Biotehnologii Industriale

Cuprins
Cap.1 Memoriu tehnic..4

Cap.2 Tehnologii de fabricaie.5
2.1 Domenii de utilizare i proprietile produsului...5
52.2Variate tehnologice...13
2.3 Alegerea variantei optime.....14
2.4 Descrierea procesului tehnologic adoptat. ......15
2.4.1 Elaborarea schemei tehnologice............15
2.4.2 Materii prime intermediare i auxiliare........30
2.4.3 Mecanismul reaciilor biochimice......44
2.4.4 Cinetica reaciilor biochimice.48
2.4.5 Termodinamica reaciilor biochimice........62
2.4.6 Bilanul de materiale............66
2.4.7 Consumuri specifice.80
Cap.3 Controlul fabricaiei...81
3.1 Controlul,reglarea i automatizarea proceselor tehnologice...81
3.2 Controlul de calitate........95
3.2.1 Metode de analiza ale materiilor prime i intermediare...95
3.2.2 Metode de analiza ale produsului finit..........104
Cap4 Utiliti................................................................................................106
Cap.5 Produse secundare, de;euri de fabricaie,epurarea apelor reziduale
...108
Cap.6 Transport,ambalare,depozitare..110
Cap.7 Norme de prevenire a muncii si PSI...114
Bibliografie..................................................................................................119
4
Cap. I Memoriu tehnic
n cadrul acestui proiect s-a proiectat procesul biotehnologic de obinere a Penicilinei

V.
Penicilina V este un produs de biosintez produs de diferite microorganisme din clasa
Penicillium chrysogenum . Penicilina V conine n structura ei un nucleu tiazolidinic.
Penicilina V reprezint unul din cele mai valoaroase antibiotice de biosintez, avnd o puternic
aciune bactericid i bacteriostatic.
.Procesul tehnologic de obinere a penicilinei Vse realizeaz printr-un proces discontinuu de
fermentaie n profunzime.
Pe baza procesului tehnologic optim adoptat s-a realizat schema bloc a procesului tehnologic de
obinere a Penicilinei V.
Schema bloc conine fiecare etap necesar procesului de obinere a Penicilinei V.
Tehnologia de obinere a Penicilinei V cuprinde urmtoarele faze:
- pregtirea mediului de cultur
- fermentaia
- filtrarea soluiei native
- separarea i purificarea.
n capitolul 2 sunt prezentate materiile prime auxiliare necesare mediului de cultur.n acest
proiect s-au prezentat mecanismulul reaciilor biochimice dar i cinetica i termodinamica
procesului.
Capitolul 3 cuprinde controlul fabricaiei cu metode de analiz ale materiilor prime i auxiliare
ct i a produsului finit.
n capitolul 4 sunt prezentate informaii despre utiliti, produse secundare, deeuri de fabricaie,
transportul, depozitarea i ambalarea produsului finit ct i norme de protecia muncii ce trebuie
respectate pe parcursul ntregului proces de fabricaie.
5
Cap.II Tehnologia de fabricaie
II.I Domenii de utilizare i proprietile produsului
Antibioticele sunt substane chimice organice produse de microorganisme sau obinute prin
sintez sau semisintez, care n doze mici inhib dezvoltarea microorganismelor patogene.S-a
observat, dup descoperirea microbilor de ctre Pasteur, c unele specii microbiene se separ de
altele prin elaborarea unor substane chimice nocive.Acest fenomen este numit antibioz, iar
substanele chimice rezultate din metabolismul celulelor vii poart numele de antibiotice.
n 1941 au fost introduse n practica medical antibioticele caractezizate prin eficacitate
ridicat i toxicitate redus.Succesele exceptionale obinute n tratarea maladiilor infecioase cu
ajutorul penicilinei G au declanat cercetri foarte minuioase i astfel ntr-un interval scurt s-a
descoperit i penicilina V.
Clasificarea antibioticelor
Numrul foarte mare de antibiotice cunoscute pn n prezent a pus problema clasificrii
acestor produse.Sau propus mai multe criterii de clasificare n funcie de originea
microorganismului productor, structura chimic i aciunea antibacterian.
Cu toate c fiecare metod folosit la clasificare este susceptibil la anumite critici,
clasificarea antibioticelor se va face n funcie de originea microorganismelor productoare,
structura chimic a antibioticelor, biogeneza i aciunea lor farmacologic
a) Dup originea microorganismului productor, antibioticele se clasific n urmtoarele
grupe:
antibiotice produse de bacterii: gramicidina, gramidina S, bacitracina,polimixinele etc.;
antibiotice produse de actinomicete: streptomicina, cloromicetina,tetraciclina,neomicina,
kanamicina, nistatina, actinomicina etc.;
antibiotice produse din fungi: penicilina, grizeofulvina.
b) Dup constituia chimic, antibioticele se clasific n urmtoarele grupe:
antibiotice cu structur alifatic: alicina;
antibiotice cu structur aromatic: acidul gladiolic, cloramfenicolul(cloromicetina);
6
antibiotice cu structur chinonic: fumigatina, ftiocolul;
antibiotice cu cicluri de furan i piran: acidul penicilic;
antibiotice heterociclice cu azot n molecul: acidul aspergilic, acidulhidroaspergilic;
antibiotice heterociclice cu azot i sulf n molecul: penicilinele;
antibiotice cu structur polipeptidic: gramicidina;
antibiotice cu structur complex: macrolidele;
antibiotice cu structur nedeterminat: viomicina
c) Dup biogenez, antibioticele se clasific n urmtoarele grupe:
antibiotice derivate din aminoacizi sau din uniti asemntoare:
oxamicina,azaserina,cloramfenicolul, penicilinele, bacitracinele, actinomicinele;
antibiotice derivate din glucide simple: streptomicina, kanamicina,neomicina;
antibiotice diverse: novobiocina, vancomicina.
d) Dup aciunea farmacologic, antibioticele se clasific n urmtoarele grupe:
antibiotice cu aciune antibacterian;
antibiotice cu aciune antituberculoas;
antibiotice cu aciune antivirotic;
antibiotice cu aciune anticanceroas;
antibiotice cu aciune antifungic;
antibiotice cu aciune antiprotozoarian.
Prin urmare, antibioticele nu exercit aceeai aciune antimicrobian asupra tuturor
germenilor patogeni; ele au spectru antibacterian caracteristic,determinat de rezistena specific a
microorganismelor patogene.
Betalactaminele
Betalactaminele, cu nucleu betalactam, grupul de antibiotice cel mai important i cu
membrii cei mai numeroi, reunesc patru familii principale: peniciline naturale i semisintetice (7
generaii); carbapeneme; monobactami; cefalosporine (3 generaii).
Penicilinele
Penicilinele naturale se obin din ciupercile genului Penicillium (notatum, chrysogenum,
crustosum); ele au un nucleu betalactamic biciclic (acidul 6 aminopenicilanic).
Generaia I cuprinde peste 20 de tipuri de peniciline biosintetice, naturale (penicilinele: G, X, F,
K, V etc).
Penicilinele conin n structura lor un nucleu tiazolic condensat cu unul tetragonal diferind
ntre ele prin natura radicalului R.
7
O
R C S
CH3
NH CH CH
C
CH3
C N CH3
O
COOH
Structura general a penicilinei
Tabel 2.1
Denumirea penicilinei Structura radicalului Denumirea Activitate
Radicalului [UI/mg]
1 2 3 4
Penicilina F CH3-CH2-CH=CH-CH2 2-pentenil 1500
Penicilina dihidro F CH3-(CH2)4 2-pentil 1670
Penicilina G C6H5-CH2- Benzil 1667
Penicilina X HO-C6H4-CH2 p-hidroxi-benzil 900
Penicilina K CH3-(CH2)5-CH2 n-heptil 2300
Penicilina V C6H5-O-CH2- Fenoximetil 1630
Penicilina O CH2=CH-CH2-S-CH2 Alilmercoptometil -
Penicilina S CH3-C=CH-CH2-S-CH2 3-clor-2-butenil-tiometil -
8
Cl
Domenii de utilizare
Penicilina V are urmtoarele domenii de utilizare:
n terapeutic;
obinerea acidului 6- aminopenicilanic;
obinerea clorurii acide sau a esterului sare;
condensarea acidului 6-AP cu clorura acid sau anhidrida mixt i separarea penicilinei
obinute.
Proprietile produsului
n practica terapeutic penicilina V a fost introdus sub form de acid liber sau sare de Na i
K. Se administreaz oral, are toleran bun i se prezint sub form de comprimate. Este
indicat n infecii uoare, faringite, otite mai ales la copii.
Denumirea comercial: Penicilina V Ospen Oracilin
Denumire chimic: Fenoximetilpenicilina
Formul brut: C16H18O5N2S
Masa molecular: Mm= 350,4 moli/ g
Formula structural:
C6H5 O CH2 C S CH3
NH CH CH C
CH3
C N CH
COOH
Penicilina V
Proprieti fizice
Penicilina V este o substan alb, cristalin, fr miros ,cu gust amar, utilizat sub form de
acid liber, avnd punct de topire 118-120C, insolubil n ap, solubil n solveni precum alcooli
9
i glicerin + alcooli. n mediul bazic viteza de inactivare a Penicilinei V este de 2.2 ori mai mare
dect viteza de inactivare a Peniciliei G. Aceste date sunt luate n consideratie atunci cnd se
trateaz problema separrii penicilinelor apoase obinute de la fermentaie.
Proprieti chimice
Penicilinele sunt instabile n prezena acizilor, alcoolilor, ozidanilor, metalelor grele i la
temperaturi ridicate.Penicilinele i pierd proprietile n soluii cu pH acid mai mic de 5 sau
bazic mai mare de 8.n soluii apoase prezint pH = 5,5 7,5.
Produsul iniial rezultat pri hidroliza nucleofil (prezent lactamazelo, a penicilinazelor sau
ionolor metalici) a penicilinei este acidul peniciloic,biologic inactiv, acesta prin acidulare pierde
o molecul de CO2 trecnd n acid peniloic.
O O
ac.peniciloic
C CH3 CH3
R S R C S
H H H H
N C C C
lactamaza N C C C
H + H+
Cu2+ H
CH3 -CO2
CH3
C N CH CH
C HN
O O
COOH COOH
OH
O ac.peniloic
C CH3
R S
H
N CH2 C C
H
CH3
HN CH
COOH
Sub aciunea cloruri mercurice acidul peniloic se degradeaz la aldehid penilic i penicil
amin.
10
O O
CH3 H
R C S R C N CH2 CH O
H
N C C C
H +HgCl2
H2
CH3 H3C
HN CH H
C C COOH
C H 3C
SH NH2
HO O
Penicilinele reacioneaz nucleofil cu hidroxiamina formnd acizi hidroxiaminici:

O O
CH3
R C C CH3
S R S
H H H H
N NH2-OH
C C C N C C C
H H
CH3 CH3
C N CH C HN CH
O O
COOH HON COOH
n reacia cu alcoolii formeaz esteri:
O O
C CH3 CH3
R S R C S
H H H H
N C C C R1-OH N C C C
H H
CH3 CH3
C N CH CH
C HN
O O
COOH OR1 COOH
n prezen de alchilamine penicilinele formeaz alchilamide:

11
O O
C CH3 CH3
R S R C S
H H H H
N C C C R1-NH2 N C C C
H H
CH3 CH3
C N CH CH
C HN
O O
COOH R1HN COOH
Proprieti biologice
n studiul aciunii biologice a antibioticelor se urmrete stabilirea relaiei dintre structura
chimic a medicamentului i aciunea sa farmacologic pe de o parte, iar pe de alt parte se caut
determinarea naturii i structurii chimice a receptorilor i modul de interaciune ntre receptor i
medicament.
Proprietile biologice a penicilinei sunt date de structura chimic, proprietile fizice i
chimice, conformaia spaial, natura interaciunilor cu receptorul, viteza de metabolizare.
Penicilinele pot aciona asupra funciei enzimatice a proteinelor, ducnd la autoliza unora
dintre bacterii, sau la inhibarea creterii.
II.II Vaiante tehnologice. Metode de obtinere
Penicilina V se poate obine prin urmatoarele variante tehnologice de fabricaie:

biosintez
semisintez
Factorul principal care intervine n obinerea tehnologic a unui antibiotic l reprezint

calitatea suei, tulpina productoare, precum i compoziia mediului de cultur pe care se
dezvolt sunt hotrtoare pentu obinerea unui tip de antibiotic. n general microorganismele
productoare de antibiotice se pstrez sub form de culturi pure, n general mediu de gelatin
sau agar-agar, la temperaturi sczute n condiii deosebite de sterilitate i securitate.
Penicilinele de biosintez se obin printr-o tehnologie comun care cuprinde urmtoarele

faze:
pregtirea mediilor de cultur i sterilizarea lor;
12
fermentaia biochimic;
filtrarea soluiilor native;
separarea i purificarea penicilinelor.
Penicilinele de semisintez au o tehnologie de obinere comun care cuprinde urmtoarele

etape:
obinerea acidului 6-aminopenicilanic;

obinerea clorurii acide sau a esterului sare;
condensarea acidului 6-AP cu clorura acid sau anhidrida mixt i separarea penicilinei
obinute.
II.III Alegerea variantei optime
Varianta optim aleas este procedeul discontinuu de fermentaie n profunzime.

Procedeul de fermentaia n profunzime se utilizeaz la majoritatea proceselor de cretere a
microorganismelor si se caracterizeaz prin faptul c microorganismele parcurg ntr- un singur
bioreactor toate etapele de dezvoltare, dup care procesul se reia.
Fermentaia n profunziune prezint urmtoarele avantaje:
costul de investiie redus;
flexibilitate ridicat;
conversia substratului ridicat;
pericol de infecie a culturilor redus fa de contaminare;
volumul bioreactorului relativ mare;
obinerea unor culturi omogene;
procedeul de desfurare cu randamente maxime obinnd produse cu puritate i ativitate
biologic ridicate.
2.4. Descrierea procesului tehnologic adoptat

2.41.Elaborarea schemei tehnologice
Obinerea penicilinei V s-a efectuat dup urmtoarea schem bloc:
13
Hidrati de carbon
Extract de porumb
Saruri minerale
Pregatirea mediului
de cultura
Aer nesteril
Abur Sterilizare m.c. Condens
Penicillium crysogenum
Fermentatie Aer steril Sterilizare aer
Acid fenoxiacetic
Filtrare Masa moleculara
Acetat de butil Fara apoasa

Extractie
Sol.NaCO3
Reextractie
HCl Distilare
azeotropa
Butanol
Filtrare/Spalare
Uscare
Penicilina V
Tehnologia de obinere a penicilinei V cuprinde urmtoarele faze:

