxic.
4. Achiziia de fier. n organismul uman fierul nu se gsete liber, n form
nelegat. Gazda uman produce o serie de proteine cu afinitate mare de legare a
fierului, acestea gsindu-se n esuturi i pe suprafaa mucoaselor (transferina,
lactoferina, feritine, mioglobina i hemoglobina). Acest mecanism de legare a
fierului reprezint i o cale de control a creterii bacteriene. Enterobacteriile,
avnd nevoie de fier pentru cretere i dezvoltare, au mai multe mecanisme de a-l
acapara, cele mai importante dintre acestea fiind:
- capturarea fierului de la transferin/lactoferin;
- folosirea Hem-ului rezultat n urma distruciei tisulare
- producerea de siderofori speciali (enterobactin, aerobactin) care
acioneaz competitiv cu proteinele de legare a fierului. Aceti siderofori cheleaz
fierul, formnd complexul siderofor-fier care este apoi transportat n celula
bacterian prin receptori specifici din membrana extern. Aceti transportori
servesc, de asemenea, ca receptori pentru bacteriofagi i loc de legare pentru
colicin.
5. Structurile capsulare. Principala funcie a capsulei este s apere
microorganismul de fagocitoz. Dintre structurile capsulare amintim:
- antigenul K la E.coli, de natur proteic, cu rol n colonizare, diminu
opsonizarea i fagocitoza. Antigenul K1, este similar structurilor self, slab
imunogen. Capsula de tip K1 a E.coli previne activarea cii alternative a sistemului
complement.
- antigenul K la Klebsiella este un antigen capsular.
- antigenul Vi la Salmonella typhi.
6. Plasmidele codific rezistena la antibiotice i caracterele de virulen ale
enterobacteriilor.
7. Antioxidanii sunt compui care protejeaz microorganismul de
distrugerile ce pot apare n prezena radicalilor liberi de oxigen.
Este important de reinut c o enterobacterie patogen poate s nu prezinte
toi factorii de virulen.
G E N U L E S C HER I C HI A- S HI G EL L A
DEFINIIE, NCADRARE
G E N U L E S C HER I C HI A
Genul Escherichia reunete specii prezente n intestinul uman evideniate
pentru prima dat n 1885 de germanul Theodor Escherich n onoarea cruia s-a
dat numele genului. Au fost considerate bacterii comensale ale intestinului gros
pn n 1935 cnd s-a demonstrat rolul etiologic jucat de o tulpin de Escherichia
coli implicat ntr-un episod de diaree la nou-nscui.
Genul Escherichia grupeaz 5 specii:
- E. coli cu 2 biovaruri: normal i inactiv;
- E. blattae;
- E. fergusonii;
- E. hermanii;
- E. vulneris.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Habitatul natural al E. coli este tractul gastrointestinal al animalelor cu
snge cald i al oamenilor. n intestinul omului E. coli reprezint flora dominant a
intestinului gros avnd un rol important n meninerea unei fiziologii normale a
acestuia i n sinteza unor proteine din grupul B i K. Eliminat n mediul extern cu
materiile fecale contamineaz apa, solul, alimentele etc.
Prezena constant a tulpinilor de E.coli n intestinul uman i animal i n
materiile fecale au fcut din aceast bacterie indicatorul de poluare fecal a
mediului, n special a apei.
Caractere morfotinctoriale
Escherichia coli este un bacil Gram negativ care prezint uneori forme
filamentoase. Majoritatea speciilor prezint cili peritrichi i sunt necapsulate. Exist
ns tulpini de Escherichia coli imobile, unele prezentnd capsul.
Caractere de cultur
E.coli este un germen bine adaptat mediului su de via. Nu este
pretenios. Crete pe medii simple n care glucoza este singurul constituent
organic. Este un germen aerob, facultativ anaerob care poate avea deopotriv
metabolism fermentativ sau respirator. Pe medii solide crete sub form de colonii
de tip S iar n mediul lichid determin tulburare uniform i inel aderent pe
peretele tubului.
Adezine
Invazine
Mobilitate/chemotaxie
Toxine
Factori cu
rol antifagocitar
Factori protectori
la reacia bactericid
a serului
Factori protectori
fa de rspunsul imun
Factori genetici ai
patogenitii
Observaii
ETEC
EPEC
EAggEC
EIEC
EHEC
Factor de patogenitate
*codificate plasmidic
*specificitate de specie
fimbrii de
-K88 porc
adeziune
-K99 viel, miel
-CFA I / CFAII - om
*codificate plasmidic
enterotoxine
*TL (cholera-like); *TS
nu au caracter invaziv
adezin nonintimin
fimbrial
enterotoxin
similar cu cea produs de Shigella
(Shiga-like)
moderat invaziv
Simptome
*copii
*aduli
*diareea
cltorilor
*fr inflamaie
*fr febr
*copii
*diaree apoas
*fenomene
inflamatorii
reduse
*fr febr
enterotoxina
EAST (enteroaggregative heat-stable
*copii mici
toxin)
*diaree apoas,
persistent
hemolizina
asemntoare ce cea produs de
*fr inflamaie
UPEC
fimbrii
asigur aderarea agregativ de celulele *fr febr
GVVPQ
epiteliale
ale
intestinului
subire,
inhibnd absorbia apei din lumenul
intestinal.
nu au caracter invaziv
adezine nonprobabil protein a membranei externe
*diaree mucofimbriale
sanguinolent
*inflamaie
au caracter invaziv
sever
*febr
adezine
*copii
*colit
toxin
VERO-toxin (Shiga-toxin)
hemoragic
moderat invaziv
*rspuns
inflamator intens
*uremie
hemolitic
Infecii extraintestinale
- infecii urinare
Tulpinile uropatogene de Escherichia coli (UPEC) sunt responsabile de
90% din infeciile tractului urinar. Sunt afectate cu precdere femeile tinere, active
sexual, colonizate iniial n intestin cu tulpini UPEC. Tulpinile uropatogene aparin
serotipurilor O 1,2,4,6,7,16,18,75 i serotipurilor K 1,2,3,12,13 care posed
adezine ce permit aderarea de epiteliul urinar.
- infecii intra-abdominale
TRATAMENT
Tratamentul infeciilor cu Escherichia coli se face n raport cu localizarea
infeciilor i n conformitate cu rezultatele antibiogramei.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Sursa de infecie este omul i animalul suportul material al transmiterii fiind
reprezentat de ap, alimente, obiectele de spital, jucrii, mute etc.
Poarta de intrare este variat (tract digestiv, respirator, urinar, genital etc.
determinnd i tipul de infecie care se instaleaz.
Profilaxia infeciilor cu Escherichia coli presupune respectarea igienei
colective, personale, alimentare.
G E N U L S HI G E L L A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Shigella, numit astfel dup microbiologul japonez Shiga care a
descoperit aceste bacterii acum 100 de ani, reunete patru specii:
Shigella dysenteriae (Grup A)
Shigella flexneri (Grup B)
Shigella boydii (Grup C)
Shigella sonnei (Grup D)
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germenii din grupul Shigella sunt bacterii strict adaptate omului,
ntotdeauna patogene. Sunt ntlnite n intestinul i materiile fecale ale bolnavilor,
convalescenilor precum i la purttorii aparent sntoi. Singurele animale care
pot fi gazde accidentale sunt primatele captive care vin n contact cu oamenii.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram negativi, neciliai, necapsulai i nesporulai.
Caractere de cultur
Sunt bacterii aerobe, facultativ anaerobe care se dezvolt bine la 37C pe
medii slab i moderat selective i difereniale (Istrati Meitert, ADCL). Formeaz
colonii S, lactozo-negative, transparente.
Caractere biochimice i de metabolism
Ca toate enterobacteriile reduce nitraii la nitrii, sunt oxidazo-negative,
fermenteaz glucoza, dar fr producere de gaz. Nu produc indol, excepia fiind
Shigella flexneri care este indol pozitiv. Speciile Shigella nu formeaz hidrogen
sulfurat, nu descompune lactoza, nu metabolizeaz urea i nu folosesc citratul ca
unic surs de carbon. Sunt germeni imobili care fermenteaz doar civa
carbohidrai i numai cteva tulpini decarboxileaz ornitina. Dup prezena sau
absena fermentaiei manitei, shigelele pot fi mprite n dou mari subgrupe
biochimice:
Grupul manito-pozitiv (grupele B,C,D);
Grupul manito-negativ (grupul A, Sh. dysenteriae).
Rezistena fa de factori fizici, chimici i biologici
Speciile din genul Shigella rezist n praf uscat (10 zile), n ape la 7-10C (9
zile), pe lenjerie (dou sptmni), n alimente 1-2 sptmni, n ghea 2 luni.
Sunt inactivate n 10 minute la 50-60C. Sunt germeni sensibili la antagonismul
microbian i la bacteriofagi specifici.
Structura antigenic
Antigenul somatic O st la baza mpririi n patru grupe antigenice i
subdiviziunii acestora n serotipuri:
o Grupul A: Shigella dysenteriae (12 serotipuri)
o Grupul B: Shigella flexneri (6+2 serotipuri)
o Grupul C: Shigella boydii (18 serotipuri)
o Grupul D: Shigella sonnei (1 serotip care prezint dou faze antigenice
S i R).
Unele tulpini posed capsul (antigenul K). Acest antigen nu este utilizat n
tipizarea serologic a genului Shigella, dar pot interfera cu determinarea
antigenului somatic O (inaglutanibilitate O).
Alte antigene ale tulpinilor Shigella sunt:
o Exotoxina termolabil exprimat de Shigella dysenteriae serotip 1
o ShET 1 i ShET 2;
o Invasion Plasmid Antigens (Ipa);
o Proteina InterCellular Spread (Ics);
Rspuns imun
Rolul protectiv al rspunsului imun al organismului mpotriva antigenelor
descrise este neclar. n general este neprotectiv; totui unele studii controlate pe
voluntari aduli au artat c o infecie anterioar cu Shigella flexneri protejeaz
mpotriva reinfeciei cu serotipul omolog (cu o eficacitate de 70%).
Dup administrare de vaccin Shigella dysenteriae, imunoglobulinele de tip
A vor reaciona cu tulpina omolog, imunitatea n dizenterie avnd un caracter
predominant local, la nivelul colonului, cu o durat de 6-12 luni.
Caractere de patogenitate
Virulena Shigellei const exclusiv n multiplicarea ei n epiteliul colonului
gazdei umane. Factorii de virulen sunt codificai plasmidic i au funcii identice la
toate speciile Shigella (tabel XVI).
PATOGENIE. BOALA LA OM
Mecanismul patogenic al shigelozei este complex, implicnd: prodromul
diareic enterotoxic i / sau citotoxic; inflamaia colonului mediat de citokine;
necroza epiteliului colonului. Shigeloza este o boal diareic acut care apare ca
urmare a infeciei pe cale oral cu Shigela spp.
Microorganismul ingerat de celulele M din plcile Peyer, strbate aceste
celule, este depozitat n spaiul subepitelial unde este fagocitat de macrofage.
Fagozomii macrofagelor sunt apoi degradai i Shigelele intracelulare induc
eliberarea de interleukin-1 care determin un aflux al leucocitelor
polimorfonucleare. n urma apoptozei macrofagelor infectate bacteriile vor fi
eliberate spre suprafaa bazolateral a enterocitelor adiacente. Bacteriile
infecteaz enterocitele prin endocitoz iar apoi vacuolele endocitice vor fi
degradate. Shigelele intracelulare se ataeaz de actina complexului joncional
enterocitic, se multiplic i se rspndete n enterocitele nvecinate prin
inducerea polimerizrii actinei. Astfel filamentele de actin propulseaz bacteria
din citoplasm n celula epitelial adiacent, evitnd efectiv imunitatea umoral
mediat prin anticorpi. n final enterocitele infectate mor, rezultnd necroza
epiteliului care mpreun cu rspunsul inflamator constituie leziunile shigelozei.
n cazul infeciei cu Shigella dysenteriae 1 avem n vedere efectele
exotoxinei (toxina Shiga), acestea fiind de trei tipuri: neurotoxic, citotoxic i
enterotoxic.
o Efectul enterotoxic const n aderarea toxinei Shiga de
receptorii intestinului subire i blocarea absorbiei electroliilor, glucozei i
aminoacizilor din lumenul intestinal.
o Efectul citotoxic const n inhibarea sintezei proteinelor, cauz
a morii celulare, leziunilor microvasculare a intestinului i a hemoragiei locale.
Astfel se explic apariia abceselor parietale n ileonul terminal, apoi a necrozei,
ulceraiei i hemoragiei.
o Efectul neurotoxic are ca semne febra i crampele
abdominale.
Shigeloza este o boal diareic acut, cu evoluie autolimitant datorit
capacitii regenerative a epiteliului intestinal. Apare dup 2-5 zile de la ingestia a
100-1000 de bacterii. Debutul este brusc cu febr, diaree apoas, colici
abdominale intense. n periada de stare pacientul are 30-40 scaune nefecaloide,
cu mucos, puroi i snge. n urma acestora poate s apar deshidratarea.
Tenesmele rectale, starea general alterat sunt de asemenea simptome
importante ale dizenteriei.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Diagnosticul de laborator este bacteriologic. Produsele patologice sunt
materiile fecale emise spontan sau recoltate cu sonda Nelaton de la pacieni n
perioada de stare a bolii i n convalescen. Transportul produsului patologic de
face n mediul Cary-Blair iar nsmnarea este recomandat s se efectueze ct
mai curnd dup recoltare.
G E N U L S AL M O N E L L A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Salmonella aparine familiei Enterobacteriaceae i cuprinde o
singur specie Salmonella enterica. Aceast specie cuprinde peste 2300 serotipuri
difereniate pe baza antigenelor somatice O i flagelare H. Subspeciile acesteia
sunt
- Salmonella enterica (subsp. I)
- Salmonella salamae (subsp. II)
- Salmonella arizonae (subsp. IIIa)
- Salmonella diarizonae (subsp. IIIb)
- Salmonella houtenae (subsp. IV)
- Salmonella bongori (subsp. V)
- Salmonella indica (subsp. VI)
Aceste subspecii sunt la rndul lor divizate n serovaruri (exemple
Salmonella serovar Typhimurium, Salmonella serovar Enteritidis, Salmonella
serovar Typhi, Salmonella serovar Paratyphi, Salmonella serovar Cholerae suis
etc.).
CARACTERE GENERALE
Habitat
Principalul habitat al salmonelelor este tractul intestinal al oamenilor i
animalelor.
