Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Definiie
Se estimeaz c exist peste 400 de virusuri distincte care infecteaz omul, iar spectrul
manifestrilor clinice, epidemiologice i patogenice care rezult n urma infeciilor virale
este foarte vast.
Virusurile sunt unice n cadrul agenilor infecioi. Caracteristicile majore care le
difereniaz de celelalte microorganisme sunt:
dimensiunea redus (20-300 nm) care le permite s traverseze filtrele bacteriologice
pstrndu-i infeciozitatea
genomul viral posed un singur tip de acid nucleic, fie ADN (dezoxiribovirusuri), fie
ARN (ribovirusuri)
sunt total dependente de celula vie, fie eucariot, fie procariot, pentru replicare i
existen
nu posed ribozomi sau aparat propriu de sintez a proteinelor, mitocondrii sau
surs proprie de energie, deci sunt metabolic inerte n afara celulei gazd
dei unele virusuri posed enzime propri ca, de pild, ARN sau ADN polimeraza, ele
nu pot amplifica i reproduce informaia n propriul genom n absena celulei gazd.
Virionul (corpusculul elementar sau viral) reprezint unitatea viral infecioas intact,
inert n afara celulei gazd.
Virusurile pot parazita celule umane, vegetale, bacteriene, fungice, parazitare i ale
insectelor.
Morfologie
Dimensiune
Unitatea de masur a dimensiunii virale o reprezinta nanometrul (1nm=10 -9 m).
Virusurile cu importan clinic au dimensiuni cuprinse ntre 20-30 nm (picornavirusuri)
pn la 300 nm (poxvirusuri). Ele sunt vizibile numai prin microscopie electronic. n
contrast, bacteriile au aproximativ 1000 nm iar eritrocitele 7500 nm n diametru.
Structura
Cunoaterea structurii virusurilor reprezint o etap important n identificarea acestora.
Structura de baz, obligatorie, a virionului o reprezint nucleocapsida constituit dintrun miez (core) de acid nucleic = genomul viral, protejat (nconjurat) de un nveli proteic
numit capsid.
Virusurile formate numai din nucleocapsid se numesc virusuri nenvelite sau
neanvelopate (nude).
Virusurile care prezint pe lng nucleocapsid i un nveli extern lipoproteic, derivat
din membrana citoplasmatic a celulei gazda, peplos sau anvelopa se numesc virusuri
nvelite (anvelopate).
fig.1 798 Mandel
a) Genomul viral este constituit dintr-un singur tip de acid nucleic, fie ADN fie ARN
(niciodata ambii acizi nucleici !) care conine ntreaga informaie genetic necesar
replicrii virusului i care reprezint suportul infeciozitii virusului.
Molecula acidului nucleic (indiferent dac este ADN sau ARN) poate fi simplu spiralat
(ss) sau dublu spiralat (ds), liniar sau circular, continu sau segmentat.
fig.38.2,442,Murray
fig.43.1,532, Murray
Funciile capsidei:
1. asigura forma caracteristic virionului
2. protejeaz acidul nucleic viral
3. la virusurile nenvelite, fixeaza virionul de receptorii specifici de pe celula gazd.
c) Peplosul sau anvelopa reprezint o membran cu structur similar membranei
citoplasmatice a celulei gazd. Aceast membran conine lipide, proteine i
lipoproteine.
fig. 38.5,443,Murray
translaie,
modificari
Speciile de ARNm care servesc drept matri pentru proteinele tardive sunt diferite de
cele care servesc ca matri pentru proteinele precoce.
Moleculele de ARNm viral sunt translate pe poliribozomii celulei gazd pentru
sinteza proteinelor virale structurale i nestructurale. Enzime ale celulei gazd sunt
responsabile de citirea mesajului genetic al virusului.
Proteinele structurale sunt proteine constitutive ale particulei virale, n timp ce
proteinele nestructurale sunt componente cu funcii importante (de obicei, enzimatice),
dar care nu fac parte din virion.
Dup ce au fost sintetizate, proteinele virale structurale migreaz la nivelul
membranei citoplasmatice sau se acumuleaz n citoplasma sau n nucleul celulei
gazd. n toate cele 3 situaii, ele sufer transformri biochimice sub aciunea enzimelor
celulei gazd.