1) Pregtirea mediului de cultur i sterilizarea sa
2) Fermentaia
3) Filtrarea soluiei native
4) Separarea i purificarea
Mediul de cultur reprezint substratul nutritive care conine toate substanele nutritive
necesare pentru creterea i multiplicarea microorganismelor n condiii artificiale.
14
Pregtirea mediilor de cultur const n dizolvarea n ap a componenilor acestuia
conform reetei pentru fiecare faz a procesului de fermentaie.n mediul de cultur trebuie s se
gseasc hidrai de carbon, sruri minerale,surse de azot organic sau anorganic, precursori i
ap.Deoarece sterilizarea mediului de cultut se face cu abur direct, cantitatea de ap ce se
adaug la prepararea mediului este mai mic cu o cantitate egal cu cea a aburului care
condenseaz n timpul sterilizrii.
Pregtirea mediilor de cultur se face n aparate destinate acestui scop, prevzute cu
agitatoare, conducte pentru abur, serpentine de ncalzire i de rcire.Conform reetei n aparate se
adaug ap ce se nclzete la 60-70 C, se adaug extrasul de porumb i se fierbe 30-60
minute.Dup aceasta este necesar rcirea soluiei la 50-60 C i se adaug restul componentelor
mediului respectnd urmtoarea ordine:CaCO3, NH4NO3, NaSO4, MgSO4, MnSO4,
KH2PO4, ZnSO4, lactoz, glucoz.
Mediul de cultur pentru penicilina V conine urmtoarele surse de carbon:lactoz i glucoz.
glucoza (dextroz) reprezint o excelent surs de carbon i energie, utilizat pentru prod
ucerea de antibiotic.
Lactoza, dizaharid reductor (4--D-galactozido-D-glucoza) se folosete n stare pur doa

r n procesul de biosintez al antibioticelor pentru obinerea penicilinelor.
Surse de azot
Azotul necesar mediului de cultur este asigurat de sursele organice i anorganice de azot.Microo
rganismele sunt capabile, n mod obinuit, s biosintetizeze toate tipurile de molecule de azot ( a
minoacizi, proteine),plecnd de la ionul amoniu n funcie de energia existent i timp.Viteza de
cretere a microorganismelor atinge valori ridicate numai dac mediul conine surse de azot.Nec
esarul de azot n culturile folosite la obinerea penicilinei V este aigurat de extractul de porumb i
de faina de soia.Acestea sunt surse naturale bogate n proteine i aminoacizi, coninnd acizi nucl
eici, vitamine, lipide, zaharuri,compui cu sulf i fosfor.
15
Componenii mediului de cultur
Tabel 1
Componentii mediului Inoculator Intermediar Regim
de cultur
Extract de porumb 2 2-3 2,5-2,8
Fin de soia - - 0,3
Sruri minerale
Surse ce conin sruri minerale in biosintez sunt folosite ca:
- elemente constitutive ale produselor: Na2SO4, ZnSO4, MnSO4
- elemente costitutive ale biomasei: CaCO3, KH2PO4, NH4NO3
- modificatori ai presiunii osmotice i a permeabilitii membranelor celulare CaCO3
- ageni de complexare i precipitare:Na2SO4, MgSO4
Precursori
Precursorii sunt compui organic sau anorganici care atunci cand sunt adugai n
mediul de cultur intervin ca molecule intermediare n biosintez sau orienteaz biosinteza ctre
un anumit process.
Acidul fenoxiacetic dirijeaz procesul de biosintez a penicilinelor spre obinerea de penicilin
V, folosind ca microorganism productor Penicillium chrysogenum.Precursorii sunt considerai
indispensabili mediului de cultur, iar pentru a evita efectele inhibitorii acetia se vor aduga
treptat,meninndu-se o concentraie constant.
Sterilizarea este procesul prin care are loc distrugerea sau ndeprtarea microorganismelor
patogene sau apatogene din substane preparate, spaii nchise,obiecte.
Procesele de biosintez impun, n marea majoritate, absena total a sporilor de microorganisme
strine, provenite din aer, ap sau materii prime, care s-ar putea dezvolta n faza de fermentaie,
infectnd cultura unic a microorganismului util.[1]
n industria de biosintez, unde se obin culturi microbiene pure, procesul de sterilizare poate fi
realizat prin:
a)Metode termice
16
- sterilizarea cu aer cald la 140-200C
- sterilizarea cu vapori de ap sub presiune la 120-140C
- sterilizarea pri nclziri repetate la 70-100C
b)Metode fizice
- filtrri prin umpluturi fibroase
- filtrri pri materiale poroase
- filtrare prin membrane
- utilizarea radiaiilor UV,IR, raze X
c)Metode chimice
- utilizarea agenilor chimici oxid de etilen,formaldehid,fenol, ozon
Sterilizarea mediilor de cultur se poate realiza prin metode mecanice( filtrri,centrifugri),pe
cale termic, cu ageni chimici sau cu unde electromagnetice.S-a ales ca posibilitate de sterilizare
a mediului de cultur sterilizarea cu abur.
Sterilizarea cu abur este un procedeu foarte simplu i permite obinerea unui grad nalt de
sterilitate.Procedeul de sterilizare termic a mediului de cultur poate fi realizat prin procedeul
continuu sau discontinuu,utiliznd drept surs de nclzire aburul sau energia electric.Deoarece
sterilizarea direct n fermentator prin procedeul discontinuu la 120C necesit un timp mare i
degradarea mediului este mai avansat,se alege procedeul de sterilizare a mediului de cultur n
instalaia continu.Acest procedeu prezint urmatoarele avantaje:
-conservarea mai bun a proprietilor nutritive ale mediului
-controlul superior al calitii
-utilizarea raional a consmului de abur
-eficacitatea i productivitatea sporit
-control automat
Realizarea n condiii optime a procesului impune un control al spumrii mediului i a
vscozitii acestuia.Pentru sterilizarea continu a mediilor de cultur se folosesc instalaii
industriale care lucreaz la 120-125C (fig.2).
17
1-coloana de distilare
2-menintor
3-rcitor
Fig.nr 2. Instalaia continu de sterilizare la 120 125C
Instalaia de sterilizare continu la 120-125C este alctuit din coloana de sterilizare

(1),menintorul (2) i rcitorul (3).Coloana de sterilizare este conceput din dou evi
concentrice prin eava interioar fiind introdus aburul,mediul de cultur circulnd prin spaiul
dintre cele dou evi.nclzirea mediului se face prin barbotarea aburului de 5 ata prin
intermediul fantelor practicate pe eava interioar, acesta fiind dirijat tangenial i uniform cu
ajutorul unui snec montat pe exteriorul evii.Mediul staioneaz n coloan 4-6 secunde, dup
care ptrunde n menintor, unde rmne 15-20 minute pentru perfectarea procesului de
sterilizare.n final mediul este rcit printr-un schimbtor de cldur tip eav n eav,la 35-40C.
18
Fig.nr 3 Diagrama timp-temperatur pentru sterilizarea continu la 100-125sC.
Din diagrama timp-temperatur, prezentat n figura nr.3, se observ c, n aceasta

instalaie, contribuia fazei de nclzire i rcire la performana procesului de sterilizare este de 5
6%, astfel ncat se poate considera c sterilizarea se realizeaz aproape n totalitate n faza de
meninere.[3]
Sterilizarea aerului
Procesele industriale de fermentaie sunt, aproape n totalitae , procesele aerobe i n

marea lor majoritate, aseptitce.Aceste procese necesit n general un debit de aer barbotat de 1-2
maer/m mediu de cultur pe minut.Aerul conine cel mai mare numr i cea mai mare varietate
de microorganisme dintre toate mediile.Aceste microorganisme sunt n general sub form de
spori de aceea sunt rezistente la factorii de mediu din aceste motive sterilizarea aerului nu se
poate face prin procedee similare cu procedeele de sterilizare a mediilor.
Figura 5.Schema de purificare i sterilizare a aerului.
1-filtru
2-compresor
3-rcitor
4-separator de picturi
5-filtru general
6-filtru individual
Schema de principiu a liniei de purificare i sterilizare a aerului prin filtarare pe material

fibros este redat n figura 5.Conform schemei aerului nesteril se filtreaz pe filtru(1) de
19
impuriti mecanice, apoi aerul filtrate introduce n compresorul(2) unde este comprimat la 3
atmosfere,prin comprimarea aerului temperatura sa crete pn la 180-200C.Aerul fierbinte se
rceste n rcitorul(3) cu ajutorul apei rcite care circul printr-o serpentin interioar iar
umiditatea din aer se separ n separatorul de picturi(4).Acest separator este o incint cu rafturi
pe care se depun picturile de ap din aer.Aerul steril prin filtrare trece prin filtrul general (5)
apoi prin cel individual (6) dup care ptrunde in fermentator.
n general pentru sterilizarea aerului se mbin procedeele termice cu filtrarea.Aceasta se

realizeaz cu ajutorul filtrelor cu material fibros, cu membran semipermeabil i cu filtre tip
lumnare.Unul din filtrele cu material fibros folosit este cu fibr de sticl.
Figura 4.Filtru cu fibre de sticl pentru sterilizarea aerului
Filtrul cu fibre de sticl, prezentat in figura 4., este alctuit dintr-un strat de material
filtrant fixat ntre dou site, susinute de dou plci perforate (diametrul perforaiilor este de 0,7
0,8 cm). Filtrul este prevzut cu manta de nclzire, care permite uscarea materilului filtrant
sterilizat cu abur direct. Acest tip de filtru, indicat pentru industria de biosintez, ofera
20
posibilitatea sterilizarii unor debite ridicate de aer, realizarea unui grad avansat de purificare i
durata ndelungata de funcionare. Dezavantajele filtrului cu fibre sunt ;operaii complicate la
schimbarea fibrelor de sticl (durata 2,5 3 ore), manipularea neplacut a fibrelor de sticl i
anularea efectului de sterilizare dup umezirea materialului filtrant fibros.
Figura 6.Modelul curgerii

perpendiculare a aerului pe fibra
Sterilizarea pe material fibros poate fi descris printr-un model de curgere prin ocolire, fenomen
care impune absena total a umiditii din filtru.Din aceste motive rcirea aerului din rcitorul
(3) se face pn la absena condensului iar dup separarea acestuia, aerul saturat se prenclzete
cu aer fierbinte pn cnd temperatura de ieire din filtrul individual (6 ) depete cu cel puin
12-15C temperatura punctului de rou.Stabilirea parametrilor de funcionare ai instalaiei de
sterilizare se face numai n funcie de parametrii temodinamici ai aerului.
Reinerea microorganismelor pe filtre de sticl, n procesul de filtrare a aerului, se realizeaz
ca efect al urmtoarelor fenomene: impact inerial,fore de atracie elecrostatic i de difuzie.[3]
21
Fermentaia
Fermentaia este faza fundamental a procesului de biosintez i se realizeaz n 3

etape:inoculator, intermediar, regim.Aceste trei trepte corespund anumitor stadii de dezvoltare a
microorganismelor.
n inoculator se petrece procesul de aclimatizare a microorganismelor la noile condiii de
dzvoltare.n intermediar ncepe creterea exponenial a numrului de microorganisme, iar n
regim se realizeaz procesul de cretere a acestora i elaborarea penicilinei.
Procesul de fermentaie a penicilinelor cuprinde trei faze metabolice distincte:faza de cretere,
faza de producere i faza analitic.
Faza de cretere se caracterizeaz prin acumulare de mas micelian i utilizarea intensiv a
componentelor mediului de cultur.Glucoza este asimilat foarte rapid att pentru formarea
materialului celular, ct i pentru furnizarea energiei necesare.Cerinele de oxigen sunt maxime
n aceast perioad,iar activitatea respiratorie caracterizat prin degajarea de CO2,este ridicat.
Faza de producere se caracterizeaz prin ncetinirea creterii miceliului, fie datorit epuizrii
constituienilor uor asimilabili,fie altor condiii existente, scderea consumului de
oxigen,meninerea pH-ului la 6,8- 7,5 i acumularea penicilinei.n aceast faz lactoza este
folosit lent de miceliu i furnizeaz energia necesar procesului de biosintez.
Faza analitic corespunde stadiului n care microorganismul se epuizeaz ca urmare a activitii
metabolice prelungite iar sursele de carbon din mediu sunt epuizate.Coninutul n azot al
miceliului crete considerabil i ncepe procesul de autoliz al acestuia cu eliberare de amoniac i
crete pH-ul peste 8.Producerea penicilinelor nceteaz i apare un proces de hidroliz alcalin a
penicilinelor formate.n practica industrial nu este permis prelungirea fermentaiei pn la
apariia autolizei.
Pentru faza de cretere a masei celulare pH-ul optim este de 4,5- 5, iar pentru faza de producere a
penicilinelor este de 7- 7,5.Pentru procesele discontinui pH-ul este cuprins ntre 6,4 7.
Regimul optic de temperatur este de 25 1C, iar necesarul de aer,deoarece procesul este aerob,
este de 1 1,5 l aer/ l mediu min,la o turaie a agitatorului elicoidal de 110 140 rot / min.
Dirijarea procesului de biosintez ctre penicilina V se realizeaz cu ajutorul unui precursor care
este acidul fenoxiacetic.
22
Procesul de fermentaie se realizeaz n fermentatoare cilindrice verticale costruite din oel
inoxidabil, echipate cu agitator cu elice sau turbin, serpentin pentru rcire,conduct pentru
aerare, dispozitive sparge-val, filtru individual de aer i rezervor cu antispumant. [10]
Parametrii procesului de fermentaie a penicilinei V
Tabel 2
Etapa de tC Agitare Debit de aer Presiunea Durata
fermentaie rot/min l/l mediu min ata procesului
H
Inoculator 261 270 1 1,2 1,3 30 - 40
Intermediar 261 170 1 1,2 1,2 - 1,3 20 40
Regim 261 120 0,6- 1 1,2 1,3 90 - 120
Controlul procesului de fermentaie se realizeaz prin determinerea sterilitii mediului, a

gradului de dezvoltare morfologic a ciupercii,a pH-ului mediului, a activitii lichidului de
ccultur si a consumului de zahr.
Concentraia penicilinelor in soluia nativ la terminarea procesului de fermentaie este cuprins
ntre 1 i 1,8 %.Valoarea exact depinde de potena suei folosite i de condiiile de realizare a
procesului de fermentaie.
Filtrarea soluiilor native
Alegerea utilajului pentru filtrare se face n funcie de umtoarele aspecte:
caracterul suspensiei
productivitate
materialul de construcie al suparafeei filtrante
23
gradul de recuperare
Pentru filtrarea lichidelor ce conin mas celular cu caracter fibros se recomand filtrele
rotative cu vid.
Filtrul rotativ cu vid este construit dintr-un tambur rotativ compus din doi cilindri
orizontali coaxiali. Cilindrul exterior este perforat i acoperit cu material filtrant iar spaiul dintre
cei doi cilindri este mprit n 10-12 celule etane, fiecare celul funcionnd succesiv,
independent ca filtru nuce.
Legtura dintre aceste celule i conductele de vid, cu aer comprimat se realizeaz prin
intermediul capului de distribuie,iar ndeprtarea miceliului de pe tambur se face cu ajutorul
unui cuit rzuitor. Suprafaa tamburului este mprit n mai multe zone n care se realizeaz
operaiile de filtrare, uscare i ndeprtare a stratului de miceliu depus. n timpul unei rotaii
fiecare celul trece prin toate aceste zone.
Tamburul filtrului rotativ cu vid are un grad diferit de scufundare n suspensia ce se

filtreaz. Stabilirea adncimii de scufundare se face funcie de caracterul stratului filtrant i a
necesitilor de splare i uscare. n producia de antibiotice se utilizeaz filtre cu adncime de
scufundare a tamburului de 50%.
Figura 7. Schema filtrului rotativ cu vid
1- tambur;2- capul distribuitorului;3- cuit rzuitor;4- buncar;5- cuva;6- conduct de apa pentru
splare;7- celule filtrante;8- strat depus;I- zona filtrrii;II si IV- zonele uscrii;III-zona de
splare;V- zona de ndeprtare a sratului depus.
Dac produsul se gseste numai n soluia nativ, splarea masei celulare dup filtrare
este uoar. Totui, aici pot avea loc pierderi mari, pentru prevenirea lor trebuie ales cu grij
24
locul de amplasare a jeturilor cu apa i debitul apei de splare, pentru a nu dilua prea mult
filtratul.
Filtrele rotative cu vid pot fi construite din oel carbon, oel inoxidabil, oel cptuit cu
cauciuc,sau epoxid, aliaje. [10]
Separarea i purificarea penicilinei V
Datorit diluiilor mari, separarea penicilinei V se poate face, rentabil, numai prin extracii
repetate cu solveni.Fluxul general al separrii penicilinelor cuprinde urmtoarele etape:
-filtararea lichidului de fermentaie n scopul separrii biomasei
-extracia penicilinei din filtrul cu solvent organic n dou sau mai multe stadii, n funcie de
concentraia sa n soluie
-reextracia penicilinelor din solventul organic cu o soluie de carbonat de sodiu
-distilare azeotop
Extracia i reextracia
Extracia reprezint operaia de separare a componenilor unui amestec lichid sau solid pe baza
diferenei de solubilitate a acestora ntr-unul sau mai muli solveni.Dac amestecul este supus
separrii este lichid operaia este extracie lichid-lichid.
Extracia lichid-lichid cuprinde 4 etape:
-contactarea soluiei iniiale cu solventul
-solubilizarea celor dou faze rezultate
-recuperarea solventului att din extract,ct i din rafinat
Viteza extraciei depinde de 3 factori: aria interfacial de contact dintre cele 2 faze lichide, fora
motrice a transferului de mas al solutului ntre soluia iniial i solvent, coeficienii de transfer
de mas ai solutului n fiecare faz.
Fluxul general al separrii penicilinei V este alctuit din patru etape:
- filtrarea lichidului de fermentaie cu ajutorul filtrelor rotative cu vid,n scopul separrii
biomasei de lichid care conine penicilina V
- extracia penicilinei V din filtrat cu un solvent organic n dou sau mai multe etape n funcie de
concentraia sa n soluie
25
- reextracia penicilinei din solventul organic cu o soluie de carbonat de sodiu
- distilarea azeotrop
Extracia penicilinei V folosete ca mediu supus extaciei fizice, lichidul de fermentaie filtrat, iar
ca solvent organic acetatul de butil la pH 2.
Figura 8. Schema de operaii la separarea prin extracie a penicilinelor