Toate serovarurile de Salmonella enterica subspecia enterica sunt parazite
pentru om i mamifere, n timp ce celelalte subspecii se ntlnesc preponderent la
psri i animale cu snge rece. Cele dou surse majore, omul i animalele, vor
determina poluarea solului, apelor reziduale, apelor de suprafa n care pot
Efectul biologic
*tulpinile de Salmonella pot produce enterotoxinele termo-labil
(LT), termo-stabil (ST), ale cror efecte nu au fost elucidate
*citotoxin implicat n invazia i distrucia tisular;
*nrudit dar distinct de cele produse de E. coli spp. sau Shigella
spp.
*adezin produs de trei serovaruri Typhi, Paratyphi C i Dublin;
*asociat cu virulena microorganismelor;
*produse de tulpini ale genului Salmonella.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Infeciile Salmonella la om variaz n funcie de serovar, de tulpin, de doza
infectant, de natura alimentelor contaminate i de statusul imunitar al gazdei.
Anumite serovaruri sunt foarte patogene pentru oameni; unele tulpini ale aceluiai
serovar pot prezenta patogenitate diferit. Pacienii imunocompromii i cei cu boli
hematologice sunt mai susceptibili la infecia cu Salmonella dect adulii sntoi.
Salmonelozele includ 5 sindroame:
o gastroenterite;
o febre enterice;
o septicemie;
o infecii focale;
Gastroenteritele determinate de serovaruri Salmonella
Salmonelele care determin enterite se gsesc att la om ct i la animale,
salmoneloza fiind o zoonoz. Salmonelele netifoidice pot determina enterite,
infecii localizate, septicemie, mecanismele lor de patogenitate fiind urmtoarele:
treia sptmn, pe lng cele amintite, se recolteaz lichid duodenal i urin; din
a patra sptmn se recolteaz doar snge pentru diagnostic serologic (reacia
Widal). Hemocultura este pozitiv din prima sptmn a bolii iar coprocultura
este pozitiv dup cteva zile de la debutul bolii, ea putnd rmne pozitiv i n
convalescen (purttori biliari de salmonele tifoidice).
TRATAMENT
n enterite terapia de suport pentru prevenirea deshidratrii i refacerea
echilibrului electrolitic, controlul durerii, al greurilor i vrsturilor este de prim
intenie. Se evit antibioterapia pentru a prevenii prelungirea fazei de purttori a
acestor pacieni.
n formele severe sau la pacienii imunocompromii care risc apariia
complicaiilor antibioticele sunt indicate, dintre cele mai folosite fiind ampicilina sau
cotrimoxazolul. Oricum antibioterapia trebuie s fie n conformitatea cu
antibiograma, unele tulpini prezentnd plurirezisten la antibiotice, n aceste
cazuri noile chinolone putnd fi indicate.
n infeciile nozocomiale la pacienii imunocompromii se pot ntlni i tulpini
de Salmonella plurirezistente la antibiotice.
n febrele enterice spitalizarea i administrarea intravenoas de antibiotice
trebuie s se realizeze ct mai repede posibil. Cloramfenicolul, ampicilina i
cotrimoxazolul sunt antibioticele clasic folosite. i n aceste cazuri florochinolonele
pot fi utilizate. Rezistena la antibiotice poate surveni i la serovarurile Typhi i
Paratyphi.
Purttorii de Salmonella serovar Typhi n vezica biliar vor suferi intervenie
chirurgical de ndeprtare a acesteia nsoit de tratament cu ampicilin. Aceast
cale de tratare a purttorilor prezint o eficacitate de 85%.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Salmonelozele fiind zoonoze, contaminarea prin alimente este modul
principal de transmitere a salmonelelor non-tifoidice. Cele mai importante
rezervoare animale sunt ginile, curcanii, porcii i vacile; se pot ntlni ca
rezervoare i alte animale domestice i slbatice. Datorit capacitii salmonelelor
de a supravieui n ou, pulberi de ou, carne crud i produse animaliere
incomplet preparate termic, produsele animale reprezint cel mai important vehicul
de transmitere, toxiinfeciile alimentare fiind cele mai frecvente salmoneloze.
Epidemiologia febrelor tifoide sau a altor febre enterice implic n primul
rnd rspndirea de la persoan la persoan, deoarece aceste microorganisme
nu au ca rezervor semnificativ animalele. Contaminarea cu scaune umane este
principala modalitate de rspndire, iar cel mai frecvent vehicul este apa
contaminat. Ocazional alimentele contaminate datorit mnuiri lor de ctre
purttori de serovar Typhi pot fi un vehicul. Amprentele plasmidice ADN i lizotipia
prin bacteriofagi a salmonelelor izolate sunt puternice unelte epidemiologice n
studiul cazurilor de salmoneloz i n gsirea sursei de infecie a acestora.
n febrele tifoide i salmonelozele netifoidice, mai sunt implicai ali doi
factori epidemiologici importani. Primul este reprezentat de purttorul uman
asimptomatic. Aproximativ 3% din persoanele infectate cu serovar Typhi i 0,1% a
celor cu salmonele netifoidice devin purttori cronici. Starea de purttor poate s
dureze de la cteva sptmni pn la un an. Deci rezervoarele de infecie
existente sunt att umane ct i animale. Copiii devin foarte rar purttori cronici ai
agenilor febrei tifoide. Al doilea factor este folosirea de antibiotice n alimentaia
animalelor precum i folosirea lor, fr discriminare, la oameni, ceea ce duce la
creterea rezistenei la antibiotice a salmonelelor.
Salmonelozele reprezint o problem major de sntate public datorit
numrului mare i variat de rezervoare animale, existenei purttorilor umani i
animali i lipsei unor programe internaionale de control a salmonelelor.
Salmonelele sunt greu de eradicat, datorit rezervoarelor importante de
infecie reprezentate de oameni i animale. Prin reducerea purttorilor animali se
poate reduce semnificativ expunerea uman. Aceasta se poate realiza prin msuri
care includ schimbarea practicilor de tiere a animalelor pentru a reduce
contaminarea de pe carcasele acestora; protejarea de contaminare a proceselor
de prelucrare a alimentelor; asigurarea unui program de nvare a practicilor
igienice pentru personalul care manevreaz alimentele n abatoare, fast-food-uri,
cofetrii, restaurante; prepararea i refrigerarea adecvat a alimentelor n
restaurante i case; un program guvernamental de supraveghere a bolilor
enterice.
Vaccinurile sunt valabile pentru febra tifoid i sunt parial eficiente, n
special la copii.
Nici un vaccin nu este valabil pentru salmonelozele netifoidice. Se continu
cercetrile n aceast arie prin acordarea unei importane mari nelegerii
mecanismelor imunitare a infeciilor enterice.
G E N U L Y E R SIN I A
DEFINIIE, NCADRARE
Bacteriologul francez Alexandre Yersin a izolat pentru prima dat bacteria
cauzatoare a epidemiei de pest din Hong Kong de la sfritul secolului al XIX-lea.
Genul care a primit numele n onoarea acestui bacteriolog japonez cuprinde
enterobacterii cocobacilare, colorate bipolar, ciliate n funcie de temperatur,
nepretenioase nutritiv.
Genul Yersinia aparine familiei Enterobacteriaceae i cuprinde 11 specii,
dintre care 3 sunt patogene pentru om:
o Yersinia pestis
o Yersinia pseudotuberculosis
o Yersinia enterocolitica.
Sunt ageni etiologici ai unor zoonoze. Se transmit accidental la om.
Yersinia pestis este agentul patogen al pestei bubonice i pestei pulmonare, pe
cnd Yersinia pseudotuberculosis i Yersinia enterocolitica pot determina
gastroenterite severe cu formare de abces local i deces prin peritonit.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Rspuns imun
n pest mecanismele rspunsului imun sunt foarte complexe implicnd o
combinaie de factori umorali i celulari. Fa de Yersinia pestis organismul uman
formeaz de anticorpi specifici anti-nveli care acioneaz ca opsonine fa de
microorganismele virulente permind fagocitoza i distrucia lor rapid la locul
iniial de infecie. Unii indivizi posed titruri nalte de anticorpi formai fa de
antigenele V i W. Gazda covalescent prezint imunitate de scurt durat fa de
o reinfecie. Vaccinurile de Y. pestis omort induc ntr-o oarecare msur o
protecie a gazdei.
Pentru celelalte dou specii nu s-a demonstrat existena rspunsului imun.
Caractere de patogenitate
Factorii de patogenitate comuni ai speciilor de Yersinia implicate n infecii
umane sunt:
- proteinele din membrana extern (Yops = Yersinia Outer Proteins)
sunt codificate de gene prezente pe plasmidul pYV, sintetizate la 37C, corespund
antigenelor V i W, inhib migrarea polimorfonuclearelor i fagocitoza, au efect
citotoxic;
- proteina P1 codificat de gene prezente pe plasmidul de virulen
pYV, asigur aderarea bacteriei de celulele eucariote;
- chelatori de fier.
Patogenitatea Y. pestis const n migrarea pe cale limfatic de la locul de
inoculare la nodulii limfatici regionali i n rspndirea pe cale sanguin la splin,
ficat, plmni unde determin leziuni hemoragice. Factorii de virulen ai Y. pestis
sunt
- antigenul de nveli F1: capsul glicoproteic sintetizat numai la
temperatura de 37C, cu efect antifagocitar i imunogen;
- antigenele V i W;
- coagulaza care intervine n formarea de microtrombi;
- activator al plasminogenului care asigur invazivitatea bacteriei i cu
rol antifagocitar.
Patogenitatea speciei Y. pseudotuberculosis const n aderarea i
traversarea epiteliului intestinal de ctre aceste microorganisme, precum i n
migrarea lor la nodulii limfatici mezenterici adiaceni i determinarea unor reacii
inflamatorii la nivelul acestora.
Infecia primar a esutului intestinal cu Y. enterocolitica este precedat de
adeziunea i invazia celulelor epiteliale care cptuesc lumenul intestinal.
Invazinele sunt codificate plasmidic i cromozomal. Nivele sideremice ridicate au
fost nregistrate frecvent la pacieni, ceea ce prezint importan n creterea
virulenei tulpinilor speciei Y. enterocolitica. Marea majoritate a tulpinilor izolate
produc o enterotoxin termostabil, sintetizat la temperaturi sub 30C, efectul
acesteia nu prezint importan deosebit n definirea virulenei.
PATOGENIE. BOALA LA OM
G E N U L CI TRO B AC TE R
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Citrobacter (Familia Enterobacteriaceae) cuprinde 8 specii a cror
difereniere este clar:
Citrobacter freundii,
Citrobacter diversus,
Citrobacter amalonaticus,
Citrobacter farmeri,
Citrobacter youngae,
Citrobacter braakii,
Citrobacter werkmanii,
Citrobacter sedlakii,
CARACTERE GENERALE
Habitat
Speciile de Citrobacter triesc n ap, sol, ocazional n alimente sau fac
parte din flora normal a tractului intestinal al omului i animalelor. Pot fi ntlnite
i n apa distilat sau deionizat folosite n mediul intraspitalicesc.
Caractere morfotinctoriale
Speciile genului Citrobacter sunt bacili Gram-negativi, ciliai peritrichi,
necapsulai, nesporulai.
Caractere de cultur
Citrobacter spp. sunt bacterii aerobe, facultativ anaerobe, cu caracteristici
de cultivare asemntoare genurilor Salmonella i Proteus. Pe mediile selective i
difereniale, cu bil sau cu sruri biliare, determin formarea de colonii tip S,
lactozo-negative, de culoarea mediilor. Speciile care nu produc H2S pot fi
difereniate de Salmonella spp. i Proteus spp. care formeaz colonii ochi de
pisic datorit producerii de H2S.
Caractere biochimice i de metabolism
Izolarea pe medii difereniale i selectiv difereniale face posibil
evidenierea caracterelor biochimice, precum i diferenierea lor de genurile
Salmonella i Proteus. Sunt bacterii care nu fermenteaz lactoza. Glucoza, n
schimb, este fermentat cu eliberare de acid i gaz. Zaharozo-negative sunt
Citrobacter werkmanii, Citrobacter sedlakii, iar cele malonat-negative Citrobacter
farmeri i Citrobacter braakii. Speciile care nu produc H2S sunt Citrobacter
diversus, Citrobacter farmeri, Citrobacter sedlakii, iar cea care nu produce indol
este Citrobacter werkmanii.
Sunt
bacterii
mobile
care
nu
produc
lizindecarboxilaz
i
fenilalanindezaminaz, dar fermenteaz dulcitolul i cellobioza. Produc galactozidaz, folosesc citratul ca unic surs de carbon i nu descompun ureea.
Pot crete i pe mediile cu cianur (testul Braun).
Rezistena fa de factori fizici i chimici
Sunt bacterii sensibile la antiseptice i dezinfectante. Multe tulpini ale
acestui gen sunt frecvent rezistente la cefalosporine de prim generaie, uneori i
la cele de generaie mai nou.
Structur antigenic
Citrobacter spp. sunt enterobacterii care posed antigen somatic O i
antigen flagelar H cu ajutorul crora s-a putut face diferenierea serovarurilor.
Citrobacter freundii prezint 40 de antigene somatice O specifice de grup i 90 de
Pili tip 2
Enterotoxine termostabile
sau termolabile
Efectul biologic
*prezent la serogrupele O5 i O29 a speciei C. freundii
*asociat virulenei i invazivitii
*determin leucopenie, scderea nivelului complementului
seric i capacitatea de multiplicare intrafagocitar;
*reprezint substratul de fixare al bacteriofagilor;
*mascheaz antigenul O, determinnd inaglutinabilitate O
n reaciile serologice;
*favorizeaz afeciuni n afara zonei lor normale de aciune;
*rolul lor n infeciile enterale nu este clar
PATOGENIE. BOALA LA OM
Citrobacter spp. sunt bacili care pot face parte din flora normal intestinal.
Infeciile cu aceste bacterii apar mai ales la persoanele care prezint factori de risc
de infecie (imunocompromii, bolnavi oncologici, pacieni cu tratament
imunosupresor, btrni, copii mici, persoane spitalizate etc.). Aceste
microorganisme pot cauza septicemii, infecii pulmonare, infecii urinare, meningite
etc.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Produsele patologice recoltate n infeciile cu Citrobacter spp. sunt
reprezentate de snge, LCR, urin, materii fecale, sput, probe de control
epidemiologic intraspitalicesc etc.
Diagnosticul de laborator se bazeaz pe caracterele de cultur, biochimice
i antigenice ale acestor microorganisme. Citrobacter freundii izolat din materiile
fecale poate fi confundat cu Salmonella enterica serovar Typhi, deoarece au n
comun caractere biochimice i antigenice, specia genului Citrobacter putnd
aglutina cu serurile polivalente i cu cele anti-Vi specifice salmonelelor. n infeciile
urinare se realizeaz greu diagnosticul de laborator diferenial ntre E. coli i C.
diversus.
Tiparea serologic se face numai n centre specializate. Schemele de tipare
fagic i bacteriocinic sunt unelte epidemiologice.