6. Eliberarea virusului din celula gazd.
n urma proceselor descrise mai sus, se realizeaz maturarea i se pun
premizele eliberrii noii particule virale din celula gazd. Aceast din urm etap se
poate realiza prin dou mecanisme : eliberarea prin nmugurire i eliberarea prin liz
celular.
In cazul virusurilor eliberate prin nmugurire, o parte din proteinele virale sunt
transportate la nivelul membranei celulare externe a celulei gazd, iar alte proteine
structurale virale se cantoneaz la nivelul membranei celulare interne. Proteinele i
acidul nucleic se asambleaz i proemin prin membrana celular. Aceast
proeminen ("mugure") este apoi desprins i un nou virion este eliberat. Adesea, n
cazul virusurilor eliberate prin nmugurire, procesul descris mai sus se repet succesiv,
astfel nct o celul gazd elibereaz valuri succesive de noi particule virale.
Eliberarea prin liz celular presupune asamblarea complet a virionului n
citoplasma celulei gazd i eliberarea sa prin liz i moartea celulei respective.
1.5.1. Variabilitate genetic
Variabilitatea genetic a virusurilor este un fenomen ce poate surveni n cursul
replicrii virale i este mult mai des ntlnit la virusurile ARN dect la cele ADN. De fapt,
toate virusurile ARN se pare c ar exista sub form de amestecuri de multiple variante
genetice. Aceste amestecuri au un caracter dinamic la nivelul organismului gazd, astfel
nct la un moment dat una dintre variantele virale poate fi dominant fa de celelalte,
urmnd ca sub aciunea unor factori endogeni (de ex. presiunea exercitat de sistemul
imun al gazdei) sau exogeni (de ex. tratamente antivirale, imunomodulatoare, etc.) s
se selecteze alte variante genomice virale care s devin dominante numeric n
populaia viral infectnd respectiva gazd.
Principalele procese ce reflect variabilitatea genetic sunt : mutaia,
complementarea i recombinarea.
A. Mutaia
Mutaia const n modificarea stabil a uneia sau mai multor gene avnd drept
rezultat absena sintezei unor proteine virale sau sinteza unor proteine virale modificate.
Caracterul de stabilitate al acestor modificri presupune transmiterea acestora la
descendeni (mutani). Varianta genomic viral iniial, neafectat de mutaie, este
desemnat ca variant "slbatic" (virus slbatic).
n funcie de mecanismul de producere, deosebim mutaii prin :
- substituie - nlocuirea unei baze azotate cu o alta
- inserie - intercalarea unei secvene nucleotidice suplimentare
- deleie - pierderea uneia sau mai multor secvene nucleotidice
- inversie - schimbarea sensului unei secvene nucleotidice
n funcie de modul n care survin :
- Mutaii spontane - determinate de erori neremediate survenite n replicarea
viral.
- Mutaii induse - cauzate de ageni mutageni fizici (temperatur, radiaii), chimici
(analogi ai bazelor azotate, etc)
n funcie de dimensiuni :
- Mutaii punctiforme - intereseaz o singur pereche de baze
- Mutaii multisitus - intereseaz mai multe secvene de baze.
B. Complementarea
Complementarea este procesul prin care dou virusuri cu genom incomplet au
capacitatea de a-i completa reciproc produsele genice defective.
C. Recombinarea
Recombinarea este procesul prin care dou virusuri au capacitatea de a face
schimb de segmente genomice.
1.6. Relaia virus-organism gazd.
Interaciunile ntre virus i celula gazd sunt de o deosebit importan, n sensul
c ele pot influena 3 aspecte eseniale :
- producerea infeciei
- tipul de infecie
- efectul final (deznodmntul) asupra gazdei.
A. Factorul viral - patogenitate, virulen
s fie propice iniierii primului ciclu replicativ. Elementele implicate la acest nivel nu sunt
nc pe deplin elucidate dar se pare c temperatura i activitile biochimice celulare
sunt de importan major. n condiii suboptimale, replicarea viral poate fi totui
iniiat rezultnd ns particule virale incomplete cu capacitate sczut de a infecta alte
celule.