Pentru extracia penicilinei V se folosete extractorul Podbielniak. Acesta este construit dintr-o
foaie metalic nfurat n spiral n jurul unui arbore care se rotete cu 2000 5000
rot/min.Rotorul are forma unei spirale cu un numr variabil de spire a cror seciune formeaz
canale paralele.
. Figura 8 Extractorul Podbielniak

1 ansamblu rotrax
2-carcas
3- lagre
4- curea de transmisie
5-foaie metalic spiralat perforat
26
6-conducte de distribuie a fazelor
7- conducte pentru lichide pentru splare i curare
8- tuuri pentru alimentare i evacuare
Distilarea azeotrop
Pentru separarea srurilor penicilinei V din soluie apoas rezultat dup reextracia n carbonat
de sodiu, se folosete pocedeul antrenrii azeotrope a apei cu acid clorhidric, la vid astfel nct
dup ndeprtarea apei are loc cristalizarea srii apoi se filtreaz i se spal cu butanol.
Uscarea
Este operaia de ndeprtare a umiditii din gaze lichide sau solide.Apa din cauza reactivitii
sale poate produce o serie de reacii secundare nedorite de hidroliz sau hidratare.
Usctoarele se pot clasifica n funcie de mai multe criterii:
1) dup regimul de funcionare
continue
discontinue
2) dup presiunea de lucru
la presiune atmosferic
la vid
3) dup procedeul de uscare
cu agent termic gazos
cu nclzirea materialului
4)dup sensul de circulaie a solidului i a gazului
- echicurent
- contracurent
- curent mixt
5) din punct de vedere constructiv
- usctoare cu strat fix
- cu strat mobil
- cu strat fluidizat
- cu pulverizare
27
- de contact
Penicilina V se filtreaz i se usuc n usctoare dulap la 35 - 45C sub vid, timp de 16-20 ore.
[10]
Etapa IV. Materii prime, intermendiare si auxiliare
Microorganismul productor este Penicillium Crysogenium i face parte din categoria

fungilor.
Fungii sunt organisme eucariote, avnd un aparat unicelular (gimnoplast, plasmodiu,

dermatoplsat, sifonoplast) sau pluricelular, dar nedifereniat n organe vascularizate. Sunt
organisme filamentoase saprofite (care cresc pe suprafaa substanelor intrate n putrefacie i nu
produc boli). Ei se produc pe cale asexuat (fr participarea unor gamei de sexe diferite). Sunt
organisme cu o mare capacitate de adaptare la condiiile variate, nefavorabile ale mediului n
care i desfoar activitatea.
Ele cresc n condiii extrem de acide, presiune osmotic, uscciune.
(https://ro.wikipedia.org/wiki/Regnul_Fungi)
Aparatul lor vegetal (formele de crestere i dezvoltare) este diferit de la o specie la alta. El
poate fi:
a).- un gimnoplast sau un plasmodiu
b).- dermatoplast
c).- sifonoplast
d).- talc tipic
a). Plasmodiu este forma de existenta a fungilor cu organizarea cea mai inferioara. El este
alctuit dintr-o mas citoplasmatic multinucleat lipsit de peretele celular rigid.
Este caracteristic fungilor primitivi.
b). Dermatoplastul este aparatul vegetativ ntalnit la cele mai multe levuri. El este format dintr-
o singur celul cu perete celular rezistent. Citoplasma i nucleu tipic eucariotelor.
c). Sifonoplastul este aparatul vegetativ ntalnit la multe ciuperci filamentoase. El este alctuit
din numeroase filamente subiri cunoscute sub numele hife a cror mpletire d un miceliu.
Hifele miceliene au form tubular, sunt rigide, prezetnd diametre relativ egale pe toat
lungimea lor. La exterior sunt delimitate de peretele hifal, rigid iar n interiorul hifei se afl
citoplasma n care sunt nglobai nucle. La aceste ciuperci numrul nucleelor este variabil. Hifa
are lungimi diferite i nu prezint septuri intracitoplasmatice .
28
d). Talul este aparatul vegetativ ntalnit la ciupercile superioare. El este format din numeroase
hife care se mpletesc i formeaz un miceliu cunoscut sub numele de tal. Hifele talului pot fi
septate complet sau incomplet prezentnd mpletituri mai mult sau mai puin compacte. La
ciupercile din clasa Dasidiomycetes hifele se mpletesc compact formnd un tal maxim.
La toate ciupercile la care aparatul vegetativ este un miceliu, se constat n mod obligatoriu
2 pri:
1. O poriune format din hife fine bogat ramificate care ptrund complet n substrat, ele formnd
miceliu de substrat. Aceste hife sunt cunoscute sub numele de rizoizi i formeaz sistemul
rezoidal al miceliului.
2. O poriune aeriana alctuit din hife lungi, mai puin ramificate i mai rezistente. Ele formeaz
miceliul aerian.
Structura intern dei este tipic eucariotelor, exist totui i unele deosebiri de la o form la
alta de mucegaiuri. Deosebirile ce pot apre se refer la prezena sau absena septului sau
peretelui hifal.
n general n structura unor hife se pot distinge urmtoarele formaiuni structurale tipice
celor mai multe eucariote: peretele celular (hifal), membrana plasmatic, citoplasmatic i
constituienii citoplasmatici i nucleu.
Perete celular
Hifa este delimitat la exterior de un perete rigid n structura creia intr chitina, celuloza,
polizaharide i unii acizi grai.
Peretele hifal acoper membrana plasmatic i tot el este cel care particip la formarea
septului hifal.
Membrana plasmatic
Are o structur tristratificat i se presupune ca ar avea un rol important n formarea
aparatului Golgi. Are totodat importante roluri n transportul unor substane din mediu n celula
i din celula n mediu.
Citoplasma
Se prezint sub form de mas granulat, n care suspectate vacuole ,picturi de grsimi,
numeroase granule de incluziuni i particule.
n citoplasma se gsesc de asemenea, reticulul endoplasmatic rugos bine dezvoltat, aparatul
Golgi, mitocondrii, ribozomi liberi sau fixai de reticolul endoplasmaic i lizozomi, formaiuni
structurale cu rol n liza unor substane.
29
(Ioan t. Bonta,Microbiologie industrial,1996)
Mediul de cultur are n componen urmtorii constitueni:
1.Glucoza SR 13359-7
Generaliti
Obiect i domeniu de aplicare: prezentul standard se refera la glucoza obtinut din cartofi si
porumb.
Destinat pentru consum i scopuri industrial:
Tipuri de glucoz:
-glucoz lichid
-glucoz solid
- aromatizat- nearomatizat
Glucoza aromatizat poate fi fabricat cu diferite adaosuri: esene, aromatizanii i colorani
alimentari avizai din punct de vedere sanitar, miez de nuc i miez de floarea-soarelui conform
acordului ntre productor i beneficiar.
Condiii tehnice de calitate:
Pentru glucoza de cartofi i de porumb, materiile prime i auxiliare trebuie s corespund
standardelor i normelor sanitare n vigoare.
Condiii de admisibilitate
Tip de glucoz Metod de verificare
Lichid Solid
Caracteristici Aromatizat Nearomatizat
Lichid Mas solid,sub Mas solid
Aspect vscos form de tabele
Culoare Incolor Crem pn la Crem pna la galben
pn la galben sau
galben specific
colorantului
adugat
Miros Lips Caracteristic Lips SR 13359-1
aromei adugate
Gust Dulce, Dulceag uor amrui
specific
Corpuri strine Lips
30
Proprieti fizico-chimice
Condiii de admisibilitate
Tip de glucoz
Caracteristici Lichid Solid Metoda de
Aromatizat Nearomatizat verificare
Umiditate,% max 20 21 SR13359-2
RBU,max 200 - SR13359-3
Culoare ml iod, soluie -
0,1n/100ml,max 1,5
Densitate 20/20C,g/ml,min 1,42 - SR13359-4
Indicele de refracie la 20C 1,49 - SR13359-5
Aciditate,grade,max 2,5 2,8 SR13359-6
Acizi minerali liberi % Lips SR13359-7
pH la o soluie 20g/100 ml 4,5...5,5 SR110-12
Coninut de n produs nealbit 4 SR EN1185
SO2,ml/100g,max n produs albit 40 15
Coninut de cenu 0,6 - SR110-2
conductometric,raportat la s.u.,
%,max
Coninutul de dextroz raportat la 32...49 min.75 SR13359-8
s.u.(DE),% sau SR13359-
9 sau SR
ISO5377
2. Extract de porumb STAS-14
Extractul de porumb are urmatoarele caracteristici:
Aspect: lichid cremos de culoare galben nchis.
Miros: caracteristic unei fermenttii lactice.
Sedimentare: dup 24 de ore ntr-un cilindru de 100 ml de 100%.
Aspect microscopic: n frotiu colorat prezint o masa bacterian tipic bacteriilor lactice, n
proporie de peste 90.
Substana uscat: minim 50%.
pH=3,5-4.
Coninutul n acid lactic: minim 20g la 100g substan uscat
31
Zahr total: maxim 2,5
Constituienti g/100g extract de porumb Domenii de valori

Substanta uscata 46-49,6
Cenusa 8,04-10,43
N total 3,33-3,67
Zahar total (exprimat x g glucoza) 4,00-4,70
Acid lactic 0,74-4,39
Aciditate (ml sol.NaOH 0,1N/100g extract de porumb) 11,6-19,3
Fe 0,009-0,02
P 1,5-1,9
Ca 0,02-0,07
Zn 0,05-0,012
K 2,0-2,5
SO2 0,22
Sedimente solide 38,4-52,9
3.Butanolul STAS-903-62
Identificare: - formul chimica C4H10O
- mas moleculara74,12
Proprieti fizice: - p.f.= 98C
- indice de refracie 1,3975
- aciditate exprimat n CH3COOH, % max= 0,02
- aspect: lichid limpede, incolor
- miros: caracteristic
4.CaCO 3 -STAS 1083-76
Prezentul standard se refer la carbonatul de calciu precipitat,tehinic, obinut prin tratarea
soluiei de var cu bioxid de carbon. Produsul se prepar sub form de pulbere microcristalin.
Formula chimic:CaCO3
Masa moleculara relativ: 100,09 g/mol
Carbonatul de calciu precipitat, tehnic se livreaz n patru tipuri:
- tipul I destinat, n special, la fabricarea pastei de dinti;
- tipul A destinat, n special, industriei de produse cosmetice, industriei de
antibiotice si industriei electrotehnice;
- tipul B destinat, n special, industriei de material plastic i industriei cauciucului;
32
- tipul C pentru alte utilizri
Condiii tehnice de calitate a carbonatului de calciu
Tipul 1 A B C
Grad de alb, % min 97 92 92 -
Finee: 0,1 1 1 -
-rest pe sita cu estur de srm 0063 STAS
10077-67,%
-rest pe sit cu estur de srm 009 STAS 0,05 0,5 0,5 1
10077-67 % max
Densitatea n grmad n stare0,45 0,45 0,45 0,47
tasat,g/cm,max
Cifr de sedimentare,cm,min 95 91 90 90
Umiditate,%, max 0,4 0,4 0,6 0,6
Substane insolubile in acid clorhidric,%, 0,1 0,2 0,2 0,2
max
Oxizi de fier i aluminiu, %,max 0,5 0,5 0,5 0,5
Carbonat de calciu, %,min 99 99 98,5 97
Alcalinitate, %, max 0,008 0,008 0,10 0,15
Limite de pH la un adaos de 1... 30cm acid 5,5...6,0 - -
clorhidric n
-pH-ul suspensiei 2% n ap,max 9 10 - -
Cuprul, %,max 0,001 0,001 0,001
Mangan, %,max 0,003 0,003 0,003 -
Arsen lips lips Lips -
5. Fosfat monopotasic STAS 10497-76

Generaliti
Prezentul standard se refer la fosfatul monopotasic ethnic utilizat, n principiu mediul de cultur
la fabricarea antibioticelor.
Formula chimic KH2PO4
Masa molecular 136,09 g/mol
Condiii tehnice de calitate
Aspect i culoare Cristale albe
Umiditate ,%,max 0.3
Fosfat monopotasic,%,min 96
Cloruri ,%,max 0,25
Fier,%,max 0,003
33
Metale grele(Pb),%,max 0.1
Substane insolubile n ap,%,max 0,5
Observaii:
-caracteristicele din table,cu excepia umiditii, se refer la fosfatul monopotasic uscat la 105
2
-cu acordul beneficiarilor se poate livra 0,05% fier
6. Azotat de amoniu STAS 405-30
Generaliti
Standardul cu nr. 450- 30 la ayotatul de amoniu tehnic,granulat obinut prin neutralizarea
acidului azotic cu amoniac utilizat la fabricarea explozivilor i n alte scopuri industrial.
Formula chimic: NH4NO3
Masa molecular relativ: 80.04 g/molAzotatul de amoniu tehnic granulat, se livreaz n dou
tipuri:
-tip I folosit la fabricarea explozivilor
-tip II folosit n alte scopuri industrial
Tip L Ll
Aspect Granule neaglomerabile Garanule neaglomerabile
Culoare Alb alb-roz
Granulaie
ntre 13mm,%,min 95 95
Granule sub 1 i peste 3 mm, 5 5
% max
Umiditate,%,max 0,2 0,3
Aciditate liber,%,max 0,02
Azotat de amoniu %,min 0,02 0,02
Azotat de magneziu,%,min 98.8 99,4
Azotat total,%,min 34,6 34,8
Reziduu de calcinare,%,min 0,2 -
7. Sulfat de sodiu-S.T.A.S 2126-84

Generalitai:Prezentul standard se refera la sulfatul de sodiu, anhidru, tehnic, intrebuintat in
industria de medicamente.
Formula chimic: Na2SO4
Masa moleculara relativ: 142.044 g/mol
Caliti:Sulfatul de sodiu, anhidru, tehnic se livreaz n trei calitai:
calitatea I produs secundar la bile de filare, de la obinerea fibrelor artificiale;
34
calitatea II obinut prin tratarea fosfogipsului rezidual cu sod calcinat (Na 2CO3),
urmat prin uscarea produsului prin atomizare.
calitatea III produs secundar din fabricaia acidului formic din formiat de sodiu i acid
sulfuric.

Calitatea I II III
Aspect praf neaglomerabil praf neaglomerabil praf aglomerabil
Culoare Alb alb Alb cenuiu
Sulfat de sodiu
99 97.5 97
(Na2SO4), %, max.
Umiditate, %, max. 0.3 0.1 0.5
Substane insolubile n
0.3 0.3 0.5
ap, %, max.
Acid sulfuric
Lips lips %, max. 1.0
liber(H2SO4)
Clorur de sodiu
0.1 1.2 1.2
(NaCl), %, max.
Fier (Fe), %, max. 0.001 0.001 0.03
Acizi organici
lips - %, max. 1.5
(HCOONa)
Densitate n stare
0.7...1.55 0.4...0.7 1.26...1.30
netasat kg/dm3
Observaie:
- toate valorile din tabel, exceptnd umiditatea si densitatea n stare netasat, sunt raportate la
produsul uscat la 105 2C.
8. Sulfat de zinc-S.T.A.S. 2367-80

Generalitati :Prezentul standard se refera la sufatul de zinc tehnic cristalizat, granulat si lichid.
Sulfatul de zinc tehnic cristalizat si granulat se livreaza in 3 calitati:
calitatea I
calitatea II
calitatea III
Sulfatul de zinc tehnic lichid se livreaza in 2 calitati:

- calitatea I
- calitatea II
Formula chimica: ZnSO4
Masa moleculara: 161 g/mol
La data aprobarii standardului, sulfatul de zinc tehnic granulat si lichid se importa.
Conditii tehinice de calitate a sulfatului de zinc tehnic cristalizat, calitatea I:

35
Calitatea I II III
Aspect cristale mici
Culoare Alba alba sau alb-galbui alb-galbuie-cenusie
Zinc(Zn) %min. 22,5 22,1 21,6

Substante insolubile
0,05 0,1 0,5
in apa, %max.
Fier(Fe), %max 0,035 0,5 1,0
Cupru(Cu), %max 0,005 - -
Acid sulfuric
0,1 0,5 -
liber(H2SO4), %max
Arsen Lipsa - -
Cloruri, %max 0,2 - -
9. Faina de soia
Faina de soia este o sursa de azot naturala, bogata in proteine, aminoacizi continand si acizi
nucleici, vitamine, oligoelemente, lipide, zaharuri, compusi cu sulf si fosfor dupa cum urmeaz:
Proteine 42%
Materii groase 3.5%
Metionina 0.54%
Cisteina 1.1%
Lizina 2.4%
Calciu 0.2%
Sodiu 0.287%
Potasiu 1.7%
Magneziu 0.21%
Sulf 0.32%
fosfor 0.6%
Generaliti: Faina de soia este o sursa de azot naturala, bogata in proteine, aminoacizi continand
si acizi nucleici, vitamine, oligoelemente, lipide, zaharuri, compusi cu sulf si fosfor dupa cum
urmeaz:
Agent antispumant: Ulei de floarea soarelui tehnic STAS 2710-70