TRATAMENT
Tratamentul acestor infecii se face pe baza antibiogramei i n funcie de
localizarea infeciei.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Sunt, n general, germeni oportuniti. Factorii predispozani importani ai
acestor infecii sunt: vrstele extreme (btrnii i copii mici), statusul imunologic
compromis, tumorile solide, mediul intraspitalicesc, soluiile perfuzabile
suprainfectate din fabricaie etc. n cadrul infeciilor nosocomiale, se observ un
risc crescut la pacienii colonizai intestinal cu aceste microorganisme fa de cei
necolonizai. Infecia se poate propaga pe cale direct sau indirect, portajul pasiv
pe minile personalului medical fiind cel mai incriminat factor de transmitere al
infeciilor nosocomiale.
La bovine, rar, poate determina mastite, laptele fiind alimentul cel mai
incriminat n izbucnirile de toxiinfecii alimentare cu aceste microorganisme.
Controlul infeciilor nosocomiale reprezint principalul pas n profilaxia
afeciunilor determinate de Citrobacter spp.
G E N U L KL E B S I E L LA
DEFINIIE, NCADRARE
Membrii genului Klebsiella sunt bacili Gram-negativi, ncadrai n tribul
Klebsiellae al familiei Enterobacteriaceae. Acest gen cuprinde 7 specii importante
din punct de vedere medical:
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella oxytoca
Klebsiella ozaenae
Klebsiella rhinoscleromatis
Klebsiella terrigena
Klebsiella ornithinolytica
Klebsiella planticola
Primele patru specii enumerate sunt mai des implicate n patologia uman.
Sugestia cercettorilor de a considera K.pneumoniae, K. ozaenae i K.
rhinoscleromatis ca subspecii ale K. pneumoniae nu este acceptat de
microbiologi i clinicieni, acetia tratndu-le ca i cnd ar fi specii separate.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Speciile genului Klebsiella sunt foarte rspndite n natur (sol, ape de
suprafa, plante) i frecvent fac parte din flora normal a tractului gastrointestinal,
a tractului respirator superior i a tegumentelor umane i animale.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili nesporulai, neciliai, Gram-negativi, scuri i groi, cu capete
rotunjite, dispui n diplo. n produsele patologice apar sub form de cocobacili,
nconjurai de capsul.
Caractere de cultur
Nu sunt germeni pretenioi, crescnd foarte bine pe mediile de cultur
convenionale. Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi. Temperatura optim de
cretere este de 37C, dar pot cre te i la temperatura camerei. Pe geloz simpl
determin formarea de colonii foarte bombate, alb-cenuii, lucioase, cu aspect
mucos (colonii tip M). Se observ deseori apariia de variante ale tipului de
colonie: tipul S i tipul R (colonii plate i uscate). Pe mediile slab selective i
pstreaz aspectul mucoid al coloniilor, iar mediile moderat selective induc
formarea de colonii cu caracter mucoid mai puin pregnant dect cel de pe
celelalte medii.
Caractere biochimice
Fermenteaz lactoza, zaharoza i glucoza cu eliberare de acid i gaz. Nu
produc indol, cu excepia tulpinilor de K. oxytoca. Produc ureaz, acetil-metil
carbinol, folosesc citratul ca unic surs de carbon, dar nu descompun proteinele
cu eliberare de H2S.
Rezistena fa de factori fizici, chimici i biologici
Tulpinile de Klebsiella sunt omorte de cldura umed (la 55C n 30
minute). La temperatura camerei i la ntuneric pot supravieui sptmni i luni de
zile. Unele tulpini pot prezenta o cretere a rezistenei la antiseptice i
dezinfectante.
Klebsiella spp. este sensibil la cefalosporinele de generaia a III-a,
floxacine, colimicin i gentamicin.
Structura antigenic
n genul Klebsiella sunt descrise 3 feluri de antigene: antigenul somatic O
(ntlnit la formele smooth), antigenul somatic R (ntlnit la formele rough) i
antigenul capsular K. Nu prezint antigen flagelar H. n schema antigenic de
antigenul capsular K
enterotoxina termostabil
Efectul biologic
*cu proprieti de adezine;
*implicai n transferul genetic
prin conjugare,
*mediaz plasmidic factorii de
virulen
i
cromozomic
rezistena la antibiotice;
* de natur polizaharidic;
*cel mai important factor de
virulen;
*ofer
protecie
fa
de
fagocitoz i fa de activitatea
bactericid a anticorpilor;
*secretat de unele tulpini;
*rolul n patogenia bolii nu este
clar.
PATOGENIE . BOALA LA OM
Speciile K. pneumoniae i K. oxytoca sunt responsabile de majoritatea
infeciilor umane. Numrul infeciilor cauzate de K. pneumoniae este mai mare
dect cel al infeciilor cauzate de K. oxytoca.
Principalele sindroame clinice ntlnite n infeciile cu Klebsiella spp. sunt:
Pneumonia, n cea mai mare parte cauzat de Klebsiella pneumoniae, este
cea mai frecvent ntlnit form clinic a infeciei cu Klebsiella att n afara ct i
n cadrul unitilor de ngrijire a sntii. Cel mai des survine la brbai de vrste
mijlocii i btrni cu boli debilitante ca alcoolism, diabet, afeciuni pulmonare
cronice. Debutul bolii este brusc cu febr, simptome pseudogripale, stare general
alterat, dureri nespecifice ale corpului, tuse productiv cu o cantitate mare de
sput. Sputa are consisten gelatinoas, de unde i denumirea sput jeleu, i
prezint urme de snge. Frecvent, acest sindrom clinic, se complic cu formare de
abcese i distrucie tisular a plmnilor.
enzime au capacitatea de a inactiva cefalosporinele prin clivarea inelului lactamic al medicamentului. Genetic, producerea acestor enzime este codificat
plasmidic.
Oricum, tratamentul infeciilor cu Klebsiella spp. nu trebuie s fie empiric, ci
bazat pe rezultatele antibiogramei.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Infeciile provocate de Klebsiella spp. sunt mult mai frecvente n instituiile
de ngrijire medical (infecii nosocomiale) dect n afara acestora. Cele dou
specii ntlnite frecvent la noi n ar, K. pneumoniae i K. oxytoca, sunt
considerate ageni patogeni oportuniti, asociai mai ales afeciunilor tractului
gastrointestinal i suprafeelor mucoase. n instituiile de ngrijire medical,
infeciile se transmit, n marea majoritate a cazurilor, prin intermediul minilor
personalului medical.
Controlul apariiei infeciilor nosocomiale este foarte dificil. Grupurile
intraspitaliceti de control a infeciilor agresive pot ajuta foarte mult la scderea
infeciilor nosocomiale prin identificarea i controlul factorilor predispozani,
educaia i instruirea personalului din spital. Pe lng investigaiile potenialelor
izbucniri infecioase, se fac i controale de rutin a personalului, a pacienilor i a
mediului spitalicesc. Cea mai important msur profilactic rmne splatul pe
mini a personalului medical dup contactul cu fiecare bolnav.
Imunizarea activ sau pasiv nu se practic. Totui, seruri hiperimune sau
vaccinuri pentru Klebsiella spp. au un impact major asupra morbiditii i
mortalitii prin infecii nosocomiale.
G E N U L E N TE R O B AC TE R
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Enterobacter (Familia Enterobacteriaceae) cuprinde 14 specii, doar 7
fiind ocazional izolate din produsele patologice umane:
Enterobacter aerogenes
Enterobacter agglomerans
Enterobacter cloacae
Enterobacter sakazakii
Enterobacter gergoviae
Enterobacter taylorae
Enterobacter amnigenus
Enterobacter asburiae
Enterobacter hormaechei.
Speciile cele mai frecvent ntlnite sunt primele cinci.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germenii aparinnd acestui gen sunt rspndii n natur (ap, sol, plante),
n tractul intestinal al oamenilor i animalelor i ocazional i ntlnim n alimente.
Caractere morfotinctoriale
Sunt cocobacili Gram-negativi, ciliai, nesporulai.
Caractere de cultur
Se dezvolt repede pe mediile simple formnd colonii S, mari (2-3 mm).
Colonii R, rugoase, conopidiforme determin E. agglomerans, iar E. aerogenes
colonii mari, mucoase, de tip M, lactozo-pozitive, asemntoare celor de Klebsiella
spp. E. agglomerans i E. sakazakii produc un pigment galben dup 2-4 zile de la
nsmnare.
Caractere biochimice i de metabolism
Speciile genului Enterobacter sunt germeni lactozo-pozitivi, zaharozopozitivi, glucozo-pozitivi cu eliberare de gaz (excepie fcnd cteva biovaruri de
E. agglomerans), ureazo-negativi. Nu produc fenilalanindezaminaz, H2S, indol iar
lizindecarboxilaz au doar dou specii (E. aerogens i E. gergoviae).
Rezistena fa de factori fizici, chimici i biologici
Sunt enterobacterii rezistente, putnd supravieui n apa distilat i
deionizat n mediul intraspitalicesc, n soluii perfuzabile, sau chiar n apa utilizat
n aparatele de hemodializ sau n cele folosite pentru terapia respiratorie. Sunt
rezistente fa de cefalosporinele de prim generaie i fa de unele de generaie
mai nou. Prezint o rezisten crescut la antiseptice i dezinfectante.
Structur antigenic
Structura antigenic a genului Enterobacter este reprezentat de antigenele
somatice O cu specificitate de grup i de cele flagelare H specifice de tip, fiind
cunoscute 79 de serotipuri de Enterobacter. n mod normal nu prezint antigen K.
Rspuns imun
Apar anticorpi anti-O i anti-H care nu au rol protectiv.
Caractere de patogenitate
Patogenitatea tulpinilor de Enterobacter se datoreaz virulenei (tabel XX)
PATOGENIE. BOALA LA OM
Enterobacter spp. sunt germeni oportuniti. Cele mai implicate n patologia
uman sunt speciile E. aerogenes i E. cloacae. Ocazional, acestea pot
determina infecii ale tractului respirator inferior, infecii ale tractului urinar, infecii
ale plgilor, gastroenterite la sugari i nou-nscui, bacteriemii datorate soluiilor
perfuzabile contaminate, uneori chiar septicemii. La pacienii oncologici i la cei cu
tratament imunosupresor sau cu deficit congenital al sistemului imun, infeciile
evolueaz frecvent spre deces.
E. cloacae a fost izolat i la pacieni cu sprue tropical (boala celiac).
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Produsele patologice, n funcie de localizarea infeciei, sunt: sputa, urina,
exsudatul purulent al plgilor, snge, materii fecale, LCR etc.
Diagnosticul de laborator este bacteriologic bazndu-se pe caracterele de
cultur, biochimice i pe reaciile de aglutinare. Tiprile serologice, biochimice i
genetice sunt de un real folos n identificarea definitiv. Pentru infeciile
nosocomiale cu E. aerogenes i E. cloacae se fac tipizri ce au la baz
identificarea plasmidic.
TRATAMENT
Tratamentul se face n funcie de localizarea infeciei inndu-se cont de
rezultatele antibiogramei.
G E N U L H AF N I A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Hafnia aparine familiei Enterobacteriaceae i este constituit dintr-o
singur specie, Hafnia alvei.
CARACTERE GENERALE
Habitat
S-a putut evidenia n ape poluate, n sol, materii fecale etc.
Caractere morfotinctoriale
Bacil Gram-negativ, necapsulat, nesporulat, ciliat.
Caractere de cultur
Crete cu uurin pe mediile uzuale sub form de colonii S, mai rar de tip
R.
Caractere biochimice i de metabolism
Este o enterobacterie lactozo-negativ care fermenteaz glucoza cu
producere de acid i gaz. Nu fermenteaz zaharoza. Nu produce indol, H2S,
ureaz,
fenilalanindezaminaz
dar
produc
lizinalanindecarboxilaz,
ornitindecarboxilaz, -galactozidaz. La 37C se intensific mobilitatea,
activitatea fermentativ i decarboxilazic.
Structur antigenic
S-au descris 60 de fraciuni antigenice O i 34 H, pe baza acestora
realizndu-se o schem de serotipie cu utilizare restrns.
Rspuns imun
Aceste enterobactetrii determin formare de anticorpi neprotectivi anti-O i
anti-H.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Sunt enterobacterii care se izoleaz frecvent din materiile fecale umane,
dar la care enteropatogenitatea nu este clar definit. Pot fi implicate n
traheobronite post-intubaie sau n infecii ale tractului urinar.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Din produsele patologice recoltate (materii fecale, urin, sput), se izoleaz
Hafnia alvei, iar diagnosticul prezumptiv se pune pe baza caracterelor
morfotinctoriale, de cultur i biochimice ale acestor enterobacterii. Identificarea
definitiv se face printr-o investigare cu teste extinse enzimatice pentru a face
diagnosticul diferenial cu Salmonella, Enterobacter i Serratia.
TRATAMENT
G E N U L S E R R ATI A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Serratia este o grupare de enterobacterii mobile care cuprinde 11
specii, 10 fiind izolate la om, din care cele mai frecvente sunt:
Serratia marcescens
Serratia liquefaciens
Serratia rubidaea
Serratia odorifera
Serratia plymuthica
Serratia ficaria
Serratia fonticola.
Serratia marcescens este principalul exponent al genului.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germenii aparinnd acestui gen sunt rspndii n natur (ap, sol, plante),
n tractul intestinal al oamenilor i animalelor i ocazional i ntlnim n alimente.
Caractere morfotinctoriale
Sunt parvobacili, Gram-negativi, cu cili peritrichi.
Caractere de cultur
Sunt germeni nepretenioi, crescnd bine pe medii simple. n bulion cresc
foarte bine, determinnd apariia unui inel rou sau a unei pelicule la suprafaa
mediului. Pe geloz simpl determin formarea de colonii de tip S, rotunde,
bombate, cu diametrul de 1-2 mm, care au consisten untoas. Dup 48-72 ore
de la nsmnare speciile S.marcescens, S.rubidaea, S.plymuthica produc un
pigment rou aprins. Pe geloz-snge S.marcescens formeaz colonii hemolitice.
Caractere biochimice
G E N U L P RO TEU S
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Proteus (Familia Enterobacteriaceae) cuprinde trei specii cu
importan medical:
Proteus mirabilis
Proteus vulgaris
Proteus penneri.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germenii din genul Proteus sunt ubicuitar rspndii n natur, putndu-se
ntlni n sol, ape reziduale, ape de suprafa, n materiile organice n putrefacie,
n tractul intestinal uman, n alimente i n produse patologice.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram-negativi, ciliai peritrichi sau lofotrichi. Sunt polimorfi: au
variate forme, de la bastonae scurte de 1-3 m lungime, pn la forme lungi
filamentoase. Nu prezint capsul i nici spori.