Ali factori legai de organismul gazd sunt :
- Vrsta - poate influena att susceptibilitatea la anumite infecii ct i evoluia acestora
- Statusul imun
- Anumite stri fiziologice particulare (ex. sarcina)
- Sexul
- Starea de nutriie
- Afeciuni asociate .
Cu alte cuvinte, ptrunderea virusului n organism nu presupune ntotdeauna
infecie, iar infecia viral nu presupune ntotdeauna boal.
1.6.1. Ci de ptrundere a virusurilor n organism
Principalele ci de intrare a virusurilor n organism sunt :
A. Tractul respirator . Infeciile virale cu poart de intrare respiratorie sunt foarte
frecvente i, n general, contagiozitatea acestora este extrem de ridicat datorit
capacitii de diseminare a particulelor virale infectante de la o gazd la alta pe cale
aerian. Aceste aspecte sunt favorizate de aglomerrile umane i de anotimpurile reci.
De menionat c, n unele cazuri, poarta de intrare nu coincide cu organul sau
esutul "int". Astfel, n cazul virusului varicelic, dei calea de intrare este tractul
respirator, inta principal este reprezentat de tegument
B. Tractul gastro-intestinal. Virusurile cu aceast poart de intrare sunt desemnate i ca
virusuri cu transmitere fecal-oral, infeciile respective fiind, de regul, asociate cu
condiii de igien defectuoas.
C. Tractul genito-urinar este calea de intrare a agenilor cu transmitere sexual. i n
aceste cazuri poarta de intrare nu poate fi ntotdeauna identificat cu localizarea i
manifestrile infeciilor respective (ex. virusul hepatitei B, HIV).
D. Calea cutaneo-mucoas. n general, tegumentul constituie o barier eficient n
calea infeciilor bacteriene i a unor infecii virale. Totui, unele virusuri sunt capabile s
traverseze acest obstacol producnd fie infecii mai mult sau mai puin localizate la
acest nivel (v. papilloma, v. herpes simplex) fie infecii generalizate.
1.6.2. Tipuri de infecii virale
n funcie de extindere deosebim :
A. Infecii localizate
B. Infecii generalizate
Aceast clasificare este desigur rigid, motiv pentru care este necesar meniunea c
n multe cazuri infecia viral intereseaz cu precdere un anumit organ sau esut
(pentru care virusul respectiv posed o afinitate crescut = tropism) afectnd ns n
paralel i alte organe i esuturi ale aceluiai organism.
A. Infecii localizate.
n general este vorba de infecii ale suprafeelor epiteliale : tegument
(poxvirusuri, papillomavirusuri), conjunctiv, membrane mucoase ale tractului respirator,
gastrointestinal i genital. Dei replicarea viral este adesea restrns la aceste
localizri, efectele pot fi de tip general (v. paragripale).
B. Infecii generalizate
Dei mecanismele patogenetice ale unor infecii virale generalizate nu sunt pe
deplin elucidate, desfurarea lor parcurge, de obicei urmtoarele etape :
- Ptrunderea virionilor n organism - se produce, de obicei printr-o suprafa epitelial ;
la acest nivel are loc o replicare viral limitat.
- Migrarea virionilor ctre ganglionii limfatici regionali - la acest nivel, o parte dintre
virioni sunt neutralizai de macrofage
- Ptrunderea virionilor restani n snge - se realizeaz astfel viremia primar care
poate determina simptome clinice (febr, stare general alterat)
- Pe cale sanguin virionii ajung la ficat, splin, mduva osoas - la aceste nivele se
reia replicarea viral, rezultnd un mare numr de virioni care eliberai n snge vor
determina:
- Viremia secundar
- Pe cale sanguin virionii ajung la "organul int" (cel pentru care virusul prezint
tropism) - la acest nivel se vor produce principalele simptome ale bolii.
n alte cazuri, infeciile generalizate se produc urmnd o cale mai direct i mai
rapid pn la organul int (de exemplu n cazul injectrii directe n torentul sanguin).
n funcie de evoluie deosebim :
A. Infecii acute nepersistente (autolimitante)
B. Infecii persistente (latente)
C. Infecii insidioase cu evoluie letal
# B i C sunt desemnate ca infecii cronice.
Termenul de infecie cronic desemneaz situaia n care virusul este produs
continuu n organism, cu sau fr integrarea ADN-ului viral n genomul celulei gazd.