Generaliti:
Standardul cu numarul 2710-70 se refer la uleiul tehnic obinut din semin ele de floarea
soarelui.
36
Uleiul tehnic de floarea soarelui se livreaz n dou caliti:
-calitatea I, obinut prin presare sau extracie cu solveni i prelucrare ulterioar;
-calitatea II, obinut prin presare sau extracie cu solveni.
Proprieti fizice i chimice:
Calitate 1 2 Metod de analiz

Aspect la 60C Limpede fr STAS 145/1-67
impuriti -
mecanice
Densitate relativ la 20C 0,9140,927 STAS 145/3-67
Indice de refracie la 20C 1,47101,4760 STAS 145/4-67
Culoare de iod,mg I/100cm 20 - STAS 145/2-67
max
Inpuriti insolubile n eter 0,1 1 STAS 145/11-67
etilic,% max
Umiditate i materii volatile,% 0,2 1 STAS 145/10-67 cap 1
max
Indice de aciditate,mg KOH/g 2 12 STAS 145/16-67 cap 1
max
Sunstane organice 1,2 1,2 STAS 145/15-67
nesaponibile, % max
Indice de iod, g I/100g min 119135 STAS 145/16-67 cap 1
Cenu, % max 0,05 - STAS 145/13-67
Indice de saponificare,mg 186198 STAS145/17-67
KOH/g
Substane mucilaginoase lips - STAS 145/18-70
165 135 STAS 145/6-67 cap 1
Cloroform S.T.A.S. 3306-82

Generalitati:
Formula chimica:HCCl3
Masa moleculara: 119,38 g/mol
Cloroformul se livreaza in urmatoarele tipuri si calitati:
-tipul A, stabilizat cu 0,61% alcool etilic absolute, utilizat in industria de
medicamente:
-calitatea I
-calitatea II
- tipul B, nestabilizat tehnic utilizat ca solvent
Conditii tehnice de calitate

Denumirea caracteristicii Tipul
A (stabilizat)
B(nestabilizat)
calitate I calitatea II
37
Aspect lichid limpede, incolor, volatile
Miros Caracteristic
Gust dulceag, arzator
Densitatea relativa 1,473-1,480 1,473-1,490
Cloroform, %min 98,0 97,0 -
Distilare:
-punct initial de fierbere, 0C,
59 57 57
min
62 63 63
-punct final de fierbere, 0C, max
-intre punctual initial si final de
97 96 94
fierbere distilata, %vol, min
Reziduu la evaporare, % max 0,002 0,002 0,015
Clor liber -
Cloruri(Cl), % max 0,0008 0,0008 -
Aciditate -
Substante organice straine - 15mg l/100cm3
Substante volatile straine - -
Apa -
Cloroformul este greu solubil in apa, miscobil in orice proportie cu alcoolul etilic absolute,
eterul etilic, benzina si majoritatea uleiurilor, este neinflamabil.
Etapa 5. Mecanismul reactiilor biochimice
Mecanismul biosintezei penicilinelor nu este pe deplin elucidat n totalitate, ns innd

seama de faptul c n molecula lor se gsesc trei componente de baz: d- valin, l-cistein i un
acid substituient, precum i identificarea n miceliul de Penicillium crysogenum a unei tripeptide.
Prima etap const n formarea, de glucoz, a l-cisteinei i d-valinei, iar din aceasta a a -amino-
adipil-cisteinil-valinei conform. (C. Oniescu)
38
Glucoza: C6H12O6
Piruvat: CH3 CO COOR

COOR
Succinat: CH2 COOR

Acetolacta: CH3 CO C CH3
CH2 COOR
OH
Glioxilat: O CH COOR
Dihidroxi- (CH3)2 C CH COOR
izovalerianat
Glicina: NH2 CH2 COOH
OH OH
Serina: HO CH2 CH(NH2) COOH

alfa-hidroxi- (CH3)2 CH CH COOR
valerianat
l- cisteina: HS CH2 CH(NH2) COOH
OH
HOCO CH3 (CH2)3 COOH L-valina; (CH3)2 CH CH COOH
NH
NH2
CH2 SH
Ac. alfa-amino
adipic (Ad) Ad NH CH COOH
CH2 SH CH(CH3)2
Ad NH CH CO NH CH COOH
-amino -adipil cisteinil-valina
Schema I
n a doua etap se formeaz sistemul biclic al penicilinelor i sunt propuse dou ipoteze:
- plecnd de la o tripeptid (schema II);

- plecnd de la l- cistein i l-valin (schema III).
39
H2C SH CH(CH 3)2
Ad NH CH CO NH CH2 COOH
CH S
Ad CO NH HC CH3 (CH 3)2
CO N&
& HC
2 COOH
H
SH
CH CH3 (CH 3)2
Ad CO NH HC N CH COOH
C
O
SH
CH O (CH 3)2
Ad CO NH HC N C COOH
C
O
S
CH3
HC C
CH3
C
O
S
HC C(CH 3)2
S C(CH 3)2
H2N HC N CH COOH
HC
CO
H5C6 O CH2 CO NH HC N CH COOH
CO
Acid 6 aminopenicilanic
Penicilina V
40
H2C SH CH(CH 3)2
Ad NH CH CO NH CH2 COOH
CH S
Ad CO NH HC CH3 (CH 3)2
CO N&
& HC
2 COOH
H
SH
CH CH3 (CH 3)2
C
O
SH
CH O (CH 3)2
Ad CO NH HC N C COOH
C
O
S
CH3
HC C
CH3
C
O
S
HC C(CH 3)2
S C(CH 3)2
H2N HC N CH COOH
HC
CO
H 5C6 O CH2 CO NH HC N CH COOH
CO
Acid 6 aminopenicilanic
Penicilina V
Glucoza: C6H12O6
Piruvat: CH3 CO COOR

COOR
Succinat: CH2 COOR

Acetolacta:
41 CH3 CO C CH3
CH2 COOR
OH
Schema II
Sinteza nucleului de baz a penicilinei, acidul 6-amino-penicilanic ar rezulta din acidul -

amino-adipic, l-cistein i l-valin trecnd prin faza tripeptidei. n ultima etap se formeaz
penicilin V sau acid 6-aminopenicilanic prin pierderea grupei acil.
SH CH(CH3)2
CH2 + H2N CH CH2

H2N CH
COOH l-valina
l-cisteina SH
H2N CH CH CH(CH3)2
CO N CH COOH
SH
H2N CH CH C(CH3)2
CO N C COOH
H2N CH CH C(CH3)2
CO N CH COOH
Acid 6 - amino-penicilanic
C6H5 O CH2 COOH
S
C 6H 5 O CH2 CO NH CH CH CH(CH3)2
CO N CH COOH
PENICILINA V
42
Schema III
Penicilinele s-ar forma i direct din l-cistein si l-valin printr-o serie de faze intermediare,
despre care nu se tie dac se formeaz n stare liber ca n schema III. . n esen, se distung n
aceast schem urmatoarele faze in formarea penicilinei: condensarea aminoacizilor,
dehidrogenarea peptidei, hidrogenarea i ciclizarea intermediarului la acid 6-aminopenicilanic i
introducerea catenei laterale.
(C. Oniescu Tehnologia produselor de biosintez)
5.1. Cinetica procesului de fermentaie discontinu
Prin metoda cintic se face studiul mecanismelor reaciilor enzimatice, a proceselor

metabolice i a vitezei de transformare a substratului n produs.
n problemele de cinetic enzimatice referitoare la viteza de formare a produsului sau de

cretere a masei celulare,se folosesc definiii pentru viteza de fermenta ie, vitez volumetric i
vitez specific.
Viteza de fermentaie reprezint variaia momentan a concentraiei produsului, a intensitaii

respiraiei sau a concentraiei masei celulare.
Viteza volumetric este definite prin unitatea de produs obinut, cantitatea de zahr
utilizat, cantitatea de celule produse sau prin consumul de oxigen, toate raportate la litru mediu
de cultur si la or. Vitezele volumetrice calculate n funcie de masa celular, de consumul de
zaharuri, de cantitatea de produs biosintetizat i de consumul de oxigen la fermentaia penicilinei
V sunt redate grafic in figura 5.1.1 (C.Oniescu)
Figura 5.1.1. Vitezele volumetrice la

fermentaia penicilinei v
D- viteza de utilizare a oxigenului,

g/l.h;
B- viteza de crestere a masei

celulare, g/l.h;
C- viteza de consum a zaharurilor,
g/l.h;
D- viteza de Yroducer a penicilinei, g/l.h.
43
Viteza specific este raportul dintre viteza volumetric sin densitatea bacterian, se exprim
n grade de produs obinut pe or si gram mas celular. Pentru cazul concret al fermenttiei
penicilinei V, vitezele specifice sunt prezentate n figura 5.1.2
Figura 5.1.2. Vitezele specifice la fermentatia penicilinei V
(C. Oniescu)
A- viteza de producere a penicilinei, g/g.h
B- viteza de utilizare a oxigenului, g/g.h.
C- viteza de consum a zaharurilor, g/g.h
D- viteza de crestere a masei celulare, g/g.h
Enzimele sunt macromolecule cu structur proteic care catalizeaz procesele biochimice.

Din punct de vedere structural, enzimele sunt compui de natura hetero-proteic cu sensibilitate
deosebit la toi factorii care afecteaz proteinele. Activitatea enzimelor este influenat de
temperatur, pH, presiune osmotic, concentraia substratului, concentraia produilor rezultai n
reacie. Activitatea enzimatic este inhibat de anumii ageni specifici, printre care: sulfamide,
antibiotice, narcotice, colorani, ap oxigenat, dioxid de carbon, dezinfectante.
Substana asupra creia se exercit aciunea enzimelor se numete substrat . Prezena

enzimelor permite transformarea substratului la temperatur normal a materiei vii, oferind, n
acest fel, energia necesar desfurrii procesului de biosintez.
44
Funcia esenial a enzimelor const n accelerarea vitezei reaciilor metabolice la
temperatur normal a organismelor. Avnd activitatea catalitic foarte ridicat, enzimele reduc
considerabil barierele de potenial ale reaciilor de transformare a substratului, facilitnd astfel
deplasarea echilibrului spre formarea de produs.
( C. Oniescu)
Mecanismul prin care enzimele transform substratul poate fi descris cu ajutorul teoriei
strii de tranziie. Aceast teorie presupune c substratul se combin cu enzima formnd un
complex activat, instabil, care ulterior se descompune n produs i enzim. Enzima eliberat reia
ciclul de transformare a substratului, conform schemei:
k +1 k2
E+S E - S* P + E (1)
k-1
n care: E-enzima liber; S-substrat; P-produs.
E-S*- complex activat enzim-substrat;
k+1 - constanta de vitez a reaciei de formare a complexului enzima- substrat;
k-1- costanta de vitez a reaciei de formare a substratului i enzimei din complexul enzima-
substrat
k2- constanta de vitez a reaciei de formare a produsului din complexul enzima- substrat.
De asemenea, se poate admite c ntre enzima i substrat, pe de o parte, i complexul

enzima-substrat, pe de alt parte, exist un echilibru descris prin ecuaia:
k+1 CE-S*
Kc* = k-1 = C C
E* S (2)
Viteza de descompunere a complexului enzima- substrat n produs este redat prin

intermediul expresiei:
kBT
K2=
h (3)
unde; CE-S*-concentraia complexului enzima-substrat n stare activate.
Kc*-constanta de echilibru
KB-constanta Boltzman
h-costanta Planck
45
Viteza reactiei de formare a produsului este:
kB T
vp = CE-S*
h (4)
vp =viteza specifica de descompunere a complexului activat
Din ecuaia (2) si (4) rezult:
kB T
vP= K C * CE CS
h (5)
Constanta de echilibru a formrii complexului activat se poate exprima funcie de energia

liber standard G*:
G* = H* - TS* = -RTlnKC * (6)
Din aceast ecuaie, constanta de echilibru se poate determina cu expresia:

G
RT
K =eC (7)
(C. Oniescu,Tehnologia produselor de biosintez)
5.2. Modele cinetice pentru viteza de formare a produsului
Michaelis si Menten au dezvoltat modelul cinetic al vitezei de formare a produsului n

funcie de concentraia susbtratului i a enzimei. Dupa acetia, se considera ca reacia dintre
enzima i substrat se desfaoar n doua etape:
n prima etap viteza de reacie este dependent direct de cantitatea de substrat;
n a doua etap are loc formarea produsului i eliberarea enzimei, care este capabil sa
reia ciclul descris de sistemul de reacie, viteza depinde de concentra ia complexului
enzima substrat:
k +1
E+S E+S
k+1 P+E
E-S (1)
Viteza de formare a produsului n procesul enzimatic este:
vp K2
= c (2)
46
Pentru determinarea concentraiei complexului enzim-substrat Cc se utilizeaz expresia
CS C
vitezei de formare a acestuia, pentru cazul n care > E .
dCC
=k +1 ( C E CC ) C S k 1 C C k 2 CC (2)
d
n regim stationar viteza de formare a complexului enzin-substrat se anuleaz:
k +1 ( C EC C ) C Sk1 CC k 2 C C =0
(3)
iar comcentraia complexului devine:
C E C S
CC =
k 1 +k 2 (4)
+C C
k +1
Constanta KM este egal cu constanta de echilibrul KS numai atunci cnd K2> k+1. Cu
ct valoarea lui KM este mai mic, cu att este mai mare afinitatea enzimei pentru substrat.
kM
Introducnd constanta se obine:
(5)
Ecuaia Michaelis-Menten a fost stabilit n ipoteza c CS >> C E . Creterea

concentraiei enzimei n mediu de fermentaie peste o anumit limit atrage dup sine anularea
acestei ipoteze i, n consecin, viteza reaciei enzimatice nu va mai fi direct proporional cu
concentraia enzimei.
(C. Oniescu,Tehnologia produselor de biosintez)
Pentru determinarea constantei KM i a vitezei maxime V, se utilizeaz metodele de

liniarizare. Una dintre acestea este metoda Lineweaver-Burk:
47
Figura 5.2.1. Reprezentarea grafica a ecuatiei Lineweaver-Burk.
1 KM 1 1 1 KM 1 1
+ +
VP V CS V VP V CS V
1 KM 1 1 1 KM 1 1
+ +
VP V CS V VP V CS V
(6)
n literartura de specialitate se ntlnesc si alte reprezentri ale ecuaiei Michaelis-

Menten:
(7)
Figura 5.2.2. Reprezentarea grafica a vitezei reaciei enzimatice dup metoda Eadie-
Hofsee.
48
O alt reprezentare a ecuaiei Michaelis-Menten a fost propus de Woolf pornind de la
CS
ecuaia lineweaver-burk pe care o inmulete cu i obine ecuaia (8), care este
reprezentat graphic n figura5.2.3.
(8)
Figura 5.2.3. Reprezentarea grafica a ecuaiei Michaelis-Menten dup metoda lui Woolf.
Viteza de formare a produsului este proporional cu concentraia complexului enzima-

substrat, de aceea este nacesar cunoaterea valorii acesteia, n regim staionar. n acest scop, se
scriu constantele de echilibru, pentru situaia n care :
(9)
Cd CC
Se reduce termenul din ecuaia (9) explicitnd funcie de , iar viteza formrii
produsului este:
(10)
49
CI
n care: - concentraia inhibitorului;
Cd
- concentratia complexului enzima-inhibitor;
KI
- constanta de echilibru a reaciei dintre enzim i inhibitor;
K M =K S
Figura5.2.4. Reprezentarea grafic a vitezei reaciei enzimatice nsoit de inhibiie

competitiv dupa metoda Lineweaver-Burk.
(C. Oniescu, tehnolohia produselor de biosintez)
5.3.Termodinamica reaciilor biochimice