Caractere de cultur
Nu sunt germeni pretenioi. Pe geloz simpl i pe geloz-snge au
caracteristica unic n familia Enterobacteriaceae de a invada mediul, fenomen
numit fenomen de crare. invazie, roire. Din locul inoculrii, valuri succesive
de cultur migreaz concentric pn la marginea mediului sau pn la ntlnirea
cu vlul migrator al altei colonii. Dac coloniile migratoare aparin aceleiai tulpini,
valurile se intric, formnd o pnz continu. Dac ele aparin unor tulpini diferite,
chiar din aceeai specie de Proteus, migrrile se opresc la o distan de 1-2 mm,
ntre ele trasndu-se o linie de demarcaie, fenomen cunoscut sub numele de
fenomen Dienes. Acesta reprezint un important marker epidemic. Pe mediile
selective care conin sruri biliare, dezoxicholat, morfin etc. Proteus crete sub
form de colonii S, netede, rotunde, translucide, lactozo-negative, de culoarea
mediului, n ochi de pisic datorit producerii de H2S, evideniat prin apariia unei
pete de culoare neagr n centrul coloniilor.
Caractere biochimice
Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi, care fermenteaz glucoza cu
producere de acid i puin gaz. Unele tulpini pot fermenta zaharoza.
Nefermentarea lactozei este un indicator al patogenitii. Proteus vulgaris este
singurul care produce indol i care nu fermenteaz maltoza. Producerea de H2S
este obligatorie n cadrul acestui gen. Descompun ureea. Produc
fenilalanindezaminaz; specia P.vulgaris fiind singura care nu produce
ornitindecarboxilaz. Proteus spp. iau parte la procesele de putrefacie, pe de o
parte prin folosirea oxigenului din mediu, favoriznd dezvoltarea bacteriilor
pili de sex
factori fimbriari de
colonizare
enterotoxinele
Efectul biologic
*importani n colonizarea normal a tractului gastro-intestinal;
* importani factori de virulen,
*ajut microorganismele s determine afeciuni n afara zonei
lor normale de aciune;
*implicai n transferul genetic prin conjugare, mediind plasmidic
factorii de virulen i cromozomial rezistena la antibiotice;
*rol n colonizarea bacteriilor;
*elaborate de tulpini implicate n producerea de gastroenterite la
nou-nscui i copii mici;
*importana lor n infeciile enterice nu este cunoscut.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Ca germeni condiionat patogeni, Proteus spp. pot declana, singuri sau n
asociaie cu ali ageni patogeni, infecii la diferite nivele ale organismului gazd.
Cauzeaz infecii ale tractului digestiv: toxiinfecii alimentare i enterite la
sugari i la copii mici. Infeciile tractului respirator inferior, pneumoniile, sunt de
cele mai multe ori nosocomiale. Septicemiile apar mai ales la btrni. Ele pot fi
nsoite sau urmate de peritonite, meningite etc. Meningita neonatal este o
afeciune foarte grav a nou-nscuilor, iar dac tulpinile incriminate aparin
speciei P.mirabilis, poate fi nsoit de abces cerebral. Pot suprainfecta plgile
chirurgicale sau pe cele arse (infecii nosocomiale) putnd duce la apariia
abceselor.
Infeciile tractului urinar inferior sunt reprezentate de cistite. La pacienii cu
litiaz urinar, P.mirabilis, a fost izolat frecvent din urin, bacteriuria recurent fiind
o complicaie nerezolvabil la aceti bolnavi. Capacitatea Proteus spp. de a
descompune ureea joac un rol foarte important n inducerea litiazei urinare.
Ureaza hidrolizeaz ureea pn la amoniac i dioxid de carbon. Alcalinizarea urinii
prin creterea nivelului amoniacului determin suprasaturarea magneziului-fosfat
i a calciului-fosfat i cristalizarea lor formnd calculi. Bacteriile din interiorul
pietrelor sunt refractare la tratamentul antibiotic. Pietrele cu dimensiuni mari pot
afecta funcia renal. Creterea nivelului amoniacului n urin, datorat hidrolizrii
ureei n prezena ureazei, poate s produc i leziuni ale epiteliului tractului urinar.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Diagnosticul de laborator este bacteriologic, diferenierea Proteus spp. de
alte microorganisme fcndu-se pe baza prezenei fenomenului de crare,
caracterele de cultur, biochimice fiind importante n punerea diagnosticului
prezumptiv de infecie cu Proteus spp. Diagnosticul definitiv este pus n urma:
identificrii biochimice cu setul lrgit de reacii, care se folosete n
cazuri rare de atipii fenotipice ale izolatelor de Proteus;
tiprii serologice, care se bazeaz pe existena a 55 factori antigenici
O i 31 H;
lizotipiei;
rezistotipiei, folosindu-se antibiotice din grupul -lactamazelor,
aminoglicozidelor i floxacinelor, studiindu-se diferitele grade i spectre de
sensibilitate ale Proteus spp.
TRATAMENT
Tratamentul se face conform antibiogramei i localizrii infeciei.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Fiind germeni foarte rspndii n natur, infeciile cu acest microorganism
depind de statusul imunologic al gazdei, de virulena tulpinilor incriminate, de
controlul infeciilor nosocomiale i a alimentelor.
G E N U L P RO VI D E N CI A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Providencia, (Familia Enterobacteriaceae), cuprinde 5 specii dintre
care 4 au fost izolate din prelevate umane, 1 specie fiind izolat doar de la
animale.:
Providencia rettgeri
Providencia stuartii
Providencia alcalifaciens
Providencia rustigianii.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Habitatul este prea puin cunoscut, de la om au putut fi izolate cel mai
frecvent din urin i materii fecale.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram-negativi, ciliai, necapsulai, nesporulai.
Caractere de cultur
Pe mediile de cultur formeaz de colonii de tip S.
Caractere biochimice i de metabolism
Din punct de vedere metabolic sunt foarte asemntoare cu Proteus spp.
diagnosticul diferenial fiind dat de lipsa migrrii pe mediile de cultur simple,
utilizrii citratului ca unic surs de carbon i de capacitatea de a scinda
malonatul.
Izolate pe mediile selective i difereniale, se vor dezvolta sub form de
colonii tip S, lactozo-negative. Fermentarea glucozei se face cu eliberare de acid
n cantiti foarte mici sau fr producere de gaz. Nu produc H2S dar produc
fenilalanindezaminaz i indol. Numai unele specii pot produce ureaz (P.rettgeri
i unele tulpini de P.stuartii).
Structur antigenic
Providencia spp. prezint antigene somatice O, cu specificitate de grup i
antigene flagelare H, cu specificitate de tip. P.rettgeri cuprinde 45 serovaruri
datorit celor 34 fraciuni antigenice O i 26 fraciuni antigenice H. Providencia
stuartii i P. alcalifaciens cuprind, mpreun, 45 serovaruri datorate fraciunilor
antigenice O (62), respectiv H (30).
Rspuns imun
Rspunsul imun al gazdei se caracterizeaz prin formare de anticorpi antiO i anti-H specifici i neprotectivi.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Speciile P.rettgeri i P.stuartii cauzeaz infecii extraintestinale, ndeosebi
nosocomiale.
Localizarea infeciilor la nivelul tractului urinar este cea mai frecvent
ntlnit.
P.alcalifaciens este foarte rar izolat la om, i se poate implica n toxiinfecii
alimentare sau diaree acut.
Cea mai rar izolat la om este P. rustigianii.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Diagnosticul prezumptiv se pune pe baza studiului caracterelor
morfotinctoriale, de cultur i biochimice, confirmat prin reacii serologice .
TRATAMENT
Tratamentul se face conform antibiogramei i innd cont de localizarea
infeciilor.
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL
Sursa de infecie provine, n marea majoritate, din mediul intraspitalicesc,
infeciile fiind de obicei nosocomiale. Apariia toxiinfeciilor alimentare cu
P.alcalifaciens este datorat manevrrii necorespunztoare a alimentelor.
G E N U L M OR GA N E L L A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Morganella prezint o singur specie, Morganella morganii, i
aparine familiei Enterobacteriaceae.
CARACTERE GENERALE
Habitat
M.morganii are un habitat puin studiat. La om se poate evidenia din
materiile fecale, din urin i mai rar din snge.
Caractere morfotinctoriale
Morganella spp. sunt bacili Gram-negativi, nesporulai, necapsulai, ciliai.
Caractere de cultur
Sunt germeni nepretenioi, pe geloz simpl formnd colonii tip S. Nu
prezint fenomen de migrare, iar pe cele selective coloniile sunt de culoarea
mediilor, lactoz negative.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Singura specie a genului, Morganella morganii, a putut fi izolat, la om, din
urin n infeciile urinare post-operatorii i din materii fecale. Rar poate determina
infecii generalizate.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Diagnosticul de laborator este bazat pe caracterele morfotinctoriale, de
cultur i biochimice putnd fi confirmat, eventual, prin reacii serologice.
TRATAMENT
Tratamentul se face conform antibiogramei iar profilaxia const tot n
prevenirea i controlul infeciilor nosocomiale.
G E N U L P S E UDO M O N AS
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Pseudomonas (Familia Pseudomonaceae) reunete bacili Gram
negativi, nesporulai, cu unul sau mai muli flageli polari, nepretenioi nutritiv,
strict aerobi, oxidaz pozitivi, incapabili s fermenteze glucoza, productori de
pigment.
n genul Pseudomonas au fost incluse peste 60 de specii genul fiind n
continu remaniere taxonomic. Multe specii ale genului au fost reclasificate n
alte 11 genuri.
Palleroni i colegii si de la Universitatea din California clasific speciile de
Pseudomonas n cinci grupe pe baza omologiei ARN-ului ribozomal. Dup 1990
P SE UD O M O N A S AE R U G I NO S A
CARACTERE GENERALE
Este numit i bacilul piocianic este specia izolat cel mai frecvent n
laboratorul de bacteriologie.
Habitat
Comensal al tubului digestiv, este un microorganism ubicuitar, prezent n
sol, pe plante. Este o bacterie creia i place apa. A fost izolat din apa de ru, de
canal, de piscin, de mare, din apa potabil, mineral, termal etc. Se gsete pe
G E N U L B AC TE R OI DES
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Bacteroides cuprinde mai multe specii: B.fragilis, B.thetaiotaomicron,
B.distanosis, B.vulgatus, B.ovatus, B.uniformis.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Au ca habitat intestinul unde se gsesc n cantitate de 109 germeni / gram
de materii fecale.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram negativi, mari, polimorfi, colorai bipolar, neciliai.
Caractere de cultur
Cultiv n strict anaerobioz, la 37C, pe medii cu snge. Cre te sub
form de colonii mari, bine delimitate, netede, lucioase, n general nehemolitice
Creterea le este inhibat pe medii cu dezoxicolat dar este stimulat de bil. Pe
geloza-snge cu bil Bacteroides fragilis descompune srurile biliare ducnd la
apariia unui precipitat cafeniu n jurul coloniei. Pe agarul bil-esculin hidrolizeaz
esculina determinnd nnegrirea mediului
Caractere biochimice
G E N U L P O RP H Y RO M O N AS
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Porphyromonas cuprinde specii anaerobe, comensale ale microbiotei
intestinale i bucale dintre care mai cunoscute sunt: P.asaccharolytica, P.catoniae,
P.endodontalis.
CARACTERE GENERALE
Habitat
P.asaccharolytica habiteaz colonul i vaginul n timp ce P.catoniae,
P.endodontalis sunt componente ale microbiotei din crevasele gingivale.
Caractere morfotinctoriale
Se prezint sub form de bacili i cocobacili Gram negativi, neciliai,
nesporulai.
Caractere de cultur
Pretenioase nutritiv, cultiv lent, n strict anaerobioz producnd un
pigment brun sau negru care poate colora colonia, se poate dezvolta n jurul sau
sub colonie n interval de 6-10 zile. Dup incubare la 37C timp de 5-7 zile apar
colonii de diferite dimensiuni, rotunde, cu margini bine delimitate, lucioase, umede
Caractere biochimice
Descompune fermentativ o serie de aminoacizi: aspartic, glutamic cu
metabolii finali acidul n-butiric, acetic i propionic.
Rezistena fa de factori fizici, chimici i biologici
Sunt sensibile la amoxicilin, macrolide, clindamicin, fluorochinolone,
metronidazol.
PATOGENIE. BOALA LA OM
P.asaccharolytica este implicat n infecii mixte legate de tractul intestinal
inferior, infecii gangrenoase sau ulcere ale piciorului diabetic. P.catoniae intervine
n boala parodontal iar P.endodontalis are rol n formarea plcii dentare
subgingivale, determin abcese periapicale severe, distructive.
G E N U L P RE VO TE LL A
DEFINIIE, NCADRARE
Germenii din genul Prevotella, componeni ai microbiotei bucale, produc
pigment negru, sunt glucidolitice i sunt responsabile de infecii pleuro-pulmonare,
gingivale, n sfera ORL sau pelvi-peritoneale. Specii mai frecvent ntlnite:
P.melaninogenica, P.intermedia, P.nigrescens.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Sunt componeni ai microbiotei bucale. P.melaninogenica se gsete n
crevasele gingivale i n vagin. P.intermedia i P.nigrescens fc parte din
microbiota colonului i a cavitii bucale a omului i animalelor.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram negativi polimorfi predominnd formele cocobacilare,
neciliai, nesporulai.
Caractere de cultur
G E N U L FU S O BAC TE R I U M
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Fusobacterium cuprinde specii strict anaerobe dintre care amintim:
F.necrophorum, F.nucleatum, F.naviforme, F.mortiferum, F.varium etc.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Fusobacterium nucleatum, F.periodonticum, F. alocis i F.necrophorum au
ca habitat cavitatea bucal a omului. F.naviforme i F.gonidioformans sunt
componente ale microbiotei vaginale.
Alte specii de fusobacterii fac parte din flora tractului intestinal.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacili Gram negativi polimorfi: forme filamentoase, balonizate,
fusiforme, cocobacilare. Nu prezint cili sau spor.
Caractere de cultur
Cultiv n strict anaerobioz, la 37C, incubare timp de 48 de ore dup
care apare cultura ce eman un intens miros putid. Coloniile sunt:
PATOGENIE. BOALA LA OM
Fusobacterium nucleatum, F.periodonticum, F. alocis particip la formarea
plcii dentare. F.nucleatum este implicat n parodontite acute i cronice, abcese
cerebrale, abcese hepatice, infecii ale esuturilor moi faciale.
F.necrophorum a fost izolat din infecii ale esuturilor moi periorale i din
infecii n sfera genital.