Mecanism
Exemple
Aprare nespecific
Barier fizic
-tegument, mucoase ;
Bariere chimice
mucus
Factori umorali
- complement, lizozim,
interferoni, proteine de
faz acut
(proteina C reactiv,
beta 2- microglobulina)
Factori celulari
Aprare
specific Anticorpi
(Rspuns imun)
Citotoxicitate
celular,
macrofagelor
liza
- inhib sinteza ARNm tardiv deci previne sinteza proteinelor structurale i formarea
virionilor infectani. Se administreaza oral.
Indicaii:
- profilaxia infeciei variolice (ATENIE: - nu are aciune terapeutic dup debutul bolii).
Inhibitori ai polimerazelor virale
FOSCARNET(acidul fosfonoacetic) - analog al pirofosfatului (fosfat anorganic).
Mecanism de aciune:
- inhibitor specific al ADN polimerazei herpes virusurilor, fr aciune pe polimerazele
celulare. Se ataeaz direct de situs-urile de legare ale pirofosfatului la ADN si ARN
polimerazele virale (inhib legarea ADN-polimerazelor i a reverstranscriptazei de
substrat). Se administreaz intravenos.
Indicaii:
-infecii herpetice din SIDA, rezistente la Acyclovir
-retinite determinate de virusul citomegalic n SIDA. Eficacitatea fa de HIV se exprim
prin scderea antigenemiei i creterea numrului limfocitelor T (CD4-pozitive), dar
fenomenele sunt tranzitorii.
Reacii adverse:
- perturbri ale funciilor renale
- perturbri ale echilibrului electroliilor (Ca, K, Mg)
-convulsii.
Se acumuleaz n organism i are efecte secundare toxice. Apariia mutantelor virale
rezistente este relativ frecvent.
Inhibitori ai reverstranscriptazei
ZIDOVUDINE (RETROVIR, AZIDOTIMIDINA = AZT- analog pirimidinic sintetic care
inhib retrovirusurile (inhib replicarea HIV in vitro i amelioreaz simptomatologia
bolnavilor n stadiile precoce ale bolii).
Mecanism de aciune:
- este substrat pentru timidinkinaz pe care o convertete n compui inhibitori ai
reverstranscriptazei i ntrerupe elongaia AND viral n cursul replicrii. Se
administreaz oral.
Indicaii:
- n infecii cu HIV
- la bolnavii cu SIDA determin o cretere a limfocitelor T (CD4-pozitive), scderea
antigenemiei i creterea ratei de supravieuire.
Reacii adverse:
murray fig.40.6,489.
E. Metode serologice .
Sunt utile n cazul virusurilor ce nu pot fi cultivate n culturi celulare i n cazul
infeciilor virale cu evoluie lent (de exemplu, virusurile hepatitice, HIV, arbovirusuri).
De asemenea, serologia este util pentru stabilirea rspunsului imun n infecii virale.
Principalele tipuri de teste serologice folosite n diagnosticul infeciilor virale
sunt :
1. Reacia de fixare a complementului
2. Reacia de hemaglutinoinhibare
3. Reacia de neutralizare
4. Imunofluorescena direct i indirect
5. Latex-aglutinarea ; Hemaglutinarea pasiv
6. Reaciile imunoenzimatice (ELISA - "enzyme-linked immunosorbent assay") ; Testele
Western blot
7. Teste radioimune (RIA)
1. Reacia de fixare a complementului.
Serul este pus n contact cu antigen viral i complement n cantitate cunoscut. n cazul
prezenei anticorpilor specifici n serul de cercetat, formarea complexelor antigenanticorp va determina activarea i fixarea complementului. Prin adugarea de eritrocite
marcate cu anticorpi anti-eritrocitari se determin prezena de complement liber
(nefixat).
Rezultat negativ - prezena de complement liber (nefixat) tradus prin hemoliz