Procesul de fermentaie se ncadreaz, din punct de vedere termodinamic, n categoria
sistemelor termodinamice deschise, sisteme specifice organismelor vii, caracterizate prin schimb
de energie i de materie cu mediul nconjurator, pe care l transform. Sistemelor deschise le este
specific faptul c ele nu sunt n echilibru cu mediul lor. Organismele vii se afl, de obicei, ntr-o
stare staionar, care reprezint condiia de baz a sistemelor deschise, i n care viteza
transferului de materie i energie din mediu n sistem este compensat total de viteza transferului
de materie i energie din sistem n afara lui.
Faptul c celula este un sistem deschis, care nu se afl n echilibru cu mediul sau, un
mecanism care capteaz energie liber din mediu, producndu-i simultan o cretere oarecare a
gradului de dezordine, adic a entropiei, face parte din logica molecular a strii vii.
n starea stationar, viteza de producere a entropiei are o valoare minim, iar sistemul
opereaz cu maximum de eficien n condiiile date. Semnificaia acestei relaii a fost discutat
50
pertinent, punndu-se n eviden faptul c viaa este o continu lupt mpotriva tendinei de a
produce entropie. Sinteza unor molecule mari, bogate n informaii, formarea structurilor
intracelulare, creterea biomasei sunt puternice fore antientropice. ns, organismele vii, fiind
obligate s se supun principiului al doilea al termodinamicii, i anume s produc entropie, au
ales calea de a produce entropie cu viteza minim, meninndu-se astfel n stare staionar, stare
n care reaciile din celulele vii decurg cu o vitez foarte mare. Ca urmare, studiul entalpiei
capat o importan deosebit.
( D. Cacaval, Inginerie biochimic i biotehnologie)
n acelai context, trebuie subliniat faptul c fluxul de energie ce trece printr-un sistem
termodinamic deschis determin autoorganizarea acestuia, astfel ncat viteza de producere a
entropiei s se menin la valori minime.
Sursa de energie a sistemelor termodinamice deschise o reprezint hidra ii de carbon,
lipidele, alcoolii, proteinele etc, care prin combustie chimic elibereaz o mare cantitate de
energie. O parte din aceast energie se elimin din sistem, iar o parte este nmagazinat de sistem
n compui organici macroenergetici, dintre care se remarc acidul adenozintrifosforic (ATP),
compus care asigur, practic, rezerva energetic a celulei. Din structura ATP-ului, prezentat mai
jos, rezult ca legturile dintre gruprile fosfat adiacente din ATP i ADP (acidul
adenozindifosforic) sunt legturi de tip anhidrid, notate cu ~, n timp ce legatura dintre acidul
fosforic i riboza din AMP (acidul adenozinmonofosforic) este o legatur esteric, notat cu linie
dreapta.
Dei ATP-ul conine doua legturi macroenergice (~), n reaciile enzimatice intervine, de
obicei, numai fosfatul terminal. De asemenea, este necesar de precizat c ATP-ul nu este numai
un rezervor de energie chimic, ci este n primul rand, un transmitor de energie chimic n
celulele vii. Transportnd energia s la alte molecule, acest compus pierde gruparea fosfat
terminal, trecnd n ADP, care, la rndul su, poate accepta energie chimic i reface ATP-ul,
primind o grupare fosfat.
51
Prin reunirea acestor observaii, ca i a multor altora, s-a constatat c ATP-ul funcioneaz
ciclic ca transportor de energie chimic de la reaciile de ardere, care furnizeaz energia chimic,
la diferitele procese celulare care necesit un cosum energetic.
Figura 5.3.1.Ciclul ATP ADP i modalitile de utilizare a energiei eliberate de ATP.

S-a evideniat experimental c, indiferent de natura substratului limitativ considerat ca surs

de energie sau molecule combustibil (excepiile fiind foarte rare), raportul dintre cantitatea n
grame a celulelor microbiene obinute n stare uscat i numrul de molecule de ATP sintetizate
este aproximativ constant i are valoarea de 10,5. De asemenea, s-a demonstrat c n procesul de
cultivare a bacteriilor n condiii aerobe 605% din cantitatea de carbon din mediu este asimilat
de celule i numai 405% este oxidat la CO2. Din punct de vedere energetic, circa 62% din
energia liber de ardere a componentelor masei bacteriene, astfel ncat Hc=22KJ/g s.u.
(masa bacteriana).
52
Dac substratul furnizor de energie este glucoza, care se consum ntr-un procesul de
fermentaie aerob prin catabolism, atunci se formeaz, conform reaciei de mai jos, 38 moli ATP,
care pot nmagazina 1159 kJ din cei 2870 obtinui prin combustia unui mol de glucoz:
Glucoza + 6O2 6CO2 + 6H2O + 38 moli ATP
Moleculele de ATP si ADP fiind puternic ionizate, datorit faptului c pH-ul lichidului
intracelular are valoarea 7, formeaz n prezenta ionilor de Mg2+ (aflat n cantitate ridicat n
lichidul intracelular) compleci de tipul celui prezentat mai jos, complecsi care constituie, de
altfel, chiar forma activa a ATP-ului:
Cea mai important sursa de cldur n timpul fermentaiei o reprezint cldura degajat n
urma activittii microorganismelor sau enzimeleor (Q1).
Calculul efectului termic total al proceselor biochimice se realizeaz prin:
Q1=V URQ
Q1efectul termic al proceselor biochimice

n care:
V u
volumul util de lichid de fermentaie
RQ- viteza de degajare a cldurii
Exist o corelatie inre viteza de degajare a cldurii,RQ, i viteza de consum a oxigenului

, RO2
RO2 3
RQ= 5*105* [W/ m ]
53
2.4.6. Bilanul de materiale
Scopul bilanului de materiale const n determinarea cantitilor de substane utilizate n scopul

obinerii Penicilinei V.
Etapele procesului tehnologic se desfasoara cu urmatoarele randamente:
Filtrare: = 80%;
Extracie : =94%;
Reextracie : = 90%;
Cristalizare: = 90%;
Filtrare: = 95%;
Uscare: =98%.
=0,56709
Calcule preliminare
Producia pe an este: Pan = 36 t Penicilina V/an
Pan = 36000 kg Penicilina V/an
Fondul anual de timp : FAT = 330 zile
Durata unei sarje: ts = tf + taux
tf = durata fermentaiei, h
taux = timpi auxiliari, h
tf = 140 h
taux = 10-15 h Se adopta taux = 14 h
ts = 140 + 14 ts = 154 h
Numrul de arje se calculeaz cu relaia : ns = (FAT * 24) / ts , arje
ns = (330 * 24) / 154
ns = 51 arje
Producia pe arja : Ps = Pan / ns , kg / arja
Ps = 36000 / 51 = 705.88235294 kg/ sarja
n fermentator se obine o producie : Pf = Ps /g
g = 0.56709
54
Pf = 705.88235294/ 0.56709
Pf = 1244.7448428 kg /arja
Topt = 26 C
Productivitatea microorganismului pentru Penicilina V este 44420 U.I./ ml , iar activitatea
standard este 1630 U.I./mg.
1 mg..1630 U.I.
X mg44420 U.I.
X =27,25153 mg/ml
P = 27,25153 kg/m3
Volumul util este dat de relaia : Vu = Pf / P , m3
Vu =1244.7448428/ 27.25153 = 45.676145258 m3
Mmdc = masa mediului de cultur
Mmdc = * Vu
= densitate apei la temperatura de 26C = 995.9 kg/m3
Mmdc = 995,9 * 45.676145258 = 45488.873062 kg/ arja
Pregatirea mediului de cultura
100 kg mdc.3 kg glucoz

45488.873062 kg mdc.....x1
x1 = 1364.6661918 kg glucoza
100 kg mdc.7 kg lactoz
45488.873062 kg mdc..x2
x2=3184.2211142 kg lactoz
100 kg mdc.2.8 kg extract de porumb

45488.873062 kg mdc..x3
x3 = 1273.6884457kg extract de porumb
100 kg mdc.0.3 kg fin de soia

45488.873062 kg mdc...x4
55
x4 = 136.46661918 kg fin de soia
100 kg mdc.0.3 kg NH4NO3

45488.873062 kg mdc..x5
X5=136.46661918 kg NH4NO3
100 kg mdc.1.3 kg CaCO3

45488.873062 kg mdc..x6
X6 = 591.35534980 kg CaCO3
100 kg mdc.0.002 kg ZnSO4

45488.873062 kg mdc..x7
X7 = 0.90977746124 kg ZnSO4
100 kg mdc.0.06 kg Na2SO4

45488.873062 kg mdc..x8
X8 = 27.293323837 kg Na2SO4
100 kg mdc.0.6 kg KH2PO4
45488.873062 kg mdc..x9
X9 = 272.93323837 kg KH2PO4
100 kg mdc.0.002 kg MnSO4

45488.873062 kg mdc..x10
X10 = 0.90977746124 kg MnSO4
100 kg mdc.0.4 kg Acid fenilacetic

45488.873062 kg mdc..x11
X11 =181.95549224 kg acid fenilacetic
100 kg mdc.0.8 kg Na2S2O3
56
45488.873062 kg mdc..x12
X12 = 363.91098449 kg Na2S2O3
100 kg mdc.83.436 kg H2O

45488.873062 kg mdc..x13
X13 = 37954.096128 kg H2O
TABEL 2.4.6.1. Compoziia mediului de cultur

MATERII INTRATE % Kg/sarja MATERII IESITE % Kg/sarja
Glucoza 3 1364.6661918 Glucoza 3 1364.6661918
Lactoza 7 3184.2211142 Lactoza 7 3184.211142
Extract de porumb 2.8 1273.6884457 Extract de porumb 2.8 1273.6884457
Faina de soia 0.3 136.46661918 Faina de soia 0.3 136.46661918
NH4NO3 0.3 136.46661918 NH4NO3 0.3 136.46661918
CaCO3 1.3 591.35534980 CaCO3 1.3 591.35534980
ZnSO4 0.002 0.9097774612 ZnSO4 0.002 0.9097774612
Na2SO4 0.06 27.293323837 Na2SO4 0.06 27.293323837
KH2PO4 0.6 272.93323837 KH2PO4 0.6 272.93323837
MnSO4 0.002 0.9097774612 MnSO4 0.002 0.9097774612
Acid fenilacetic 0.4 181.95549224 Acid fenilacetic 0.4 181.95549224
Na2S2O3 0.8 363.91098449 Na2S2O3 0.8 363.91098449
H2O 83.436 37954.096128 H2O 37954.096128
TOTAL 100 45488.873062 TOTAL 100 45488.873062
Deoarece in timpul sterilizarii o parte din componentii mediului de cultura se degradeaza,

urmatorii component se iau in exces de 10 % : glucoza, lactoza, extract de porumb, faina de soia.
- Glucoza: 1.1 * 3 = 3.3%
1.1 * 1364.6661918=1501.1328109 kg/ sarja
- Lactoza : 1.1 * 7 = 7.7 %
1.1 * 3184.2211142 = 3502.6432256 kg/sarja
- Extract de porumb : 1.1 * 2.8 = 3.08 %
1.1 * 1273.6884457 = 1401.0572902 kg/sarja
- Faina de soia : 1.1 * 0.3 = 0.33 %
1.1 * 136.46661918 = 150.11328109 kg/ arj
57
TABEL 2.4.6.2. Compoziia mediului de cultur cu exces
Glucoza 3.3 1501.1328109 Glucoza 3.3 1501.1328109
Lactoza 7.7 3502.6432256 Lactoza 7.7 3502.6432256
NH4NO3 0.3 136.46661918 NH4NO3 0.3 136.46661918
CaCO3 1.3 591.35534980 CaCO3 1.3 591.35534980
ZnSO4 0.002 0.9097774612 ZnSO4 0.002 0.9097774612
Na2SO4 0.06 27.293323837 Na2SO4 0.06 27.293323837
KH2PO4 0.6 272.93323837 KH2PO4 0.6 272.93323837
MnSO4 0.002 0.9097774612 MnSO4 0.002 0.9097774612
Na2S2O3 0.8 363.91098449 Na2S2O3 0.8 363.91098449
H2O 82.126 37358.19189 H2O 82.126 37358.19189
TOTAL 100 45488.873062 TOTAL 100 45488.873062
2.Etapa de sterilizare
n aceast etapa se degradeaz compuii care la etapa precedent au primit un exces de 10 %.
TABEL 2.4.6.3.
Glucoza 3.3 1501.1328109 Glucoza 3 1364.6661918
Lactoza 7.7 3502.6432256 Lactoza 7 3184.2211142
NH4NO3 0.3 136.46661918 NH4NO3 0.3 136.46661918
CaCO3 1.3 591.35534980 CaCO3 1.3 591.35534980
ZnSO4 0.002 0.9097774612 ZnSO4 0.002 0.9097774612
Na2SO4 0.06 27.293323837 Na2SO4 0.06 27.293323837
KH2PO4 0.6 272.93323837 KH2PO4 0.6 272.93323837
MnSO4 0.002 0.9097774612 MnSO4 0.002 0.9097774612
Na2S2O3 0.8 363.91098449 Na2S2O3 0.8 363.91098449
H2O 82.126 37358.19189 H2O 83.436 37954.096128
TOTAL 100 45488.873062 TOTAL 100 45488.873062
58
3.Fermentaia
Se calculeaz: Necesarul de aer;
Biomasa;
Apa evaporata.
3.1. Se consider necesarul de aer : 1 L aer pentru 1 L mdc * min.
1 L = 10-3 m3 mdc.1L= 10-3 m3 aer

Vu = 45.676145258 m3 mdc..x m3 aer
X =45.676145258 m3 aer/m3 mdc
1 min45.676145258.m3 aer
Tf = 140 * 60 = 8400 Vaer
Vaer = 383679.62016 m3 aer
aer = 0 * (T0 / T)*(p / p0)
0 = densitatea aerului n condiii normale = 1.293 kg /m3
T0 = temperatura normal = 273K
T = temperatura de lucru (fermentaie) = 299 K
p = presiunea de lucru n fermentator = 1.1 atm
p0 = presiunea normal =1 atm
aer = 1.293 * (273/299) * 1.1
aer =1,2986217390 kg/m3
Maer = aer * Vaer
Maer = 1.2986217390*383679.62016 = 498254.69555 kg aer/ sarja
3.2. Biomasa
Cx = 20 g s.u. / L mdc
Celulele vii contin 20 % substanta uscata si 80 % apa.
10-3 m3..100 g celule (biomasa)
45.676145258 m3.Mbiomas , g biomas = kg biomas/ arj
59
Mbiomas = 4567.6145258 kg biomas/ arj
3.3 Ap evaporat
1 kg aer preia.0.01 kg H2O
498254.69555 kg aerx
X =4982.5469555 kg ap evaporat
Lichidul de fermentaie:
Mldf = Mmdc + Minocul MH2O evaporate - Mbiomas
Mmdc = 90% * Mmdc = 0.9 *45488.873062 = 40939.985755 kg/ sarja
Minocul = 10% * Mmdc = 0.1 *45488.873062 = 4548.8873062 kg/ sarja
Mldf =40939.985755 + 4548.8873062 4982.5469555 4567.6145258
Mldf = 35938.711579 kg lichid de fermentaie / arj
TABEL 2.4.6.4.
MARIMI INTRATE Kg / sarja MARIMI IESITE Kg / sarja
Mediu de cultura 40939.985755 Lichid de fermentatie 35938.711579
Produs util PV (0.9*1244.7448428=
1120.2703585)
Inocul 4548.887306 Biomasa 4567.6145258
Aer 498254.69555 Aer 498254.69555
Apa evaporate 4982.5469555
TOTAL 543743.5686 TOTAL 543743.5686
4. Filtrearea = 80% = 0.8
Precipitatul reine 20% din lichidul de fermentaie.

MPP = Mbiomasa + MH2O din pp
Mpp = Mbiomasa / 0.8
Mpp = 4567.6145258 / 0.8 = 5709.5181572 kg / sarj
Mfiltrat = Mldf 0.2 * Mpp
Mfiltrat =35938.711579 0.2 *5709.5181572 =34796.807947 kg / sarj
TABEL 2.4.6.5.
60
Licghid de fermentatie 35938.711579 Precipitat 5709.5181572
(Penicilina V) (1244.7448428) Filtrat 34796.807947
Biomasa 4567.6145258 Penicilina G (produs (1120.2703585)
util)
TOTAL 40506.326104 TOTAL 40506.326104
5. Extratia = 94% = 0.94
Extracia se realizeaz utiliznd acetat de butil n raport 1:3 cu filtratul.