G E N U L V I B RI O
DEFINIIE, NCADRARE
Microorganismele din acest gen sunt bacili Gram negativi, ncurbai n
virgul, mobili printr-un flagel polar, nesporulai, necapsulai, catalazo- i oxidazopozitivi. Se multiplic n mediu alcalin (pH 7-9) fiind organisme acvatice adaptate
la variate saliniti.
Sunt cunoscute 36 de specii de Vibrio, dintre care cel puin 12 sunt
patogene sau cu potenial patogen pentru om. Germenii din acest gen determin
cel mai frecvent boli gastrointestinale dar i infecii invazive (septicemii cu punct
de plecare necunoscut sau din plgi suprainfectate), infecii ale plgilor expuse la
ap marin. Specii cu importan medical sunt
- Vibrio cholerae, agentul etiologic al holerei,
- Vibrio parahaemolyticus, determin infecii gastrointestinale,
infecii ale plgilor,
- Vibrio vulnificus, determin septicemie, infecii localizate ale
plgilor.
V I B RI O CH O L E R AE
CARACTERE GENERALE
Habitat
Vibrionii sunt microorganisme acvatice, putnd supravieui n ape marine
sau ape dulci i formeaz o microflor autohton a apelor slcii, a lacurilor srate,
estuarelor i a apelor marine i oceanice din vecintatea rmurilor situate n
zonele temperate i calde.
n apele dulci se pot gsi speciile non-halofile, ca V. cholerae, dar prezena
lor este tranzitorie. n apele marine i estuariene, speciile halofile care tolereaz
concentraii crescute de NaCl persist sub mai multe forme: forma liber, forma
epibiotic i forma dormant. Forma liber persist att timp ct apa le ofer
concentraii optime de nutrieni necesari pentru cretere. Forma epibiotic
reprezint o asociere strns a vibrionilor cu matricea chitinoas a
zooplanctonului, scoicilor sau a copepodelor. Aceast asociere este favorizat de
producerea de ctre vibrioni a chitinazei care poate descompune i recicla
substana organic planctonic. Forma dormant este reprezentat de
microvibrioni i celule viabile dar necultivabile i a fost demonstrat prin coloraii
imunofluorescente a probelor de mediu.
Caractere morfologice
Sunt bacterii cu form de bastonae relativ scurte (1,5 - 3 / 0,5m),
ncurbate sau drepte, alteori n form de S, Gram negative, prezentnd un flagel la
unul dintre capete. Nu prezint spori i nici capsul.
Caractere de cultur
Vibrionii sunt bacterii aerobe. Cresc pe medii cu pH alcalin care au n
componen sruri biliare. Pe ap peptonat alcalin vibrionii au o cretere rapid,
n 6 ore fac un vl fin la suprafa i tulbur mediul.
Pe mediile solide dau colonii de tip S, umede. Pe mediul TCBS descompun
sucroza coloniile avnd culoarea galben. Pe geloz snge variantele
neholerigene produc n general colonii hemolitice. Dintre tulpinile holerigene,
biotipul El Tor produce hemoliz beta.
Caractere biochimice i de metabolism
Vibrio cholerae este un germen aerob, oxidazo-pozitiv i catalazo-pozitiv.
Descompune unele zaharuri (glucoz, manoz, sucroz i galactoz), este indol
pozitiv, nu produce ureaz i H2S
Aciunea agenilor fizici i chimici
Vibrio cholerae moare repede prin expunere la lumin, uscare i
antiseptice. n scaunul bolnavilor rezist cteva zile la frig. Rezistena sa n ap
depinde de temperatur, pH, i prezena altor microorganisme. n zonele
temperate se izoleaz din ape, sedimente, plancton, pete, molute i crustacee
n anotimpurile clduroase. Dac temperatura apei nu scade sub 10C se pot izola
n toat perioada anului. n fructe, pete i alte vieuitoare marine rezist 2 3 zile
la temperaturi de 20 - 30C, iar n unt i ngheat mai multe zile. n lapte moare
repede datorit mediului acid.
Structura antigenic
Vibrio cholerae posed antigen flagelar H i un antigen somatic O.
Antigenul flagelar H este comun tuturor vibrionilor.
Pe baza antigenului somatic O vibrionii au fost ncadrai n mai multe
serogrupe notate O1-O6 i O139. Dintre acestea patogene (holerigene) sunt
serogropele O1 i O139. Celelalte serogrupuri sunt neholerigene.
Serogrupul O1 prezint dou biotipuri: clasic i El Tor, difereniate pe baza
unor proprieti fiziologice i a sensibilitii fa de bacteriofagi. Tot serogrupul O1
prezint 13 factori antigenici notai cu litere mari de la A la M. Prin combinaia
acestor factori antigenici, biotipurile se subdivid n 3 serotipuri: Inaba (A+C),
Ogawa (A+B) i Hikojima (A+B+C)
Rspunsul imun
n urma infeciei holerice apar anticorpi fa de:
- antigenul somatic O. Sunt considerai vibriocizi deoarece
determin liza vibrionilor n prezena complementului seric. Titrul acestor anticorpi
crete atingnd un maxim la 10 zile de la infecie, apoi scade rmnnd la un titru
constant 2 7 luni. Prezena lor determin rezisten la reinfecii.
- antigenul flagelar H. Anticorpii antiflagelari determin imobilizarea
vibrionilor.
- anticorpi antitoxici.
Cu toate c titrul anticorpilor virulicizi scade, totui nu se observ foarte
multe reinfecii. Acest lucru poate fi explicat prin prezena anticorpilor secretori de
tip IgA. Acetia acioneaz la nivelul mucoasei intestinale i nu necesit prezena
complementului.
Imunitatea dup vaccinare este parial i dureaz numai 3-6 luni.
Caractere de patogenitate
Cel mai important caracter de patogenitate este reprezentat de producerea
de toxin holeric. Aceasta este o enterotoxin de natur proteic. Este alctuit
din dou subuniti active A i 5 subuniti de aderare. Subunitile B se fixeaz
de receptori specifici ai enterocitelor, permind subunitilor A s acioneze.
Aciunea lor const n activarea adenilciclazei urmat de acumularea de AMPc n
enterocite. Activarea sistemului adenilciclaz/AMPc duce la inhibarea absorbiei
intestinale de sodiu i creterea secreiei de ap n lumenul intestinal. De
asemenea crete eliminarea de potasiu i bicarbonat de sodiu. Urmarea acestei
aciuni este apariia unei diareei apoase cu pierdere masiv de electrolii.
Ali factori de patogenitate sunt mobilitatea i producerea de chemotaxine
care permit vibrionilor s se ndrepte direct ctre suprafaa enterocitelor.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Vibrio cholerae produce holera, o toxiinfecie alimentar caracterizat clinic
prin diaree apoas urmat de deshidratare grav, colaps algid, alterarea profund
a strii generale, cu evoluie grav i o mortalitate de 50 - 80% dac nu este
tratat i de 1 - 2% sub tratament. Boala poate evolua uor sau chiar
asimptomatic. Suportul material al transmiterii este apa i alimentele contaminate
marine n stare crud dac sunt recoltate din zone cunoscute c ar fi populate cu
vibrioni; evitarea contaminrii alimentelor gtite cu cele crude.
Msurile specifice sunt reprezentate de vaccinare. n acest domeniu ara
noastr are prima contribuie n pandemia din 1913, cnd pe teritoriul Romniei sa practicat pentru prima dat vaccinarea pe scar larg, care a dus la stingerea
rapid a epidemiei.
Primele vaccinuri au fost cu administrare parenteral cu eficien mai
redus. n prezent se ncearc dezvoltarea vaccinurilor cu administrare oral,
utiliznd mai multe metode: vaccinuri corpusculare inactivate, vaccinuri vii obinute
prin inginerie genetic.
Vaccinurile corpusculare inactivare cu administrare oral confer o
imunitate de 6 luni i se pot administra n zonele endemice. Vaccinurile vii cu
administrare oral, obinute prin inginerie genetic par a fi o promisiune n
creterea eficienei vaccinrii holerice.
VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS
V. parahaemolyticus este agentul etiologic al unor gastroenterite cu scaune
sangvinolente ce apar dup consumul de animale marine. De asemenea
determin i infecii extraintestinale cum ar fi infecia plgilor, otite, conjunctivite.
Aceste infecii au un caracter profesional i apar la personalul care se ocup cu
transportul animalelor marine. Bacteria s-a izolat i din snge.
Boala este mai frecvent n zonele de coast ale mrilor i oceanelor,
primele i cele mai multe cazuri fiind descrise n Japonia.
Diagnosticul bolii se suspecteaz pe baza semnelor clinice, a datelor
epidemiologice (zona geografic, obiceiurile culinare din zon). Diagnosticul se
confirm prin examene de laborator care urmresc izolarea bacteriilor din materii
fecale i din alimentele suspecte. Metodele de laborator sunt comune cu cele
folosite pentru identificarea celorlali vibrioni. V. parahaemolyticus se deosebete
de V. cholerae prin faptul c este halofil i crete pe medii hiperclorurate.
VIBRIO VULNIFICUS
V. vulnificus produce dou forme clinice de boal:
- septicemie primar care apare dup ingerarea oral a bacteriei i are o
rat mare de mortalitate
- o form localizat de infecie a plgilor care poat evolua spre necroz.
Boala are un caracter profesional fiind mai frecvent la persoanele care
manevreaz carnea de pete sau cur bazinele de peti. Bacteria triete n
apele i vieuitoarele marine din zonele calde.
Diagnosticul se confirm prin izolarea bacteriei din snge i puroi prin
metode folosite pentru vibrioni. Se remarc faptul c V. vulnificus este o specie
halofil i descompune lactoza.
G E N U L HE LI CO B AC TE R
DEFINIIE, NCADRARE
Microorganismele din acest gen sunt bacili spiralai, Gram negativi, cu 4-6
flageli la un pol i sunt microaerofili. Pe baza acestor caractere au fost ncadrai la
nceput n genul Campylobacter. Mai recent, studii de taxonomie molecular au
pledat pentru ncadrarea lor ntr-un gen nou, genul Helicobacter.
Germenii din genul Helicobacter au ca habitat natural omul i animalele
care le gzduiesc n:
- stomac: H.pylori, H.heilmanni, H.nemestrinae, H.acinonyx, H.mustelae,
H.felis, H.bizzozeronnii etc;
- intestin: H.cinaedi, H.fenneliae, H.canis, H.hepaticus, H.pullorum,
H.bilis, H.muridarum etc.
Importan medical o are Helicobacter pylori i mai puin Helicobacter
heilmannii. Evidenierea n 1982, prin examen microscopic i cultur a H. pylori n
biopsiile de mucoas gastric a fost probabil cea mai important descoperire
medical de la sfrit de secol, cercetrile ulterioare demonstrnd implicarea
acestei bacterii n patogenia afeciunilor gastroduodenale.
HELICOBACTER PYLORI
CARACTERE GENERALE
Habitat
H. pylori colonizeaz mucoasa gastric, ndeosebi zona antral, fiind
deosebit de bine adaptat la condiiile ostile oferite de stomac. Odat stabilit in
stomac poate persista o lung perioad de timp, chiar toat viaa. Poate disprea
spontan odat cu instalarea gastritei atrofice ce determin dispariia receptorilor
specifici.
Caractere morfotinctoriale
Sunt bacterii Gram negative, ncurbate sau spiralate, prezentnd 4-6 flageli
localizai la un pol. La microscopul electronic pot avea forma literei S sau pot fi
cocoide.
Caractere de cultur
Pentru cultivare se utilizeaz o gam larg de medii care trebuie
suplimentate cu snge 10% i ageni antimicrobieni pentru a preveni contaminarea
fungic i bacterian. Plcile se incubeaz la 37C, n microaerofilie (CO2 10%, N
85%, O2 5%), peste 7 zile, cu prima citire la 3 zile.
H.pylori produce colonii de tip S, translucide, de 1-2 mm.
Caractere biochimice i de metabolism
Sunt bacterii care cresc n condiii de microaerofilie, au metabolism
respirator, nu cresc la 25C, sunt oxidazo pozitive i nu descompun zaharurile.
(mucosa-associated lymphoid tissue lymphomas), coronarite, reflux gastroesofagian, anemie feripriv, boli dermatologice i reumatice.
La gazda susceptibil, Helicobacter pylori cauzeaz gastrit cronic activ
care poate duce la boal ulceroas gastric sau duodenal, cancer gastric, limfom
MALTomas.
Normal mucoasa gastric nu este colonizat cu bacterii, pH-ul acid
distrugnd bacteriile ajunse la acest nivel. Cu toate acestea H. pylori este capabil
s colonizeze mucoasa gastric, mai ales cea antral. Trei factori fac posibil
colonizarea stomacului:
- producerea de ureaz n cantitate mare. Ureaza hidrolizeaz ureea cu
eliberare de amoniac care tamponeaz pH-ul acid;
- forma spiralat i flagelii care permit traversarea stratului de mucus cu
localizarea bacteriei la nivelul celulelor mucoasei gastrice unde pH-ul este neutru;
- prezena de adezine care realizeaz legarea specific de celulele
epiteliului gastric.
La persoanele receptive, dup un scurt episod de gastrit acut, infecia cu
H. pylori determin constant o inflamaie cronic a mucoasei gastrice, care crete
semnificativ riscul apariiei ulcerului gastro-duodenal, a cancerului gastric i a
limfomului gastric.
Gastrita cronic activ este caracterizat de prezena unui infiltrat
inflamator bogat al mucoasei alctuit din neutrofile, limfocite B i T, macrofage i
mastocite. Uneori n lamina propria se constituie foliculi limfoizi care prin
dimensiunea lor pot proemina spre lumenul gastric. De notat c bacteria nu
invadeaz mucoasa gastric. Contactul dintre bacterie i epiteliu determin
eliberare de citokine care accentueaz infiltratul inflamator.
Infecia cu H. pylori este probabil cea mai frecvent i persistent infecie
din lume afectnd aproximativ jumtate din populaia globului. Dintre persoanele
infectate doar o mic parte au infecie simptomatic sau dezvolt ulcer i cancer
gastric. Acest fapt este datorat variabilitii exprimrii genelor ce codific
citotoxinele, rezultnd astfel tulpini circulante cu virulen diferit. Deci n
patogenia acestor boli gastroduodenale, prezena H. pylori este necesar dar nu
suficient.
Fr s se gseasc o explicaie concret, s-a demonstrat c aceast
bacterie este implicat n producerea altor boli ca: reflux gastroesofagian, anemie
feripriv, boli dermatologice, boli reumatice
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Posibilitile de diagnostic sunt multiple, descriindu-se metode invazive ce
permit evidenierea direct a H. pylori de la nivelul biopsiilor de mucoas gastric
i metode neinvazive, indirecte.
Metodele invazive presupun efectuarea unei gastroscopii cu recoltarea
mai multor fragmente de mucoas gastric. Prezena bacteriei n sucul gastric
este rar ntlnit, astfel nct examinarea acestui produs nu este util.