2PCOOK + H2SO4 2 PCOOH + K2SO4
2 * 388 ..98.2 * 350..174
Pu=1120.2703585..X.Y..Z
X = 141.47744217 kgH2SO4 / sarj

Y =1010.5531584 kg penicilina / sarj Y = Y * 0.94 =949.91996889 kg penicilin/sarj
Z = 251.19464222 kg K2SO4 /sarj
Fermentaia are loc la un pH = 6.7 dar pentru a avea loc extracia este necesar un pH al fazei
apoase egal =2; pentru aceasta se adaug H2SO4.
pH = 6.7 pH = 6.7 2 = 4.7
pH =2
pH = - log [H+]
4.7 = - log [H+] [H+] = 1.995 * 10-5 ioni H* / L
1 mol H2SO4..2H+
t moli H2SO4..1.995 * 10-5 ioni H+
t = 9.975 *10-6 moli H2SO4
Vfiltrat = Mfiltrat / = 34796.807947 / 995.9= 34.91295104 m3 = 34912.95104 L
1 L = 10-3 m3 filtrat9.975 * 10-6 moli H2SO4
61
34.91295104m3 ..u moli H2SO4
4
U = 3.482566866* 10 kmoli H2SO4 / sarj
Md= x + u*0.98
4
Md =141.47744217 +3.482566866* 10 *0.98 = 141.47778346 kg H2SO4 , 100%
Pentru extracie se folosete H2SO4 4 %:

Ms = (Md * 100) / c
Ms = ( 141.47778346*100) /4 = 3536.9361395 kg H2SO4/sarj
Map = ms-md= 3395.4583560 kg H2SO4 / sarja
Macetat de butil = Mfiltrat / 3 = 34796.807947/3 =11598.935982 kg acetat de butil / sarja
Mextract = 98% Macetat + MPV extras=12316.87723 kg/ arj
Mrafinat = 2% Macetat + MPV neextrasa + MK2SO4 + Mapa din sol + (Mfiltrat MPV)
Mrafinat=231.97871964+60.63318951+251.19464222+3395.4583560+(34796.807947-
1120.2703585)
Mrafinat =37615.802495 kg / sarj
TABEL 2.4.6.6
Filtrat 34796.807947 Extract 12316.877230
( Penicilina V) (Penicilina V extrasa)
Acetat de butil 11598.935982 Rafinat 37615.802495
H2SO4 4% 3536.93613
TOTAL 49932.680059 TOTAL 49932.679725
6. Reextracia = 90% = 0.9
Reextracia se realizeaz cu K2CO3 10% n exces de 10%.
2 PCOOH + K2CO3 2 PCOOK + CO2 + H2O
2*350....138....2*388..44..18
1120.2703585....X..Y..ZT
X = 220.8532991 kg K2CO3 /sarj
Y = 1241.899711 kg Penicilina V Y = 1117.70974 kg PV reextras
62
Z =70.41699393 kg CO2 Z = 63.37529454 kg CO2
T = 28.80695206 kg H2O T =25.92625686 kg H2O
Soluia K2CO3 n exces:

X = x + 10% = x*1.1= 220.8532991 * 1.1 = 242.938629 kg K2CO3 100%
K2CO3 exces = 0.1 *242.938629 = 24.2938629kg/ sarja
Ms = x * (100/10) =242.938629 * 10 = 2429.38629 kg K2CO3 10%
Mapa = ms x =2429.38629 242.938629 = 2186.447661 kg H2O din carbonat
Datorit excesului exist K2CO3 nereacionat:
a = 0.1 * x
a = 0.1 * 220.8532991= 22.08532991 kg K2CO3 nereacionat
Solvent:
Msolvent = Mextract MPV extras - 2% Macetat
=12316.877230 (1120.2703585* 0.9 ) (0.02 * 11598.935982*0.98)
= 11081.29476
Msol carbonat = MPV Extrasa + MH20din carbonat + MK2CO3 nereactionat + MK2CO3 exces
+ Mapa din reactie + MCO2 + (0.02* Macetat)
Msol carbonat = 1117.70974 +2186.447661+ 22.08532991 +22.08532991 + 25.92625686
+63.37529454 +(0.02*0.98* 11598.935982)
Msol carbonat = 3664.968757 kg /arj
TABEL 2.4.6.7.
Extract 12316.877230 Solvent-acetat epuizat 11081.29476
K2CO3 10% 2429.38629 Solutie carbonat 3664.968757
TOTAL 14746.26352 TOTAL 14746.26352
7. Cristalizarea prin distilare azeotropa

= 0.9
63
PCOOK + HCl PCOOH + KCl
388...36.5..35074.5
1117.70974 ....X..Y..Z
X=105.145375 kg/ arj X=94.63083752 kg/ arj

Y= 1008.243322kg/ arj Y=907.4189899 kg/ arj
Z= 214.6117929 kg/ arj Z=193.1506136 kg/ arj
Se utilizeaz HCl 20% n exces 5%.
X*(1+0.05)= 105.145375 * 1.05 = 110.4026438 kg soluie HCl 100%
ms= md +100/20= 110.4026438 * 5 = 552.0132188
md + map= w map=552.0132188 - 110.4026438 = 441.6107808 kg H2O/ arj
MHCl nereacionat=105.145375 - 94.63083752 = 10.51453748 kg
Ape acide= M soluie carbonat M PV precipitat +M ap + M HCl ex + MHCl nereacionat + M KCl
Ape acide = 3664.968757 (1117.70974* 0.9) + 441.6107808 + 10.51453748 + 5.2572688 +
193.1506136 = 3309.558611
Mrimi intrate Kg/ arj Mrimi ieite Kg / arj
Soluie carbonat 3664.968757 PV precipitat 907.4189899
(penicilina V) Ape acide 3314.82046
HCl 20% 552.0132188
Total 4216.981976 Total 4216.981976
8. Filtrarea. Spalarea pe filtru = 95% = 0.95

Precipitatul conine 20% umiditate.
MPP =PV + 0.2 * PP 0.8 * Pp = PV

MPVf = 0.95* 907.4189899
MPVf =862.0480404 Kg / arj
0.8 * PP = PV
PP = 862.0480404 / 0.8
PP = 1077.560051 Kg / arj
Filtrul apos:
Mfiltru apos = Mape acide -0.2 * MPP +0.05 * PV
64
Mfiltru apos = 3314.82046 215.5120101 + 45.3709495
Mfiltru apos = 3144.679399 Kg / arj
Cristalele se spala pe filtru cu butanol si chloroform in raport cu 1:5 fata de masa pp.
Mbutanol = Mcloroform =Mpp/5 =(1077.560051 / 5) / 2 = 107.7560051 kg / arj
TABEL 2.4.6.9
MARIMI INTRATE Kg/sarja MARIMI IESITE Kg/sarja
Penicilina V pp 907.4189899 Precipitat 1077.560051
(Penicilina V)
Cloroform 107.7560051 Fibru apos 3144.679399
Butanol 107.7560051 Cloroform 107.7560051
Ape acide 3314.82046 Butanol 107.7560051
TOTAL 4437.75146 TOTAL 4437.75146
9. Uscarea = 98% = 0.98
Umiditatea este de 20 %.
Mcloroform = 0.2 * Mpp + MPVpierduta
= (0.2*1077.560051 ) + ( 0.02*862.0480404 )=220.1670696 kg / arj
TABEL 2.4.6.10.
MARIMI INTRATE Kg/sarja MARIMI IESITE Kg/sarja
Precipitat 1077.560051 Penicilina V
Cloroform evaporat 232.752971
TOTAL 1077.560051 TOTAL 1077.560051
2.4.7. Consumuri specifice
CS = MS / PS
PS = 705.88235294 kg / arj
TABEL 2.4.6.11
CONSUMURI SPECIFICE MS CS = MS / PS
Glucoza 1364.6661918 1.933277104

Lactoza 3184.2211142 4.510979912
65
Extract de porumb 1273.6884457 1.804391964
Faina de soia 136.46661918 0.19332771
NH4NO3 136.46661918 0.19332771
CaCO3 591.35534980 0.837753412
ZnSO4 0.9097774612 0.0012888514
Na2SO4 27.293323837 0.038665542
KH2PO4 272.93323837 0.08665542
MnSO4 0.9097774612 0.0012888514
Acid fenilacetic 181.95549224 0.25770278
Na2S2O3 363.91098449 0.515540561
H2O 37954.096128 53.76830284
TOTAL
Cap. III. Controlul fabricaiei
III.1. Controlul, reglarea i automatizarea procesului tehnologic
Reglarea automata a nivelului.

n cazul unui rezervor nchis, cu seciune transversal mare si cu suprapresiune depind
considerabil presiunea hidrostatic,variaii ale suprapresiunii vor induce abateri relativ mici ale
nivelului dar modificari nsemnate ale debitului de ieire. Pentru aceste situa ii se recomand
reglarea nivelului cu SRA evoluate, n cascad nivel-debit.
Obiectivul reglarii automate a nivelului este de a mentine cu precizie ridicata un nivel
constant. Principala perturbatie este reprezentata de variatia debitului de intrare, iar variabila
manipulate va fi debitul de evacuare. ( Automatizarea Pr. din Ind. Ch.- t. Ungureanu)
Reglarea automata a temperaturii
66
Transferul de caldura se face prin conductie. Variabila manipulata este de regula debitul de
agent termic. Pentru stabilizarea temperaturii in bioreactoare se foloseste o schema de reglare tip
cascada: temperatura debit. Bucla de debit stabilizeaza debitul de agent de incalzire la valoarea
dara de regulatorul de temperatura inainte ca abaterea acestui debit sa influenteze temperatura
care este paramentrul reglat princial. Dac temperatura lichidului ncalzit depaete referina,
regulatorul comand nchiderea parial a ventilului de reglare de pe conducta de agent
Reglarea automata a concentratiei

Reglarea automate a concentratiei in bioreactoare este realizata de cele mai multe ori
indirect, stabilizand direct alti parametrii care influenteaza desfasurarea procesului de reactie:
temperatura, debite de reactanti , timpi de stationare in reactor, etc. Reglarea automata directa a
concentratie este justificata in cazurile in care viteza de reactie fluctueaza si abaterile
concentratiei au efecte economice semnificative. De exemplu, concentratia unui produs poate
trece printr-un maxim dupa care, cresterea conversiei reactantilor duce la descompunerea
acestuia intr-o serie de produse secundare. In acest caz reactorul trebuie automatizat, avand ca
scop obtinerea unei concentratii optime a produsului care, in mod obisnuit poate fi mai mica
decat valoarea maxima. Reglarea automata a concentratiei se face indirect urmarind alti
parametrii cum ar fi: densitate, indice de refractie, vascozitate, etc. Schema de automatiza este
urmatoarea:
67
Reglarea automata a pH-ului.
Pentru obtinerea pH-ului dorit al unei solutii se recurge la adaugarea in aceasta a unor
reactivi sub forma altor solutii de acizi si baze , substante pulverizate, substante gazoase, a unor
solutii tampon, agenti de neutralizare.
Sistemele de reglare a pH-ului au scopul de a regla pH-ul ca o actiune suplimentara, in ideea
realizarii unei conditii necesare pentru buna desfasurare a unui proces. In procesul de fermentatie
unde datorita unui timp indelungat de stationare a masei de reactie in reactor si a consumului lent
de reactiv adaugat pentru stabilizarea pH-ului, reglarea este destul de usor de indeplinit si este
suficient un regulator simplu, bi-pozitional.( Automatizarea Pr. din Ind. Ch.- t. Ungureanu)
Reglarea nivelului spumei
68
Sensorii sau electrozii de contact reprezint cea mai simpl solu ie pentru controlul
formrii spumei. Aceste sisteme sunt constituite din dou fire metalice fixate intr-un corp izolant,
a cror capete sunt plasate la o distan foarte mic, unul de altul . Acest tip de sensor se plaseaz
la o anumit nlime deasupra mediului lichid din interiorul bioreactorului. Prin atingerea
spumei la extremitaile capetelor neizolate ale firelor metalice, se realizeaz practic un contact
electric cu apariia unui semnal analitic, care dup o prealabil amplificare poate declana un
sistem de avertizare opticsau acustic, sau ambele. Simultan, semnalul dat poate ac iona
spargatorul mecanic de spum, sau dupa un anumit interval de timp sistemul de adugare a
agentului de antispumare. . ( Automatizarea Pr. din Ind. Ch.- t. Ungureanu)
Sisteme de control-reglare a concentraiei O2

Senzorul Clark, a crui reprezentare schematic este dat n figur, este realizat dintr-un
catod de platin sub form unui disc plat i o incint cu electrolit (soluie KCl), n care se gsete
imersat anodul de argint. Membran,din teflon cu o grosime de 25m, se ntinde de la partea
inferioar a senzorului prin intermediul unui inel de cauciuc, un film de electrolit furnizat din
rezervorul cu electrolit al senzorului.
69
Senzor de tip Clark: 1 catod, 2 anod, 3 electrolit, 4 membran, 5 corpul
senzorului, 6 inel din cauciuc
Prin utilizarea corect a unui sensor de tip Clark, cu membran din teflon cu o grosime de
25 m, aproximativ 95% din semnalul analitic n regim staionar, se obine n 15 20 secunde.
( Automatizarea Pr. din Ind. Ch.- t. Ungureanu)
Reglarea automat a debitului
Reglarea automat a debitului nu prezint dificulti deoarece obiectele reglate poiuni
de conduct au fie comportare de element neinerial, n cazul lichidelor, fie comportare de
element aperiodic stabil, cu timp mort nul sau foarte redus, n cazul gazelor sau vaporilor.
Deoarece debitul este funcie de cderea de presiune ntre extremitile conductei i de
rezistenele hidraulice de pe traseu, rezult c reglarea debitului se poate realiza introducnd o
rezisten variabil (un ventil) pe conduct. Nu are importan dac msurarea se face nainte sau
dup ventil.
70
Se msoar debitul pe conduct n punctul (1) i se compar aceast valoare cu referin
fixat n regulator. n concordan cu eroarea obinut, regulatorul de debit, F.C., acioneaz
ventilul de pe conduct.
Se utilizeaz, de obicei, o baterie de ventile, astfel nct reglarea s se poat face automat
sau manual.
n cazul reglrii automate, regulatorul acioneaz ventilul 1, ventilele 2 i 3 sunt deschise,

iar 4 este nchis. Trecerea pe reglare manual presupune nchiderea ventilelor 2 i 3 izolnd astfel
ventilul 1, procesul fiind condus manual prin manevrarea ventilului 4.
3.2 Controlul de calitate

3.2.1 Metode de analiza ale materiilor prime si intermediare
1. Extractul de porumb si faina de soia

Analiza aminoacizilor
Metode spectrofotometrice: In prezena ninhidrinei, aminoacizii, formeaza un
compus albastru-violet cu un maxim de absorbie la 570 nm sau prin descompunerea enzimatica

ionii de amoniu formai pot fi dozai spectrofotometric. Cromatografia cu gradient de pH sta la
baza funcionarii unor analizoare automate pentru aminoacizi. Aceste analizoare folosesc in
general separarea pe coloana cromatografica termostatata, cu shimbatori de ioni, iar eluarea se
face cu soluie tampon de diferite valori ale pH-ului dupa un program prestabilit pentru ob inerea
unui gradient de pH cu rezoluie maxima, intr-un timp minim.
71
Detecia se efectueaza spectrofotometric, pe baza reaciei de culoare pe care o dau
aminoacizii eluai de pe coloana cu ninhidrina.
Absorbia optica a compusului colorat se masoara la 440 si 570 nm, cu un spectrofotometru

cu dublu fascicol, iar semnalul analitic obinut care este direct proporional cu concentraiile
diferiilor aminoacizi din proba de analizat se inregistreaza grafic cu ajutorul unui inregistrator.
Aparatura:
- coloana cromatografica termostatata
- rezervoare cu soluie tampon pH
- soluie cu reactivi de culoare pentru determinarea spectrofotometrica a aminoacizilor
(ninhidrina)
- camera de amestecare
- serpentina pentru racire
- spectrofotometru
- inregistrator
- pompe
- proba de analizat ( STAS-uri si standarde)
2. Sulfat de Zinc, tehnic
Determinarea coninutului de zinc.
Metoda polarografica
Principiul metodei: Proba se dizolva in apa si se aciduleaza cu acid pentru oxidarea
fierului. Dupa separarea fierului, zincul se polarografiaza in mediu amoniacal, intre 1,0 v si 1,5 v.
Aparatura: Polarograf si accesorii.
Reactivi:
acid azotic d = 1,40 diluat 1+1
amoniac, sol d = 0,91
gelatina, sol 1% preparata la 60C - proaspat preparata.
soluie de baza - intr-un balon cotat de 1000 ml se introduc 20g clorura de amoniu si 80
ml amoniac sol. d = 0,91, se aduce la semn cu apa.
soluie etalon de zinc - intr-un pahar Berzelius de 150 ml se dizolva 0,4g zinc metalic
intr-un amestec format din 10ml acid sulfuric d = 1,84 diluat 1+1 si 1 ml acid azotic d =
1,40 diluat 1+1. Se fierbe pentru completa dizolvare si eliminare a vaporilor nitrosi.
72
Soluia se trece intr-un balon cotat de 1000 ml. Se adauga 25 ml soluie d = 0,91, 100 ml
soluie de baza si 20 ml soluie 1% de gelatin. Se aduce la semn cu apa. 1 ml soluie
etalon conine 0,0004 g zinc.
sulfit de sodiu.
Modul de lucru: Intr-un pahar Berzelius de 250 ml se introduce 1 g proba de analizat si se
dizolva in 30 ml apa 5 ml acid azotic. Se fierbe pentru oxidarea fierului si eliminarea vaporilor
nitrosi.
Dupa racire, soluia se trece intr-un balon cotat de 500 ml si se adauga:
25 ml soluie de amoniac
50 ml soluie de baza
10 ml soluie de gelatina
Se aduce la semn cu apa. Se lasa sa se depuna hidroxidul de fier. Soluia se introduce in

vasul pentru polarografiere. Se adauga circa 1 g sulfit de sodium, se agita si se lasa 5 minute in
repaus.
Se polarografiaza faa de electrodul saturat de calomel intre 1 V si 1.5 V.
In aceleasi condiii se polarografiaza si un volum egal de soluie etalon.
Se masoara inalimea treptei polarografice a probei de analizat si a soluiei etalon.
Calcul
%zinc =
unde:
Ip inalimea treptei polarografice a soluiei de analizat, mm
Ie inalimea treptei polarografice a soluiei etalon, mm
Ce cantitatea de zinc, in g, coninuta in volumul de soluie etalon folosit (500 ml)
m masa probei luata in lucru, g. ( STAS-uri si standarde)
3. Sulfat de sodiu anhidru tehnic