Conservarea probelor recoltate se face la 4C pentru maximum 4 ore. Dac
se depete acest interval se folosesc medii de transport n care proba poate fi
meninut maximum 24 de ore.
Din fragmentul recoltat se efectueaz testul ureazei, microscopie direct i
cultivarea bacteriei.
HELICOBACTER HEILMANNII
G E N U L C AM P YL O B AC TE R
DEFINIIE. NCADRARE
Din punct de vedere morfologic genul cuprinde bacili Gram negativi, de
form spiralat, ncurbat sau asemntoare literei S, prevzui cu un singur flagel
polar la una sau ambele extremiti, care i confer o micare specific n zbor de
musculi. Necesit condiii speciale de cultivare: microaerofilie, medii speciale
mbogite i o temperatur de cretere de 42-43C, cu o incubare de 48-72 de
ore.
Genul cuprinde mai multe specii: Campylobacter jejuni, C.coli, C.fetus,
C.lari, C.upsaliensis, C.hyoliei, C.showae, C. hyointestinalis, dintre care primele 3
specii au importan medical mai mare.
C.jejuni i C.coli sunt implicate n numeroase episoade de toxiinfecie
alimentar ce evolueaz cu diaree sangvinolent sau apoas, mai ales la copii.
Localizri sistemice, extraintestinale ale infeciei apar la organisme
imunocompromise. C. fetus este un germen oportunist la organisme
imunodeprimate, fiind resposabil de boala abortiv la animale.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Germeni din genul Campylobacter sunt comensali n intestinul animalelor,
n general psri: pui, curcani, rae, pescrui (C. lari), dar i al mamiferelor:
porcine. Faptul c psrile reprezint sursa cea mai important este explicat de
temperatura corporal mai crescut a lor ce convine caracterului termotolerant al
bacteriei. Din cauza rezervoarelor naturale extinse, Campylobacter poate
contamina apele de suprafa i solul.
Transmiterea la om se face prin consum de ap, lapte sau alimente de
origine animal contaminate sau prin contact cu animalele de apartament.
Alimentul cel mai incriminat este laptele nepasteurizat, urmat de carnea de
pasre.
Foarte rar infecia se transmite de la om la om. La homosexuali germenii
pot ptrunde n organism prin contact sexual anal sau oral. La acetia sunt mai
frecvente infeciile cu germeni atipici.
Mutele din ferme i molutele pot fi vectorii acestei infecii.
Receptivitatea este general, infeciile putnd aprea la orice vrst.
Studiile arat un vrf al incidenei bolii la copiii sub un an i la grupa de vrst 1529 de ani. Totui cele mai multe coproculturi pozitive se ntlnesc la aduli i copiii
mari. Se pare c infeciile sunt mai frecvente la sexul masculin dect la cel
feminin.
Dei Campylobacter este o bacterie fragil care se inactiveaz prin
majoritatea procedeelor folosite pentru distrugerea agenilor enteropatogeni din
alimente, ea continu s fie cauza unui numr mare de gastroenterite, necesitnd
aplicarea continu a msurilor de prevenire. Dintre acestea cele mai eficiente sunt
clorinarea apei potabile, pasteurizarea laptelui, creterea animalelor de ferm n
condiii ct mai igienice, respectarea tehnologiilor i a igienei n timpul sacrificrii
animalelor i a prelucrrii crnii, controlul periodic al personalului care lucreaz la
prepararea i distribuirea alimentelor, prepararea separat a alimentelor de origine
animal. Msurile de educaie sanitar a populaiei trebuie s includ informarea
prinilor asupra pericolului contactului copiilor cu animalele de companie bolnave,
evitarea consumului de lapte proaspt nepasteurizat i a crnii insuficient
preparat termic.
Ca msur specific s-a reuit prepararea unui vaccin care s-a dovedit
eficient la animalele de experien, fiind n prezent ntr-o faz precoce de testare
pe voluntari umani.
Spirochete
G E N U L TR E P ON E M A
DEFINIIE, NCADRARE
Microorganismele din acest gen sunt bacterii spiralate, subiri, foarte
mobile. Sunt strict aerobe sau microaerofile i sunt foarte pretenioase nutritiv.
Speciile patogene nici nu se cultiv pe medii artificiale.
TREPONEMA PALLIDUM
CARACTERE GENERALE
Habitat
T. pallidum are ca unic gazd omul, nefiind izolat de la animale. n mediul
extern nu rezist fiind foarte sensibil la uscciune i la aciunea dezinfectantelor.
Caractere morfotinctoriale
T. pallidum este o bacterie spiralat, cu spire regulate i cu capetele drepte.
Este foarte subire i relativ scurt avnd lungimea de 2 20 m i grosimea de
0,1 - 0,3 m. Este foarte mobil, mobilitatea fiindu-i asigurat prin mai multe fibre
axiale periplasmice nfurate n jurul protoplastului i inserate la extremitile
cilindrului protoplasmic prin corpii bazali. Micarea caracteristic se observ prin
examinarea treponemelor la microscopul cu fond ntunecat unde apar ca
spirochete fine, cu 6 - 14 spire regulate (1,1 m lungimea de und i 0,3 m
amplitudine) capetele efilate, animate de micri graioase de nurubare, flexie i
translaie.
Caractere de cultur
T. pallidum nu se poate cultiva pe medii de cultur artificiale. Poate fi
meninut n via prin inoculri intratesticulare la iepure care dezvolt o orhit
sifilitic. n acest mod s-a pstrat n laboratoarele de referin tulpina Nichols de T.
pallidum obinut n 1912 de la un pacient care a decedat de neurosifilis. Din
aceast tulpin se prepar antigenele necesare diagnosticului serologic.
Caractere biochimice i de metabolism
Este un germen microaerofil pentru c nu poate fi cultivat in vitro
caracterele biochimice nu sunt cunoscute.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Diagnosticul de laborator se bazeaz pe evidenierea treponemelor din
leziunile din sifilisul primar i secundar i pe diagnosticul serologic n toate cele trei
stadii.
Deoarece T. pallidum nu se cultiv pe medii artificiale, diagnosticul
bacteriologic direct se rezum la evidenierea spirochetelor prin examen
microscopic direct.
n sifilisul primar recoltm secreie din ancru. Leziunea se cur cu ser
fiziologic, se ndeprteaz crustele, se scarific uor zona i exsudatul aprut se
recolteaz pe o lam prin capilaritate sau aspirare fr a-l contamina cu hematii.
Se examineaz imediat deoarece treponemele sunt foarte sensibile n mediul
extern.
n sifilisul secundar se recolteaz exsudat din leziuni, biopsii. n sifilisul
teriar se recolteaz lichid cefalorahidian, piese necroptice. n sifilisul congenital
examinm cordonul ombilical, placenta, aspiratul nazal, prelevatele din leziunile
cutanate.
Deoarece treponemele sunt organisme foarte subiri, care se coloreaz
slab dup metoda Gram, ele pot fi observate doar la microscopul cu fond
ntunecat sau prin coloraii speciale.
Microscopia pe fond ntunecat evideniaz treponemele ca spirochete fine,
cu 6 - 14 spire regulate, cu capetele efilate, animate de micri graioase de
nurubare, flexie i translaie.
Coloraiile speciale ce pot fi folosite sunt: impregnarea argentic (folosit la
colorarea preparatelor anatomopatologice), coloraia Giemsa, coloraia negativ
cu tu de China i imunofluorescena.
Deoarece la microscopia pe fond ntunecat treponemele patogene pot fi
confundate cu cele comensale de pe mucoasa genital, iar coloraiile sunt greoaie
i greu de interpretat datorit artefactelor, imunofluorescena rmne metoda de
referin deoarece colorarea se face cu globuline anti - T. pallidum marcate cu
fluorescein.
Sifilisul este rspndit n toat lumea, fiind mai frecvent n marile aglomerri
urbane. Dup un iniial declin n anii 40 dup descoperirea penicilinei, n prezent
incidena acestei boli este n cretere n toat lumea.
Sursa de infecie este omul bolnav n stadiu de sifilis primar sau secundar.
Boala se transmite prin contact sexual, transplacentar i prin snge infectat
(transfuzii). Receptivitatea este general, infecia existnd la orice vrst. O
frecven mai mare o ntlnim la persoanele active sexual cu vrste ntre 25 i 40
de ani.
Scopul principal al msurilor de prevenire l reprezint limitarea rspndirii
bolii. Se iau msuri de profilaxie nespecific pentru bolile cu transmitere sexual:
evitarea contactelor sexuale neprotejate, evitarea partenerilor multiplii, anonimi, iar
n cazul mbolnvirii, tratarea tuturor partenerilor sexuali.
Triajul n mas al cazurilor nou aprute i tratarea acestora reduce mult
frecvena bolii n populaie. Depistarea gravidelor i tratarea lor scade incidena
sifilisului congenital.
G E N U L BO RR EL I A
DEFINIIE. NCADRARE
Borreliile sunt spirochete groase, cu spire laxe, mobile. Sunt meninute n
natur printr-un ciclu care implic animale slbatice sau omul i artropode
hematofage.
Clasificarea germenilor din genul Borrelia bazat iniial pe gazda natural,
vectorii implicai i patogenitate este perfectat prin metode de biologie
molecular. Difereniem dou specii de interes medical uman:
- Borrelia recurrentis agentul etiologic al febrelor recurente
- complexul Borrelia burgdorferi agentul etiologic al bolii Lyme.
BORRELIA BURGDORFERI
CARACTERE GENERALE
Habitat
Specia este gzduit de variate psri slbatice i mamifere iar
transmiterea se face prin cpue Ixodides i probabil prin nari. Cpuele au un
ciclu de via de doi ani iar n acest timp au trei perioade n care se hrnesc cu
snge parazitnd mamifere slbatice. Astfel se pot infecta cu Borrelia spp. i pot
transmite boala la alte animale, ntreinnd astfel rezervorul natural.
Caractere morfotinctoriale
Borrelia spp. sunt spirochete mai groase (0,2-0,5 m grosime, 830 m
lungime) cu 3-10 spire laxe, cu capetele drepte i foarte mobile. Mobilitatea este
asigurat prin mai multe fibre axiale periplasmatice (7-20 de fibre la fiecare
G E N U L LE P TO S PI R A
DEFINITIE. NCADRARE
Leptospirele sunt spirochete subiri, fine cu spire strnse i regulate i cu
capetele ncrligate. Sunt organisme mobile avnd o micare caracteristic de
nurubare i flexie. Sunt unice ntre spirochete deoarece pot fi cultivate pe medii
artificiale. Pot ptrunde n organism prin tegumente i mucoase intacte sau uor
scarificate.
Genul Leptospira, n funcie de diferenele antigenice ale nveliului
lipopolizaharidic care nconjoar peretele celular se mparte n dou specii: L.
interrogans, cu peste 200 de serovaruri patogene i L. biflexa cu peste 60 de
serovaruri saprofite.
Taxonomia modern bazat pe omologia ADN-ADN mparte leptospirele n
7 specii patogene i 3 specii saprofite.
Cele dou clasificri ale leptospirelor se suprapun parial. Organisme
identice din punct de vedere serologic pot fi diferite genetic, iar organisme cu
aceeai genetic pot face parte din grupuri serologice diferite.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Leptospira interrogans este gzduit de mamifere dar i de reptile i
amfibieni. Gazdele se mpart n trei categorii: de meninere, accidentale i de
amplificare.
Gazdele de meninere poart leptospirele n rinichi i posibil i n organele
de reproducere, fiind aparent sntoase. Doza infectant este mic i infecia se
transmite prin urin sau pe cale sexual. Exist o afinitate a serovarurilor pentru o
anumit gazd: L. icterohaemorrhagiae pentru obolan, L. canicola pentru cini, L.
pomona pentru porci, L. grippotyphosa i L. hebdomadis pentru oareci. Cele mai
numeroase gazde de meninere sunt roztoarele.
Gazdele accidentale sunt reprezentate de om sau animale domestice care
se infecteaz prin elementele din mediu contaminate cu urina gazdelor de
meninere sau a altor gazde accidentale. Doza infectant este mare, portajul renal
este de scurt durat, infecia fiind manifest clinic frecvent.
Gazdele de amplificare sunt gazde accidentale la care infecia se poate
transmite epidemic. Aceste condiii sunt ndeplinite n cresctoriile de animale
domestice unde acestea transmit infecia i ctre om i ctre gazdele de
meninere.
Animalele contamineaz prin urin apa, solul umed sau nmolul unde
leptospirele pot supravieui pn la 42 de zile la ntuneric, mediu cald i pH neutru
sau uor alcalin. L. biflexa triete n apele de suprafa.
Caractere morfotinctoriale
Leptospirele sunt spirochete subiri, fine (lungime 6-20 m, diametrul 0,1
m) cu spire strnse i regulate i cu capetele ncrligate. Sunt organisme mobile,
avnd doi flageli periplasmici inserai subterminal, nfurai ntr-un cilindru
protoplasmic protector. Flagelii sunt inserai la capetele opuse ale corpului
bacterian. Forma spiralat i dispoziia flagelilor i permite s ptrund n organism
Caractere de patogenitate
Leptospira interrogans este patogen prin multiplicare i invazivitate.
Mobilitatea i gradul de ncovoiere a extremitilor corpului bacterian confer
leptospirei puterea de penetrare a esuturilor. Unele tulpini posed un factor de
virulen Vi.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Leptospiroza este zoonoza cu cea mai larg rspndire, afectnd
numeroase specii de mamifere domestice sau slbatice. Boala la om este
determinat cel mai frecvent prin contactul indirect cu apa sau solul contaminate
cu urina animalelor infectate dect prin contact direct cu animalele purttoare.
Leptospirele ptrund n organismul uman prin tegumente i mucoase intacte sau
uor scarificate. Pot ptrunde prin conjunctiv, mucoasa nazal sau chiar prin
plmni (aerosoli). Leptospirele pot strbate placenta i pot provoca avort sau
deces fetal ante-partum.
n gazdele susceptibile, prin intermediul sistemului limfatic, leptospirele
ajung n sistemul circulator cauznd o leptospiremie urmat de rspndirea lor n
toate organele. Organismul gazd rspunde prin secreia de imunoglobuline
opsonizante care determin eliminarea bacteriilor din snge. Leptospirele vor
rmne viabile timp de sptmni sau luni n esuturile ferite de aciunea
anticorpilor: tubii renali, sistemul nervos central, camera anterioar a ochiului.
n boala acut leptospirele se multiplic n endoteliul vaselor mici
determinnd vasculite n orice sistem sau organ: rinichi, ficat, plmni, piele,
muchi.
Posibilitatea afectrii mai multor organe explic polimorfismul clinic al bolii,
simptomatologia fiind reprezentat de asocierea de sindroame. Manifestrile
clinice ale bolii la om pot fi variabile, de la forme uoare pn la forme grave cu
insuficien renal sau hepatic.
Incubaia este de 3-30 de zile, debutul fiind caracterizat de febr nalt,
greuri, vrsturi, tuse, dureri musculare i erupii tegumentare. n perioada de
stare se pot descrie totui dou entiti n funcie de apariia icterului: leptospiroza
anicteric i leptospiroza icteric sau boala Weil. Forma anicteric are n general o
evoluia autolimitat i se manifest ca un sindrom pseudogripal. Forma icteric
are o evoluie medie sau sever fiind asociat cu sindrom hemoragic, insuficien
renal. Alte sindroame pot fi asociate sau pot evolua singular: meningita cu lichid
clar, oc endotoxic, colecistit acut nelitiazic, pneumonie interstiial, sufuziuni
conjunctivale, miocardit.
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
Leptospirele se pot evidenia n snge n primele 5 zile de boal, n lichidul
cefalorahidian ntre a 4-a i a 8-a zi de boal, iar din urin ncepnd din ziua a 9-a
de boal, timp de 6 sptmni.
Examenul direct se poate face printr-un preparat nativ examinat la
microscopul cu fond ntunecat, frotiu colorat Giemsa sau prin impregnaie
argentic i metode imunofluorescente.
Pentru examinarea unui preparat nativ produsul patologic trebuie
centrifugat fracionat, iniial la vitez sczut astfel nct s se ndeprteze
G E N U L M Y CO BA C TE R I U M
DEFINIIE, NCADRARE
Familia Mycobacteriaceae are n componen un singur gen: Genul
Mycobacterium. Genul Mycobacterium cuprinde urmtoarele specii:
- grupul tuberculosis
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium africanum
Mycobacterium bovis
- grupul mycobacteriilor atipice
Mycobacterium kansasii
Mycobacterium marinum
Mycobacterium xenopi
Mycobacterium scrofulaceum
Mycobacterium fortuitum
Mycobacterium gordonae
Mycobacterium malmoense
Mycobacterium ulcerans
Mycobacterium avium-intracellulare
Mycobacterium chelonae
Mycobacterium abscessus
- Mycobacterium leprae
Germenii din genul Mycobacterium sunt bacili care nu cedeaz colorantul
nici sub aciunea combinat a acidului diluat i a alcoolului. Din acest motiv se
numesc bacili acido-alcoolo-rezisteni. Aceast proprietate se datoreaz cantitii
mari de lipide i ceruri din peretele bacterian.
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
CARACTERE GENERALE
Este agentul cauzal al tuberculozei, descoperit de Robert Koch n 1882.
Dei neoficial se mai numete i bacilul Koch numele genului se datoreaz
asemnrii morfologice cu fungii microscopici filamentoi: myces = fung +
bakterion = baston mic.
Habitat
Este un patogen strict uman dei poate infecta i animalele de companie:
papagal, cine, pisic, maimu.
Caractere morfotinctoriale
Mycobacterium tuberculosis se prezint ca un bacil fin, uor ncurbat, cu
dimensiuni de 2-5 m lungime. Are structura peretelui asemntoare cu a
bacteriilor Gram pozitive dar cu coninut mare n lipide i ceruri. Se coloreaz greu
cu coloraia Gram. Pentru evidenierea pe frotiu se folosete coloraia ZiehlNeelsen.
Pe frotiul din cultur tulpinile patogene se dispun n iruri paralele alctuind
corzi (cordoane).
Caractere de cultur
Cultiv lent ntruct timpul de generaie este de 20 de ore. Este un germen
aerob, se dezvolt la 36C, necesit medii de cultur speciale. Cel mai utilizat este
mediul Loewenstein-Jensen care conine printre altele ou, cartof, asparagin,
glicerin, sruri minerale, verde de malachit.
Coloniile apar n interval de 15-30 de zile i sunt de tip R: rugoase, cu
suprafaa zbrcit, uscate, conopidiforme asemnate cu firimiturile de pine.
Coloniile pot fi pigmentate crem-bej.
Pe mediul lichid Mycobacterium tuberculosis crete sub forma unei
membrane groase, cu multe pliuri, care se ridic pe peretele flaconului de cultur.
Astfel de cretere pe medii de cultur o numim cretere eugonic
(abundent, optim).
Caractere biochimice i de metabolism
Este o bacterie strict aerob. Pe baza caracterelor biochimice pe care le
prezint Mycobacterium tuberculosis poate fi identificat n cadrul genului:
- produce acid nicotinic sau niacin
- produce nitrat-reductaz, catalaz, ureaz
- este sensibil fa de pirazinamid
- este rezistent fa de hidrazida acidului tiophen-2-carboxilic
Rezistena fa de factori fizici, chimici i biologici
Este sensibil la cldur, la lumina solar, la radiaiile UV i X, la aciunea
alcoolului de 70. Rezist la frig, desicaie, antiseptice, dezinfectante i detergeni.
n mediul extern, n produse patologice uscate, la adpost de lumina solar
supravieuiete de la cteva luni la un an.
Este o bacterie care dezvolt rezisten fa de tuberculostatice prin mutaii.
Structur antigenic
Constituenii peretelui celular induc apariia unui rspuns imun de tip celular
i a unei hipersensibiliti de tip IV. Mycobacterium tuberculosis prezint la nivelul
peretelui celular urmtoarele structuri antigenice:
- tuberculolipidele reprezentate de acizii micolici, ceruri i alcooli
superiori. n peretele tulpinilor patogene se gsete un sulfo-lipid care induce
dezvoltarea pe cultur sub form de cordoane: cord-factor;
MYCOBACTERII ATIPICE
DEFINIIE, NCADRARE
Sunt mycobacterii prezente n mediul nconjurtor i n microbiota
animalelor, oportuniste pentru organismul uman bolile cauzate fiind numite
micobacterioze. n raport cu caracterele de cultivare micobacteriile atipice se
mpart n patru grupe:
Grupul I fotocromogen, produce pigment dup expunere la lumin:
Mycobacterium kansasii
Mycobacterium marinum
Grupul II scotocromogen, produce pigment dup expunere la lumin dar i
cnd este incubat la ntuneric:
Mycobacterium scrofulaceum
Mycobacterium gordonae
Grupul III noncromogen nu produce pigment:
Mycobacterium xenopi
Mycobacterium ulcerans
Mycobacterium avium-intracellulare
Mycobacterium malmoense
Grupul IV cu cretere rapid, sub 7 zile de incubaie:
Mycobacterium fortuitum
Mycobacterium chelonae
Habitat
Mycobacterium avium complex alctuit din dou specii (M.avium i
M.intracellulare) a fost izolat din apa potabil, din reeaua de ap, din pete crud i
brnzeturi.
Mycobacterium abscessus i Mycobacterium chelonae sunt prezente n apa
de suprafa, n apa de canal, n gunoiul de grajd.
Mycobacterium gordonae este o micobacterie ubicuitar prezent n sol,
ap, lapte nepasteurizat. Este nepatogen pentru om fiind izolat de pe mucoasele
umane, din urin sau lichid gastric.
Mycobacterium kansasii a fost izolat mai puin din mediul nconjurtor fa
de celelalte micobacterii atipice. A fost izolat din reeaua de alimetare cu ap de
unde, prin aspirare sau inoculare, ptrunde n organismul uman.
Mycobacterium marinum se gsete n apele dulci i srate infectnd
persoanele care noat prezentnd traumatisme cutanate.
Sunt rezistente fa de substanele antituberculoase. Este necesar polichimioterapia pentru a evita selectarea mutantelor rezistente
PATOGENIE. BOALA LA OM
Sunt responsabile de afeciuni cu diferite localizri n raport cu specia
infectant:
Mycobacterium kansasii, avnd ca rezervor apa i vitele induce afeciuni
respiratorii;
G E N U L M Y CO P L AS M A I GE NU L U RE AP L AS M A
DEFINIIE, NCADRARE
Genul Mycoplasma i genul Ureaplasma fac parte din familia
Mycoplasmataceae. Cuprind celule procariote fr perete bacterian, rspndite n
natur, izolate de la animale, insecte i de pe plante. Majoritatea speciilor izolate
de la om sunt comensale sau ocazional patogene. Diferena ntre cele dou genuri
TRATAMENT
n tratamentul infeciilor cauzate de Mycoplasma pneumoniae sunt utile
macrolidele, tetraciclinele, fluorochinolonele de ultim generaie.
Ureaplasma urealyticum este rezistent fa de tetracicline deci tratamentul
eficient este eritromicina.
Bacterii intracelulare
G E N U L CH L AM Y DI A
DEFINIIE, NCADRARE
n Ordinul Chlamydiales, familia Chlamydiaceae sunt incluse 2 genuri
(Chlamydia i Chlamydophyla) cu patru specii din care 3 sunt patogene pentru
om: Chlamydia trachomatis, Chlamydophyla psittaci, Chlamydophyla pneumoniae
divizate n biovaruri i serovaruri care determin afeciuni specifice.
CARACTERE GENERALE
Habitat
Chlamydia trachomatis are ca gazde omul, oarecele i porcul.
Chlamydophila pneumoniae are ca gazde naturale omul i caii. Chlamydophyla
psittaci este gzduit de:
- psrile slbatice: pescrui, egrete etc;
- psri domestice: curcan, ra, gin;
- psri de agrement: papagal, canar, pescru;
- mamifere: bovine, ovine, pisici.
Caractere morfotinctoriale
Bacterii mici, 0,2 m, cocoide, parazii intracelulari obligatorii cu perete
rigid, multilaminat, asemntor ca structur cu cel al bacteriilor Gram negative.
n interiorul celulelor incluzia este nconjurat de o matrice bogat n
glicogen. Din acest motiv, incluziile chlamydiene pot fi evideniate pe frotiu prin
colorare cu iod (Lugol).
Coloraia Giemsa, mai frecvent utilizat permite diferenierea incluziilor
tinere alctuite din corpi reticulai care se coloreaz n albastru i a incluziilor
mature n care predomin corpii elementari care se coloreaz n rou.
Caractere de cultur
Cultivarea Chlamydiilor se face pe oul embrionat de gin care se
inoculeaz n sacul vitelin, pe culturi de celule, pe culturi de organ. Creterea
bacteriei este evideniat pe frotiu prin apariia incluziilor intracitoplasmatice.
Rezistena fa de factori fizici, chimici i biologici
Corpusculii elementari rmn infecioi perioade lungi chiar i n condiii de
uscciune. Sunt inactivai de eter, sruri cuaternare de amoniu, fenol, cldur
umed.
Sunt sensibile fa de rifampicin, cicline, macrolide, fluorochinolone iar
Chlamydia trachomatis este sensibil n plus fa de sulfamide.
Structur antigenic
Peretele bacterian conine urmtoarele structuri antigenice:
- antigenul specific de gen: de natur lipopolizaharidic, termostabil,
fixator de complement. Este comun celor 3 specii i este prezent n toate stadiile
de dezvoltare. Poate fi extras din peretele bacterian i este utilizat n
serodiagnostic;
- antigenul cu specificitate de specie: de natur proteic, termolabil, se
numete protein major a membranei externe (PMME). Este prezent n toate
stadiile de dezvoltare dar este specific fiecrei specii de Chlamydia.
- Antigene cu specificitate de tip: de natur proteic, permit clasificare
serovarurilor n cadrul speciei. Chlamydia trachomatis este subdivizat n 16
serovaruri, Chlamydophila psittaci n 13 i Chlamydophila pneumoniae ntr-un
biovar.
Rspuns imun
Rspunsul imun const n sinteza de anticorpi IgM, IgG i IgA fa de
antigene cu specificitate de gen, specie i tip care ns nu au putere protectoare.
Caractere de patogenitate
Sunt patogene prin:
- proteinele hsps = heat shock protein din nveliul chlamydian, care
asigur ptrunderea bacteriei n celula gazd;
- lipoproteina MIP = macrophage infectivity potentiator protein cu rol n
virulena bacteriei.
PATOGENIE. BOALA LA OM
Ciclul de dezvoltare al speciilor de Chlamydia se desfoar n celula
gazd, n interiorul unei vacuole provenit din invaginarea membranei celulare.
Chlamydia ptrunde n celul prin fagocitoz sub form de corpi elementari
cu diametrul de 0,2 m. Corpii elementari reprezint forma extracelular
infecioas a chlamydiilor. Dup aderarea de receptorii celulari specifici,
corpusculii elementari sunt fagocitai ntr-o vacuol n interiorul creia se
transform n corpi intermediari, apoi n corpi reticulai cu dimensiuni de 0,8-1 m.
Corpii reticulai reprezint forma vegetativ neinfecioas a chlamydiilor. Se
multiplic prin diviziune binar alctuind o microcolonie sau incluzie n interiorul
vacuolei de fagocitoz care va crete ca dimensiuni transformndu-se ntr-o mare
incluzie bazofil. Dup 4-5 diviziuni, corpii reticulari sufer o maturare devenind
corpi intermediari apoi, din nou, corpi elementari. Ciclul ia sfrit prin eliberarea
noilor corpi elementari n urma lizrii celulei gazd dup un interval de 48-72 de
ore de la infectarea acesteia. Noii corpusculi elementari infecioi eliberai vor
contamina alt celul.
Corpii elementari sunt forme virulente dar odat intrai n celul
infeciozitatea lor scade devenind nul pentru corpii reticulai.
Chlamydia trachomatis este un patogen exclusiv uman cauznd:
- trahomul, o infecie conjunctival care are ca etiologie serovarurile
(serotipurile) A, B, Ba, C;
- boli cu transmitere sexual cauzate de 8 serotipuri notate de la D la K,
implicate n:
infecii cu localizare joas: uretrite nespecifice i epididimite la
brbat, cervicite i uretrite la femeie;
infecii cu localizare nalt: prostatite, salpingite acute sau
cronice, sterilitate tubar;
localizri extragenitale: conjunctivite foliculare, conjunctivit cu
incluzii, pneumonie, rinit sau otit la nou-nscutul contaminat la
natere.
- Limfogranulomatoza inghinal venerian (boala Nicolas-Favre) cauzat
de serotipurile L1, L2, L2a, L3. Este o boal cu transmitere sexual, cu incubaie
de 10-15 zile. Pe gland, n vagin sau anus apare un ancru nsoit de
poliadenopatie inghinal care fistulizeaz.
Chlamydophila psittaci a fost izolat de la psri, bovine, ovine omul fiind
doar o gazd ocazional, infectat accidental n special cu tulpini aviare. Cauzeaz
psitacoza la papagal, canar i la om. Boala cauzat de Chlamydophila psittaci la
psrile slbatice i la psrile de curte se numete ornitoz. Psitacoza uman se
manifest ca o brohopneumonie. Infecia gravidei cu tulpini ovine duce la avort.