Determinarea coninutului de sulfat de sodiu
Principiul metodei: Ionul sulfat se precipita sub forma de sulfat de bariu, care se determina
gravimetric.
Reactivi:
acid azotic d= 1,4
acid clorhidric 10%
73
azotat de argint, soluie 1%
clorura de bariu, soluie 10%.
Modul de lucru: Din proba se introduc 25 ml intr-un pahar Berzelius si se adauga 250 ml apa.
Soluia se aciduleaza cu 5 ml acid clorhidric, se incalzeste la fierbere, apoi se adauga picatura cu
picatura, sub continua agitare, 20 ml soluie de clorura de bariu. Se fierbe circa 10 minute.
Se lasa sa se depuna precipitatul de sulfat de bariu, circa 30 minute dupa care se controleaza
daca precipitarea este completa - prin adaos de 1 ml soluie de clorura de bariu. Se lasa sa se
depuna precipitatul minim 4 ore. Se filtreza prin hartie de filtru cu porii mici si precipitatul se
spala cu apa fierbinte pana la dispariia ionilor clor in filtrat.
Hartia de filtru cu precipitat se introduce intr-un creuzet de por elan, adus in prealabil la
masa constanta la 800C, se arde apoi se calcineaza la 800C, in etuva, pana la masa constanta.
Calculul rezultatelor:
% sulfat de sodiu
unde:
m1 masaprecipitatului de sulfat de bariu calcinat, in grame
m masa probei de sulfat de sodiu luata, in grame
U umiditatea, in procente
A coninutul de acid sulfuric liber, in procente.
4. Carbonat de calciu precipitat

Determinarea continutului de Carbonat de calciu.
Reactivi:
- acid clorhidric, n.
- hidroxid de sodiu, sol. 0.5 n
- fenolftaleina, sol 1% in alcool etilic sol 96% vol.
- metiloranj, sol 0.1 %
74
Mod de lucru: Circa 1 gram din proba uscata se introduce cantitativ intr-un vas Erlenmayer de
300 ml. Se adauga 100 ml apa lipsita de bioxid de carbon si se amesteca prin agitarea vasului
timp de 3 minute. Se adauga 2 picaturi solutie felolftaleina, apoi, acid clorhidric picatura cu
picatura, sub agitara, pana la virarea culorii indicatorului.
Se adauga 40 ml acid clorhidric, exact masurati, se fierbe timp de 10 minute si se raceste. Se
adauga 2 picaturi solutie metiloranj si se titreaza excesul de acid clorhidric cu solutie de hidroxid
de sodiu.
Titrarea este considerata terminata atunci cand, prin adaugarea unei picaturi de solutie de
hidroxid de sodiu, indicatorul vireaza de la portocaliu la galben.
Aceasta picatura se scade din volumul de solutie de hidroxid de sodiu consumat pentru
titrare.
Intre doua determinari paralele se admite o diferenta de maxim 0.5% in valoare absoluta.
Calcul:
%carbonat de calciu (CaCO3)
V volumul sol.0.5 n de hidroxid de sodiu utilizat la titrare, in ml

m masa probei luata in calcul, in g. ( STAS-uri si standarde)
5.Azotat de amoniu, tehnic

Principiul metodei: Azotatul de amoniu reacioneaza cu aldehida formica cu formare de
hexametilentetramina. Acidul azotic pus in libertate se titreaza cu hidroxid de sodiu in prezen a
de fenolftaleina.
Reactivi:
aldehida formica, soluie 16%, neutralizata cu sol 0,1 n de hidroxid de sodiu in prezen a
de fenolftaleina
fenolftaleina, soluie 1% in alcool etilic 96% vol.
hidroxid de sodiu, sol 0,1 n
rosu de metil, sol 0,1% in alcool etilic 96% vol.
Modul de lucru: Din proba de azotat de amoniu se iau 5g si se introduc intr-un balon cotat
de 100 ml si se completeaza cu apa pana la semn.
75
Din aceasta soluie, se iau cu o pipeta cate 25 ml si se introduc in doua vase Erlenmayer
de 200 ml. In primul vas, se adauga una sau doua picaturi de solu ie de rosu de metil si daca este
cazul se neutralizeaza cu soluie de hidroxid de sodiu. In al doilea vas, se adauga volumul de
soluie de hidroxid de sodiu adaugat in primul vas pentru neutralizarea solu iei - fara solu ia de
rosu de metil, 10 ml soluie de aldehida formica masurai cu cilindrul gradat si 5...7 picaturi de
fenolftaleina. Se agita si se lasa sa stea 5 minute, pentru terminarea reaciei de formare a
hexametilentetraminei si eliberarea acidului azotic.
Se titreaza cu soluie de hidroxid de sodiu pana la coloraia slab roz, persistenta.
Calcul:
%azotat de amoniu
unde:
V volumul soluiei 0,1 n de hodroxid de sodiu folosit la titrarea probei, dupa adaugarea
aldehidei formice, in ml
m masa probei luata pentru determinare, in g
U coninutul de umiditate, in procente.
6. Tiosulfat de sodiu
Reactivi:
iod, sol. 0,1 n;
amidon, sol. 0,5 % Preparare: se dizolva prin agitare continua 0,5g amidon in 10 ml acid
salicilic soluie 0,1 %. Se adauga 3040 ml apa clocotita si se fierbe pana la dizolvarea
amidonului. Dupa racire se completeaza cu apa pana la 100 ml.
Mod de lucru: 10 ml proba tiosulfat de sodiu in apa si se trece cantitativ intr-un balon cotat de
100 ml, se aduce la semn cu apa si se omogenizeaza. Se iau cu pipeta 10 ml proba, se introduc
intr-un vas Erlenmeyer de 300 ml si se adauga circa 40 ml apa. Se titreaza cu solu ie de iod in
prezena de amidon, pana cand apare o coloraie albastra care se menine timp de un minut.
Calcul:
%tiosulfat de sodium
unde
V- volumul soluiei de iod 0,1 n utilizat la titrare, in ml
76
m - masa probei, in g. ( STAS-uri si standarde)
7.Carbonat de potasiu tehnic
Principiul metodei: Precipitarea ionului sulfat cu clorura de bariu si dozarea gravimetrica a
acestuia ca sulfat de bariu.
Reactivi:
acid azotic d = 1,4
acid clorhidric d = 1,19
azotat de argint, sol. ,5%
acid sulfuric d = 1,84
clorura de bariu, sol. 10%
metiloraj sol. 0,1%
Mod de lucru:Din soluia pregatita se iau 50 ml si se introduc intr-un pahar de laborator de
200 ml. Se adauga 2-3 picaturi de soluie de metiloranj, se neutralizeaza cu acid clorhidric pana
la virarea indicatorului, apoi se dauga 1 ml acid clorhidric in exces.
Se fierbe soliia cateva minute, apoi in soluia calda se adauga in fir subire, 25 ml soluie de
clorura de bariu. Se fierbe inca 2 - 3 min. Se lasa sa se depuna pana a doua zi.
Se filtreaza apoi prin hartie de filtru cu porozitate mica si se spala precipitatul cu apa calda
pana cand filtratul nu mai da reacia ionului clor(verificarea cu solu ie de azotat de argint, in
prezena de acid azotic).
Filtrul cu precipitat se introduce intr-un creuzet de platina sau de por elan, adus in prealabil
la masa constanta prin calcinare in cuptor electric, la cca. 800C.
Precipitatul se usuca in etuva la 105 2 C, apoi se carbonizeaza hartia pe becul de gaz,
avand grija ca hartia sa nu arda cu flacara. Se calcineaza creuzetul in cuptorul electric la 800C,
timp de 30 de minute. Se raceste creuzetul in exicator si apoi se cantareste. Se repeta operaiile
de uscare, racire si cantarire pana la masa constanta.
Daca precipitatul calcinat are o culoare cenusie, se adauga o picatura de acid sulfuric si se
calcineaza din nou inca 15 minute.
Calcul:
% sulfa =
unde:
m1 masa precipitului calcinat, in g
m - masa probei luate pentru determinare, in g
8.Acetat de N-butil tehnic.
77
Principiul metodei: Saponificarea esterilor cu solutie alcoolica de hidroxid de potasiu si
titrarea excesului de hidroxid de potasiu cu acid clorhidric, in prezenta fenolftaleinei ca indicator.
Reactivi:
- acid clorhidric, n.
- alcool etilic, 96% vol.
- fenolftaleina: se dizolva 0.5g fenolftaleina in 100 ml alcool etilic 95% vol., apoi se adauga
solutie 0,5% hidroxid de sodium, picatura cu picatura, pana la colorarea solutiei in roz.
- hidroxid de potasiu, sol n in alcool etilic 95% vol.
Mod de lucru: Intr-un vas conic de 250 ml cu gatul slefuit se introduc 50 ml sol hidroxid de
potasiu si se cantareste la balanta analitica. Se introduc apoi 5 ml proba si se cantareste din nou,
determinandu-se prin diferenta cantitatea de proba.
Vasul se racordeaza la un refrigerent cu reflux, racit cu apa si se incalzeste la fierbere timp
de o ora, pe baie de apa. Apoi se raceste vasul si se spala interiorul refrigerentului si sliful de
doua ori cu care 20 ml apa, care se prinde in vasul cu proba. Se adauga 0.5 ml sol fenolftaleina si
se titraza excesul de hidroxid de potasiu cu acid clorhidric pana la disparitia culoarei roz.
In paralel, in mod identic dar fara proba de analizar, se executa o proba de control al
reactivilor.
Calcul:
V1 volumul de acid clorhidric n folosit la titrarea probei de control al reactivilor in ml

V2 volumul de acid clorhidric folosit la titrarea probei de analizat, in ml
m masa probei luate pentru determinare, in g
A aciditatea probei in procente. ( STAS-uri si standarde)
9. Cloroform
Principiul metodei: Continutul de cloroform se determina prin metoda gaz-
cromatografica. Componentii din proba de analizat se identifica prin compararea timpilor de
retinere a fiecarui component de pe cromatograma probei cu cei ai unui amestec etalon cu
compozitie cunoscuta si care contine toti componentii existenti in proba de analizat. Concentratia
componentilor se calculeaza prin metoda normarii interne.
78
Aparatura si materiale:
- cromatograf de analiza in faza gazoasa, prevazut cu termostat pentru coloana
cromatografica, cu detector de conductivitate termica si cu potentiometru inregistrator.
- Coloana cromatografica din otel inoxidabil, cu lungime 2m si diametrul interior de 2.2

mm
- Microseringa de 5l
Reactivi:
- amestec etanol care contine toti componentii existenti in proba de analizat si in concentratii
apropiate de ale probei de analizat
- Chromsorb W, cu granulatia 0.1250.15 mm
- Cloroform, de calitate pentru cromatografie
- Gaz de protectie: azot cu conc min. 99.9%
- Gaz purtator : hidrogen cu conc min 99.9%
- Tricrezil fosfat
10. Glucoza
Reactivii folosii pentru analiz trebuie sa fie de calitateapentru analiza(p.a.) sau de
calitate echivalent. Apa trebuie sa fie distilat.
10.1. Examenul organoleptic: Temperatura de 20C.
Pentru verificarea aspectului, culorii i a corpurilor strine, o parte din proba de glucoza
lichid se introduce ntr-un vas de sticl incolora cu diametrul de 7-12 cm, iar proba de glucoza
solid se secioneaz cu un cuit n buci de cca. 250 g. Verificrile respective se fac la lumina
natural a zilei sau la o surs de, pe fondul unei hrtii albe.
Gustul i mirosul se apreciaz asupra probei respective prin degustare i mirosire.
10.2. Determinarea culorii glucozei.
Principiul metodei: Se adaug soluia de iod 0,1 n n ap, n condiii determinate, pn se
obine o culoare identic cu cea a glucozei lichide de analizat.
79
Mod de lucru: ntr-un pahar de laborator se introduc 100 ml din proba de glucoza lichid.
ntr-un alt pahar identic se introduc 100 ml ap, n care se adaug cu ajutorul unei biurete,
pictur cu pictur, soluie de iod, pn cnd coloraia din cele doua pahare este identic.
Compararea se face la volume egale de lichid. Coloraia celor 2 pahare se constat cu ochiul
liber la lumina zilei, pe fondul unei hrtii albe.
Exprimarea rezultatelor. Culoarea se exprim prin volumul soluiei de iod 0,1 n folosit
pentru egalarea culorii, n ml.
10.3. Determinarea aciditii.
Principiul metodei: Proba de analizat, dizolvata n ap, se titreaz cu hidroxid de sodiu,
soluie 0,1 n n prezena de FF soluie 1% n alcool etilic 70% vol.
Mod de lucru: Se masoar cu pipeta 100 ml din soluia de lucru obinut anterior i se
introduc ntr-o capsul de porelan. Se titreaz cu soluie de hidroxid de sodiu n prezena FF,
pn la apariia coloraiei roz, care persist timp de 1 minut. Se execut n paralel 2 determinri
din aceeai soluie de lucru. ( STAS-uri si standarde)
3.2.2. Metode de analiza a produsului finit