Chlamydophila pneumoniae este un patogen strict uman care poate
cauza infecii la orice vrst evoluia fiind mai grav la pacientul adult sau btrn.
Rezervorul de infecie este uman, transmiterea aerogen. Pot fi afectate succesiv
sau izolat toate segmentele aparatului respirator: sinus, faringe, laringe
(rgueal), bronhii, parenchim pulmonar (pneumonie atipic). n prezent se
deruleaz studii referitoare la posibila implicare a Chlamydophyla pneumoniae n
etiologia ateromatozei ntruct s-au izolat gene i antigene ale bacteriei n plcile
de aterom.
DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Chlamydia trachomatis
Pentru c bacteria se gsete intracelular este necesar ca prelevatul
destinat diagnosticului de laborator s fie recoltat prin raclajul blnd al mucoaselor
pentru a recolta celule. Se examineaz tamponul endouretral, din endocolul uterin,
raclat conjunctival. De la nou nscut se recolteaz secreia nasofaringian iar de
la cazurile de linfogranulomatoz venerian se examineaz aspiratul ganglionar i
puroiul din fistul.
Pe frotiul colorat Giemsa sau cu iod se pot evidenia incluzii citoplasmice,
ntr-o matrice albastr, care deformeaz nucleul. Se pot aplica tehnici de
imunofluorescen direct care utilizeaz anticorpi monoclonali anti-Chlamydia
trachomatis, marcai, pentru evidenierea corpusculilor elementari.
Izolarea se poate face pe culturi celulare Mac Coy sau HeLa.
Bibliografie selectiv
1. Ali A., El-Solh, Mifue Okada, Celestino Pietrantoni, Alan Aquilina, Eileen
Berbary: Procoagulant and fibrinolytic activity in ventilator-associated pneumonia:
impact of inadequate antimicrobial therapy, Intensive Care Med, 2004, 30:1914
1920
2. Amsden GW: Tables of antimicrobial agent pharmacology. n: Mandell GL,
Bennett JE, Dolin R (eds) Mandell, Douglas, and Bennetts principles and practice
of infectious diseases. Churchill Livingstone, Philadelphia, PA, 2000, 578579
3. Andrzej Piekarowicz, Daniel C. Stein: Biochemical Properties of Neisseria
gonorrhoeae LgtE, Journal of Bacteriology, 2002, 184 (23), 6410-6416
4. Appleman MD, Belzberg H, Citron DM, Heseltine PN, Yellin AE, Murray J,
Berne TV: In vitro activities of nontraditional antimicrobials against multiresistant
Acinetobacter baumannii strains isolated in an intensive care unit outbreak,
Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2000, 44:10351040
5. Barnes PF, Barrows SA: Tuberculosis in the 1990s, Ann Intern Med, 1993; 119:
400-410
6. Bass JB Jr, Farer LS, Hopewell PC: Treatment of tuberculosis and tuberculosis
infection in adults and children. American Thoracic Society and The Centers for
Disease Control and Prevention, Am J Respir Crit Care Med, 1994, 149 (5): 135974
7. Beezhold DW, Slaughter S, Hayden MK, et al: Skin colonization with
vancomycin-resistant enterococci among hospitalized patients with bacteremia,
Clin Infect Dis, 1997; 24(4): 704-6
8. Bell Edward A: Quinupristin/dalfopristin: An interesting new antibiotics period,
Infect Dis Child, 2000; 13(3): 53.
9. Berlau J., H. Aucken, H. Malnick, T. Pitt: Distribution of Acinetobacter Species
on Skin of Healthy Humans, Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 1999, 18 :179183
10.
bacterial pathogenesis at mucosal surfaces, Clin Infect Dis, 1998, 27 (2): 256-8.
12.
13.
Bradley SJ, Wilson AL, Allen MC, et al: The control of hyperendemic
Bucureti, 1999
18.
25.
Chang W.N., C.H. Lu, C.R. Huang, Y.C. Chuang: Mixed Infection in Adult
associated with foreign body: four cases and a review of the literature, Chest,
2002, 121(6): 2069-72
29.
Cookson
BD.:
Methicillin-resistant
Staphylococcus
aureus
in
the
community: new battlefronts, or are the battles lost?, Infect Control Hosp
Epidemiol, 2000; 21: 398-403.
34.
intraabdominal infections: case control analysis, Infect Dis Clin Practice, 1993; 2:
332-9.
35.
37.
Cunha BA: Bioterrorism anthrax: A clinical perspective (Part II). Infect Dis
Cunha BA: Zoonotic anthrax: A clinical perspective (Part I). Infect Dis Pract
Cunha CB: Anthrax: Ancient Plague, Persistent Problem. Infect Dis Pract
Donskey CJ, Chowdhry TK, Hecker MT, et al: Effect of antibiotic therapy on
Papanicolaou stained smears and culture, Am J Clin Pathol, 1983, 79 (4): 421-5
46.
Enterococcus faecium bacteremia: risk factors for infection, Clin Infect Dis, 1995,
20 (5): 1126-33.
48.
49.
Evans ME, Feola DJ, Rapp RP: Polymyxin B sulfate and colistin: old
Frank
U:
Hospital
Acinetobacter baumannii
outbreaks
bacteremic
of
Pseudomonas
infections,
Clinical
aeruginosa
and
Microbiology and
Mutation Frequency
Favors
Development
of
Vancomycin
Resistance
in
Fridkin SK, Edwards JR, Courval JM, et al: The effect of vancomycin and
third-generation
cephalosporins
on
prevalence
of
vancomycin-resistant
enterococci in 126 U.S. adult intensive care units, Ann Intern Med, 2001, 135 (3):
175-83.
56.
biological warfare threat, Curr Clin Top Infect Dis, 2000; 20: 335-49
57.
Paris, France, area from 1987 to 1997, Pediatr Infect Dis J, 2001, 20 (6): 570-3
58.
59.
between the United States and Europe, Infect Control Hosp Epidemiol, 1998, 19
(8): 546-51.
61.
Grabenstein JD: Anthrax vaccine: a review, Immunol Allergy Clin North Am,
13: 257-277.
64.
LE, Struelens MJ: French and Portuguese ICU Study Groups: Antibiotic
susceptibility among aerobic gramnegative bacilli in intensive care units in 5
European countries., JAMA, 1999, 281:6771
66.
Streptococcus and Enterococcus, Soc Appl Bacteriol Symp Ser, 1997; 26: 1S11S.
68.
Havlir
DV,
Barnes
PF:
Tuberculosis
in
patients
with
human
treat or not to treat, a reappraisal, Rev Infect Dis, 1991, 13 (4): 600-5.
70.
anthrax: The first 10 cases reported in the United States, Emerg Infect Dis, 2001;
7: 933-943.
76.
Johnson DM, Biedenbach DJ, Beach ML: Antimicrobial activity and in vitro
Kaye KS, Cosgrove S, Harris A, Eliopoulos GM, Carmeli Y.: Risk factors for
of Georgia, 1995:
immunogenicity and adverse reactions, J Infect Dis, 2000, 181 Suppl 1: S208-12
83.
84.
dependent Enterococcus faecium in a bone marrow transplant unit, Clin Infect Dis
1999, 29 (5): 1268-73.
85.
gordonae associated with water from refrigerated fountains, J Hosp Infect, 2001,
48 (1): 76-9
87.
Lane HC, Fauci AS: Bioterrorism of the home front: A new challenge for
factors for vancomycin resistance and predictors of mortality, Infect Control Hosp
Epidemiol, 1999, 20 (5): 318-23.
90.
Actinomyces naeslundii: report of a case, Joint Bone Spine, 2002, 69 (5): 499-501.
91.
Levin AS, Barone AA, Penco J, Santos MV, Marinho IS, Arruda EA,
Manrique EI, Costa SF: Intravenous colistin as therapy for nosocomial infections
caused by multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter
baumannii, Clin Infect Dis, 1999, 28:10081011
92.
Li WC, Chiu NC, Hsu CH: Pathogens in the middle ear effusion of children
vancomycin-resistant
Enterococcus
faecium
transmitted
by
electronic
96.
21 (3): 545-51.
98.
Maki DG, Agger WA: Enterococcal bacteremia: clinical features, the risk of
happen in the United States?, Infect Control Hosp Epidemiol, 1998, 19 (8): 539-45.
102.
1: S101-7
106.
Med Lett Drugs Ther: Linezolid (Zyvox), Med Lett Drugs Ther, 2000, 42
(1079): 45-6.
107.
Megran DW: Enterococcal endocarditis Clin Infect Dis, 1992, 15 (1): 63-71.
108.
catarrhalis isolated from clinical materials in 1997-1998, Med Sci Monit, 2000, 6
(2): 300-4
109.
Morris JG Jr, Shay DK, Hebden JN, et al: Enterococci resistant to multiple
Murray BE, Singh KV, Markowitz SM, et al: Evidence for clonal spread of a
284-93.
121.
122.
Norris AH, Reilly JP, Edelstein PH, et al: Chloramphenicol for the treatment
Oddie Sam, Nicholas D. Embleton: Risk factors for early onset neonatal
enterococcus in health care facilities in a region, N Engl J Med, 2001, 344 (19):
1427-33.
125.
enterococci in intensive care units: high frequency of stool carriage during a nonoutbreak period, Arch Intern Med, 1999, 159 (13): 1467-72.
126.
O'Sullivan NP, Keane CT.: Risk factors for colonization with methicillin-
Paterson D. L., Ko W. C., Von Gottberg A., Casellas J. M., Mulazimoglu L.,
Klugman K. P., Bonomo R. A., Rice L. B., McCormack J. G., Yu V. L.: Outcome of
cephalosporin treatment for serious infections due to apparently susceptible
organisms producing extended-spectrum -lactamases: implications for the clinical
microbiology laboratory, J Clin Microbiol, 2001, 39, 22062212.
131.
133.
jejuni infections in patients infected with the human immunodeficiency virus (HIV),
Ann Intern Med, 1988, 108 (4): 540-6
134.
enteritis due to Campylobacter fetus ssp. Jejuni, Ann Rheum Dis, 1981, 40 (4):
414-5
135.
syndrome (reactive arthritis), Rheum Dis Clin North Am, 1992, 18(1): 67-79
140.
145.
Sabate M., Tarrago R., Navarro F., Miro E., Verges C., Barbe J., Prats G.:
Cloning and sequence of the gene encoding a novel cefotaxime-hydrolyzing lactamase (CTX-M-9) from Escherichia coli in Spain, Antimicrob Agents
Chemother, 2000, 44, 19701973.
146.
disease in 2000: a state-of-the-art review, Clin Microbiol Rev, 2001, 14 (2): 336-63
149.
salient features and outcome of therapy, Scand J Infect Dis, 2002; 34 (5): 386-91.
150.
Shay DK, Maloney SA, Montecalvo M, et al: Epidemiology and mortality risk
Smego RA Jr, Foglia G: Actinomycosis, Clin Infect Dis, 1998, 26 (6): 1255-
61; 1262-3.
154.
Song W, Lee KM, Kang HJ, Shin DH, Kim DK.: Microbiological aspects of
predominant bacteria isolated from the burn patients in Korea, Burns, 2001,
27:1369.
155.
case report and review of the literature, Scand J Infect Dis, 2000; 32 (2): 217-8
157.
158.
faecium in the feces of patients with hematologic malignancies, Clin Infect Dis,
1996, 23 (4): 694-7.
159.
Suratt BT, Welsh CH: A 48-year-old smoker with cough and weight loss,
Med, 2001
161.
septicemia and peritonitis in nephrotic children, Pediatr Nephrol, 1999, 13: 835
837
162.
Taylor DN, McDermott KT, Little JR, et al: Campylobacter enteritis from
untreated water in the Rocky Mountains, Ann Intern Med, 1983, 99 (1): 38-40
165.
Taylor DN, Perlman DM, Echeverria PD, et al: Campylobacter immunity and
quantitative excretion rates in Thai children, J Infect Dis, 1993, 168 (3): 754-8
166.
Tee
W,
immunodeficiency
Mijch
virus
A:
Campylobacter
(HIV)
infected
jejuni
and
bacteremia
in
non-HIV-infected
human
patients:
comparison of clinical features and review, Clin Infect Dis, 1998, 26 (1): 91-6
167.
Tucker JB: Toxic terror: Assessing the terrorist use of chemical and
and Branhamella catarrhalis in children with respiratory tract infections, Clin Infect
Dis, 2000, 31 (2): 477-81
172.
Wald ER: Microbiology of acute and chronic sinusitis in children and adults,
Wang CC, Celum CL: Global risk of sexually transmitted diseases, Med Clin
Mycobacterium gordonae: report of a case and critical review of the literature, Clin
Infect Dis, 1992, 14 (6): 1229-39
181.
Volker Brade, Albrecht Ludwig: Biological Cost of Rifampin Resistance from the
Perspective of Staphylococcus aureus, Antimicrobial Agents and Chemotherapy,
2002, 46, (11), 3381-3385,
184.
prevalence
of
strains
expressing
an
extended-spectrum
beta-lactamase
phenotype and characterization of isolates from Europe, the Americas, and the
Western Pacific region, Clin Infect Dis, 2001; 32 (Suppl. 2): S94-S103.
185.
Yamasaki K., Komatsu M., Yamashita T., Shimakawa K., Ura T., Nishio H.,
Satoh K., Washidu R., Shohiro K., Aihara M.: Production of CTX-M-3 extendedspectrum -lactamase and IMP-1 metallo -lactamase by five Gram-negative
bacilli: survey of clinical isolates from seven laboratories collected in 1998 and
2000, in the Kinki region of Japan, J Antimicrob Chemother, 2003, 51, 631638.
186.
on Immunization Practices: The role of BCG vaccine in the prevention and control
of tuberculosis in the United States. A joint statement by the Advisory Council for
the Elimination of Tuberculosis and the Advisory Committee on Immunization
Practices, MMWR Morb Mortal Wkly Rep, 1996, 45(RR-4): 1-18
188.
latent tuberculosis infection. American Thoracic Society, MMWR Morb Mortal Wkly
Rep, 2000, 49(RR-6): 1-51
189.
Centers for Disease Control and Prevention: 1998 guidelines for treatment
appears in Am Rev Respir Dis 1990 Dec;142 (6 Pt 1):1470], Am Rev Respir Dis,
1990 Sep; 142(3): 725-35
193.
control.
Bureau
of
Tuberculosis
Control
2004;
disponibil
la
adresa
http://www.ci.nyc.ny.us/html/doh/html/pub/pub.html
195.
infections in France: results of the nationwide survey in 1996, J Hosp Infect, 2000;
46: 186-193.
196.