Pentru analiza Penicilinei V sare de potasiu se folosete ca microorganism: Staphylococcus
aureus ATCC 6538 P.
Medii de cultur pentru:
- ntreinerea tulpinii de microorganisme-test (A) I-A
- obinerea suspensiei-stoc de spori (B) I-C
- treceri zilnice (C)
Medii de cultur pentru determinarea activitii microbiologice a antibioticului:
- strat inferior (i)
- strat superior (s)
Concentraia suspensiei de microorganisme-test (n microorganisme-test/ml):
Solveni pentru prepararea soluiei-stoc (standard i proba): tampon fosfat pH = 7,0
Solveni pentru prepararea diluiilor de lucru (standard i proba): tampon fosfat pH = 7,0
Timp de conservare a soluiei stoc (standard i proba) la 4oC: 3 zile
n mediul de cultur prevzut mai sus pentru a forma stratul inferior al mediului de
cultura folosit pentru determinarea activitii microbiologice a antibioticului, topit i rcit la
80
50oC, n cazul suspensiei de microorganisme-test n form vegetativ sau rcit la 60oC n cazul
suspensiilor de microorganisme-test n form sporulat, se introduce un ml de suspensie de
microorganisme-test pentru 100 ml mediu de cultur i se amestec pentru omogenizare.
Concentraiile suspensiilor de microorganisme-test, obinute prin diluie, conform prevederilor
anterioare, necesare nsmnrilor sunt prevazute mai sus.
5 ml mediu de cultur nsmnat se aduc peste stratul inferior de mediu de cultur
solidificat n plcile Petri, astfel ncat s se formeze un strat superior uniform ca grosime. Dup
solidificarea stratului superior se aeaz pe suprafaa acestuia la o distan de aproximativ 28
mm de centrul plcii Petri i la o distan egal unul fa de celalalt, patru cilindri din hotel
inoxidabil sau dintr-un alt material adecvat, cu diametrul interior de 7 mm i cu nlimea de 10
mm.
Se efectueaz cate 3 cntriri att din antibioticul standard ct i din cel de analizat.
Din fiecare cntrire se prepar soluiile-stoc i soluiile de lucru. Se folosesc cte 6 placi Petri.
Diluiile de lucru se introduc n cei 4 cilindri din fiecare din plcile Petri, dup cum urmeaz: n
primele 6 plci Petri, n cei 2 cilindri se introduc cte 0,4 ml din prima soluie standard de lucru
i n ceilali 2 cilindri cte 0,4 ml din prima diluie proba de lucru. n celelalte 6 plci Petri se
procedeaz n mod identic cu cea de-a doua diluie de lucru (standard i proba).
Plcile Petri se nchid, se incubeaz la termostat la 35-37oC timp de 18 ore i se
masoar diametrul zonelor de inhibiie a creterii microorganismelor-test, produse att de
diluiile standard de lucru ct i de diluiile-prob de lucru. Determinarea se efectueaz cu o
precizie de 0,1 mm, folosind un instrument adecvat de msurare.
Intrepretarea rezultatelor. Se calculeaz media aritmetic a diametrelor zonelor de
inhibiie pentru fiecare diluie de lucru i se procedeaz conform prevederilor de la Evaluarea
statistic a determinrilor biologice-Calculul activitii biologice prin evaluarea indirect-Metode
bazate pe rspunsuri gradate.
Proba de analizat este corespunzatoare dac activitatea microbiologic a acesteia este de
cel putin 90% i de cel mult 110% fa de activitatea microbiologic a penicilinei V..
Limitele de eroare sunt cuprinse ntre 80 si 125%.
Cap. IV. Produse secundare, deeuri de fabricaie, epurarea apelor reziduale
81
Din tehnologia obinerii penicilinei V prin fermentaie discontinu, pe lng
produsul principal apar n diferite etape produse secundare i deeuri de fabricaie.
Principalul deeu rezultat n procesul de biosintez a penicilinei V este miceliul separat prin
filtrarea lichidului de fermentaie. Miceliul se usuc, se trateaz cu un mediu alcalin, se amestec
cu lisin sau extract vitaminic obinnd o mas proteic valoroas pentru zootehnie.
Apele cu urme de solvent, sunt supuse ndeprtrii solventului, apoi se epureaz.
Apele acide rezultate n urma procesului de extracie se neutralizeaz i se trimit la sta iile
de epurare.
O alt surs de poluare n industria chimic este reprezentat de gazele i vaporii forma i n
timpul obinerii penicilina V. De cele mai multe ori acestea sunt amestecate cu particule solide
sau lichide. Prin interaciunea acestor substane din aer cu diverse forme fizice ale apei rezulta de
obicei substane foarte toxice cum ar fi: SO2, SO3, CO, CO2, oxizi de azot.
Procesul de epurare const n ndeprtarea din apele uzate a substanelor toxice, a
microorganismelor, n scopul proteciei mediului nconjurtor. Evacuarea apelor uzate neepurate
n mod necorespunztor poate prejudicia sntatea public. Epurarea apelor uzate se realizeaz n
staii de epurare; acestea fac parte integrat din canalizarea oraului sau industriei, mrimea lor
fiind determinat de gradual de epurare necesar, de debitele i caracteristicile apelor uzate, de
folosinele prezente i viitoare ale apelor.
Epurarea apelor uzate se poate realize prin metode ce se bazeaz pe procese fizice, chimice
i biologice, care difer n funcie de tipul poluanilor i concentraia lor n apa uzat. Se poate
face o clasificare a acestor metode lund n considerare tipul procesului care st la baza metodei
de epurare:
Epurare mecanic
Epurare chimic
Epurare biologic
Epurare avansat (Mihai D.Canalizri,Vol. II,Epurarea apelor uzate,1998)
Considernd operaiile i procesele unitare necesare pentru a realiza ndeprtarea poluanilor
ntr-un anumit stadiu al sistemului de epurare n:
Epurare primar
Epurare secundar
Epurare teriar (avansat)
Este interzis evacuarea n reelele de canalizare orenetia apelor reziduale industrial ce
conin: suspensii sau alte materiale care se pot depune-corpuri solide, solide plutitoare sau
antrenate care nu trec prin grtarul cu spaiul liber de 20 mm ntre bare-corpuri solide antrenate,
dure care pot genera zone de corodare a colectoarelor -pcur, uleiuri, grsimi care pot genera
aderen pe pereii colectorului
-substane care provoac fenomene de coagulare
-substane cu agresivitate chimic asupra materialului de construcie a colectorului i staiei
de epurare
82
-substane ca: benzin, benzen, eter, cloroform, acetilen, hidrocarburi clorurate,etc., care prin
evaporare pot provoca amestecuri detonante
-substane nocive care pot pune n pericolpersonalul de deservire al staiilor de epurare
-substane inhibitoate ale procesului de epurare care ar putea prejudicial funcionarea instalaiilor
de epurare biologic sau a celor de fermentare a nmolului
- ape cu temperature de peste50C.
(Mihai D.Canalizri,Vol. II,Epurarea apelor uzate,1998)
Cap. V. Transport, ambalare, depozitare

Glucoza
Se ambaleaz, pentru desfacere, n hrtie pergaminat i apoi n hrtie velin.
Ambalajele de transport pentru glucoza solid sunt lzi de lemn cptuite cu material
corespunztor, iar pentru glucoza lichid, butoaie de metal sau de material plastic.
Toate ambalajele de desfacere i transport trebuie s corespund normelor legale sanitare n
vigoare. Abaterea admis la coninutul net al ambalajelor de desfacere este de 10 g. Glucoza
se depoziteaz n magazii curate, uscate, dezinfectate, lipsite de miros strin i aerisite, avnd
temperatura de max. 20C i umiditatea relativ a aerului de max. 70%.
Transportul glucozei se face n vehicule acoperite, curate, dezinfectate, uscate i fr miros
strin.
Azotat de amoniu tehnic, granulat
Se amabaleaz n saci de polietilen nchii prin sudur.
Viza organului de control tehnic al calitiia ambalajelor se face prin ablonare sau
etichetare cu urmtoarele specificaii:
-marca de fabricaie a ntreprinderii productoare;
-denumirea produsului de calitate STAS 2126-84-masa net-numrul lotului;
-data livrrii;
-data fabricaiei;
-termenul de garanie.
Depozitarea azotatului de amoniu se face n stive, de max. 20 saci, pentru tipul I i de max.
10 saci pentru tipul II, n magazii special amenajate, pentru acest produs. Magaziile vor fi curate,
uscate i fr alte surse de nclzire, dect cele ale instalaiilor de condiionare.
Temperatura n timpul depozitrii nu trebuie s depeasc valorile cuprinse ntre -15C i
+30C. (Mihai D.Canalizri,Vol. II,Epurarea apelor uzate,1998)
Azotatul de amoniu nu se depoziteaz la un loc cu alte materiale. Pentru transportul
azotatului de amoniu, se folosesc vehicule acoperite, uscate i curate.
Manipularea, depozitarea i transportul azotatului de amoniu, tehic, granulat, se face
n conformitate cu legile, regulamentele i instruciunile n vigoare privind tehnica securitii
muncii pentru produse comburante. Fiecare lot de livrare va fi insoit de documentul de
certificare a calitii ntocmit conform dispoziiilor legale n vigoare.
Carbonat de calciu precipitat tehnic
83
Se ambaleaz n saci de hrtie, curai, legai cu srm.
Sacii se marcheaz vizibil prin ablonare sau etichetare, cu urmtoarele specificaii:
-marca de fabric;
-denumirea produsului, tipul STAS 1083-76;
-masa net;
-numrul lotului;
-semnul organului de control tehnic al calitii (CTC).
Carbonatul de calciu precipitat,tehnic se depoziteaz n locuri curate, ferite de umezeal. La
documentele de transport se va anexa un certificat de calitate ntocmit conform dispoziiilor
legale n vigoare.
Tiosulfat de sodiu
Tiosulfatul de sodiu cristalizat, tehnic, se ambaleaz n butoaie din hrtie nfurat STAS
5537-65, sau n butoaie din fag STAS 1648-71. Se admite folosirea i a altor ambalaje numai
dac ele se ncadreaz n prescripiile respective prevzute de legislatia n vigoare. Ambalajele se
eticheteaz n mod vizibil i durabil cu urmtoarele specificaii:
-marca de fabric;
-denumirea produsului, calitatea i STAS 1817/2-75;
-numrul lotului i data fabricaiei;
-masa brut i tara;
-semnul organului de control tehnic al calitii (CTC);
-termenul de garanie.
Tiosulfatul de sodiu cristalizat, tehnic se depoziteaz n ncperi uscate, n care temperatura
nu depete 30C.
Transportul produsului se face numai cu mijloace de transport acoperite.La documentele de
transport se va anexa un certificat de calitate ntocmit conform reglementrilor legale n vigoare.
Cloroform
Cloroformul se ambaleaz astfel:
-tipul A n damigene de sticl, de culoare nchis sau vopsite n negru, nchise cu dopuri de plut
nvelite n foi de staniol sau n celofan i apoi parafinate. Damigenele de sticl se introduc n
couri de nuiele i se protejeaz cu un strat de paie sau tala. Sau cisterne de oel.
-tipul B n cisterne de oel sau bidoane de polietilen.
Ambalajele trebuie s fie curate, uscate i nchise etan.
Ambalajele vor fi marcate cu urmtoarele specificaii:
-marca de fabric a ntreprinderii productoare;
-denumirea produsului, tipul, calitatea, STAS 330-82;
-masa net-numarul lotului;
-data fabricaiei;
-termenul de garanie;
-viza organului de control tehnic al calitii (CTC);
-semnele avertizoare pentru produse toxice, produse care trebuie ferite de umezeal i produse
care trebuie pstrate la rece, conform STAS 5055-66.
84
Manipularea, depozitarea i transportul cloroformului se face cu respectarea normelor de
tehnic a securitii muncii referitoare la produsele toxice.
Cloroformul se depoziteaz n ncperi, ferite de lumin, de umiditate i de cldur,pentru a
evita descompunerea produsului cu formare de fosgen (foarte toxic).Transportul se face cu
mijloace de transport acoperite.Fiecare lot de livrare va fi nsoit de documentul de certificare a
calitii ntocmit conform dispoziiilor legale n vigoare.
Acid sulfuric ethnic

Pn la stabilirea ambalajelor i materialelor de ambalare pentru acidul sulfuric tehnic, prin
normativul de ambalare pe produse i grupe de produse destinate consumului intern, aprobat de
organul central coordonator, acesta se livreaz n cisterne de oel, butoaie i baloane de
sticl,curate i uscate, sau alte ambalaje convenite ntre pari cu condiia men inerii integrit ii
produsului. Butoaiele de oel vor fi prevzute cu dopuri de oel,filetate, cu garnituri de azbest i
vor fi plumbuite.
Baloanele de sticl vor fi prevzute cu dopuri etane cu ipsos.
Baloanele de sticl vor fi protejate cu un strat de vat mineral i introduse n couri
metalice, prevzute cu capace de protecie i mnere.
Marcarea ambalajelor se face prin ablonare sau etichetare cu urmtoarele specificaii:
-marca de fabric a ntreprinderii productoare;
-denumirea produsului, tipul, STAS 97-80;
-masa brut;
-tara;
-viza organului de control tehnic al calitii (CTC);
-semnul avertizor pentru produse corosive, STAS 5055-66-PRODUS COROSV, A SE
MANIPULA CU ATENIE.
Manipularea, depozitarea i transportul acidului sulfuric tehnic se fac cu respectarea
normelor de tehnic a securitii muncii, referitoare la produsele corosive.
Se interzice transportul altor produse (inclusiv acid sulfuric rezidual) n cisternele destinate
transportului de acid sulfuric tehnic.Fiecare lot de livrare va fi nsoit de documentul de
certificare a calitii, ntocmit conform dispoziiilor n vigoare.
85
BIBLIOGRAFIE
1 .C.Oniscu, Tehnologia produselor de biosintez, Ed.Tehnic, Bucureti, 1978
2. www.eu5.org
3.Cacaval, Metabolii secundari i bioreactoare, Ed. Bit, Iai, 2004
4.www.scribtube.com
5.STAS-uri i standarde conform Consiliului naional pentru tiin i tehnologie, Institut

ul romn de standardizare ;
6. www.regielive.ro
7. Anca Irina Galaction, D. Cacaval, Metabolii secundari cu aplicaii
86
farmaceutice,cosmetice i alimentare,Ed. Venus Iai 2006
8. Mihai Dima,Canalizri,Volumul II,Epurarea apelor uzate,1998
9. Ioan t. Bonta,Microbiologie industrial,1996
10. Radu Z. Tudose,Alexandru Tancu,Fenomene de transfer i utilaje n industria

chimic,ndrumar de proiectare,1990
87

Biotehnologii Industriale

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Biotehnologii Industriale

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Cuprins

Cap.1 Memoriu tehnic..4

n cadrul acestui proiect s-a proiectat procesul biotehnologic de obinere a Penicilinei

II.I Domenii de utilizare i proprietile produsului

Denumirea penicilinei Structura radicalului Denumirea Activitate

Penicilina F CH3-CH2-CH=CH-CH2 2-pentenil 1500

Penicilina dihidro F CH3-(CH2)4 2-pentil 1670

Penicilina G C6H5-CH2- Benzil 1667

Penicilina X HO-C6H4-CH2 p-hidroxi-benzil 900

Penicilina K CH3-(CH2)5-CH2 n-heptil 2300

Penicilina V C6H5-O-CH2- Fenoximetil 1630

Penicilina O CH2=CH-CH2-S-CH2 Alilmercoptometil -

Penicilina S CH3-C=CH-CH2-S-CH2 3-clor-2-butenil-tiometil -

C6H5 O CH2 C S CH3

Penicilinele reacioneaz nucleofil cu hidroxiamina formnd acizi hidroxiaminici:

n reacia cu alcoolii formeaz esteri:

n prezen de alchilamine penicilinele formeaz alchilamide:

II.II Vaiante tehnologice. Metode de obtinere

Penicilina V se poate obine prin urmatoarele variante tehnologice de fabricaie:

Factorul principal care intervine n obinerea tehnologic a unui antibiotic l reprezint

Penicilinele de biosintez se obin printr-o tehnologie comun care cuprinde urmtoarele

pregtirea mediilor de cultur i sterilizarea lor;

Penicilinele de semisintez au o tehnologie de obinere comun care cuprinde urmtoarele

obinerea acidului 6-aminopenicilanic;

II.III Alegerea variantei optime

Varianta optim aleas este procedeul discontinuu de fermentaie n profunzime.

2.4. Descrierea procesului tehnologic adoptat

Acetat de butil Fara apoasa

Tehnologia de obinere a penicilinei V cuprinde urmtoarele faze:

3) Filtrarea soluiei native

Lactoza, dizaharid reductor (4--D-galactozido-D-glucoza) se folosete n stare pur doa

Fig.nr 2. Instalaia continu de sterilizare la 120 125C

Instalaia de sterilizare continu la 120-125C este alctuit din coloana de sterilizare

Din diagrama timp-temperatur, prezentat n figura nr.3, se observ c, n aceasta

Procesele industriale de fermentaie sunt, aproape n totalitae , procesele aerobe i n

Figura 5.Schema de purificare i sterilizare a aerului.

Schema de principiu a liniei de purificare i sterilizare a aerului prin filtarare pe material

n general pentru sterilizarea aerului se mbin procedeele termice cu filtrarea.Aceasta se

Figura 4.Filtru cu fibre de sticl pentru sterilizarea aerului

Figura 6.Modelul curgerii

Fermentaia este faza fundamental a procesului de biosintez i se realizeaz n 3

Parametrii procesului de fermentaie a penicilinei V

Controlul procesului de fermentaie se realizeaz prin determinerea sterilitii mediului, a

materialul de construcie al suparafeei filtrante

Tamburul filtrului rotativ cu vid are un grad diferit de scufundare n suspensia ce se

Figura 7. Schema filtrului rotativ cu vid

Separarea i purificarea penicilinei V

Figura 8. Schema de operaii la separarea prin extracie a penicilinelor

. Figura 8 Extractorul Podbielniak

Microorganismul productor este Penicillium Crysogenium i face parte din categoria

Fungii sunt organisme eucariote, avnd un aparat unicelular (gimnoplast, plasmodiu,

Ele cresc n condiii extrem de acide, presiune osmotic, uscciune.

Mediul de cultur are n componen urmtorii constitueni:

2. Extract de porumb STAS-14

Extractul de porumb are urmatoarele caracteristici:

Aspect: lichid cremos de culoare galben nchis.

Miros: caracteristic unei fermenttii lactice.

Sedimentare: dup 24 de ore ntr-un cilindru de 100 ml de 100%.

Substana uscat: minim 50%.

Coninutul n acid lactic: minim 20g la 100g substan uscat

Constituienti g/100g extract de porumb Domenii de valori

5. Fosfat monopotasic STAS 10497-76

7. Sulfat de sodiu-S.T.A.S 2126-84